Name: אנושי עכבר מודל ללמוד זיהומים חיידקיים מיקוד microvasculature (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-04-01T15:45:00.000+00:00
Duration: 11 min 40 s
Description: למד את מנגנוני ההדבקה של Neisseria meningitidis בכלי דם אנושיים באמצעות מודל עכבר מואנש עם שתל עור אנושי. שיטה זו מאפשרת תצפית ישירה של פתולוגיה קלינית ונזק כלי דם בזיהומים מנינגוקוקליים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות לכל החברים במעבדה Dumenil, במיוחד סלקתי סילבה לקריאה ביקורתית של כתב היד. מחלקת הכירורגית בHôpital Europeen ז&#39;ורז&#39; פומפידו-(HEGP), ד&quot;ר דוד Maladry. מיכאל Hivelin וד&quot;ר פטריק Bruneval, פתולוגיה המחלקה בHEGP. מתקן בעלי החיים בPARCC, בראשותו של אליזבת איק. עבודה זו נתמכה על ידי סוכנויות המענק הבאות: אחוות מארי קירי IEF לא. 273,223 (KM), ATIP-Avenir גרנט מINSERM, מענק ציוד CODDIM (Ile de France אזור), FRM (Fondation לשפוך la משוכלל ונדיר médicale) מענק ציוד, המעבדה IBEID של קונסורציום מצוינות, ANR (סוכנות הידיעות Nationale לשפוך משוכלל ונדיר לה) מענק &quot; באגס-בזרימה &quot;. היו הממנים שום תפקיד בעיצוב מחקר, איסוף נתונים וניתוח, החלטה לפרסם, או הכנה של כתב היד.

<ol><li>Davis, C. E., Arnold, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+meningococcal+endotoxin+in+Meningococcal+purpura%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Role of meningococcal endotoxin in Meningococcal purpura.</a> J. Exp. Med. 140, 159-171 (1974).</li>
<li>Mairey, E., et al. Cerebral microcirculation shear stress levels determine Neisseria meningitidis attachment sites along the blood-brain barrier. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMairey%2C+E+%22J.+Exp.+Med%22">J. Exp. Med</a>. 203, 1939-1950 (2006).</li>
<li>Brandtzaeg, P., van Deuren, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+and+pathogenesis+of+meningococcal+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Classification and pathogenesis of meningococcal infections.</a> Methods Mol. Biol. 799, 21-35 (2012).</li>
<li>Guarner, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+and+diagnosis+of+human+meningococcal+disease+using+immunohistochemical+and+PCR+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis and diagnosis of human meningococcal disease using immunohistochemical and PCR assays.</a> Am. J. Clin. Pathol. 122, 754-764 (2004).</li>
<li>Hill, W. R., Kinney, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cutaneous+lesions+in+acute+meningococcemia%3B+a+clinical+and+pathologic+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Med.+Assoc%22%5BJournal%5D)">The cutaneous lesions in acute meningococcemia; a clinical and pathologic study.</a> J. Am. Med. Assoc. 134, 513-518 (1947).</li>
<li>Capecchi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neisseria+meningitidis+NadA+is+a+new+invasin+which+promotes+bacterial+adhesion+to+and+penetration+into+human+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Neisseria meningitidis NadA is a new invasin which promotes bacterial adhesion to and penetration into human epithelial cells.</a> Mol. Microbiol. 55, 687-698 (2005).</li>
<li>Merz, A. J., Enns, C. A., So, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+IV+pili+of+pathogenic+Neisseriae+elicit+cortical+plaque+formation+in+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Type IV pili of pathogenic Neisseriae elicit cortical plaque formation in epithelial cells.</a> Mol. Microbiol. 32, 1316-1332 (1999).</li>
<li>Morand, P. C., Tattevin, P., Eugene, E., Beretti, J. L., Nassif, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adhesive+property+of+the+type+IV+pilus-associated+component+PilC1+of+pathogenic+Neisseria+is+supported+by+the+conformational+structure+of+the+N-terminal+part+of+the+molecule%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The adhesive property of the type IV pilus-associated component PilC1 of pathogenic Neisseria is supported by the conformational structure of the N-terminal part of the molecule.</a> Mol. Microbiol. 40, 846-856 (2001).</li>
<li>Taha, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neisseria+meningitidis+induces+the+expression+of+the+TNF-alpha+gene+in+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">Neisseria meningitidis induces the expression of the TNF-alpha gene in endothelial cells.</a> Cytokine. 12, 21-25 (2000).</li>
<li>Kirchner, M., Meyer, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+PilC+adhesin+of+the+Neisseria+type+IV+pilus-binding+specificities+and+new+insights+into+the+nature+of+the+host+cell+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The PilC adhesin of the Neisseria type IV pilus-binding specificities and new insights into the nature of the host cell receptor.</a> Mol. Microbiol. 56, 945-957 (2005).</li>
<li>Mikaty, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+bacterial+pathogen+induces+host+cell+surface+reorganization+to+resist+shear+stress%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Extracellular bacterial pathogen induces host cell surface reorganization to resist shear stress.</a> PLoS Pathog. 5, (2009).</li>
<li>Johansson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD46+in+meningococcal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">CD46 in meningococcal disease.</a> Science. 301, 373-375 (2003).</li>
<li>Kirchner, M., Heuer, D., Meyer, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD46-independent+binding+of+Neisserial+type+IV+pili+and+the+major+pilus+adhesin%2C+PilC%2C+to+human+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">CD46-independent binding of Neisserial type IV pili and the major pilus adhesin, PilC, to human epithelial cells.</a> Infect. Immun. 73, 3072-3082 (2005).</li>
<li>Noinaj, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+basis+for+iron+piracy+by+pathogenic+Neisseria%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural basis for iron piracy by pathogenic Neisseria.</a> Nature. 483, 53-58 (2012).</li>
<li>Schryvers, A. B., Gonzalez, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptors+for+transferrin+in+pathogenic+bacteria+are+specific+for+the+host%27s+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Receptors for transferrin in pathogenic bacteria are specific for the host's protein.</a> Can. J. Microbiol. 36, 145-147 (1990).</li>
<li>Oftung, F., Lovik, M., Andersen, S. R., Froholm, L. O., Bjune, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+utilising+human+transferrin+to+study+protection+against+Neisseria+meningitidis+serogroup+B+induced+by+outer+membrane+vesicle+vaccination%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Immunol.+Med.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A mouse model utilising human transferrin to study protection against Neisseria meningitidis serogroup B induced by outer membrane vesicle vaccination.</a> FEMS Immunol. Med. Microbiol. 26, 75-82 (1999).</li>
<li>Zarantonelli, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+mice+expressing+human+transferrin+as+a+model+for+meningococcal+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Transgenic mice expressing human transferrin as a model for meningococcal infection.</a> Infect. Immun. 75, 5609-5614 (2007).</li>
<li>Melican, K., Michea Veloso, P., Martin, T., Bruneval, P., Dumenil, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adhesion+of+Neisseria+meningitidis+to+dermal+vessels+leads+to+local+vascular+damage+and+purpura+in+a+humanized+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Adhesion of Neisseria meningitidis to dermal vessels leads to local vascular damage and purpura in a humanized mouse model.</a> PLoS Pathog. 9, (2013).</li>
<li>Murray, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+T-cell-mediated+destruction+of+allogeneic+dermal+microvessels+in+a+severe+combined+immunodeficient+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Human T-cell-mediated destruction of allogeneic dermal microvessels in a severe combined immunodeficient mouse.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 91, 9146-9150 (1994).</li>
<li>Nassif, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antigenic+variation+of+pilin+regulates+adhesion+of+Neisseria+meningitidis+to+human+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Antigenic variation of pilin regulates adhesion of Neisseria meningitidis to human epithelial cells.</a> Mol. Microbiol. 8, 719-725 (1993).</li>
<li>Geoffroy, M. C., Floquet, S., Metais, A., Nassif, X., Pelicic, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+analysis+of+the+meningococcus+genome+by+gene+disruption%3A+resistance+to+complement-mediated+lysis%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Res%22%5BJournal%5D)">Large-scale analysis of the meningococcus genome by gene disruption: resistance to complement-mediated lysis.</a> Genome Res. 13, 391-398 (2003).</li>
<li>Ho, M., Hickey, M. J., Murray, A. G., Andonegui, G., Kubes, P. Visualization of Plasmodium falciparum-endothelium interactions in human microvasculature: mimicry of leukocyte recruitment. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHo%2C+M+%22J.+Exp.+Med%22">J. Exp. Med</a>. 192, 1205-1211 (2000).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שום אינטרסים כלכליים מתחרים.

