Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Elisabeth M. Meulenbroek; Diana Wouters; Sacha Zeerleder

doi:10.3791/51161

שיטות כמותיות לאיתור של הפעלת משלים-Induced נוגדן בתאי דם אדומים

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

שיטות כמותיות לאיתור של הפעלת משלים-Induced נוגדן בתאי דם אדומים

Full Text

31,214 Views

06:29 min

January 29, 2014

DOI: 10.3791/51161-v

Elisabeth M. Meulenbroek¹, Diana Wouters¹, Sacha Zeerleder^1,2

¹Department of Immunopathology, Sanquin Research and Landsteiner Laboratory Academic Medical Center,University of Amsterdam, ²Department of Hematology, Academic Medical Center,University of Amsterdam

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

כאן אנו מתארים שני מבחני למדידת הפעלת משלימים הנגרמת על ידי נוגדנים כנגד תאי דם אדומים. היתרון הגדול על פני מבחני הנוכחיים הוא מטבעם כמוני וקל לפרש.

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא להעריך את הפעלת המשלים על ידי נוגדנים כנגד כדוריות דם אדומות או RBCs בסרום המטופל. זה מושג על ידי דגירה של כדוריות דם אדומות עם סרום המטופל בנוכחות נוגדן חוסם נגד C 5 כדי לגרום לתצהיר C ארבע ו-C3 על פני ה-RBC. לאחר מכן, ה-RBCs מוכתמים בנוגדנים נגד C 4 ו-Anti C3 המסומנים פלואורסצנטית, ולאחר מכן ניתן לנתח את כמות שקיעת המשלים על ה-RBCs על ידי זרימה ציטומטרית בשיטה חלופית.

תאי הדם האדומים מודגרים בסרום המטופל בהיעדר אנטי C חמש כדי לגרום לליזה מתווכת משלים. לאחר מכן ניתן לקבוע את אחוז ה-RBCs שעברו ליזה על ידי מדידת כמות ההמוגלובין המשתחרר על ידי התאים על ידי ספקטרומטריה. היתרון העיקרי של טכניקה חדשה זו על פני שיטות קיימות כמו המוליזה או בדיקת אנטיגלובולין המשמשת באבחון שגרתי הוא שהיא כמותית באופייה ואנו יכולים לזהות הבדלים לא אופטימליים בהפעלת המשלים.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

אימונולוגיה גיליון 83 משלים תאי דם אדומים אנמיה המוליטית אוטואימונית assay המוליטית FACS נוגדנים C1-מעכב