Name: פרוטוקול בדיקה קלינית לגילוי גרוטאות לא טיפוסיות וקלאסיות בכבשים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 42 s
Description: למד פרוטוקול בדיקה קלינית לזיהוי גרוטאות קלאסיות ולא טיפוסיות בכבשים. שיטה זו מסייעת לחוקרים לאבחן מחלות נוירולוגיות בבעלי חיים חיים ולשפר את הטיפול בהן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

המחקרים המספקים את בעלי החיים מומנו על ידי המחלקה הבריטית לענייני מזון, סביבה וכפרים והאיחוד האירופי (באמצעות מימון מעבדת הייחוס של האיחוד האירופי TSE). אנו מכירים בתמיכתם של מנהלי הפרויקטים, ד"ר .M סימונס וד"ר.M ג'פרי.

1. הערכת היציבה
<ol><li>להעריך את היציבה של החיה תוך באין מפריע.</li>
	<li>בעלי חיים המושפעים מ-TSEs עשויים לעמוד עם גפיים רחבות, להיראות רכון, או לעמוד עם עגלת ראש נמוכה.</li>
</ol>2. הערכת התנהגות
<ol><li>למד את התנהגותו של בעל החיים, כאשר הוא נשאר לבד, כאשר ניגשים אליו, וכאשר מטפלים בו.</li>
	<li>בעלי חיים המושפעים מ-TSE עשויים להציג מנטציה שונה על ידי עמידה בנפרד מכבשים אחרות או לא מיד לאחר כבשים אחרות.</li>
	<li>כשמתקרבים לחיה, היא עלולה לברוח ולהתמוטט, או שהיא מתמוטטת על הרצפה כשמטופלים בה. כפייתי בכיוון השעון או נגד כיוון השעון ניתן לראות בכבשים עם גרוטאות לא טיפוסיות.</li>
</ol>3. בדיקות תגובה איום
<ol><li>החזק את ראשו של בעל החיים לבדיקת תגובת האיום: הזז את היד או מספר אצבעות מספר פעמים לכיוון כל עין של החיה כדי לגרום לתגובה מהבהבת אך היזהר שלא לגעת בשערות פנים או ליצור מערבולת אוויר שעלולה לגרום לחיה למצמץ.</li>
	<li>תגובת האיום עלולה להיעדר בבעלי חיים מושפעי גרוטאות, במיוחד בכבשים עם גרוטאות לא טיפוסיות. למרות שבדיקת תגובת האיום היא הבדיקה העצבית הגולגולתית היחידה המשמשת כחלק מהפרוטוקול, בדיקה חזותית של הפנים במהלך הליך זה עשויה לחשוף סימנים אחרים של ליקויים נוירולוגיים שאינם נראים בדרך כלל במגרד, למשל שיתוק פנים. אם החיה אינה ממצמצת בתגובה לאיום מומלץ לבדוק את רפלקס הפלפברי על ידי נגיעה בעפעפיים כדי להבטיח שחוסר היכולת של החיה למצמץ אינו נגרם על ידי שיתוק הפנים.</li>
</ol>4. בדיקת תגובת השריטה
<ol><li>ודאו שהחיה רגועה במהלך הליך זה מכיוון שלא ניתן לפרש את הבדיקה בבעלי חיים נאבקים.</li>
	<li>אזורי שריטות בגב באזורי בית החזה, המותני והסקרל, עוצרים בין כל פרק גירוד.</li>
	<li>אם החיה מגיבה בתנועות קצביות של הראש או הגוף, או זזה או מלקקת את שפתיה עם גירוד של אזור מסוים אחד, חזור על בדיקת השריטה כדי לאשר את הרבייה של תגובת השריטה.</li>
	<li>תגובה חוזרת היא בדרך כלל עורר בבעלי חיים כי הם pruritic, אשר בדרך כלל כולל כבשים עם גרוטאות קלאסיות או עזים עם הצורה pruritic של גרוטאות, אבל בדרך כלל אין תגובה כבשים עם גרוטאות לא טיפוסי אלא אם כן תנאי עור pruritic אחרים או ectoparasites נוכחים.</li>
</ol>5. בדיקת אובדן צמר ונגעים בעור
<ol><li>תבדקו את העור.</li>
	<li>Pruritus עקב גרוטאות בדרך כלל גורם לנשירת שיער, אשר עשוי להיות על הסקר, בחזרה, עכוז, בצד החזה או הבטן עקב שפשוף מוגזם או גירוד שבו העור הבסיסי נראה נורמלי.</li>
	<li>שפשופים עשויים להופיע מאוחר יותר אם לבעל החיים יש הזדמנות לשפשף חפצים חדים. פצעי נשיכה עשויים להופיע, במיוחד על הגפיים, עקב כרסום מוגזם של הגפיים.</li>
</ol>6. ניקוד מצב הגוף
<ol><li>להעריך את מצב הגוף של החיה על ידי חיטוט התהליכים הגביים והרחבים של החוליות המותני.</li>
	<li>Scrapie עלול לגרום לאובדן מתמשך של מצב הגוף שבו התהליכים הרוחביים של החוליות המותניות ניתן להרגיש בקלות בנפרד, ואת הקצוות של התהליכים נראים חדים.</li>
</ol>7. כיסוי עיניים של החיה
<ol><li>לכסות את עיניו של החיה עם מכסה המנוע, אשר יכול להתבצע באמצעות כל שקית שאינה עין דרך שבו פינה אחת מנותקת כדי לאפשר נשימה של החיה.</li>
	<li>שחררו את החיה רק אם אין חששות בטיחותיים, ואין סכנה לפציעה עקב בעל חיים מבוהל; אחרת לשמור על אחיזת הכבשים וללמוד תנועות בעלי חיים תוך שליטה על החיה.</li>
	<li>כיסוי עיניים עלול להחריף סימנים של מערכת שיווי המשקל או תפקוד לקוי של המוח הקטן, אשר עשוי להיות מוסתר על ידי היכולת של החיה לפצות באמצעות החזון שלה. אובדן שיווי משקל, חוסר קואורדינציה או הקפה עלולים להיגרם, במיוחד בכבשים לא ראויות לציון מבחינה קלינית עם גרוטאות לא טיפוסיות.</li>
</ol>8. הערכת תנועת בעלי החיים
<ol><li>למד את תנועות ההליכה והשרירים של החיה כאשר היא נעה בחופשיות.</li>
	<li>אי-קואורדנציה עשויה להיות מאופיינת בתנועות רחבות של הגפיים האחוריות, מקפץ עם שתי הגפיים האחוריות, או מתנדנד יתר על המידה ברבעים האחוריים, אשר עלול לגרום למעוד או לשבת לזמן קצר.</li>
	<li>נוכחות של רעד בראש היא לעתים קרובות עדינה כאשר החיה אינה מופרעת אך עשויה להיות מורגשת יותר במהלך או לאחר השלמת הבדיקה הקלינית.</li>
</ol>9. פרשנות
<ol><li>קחו למשל את משמעות הממצאים ביחס לגרוטאות.</li>
	<li>למרות נוכחותם של סימנים בודדים, כגון תגובה חוזרת ונשנית גירוד, רעד, התנהגות חריגה, חג, פרקים קורסים, אטקסיה, או תגובה איום נעדר, עשויים להיות סיבות שונות, המופע המשולב של שניים או יותר סימנים אלה מרמז מאוד של גרוטאות כבשים או עזים.</li>
</ol>