מודלים של בעלי החיים חשובים באופן קריטי למחקר פתוגנזה של חיידקים. אי אפשר לחקות את הסביבה vivo בתרבית תאים באופן מלא וזה הופך להיות ברור כי האינטראקציה המאכסן לפתוגן מושפעת מגורמים דינמיים רבים. הייחוד האנושי של כמה פתוגנים חשובים קליני, כגון נ meningitidis, HIV, HCV, Plasmodium falciparum, חיידקי ליסטריה, וסלמונלה typhi הגביל את השימוש במודלי vivo לזיהומים אלה. עם זאת, כפי שאנו מתחילים להבין שצעדי זיהומיות מעורבים בסגולי, מודלים אנושיים מפותחים. הפרוטוקול המתואר כאן הוא הפגנה של זה עם ההקדמה של microvessels האנושי בעכברים, המאפשר נרחב בזיהום vivo עם נ &#39; meningitidis, וכתוצאה מכך לנזק בכלי דם ולעתים ההתפתחות של פריחות purpuric. שימוש במודל זה,אנחנו כבר יכולים להגדיר שמאפייני ההדבקה של פריון הכולל מעורבים בהתישבות בכלי הדם בvivo באמצעות מוטציות בקטריאלי וכי הנזק בכלי הדם מופחת בהיעדר ההידבקות 18. בעבר, מוצרי חיידקים במחזור היו מעורבים בנזק הזה, אבל התוצאות שלנו מצביעות על תפקיד מכריע בהדבקה מקומית וקולוניזציה של כלי דם. זו פותחת אפשרויות חדשות לפיתוח של מטרות טיפול חדשני. אם הידבקות של חיידקים פתוגניים יכולה להיחסם pharmaceutically זה אולי יכול למנוע ההתפתחות של נגעי עור ולהוביל לתוצאות טובות יותר עבור ניצולי קרום מוח במונחים של נמק רקמות, הטרייה וקטיעות. העבודה הוכיחה גם את המורכבות של הזיהום ואת מעורבותם של התגובה החיסונית ומפל קרישה. זיהינו איתות ציטוקינים אדם בסרום של עכברים נגועים למרות הכמות הקטנה יחסית של האנדותל הווה האנושי 18.זה היה רמז לתגובת ציטוקינים משמעותי, יחד עם החדירה של אוכלוסיות תאים חיסוניים עכבר לאזור. מודלים של בעלי חיים כמובן לא יכולים לשכפל באופן מלא מחלות של בני אדם וכל התוצאות זכו מהם יש לקחת בחשבון עם זה בחשבון. לדוגמא, במודל זה הדם ותאים במחזור הם ממוצא עכבר ולא ניתן לשלול כי הם עשויים להתנהג באופן שונה לתאים אנושיים. יתרון של זה עם זאת, כפי שמודגם בפרסום האחרון שלנו 18, הוא היכולת להבחין שמקורו איתות מהאנדותל האנושי מזה של תאי עכבר במחזור. רקע החיסון של העכברים משמשים במודל זה גם יאפשר את העברת allogenic של אוכלוסיות תאי חיסון אנושיות, והוסיף היבט &#39;האנשה&#39; נוסף. רקע החיסון של העכברים עשוי עם זאת להסוות תפקיד לנ&quot;ח, T או תאי B, אשר כולם חסרים או פגום במודל זה. שור יחסיתזמן t (24hr) המשמש במודל זה בעיקר נוגע לתגובה המולדת, אך לזיהומים לטווח ארוך והפיתוח של אפשרויות אחרות חסינות ייתכן שיצטרך להיחקר. העור הוא אתר זיהום חשוב לנ meningitidis אלא שיש כמות קטנה יחסית של כלי אנושיים גם אומר שחיוץ הנתונים לזיהום מערכתי הכולל איברים רבים הוא קשה. בעוד מודל זה מאפשר לחקר התפתחות נגע עורי, צעדים חשובים של זיהום קרום המוח כגון מעבר אפיתל ודם למוח אינם כלולים. יש צורך בפיתוח נוסף של המודלים אנושיים האלה כדי לטפל בהיבטים שונים של זיהום. עם זאת מודל זה מציע פוטנציאל גדול לפתוגנים רבים אדם ספציפיים, במיוחד אלה המתמקדים בכלי הדם.

