Name: Heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד Arterialization בכישלון חריף כבדית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 19 s
Description: למד השתלת כבד עזר הטרוטופית עם זרימה מוסדרת בעורבים לטיפול בכישלון כבדי חריף. שיטה זו מאפשרת למחקרים לבחון התחדשות כבדית ותפקוד שתל.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה מומן על ידי &quot;דויטשה Forschungsgemeinschaft&quot; (DFG). ק Schleimer נתמכה על ידי ליזה מייטנר המלגה של משרד המדע והמחקר של NRW. ברצוננו להודות לגב &#39;מרי-ג&#39;ואן Blümich לסיוע העריכה מצוין שלה. ד&quot;ר מריה Kokozidou מומן מFresenius 2011_A61.

.1 חיות מעבדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השג אישור ועדת האתיקה מקומית לכל הניסויים שיבוצעו, בהתאם להנחיות FELASA הגנה על בעלי חיים (40 K, 17/99). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בחולדות לואיס זכר זמינות לרכישה מכל מגדל מסחרי (לדוגמא, צ&#39;ארלס ריבר Wiga GmbH, Sulzfeld, גרמניה). כאן, 224 בעלי חיים (112 תורמים, 112 נמענים) שמשו לביצוע 112 השתלות. המקבלים הוקרבו בגיל 6 שבועות לאחר הניתוח. בזמן הפעולה, בעלי החיים צריכים לשקול 250-350 גרם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על בעלי החיים בחדרי מבוקרי אקלים עם גישה חופשית למזון ומים. </li></ol> .2 הרדמה והכנה אופרטיבית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החולדה בתיבת פרספקס מחוברת למכונת ההרדמה עם קצב זרימת חמצן של 1 ליטר / דקה, ומאדה isofluorane עם 5% גז הרדמה כדי לגרום להרדמה. לשמור על הרדמה בisofluorane 1.5%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את החולדות במצב שכיבה על צלחת התחממות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הפרווה של הבטן עם אפילציה שמנת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן שדה ניתוח סטרילי כמו הבא: השתמש בחומר חיטוי לניקוי המעבדתיים. לחיטוי כלורהקסידין שימוש אתר החתך הראשון, השני אלכוהול ו, סוף סוף, פתרון לשפשף (למשל, כלורהקסידין ו70% אלכוהול איזופרופיל). תלבש חלוק ניתוחים חד פעמי וכפפות מנתחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משתמש במכשירי מייקרו סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במיקרוסקופ פעולה בהגדלה של פי 12-20. </li></ol> .3 נוהל כירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פעולה תורם הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע laparotomy חציון ולכרות אונה לרוחב מהשמאל ואונת החציון של השתל כפי שתואר על ידי היגינס. 14 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אז להכין את רצועת hepatoduodenal. לקשור ראשון בצינור המרה כדי לגרום לגודש והתרחבות של צינור המרה הקטן. ואז לקשור ותחצה gastroduodeוריד סופי ועורק. לאחר מכן, לבודד את תא מטען צליאק ועורק כבד הנפוץ ויחצה את עורק הקיבה השמאלי ועורק הטחול. לחתוך את צינור המרה הצפוף, ולהציג את הסטנט 20-G לתוכו. המיצוב של סטנט חייב להבטיח את הניקוז של מערכת צינור המרה hilar כולו. Transect צינור המרה distally לסטנט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את קטע infrahepatic של וריד caval ממש מעל וריד הכליה תקין. זלוף </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר קשירה של אב העורקים מעל תא מטען צליאק, מהדק את וריד השער ולחתוך אותו. להציג את הקטטר זלוף (14 G) לתוך וריד השער, ולבצע זלוף עם 30 מ&quot;ל של היסטידין טריפטופן-ketoglutarate--solution (HTK) (H2O 12 סנטימטר, 4 ° C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את הסרעפת ואת וריד caval suprahepatic לאפשר perfusate לזרום החוצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בלו תא מטען צליאק יחד עם תיקון אב העורקים ולשטוף אותו עם פתרון היסטידין-טריפטופן-ketoglutarate. Explantation </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Transect וריד caval infrahepatic ממש מעל וריד הכליה תקין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ואז, במקום סטנט בקוטר של 0.3 מ&quot;מ בוריד השער ולתקן אותה עם קשירה. במהלך המבצע הבא, וריד הפורטל arterialized דרך עורק הכליה תקין. Transect וריד שער distally לסטנט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר קשירה של וריד caval suprahepatic, תחצה אותו יחד עם שרוול של סרעפת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Explant השתל ולאחסן אותו בהיסטידין-טריפטופן-ketoglutarate -solution (HTK) בשעה 4 מעלות צלזיוס בשקית ניילון על קרח. תפרי פינת מקום (8-0 Ethilon) בוריד caval infrahepatic. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פעולת נמען <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע laparotomy חציון ולהכין את וריד caval infrahepatic. אז לבודד את עורק הכליה הימני ושופכן, ולקשור השופכן ותחצה אותו. הצמד את עורק הכליה הימני במקורו, ואז לקשור את וריד הכליה תקין. ואז אחרי חיתוך רוחב של שני מחדשכלי סופיים, לבצע כריתת הכליה. בהמשך לכך, לקצר את עורק הכליה תקין, לשטוף אותו עם תמיסת מלח הפרין (heparin 40 UI תמיסת מלח מ&quot;ל /). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Transect וריד הכליה תקין proximally למייתר לאחר הידוק הפרוקסימלית ומ דיסטלי של וריד caval infrahepatic ליצור לומן סגלגל בוריד caval infrahepatic. יש לשטוף את וריד caval עם תמיסת מלח הפרין. להשתיל את השתל באזור הכליות הימני של הבטן של הנמען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Anastomose הסוף לצדו של התורם infrahepatic וריד caval לוריד caval recipient`s עם תפר פועל 8-0 Ethilon. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שטיפה עם פתרון הפרין / מלוח, להציג את הסטנט בוריד השער לתוך העורק הכלייתי תקין (איור 3). חבר את וריד השער ועורק כליה עם 2 תפרים (8-0 Ethilon). לתקן את הסטנט מקשר בעורק הכליה עם מייתר (משי קלוע 7-0 שחור). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לאפשר reperfusion, להסיר ראשון מהדק העורקים, ואז שניהםמהדק ורידים (איור 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את אב העורקים infrarenal, ואז למקם את הפרוקסימלית וmicroclamp דיסטלי ולחתוך את אב העורקים תקין בין שני מלחציים. לבצע השקה קצה לצד בין אב העורקים ותא מטען צליאק של התורם, משתמש בתיקון אב העורקים, עם תפר פועל 10-0 Ethilon. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את צינור המרה לתריסריון: למרוח תפר pursestring בקיר התריסריון, לעשות חתך קטן בדופן התריסריון ממש באמצע של pursestring. להציג את צינור המרה stented לתריסריון, ולהדק את תפר pursestring. לבסוף, להחזיק את התריסריון ואת צינור המרה יחד באופן הדוק עם שני תפרים (Ethilon 8-0) (איור 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ואז לבצע כריתת סיכום ביניים של כבד הילידים, שתואר לראשונה על ידי אדמונד et al. כדי לחקות את אי ספיקת כבד חריפה. 7 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתקן את וריד caval suprahepatic של השתל, יחד עם שרוול של סרעפת, לדופן הבטן הרוחבי של מחדשcipient עם 4-0 תפר Vicryl. יש לשטוף את הבטן עם תמיסת מלח (איור 6). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשכבה השרירית להשתמש תפר 4-0 Vicryl ריצה ולעורית תפר פועל 3-0 Vicryl. </li></ol></li></ol> שחזור .4 וניהול לאחר הניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תן לחיות להתאושש מהרדמה תחת מנורת חימום אינפרא אדום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק עצירות במינון של .03-.05 מ&quot;ג / קילוגרם BW sc כל 8-12 שעה למשך 2 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבחון את בעלי החיים הנוגעים למצבו וסימנים של מחלה או דלקות הכלליים. </li></ol> .5 חישוב משקל כבד ילידים הראשוני לחשב את המשקל כבד ילידים הראשוניים באופן הבא: להפחית את המשקל של האונה של הכבד שעברה כריתה ממשקל הכבד השלם (2.66% ממשקל גוף (ערך זה עם סטיית תקן של +/- 0.49% נקבעו בניסויים קודמים עם n = 80 חיות מאותו הזן וge)). 15

