Name: בארנס מבוך אסטרטגיות בדיקה עם קטן ומודלים מכרסמים גדולים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-26T22:45:00.000+00:00
Duration: 12 min 59 s
Description: למדו להעריך למידה מרחבית וזיכרון במכרסמים באמצעות מבוך בארנס יבשתי. שיטה זו מציעה חלופה פחות מלחיצה למבוך מים ומאפשרת מעקב אחר שיפור ביצועים לאורך זמן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים למר אלדין Jašarević, מר סקוט וויליאמס, מר רוג&#39;ר ו &#39;מייסן, שרה א&#39; ג&#39;ונסון, ד&quot;ר ר &#39;מיכאל רוברטס, ד&quot;ר מרק ר&#39; Ellersieck, וד&quot;ר דוד ג גירי באוניברסיטת מיזורי, ומר חוק דלברט ג וצוות הטיפול בבעלי החיים במרכז הלאומי למחקר Toxicological / ה-FDA. עבודה זו נתמכה על ידי NIH אתגר גרנט לגרנט לאחריות חברתית (RC1 ES018195), גרנט יתרון Mizzou ל( CSR וDCG), מכללת אוניברסיטת מיזורי של הפרס פקולטה לרפואת הווטרינרית (CSR), וE7318 פרוטוקול במרכז הלאומי לToxicological מחקר / ה-FDA.