אלח דם קרום המוח הוא זיהום בדם נולד לעתים קרובות קטלני הנגרם על ידי meningitidis Neisseria פתוגן החיידקים. חולי אלח דם קרום מוח לעתים קרובות בהווה עם פריחה petechial או purpuric על העור שלהם שהעבר היה קשור להרס של כלי דם נגרמים על ידי חיידקים במחזור ומוצרי חיידקי 1. ביופסיות עור של חולים קליניים מראות חיידקים הקשורים microvessels, לעתים קרובות ממלאים את כלי 2. מלבד דליפת חיידקים, פקקת נרחב, קרישה, גודש כלי דם ונראה באזורי purpuric 3-5. נזק בכלי דם זה יכול להוביל לנימק נרחב של העור ורקמות הסובבות, וכתוצאה מהטריה ואפילו קטיעה בניצולי קרום מוח. הבנה כיצד זיהום גורם לניזק בכלי דם זה חשוב כדי לייעל את אסטרטגיות מניעה וטיפול. רוב המחקר על אלח דם קרום המוח שבוצע במבחנה עלשורות תאים אנושיות בשל הייחוד האנושי של נ &#39; meningitidis. היבטים של זיהום רבים כבר למדו במבחנה כולל הידבקות חיידקים, תגובת תא מארחת, כמו גם תגובת ציטוקינים 6-9. פילי סוג IV (פריון כולל) היו מעורבים כאברון הידבקות הגדול לנ &#39; meningitidis משני תאי אפיתל ואנדותל 10. זה גם הוכח שהידבקות של נ &#39; meningitidis לארח תאים הוא מאמץ גזירה תלוי ולכן הוא חשב להיות קשור לשיעורי זרימת דם בנימי הדם 11. הדבר מצביע על הלחצים הדינמיים החיידקים להתמודד in vivo הם קריטיים להיווצרות מחלה. זה אולם קשה מאוד למודל המיקרו של כלי דם קטנים במבחנה. קולט ההידבקות לNeisseria הפריון כולל עדיין אינו ידוע, ולכן לא ניתן בחזון אסטרטגיות לדפוק בלהשיג הידבקות חיידקים במודל חיה בשלב זה. CD46 הוצע להיות קולט הפריון כולל ובעלי החיים מהונדסים יוצרו לפעול כמודלים עכבר. עם זאת, זיהום בבעלי החיים אלה אינו מוביל לזיהום נרחב או לפריחת 12,13 פיתוח. מודלים של בעלי חיים אחרים, שתוארו להיבט קטרמיה של זיהום Neisseria לקחת בחשבון את העדפת החיידקים לtransferrin אנושי כמקור ברזל 14,15. כך או להשלים transferrin אדם או להביע אותו מתוצאות transgene בעומס חיידקים גדל בזרם הדם על פני תקופת זמן ממושכת, אבל מודל זה לא מראה הידבקות חיידקים או התפתחות הפריחה 16,17. בפרוטוקול זה, אנו מתארים מודל עכבר אנושי שבו עור אדם, כולל נימי דם עורי, הוא הושתל על עכברי מדוכאי חיסון 18,19. התוצאה היא כלי אנושי פונקציונלי, perfused עם מחזור העכבר. , מ &#39;בשילוב עם תוספי transferrin האנושי הזהאודל מהווה לפחות שני ההיבטים הספציפיים האדם של נ &#39; meningitidis, כלומר האנדותל אנושי וtransferrin אדם, בסביבה בvivo. נ meningitidis הציג לווריד למודל זה לדבוק במיוחד כדי האנדותל האנושי, ייצור פתולוגיה כי הוא דומה למה שדווח בחולים קליניים, כוללים נזק בכלי דם והתפתחות הפריחה purpuric 18.