<ol><li>Boudjema, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+for+fulminant+and+subfulminant+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation for fulminant and subfulminant hepatic failure.</a> Transplantation. 59, 218-223 (1995).</li>
<li>Boudjema, K., Jaeck, D., Siméoni, U., Bientz, J., Chenard, M. P., Brunot, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporary+auxiliary+liver+transplantation+for+subacute+liver+failure+in+a+child%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Temporary auxiliary liver transplantation for subacute liver failure in a child.</a> The Lancet. 342, 778-779 (1993).</li>
<li>Chenard-Neu, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation%3A+Regeneration+of+the+native+liver+and+outcome+in+30+patients+with+fulminant+hepatic+failure+-+a+multicenter+European+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation: Regeneration of the native liver and outcome in 30 patients with fulminant hepatic failure - a multicenter European study.</a> Hepatology. 23, 1119-1127 (1996).</li>
<li>Gubernatis, G., Pichlmayr, R., Kemnitz, J., Gratz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+partial+orthotopic+liver%E2%80%93transplantation+%28APOLT%29+for+fulminant+hepatic+failure%3A+first+successful+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary partial orthotopic liver–transplantation (APOLT) for fulminant hepatic failure: first successful case report.</a> World J Surg. 15, 660-666 (1991).</li>
<li>Erhard, J., Lange, R., Giebler, R., Rauen, U., de Groot, H., Eigler, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterialization+of+the+portal+vein+in+orthotopic+and+auxiliary+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Arterialization of the portal vein in orthotopic and auxiliary liver transplantation.</a> Transplantation. 60, 877-879 (1995).</li>
<li>Erhard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+arterialization+of+the+portal+vein+for+acute+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with arterialization of the portal vein for acute hepatic failure.</a> Transpl Int. 11, 266-271 (1998).</li>
<li>Emond, J., Capron-Laudereau, M., Meriggi, F., Bernuau, J., Reynes, M., Houssin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extent+of+Hepatectomy+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Extent of Hepatectomy in the rat.</a> Eur Surg Res. 21, 251-259 (1989).</li>
<li>Mas, A., Rode`s, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fulminant+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Fulminant hepatic failure.</a> Lancet. 349, 1081-1085 (1997).</li>
<li>Terpstra, O. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+grafting%3A+a+new+concept+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver grafting: a new concept in liver transplantation.</a> The Lancet. 342, 758(1993).</li>
<li>Terpstra, O. T., Reuvers, C. B., Schalm, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+heterotopic+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Auxiliary heterotopic liver transplantation.</a> Transplantation. 45, 1003-1007 (1988).</li>
<li>Schleimer, K., Lange, R., Rauen, U., Erhard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+in+acute+liver+failure+in+the+rat+-+an+illustrated+description+of+a+new+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation in acute liver failure in the rat - an illustrated description of a new surgical approach.</a> Langenbecks Arch Surg. 384 (2), 204-208 (1999).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+microcirculation+of+the+heterotopically+transplanted+rat+liver+with+portal+vein+arterialization+depending+on+optimal+stent+diameter%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+Monit%22%5BJournal%5D)">Physiologic microcirculation of the heterotopically transplanted rat liver with portal vein arterialization depending on optimal stent diameter.</a> Med Sci Monit. 28 (BR140-145), (2006).</li>
<li>Hong, H. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+portal+arterialization+with+auxiliary+liver+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hiroshima+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Study of portal arterialization with auxiliary liver in rats.</a> Hiroshima J. Med. Sci. 40, 29-33 (1991).</li>
<li>Higgins, G. M., Anderson, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+pathology+of+the+liver.+I--Restoration+of+the+liver+of+the+white+rat+following+partial+surgical+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Path%22%5BJournal%5D)">Experimental pathology of the liver. I--Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.</a> Arch. Path. 12, 186-202 (1931).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+flow-regulated+portal+vein+arterialization+offers+a+successful+therapeutic+option+in+acute+hepatic+failure--investigations+in+heterotopic+auxiliary+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with flow-regulated portal vein arterialization offers a successful therapeutic option in acute hepatic failure--investigations in heterotopic auxiliary rat liver transplantation.</a> Transpl Int. 19 (7), 581-588 (2006).</li>
<li>Lee, S., Edgington, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Forum%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation in the rat.</a> Surg. Forum. 17, 220-222 (1966).</li>
<li>Hess, F., Willemen, A., Jerusalem, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+in+the+rat%2C+influence+of+the+condition+of+the+recipient%27s+liver+on+the+fate+of+the+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation in the rat, influence of the condition of the recipient's liver on the fate of the graft.</a> Eur. Surg. Res. 9, 270-279 (1977).</li>
<li>Aguirrezabalaga, J., Arnal, F., Marini, M., Centeno, A., Fernandez-Selles, C., Rey, I., Gomez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+liver+transplantation+with+portal+arterialization+in+the+rat%3A+description+of+a+new+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Auxiliary liver transplantation with portal arterialization in the rat: description of a new model.</a> Microsurgery. 22, 21-26 (2002).</li>
<li>Palmes, D., Dietl, K. H., Drews, G., Holzen, J. P., Spiegel, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+partial+orthotopic+liver+transplantation%3A+treatment+of+acute+liver+failure+in+a+new+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Auxiliary partial orthotopic liver transplantation: treatment of acute liver failure in a new rat model.</a> Langenbecks Arch Surg. (386), 534-541 (2002).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+microcirculation+of+a+liver+graft+by+controlled+portal+vein+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Improved microcirculation of a liver graft by controlled portal vein arterialization.</a> J Surg Res. 116 (2), 202-210 (2004).</li>
<li>Schleimer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+hyperperfusion+causes+disturbance+of+microcirculation+and+increased+rate+of+hepatocellular+apoptosis%3A+investigations+in+heterotopic+rat+liver+transplantation+with+portal+vein+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Portal hyperperfusion causes disturbance of microcirculation and increased rate of hepatocellular apoptosis: investigations in heterotopic rat liver transplantation with portal vein arterialization.</a> Transplant Proc. 38 (3), 725-729 (2006).</li>
</ol>