<ol><li>Benestad, S. L., Arsac, J. N., Goldmann, W., Nöremark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical%2FNor98+scrapie%3A+properties+of+the+agent%2C+genetics%2C+and+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res.%22%5BJournal%5D)">Atypical/Nor98 scrapie: properties of the agent, genetics, and epidemiology.</a> Vet Res.. 39 (4), 19 (2008).</li>
<li>D'Angelo, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+clinical+criteria+to+diagnose+scrapie+in+Italy%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+J%22%5BJournal%5D)">Assessment of clinical criteria to diagnose scrapie in Italy.</a> Vet. J. 174 (1), 106-112 (2007).</li>
<li>Eloit, M., Adjou, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BSE+agent+signatures+in+a+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">BSE agent signatures in a goat.</a> Vet. Rec. 156 (16), 523-524 (2005).</li>
<li>Fediaevsky, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+atypical+scrapie+in+sheep+from+positive+flocks+is+not+higher+than+in+the+general+sheep+population+in+11+European+countries%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The prevalence of atypical scrapie in sheep from positive flocks is not higher than in the general sheep population in 11 European countries.</a> BMC Vet. Res. 6, 9 (2010).</li>
<li>Healy, A. M., Weavers, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+neurology+of+scrapie+in+Irish+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Intern.+Med%22%5BJournal%5D)">The clinical neurology of scrapie in Irish sheep.</a> J. Vet. Intern. Med. 17 (6), 908-916 (2003).</li>
<li>Houston, E. F., Gravenor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+signs+in+sheep+experimentally+infected+with+scrapie+and+BSE%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Clinical signs in sheep experimentally infected with scrapie and BSE.</a> 152 (11), 333-334 (2003).</li>
<li>Kittelberger, R., Chaplin, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie%2FNor98+in+a+sheep+from+New+Zealand%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Diagn.+Invest%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie/Nor98 in a sheep from New Zealand.</a> J. Vet. Diagn. Invest. 22 (6), 863-875 (2010).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+of+clinical+signs+and+prion+protein+genotypes+in+British+sheep+with+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch.+Tier%C3%A4rztl.+Wochenschr%22%5BJournal%5D)">Associations of clinical signs and prion protein genotypes in British sheep with scrapie.</a> Dtsch. Tierärztl. Wochenschr. 116 (11), 380-388 (2009).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scrapie+in+goats%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">Scrapie in goats.</a> Vet. Rec. 161 (11), 395-396 (2007).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pruritus+is+a+common+feature+in+sheep+infected+with+the+BSE+agent%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Pruritus is a common feature in sheep infected with the BSE agent.</a> BMC Vet. Res. 4, 16 (2008).</li>
<li>Konold, T., Bone, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+clinical+signs+in+goats+with+transmissible+spongiform+encephalopathies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Monitoring of clinical signs in goats with transmissible spongiform encephalopathies.</a> BMC Vet. Res. 6, 13 (2010).</li>
<li>Konold, T., Davis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+findings+in+two+cases+of+atypical+scrapie+in+sheep%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Clinical findings in two cases of atypical scrapie in sheep: a case report.</a> BMC Vet. Res. 3, 1 (2007).</li>
<li>Passler, T., Walz, P. H., Pugh, D. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPassler%2C+T+%22Diseases+of+the+Neurologic+System.+In%3A+Sheep+and+Goat+Medicine%22">Diseases of the Neurologic System. In: Sheep and Goat Medicine</a>. Pugh, D. G., Baird, A. N. , 2, W.B.Saunders. Saint Louis. 361-405 (2012).</li>
<li>Russel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+condition+scoring+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22In+Pract%22%5BJournal%5D)">Body condition scoring of sheep.</a> In Pract. 6 (3), 91-93 (1984).</li>
<li>Simmons, H. A., Simmons, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie+in+sheep+from+a+UK+research+flock+which+is+free+from+classical+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie in sheep from a UK research flock which is free from classical scrapie.</a> BMC Vet. Res. 5, 8 (2009).</li>
<li>Simmons, M. M., Konold, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+natural+atypical+scrapie+phenotype+is+preserved+on+experimental+transmission+and+sub-passage+in+PRNP+homologous+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The natural atypical scrapie phenotype is preserved on experimental transmission and sub-passage in PRNP homologous sheep.</a> BMC Vet. Res. 6, 14 (2010).</li>
<li>Spiropoulos, J., Lockey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+prion+with+BSE+properties+from+farmed+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Emerg.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Isolation of prion with BSE properties from farmed goat.</a> Emerg. Infect. Dis. 17 (12), 2253-2261 (2011).</li>
<li>Ulvund, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aUlvund%2C+MJ+%22Clinical+Findings+in+Scrapie.+In%3A+Prions+in+humans+and+animals%22">Clinical Findings in Scrapie. In: Prions in humans and animals</a>. Hörnlimann, B., Riesner, D., Kretzschmar, H. , de Gruyter. Berlin. 398-407 (2006).</li>
</ol>