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Gibco Invitrogen</td><td>31885-023</td><td></td></tr><tr><td>פוספט חוצץ מלח</td><td>Gibco Invitrogen</td><td>10010-056</td><td></td></tr><tr><td>קטמין 500</td><td>Virbac צרפת</td><td></td><td>פריט מס' VAL4243</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Bayer Healthcare</td><td>AMM N&deg; FR/8146715 2/1980</td><td>פריט מס' KPO809S</td></tr><tr><td>אופטיגל&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Europhta</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lacrigel&nbsp;</td><td>Medicament Autoris&eacute;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tronothane</td><td>Lisa Pharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GC agar base</td><td>Conda</td><td>1106</td><td></td></tr><tr><td>Human endothelium SFM media</td><td>Gibco Invitrogen</td><td>11111</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>P A A</td><td>A15-101</td><td></td></tr><tr><td>טרנספרין אנושי</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T3309</td><td></td></tr><tr><td>UEA לקטין - מעבדות</td><td></td> <td>וקטור רודמיןRL-1062</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H9627</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E4009</td><td></td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>534056</td><td></td></tr><tr><td>Sober Hand Dermatome</td><td>Humeca BV, הולנד</td><td>4.SB01</td><td></td></tr><tr><td>דיור לבעלי חיים</td> אגרוף ביופסיה <td>חדשני</td><td>M-BTM-C8</td><td></td></tr><tr><td>(4 מ"מ)</td><td>דומיניק דוטשר</td><td>30737</td><td></td></tr><tr><td>מהיר הכנה ליזינג מטריקס M צינורות</td><td>MP ביו</td><td>116923050</td><td></td></tr><tr><td>MagNA ליזר ירוק חרוזים</td><td>Roche</td><td>3358941001</td><td></td></tr><tr><td>MagNA Lyzer</td><td>Roche</td><td>3358976001</td><td></td></tr><tr><td>VECTASHIELD הרכבה מדיה</td><td></td><td>וקטור מעבדות H-1000</td><td></td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td>רקמות דבק</td></tr><tr><td>OCT רקמות tek</td><td>סאקורה</td><td>4583</td><td></td></tr></tbody></table>

אנושי עכבר מודל ללמוד זיהומים חיידקיים מיקוד microvasculature

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

Neisseria meningitidis גורם לאלח דם חמור, לעתים קרובות קטלני כאשר הוא נכנס לזרם הדם של בני האדם. זיהום גורם לנזק נרחב של כלי הדם וכתוצאה מכך הדליפה של כלי דם, ההתפתחות של פריחות purpuric ונימק רקמות סופו של דבר. לומד בפתוגנזה של זיהום זה היה מוגבל בעבר על ידי האדם ספציפי של החיידקים, מה שהופך במודלי vivo קשה. בפרוטוקול זה, אנו מתארים מודל אנושי לזיהום זה שבו עור אנושי, המכיל microvessels עורי, הוא מורכבים על עכברי מדוכאי חיסון. כלים אלה anastomose עם מחזור העכבר תוך שמירה על התכונות האנושיות שלהם. ברגע שהציג למודל, נ &#39;זה meningitidis לדבוק אך ורק לכולים האנושיים, וכתוצאה מכך לנזק רב בכלי דם, דלקת ובמקרים מסוימים להתפתחות של הפריחה purpuric. פרוטוקול זה מתאר את שלבי השתלה, זיהום והערכה של מודל זה בקונטהXT של נ &#39; זיהום meningitidis. הטכניקה עשויה להיות מיושמת לפתוגנים ספציפיים אדם רבים כי להדביק את זרם הדם.