כל המחברים הכריזו לא אינטרסים מתחרים.

השתלת עזר heterotopic הראשונה כבד החולדה תוארה על ידי אל Lee et., 16 ב -1966 אחריו הס. 17 וריד השער של השתל היה anastomosed עם וריד השער של הנמען. במהלך הליך זה, אספקת דם ורידי הפורטל אל כבד הילידים נפגעת. בשנת 1991 הונג ביצעה אלט עם PVA דרך עורק הכסל של הנמען. 13 ללא פורטל מאסיבי זרימת דם התקינה וcongestions סינוסואידה התרחשה. <p class="jove_content" style="...

אי ספיקת כבד חריפה מהווה בעיה חמורה ברפואה קלינית שמובילה לשיעור תמותה של 60-80%. 8 באי ספיקת כבד חריפה, השתלה כבד עזר היא טיפול אלטרנטיבי מבטיח לגשר על השלב האקוטי. כבד הילידים נשאר להתחדש והבא להתחדשות יכולות להיות הופסקו תרופות הדיכוי החיסוני. כתוצאה מכך השתל יהפוך מכולה. עם זאת הטכניקה הניתוחית להשתלת כבד עזר עדיין נדונה. 1-3 בהקשר זה, טרפסטרה דיווחה חוסר המקום לשתל, דם הפורטל לגנוב תופעה ואת הבעיה של גודש וניקוז ורידים. 9-10 וריד השער של התורם היה anastomosed סוף לצד לוריד השער של הנמען. זה הביא פורטל זרימת תחרות בין השתל וכבד הילידים ובפקקו וריד שער. רוב הבעיות הטכניות אלה ניתן להימנע בשימוש בAPOLT-השיטה (orthotopic השתלה של מגזרי עזר). 4 עם זאת שיטה זו מחייבת כריתות נרחבות של שני כבד היליד והשתל. 4 ב -1998, ארהרד וצוות שלו פיתחו את השתלת heterotopic עזר הכבד (אלט) ניצול arterialization פורטל וריד (PVA) (איור 1 ). Hilum ווריד השער של כבד הילידים יכובדו בשימוש בשיטה זו. שחוסך את הנמען מתופעות לוואי לא רצויה כגון פקקת וריד שער ודם פורטל לגנוב תופעה, שעלול להפריע להתאוששות כבד ילידים. בנוסף, אין כריתות כבד נרחבות של הכבד והשתלת ילידים נדרשות לשיטה זו, עם וכתוצאה מכך פחות דימום וכולל המוני parenchymal הכבד שנותר עוד לגישור (שתל) והתחדשות (כבד ילידים). טכניקה זו הראתה מבטיחה תוצאות קליניות ראשוניות. 5-6 המטרה של עבודה ניסויית זה הייתה הפיתוח של טכניקת אלט עם arterialization וריד שער בהחולדה למטרות מחקר (איור 2). בניסויים הראשוניים שלא לקחת בחשבון את זרימת דם הרגולציה של פורטל arterialized וריד, אשר הביאה לגודש של השתל המושתל לאחר reperfusion ודימום מאסיבי מכמוסת הכבד. 11 מאז את זרימת הדם בוריד שער arterialized היה מוסדר על ידי סטנט עם קוטר פנימי של 0.3 מ&quot;מ ואורך של 8 מ&quot;מ. ניסויי פיילוט הראו כי קוטר סטנט של 0.3 מ&quot;מ מניב זרימת דם ממוצעת בוריד שער arterialized שנמצאת בטווח הפיזיולוגי העליון (1.7 +/- 0.4 מ&quot;ל / דקה / משקל כבד ז). 12 התוצאות שלנו ללא זרימת דם רגולציה לתאם עם התוצאות של הונג, שביצעה אלט עם PVA דרך עורק הכסל של הנמען. 13 בניסויים שלו בלי פורטל מאסיבי זרימת דם התקינה וcongestions סינוסואידה התרחשה. המטרה של הווידאו שלנו היא דצעד אחר צעד emonstrate טכניקה זו ne.w הניסיונית כירורגית בחולדה. בטווח הארוך הטכניקה המוצעת ניתן להשתמש במחקרים על התחדשות כבד ותחרות בין הכבד וarterialization וריד שער, hyperperfusion וריד שער ואת זרימת דם רגולציה פורטל.

<table><tbody><tr><td>משי קלוע שחור 7-0&nbsp;</td><td>Ethicon Products</td><td>892100</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 3-0</td><td>Ethicon Products</td><td>J285G</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 4-0</td><td>Ethicon Products</td><td>J284G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 8-0</td><td>Ethicon Products</td><td>1714G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 10-0 Ethicon</td><td>Products</td><td>7770G</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix Safety 14G</td><td>B Braun</td><td>2758853</td><td></td></tr><tr><td>Vasofix Safety 20G</td><td>B Braun</td><td>2758818</td><td></td></tr><tr><td>2 קטטר צרפתי (0.012 אינץ'/0.3 מ"מ קוטר חיצוני x 0.025 אינץ'/0.6 מ"מ קוטר חיצוני) x 24 אינץ'/60 ס"מ קטטר פוליאוריתן</td><td>Access Technologies, חטיבה של Norfolk Medical, Inc., אילינוי, ארה"ב</td> פתרון <td>CNC-2P</td><td></td></tr><tr><td>HTK, הקוסטודיול</td><td>ד"ר פרנץ קאנד אומל; hler Chemie GmbH, Alsbach-H&auml; hnlein, גרמניה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>איזופלואורן 5</td><td></td><td></td>% <td>כל ג'נריקון</td></tr><tr><td>הפרין</td><td></td><td></td><td>כל ג'נריקון</td></tr><tr><td>0.9% מי</td><td></td><td></td> מלח <td>כל ג'נריקון</td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td></td><td></td><td>כל ג'נריקון</td></tr></tbody></table>

heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד arterialization בכישלון חריף כבדית