כל ההליכים הנוגעים לבעלי חיים בוצעו בהתאם לחוק בעלי חיים (נהלים מדעיים) משנת 1986, ברישיון משרד הפנים של ממשלת בריטניה. המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

Scrapie היא מחלה רשומה על ידי ארגון הבריאות העולמי לבריאות בעלי חיים (OIE), אשר, בהיעדר בדיקה מהירה ואמינה ante mortem, מסתמך על היכולת של החקלאים או וטרינרים לזהות את הסימנים הקליניים הקשורים למחלה זו. רוב מקרי גרוטאות, במיוחד במקרים מגרדים לא טיפוסיים, עם זאת, נמצאים כיום על ידי מעקב TSE ממוקד, כלומר על ידי בדיקה מוחית של מהורהרים קטנים הכפופים לשחיטה או בעלי חיים במלאי שנפלו. גידול כבשים להתנגדות גרוטאות קלאסיות, אשר הפחית את מספר מקרי גרוטאות קלאסי, סביר להניח גם הפחית את המודעות של אנשים למחלה, כך שהוא נחשב לעתים קרובות פחות באבחון דיפרנציאלי של הפרעות נוירולוגיות בכבשים. מגרד לא טיפוסי יש גם שכיחות נמוכה עם כחמישה מקרים בבתי מטבחיים ושמונה מקרים במלאי שנפל לכל 10,000 נבדק באירופה4. בנוסף, pruritus, בדרך כלל ניכר כמו התקרחות עם או בלי excoriation, נחשב לעתים קרובות סימן אופייני של scrapie13. לכן, מחלה נוירולוגית ללא pruritus בו זמנית כפי שנצפה מגרד לא טיפוסי12 או הצורה הלא פרורטית של גרוטאות קפרין11 לא יכול להעלות חשד של גרוטאות.
פרוטוקול בדיקה זה נועד לזהות סימנים קליניים של TSE בכבשים על ידי הערכת סימנים קליניים ספציפיים הקשורים לסוגים שונים של גרוטאות (גרוטאות לא טיפוסיות וקלאסיות, האחרונה מיוצגת על ידי כבשה מחוסמת BSE לא טיפוסית, אשר הציגה סימנים קלאסיים דמויי גרוטאות). בגרד קלאסי, אחוז המקרים שהפגינו תגובת שריטה חיובית ("רפלקס כרסום") נע בין 50-77 בלמעלה מ -100 כבשים למדו5,8. הפרעות תנועה ניתן לראות עד 81% ממקרי גרוטאות קלאסי מבוסס על מחקרים שונים18. אי-קואורדינציה היא גם סימן מרכזי במקרים טבעיים שונים של גרוטאות לא טיפוסיות, המלוות לעתים קרובות בשינויים התנהגותיים1, אך סימנים נוספים שדווחו הן באופן טבעי והן באופן ניסיוני נגועים כבשים גרוטאות לא טיפוסיות היו חגים וליקוי ראייה12,15,16, ולכן כיסוי עיניים ובדיקת תגובת האיום נכללים בפרוטוקול הבדיקה. ניקוד מצב הגוף, למשל באמצעות מערכת ניקוד 6 נקודות14, מאפשר הערכה של emaciation, אשר ניתן לראות כבשים מושפעות גרוטאות5. למרות קריטריונים קליניים כדי לסייע בזיהוי של גרוטאות בכבשים הוצעו בעבר2, אלה קשורים רק לגילוי של מגרד קלאסי לקח את ההיסטוריה הקלינית בחשבון, אשר לא יכול להיות זמין אם בעלי חיים מוצגים בבית מטבחיים.
הפרוטוקול הנוכחי מאפשר הקרנה של בעלי חיים רבים לסימני גרוטאות בתוך פרק זמן קצר. יתר על כן, פרוטוקול הבדיקה יכול להיות מיושם על מחקרים ניסיוניים של גרוטאות כבשים ועזים כדי לפקח על התפרצות קלינית, התקדמות, ונקודת קצה. עם זאת, הוא אינו מחליף בדיקה פיזית ונוירולוגית מפורטת יותר בהקלטה מתאימה של היסטוריית המקרים הקליניים, אולי ואחריו בדיקות אבחון נלוות (בדיקת דם ונוזל שדרתי; טכניקות הדמיה מתוחכמות יותר במידת הצורך), אשר עשויות להיות נחוצות לאחר מכן כדי לשלול תנאים שונים אחרים בהרהורים קטנים המציגים סימנים דומים. כגון מחלות נוירולוגיות מטבוליות או דלקתיות, מורסות מוח או גידולים.
למרות שבדיקה קלינית היא בדרך כלל פחות רגישה באיתור בעלי חיים שנפגעו מ- TSE מאשר בדיקות שלאחר המוות המבוססות על גילוי חלבון פריון2,11, במיוחד בשלב מוקדם של תקופת הדגירה, זוהי כיום שיטת הגילוי היחידה בבעלי חיים חיים ורלוונטית ביותר למדינות שאין להן מערכת מעקב ממוקדת במקום לזהות חומרים מהרהרים קטנים המושפעים מ- TSE.