ספירת CFU נ זן meningitidis השתמש בתוצאות הנציג אלה הוא נ meningitidis 8013 שיבוט 12, בודד קליני C serogroup, להביע בכיתה אני pilin SB, אופה -, OPC -, PilC1 + / PilC2 + 20. המתח היה שהונדס חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) מהכנסה כרומוזומליות 18. ספירת יחידות מושבה להרכיב חיידקים נקבעות על ידי ספירת מספר המושבות על הצלחות אגר וחישוב או CFU / מיליליטר של דם או CFU / מ&quot;ג של רקמה מהכרכים הידועים מצופים. ספירת דם הראתה כי 5 דקות לאחר ההזרקה הרביעית של 10 6 חיידקי CFU היו ממוצעת של 1.5 x 10 5 CFU / מיליליטר במחזור הדם (איור 1 א). לאחר 6 שעות בממוצע הספירות 4.8 x 10 4 CFU / מיליליטר. על ידי 24 שעות הספירה הממוצעת היו 2.4 x 10 4 CFU / מיליליטר אבל בקבוצה זו של 10 עכברים, 5 היואין לגילוי חיידקים במחזור ואילו 5 אחר ספירות גבוהות יחסית (איור 1 א). ספירת CFU שנלקחה דגימות העור להראות את רוב העכברים שיש סעיפים רבים בעור האנושי, עם ממוצע של 2.1 x 10 4 CFU / מ&quot;ג של רקמה ב6 שעות ו4.4 x 10 2 CFU / מ&quot;ג של רקמה ב24 שעות (איור 1) . דגימות עור העכבר הנגדית לא הראו ספירת חיידקים ב24 שעות ומספר נמוך מאוד רק בשעה 6, מפגינה ההעדפה החזקה לנ meningitidis לכלי אדם בעור מורכב (איור 1). באופן כללי ספירת חיידקים היו נמוכה מאוד לnondetectable באיברים האחרים שנדגמו למרות 2 חיות עשו ספירה להראות שניתן לייחס לזיהום מהדם, כפי שהם מתואמים עם גבוהים במחזור מספרי חיידקים (איור 1 ג). גם המודל יכול לשמש כדי לקבוע את התפקיד של גורמים ארסי in vivo, למשל pi הסוג IVli. זני חיידקים עם מוטציות מוגדרות בגן pilD 21, וכתוצאה מזן חסר פריון כולל, כמו גם את גן pilC1 8, חסר &#39;adhesin&#39; הפריון הכולל המוצע הוכנסו לתוך המודל. מוטציות אלה לא גרמו להידבקות חיידקים בשתל העור האנושי, המאשרות את התפקיד המכריע פריון הכולל הוא משחק בהידבקות בvivo (1D איור). אימונוהיסטוכימיה / היסטולוגיה בניסויים אלה השתמשנו בנ זני meningitidis המבטאים חלבון ירוק הקרינה (GFP), כדי לאפשר זיהוי ניאון ללא הצורך בצביעה משנית. כלי אדם הוכתמו באמצעות סמן על האנדותל אנושי, או CD31 (PECAM-1) או agglutinin קטיני Ulex europaeus (UEA) 18,22. UEA היה מצומדת לrhodamine מאפשר צביעת צעד אחד (איורים 2A-C). ניתן להכתים גרעין תאאד עם DAPI כדי לסייע בזיהוי מבני רקמות (איורים 2A-B). היסטולוגיה בוצעה באמצעות צביעת hematoxylin / eosin סטנדרטי. גבול אפידרמיס / עורי של העור היה ברור לזיהוי. דליפת דלקת, פקקת וכלי דם היו מרוכזת לכלי קרובים לשעת גבול 24 זה לאחר ההדבקה (איור 2 ד). פקקת היה גלוי לעין בכמה כלי עורי קטנים, לעתים קרובות מלווים בגודש ודלקת. דליפה של כדוריות דם אדומים מתוך לתוך הרקמות ניתן הייתה לראות, המציין רמה נרחבת של נזק כלי שיט. Histopathology של עור מושתל בעכברי noninfected נראה נורמלי ללא דלקת להבחין 18. בעוד כ30% מזיהומי הידבקות חיידקים בעור מובילה להתפתחות של ארגמנת macroscopically לגילוי (2E דמויות ו2F). <img alt="איור 1" fo:content-width=<html> &quot;5in&quot; עבור: src = /&gt; &quot;/ files/ftp_upload/51134/51134fig1highres.jpg&quot; = &quot;/ files/ftp_upload/51134/51134fig1.jpg&quot; src איור 1. ספירת CFU. () ספירת החיידקים CFU לכל מיליליטר של דם בדקות 5, 6 שעות, ו24 הודעה hr זיהום. (ב) בקטריאלי CFU סופר מדגימות עור השוואת עור אנושי (HS) ועור של עכבר (MS) בשתי שעות 6 ו24 הודעה hr זיהום. (ג) בקטריאלי CFU סופר מאיברים אחרים נלקחו 24 הודעה hr זיהום. (ד) השוואה בין ספירות CFU חיידקים מדגימות עור אנושיות ועכבר שצולמו ב24 הודעה hr זיהום מעכברים נגועים בנ הסוג בר כתם meningitidis 2C43 (WT), מתח עם מוטציה בגן pilD (pilD) או מתח עם מוטציה בגן pilC1 (pilC1). כל הגרפים מוצגים כנתונים גולמיים בחציון. איור הוא שונה מMelican et al. 18&quot;_blank&quot;&gt; לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר. <img alt="איור 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51134/51134fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51134/51134fig2.jpg" /> איור 2. הקרנה מיקרוסקופית. (א) לערימת confocal מראה microvessel אנושי מוכתם בקטיני UEA (אדום) קרובים לעורי (ד) גבול אפידרמיס (ה). כלי נגוע בנ meningitidis 2 הודעה hr זיהום (ירוק). (ב) פרוסה אופטית והקרנה פרוסה (C) מראה נ זיהום microcolonies meningitidis (ירוק) כלי אנושי (UEA - אדום) בתוך עור שתל 2 הודעה hr זיהום. (ד) מכתים Haematoxylin / Eosin של שתל עור האנושי נגוע עבור שעות 24 עם נ &#39; meningitidis. אפידרמיס (ה), גבול עורי (ד) הוא באופן ברור פקקת וגודש של microvess גלויים ונרחבאלס (חיצים) נתפסת בדרמיס. יכולים גם להיות מזוהה דלקת וכמה דליפה של כלי דם (ראש חץ). (ה) שתל עור אדם לפני ההדבקה. אותו שתל העור כשעה לאחר זיהום (E) 24 עם נ &#39;(F) meningitidis מראה אזורי purpuric (חיצים). איורים 2B, 2D, 2E, ו2F הם שונה מMelican et al. 18 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51134/51134fig2highres.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בתמונה גדולה יותר.</a>

meningitidis Neisseria הוא הפתוגן ספציפי אדם שמדביק את כלי דם. בפרוטוקול זה microvessels אדם מוכנס בעכבר על ידי השתלת עור אנושי על עכברי חיסון. חיידקים לדבוק בהרחבה לכלי האנושי, שהובילו לניזק והתפתחות כלי דם של הפריחה purpuric נצפתה בדרך כלל במקרים של בני אדם.