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

בהשתלת כבד חריפה אי ספיקת כבד עזר הוא גישה חלופית מעניינת. המטרה היא לספק תמיכה זמנית עד הכבד האם של אי שנוצר מחדש. 1-3 APOLT-השיטה, השתלת orthotopic של segments- העזר מסבה את רוב הבעיות הטכניות. עם זאת שיטה זו מחייבת כריתות נרחבות של שני כבד היליד והשתל. 4 ב -1998, ארהרד פיתח את השתלת heterotopic עזר הכבד (אלט) ניצול arterialization פורטל וריד (PVA) (איור 1). טכניקה זו הראתה מבטיחה תוצאות קליניות ראשוניות. 5-6 פיתחנו עצירה-טכניקה עם PVA מוסדר זרימה בחולדה כדי לבחון את ההשפעה של PVA מוסדר זרימה על מורפולוגיה שתל ותפקוד (איור 2). שתל כבד המופחת ל30% מגודלו המקורי, היה מושתל heterotopically באזור הכליות תקין של הנמען לאחר explantation של הכליה הימנית.60; וריד caval אינפרא כבד של השתל היה anastomosed עם וריד caval infrahepatic של הנמען. Arterialization של וריד השער של התורם בוצע באמצעות עורק הכליה הימני של הנמען עם טכניקת סטנט. זרימת דם הרגולציה של וריד שער arterialized הושגה עם השימוש בסטנט עם קוטר פנימי של 0.3 מ&quot;מ. תא מטען צליאק של השתל היה הסוף לצד anastomosed עם אב העורקים של הנמען ואת צינור המרה היה מושתל לתוך התריסריון. כריתת סיכום ביניים של כבד הילידים בוצעה כדי לגרום לאי ספיקת כבד חריפה. 7 באופן זה 112 השתלות בוצעו. שיעור ההישרדות סביב הניתוח היה 90% ושיעור ההישרדות של 6 השבועות היה 80%. שישה שבועות לאחר הניתוח, בכבד הילידים מחדש, מראה עלייה במשקל מ2.3 ± 0.8 גרם ל9.8 ± 1 גרם. בשלב זה, במשקל של שתל ירד מ 3.3 ± 0.8 גרם ל2.3 ± 0.8 גרם. </p&gt; אנחנו הצלחנו להשיג תוצאות לטווח ארוך מבטיחות במונחים של מורפולוגיה שתל ותפקוד. אלט עם PVA מוסדר זרימה מהימנה גשרים אי ספיקת כבד חריפה עד כבד הילידים מחדש.

משך הממוצע של ההשתלה היה על 150 דקות. זמן איסכמיה הקר היה 64 +/- 7 דקות, זמן איסכמיה החם היה פחות מ 25 דקות. שיעור ההישרדות סביב הניתוח היה 90% ושיעור ההישרדות של 6 השבועות היה 80%. אובדן 20% היה עקב דלקת הצפק בגלל הנקע בסטנט ודליפת מרה (ארבעה בעלי חיים) בשבוע שלאחר הניתוח הראשון ובשל דלקת ריאות, מורסה תוך הבטן וileus (שבעה בעלי חיים) בחמשת השבועות הבאים. בעלי החיים ששרדו היו במצב כללי מצוין. <p class="jove_c...

השתלה כבד עזר מספקת תמיכה זמנית בכשל כבד אקוטי, עד התחדשות של הכבד הכושל. השתלת heterotopic עזר הכבד (אלט) עם arterialization וריד שער (PVA) הופכת את תפקוד כבד מספיק. פיתחנו טכניקה דומה בעכברים, כדי לבחון את ההשפעה של arterialization וריד שער על המורפולוגיה והתפקוד של השתל.

Heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד Arterialization בכישלון חריף כבדית