1. בארנס מבוך נוהל המכרסמים קטנים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להדליק את האורות ממעל מעל המבוך והמקום &quot;לא נכנס&quot; סימנים בצד החיצוני של דלת המעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להביא עכברים בכלובים בבית הרגילים שלהם במבחן החדר כ 30 דקות לפני תחילת המשפט הראשון כדי לאפשר התרגלות. אם החדר שקט, זה לא יכול להיות צורך לכלול רעש לבן, אחרת אמצעי זהירות זה עשוי להילקח בחשבון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את תכנית המעקב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר בעדינות את העכבר הראשון מהכלוב בבית שלה ואת המקום בקופסא הפלסטיק המכוסה הגבוהה. הנח את הבריחה שלה (בית נקי) כלוב פוליפרופילן (29 סנטימטר x 19 סנטימטר x 13 סנטימטר) מתחת לחור המילוט המיועד. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבטיח את הנייר שהוא חוסם את צינור מוסר שמחור הבריחה וכל החורים האחרים מחוברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צייר וילון סביב המבוך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את קופסא הפלסטיק עם העכבר בתוך במרכז המבוך וכ -8 שניות מאוחר יותר, בעדינות taKe בעלי החיים מחוץ לכלוב ולמקם אותו על גבי המבוך. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שהניח את בעלי החיים שבמרכז המבוך, בשקט לעבור לאזור המחשב (~ 150 סנטימטר מהמבוך). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליזום את תוכנת מעקב התכנית המתאימה שצריכה להיות כבר פתוח כדי להבטיח זמן מינימאלי (תוך מספר שניות) שחלפה מרגע שבעלי החיים הונחו על המבוך עד שהתכנית מתחילה מתעדת את הביצועים שלה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב לביצועים של בעלי החיים מצג המחשב ומספר חור השיא, מספר המשפט, אסטרטגיית חיפוש, ומספר הטעויות שנעשו. שגיאה מוגדרת כמרחרח של חור שגוי. הערכה של אסטרטגיית חיפוש יכולה להתבצע בשידור חי או במאוחר על בסיס תבנית המעקב. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסטרטגיית חיפוש היא מסווגת כישירה (הולך ישירות לתוך כלוב הבריחה עם 3 או פחות שגיאות), </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סידורי (נסיעה לאורך היקף המבוך עד לכלוב הבריחה נמצא), או </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אקראי &lt;/ Strong&gt; (חוצה את מרכז המבוך מספר פעמים כדי לבדוק את החורים שונים). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעצור את תכנית המעקב, כאשר יש לו את בעלי החיים בכל ארבע כפות הרגליים בתוך כלוב הבריחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם העכבר לא מצליח להיכנס לכלוב הבריחה תוך 5 דקות, בעדינות להדריך אותו למיקום הנכון ולתוך כלוב הבריחה. בואו העכבר יישאר בכלוב הבריחה למשך 2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את העכבר מכלוב הבריחה והמקום בכלוב בבית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ריסוס העליון המבוך ולברוח כלוב עם 70% אתנול ולנגב יבש. הגדר את הכלוב / העכבר הראשון בצד ל30 דקות לפני הפעלת הניסוי השני שלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני שיתחיל בעכבר הבא, לסתום את חור הבריחה הנכון בעבר וניתק את תקע נייר חוסם את החור מחור הבריחה המיועד לכי הנושא הבא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל עכבר נבדק על 2 ניסויים / יום עם מרווח בין משפט של כ 30 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים אלה עד שכל העכברים נבדקו במשך שבעה ימים רצופים, דבר שעשוי להגדיל את סיכוי of התבוננות ביצועים ו / או הבדלים בין קבוצות טיפול, ביחס לארבעה ימים בלבד של נתונים משופרים. </li></ol> 2. בארנס מבוך בדיקה לחולדות כאשר תכנית מעקב היא לא זמינה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבטיח את המבוך הוא במיקומה הנכון (במרכז ישירות מתחת אורות), תחתיות שווא שחוסמים חורי nonescape ולמנוע את בעל החיים מהנפילה מתוכם באופן מאובטח במבוך, וכלוב הבריחה הוא במיקום הייעודי לנושא הראשון. תאורה עילית מעל המבוך צריכה להיות מופעלת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחשב והמצלמה להבטיח מוכנים ושעון עצר זמין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל רעש לבן כדי להחליש כל רעשים ממקומות אחרים בסביבה. הכיסא של הבוחן הוא כ 122 סנטימטר מהקצה הקרוב ביותר של ראש המבוך ונשאר באותו המקום לאורך כל בדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טיימר (מוגדר 2 דקות) צריך להיות זמין (נדרש רק ביום 1 של בדיקות). טיימר לא צריך &quot;ביפ&quot; או בדרך אחרת לעשות רעש. דלת (ים) כדי לבדוק room צריך להיות &quot;לא נכנס&quot; לחתום על בחוץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גיליון צו מבחן לנבדקים יפרט את סדר בדיקת הנושא, את מספר המושב, מיקום מספר החור של כלוב הבריחה לכל נושא, ואזורים להקליט חביון ושעה ביום לכל נושא, כמו גם אזור לכל הערות נחוצות (איור 6). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מ30-60 דקות לפני החולדה הראשונה היא להיבדק, להביא את בעלי החיים בכלובים בביתם לחדר הבדיקה כדי לאפשר להתרגלות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צינור המרכז שהעכברוש הוא להציב לתוך בתחילת משפט מוגדר במרכז המבוך. הגדר את גיליון הקרטון מראה את תעודת הזהות של בעלי החיים הראשונות על העליונה. זה מאפשר הקלטת וידאו כדי ללכוד את קוד זיהוי של בעלי החיים לזיהוי קל של כל נושא על ידי התבוננות כמה שניות הראשונות של הווידאו. </li></ol> בדיקה ראשוני יום 1: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתחיל בהקלטת וידאו של מחשב (אם משתמש בו) וכולל כ 5 שניות של המשפט עם גיליון זיהוי בעלי החיים לSubject זיהוי. שם קובץ (או תאריך יצירה) יזהה יום / שעה של בדיקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את החיה הראשונה מהכלוב בבית שלה (תבדוק את הזהות אם בעלי חיים רבים נמצאים בכלוב) ומניח בעדינות את הראש ראשון לתוך כלוב הבריחה. לכסות את כלוב הבריחה עם תחתית כפולה נוספת ולהתחיל את הטיימר 2 דקות. זה מאפשר לבעלי החיים כדי להרגיל לכלוב הבריחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 2 דקות הטיימר מסתיים, להסיר בעדינות בבעלי חיים מכלוב בריחה (להסיר מכסה תחתון שווא, כמו גם ולהגדיר מן המבוך), גיליון מזהה מעלית, ומניח מייד את העכברוש בתוך צינור המרכז. מכסה העליון של צינור מרכז עם גיליון מזהה קרטון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות ולאט לאט להרים את שפופרת מרכז עם כריכת קרטון ומניח בצד. הפעל את שעון העצר כצינור המרכז הוא הרים מעל לבעלי החיים. מעבר ללשבת בכיסא של הבוחן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשבת בשקט בכיסא, צופה גם בבעלי החיים ושעון העצר. לכל בעל חיים מרבי של 5 דקות כדי למצוא את כלוב הבריחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם החולדה מוצאת את כלוב הבריחה בפחות מ5 דקות, לעצור את שעון העצר ומיסות שיא והשעה ביום על גיליון כדי בדיקה. הסר את בעלי החיים מכלוב בריחה ומניח חזרה לכלוב בבית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם החולדה אינה מוצא את כלוב הבריחה תוך 5 דקות, בעדינות להנחות את בעלי החיים לכלוב הבריחה ולאפשר 15 שניות לעבור לפני הסרת והחזרת בעלי החיים לכלוב בבית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משך שניות זה 15 יכול להיות מתוזמן באמצעות שעון עם יד שנייה על קיר חדר בדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זמן שיא של יום בגיליון צו מבחן והשיא שהעכברוש לא מצא כלוב הבריחה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם החולדה נופלת / קופץ מהמבוך, הבוחן צריך להעיף מבט בשעון העצר בזמן. הבוחן צריך ואז ינסה לשלוף את בעלי החיים במהירות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם זה יכול להיעשות תוך 10 שניות, החלף את בעלי החיים אל מרכז המבוך ולהקליט את הזמן של הנפילה / הקפיצה בגיליון המבחן (אם הבוחן יכול להבחין בין נפילה או לקפוץ, זה צריך להיות מסומן). להמשיך במשפט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם אחזור animal לוקח זמן רב יותר מאשר 10 שניות, לעצור את שעון העצר, ואת בעלי החיים לכלוב בבית בחזרה. זמן שיא של נפילה / קפיצה (אם הבוחן יכול להבחין בין נפילה או קפיצה, תציין זאת). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתונים מניסויים בבעלי חיים שנפלו / קפצו ושלא ניתן לאחזר בתוך 10 שניות הושמטו מניתוחים סטטיסטיים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעצור את הקלטת וידאו במחשב. הקלט את כל הערות על המשפט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל שתן או צואה מהחלק העליון המבוך, לרסס עם 70% אתנול, ולנגב ביסודיות יבשה. הסר את כלוב בריחה ולנקות עם 70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את כלוב בריחה נקי במיקום הייעודי לנושא הבא. לאחר בריחת כלוב אחד או יותר מאפשר לכל לאוויר יבש כדי להפחית את ריח אתנול. שים תחתון שווא נקי על החור הקודם (כך שכל אבל חור אחד יש תחתית כפולה וחור אחד שמכיל את כלוב הבריחה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את צינור המרכז עם גיליון מזהה לנושא הבא במרכז המבוך. להתחיל בהקלטת וידאו במחשב. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את החיה הבאה להיבדק, מקום לתוך כלוב בריחה (אם היום / 1 מושב), ולהתחיל 2 דקות טיימר (רק אם יום / מושב 1). תמשיך משלב 2 לעיל. כל נושא מקבל משפט 1 / יום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי הכל בעלי החיים שנבדקו, לנקות את המבוך ולברוח כלוב, לכבות את אור זרקורים, ורעש לבן. הסר &quot;לא נכנס&quot; שלט (ים) מדלת (ים). </li></ol> ימים 2 עד 7 בדיקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקמתי חדר בדיקה ומבוך לבדיקה כפי שפורט לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר צינור מרכז במרכז מבוך עם גיליון מזהה על העליונה. להתחיל בהקלטת וידאו. הסר את החיה הראשונה מכלוב בבית והמקום לתוך הצינור המרכזי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צעד זה מבדיל את הימים 2-7 מיום 1, במיוחד, בימים 2-7, הנושא הוא להציב לתוך צינור המרכז ישירות לאחר ההסרה מהכלוב בבית ותקופת התרגלות 2 דקות בתוך כלוב הבריחה לא נעשה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך חוזר החל מהשלב 4 לעיל. </li></ol> 3. ניתוח סטטיסטיעבור נקודתי קצה מבוך בארנס <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנתח נתונים עשוי לדרוש מספר בדיקות סטטיסטיות. משתנה רציף, כגון מיסות ושיעור שגיאה, עשוי להיות מנותח כמזימה לפצל במרחב ובזמן 52. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם חלק מבעלי החיים לא לאתר את כלוב בריחה או בבית בתוך הזמן המרבי מוקצב, ניתן להקצות את נתוני ההשהיה כמרביים ונותחו על ידי שימוש בבדיקות ProcLife בגרסת SAS 9.2 ניתוח תוכנה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיטה סטטיסטית זו שימושית עבור נתונים התנהגותיים שבו יש הפסקת גבול עליונה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתונים אסטרטגית חיפוש עשויים להיות מנותחים על ידי שימוש בעיצוב מידה חוזרת ונשנית עם PROC GLIMMIX וגרסת SAS 9.2 ניתוח תוכנה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח ראשון זה מעסיק קישור להיכנס זה מצטבר והפצה multinomial כזה שכל אסטרטגיות החיפוש שלוש (אקראי, סידורי, וישיר) נכללות בניתוח זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לקבוע אם החיות לומדות להשתמש באסטרטגית החיפוש היעילה יותר, secon (ישיר)ניתוח ד באסטרטגיית חיפוש יכול להתבצע על ששתי אסטרטגיות פחות יעילים (אקראיות וסדרתי) בשילוב והשוואה מול אסטרטגיית החיפוש הישירה היעילה יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיטה השנייה זו התוצאה התפלגות הבינומית ומעסיקה גם PROC GLIMMIX. </li></ol></li></ol>

