Intralymphatic חיסוני וחיסון בעכברים

חיסון המניעה והטיפולי לעתים קרובות לא מצליח לעורר תגובה חיסונית חזקה בשל ניקוז שבוע של החיסון לבלוטות הלימפה ומעורבות עניות וכתוצאה מכך של תאים חיסוניים. על ידי הזרקה ישירה של חיסון לבלוטות הלימפה, הזרקת intralymphatic כביכול, יעילות חיסון ניתן לשפר מאוד וניתן להפחית מינוני חיסון.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לעורר את התגובות החיסוניות של עכברים על ידי הזרקה ישירה של החיסון לבלוטות הלימפה שלהם. זה מושג על ידי הרדמה ראשונה של העכבר וביצוע חתך קטן באזור המפשעה. לאחר מכן, אתר ושתק את בלוטות הלימפה המפשעתיות.

השלב האחרון הוא הזרקת חיסון לבלוטת הלימפה המפשעתית. בסופו של דבר, ניתן להעריך מתן חיסון תוך לימפטי על ידי מדידת תגובתו ti והשוואתו לשיטות מתן מסורתיות כגון זריקות תת עוריות. בדרך כלל אנשים חדשים בשיטה זו, שמתקשים לפגוע בבלוטת הלימפה עם חיסון.

ייתכן שיידרש אימון מסוים כדי לתאם את הקיבוע של בלוטת הלימפה, החדרת המחט והזרקת החיסון לגרום למחט לצאת בקלות ממקומה ואז החיסון מוזרק מחוץ לבלוטת הלימפה. כדי להתחיל להרדים את העכבר כמתואר בפרוטוקול הטקסט הנלווה. בהקדם האפשרי יש למרוח משחה עיניים על עיני העכבר על מנת למנוע התייבשות של הקרניות.

לאחר מכן הנח את העכבר במצב שכיבה וצבט את כף הרגל של העכבר במלקחיים כדי לוודא שהוא מורדם מספיק. אם לא נצפתה תגובה, הניחו טישו על ראש העכבר להגנה מפני אור וחטאו אזור מפשעתי אחד עם 70% אתנול. לאחר מכן הרם את הרגל האחורית וכופף את מפרק הירך לזווית של 90 מעלות.

כעת בעזרת מלקחיים מיקרו מעוקלים לניתוח, משוך את העור הנשוי בעיקול וחתוך חתך קטן דרך העור. לאחר מכן הניחו את קצה המספריים הסגורים לתוך החתך. פתח את המספריים כדי לקרוע קוטר של פחות מ -10 מילימטרים באזור המפשעה.

זהה את בלוטת הלימפה על ידי המראה הכדורי והאפרפר שלה כנגד רקמת השומן הלבנה יותר שמסביב. השתמש במזרק של 0.5 מיליליטר עם מחט היפודרמית קצרה בגודל 28 כדי לשאוב 10 מיקרוליטר מהחיסון להזרקה. כעת יש לשתק את בלוטת הלימפה בין ענפי המלקחיים המעוקלים.

ואז כשהשיפוע פונה כלפי מעלה, הכנס את מחט המזרק לבלוטת הלימפה. ודא שכל השיפוע נכנס לבלוטת הלימפה. יש להזריק את החיסון ולחפש את הנפיחות המעידה על הזרקה מוצלחת.

פתח חבילת תפרים כירורגיים סטריליים עם מחזיק מחט. אחזו במחט התפר בחלק הדיסטלי של גוף המחט. לאחר מכן הדק את מחזיק המחט על ידי סחיטתו עד שהמחגר הראשון נתפס ומשוך את החוט החוצה.

לאחר מכן, אחזו בעור בצד אחד של החתך. הכנס את המחט מהחלק החיצוני של העור בקצה החתך. כעת שחרר את האחיזה בעור ותפס את הצד הנגדי של החתך בעזרת המלקחיים.

הכנס את המחט מבפנים העור כשניים עד שלושה מילימטרים מקצה החתך. שוב, תפסו את המחט. סיים עם המלקחיים ושחרר את מחזיק המחט.

משוך את המחט עם החוט דרך העור, והשאיר אורך נוח של החוט מחוץ לנקודת החדרת המחט הראשונה. צור את הקשר הכירורגי המועדף. אם החתך גדול מ-10 מילימטרים.

בצע תפר שני כאשר החתך סגור מספיק. העבירו את העכבר למשטח חימום כדי להתאושש. עקוב אחר העכברים מדי יום לריפוי פצעים כמו גם תסמינים קליניים אחרים כגון זיהום.

הזריקות התוך-לימפטיות הללו בעכברים הן פשוטות ומהירות יחסית. חתך שנסגר בתפר אחד נרפא בדרך כלל תוך יומיים. הנה. ייצור הנוגדנים נמדד לאחר החיסון עם החלבון פוספוליפאז A שתיים.

אלרגן ארס B הגדול. השורש התוך-לימפטי עורר תגובות נוגדנים חזקות עם הזרקה של 0.01 מיקרוגרם של PLA A 2. בעוד שזריקה תת עורית של 10 מיקרוגרם של PLA A נדרשה שניים כדי להשיג תגובה נאותה.

בניסוי זה, נעשה שימוש בחיסון תוך-לימפטי כדי לעורר תגובות ציטוטוקסיות של תאי T. זריקה תת עורית אחת של עכברי TCR 3 1 8 עם G 33 עוררה וציפתה לתגובה ציטוטוקסית של שמונה תאי T. זה הוגבר בערך שישה סדרי גודל לאחר הזרקה תוך-לימפטית, CD, ארבעה תפקודי תאי T נבדקו גם הם בבדיקת אתגר גידול.

כאשר העכברים המחוסנים אותגרו תוך ורידי עם NP 52 המבטא תאי גידול EL 4 סינגניים, העכברים פיתחו לימפומה מערכתית. חיסון על ידי השורש התוך-לימפטי הביא לזמני הישרדות ארוכים בהרבה מאשר חיסון על ידי השורש התת עורי. בבני אדם.

מתן חיסון תוך לימפטי מתבצע בעזרת אולטרסאונד על ידי הקצאת בלוטות לימפה תת עוריות. מעניין שבבני אדם, עוקבי חלבון עם תווית רדיו מצביעים על כך שהזרקות תת עוריות גרועות להפצה ביולוגית של בלוטות הלימפה לאחר הזרקה תוך-לימפטית ישירה למערכת הלימפה מאפשרות אספקה יעילה לתאי החיסון לגירוי תגובה חיסונית. לאחר השליטה, ניתן לבצע הליך זה של חיסון לימפטי תוך כ-2-3 דקות לכל עכבר.