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא לחקור את המנגנונים שבאמצעותם החיידק Neisseria meningitidis מדביק כלי דם אנושיים in vivo. מטרה זו מושגת תחילה על ידי השתלת עור אנושי בעכבר עם חסר חיסוני, ובכך מוחדרים כלי דם דרמליים אנושיים. בשלב השני, העכברים ההומניזים מודבקים בחיידק.לאחר מכן מאפשרים לזיהום להתקדם למשך פרק זמן שנקבע מראש. בשלב הסופי, נלקחים דגימות דם ורקמה כדי להעריך את תוצאות הזיהום. לבסוף, נעשה שימוש בשילוב של היסטולוגיה, אימונופלואורסצנציה וניתוח דם ורקמה כדי לחקור את התקדמות הזיהום בכלי דם אנושיים.היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני טכניקות קיימות, כגון מודלים של תרביות תאים או מודלים של בעלי חיים, הוא שמעתה נוכל לצפות לראשונה בפתולוגיה הקלינית הטיפוסית המתרחשת במהלך זיהומים אלו. מיד לאחר האיסוף, ובמהירות האפשרית, נקה את פני השטח של עור האדם באמצעות 70% ethanol, ולאחר מכן הנח אותו בצורה שטוחה על משטח נקי היטב, רצוי תחת מapay-flow (מנדף זרימה למינרית). לאחר מכן, השתמש בדרמטום עם עובי מוגדר מראש כדי לחתוך פרוסות בעובי 200 עד 400 micrometer מהחלק העליון של העור.בדקו את שלמות הפרוסות, ולאחר מכן גזרו אותן לריבועים של שני על שני סנטימטרים. הניחו את הריבועים ב-PBS, ולאחר מכן נקו את האזור הגולח של עכבר beige עם תסמונת חיסון משולב חמור (severe combined immunodeficient) בן שש עד שמונה שבועות, שהורדם והוכן ניתוחית, באמצעות 70% ethanol. לאחר מתן אלחוש מקומי לאתר השתלה, השתמשו במספריים מעוקלים כדי להסיר בזהירות את השכבה השטחית של עור העכבר באזור שקטן מעט מחלקי השתלה, תוך הקפדה לא להפריע לכלי הדם שמתחתיה.כדי למנוע את התייבשות השתל, פעל במהירות והנח את אחת מפרוסות עור האדם על מצע השתל, תוך וידוי שהצד האפידרמלי פונה כלפי מעלה. יישר את קצה הרקמה וקבע אותה באמצעות דבק לרקמות. לאחר מכן, התאם בזהירות את שאר עור האדם למצע השתל, תוך הנחת כמויות קטנות של דבק לרקמות מסביב לכל קצה.יש תמיד לגזור את עור האדם לגודל המתאים במקום להגדיל את מצע השתל. לאחר אישור שכל פינה מקובעת, נקה את האזור באמצעות תמיסת יוד והחלב פלסטר בחוזקה אך לא במידה לוחצת, כאשר הצד הרך פונה כלפי השתל, תוך הקפדה על כך שנשימתו של בעל החיים לא תיפגע; לאחר מכן, קבע את הפלסטר באמצעות סרט חבישה ואפשר לבעל החיים להתאושש על משטח חם. לאחר ההתעוררות, החזר את בעל החיים לכלובו עד להזרקת החיידקים, ואז זרע מחדש תרבית צלחת לילה לתוך תרבית נוזלית.בבוקר ההדבקה, כאשר החיידקים מגיעים לריכוז הרצוי, דללו את התאים ל-1×10⁷ CFU/mL. לאחר מכן, בעקבות הרדמה, ודאו את רמת הסדציה של העכברים המושתלים באמצעות צביטה בבהונות, והניחו את בעלי החיים על פד חימום.מרחו משחה לעיניים על עיני בעל החיים, ולאחר מכן בצעו הזרקה תוך-פריטונית (ip). הזריקו לכל עכבר שמונה מיליגרם של transfer אנושי בתמיסת סליין. לאחר מכן, עבור כל בעל חיים, גזרו את קצה הזנב ומרחו טיפה קטנה של דם מהזנב על צלחת אגר כדי לוודא שהדם סטרילי לפני ההדבקה.לאחר מכן, הזרקו 100 µL של תרבית החיידקים באופן תוך-ורידי באמצעות הזרקה רטרו-אורביטלית. לאחר מספר דקות, גזרו שוב את קצה הזנב ופזרו גם דגימת דם זו על צלחות אגר טריות. כדי לקבוע את מספר היחידות יוצרות המושבות (CFU) בדם מיד לאחר ההדבקה, אטמו את הזנב בעזרת דבק לרקמות, ואז דללו את האינוקולום החיידקי ופזרו אותו על צלחות אגר המכילות את האנטיביוטיקה המתאימה.כדי לקבוע את מספר יחידות יוצרות המושבות (CFU) של האינוקולום שש שעות לאחר ההדבקה, יש לשאוב כמות קטנה נוספת של דם מכל אחד מזנבות העכברים, ולאחר מכן לדלל ולזרוע את טיפות הדם כפי שהודגם זה עתה כדי לקבוע את מספר יחידות יוצרות המושבות לאחר שש שעות. לאחר מכן, יש לדגור את כל הצלחות הפטריות ב-37 °C וב-5% carbon dioxide למשך לילה כדי לבצע ספירת יחידות יוצרות מושבות באיברים של בעלי החיים המודבקים.