מסמך זה נבדק בהתאם למדיניות מזון והתרופות האמריקאית (FDA) ארצות הברית ואושר לפרסום. אישור לא מסמל שהתוכן משקף בהכרח את העמדה או חוות דעת של ה-FDA וגם לא אזכור של שמות מסחריים או מוצרים מסחריים מהווה אישור או המלצה לשימוש. הממצאים ומסקנות בדו&quot;ח זה הם אלה של הכותבים ולא בהכרח מייצגים את הדעות של ה-FDA. יש המחברים אין אינטרסים ואין לחשוף מתחרים.

שלבים קריטיים בתהליכי בדיקת מבוך בארנס כוללים: 1) מתן הגירוי המעטה מרתיע הנכון להניע את בעלי החיים כדי לאתר את כלוב הבריחה, 2) הבטחת תנאים אחידים נשמרים על פני הניסויים בבעלי החיים (לדוגמא בזמן בדיקה, בדיקת כוח אדם, בקרת רעש חיצונית, וגירויים אחרים שעלול להשפיע על ביצועים), 3) במידה וניסויים הם וידאו מוקלט, מיטוב ולהבטיח הקלטת וידאו מתאימה ולהגיש בחזרה למעלה, ו4) ניקוי של המבוך עם 70% אתנול להסיר רמזי חוש הריח בין ניסויים. <p class="jove_content" style=";text-align:ri...