Scrapie הוא אנצפלופתיה ספונגיפורמית (TSE) של כבשים ועזים, השייכת לקבוצה של הפרעות תיקון חלבונים, כמו אנצפלופתיה ספונגיפורמית שור (BSE) בבקר, מחלת בזבוז כרונית בצבי, ומחלת קרויצפלד-יעקב בבני אדם. האבחנה נעשית לאחר המוות על ידי גילוי הצורה החריגה של חלבון הפריון, שהוא עמיד לחלבונים, בדרך כלל במוח. ניתן להבחין בין שתי צורות גרוטאות עיקריות המתרחשות באופן טבעי, שהן אפידמיולוגיות, פתולוגיות ושונות ביוכימית: גרוטאות קלאסיות ומגרדות לא טיפוסיות. בנוסף, מחלה נוירולוגית עם סימנים קליניים דמויי גרוטאות קלאסי יכול להיגרם כבשים ועיזים על ידי זיהום ניסיוני עם סוכן BSE6,10-11. למעשה, BSE המתרחשים באופן טבעי אובחן עזים3,17. שליטה של מגרד קלאסי (ו BSE בכבשים אם זה קרה באופן טבעי) הושגה על ידי רבייה עבור התנגדות גנטית מיקוד גן חלבון פריון, אבל זה קשה יותר עבור מגרד לא טיפוסי, אשר הוא האמין להיות מחלה ספורדית אובחן במדינות הנחשבות חופשיות מגרד קלאסי, למשל ניו זילנד7.
Scrapie היא מחלה נוירולוגית של כבשים ועזים בוגרים וכתוצאה מכך שינויים בהתנהגות, תחושה, ותנועה, אבל המחלה מתקדמת לאט, סימנים קליניים לעתים קרובות אינם מוכרים כי שומר בעלי חיים או מנתח וטרינרי לא יכול להיות מוכר עם הסימנים הקליניים, או scrapie אינו נחשב בכלל באבחון דיפרנציאלי של מחלות נוירולוגיות בהבעות קטנות.
פרוטוקול הבדיקה המוצע נועד לסייע באבחון הקליני של מגרד עם שתי מטרות בראש: זה צריך להיות קצר במידה ניכרת כדי לאפשר סריקה של בעלי חיים רבים בתוך פרק זמן קצר, אבל ספציפי מספיק כדי לאפשר זיהוי של בעלי חיים מושפעים scrapie, אשר מושגת על ידי הערכת נוכחות של סימנים קליניים נתקל לעתים קרובות בבעלי חיים מושפעים scrapie. פרוטוקול זה הוא שינוי קל מזה המשמש לניטור עזים לסימנים של גרוטאות קלאסיות11 וכולל כיסוי עיניים של החיה, אשר עלול להחריף סימנים קליניים שאינם קשורים בדרך כלל עם scrapie9.