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

כשל כבדי חריף מהווה בעיה חמורה ברפואה הקלינית המובילה לשיעור תמותה של 60 עד 80% במקרים של כשל כבדי חריף. השתלת כבד עזר היא טיפול חלופי מבטיח. לאחר התחדשות הכבד המקורי, ניתן להפסיק את הדיכוי החיסוני ואת הש Transplant הכבדי ניתן להוציא או להותיר להתנוון.עם זאת, הטכניקה הניתוחית להשתלת כבד עזר היא שנויה במחלוקת. שיטת ה-APOL, הכוללת השתלה אורתוטופית של פלחים משלימים, מונעת את מרבית הבעיות הטכניות שעלולות להתעורר. עם זאת, שיטה זו מחייבת כריתות נרחבות הן של הכבד המקורי והן של הש Transplant.בשנת 1998, Erhart וצוותו יזמו את השתלת הכבד העזר ההטרוטופית המכונה halt. באמצעות שימוש בערקום וריד השער (portal vein arterial) המכונה PVA, טכניקה זו הראתה תוצאות קליניות ראשוניות מבטיחות. פיתחנו טכניקת halt עם זרימה מווסתת של וריד השער בחתול למטרות מחקר. סרטון זה מדגים בפירוט טכניקה ניסיונית חדשה זו; בוצעו ניתוחים ב-224 חולדות זכר מסוג Syngen Louis במשקל 250 עד 350 גרם.ניתוחי התורם והמקבל בוצעו תחת הרדמה בשאיפה. הרדמה כללית של בעלי החיים הושרתה באמצעות isoflurane בתוך תיבת פלקסיגלאס המחוברת למכונת ההרדמה בקצב מד זרימת חמצן של one liter per minute. במאייד היה ריכוז של 5% isoflurane.ההרדמה נשמרה בריכוז של 1.5%. קבלנו אישור מוועדת האתיקה המקומית עבור כל הניסויים, אשר בוצעו בהתאם להנחיות להגנה על בעלי חיים. במהלך הפרוצדורה הבאה, וריד השער (portal vein) הופך לעורקי באמצעות העורק הכליתי הימני.זרימת הדם בווריד הפורטלי שעבר ארטריאליזציה (Arterialized portal vein) מוסדרת על ידי סטנט בעל קוטר פנימי של 0.3 מילימטרים ואורך של שמונה מילימטרים. ניסויי פיילוט הראו כי קוטר סטנט של 0.3 מילימטרים מניב זרימת דם ממוצעת בווריד הפורטלי שעבר ארטריאליזציה, שנמצאת בטווח הפיזיולוגי העליון.המיקרוסירקולציה הכבדית מוצגת באמצעות דימיון OPS, טכניקת ספקטרוסקופיית השתקפה המאפשרת תצפית בזמן אמת על המיקרוסירקולציה הכבדית in vivo. ללא שימוש בחומרי ניגוד ותחת טבילה בתמיסת סלין פיזיולוגית, הפרובה ממוקמת בעדינות על פני השטח של האונה הימנית של הכבד. בשלב זה חשוב להימנע מדחיסה של הפרנכימה של הכבד.ניתוח התור מודגם תחילה לאחר לפרוטומיה חצצית. האונה הצדדית השמאלית והאונה המרכזית של השבת נכרתות כפי שתיאר Higgins. כאן ניתן לראות את הכנת הרצועה הכבדית-טחונית (Hepato duodenal ligament).ראשית קושרים את תעלת המרה כדי להשרות גודש והרחבה של תעלת המרה הקטנה. את הווריד והעורק הגסטרו-דודנלי קושרים וחותכים. לאחר מכן מבודדים את גזע ה-CIC, את עורק הכבד המשותף, את עורק הקיבה השמאלי ואת עורק הטחול.העורק הגסטרי השמאלי והעורק הספלני נחתכים. כאן ניתן לראות את גזע ה-CIC וכאן את העורק ההפטי המשותף. צינור המרה הגבהיר נחתך, וסטנט במידה 20 gauge מוחדר לתוכו.מיקום הסטנט חייב להבטיח את ניקוז כל מערכת צינורות המרה של הכבד. צינור המרה נחתך באופן דיסטלי לסטנט. המקטע התת-כבדי של וריד הנישאת מבודל ממש מעל הווריד הרנלי הימני.כאן ניתן לראות את ה-tus לאחר ההכנה, לאחר ליגציה של ה-aorta מעל ה-celiac trunk. הוריד הפורטלי (portal vein) מהודק ונחתך. כעת מוכנס קטטר פופוזיה והפופוזיה מבוצעת עם 30 milliliters של תמיסת histidine tryptophan gito glu.הסרעפת והוריד הצהוב העליון (suprahepatic vena cava) נחתכים כדי לאפשר לנזילות לזרום החוצה. גזע ה-CIC יחד עם טלאה אאורטלית מוצאים ונשטפים בתמיסת histidine tryptophan ketoglutarate. הווריד הצהוב התחתון (infrahepatic vena cava) נחתך ממש מעל הווריד הרנלי הימני.לאחר מכן, סטנט בקוטר של 0.3 מילימטרים מוחדר לווריד הפורטלי ומקובע באמצעות ליגטורה. הווריד הפורטלי נחתך דיסטלית לסטנט. כאן ניתן לראות את צינור המרה, הווריד הפורטלי, גזע הצליאק והווריד הנבוב התת-כבדי.לאחר קשירת הווריד הנבוב העילי (supra hepatic caval vein), הוא נכרת יחד עם שוליים של הסרעפת. השתל הוצא מהגוף ונשמר בתמיסת histidine tryptophan ketoglutarate בטמפרטורה של ארבע מעלות צלזיוס בתוך שקית פלסטיק על קרח. תפרים מוצבים בווריד הנבוב התחתון (infra hepatic caval vein). בשלב הבא מוצגת הפעולה המבוצעת במקבל.לאחר לפרוטומיה והכנה, מבודדים תחילה את הוריד הנבוב התת-כבדי ואת העורק הכליתי הימני. לאחר מכן, קושרים וחוצים את השופכן. לאחר סגירת העורק הכליתי הימני בעזרת תסביך במקורו, קושרים את הווריד הכליתי הימני.לאחר חיתוך של שני כלי הדם הכליתיים, מבוצעת נפריקטומיה. לאחר מכן, העורק הכליתי הימני מקוצר ונשטף בתמיסת סלין עם הפרין, לאחר סגירה (clamping) פרוקסימלית ודיסטלית של הווריד התת-כבדי (infrahepatic cava vein). הווריד הכליתי הימני נחתך פרוקסימלית לליגטורה.