למידה וזיכרון במכרסמים מעבדה המרחבית הוערכו ראשון עם חולדות שנשלל מזון שניווטו במבוך של סמטאות לאתר חיזוק מזון 1. כמה עשורים מאוחר יותר, מערכת זיכרון התייחסות מרחבית הוצעה 2. בניגוד לזיכרון עבודה המתייחס לזיכרון בתוך פגישת מבחן או משפט, זיכרון התייחסות מתייחס לזיכרון על פני מפגשי מבחן או ניסויים, והוא קשור באופן הדוק יותר לזיכרון לטווח ארוך. מספר סוגים של מבוכים פותחו כהערכות פולשנית של למידה זו בהיפוקמפוס תלוי במרחב ובזיכרון במכרסמים קטנים וגדולים (למשל מבוך מים, T-מבוך מרובה, מבוך זרוע הרדיאלית ומבוכים יבש קרקע) 3-6. כאן, אנו מתמקדים בפלטפורמה העגולה או מבוך בארנס, שתוארה לראשונה בשנת 1979 על ידי ד&quot;ר קרול 7 ברנס. המבוך הזה נעשה שימוש כדי לבחון את מידת ניווט במרחב ובזיכרון במגוון רחב של מודלים של מכרסמים, כולל חולדות (Ranorvegicus ttus), עכברים (מאסכאלאס), צבאים עכברים (Peromyscus maniculatus bairdii), עכברי קליפורניה (Peromyscus californicus), ומכרסמים hystricomorph (למשל degus [degus Octodon]) 8-13. מינים אחרים הוערכו באמצעות המבוך בארנס כוללים תיקנים אמריקאים (americana Periplaneta) 14, נחשי תירס (Elaphe guttata guttata) 15, &#160; זוחלים קשקשים (למשל לטאות מוכתמות בצד [stansburiana אוטה]) 16, ופרימטים לא אנושיים (למשל הלמורים עכבר [murinus Microcebus]) 17. במעבדות שלנו, ביצועי מבוך בארנס שמשו כמדד לרעילות עצבית לאחר יספנול התפתחותית (BPA) או אסטרדיול ethinyl חשיפה (EE2) 9-1,113. כמו כן הוא משמש בדרך כלל לphenotyping התנהגותם של זנים שונים עכבר 18-21, הערכה של השפעות הזדקנות 7,22-28, וdef הקשורים למחלה אלצהיימרicits במודלים של בעלי החיים 3,29-33, כמו גם את ההשפעות של פעילות גופנית ושינויים תזונתיים, סביבתיים, וחילוף חומרים של 34-42. יתרון עיקרי של שימוש במבוך בארנס הוא שזה גורם פחות מתח בנושאים ביחס למבוכי מים, כמו מבוך המים של מוריס 43, אם כי הן יכולות לגרום לעלייה חריפה בריכוזי corticosterone פלזמה בעכברים 44. כמבוך יבשה, מבוך בארנס עשוי להיות יותר ethologically רלוונטי למכרסמים יבשתיים 45. למרות ביצועי מבוך מים הוכח להיות רגיש יותר לשינויים גנטיים בעכברים 3,46,47, ביצועי מבוך בארנס הוא רגיש יותר לשינויים מסוימים אחרים 48,49. במודלים של מכרסמים שבו שימוש במבוך מים אינו אפשרי, מבוך בארנס עשוי לספק הערכה מכויל של שימור זיכרון המרחבי ביום 31. הגירויים המעטה מרתיעים בדרך כלל בשימוש במבוך בארנס (אורות כלומר בהירים),עם זאת, לא יכול לספק מוטיבציה מספקת למכרסמים כדי לאתר את כלוב הבריחה 45. יתר על כן, מכרסמים יכולים ללמוד שאין עונש מתרחש אם הם לא נכנסים לכלוב הבריחה. כך, במקום באופן פעיל מחפש את כלוב הבריחה, כמה מכרסמים פעיל לחקור את המבוך עבור משכיו של כל משפט ארוכים. כפי שנסקר על ידי קנארד ו24 ודרוף-Pak, חיפושים מוגברים זה יהיה להאריך את זמן האחזור כדי לאתר את כלוב הבריחה, אורך דרך, ולהגדיל את מספר הטעויות. לכן, מדידה של מספר פרמטרים, כוללים מיסות, שיעור שגיאה, זמן מושקע ברביעים הנכונים ולא הנכונים, המהירות, הזמן נע, זמן מנוחה, ואסטרטגיית חיפוש, עשויה באופן קולקטיבי לספק אינדיקציה טובה יותר לגבי יכולת הלמידה וזיכרון ניווט המרחבי של כל נושא 8 -10. בנוסף, ביצועים ניתן למדוד כמיסות כדי לאתר את כלוב הבריחה (מדד עיקרי) או חביון להיכנס לכלוב הבריחה (מדד כולל) ראשון. יש לי כמה arguאד כי צעדים עיקריים של ביצועים הם השתקפות מדויקת יותר של למידה מרחבית מאשר אמצעים כולל 50. רוב המחקרים, כוללים דוגמאות שתוארו כאן, השתמשו בהשהיה להיכנס לכלוב הבריחה כדי לקבוע שיעור שגיאה ואסטרטגיה חיפוש. יתר על כן, יש לי כמה מערכות תוכנת מעקב מערכת איתור גוף שלוש נקודות שניתן למדוד את התדרים של מרחרח את החורים שגויים לעומת נכונים. לבסוף, המבוך יש לנקות ביסודיות עם אתנול בין ניסויים כדי להסיר רמזי חוש הריח שיכול לספק רמזים או להוכיח מסיח את הדעת לבעלי חיים שלאחר מכן. עיצובי מבוך בארנס להשתנות אבל בדרך כלל לכל אחד יש 12 20 או חורי בריחה פוטנציאליים, רק אחת מהן מוביל לבית או כלוב בריחה. כלוב הבריחה עשוי להיות ממוקם באופן ישיר מתחת לחור המילוט בחלק העליון המבוך (למבוכים ללא קירות) או בנוי לתוך החומה המקיפה של המבוך. הרמזים יכולים להשתנות בגודל כ 16.5 גובה סנטימטר או רוחב (בתוך מ &#39;aze) לקו אופקי 21.6 ס&quot;מ רוחב שבוצעו מרצפה ועד תקרה של קיר החדר מחוץ למבוך. איורים 1-5 דוגמאות מופע של עיצובי מבוך בארנס למיני Peromyscus (איור 1) וחולדות (איורים 2-5). חייבים תקעים או תחתית שווא לכסות את חורי nonescape כדי למנוע את בעל החיים מהנפילה אל מחוץ למבוך. גודלו של חדר הבדיקה יכול להשתנות (~ 20 מ &#39;2), אבל זה חייב להיות גדול מספיק כדי לספק מספיק מקום במבוך, הרגלת בעלי החיים לחדר, אדיב מחשב עם וידאו הגדרה (אם משתמש בו), ומקום לניסוי לשבת במרחק (לפחות ~ 122 סנטימטר) ממנגנון המבוך כך שנוכחותם לא תפריע לביצועים של בעלי החיים. הקצאה של מיקום כלוב בריחה צריכה להיות מאוזנת בין קבוצות טיפול ויחסי מין. בעוד הנהלים הספציפיים שתוארו כאן אינם כוללים את מסתובבים במבוך בין ניסויים כדי להרתיע שימוש ברמזי ריח תוך מבוך, חלק ממחקריםלשלב הליך זה 50. בנהלים שלנו, הוא ניגב את המבוך נקי עם אתנול בין הניסויים לחסל רמזי ריח. באיתור כלוב הבריחה, שלושה סוגים של אסטרטגיות חיפוש הוגדרו (&quot;דפוסים&quot; שמכונים במקור על ידי 7 ברנס): 1) אקראיים, מבצעי מוגדרים כחיפושים מקומיים של חורים מופרדים על ידי שבילים חוצים את מרכז המבוך, 2) סדרתי, כפי שהוגדרו חיפוש שיטתי של חורים רצופים בכיוון השעון או נגד כיוון השעון, ו3) ישיר או מרחבי, שהוגדר כניווט ישירות לרבע הנכון מבלי לחצות את מרכז המבוך יותר מפעם אחת ועם שלוש או פחות שגיאים. באופן כללי, עם בדיקות חוזרות ונשנות, מכרסמים בדרך כלל להתקדם דרך אסטרטגיות החיפוש לפי הסדר הרשום (אקראי, סידורי, וישיר) 51. גם ניסוי בדיקה ללא כלוב הבריחה עשוי לשמש כאמצעי נוסף של זיכרון 50. הפרוטוקול והנציגתוצאות כאן פותחו עבור שני סוגים של מכרסמים (מכרסמים מכונים Peromyscus מינים אחרים קטנים) וחולדות. בעוד נהלים הכלליים אלה עשויים גם להחזיק לעכברים מולדים ו / או outbred (מאסכאלאס), יש להתייעץ מחקרים אחרים על הבדלי המתודולוגיה פוטנציאל למינים אלה האחרונים 18-21.