התחילו בביצוע חתך בקו האמצע בכל עכבר שעבר הרדמה והמתה. לאחר מכן, עבור כל בעל חיים, חתכו את הצלע ובצעו חתך בלב. השתמשו במזרק סטרילי כדי לשאוב כמה שיותר דם מהלב ומחלל החזה, והעבירו אותו למבחנות סטריליות נפרדות עבור כל דגימה.בשלב הבא, הוצא את האיברים הרלוונטיים ולאחר מכן העבר את השתלי העור ומקטעי עור העכבר הנלווים אל פלטה סטרילית אחת לכל בעל חיים. אפשר לדם שנאסף להיקרש במשך 15 דקות, ולאחר מכן סבב אותו בצנטריפוגה. לאחר מכן, הפר את הפלזמה מהדם ואחסן אותה בטמפרטורה של 80- מעלות צלזיוס לצורך אנליזה מאוחרת.בשלב הבא, שקלו מבחנות הומוגניזציה המכילות כל אחת 500 µL של PBS. לאחר מכן, השתמשו במנקב ביופסיה סטרילי כדי לקחת דגימות ביופסיה של 4 mm מכל רקמה שנותחה. העבירו את הביופסיות באופן פרטני למבחנות ההומוגניזציה, כאשר בכל מבחנה המכילה דגימת עור יש להוסיף חרוץ אחד של 2 mm.שמור את הרקמות שנותרו ב-4%para formaldehyde בטמפרטורה של ארבע מעלות צלזיוס לצורך מיקרוסקופיה, ושקול את מבחנות ההומוגניזציה כדי לקבוע את משקל הביופסיה. לאחר מכן, בצע הומוגניזציה לדגימות ב-6,000 RPM למשך 30 שניות, וחזור על הומוגניזציית העור עד שההומוגנאט יהיה אחיד. לבסוף, פרס את תרחילי התאים מכל מבחנה על צלחות אגר רעננות והגדל את התרביות למשך הלילה ב-37 מעלות צלזיוס ב-5%carbon dioxide.כדי לקבוע את ספירת יחידות יוצרות מושבות באיברים בתוצאות מייצגות אלה, נעשה שימוש בזן של N meningitis מסוג Serogroup C החיובי ל-GFP.ספירות דם הראו כי חמש דקות לאחר הזרקה תוך-ורידית (IV) של 1×10⁶ יחידות יוצרות מושבות (CFU) של חיידקים, נמדד ממוצע של 1.5×10⁵ יחידות יוצרות מושבות למילליליטר במחזור הדם. לאחר שש שעות, הספירות עמדו בממוצע על 4.8×10⁴ יחידות יוצרות מושבות למילליליטר, ובתוך 24 שעות, הספירות הממוצעות היו 2.4×10⁴ יחידות יוצרות מושבות למילליליטר.אך בקבוצה זו של 10 עכברים, לחמישה לא נמצאו חיידקים במחזור הדם, בעוד שלחמישה האחרים היו ספירות גבוהות יחסית. פסים אלו בגרפים מראים את ערכי החציונה של ספירות ה-CFU שנלקחו מהעור עבור כל קבוצה. הדגימות מראות כי לרוב העכברים היו ספירות ניכרות בעור האדם, בממוצע של 2.1 × 10⁴ CFU למיליגרם רקמה לאחר שש שעות, ו-4.4 × 10² CFU למיליגרם רקמה לאחר 24 שעות.דגימות עור העכבר מהצד הקונטרלטיבי לא הראו ספירות חיידקים לאחר 24 שעות ומספר נמוך מאוד בלבד לאחר שש שעות, מה שמעיד על ההעדפה החזקה של end meningitis לכלי הדם האנושיים ברקמה המשתולת. באופן כללי, ספירות החיידקים היו נמוכות מאוד עד לרמה שאינה ניתנת לגילוי באיברים האחרים שנדגמו, למרות שבשני בעלי חיים נצפו ספירות, דבר שעשוי להיות קשור למספרים גבוהים של חיידקים במחזור הדם. ניתן להשתמש במודל זה גם כדי לקבוע את תפקידם של גורמי virulent in vivo.לדוגמה, בניסוי זה, נעשה שימוש בזני חיידקים חסרים ב-type four pili I תפקודי; עכברים שהודבקו בזנים מוטנטיים אלו לא הראו היצמדות חיידקית בשטחי העור המושתלים מבני אדם, מה שמאשר את התפקיד המכריע ש-type four pili I ממלא בהיצמדות in vivo. בתמונות קונפוקאליות אלו של השתלת עור, שעתיים לאחר ההדבקה, ניתן להבחין בכלי דם אנושיים שצבעו lectin UEA המצומד ל-rhodamine. הגבול בין האפידרמיס לדרמיס של העור ניתן לזיהוי בבירור, וניתן להבחין בבירור בחיידקי meningitis חיוביים ל-GFP המדביקים את אזור כלי הדם.שתל עור אנושי זה, הצבוע ב-h and e, מדגים דלקת ונזילות וסקולריות, וכן תסביב (thrombosis) המרוכז בכלי דם הקרובים לגבול שבין האפידרמיס לדרמיס. 24 שעות לאחר ההדבקה, בכ-30% מהמקרים, היצמדות חיידקית לעור הובילה להתפתחות של פורפורה (purpura) הניתנת לזיהוי מאקרוסקופית. לפיכך, פיתוח טכניקה זו סולל את הדרך לחוקרים העוסקים באינטראקציות בין המאחס לפתוגן ללמוד את מנגנוני המחלה בהקשר של כלי דם אנושיים.