פרוטוקול בדיקה קלינית לגילוי גרוטאות לא טיפוסיות וקלאסיות בכבשים

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

האבחנה של גרוטאות, אנצפלופתיה ספונגיפורמית (TSEs) של כבשים ועזים, מבוססת כיום על גילוי של חלבון פריון הקשור למחלות על ידי בדיקות שלאחר המוות. אלא אם כן מדגם אקראי של אוכלוסיית הכבשים או העזים מנוטר באופן פעיל עבור scrapie, זיהוי של מקרי גרוטאות מסתמך על דיווח של חשודים קליניים, אשר תלוי בהיכרות של הפרט עם המחלה ואת היכולת לזהות סימנים קליניים הקשורים scrapie. Scrapie לא יכול להיחשב באבחנה דיפרנציאלית של מחלות נוירולוגיות בהבעות קטנות, במיוחד במדינות עם שכיחות מגרדת נמוכה, או לא מוכר אם הוא מציג כצורה לאpruritic כמו גרוטאות לא טיפוסיות. כדי לסייע בזיהוי חשודים קליניים, פרוטוקול בדיקה קצר מוצג כדי להעריך את התצוגה של סימנים קליניים ספציפיים הקשורים צורות pruritic ולאpruritic של TSEs בכבשים, אשר יכול להיות מיושם גם על עזים. זה כולל הערכה של התנהגות, ראייה (על ידי בדיקת תגובת האיום), pruritus (על ידי בדיקת התגובה גירוד), ותנועה (עם ובלי כיסוי עיניים). זה עלול להוביל לבדיקה נוירולוגית מפורטת יותר של דיווח על בעלי חיים כחשודים מגרדים. זה יכול לשמש גם במחקרים ניסיוניים TSE של כבשים או עזים כדי להעריך את התקדמות המחלה או לזהות נקודת קצה קלינית.

כבשה בריאה מבחינה קלינית. סקר דורסט wether מתוך עדר ללא גרוטאות מחוסן תוך-אופן עם מוח שור ממוצא ניו זילנדי ונבדק ב 49 חודשים לאחר החיסון. לכבשה זו יש יציבה נורמלית, היא מתנהגת כרגיל, מציגה תגובת איום נורמלית (איור 1),אינה מגיבה לבדיקת השריטה, יש לה צמר שלם ומצב גוף טוב מאוד. זה קלינית יוצא דופן כאשר בעיניים מכוסות ולא מראה סימנים של הפרעת תנועה.
כבשים גרוטאות לא טיפוסיות המציגות את הצורה הלא-פרורית של TSEs בכבשים. Cheviot wether מלהקה נטולת גרוטאות מחוסנת תוך-גזעית עם הומוגניאט במוח ממארז שדה גרוטאות לא טיפוסי של אותו גנוטיפ של חלבון פריון (AHQ/AHQ) ונבדק בגיל 36 חודשים לאחר החיסון. כבשה זו יש גם יציבה נורמלית אבל מתנהג באופן שונה לכבשים האחרות בעט ועיגולים בכיוון השעון. הוא אינו ממצמץ כאשר תגובת האיום נבדקת. גירוד אינו מעורר כל תגובה, ואין שינויים פליז ניכרים, אבל מצב הגוף הוא רק הוגן. הוא מקיף בכיוון השעון כשעיניים מכוסות (איור 2)ומאבד שיווי משקל. ההליכה היא אטקסית, ורעד ראש עדין נראה לעין.
כבשים BSE לא טיפוסי מציג עם הצורה pruritic של TSEs בכבשים, אשר דומה קלינית המצגת הקלינית של כבשים קלאסיות מושפעות גרוטאות. מסיבה זו, מקרה גרוטאות קלאסי אינו כלול. Poll Dorset wether מלהקה נטולת גרוטאות מחוסנת תוך-גזעית עם מוח BSE לא טיפוסי (L-type) הומוגנית ונבדקה בחיסון של 50 חודשים לאחר. כבשה זו עומדת מעט רכון, נוטה לשמור על הגפיים האחוריות רחב מבוסס ונופל על הרצפה כאשר נתפס. תגובת האיום חלשה. גירוד של אזורים שונים בגב מעורר תנועות ראש או שפתיים (איור 3), ויש אובדן צמר עם פגיעת עור קלה בסקר. מצב הגוף טוב. כאשר עיניו מכוסות, הוא מסרב לזוז ומניח את הקצה האחורי שלו על המשוכה כדי לשמור על איזון. הכבשים אטקסיות ומציגות היפרמטריה של גפיים.
<img alt="Figure 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1.jpg"> איור 1. בדיקות תגובה לאיים. מחווה מאיימת כלפי עין החיה מעוררת תגובה מהבהבת. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג תמונה גדולה יותר.</a>
<img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2.jpg"> איור 2. כיסוי עיניים. הקפה בכיוון השעון עוררה על ידי כיסוי העיניים של הכבשים עם ברדס. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג תמונה גדולה יותר.</a>
<img alt="Figure 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3.jpg"> איור 3. בדיקה של תגובת השריטה. גירוד של הגב מעורר ליקוק שפתיים עם תנועות צדדיות של הראש <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג תמונה גדולה יותר.</a>

פרוטוקול בדיקה קלינית קצר מוצג כדי לסייע באיתור של גרוטאות קלאסיות ולא טיפוסיות בכבשים ועזים.