<table><tbody><tr><td>הערה: הפריטים המיועדים למכרסמים קטנים בלבד מודגשים. אותם פריטים המיועדים למכרסמים גדולים בלבד נטויים. פריטים שאינם מודגשים או נטויים מיועדים לשניהם.</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>פלטפורמת מבוך בארנס עם 12 או 20 חורי מילוט כל 30 מעלות. עבור חולדות, קוטר כל חור הוא 10.5 ס"מ ו -4 ס"מ מהקצה העליון של המבוך. לשימוש עם תוכניות מעקב אוטומטיות, יש צורך בחלק עליון שחור למכרסמים לבנים או חלק עליון לבן למכרסמים פיגמנטיים. עבור עכברים וחולדות, קוטר החלק העליון העגול הזה הוא 95 ו -122 ס"מ, בהתאמה.</td><td>US Plastics Corp, Lima, OH</td><td>42625</td><td>זהו החלק העליון של מבוך בארנס והמשטח שעליו מונח המכרסם. ניתן לבנות אותו ממגוון חומרים (למשל, פרספקס), אך לעבודה משבשת אנדוקרינית, חומר נטול פוליפרופילן BPA הוא אופטימלי. אחד החורים מוביל לכלוב מילוט; כל שאר החורים הם עיוורים או תחתית מזויפת. עבור מבוך העכברושים, מגלשות קטנות בצד התחתון של פלטפורמת המבוך מאפשרות לכלוב המילוט ולתחתית המזויפת להחליק פנימה.</td></tr><tr><td><חזק>2 בתקע צינור פוליפרופילן (24) 2 ב-90&deg; מרפק פוליפרופילן שחור (12) 2 אינץ' x 6 בפטמת צינור פוליפרופילן (1)</חזק></td><td><חזק>US Plastics Corp, לימה, אוהיו</חזק></td><td><חזק>30724 32086 30712</חזק></td><td><חזק>אלה נחוצים רק עבור המכרסם הקטן (למשל עכבר) Barnes Maze. התאמות אלה הן צינורות/מרפקים עיוורים או שאחד הצינורות מחובר לפטמת הצינור שמובילה לאחר מכן לכלוב המילוט.</td></tr><tr><td>תחתיות מזויפות למבוך בארנס עכברוש</td><td></td><td></td><td>אלה היו עשויים בהתאמה אישית מפלסטיק ABS ויוצקו בוואקום עבור מנגנון מבוך העכברושים.</em</td></tr><tr><td>>קיר/מחסום אלומיניום עגול (50 ס"מ גובה) סביב המבוך</td><td>Ace Hardware, Columbia, MO</td><td></td><td>במקרה של מכרסמים קטנים (למשל , עכברים), מחסום זה מונע מהם ליפול מהמבוך; מנגנון החולדה בדרך כלל אינו דורש זאת. ייתכן שהקיר לא יהיה נחוץ עבור עכברי מעבדה מאולפים </חזקים יחסית>.</td></tr><tr><td>מעמד תמיכה למשטח המבוך העליון</td> US <td>Plastics Corp, Lima, OH</td><td>42625</td><td>המעמד תומך בחלק העליון של פלטפורמת המבוך כך שהוא מוגבה מעל הרצפה (בדרך כלל, 70-100 ס"מ) כדי להניע את המכרסם לאתר את כלוב המילוט. המעמד יכול להיות בנוי מכל חומר.</td></tr><tr><td>רעש לבן</td><td>SleepMate Sound Conditioner, Marpac, Rocky Point, NC</td><td>980A</td><td>ניתן להשתמש ברעשי רקע כדי לחסום רמזים אקוסטיים היקפיים שעלולים לבלבל את בדיקות Barnes Maze על פני ניסויים ובעלי חיים</td></tr><tr><td>גופי תאורה ונורות 300-500 W עטופות בקליפות אלומיניום. לדוגמה, פנסי עבודה ניידים הלוגן Utilitech 500 W.</td><td>Ace Hardware או Lowes</td><td></td><td>אורות בהירים מספקים גירוי מרתיע קל המניע את המכרסם לאתר את כלוב המילוט. האורות תלויים בדרך כלל ~ 150 ס"מ מעל ראש המבוך.</td></tr><tr><td>כלוב מילוט. עבור מכרסמים קטנים, זה יכול להיות כלוב פוליפרופילן (27.8 ס"מ על 7.5 ס"מ על 13 ס"מ).</td><td>אנקרה, בלמור, ניו יורק</td><td>N40 PP</td><td>כלוב בריחת החולדות כאן נבנה בהתאמה אישית ויש לו רמפה המובילה לכלוב המילוט.</td></tr><tr><td>צינור אטום (חולדות בלבד) (קוטר 27 ס"מ; גובה 23 ס"מ) עם חתיכת קרטון עבה לכיסוי החלק העליון.</td><td></td><td></td><td>הצינור ממוקם במרכז המבוך והחולדה מונחת לתוך הצינור מלמעלה המכוסה בקרטון. ידית בחלק החיצוני של הצינור מאפשרת הרמה קלה יותר של הצינור, שלאחר מכן מתחיל את הניסוי. הצינור יכול להיות בנוי מכל חומר, אך צריך להיות אטום.</td></tr><tr><td>מצלמת וידאו ברזולוציה גבוהה (למשל , מצלמת וידאו דיגיטלית של Panasonic)</td><td>Panasonic, Secaucus, NJ</td><td>ICV19458</td><td>מצלמת הווידיאו ממוקמת מעל הראש ומתעדת ניסויים לניתוח מאוחר יותר.</td></tr><tr><td>רמזים גיאומטריים מחוץ למבוך או בתוך המבוך העשויים מנייר בנייה מקרטון איכותי</td><td>בכל חנות לציוד משרדי, כגון סטייפלס</td><td></td><td>רמזים חזותיים אלה מכוונים את החיה בתוך סביבת המבוך, ומספקים רמזים לגבי המיקום המרחבי של כלוב המילוט; בחולדות, רמזים מחוץ למבוך על הקירות עובדים היטב, בעוד שבמכרסמים קטנים הדורשים קיר סביב המבוך, יש להשתמש ברמזים בתוך המבוך.</td></tr><tr><td><וילון חזק>שחור להקיף את המבוך (מכרסמים קטנים בלבד)</חזק></td><td><חזק>כל חנות בדים ומלאכת יד, כגון Jo-Ann Fabrics</td><td></td><td>וילון שחור משמש במכרסמים קטנים (במיוחד מיני בר, למשל Peromyscus) כדי לשמור על תשומת הלב בתוך גבולות המבוך</חזק>.</td></tr><tr><td>70% אתנול</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>BP2818-4</td><td>לאחר כל ניסוי, מנקים את החלק העליון של המבוך וכלוב המילוט כדי למנוע רמזי ריח פוטנציאליים למכרסמים שנבדקו ברציפות.</td></tr><tr><td>תוכנת מעקב, כגון Ethovision, ומחשב עם כרטיס מסך מתאים ושטח כונן קשיח משמעותי (1 TB או יותר). לחלופין, ניתן להקליט סרטונים ישירות למחשב לניתוח מאוחר יותר באמצעות תוכנית כגון Win TV (Hauppauge Computer Works, Inc.).</td><td>נולדוס (ליסבורג, וירג'יניה)</td><td></td><td>תוכנת מעקב נדרשת כדי לנתח ניסויים לחביון לאיתור כלוב המילוט, מהירות, מרחק נסיעה, זמן מנוחה, זמן שהושקע בתנועה, זמן שהושקע ברבעים הנכונים לעומת שגויים, זמן שהושקע סביב חור המילוט, מספר שגיאות או כניסות לחורים שגויים, ואסטרטגיית חיפוש כוללת המשמשת למציאת כלוב המילוט.</td></tr><tr><td>כוננים קשיחים חיצוניים, כגון Seagate או WD, עם זיכרון של 1-2 TB לפחות</td><td>כל חנות לציוד משרדי, כגון Staples.</td><td></td><td>יש לגבות הקלטות וידאו במיקום נפרד אחד לפחות.</td></tr><tr><td>תוכנית הקלטת וידאו, e. תוכנית WinTV</td><td>Hauppauge Computer Works, Inc., Hauppauge, NY</td><td></td><td>אם תוכנת מעקב אינה זמינה בזמן הבדיקה, יש להקליט את הניסויים בווידאו לניתוח מאוחר יותר</td></tr></tbody></table>