בדרך זו, נוצר חלל אובלי בוריד ה-infra hepatic cable. השתל ממוקם מתחת לכבד המקורי. וריד ה-infra hepatic cable של התורד מאנוסטמוז מקצה לצד לוריד ה-cable של המקבל באמצעות תפר רץ של ethylene שמונה אפס.לאחר שטיפה בתמיסת סלין עם הפרין, מוחדר הסטנט מהווריד הפורטלי אל העורק הכליתי הימני. הווריד הפורטלי והעורק הכליתי מחוברים באמצעות שתי תפרים. שימוש בסטנט בעל קוטר פנימי של 0.3 מילימטרים ואורך של שמונה מילימטרים מאפשר אנסטומוזה עורקית-ורידית עם קצבי זרימה מבוקרים וסטנדרטיים.הסטנט המקשר מקובע בעורק הכליה באמצעות ליגטורה כדי לאפשר רפרפוזיה. תחילה מסירה את התסמין העורקי, ולאחריו את שני התסמינים הוורידיים. כעת ניתן לראות את המיקרו-סירקולציה ברגע תחילת הרפרפוזיה, החל מהכלים הבין-סוגייתיים, בהמשך לאורך הסינואידים והגעה לווריד המרכזי של המבנה הכבדי.כאן ניתן לראות כעת את הש transplanted שחודש בו זרימת הדם, את הווריד הפורטלי שהפך לעורק ואת צינור המרה. האורטה התת-כלייתית מוכנה, ולאחר מכן נסגרת באמצעות תפסנית ונחתכת. אנסטומוזה מקצה לצד בין האורטה לבין גזע הצליאק, תוך שימוש בטלאי אאורטלי, מבוצעת באמצעות תפר רץ של ethylene 10 O.לאחר ביצוע תפר purse string, נחתך חתך קטן בדופן התריסריון. לאחר מכן, מוחדר תעלת המרה עם הסטנט אל תוך התריסריון ותפר ה-purse string מהודק. לבסוף, התריסריון ותעלת המרה מקובעים זה לזה בחוזקה באמצעות שני תפרים.כאן ניתן לראות את השתל שעבר רפרפוזיה ואת הכבד המקורי שעבר כריתה חלקית כדי לדמות אי-ספיקת כבד חריפה. בעלי החיים קיבלו לאחר הניתוח זריקות תת-עוריות של buprenorphine בכל שמונה עד 12 שעות, במשך יומיים.שיעור ההישרדות הפרי-אופרטיבי היה 90% ושיעור ההישרדות לאחר שבועות שישה היה 80%. במהלך השבוע הראשון לאחר הניתוח, ארבעה חולדות מתו מפריטוניטיס עקב תזוזה של התומכן (stent) ודליפה של מרה. בנוסף, שבע חולדות מתו מפנאומוניה, מכלסום תוך-בטני או מאילאוס. בעלי החיים ששרדו היו במצב כללי מצוין.ששה שבועות לאחר הניתוח, פרמטרי סינתזת הכבד היו בטווח הנורמה. כאן אתם רואים את המדענים ששה שבועות לאחר השתלת כבד עזר הטרוטופית בחולדה עם חיבור עורקי של הווריד הפורטלי. ששה שבועות לאחר הניתוח, הכבד המקורי התחדש והראה עלייה במשקל מ-2.3 פלוס או מינוס 0.8 גרם ל-9.8 פלוס או מינוס 1 גרם.בשלב זה, ה-GRAT היה אטרופי ומשקל הכבד ירד מ-3.3 פלוס או מינוס 0.8 גרם ל-2.3 פלוס או מינוס 0.8 גרם. המשקל הכולל של שני הכבדים היה בתוך היחס הפיזיולוגי של משקל הכבד למשקל הגוף בצביעה היסטופתולוגית של hematin eoin שישה שבועות לאחר העצירה. נצפו הפטוציטים תקינים ללא בצקת או דגנרציה שומנית.כל הגרפים הראו פרוליפרציה קלה של מרה, תעלות מרה וכולנגיטיס עקב היווצרות רסיסי מרה (sludge). רק בשני גרפים ניתן היה להבחין בנמק של תאי כבד (hepatocellular necrosis) בדרגה נמוכה ב-CTUs. שימוש בסטנט בעל קוטר פנימי של 0.3 millimeters ואורך של שמונה millimeters מניב זרימת דם פורטלית ממוצעת לאחר רפרפוזיה של הווריד הפורטלי שעבר ארטריזציה, הנמצאת בטווח הפיזיולוגי העליון.ניקוז דרכי המרה הוא נקודת התורפה של השתלת כבד. בהשתלת כבד בחולדות, המקלטים מתים לעיתים קרובות במהלך הימים הראשונים לאחר הניתוח עקב דליפת מרה ודלקפת פריטונית. אנו מבצעים כולדוכוסטומי באמצעות סטנט, תפר מסוג purse-string, ושני תפרי עיגון נוספים המבטיחים הגנה מפני דליפות וניתוק.באמצעות טכניקה זו, הסיבוכים המרהיליים הופחתו ל-4% במחקר הנוכחי בוצעה כריתה סב-טוטאלית של כבד טבעי. אנו משתמשים בשיטה זו, שתוארה לראשונה על ידי amond, כדי להשרות כשל כבדי חריף. בניגוד לשימוש בחומרים הפטו-טוקסיים, שיטה זו היא סטנדרטית ואינה מראה תופעות לוואי על מערכות איברים אחרות או על הש Transplant.בניגוד להשתלת כבד אורתוטופית, אין כאן שלב כבד סופי. במהלך השתלת כבד הטרוטופית, ניתן לבצע את ה-Anas ללא לחץ של זמן. יתרה מכך, במיקום ההטרוטופי, אין הפרעה מצד הסרעפת הנעה.יתרה מכך, וריד הפורטה של המקבל אינו נסגר, ובכך נמנעת גודש ורידי של המעי הדק, הטחול, הלבלב והקיבה. באמצעות טכניקה זו, הצלחנו להשיג תוצאים מבטיחים לטווח ארוך במונחים של השתלה עזר הטרוטופית של כבד חולדה עם זרימה מווסתת בווריד הפורטה, הן מבחינת המורפולוגיה והן מבחינת התפקוד של השתל. השתלה עזר של כבד חולדה עם זרימה מווסתת בווריד הפורטה וב artistry היא טכניקה חדשנית המציעה מעט מקורות לשגיאה והיא קלה ללמידה.טכניקה זו מתאימה לחקר ההשפעה של וריד השער, היפרפרפוזיה עורקית של הכבד ובקרת זרימת הדם על התפקוד והמורפולוגיה של המיקרוסירקולציה הכבדית. מודל זה מאפשר מחקרים עתידיים על רגנרציה של הכבד בתחרות בין כבדים.