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

סקראפ (Scrape) היא אנצפאלופתיה ספוגית מדבקת בכבשים ובעיזים, הגורמת לסימנים נוירולוגיים בבעלי החיים הנגועים. אישור המחלה מתבצע לאחר המוות בבדיקת המוח, המאפשרת גם סיווג לצורות שונות של סקראפ: סקראפ קלאסי, סקראפ אטיפי컬, ובמקרים נדירים צורות אחרות המועברות ממינים אחרים, כגון אנצפאלופתיה פריונית בבקר (BSE). סקראפ היא מחלה רשומה על ידי ארגון הבריאות העולמי לבריאות בעלי חיים, אך לעיתים קרובות המחלה אינה מזוהה בבעלי מעלה קטנים נגועים.סרטון זה מדגים פרוטוקול קצר של בדיקה קלינית הנמשך כחמש דקות, שנועד לסייע בזיהוי מקרים קליניים המושפעים מאנצפלופתיות ספוגיות מדבקות, תוך שימוש בשלושה כבשים כדוגמאות. דוגמה אחת היא כבשה בריאה קלינית שהוחדרה למוח ב-BSC. Free bovine brain homogenate ונבדקה 49 חודשים לאחר ההחדרה, מה שמהווה ביקורת.דוגמה שתיים היא כבשה עם תסמינים קליניים שזוהמה במוח באופן תוצאתי עם הומוגנאט של מוח כבשים עם scrapy לא טיפוסי ונבדקה 36 חודשים לאחר ההזרקה, דבר המייצג מקרה של scrapy לא טיפוסי. דוגמה שלוש היא כבשה עם תסמינים קליניים שזוהמה מחדש עם הומוגנאט של מוח בקר עם BSE לא טיפוסי ונבדקה 50 חודשים לאחר ההזרקה, ומציגה תסמינים קליניים דומים ל-scrappy קלאסי. מסיבה זו, מקרה של scrapy קלאסי לא נכלל.הערכת היציבה. הכבשה הבריאה הנושאת את תג האוזן מספר 1 ומסומנת על ידי החץ האדום מציגה יציבה נורמלית כאשר היא אינה מופרעה במכלה. גם יציבת הכבשה עם ה-atypical scrapy נראית נורמלית.הכבש עם BSC לא טיפוסי נראה מעט שפוף ונוטה לצלוע ברגליו האחוריות. בהערכה רחבה של ההתנהגות כפי שצפוי בכבשים נורמליים, הכבש הבריא נשאר בתוך הקבוצה ועוקב אחר תנועות הבוחן. גישה ותפיסה של הכבש, בהתחשב בגודלו, אינן מעוררות שום חריגה.הכבש עם מחלת ה-scrapy הבלתי-טיפוסית מתנהג באופן שונה משאר הכבשים במכלאה ועומד כאשר חלקו האחורי פונה למצלמה, בעוד שכל שאר הכבשים מביטות לעבר המצלמה. כבשים הן בעלי חיים חברתיים הנעים בקבוצות, אך כבש זה אינו עוקב מיד אחרי הכבשים האחרות ונראה כי הוא איטי בקליטת העובדה שהכבשים האחרות נעו עם כיוון השעון. תנועת סיבוב (Circling) נגרה לאחר בדיקתו של כבש זה.התנהגות כפייתית זו נפסקת רק כאשר ניגשים אל הכבשה והיא בורחת. כבשה עם BSC לא טיפוסי תיפול על הרצפה בעת טיפול בה לאחר תפיסתה. בדיקת תגובת פחד (Menace response), הכוללת הזזת היד או מספר אצבעות מספר פעמים לעבר כל אחת מעיני בעל החיים ללא מגע בשערות הפנים וללא יצירת זרם אוויר.טורבולנציה אמורה לעורר מצמוץ כפי שנראה בשתי העיניים ובכבש הבריא. התגובה של הגברים אובדת בכבש עם scrapy לא טיפוסי, אשר אינו ממצמץ. זאת למרות שיכולתו למצמץ כאשר נוגעים בעפעפיים אינה פגועה.הכבשה עם ה-BSE הבלתי-טיפוסי ממצמצת בתגובה לאיום, אך תגובת המצמוץ בעין שמאל חלשה בהשוואה לתגובת המצמוץ. כאשר נוגעים בעפעף, בבדיקת תגובת השריטה, הבדיקות מבוצעות כאן בעוד הכבשה עומדת לצד קיר, ומניעת בריחתה קדימה מתבצעת באמצעות רגל אחת של הבוחן; הכבשה רגועה מספיק כדי להמשיך בבדיקה. מספר אזורים בגב נשרטים כאן, האזורים הסקראלי-לומברי, התורקלי האמצעי והתורקלי הקרניאלי, עם הפסקה בין כל אירוע שריטה כדי להתרשם מהתגובה.כבש זה, הבריא מבחינה קלינית, אינו מראה תגובה סטריאוטיפית הניתנת לשחזור. באופן דומה, הכבש עם scrapy לא טיפוסי אינו מגיב לגירוד של מספר אזורים בגב. עם זאת, תגובה מתעוררת כאשר מגרדים את הכבש עם BSC לא טיפוסי.בהתאם לאזור שנשרט, התגובה תהיה תנועות נקירה של השפה או תנועות ראש. תגובה זו נחשבת כבדיקה חיובית (Positive Checking) לאובדן צמר ולנגעי עור. ניתן בדרך כלל להבחין באזורים נרחבים של אובדן צמר, עם או בלי נגעי עור, מרחוק, אך בדיקה מקרוב של הכבש במהלך הריסון עשויה לזהות אזורים קטנים יותר של אובדן צמר שנגרמו עקב גרד מוגבר.