בארנס מבוך אסטרטגיות בדיקה עם קטן ומודלים מכרסמים גדולים

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

למידה וזיכרון של מכרסמים מעבדה המרחבית לעתים קרובות העריכו באמצעות יכולת ניווט במבוכים, הפופולרי ביותר מהם המים וקרקע יבשה במבוכים (ברנס). הוא חשב ביצועים משופרים מעל מפגשים או ניסויים כדי לשקף את הלמידה וזיכרון של מיקום כלוב בריחה / פלטפורמה. נחשב פחות מלחיץ מ מבוכי מים, מבוך בארנס הוא עיצוב פשוט יחסית של למעלה פלטפורמה עגולה עם כמה חורים במרווחים שווים מסביב לקצה המעטפת. אבל כל אחד מהחורים בתחתית כפול או מסתיים סמיות, בעוד אחד מוביל לכלוב בריחה. גירויים המעטה מרתיעים (למשל אורות בוהקים מלמעלה) מספקים מוטיבציה לאתר את כלוב הבריחה. חביון לאתר את כלוב הבריחה ניתן למדוד במהלך הפגישה, עם זאת, נקודות קצה נוספות בדרך כלל דורשים הקלטת וידאו. מהקלטות וידאו אלו, שימוש בתוכנת מעקב אוטומטי יכול ליצור מגוון של נקודות קצה, כי הם דומים לאלו שיוצרו במבוכי מים (לדוגמא: &lt;/ Em&gt; המרחק שעבר, מהירות / מהירות, זמן בילה ברבע הנכון, משך הזמן נע / נח, ואישור של חביון). סוג של אסטרטגית החיפוש (כלומר אקראית, סידורי, או ישירה) יכול להיות מסווג גם כן. שיטות בניית מבוך ובדיקות בארנס יכולות להשתנות למכרסמים קטנים, כגון עכברים, ומכרסמים גדולים, כגון חולדות. לדוגמא, בעוד רמזים נוסף מבוך הם יעילים לחולדות, מכרסמים פראיים קטנים יותר עשויים לדרוש רמזי התוך מבוך עם מחסום חזותי ברחבי המבוך. גירויים מתאימים חייבים להיות מזוהים אשר להניע את המכרסם לאתר את כלוב הבריחה. בארנס ומבוכי מים שניהם יכולים להיות זמן רב כ4-7 ניסויים מבחן נדרשים בדרך כלל כדי לזהות ביצועי למידה וזיכרון משופרים (למשל שיהוי קצר יותר או נתיב אורכים כדי לאתר את פלטפורמת הבריחה או כלוב) ו / או הבדלים בין קבוצות ניסוי. למרות זאת, במבוך בארנס הוא הערכה התנהגותית מועסק נרחב מדידת יכולות ניווט במרחב ובהשיבוש הפוטנציאלי שלהם על ידי מניפולציות גנטיות, neurobehavioral, או חשיפה לסמים / toxicant.

עכברי צבי זכר לבגרות מינית תלויים ביכולת ניווט מרחבית משופרת לאיתור שותפים פוטנציאלי רבייה, אשר הופצו באופן נרחב בכל הסביבה. לנשים בהריון וחשיפה למבוגרים לטסטוסטרון שניהם חיוניים בארגון והפעלה זה מאוחר יותר זכר בוגר התנהגות 53. ככזה, הוא היה חזקה כי חשיפה המוקדמת לתרכובות האנדוקרינית שיבוש עלולה להפריע תכונה מאוחר יותר אצל גברים. כדי לבדוק השערה זו, עכברי צבי זכר ונקבה נחשפו התפתחותית באמצעות הדיאטה האימהית לכמה מינונים רלוונטיים לסביבה של BPA בדיאטה פיטואסטרוג...

מבוך בארנס היבשתי נעשה שימוש נרחב כדי למדוד את יכולת ניווט המרחבי לגירויים המעטה מרתיעים תגובה. במשך ימים רצופים, ביצועים (למשל השהיה לאתר כלוב בריחה) של נבדקי ביקורת משתפרת, מעיד על למידה וזיכרון רגילים. הבדלים בין חולדות ועכברים מחייבים שינויי מנגנון ומתודולוגיה המפורטים כאן.