heterotopic-auxiliary-rat-liver-transplantation-with-flow-regulated

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מציגים גרסה לא קל ליצור בטכניקה של שתי השרוול קלאסית השתלת כבד orthotopic בחולדה.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

השתלת הכבד orthotopic בחולדות היא מודל ניסיון הכרחי למחקר ביו. כאן אנו מציגים הניתוחים שלנו להשתלת כבד חולדת orthotopic עם שחזור עורק כבד באמצעות 50% שתל חלקי.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

מחקר ניסיוני בבעלי חיים ממלא תפקיד מרכזי בפיתוח פרקטיקת השתלות קליניות. מודל השתלת הכבד האורתוטופי של חזיר (OLTx) דומה מאוד למצבים אנושיים ומשמש לעתים קרובות במחקר קליני. הפרוטוקול הבא מכיל את כל המידע עבור מודל OLTx חזירי אמין המשתמש בשאנט פורטו-קוואל-צווארי פעיל.

טכניקה של רכש כבד בשר חזירים והשתלות Orthotopic באמצעות פורטו-caval אנט פעיל

אנו מתארים טכניקה חדשה להשתלת לב-ריאה בטנית הטרוטופית (HAHLT) בחולדות. תצורת ההשתלה מביאה לזרימת שתל טעונה חלקית, המאפשרת הערכה תפקודית ישירה. מודל זה עשוי לשמש למחקרים חריפים או כרוניים של תפקוד ומצב חיסוני של השתל המושתל.

עכברוש Heterotopic בטן לב / השתלת ריאה בודדת בתצורה טעונה נפח

כאן, מוצג פרוטוקול מעורבים השתלת כבד חלקית עכברוש arterialized מחדש. באופן ספציפי, 70% הכבד היה resected ויוו באמצעות טכניקת מעודכן של hepatectomy מונחה כלי השיט. עורק הכבד שוחזר בצורה הקצה לצד. הטכניקה השרוול שונה כדי לקצר את זמן השקה של infrahepatic את הווריד הנבוב.

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

המטרה של מחקר זה היא לשנות את מודל השתלת כבד אורתוטופית חולדה כדי לייצג טוב יותר השתלת כבד אנושי ולשפר את הישרדות הנמען. השיטה המוצגת מחדש את זרימת העורקים הכבדים על ידי חיבור עורק הכבד המשותף של הכבד התורם לעורק הכבד התקין של הכבד הנמען.

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

מאמר זה מספק תיאור מפורט של איך לבנות מודל של בעלי חיים של השלב האנהפטי (איסכמיה בכבד) בחולדות כדי להקל על מחקר בסיסי לתוך פגיעה איסכמיה-reperfusion לאחר השתלת כבד.

פגיעה באיבר איסכמיה-רפרופוזיה על ידי הדמיית שינויים המודינמיים במודל השתלת כבד עכברוש

פרוטוקול השתלת כבד עזר הטרוטופי של חולדות המתואר כאן מציע כלי מחקר מעשי לחקר מנגנונים של דחיית השתלת כבד. מודל זה מסייע להקל על המכשולים הכירורגיים והלחץ של בעלי חיים של השתלת כבד אורתוטופית בחולדות.

מודל השתלת חולדה בכבד שלם עזר הטרוטופי תוך שימוש בכבד כבד למחקרי דחיית אלוגרפט

כתב היד מתארת ​​את הצעדים הנדרשים כדי לבצע את השתלת לב heterotopic בעכבר.

טכניקת השתלות Murine Heterotopic לב

למד השתלת כבד עזר הטרוטופית עם זרימה מוסדרת בעורבים לטיפול בכישלון כבדי חריף. שיטה זו מאפשרת למחקרים לבחון התחדשות כבדית ותפקוד שתל.

Heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד Arterialization בכישלון חריף כבדית

גלה סרטונים נוספים