אזורים אלו נמצאים לעיתים קרובות בראש, בגב, בעתרה ובצדי החזה או הבטן, ולרוב הם סימטריים דו-צדדיים. בעוד שבכבשי הביקורת ובכבשים עם scrapy לא טיפוסי לא זוהה אובדן של פרווה, הכבשה עם BSC לא טיפוסי איבדה את צמרה באזור הקוטב. העור שלם בשאר הגוף, למעט גרב קטן שנוצר בעקבות פגיעה בעור.ייתכן שהדבר נגרם מדירוג גרד מופרז של מצב הגוף. מצב הגוף של בעל החיים מדורג על ידי מישוש של הזקיפים הרוחביים והגביים של חוליות המותן. ניתן לבצע זאת גם במהלך בדיקת הגירד של הכבשים.ניתן להשתמש במדד הנע בין אפס לחמש, כאשר הציון חמש מוקצה לכבש השמן מאוד. הדבר מיוצג בתמונה המצוירת של חתך רוחבי דרך עמוד השדרה המותני. זרועות החוליות מכוסות בשריר בצבע אדום וברקמה שומנית בצבע צהוב, ולא יהיה ניתן למלא את קצות הזרועות הרוחביות גם אם תפעילו לחץ על העור.בניגוד לכך, מצב הגוף גרוע. אם קצות הזקירים של חוליות השדרה מרגישים חדים, כך שהפעלת לחץ כלשהו אינה מאפשרת להרגיש שכבת רקמה מעליהם כפי שמוצג בתמונה זו. מצב זה יקבל ציון אפס.מצב הגוף טוב מאוד בכבשים הבריאות קלינית עם ציון של ארבעה; סקראפי אטיפיקלי (atypical scrapie) גרם לירידה במצב הגוף, שהיה סביר בלבד עם ציון של שתיים. לעומת זאת, הכבש עם BSC אטיפיקלי שמר על ציון מצב גוף טוב של שלוש. כיסוי עיניים של בעל החיים: ראש הכבש מכוסה כאן עם כיסוי עיניים בעבודת יד, שיכול להיות כל שק שאינו C3 שפינה אחת בו גזוזה באזור אפו של בעל החיים כדי לאפשר נשימה; לפני שמשחררים את הכבש, ודאו כי הדבר בטוח עבור בעל החיים.ייתכן שחלק מהכבשים יכנסו לבהלה וירוצו או יקפצו, ובכך יעמידו את עצמן או אחרים בסכנת פגיעה. במקרה זה, אין לשחרר את הכבשה לחלוטין ויש לבחון את תנועות בעל החיים תוך כדי החזקתו. הכבשה הבריאה נותרת רגועה כשהיא מכוסה בעיניים, אך היא מנערת את ראשה בניסיון להסיר את הכיסוי.תנועתו או שיווי המשקלו אינם פגועים. לעומת זאת, הכבש עם הסקרפי הבלתי-טיפוסי מתחיל להסתובב בכיוון השעון. קיימת גם אובדן של שיווי המשקל.הכבש עם BSC לא טיפוסי נמנע מלהיעמד ונשען על הגדר, אך בעודו עושה זאת, הוא מצליב את ארבע רגליו וניכרת אובדן שיווי משקל. בהערכת תנועת בעל החיים, ההליכה בכבשים הבריאות מבחינה קלינית נראית נורמלית. אין רעד ניכר, הן כאשר הכבש נשאר ללא הפרעה והן קודם לכן במהלך הטיפול.אטקסיה (Ataxia) מופיעה בכבש עם סקראפי (scrapie) לא טיפוסי. הוא מחליק כאשר הוא עוקב אחר הכבשים האחרות ותנועות הגפיים האחוריות שלו נראות לא מתואמות; ניתן להבחין לרגע ברעד עדין של הראש כאשר הכבש עומד בתוך הקבוצה.מרקם דומה ניכר גם בכבש המסומן כ-BSE לא טיפוסי. קיימת אובדן שיווי משקל בקו-אורדינציה והיפרמטריה, כפי שניתן לראות בנפילה עם הרמת רגליים גבוהה. פרשנות של דפוס ההליכה.סימנים קליניים שנצפו בכבשים אלו שהושפעו מאנצפאלופתיה ספוגית מדבקת כללו התנהגות חריגה, היעדר תגובה לאיום, תגובה חיובית לגירוד, אלופציה (נשירת שיער), נזקי עור, סיבוב במעגלים כאשר העיניים מכוסות, חוסר קואורדינציה ורעד; המוצגים כאן הם אחד או יותר מסימנים אלו. הופעתם של סימנים אלו צריכה להדליק נורה אדומה אצל הבודק, ויש לשקול את המחלה כאחת מהסיבות האפשריות. סיכום: סרטון זה מציג את פרוטוקול הבדיקה הקלינית המבוצעת בכבשה בריאה קלינית ומספק דוגמאות לממצאים חריגים בכבשים המושפעות מאנצפאלופתיה ספוגית מדבקת.פרוטוקול זה שימושי לזיהוי מקרים החשודים מבחינה קלינית, אשר ניתן לבחון בפירוט רב יותר כדי לשלול מחלות אחרות בעלות ביטוי קליני דומה, או שניתן להשתמש בו להערכת תחילת המחלה, התקדמותה או נקודות סיום קליניות. במחקרים ניסויים של אנצפלופאתיות ספוגיות מדבקות בבעלי פרסות קטנים.