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבחון יכולות למידה וזיכרון מרחביות במכרסמים קטנים וחולדות עם מבוך בארנס היבש. זה מושג על ידי הרגלת חיות הניסוי לחדר הניסויים ולמבוך בארנס. השלב הבא הוא למקם את החיה במרכז המבוך ולהתחיל לעקוב אחר זמן ההשהיה שלה כדי לאתר את כלוב המילוט המעקב נעצר כאשר החיה נכנסת לכלוב המילוט או לאחר 300 שניות.התוצאות יכולות להראות שיבושים בלמידה ובזיכרון המרחבי כמו חביון מוגבר, שיעורי שגיאות מוגברים וכישלון בשינוי אסטרטגיות חיפוש. היתרונות העיקריים של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו מבוך המים, הם שהיא קצת פחות מלחיצה, קלה יותר לביצוע ורלוונטית יותר מבחינה אקולוגית למכרסמים יבשתיים. אם כי שיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי ההשפעות הטוקסיקולוגיות של למידה מרחבית ושיבושים בזיכרון.ניתן ליישם אותו גם בתחומים אחרים כגון הפרעות ניווניות, הזדקנות ופגמים קוגניטיביים מולדים. עיצובי המבוך של בארנס משתנים, אך בדרך כלל לכל אחד מהם יש 12 או 20 חורי מילוט פוטנציאליים, שרק אחד מהם מוביל לבית או לכלוב מילוט. כלוב המילוט עשוי להיות ממוקם ישירות מתחת לחור המילוט בראש המבוך, או מובנה בקיר המקיף את המבוך.הרמזים יכולים להשתנות בגודלם מכ-16.5 סנטימטרים, גובה או רוחב בתוך המבוך לקו אופקי, ברוחב 21.6 סנטימטרים הממוקם מהרצפה עד התקרה של קיר החדר מחוץ למבוך. תקעים או תחתית מזויפת חייבים לכסות את החורים שאינם נמלטים כדי למנוע מהחיה ליפול מהמבוך. גודל חדר הבדיקה יכול להשתנות, אבל חייב להיות בו הרבה מקום למבוך.מקום לכלובי בעלי חיים, חדר למחשב עם הגדרת וידאו, ומקום לנסיין לשבת לפחות מטר ורבע מהמבוך. חשוב שבעלי החיים ייחשפו לתנאי סביבה אחידים כדי למזער רעשים משתנים או רמזים חיצוניים שישפיעו באופן שונה על ביצועי החיה. יש לאזן את הקצאת מיקום כלוב המילוט בין קבוצות הטיפול ומין בין הניסויים.המבוך ניגב באתנול כדי להסיר רמזי ריח, וכך גם תיבת הבריחה. סרטון זה אינו כולל פרטים על פעולת תוכנת מעקב ספציפית מכיוון שהם ככל הנראה ספציפיים לתוכנה. עם זאת, מערכת כזו רצויה בזמן הבדיקה העקבי.הגדר את החדר על ידי הדלקת האורות מעל המבוך ומיקום. אין להזין שלטים מחוץ למעבדה 30 דקות לפני הניסוי הראשון. הביאו את העכברים לחדר הבדיקה בכלובים הביתיים הרגילים שלהם כדי לעזור להם להתרגל.הגדר את תוכנית המעקב. כעת הוציאו בעדינות את העכבר הראשון מהכלוב הביתי שלו והניחו אותו בקופסת הפלסטיק הגבוהה והמכוסה. הרגילו את החיה לכלוב המילוט למשך דקה אחת.ודא שהנייר שחוסם את הצינור הוסר מחור המילוט ושכל החורים האחרים סתומים. הניחו את העכבר במרכז המבוך וכסו את העכבר בקופסת פלסטיק. לאחר הנחת החיה במרכז המבוך, עברו בשקט לאזור המחשב והתחילו במהירות את ההקלטה.תוך כדי ניטור ביצועי החיה במחשב רשום את מספר החור, מספר הניסוי, אסטרטגיית החיפוש ומספר השגיאות שנעשו. שגיאה מוגדרת כרחרוח של חור שגוי. הערכת אסטרטגיית החיפוש עשויה להתבצע בשידור חי או מאוחר יותר עם דפוסי המעקב המוקלטים.אסטרטגיה ישירה מראה שהמכרסם נכנס ישירות לכלוב המילוט עם שלוש טעויות או פחות. דפוס סדרתי כולל נסיעה לאורך היקף המבוך עד לאיתור כלוב המילוט. ולבסוף, הדפוס עשוי להיות אקראי, כלומר המבוך נחצה דרך המרכז מספר פעמים כדי לבדוק חורים שונים.עצור את תוכנית המעקב כאשר לבעל החיים יש את כל ארבע הכפות בתוך כלוב המילוט. אם החיה לא מצליחה להימלט מהמבוך תוך חמש דקות, הפסק את ההקלטה. לאחר מכן דחף בעדינות את החיה לחור המילוט.אפשרו לבעלי החיים שנדחפו להישאר בכלוב המילוט למשך שתי דקות בדיוק לפני החזרתם לכלוב הביתי שלהם. כעת יש לרסס את החלק העליון של המבוך באתנול 70% ולנגב יבש. לאחר מכן החזירו את החיה לחלל מחוץ לחדר ונבדקו שוב כעבור 30 דקות.כל עכבר נבדק פעמיים ביום. לפני שתתחיל את העכבר הבא במבוך, חבר את חור המילוט הנכון קודם לכן והסר את תקע הנייר החוסם את החור מחור המילוט המיועד לכך. ההגדרה הבאה של אובייקט הנושא כוללת מרכוז המבוך מתחת לאורות העיליים, שחייבים להיות דולקים כדי להבטיח שהתחתית המזויפת שחוסמת חורים שאינם נמלטים ומונעת מהחיה ליפול החוצה נמצאת היטב במבוך וכי כלוב המילוט נמצא במיקום המיועד.עבור הנושא הראשון, ראש המבוך של בארנס חייב להיות מרתיע מספיק כדי להניע את החיה. כדי למצוא את כלוב המילוט, קבענו שתאורה בהירה אינטנסיבית ישירות מעל ראש המבוך משרתת מטרה זו היטב. כמו כן, ודא שהמחשב והמצלמה מוכנים ושעון עצר זמין.כעת הפעל רעש לבן כדי להחליש את רעשי הרקע. הכיסא צריך להיות במרחק של כמטר מהמבוך ולהישאר שם לאורך כל הבדיקה. הכן טיימר לספירה לאחור של שתי דקות, אך לא להשמיע רעשים מחוץ לחדר.הצב שלט אל תיכנס. יש להצטייד גם בגיליון מבחן לרישום הערות. 30 עד 60 דקות לפני בדיקת החולדה הראשונה, הביאו את בעלי החיים בכלובי הבית שלהם לחדר הבדיקה כדי לאפשר התרגלות.כעת, מקמו צינור עבור החולדה כדי להתחיל את הניסוי במרכז מאי על הצינור, הניחו כרטיס כותרת עם תעודת הזהות של החיה כדי לזהות בקלות את הסרטון אם נעשה בו שימוש. הקלט כמה שניות כדי ללכוד את גיליון הזיהוי של בעל החיים. הוציאו את החיה מביתה והניחו אותה בעדינות עם הראש לתוך כלוב המילוט.לאחר מכן כסו את כלוב המילוט בתחתית מזויפת והתחילו את הטיימר של שתי הדקות. לאחר שתי דקות, הוציאו בעדינות את החיה מכלוב המילוט והניחו אותה במרכז הצינור. החזר את גיליון הזיהוי לראש הצינור והרם בעדינות את המכלול, ושחרר את החולדה.הפעל מיד את שעון העצר והתיישב בכיסא הבוחן על גיליון הבדיקה. רשום את השעה ביום למשפט. התחל והמתן בסבלנות בזמן שהחולדה משתמשת עד חמש דקות כדי למצוא את כלוב המילוט.הקלט את זמן שעון העצר. כאשר החולדה מוצאת את כלוב המילוט, הוציאו את החיה מכלוב המילוט והחזירו אותה לכלוב הבית שלה. אם החולדה לא מוצאת את כלוב המילוט תוך חמש דקות, שימו לב לכך ואז הובילו אותה בעדינות לשם.לאחר 15 שניות בכלוב, החזירו את החולדה לכלוב הביתי שלה. אם החולדה עוזבת את המבוך מבחינה נפשית, שימו לב לשעה ותפסו במהירות את החיה. אם הוא נלכד תוך 10 שניות, החזירו אותו למרכז המבוך והמשיכו בניסוי.אחרת לבטל את הניסוי ולהשמיט אותו מהניתוח. בכל מקרה, רשום את זמן הנפילה או קפוץ על גיליון הבדיקה לאחר המשפט, עצור את ההקלטה ורשום הערות על הניסוי בין הניסויים. הסר כל שתן או צואה מראש המבוך.רססו אותו באתנול 70% ונגבו אותו היטב. נקו גם את כלוב המילוט עם 70% אתנול. הניחו לו להתייבש באוויר והשתמשו בכלוב מילוט שני לניסיון הבא.תמיד חלופי כלובי מילוט. כעת חזור על התהליך. בודק את החיה הבאה.בדקו כל בעל חיים רק פעם ביום. בימים שלאחר מכן, הפעל את המבוך עם שינוי אחד. הנח את החולדות ישירות לתוך הצינור המרכזי מהכלוב הביתי, תוך השמטת ההתרגלות של כלוב המילוט, נקודה.עכברים יקרים, מין פוליגמי נחשף התפתחותית למינונים רלוונטיים לסביבה של BPA בתזונה נטולת פיטואסטרוגן, או אסטרוגן באותה תזונה כמו ביקורת חיובית או דיאטה נטולת פיטואסטרוגן כביקורת שלילית, העכברים הוערכו באמצעות מבוך בארנס. שני מינוני ה-BPA הגבוהים ביותר הובילו לשיבוש יכולת הניווט המרחבית, אך לא המינון הנמוך ביותר של BPA שנבדק, הראה ליקויים שווים בלמידה מרחבית וחוסר יכולת לעבור לאסטרטגיית החיפוש הישיר במהלך תקופת הניסוי, גברים. עכברים יקרים, שנחשפו למינונים גבוהים יותר של BPA הראו חביון ממושך בהשוואה לגברים עם BPA במינון נמוך ויחסית לגברים עם ביקורת שלילית.הבקרות החיוביות לאסטרוגן ביצעו ביצועים גרועים באותה מידה, יחד עם חביון מוגבר הגיע גם שיעור טעויות מוגבר. בניגוד לעכברים זכרים, עכברים נקבות שנחשפו למינון EE 2 ו-BPA בינוני, אך לא למנות BPA אחרות הראו דפוסים גבריים של למידה וזיכרון מרחבי. זה מודגם על ידי השימוש החריג שלהם באסטרטגיית החיפוש הישיר ובאופן הגיוני זה בא לידי ביטוי בהשהיה מופחתת.בניגוד לעכברי צבי פוליגמיים, בני דודיהם הקרובים, עכברי קליפורניה הזכרים המונוגמיים קיבלו גם הם מינון עם חשיפה מוקדמת ל-BPA ו-EE 2 ונבדקו במבוך. אסטרטגיות החיפוש לא הושפעו. עכברי קליפורניה זכרים לא השתמשו באסטרטגיית החיפוש הישיר כמו עכברי צבי זכרים במין זה, BPA ו-EE 2 לא השפיעו על שגיאות חיפוש ביחס לביקורת.שימו לב שבהשוואה לביקורת עכברי צבי מבוקרים, עכברי קליפורניה לא הפחיתו את מספר הטעויות שנעשו במהלך שבעת ימי הבדיקה הרצופים. גם ההשהיה לא הושפעה. ההבדל שנצפה בשיבוש הניווט המרחבי בין עכברי צבי לעכברי קליפורניה נובע ככל הנראה מהבדלים בין מינים בפגיעות התנהגותית לחשיפה התפתחותית ל-BPA.בלי קשר, ברור שהמינון ההתפתחותי לא שינה באופן מדיד את ההתנהגויות הללו של עכברי קליפורניה תחת משטר הבדיקות. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כגון חרדה או הערכות פעילות על מנת לענות על שאלות נוספות כגון האם בעלי החיים מפגינים רמות חרדה או פעילות משתנות או ליקויים קוגניטיביים אחרים. יש לציין כי לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך למחקר בתחום הקוגניציה לחקר ניווט בחלל במינים שונים של מכרסמים ולא מכרסמים.