humanized-mouse-model-to-study-bacterial-infections-targeting

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

כאן אנו מתארים מתודולוגיה להעביר חוט האדם הנגזרות דם אנדותל מושבת תאים יוצרי (ECFCs) ו מח עצם שמקורם בתאי גזע mesenchymal (MSCs), מוטבע ג'ל קולגן / פיברונקטין, תת עורי לעכברים immunodeficient. שילוב זה תא / ג'ל יוצרת רשת כלי דם האדם מתחבר עם vasculature העכבר.

האדם Bioengineering רשתות כלי הדם של עכברים Immunodeficient

מקור: ולנטיין, מ. א. ואחרים, יצירת מוטנטים למחיקת גנים בתוך המסגרת ב-Pseudomonas aeruginosa ובדיקת החלשת אלימות במודל פשוט של זיהום בעכברים. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את השימוש בגישה של הדמיה מבוססת ביולומינסצנציה לניטור זיהום חיידקי במודל עכבר חי. הדמיה ביולומינצנטית רציפה וצילום רנטגן מאפשרת הדמיה בזמן אמת ומיקום אנטומי של הזיהומים המתפשטים ברחבי המארח.

הדמיה בזמן אמת של זיהום חיידקי במודל עכבר באמצעות ביולומינסציה

Source: Claes, J., et al, In Vitro and In Vivo Model to Study Bacterial Adhesion to the Vessel Wall Under Flow Conditions. J. Vis. Exp. (2015).This video demonstrates an in vivo method for analyzing shear-dependent bacterial adhesion in a live mouse model. Following surgical preparation and catheterization, the mesenteric vasculature is exposed for real-time imaging under a fluorescence microscope. Perfusion with an ionophore and fluorescently labeled bacteria reveals how shear stress triggers...

An In Vivo Model to Study Shear-Dependent Bacterial Adhesion

סרטון זה מדגים הדמיה in vivo כדי לחקור את דינמיקת גיוס הנויטרופילים באתר זיהום בעכבר מהונדס מדוכא חיסון עם נויטרופילים המבטאים GFP. זה כרוך הזרקת חיידקים זוהרים כדי לגרום לזיהום. זה מוביל גיוס נויטרופילים לאתר הזיהום, אשר מעקב נעשה על ידי הדמיה.

ניטור דינמיקת גיוס נויטרופילים ועומס חיידקים באתר ההדבקה במודל מורין

סרטון זה מדגים טכניקה ליצירת מודל מוריני של זיהום פצע בעור. לאחר הדבקת עכברים – שהונדסו לבטא חלבון פלואורסצנטי בנויטרופילים – בחיידק ביולומינסנטי מהונדס גנטית Staphylococcus aureus – חיידק פתוגני. ניתן לחקור את העומס החיידקי באתר ההדבקה ואת דינמיקת גיוס הנויטרופילים באמצעות הדמיה של בעלי חיים שלמים.

מודל זיהום פצע עור מורין לחקר התגובה החיסונית נגד פתוגן חיידקי

כאן אנו מדווחים טכניקה ניסויית של מיקרוסקופיה intravital פלואורסצנטי לדמיין אינטראקציות heterotypic טסיות דם נויטרופילים על האנדותל הופעל במהלך דלקת כלי דם והיווצרות קרישים בעכברים חיים. טכנולוגיה מיקרוסקופית זה תהיה יקרה כדי לחקור את המנגנון המולקולרי של מחלת כלי דם ולבדוק סוכנים תרופתיים בתנאי pathophysiological.

הדמיה בזמן אמת של אינטראקציות heterotypic טסיות דם-נויטרופילים על האנדותל הופעל במהלך דלקת של כלי דם והיווצרות קרישים בעכברים חיים

מודלים של בעלי החיים הוכיחו להיות כלי רב ערך בהגדרת מנגנונים ספציפיים מארח ופתוגן שתורמים להתפתחות של דלקת כרונית. כאן אנו מתארים מודל עכבר של זיהום אוראלי עם הפתוגן האנושי Porphyromonas gingivalis ומתודולוגיות פרט כדי להעריך את ההתקדמות של דלקת באתרים מקומיים ומערכתיים.

מודל של עכברים של דלקת כרונית הנגרם על ידי פתוגן באתרים מקומיים ומערכתיים

כדי לחקור את האינטראקציה של חיידקים עם כלי הדם תחת לחץ גזירה, מתוארים תא זרימה ומודל מיקרוסקופיה תוך-חיונית מזנטרית in vivo המאפשרים לנתח את גורמי החיידקים והמארח התורמים להידבקות כלי הדם.

במבחנת in vivo המודל ללמוד הידבקות חיידקים לכלי השיט וול תנאי זרימה תחת

בעוד שמחקר במבחנה של אינטראקציות מארח-פתוגן מאפשר אפיון של תגובות חיסוניות ספציפיות, מודלים in vivo נדרשים כדי להתבונן בהשפעות של תגובות מורכבות. באמצעות חשיפה לקנדידה אלביקנס ואחריה זיהום ריאות בתיווך Pseudomonas aeruginosa, הקמנו מודל עכברי של אינטראקציות מיקרוביאליות המעורבות בפתוגניות של דלקת ריאות הקשורה למכונת הנשמה.

לומד קהילות חיידקים<em&gt; In vivo</em&gt;: דגם של אינטראקציה בתיווך בין מארח<em&gt; קנדידה אלביקנס</em&gt; ו<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; באיירווייס

גישה זו מתוארת זיהוי בזמן אמת של התגובה החיסונית מולדת ופצעו עורית, Staphylococcus aureus זיהום של עכברים. מאת LysM בהשוואת-EGFP עכברים (אשר מחזיקים נויטרופילים פלורסנט) עם LysM-EGFP crossbred immunodeficient עכבר זן, נוכל לקדם את ההבנה שלנו של זיהום ופיתוח של גישות כדי להילחם זיהום.

דגם העכבר כדי להעריך מולדת התגובה החיסונית לזיהום Staphylococcus aureus

למד את מנגנוני ההדבקה של Neisseria meningitidis בכלי דם אנושיים באמצעות מודל עכבר מואנש עם שתל עור אנושי. שיטה זו מאפשרת תצפית ישירה של פתולוגיה קלינית ונזק כלי דם בזיהומים מנינגוקוקליים.

אנושי עכבר מודל ללמוד זיהומים חיידקיים מיקוד microvasculature

גלה סרטונים נוספים