clinical-examination-protocol-to-detect-atypical-classical-scrapie

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

כאן אנו מתארים assay הרומן לניטור ספיגת הפריון וסחר על ידי תאים חיסוניים מיד לאחר חיסון intraperitoneal ידי מטהרים fluorescently תיוג מוטות הפריון מצטבר חומר במוח נגועים אז ניטור ספיגת שלהם תנועה מאתר ההזרקה ואפיון התאים לתווך את האירועים הללו.

ניטור החיסונית תאים פלורסנט סחר Prion שעות לאחר ההדבקה מוטות intraperitoneal

יש אוכלי נבלות פוטנציאל translocate פריונים ספגו מוח העברה זיהומיות בצואה שלהם לאזורים ללא מחלה. שלנו שיטות פירוט משמשות כדי לקבוע אם פריונים מרוסקים מותאמים עכבר יישארו זיהומיות לאחר מעבר למרות שמערכת העיכול של עורבים אמריקאים (brachyrhynchos Corvus), הצריכה נפוצה של בעלי חיים מתים.

נהלים לזיהוי פריוני זיהומיות לאחר המעבר דרך מערכת העיכול של מינים עופות

מדידת המחסום להעברה בין מינים של מחלות פריונים היא מאתגרת וכוללת בדרך כלל אתגרים של בעלי חיים או בדיקות ביוכימיות. כאן, אנו מציגים מבחן המרת חלבון פריון במבחנה עם יכולת לחזות מחסומי מינים.

הערכת מחסומי transmissible מינים ספגו מוח עם<em&gt; במבחנה</em&gt; Assay המרת חלבון הפריון

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לתיאור טכניקה פשוטה, מהירה ויעילה פריון הגברה, השיטה בזמן אמת רועד מפחד-induced ההמרה (RT-מהר).

בזמן אמת רועד מפחד הנוצרות על-ידי המרה Assay גילוי של CWD Prions חומר צואתי

מבחן אימונוהיסטוכימיה מהירה ישירה (DRIT) מציע ארגון עולמי לבריאות בעלי חיים וארגון הבריאות העולמי (OIE/מי) המזוהה נגד נוגדן פלורסנט ישירה (DFA) מבחן לאבחון כלבת. בדיקה זו מאפשרת יישומים מבוססי שדה שניתן לבצע בתוך כ 1 שעות על רשמים במוח באמצעות מיקרוסקופ אור.

מעקב משופר כלבת באמצעות מבחן אימונוהיסטוכימיה ישירה מהירה

המטרה של פרוטוקול זה היא להפגין שיטות נמק בטוח בבעלי חיים קטנים וגדולים כדי להשיג דגימות רקמה מספקת עבור בדיקת כלבת.

כלבת נקרומה טכניקות בעלי חיים גדולים וקטנים

תיוג חיסוני של חלבון פריון חריג באמצעות פרוטוקולים אימונוהיסטוכימיים דורש דגימה ספציפית ומתודולוגיות להכנת נוגדנים נגד PrP. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את השלבים העיקריים בהסרת אפיטופים כדי להבטיח תיוג חיסוני תקין של PrP ולמזער כתמי רקע לא ספציפיים. כמו כן, גישה זו לוקחת בחשבון אמצעי בטיחות ביולוגית בעת ביצוע מחקרים אימונוהיסטוכימיים עם רקמות נגועות פריון.

זיהוי של חלבון פריון חריג על ידי אימונוהיסטוכימיה

אנצפלומיאליטיס אוטואימונית ניסיונית היא אחד המודלים הנפוצים ביותר של טרשת נפוצה. בפרוטוקול הנוכחי, עכברי C57BL/6J משני המינים מחוסנים בפפטיד גליקופרוטאין אוליגודנדרוציטים מיאלין, וכתוצאה מכך בעיקר פרזיס עולה של הזנב והגפיים. כאן אנו דנים בפרוטוקול של אינדוקציה והערכה של EAE.

מידול טרשת נפוצה בשני המינים: MOG35-induced ניסיוני אוטואימוני אנצפלומיאליטיס

פרוטוקול זה מדגים את בדיקת תגובת שרשרת פולימראז (RT-PCR) בזמן אמת של pan-lyssavirus LN34 מאיסוף רקמות ועד לפירוש התוצאה, כולל עדכונים לרצפי פריימר ותכשירים לשיפור ביצועי הבדיקה עבור כמה נגיפי ליסה ולגומורפים שאינם כלבת. אנו גם מדגימים את מערך הבדיקה עבור פורמט LN34 מרובב (LN34M) בעל באר אחת.

אבחון לאחר המוות של כלבת בבעלי חיים על ידי מבחן תגובת שרשרת פולימראז LN34 המעודכן והמרובה בזמן אמת

חסרה שיטה להערכת אזורים נפוצים במעבדות לזיהום פריונים וטיהור יעיל. הפרוטוקול המתואר כאן מספק יסודות מרכזיים ליישום בדיקת בטיחות פריון מעבדה שניתן לשנות בקלות כדי לענות על הצרכים האישיים של מעבדות ספציפיות.

בדיקת החלקה של מעבדת בטיחות פריון

למד פרוטוקול בדיקה קלינית לזיהוי גרוטאות קלאסיות ולא טיפוסיות בכבשים. שיטה זו מסייעת לחוקרים לאבחן מחלות נוירולוגיות בבעלי חיים חיים ולשפר את הטיפול בהן.

פרוטוקול בדיקה קלינית לגילוי גרוטאות לא טיפוסיות וקלאסיות בכבשים

גלה סרטונים נוספים