barnes-maze-testing-strategies-with-small-and-large-rodent-models

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

סרטון וידאו זה מראה כיצד להשתמש במבוך בארנס עם עכבר. הליך הבדיקה של מבוך בארנס משמש חוקרים להערכת למידה מרחבית וזיכרון בחיות מעבדה לאחר ניסויים חוזרים ונשנים.

מבוך בארנס: שיטה להערכת למידה מרחבית וזיכרון בחיות מעבדה

מטרת פרוטוקול זה היא לחקור קוגניציה מרחבית במכרסמים. מבוך המים הכפול H הוא מבחן חדשני, שימושי במיוחד להבהרת המרכיבים השונים של למידה, קונסולידציה וזיכרון, כמו גם את יחסי הגומלין בין מערכות זיכרון.

זוגי H-המבוך: מבחן חזק התנהגות למידה וזיכרון במכרסמים

פרוטוקול זה מתאר assay התנהגותי, המבוסס על הבדיקה מבוך בארנס, ללמוד איך אינסטינקטיבית הגנתי פעולות עוברות שינוי באמצעות הידע של הסביבה המרחבית.

וזמינותו התנהגותית עבור חוקרים את התפקיד של זיכרון מרחבי במהלך ההגנה אינסטינקטיבית בעכברים

מאמר זה מציג את מנגנון T-maze אוטומטיות שהמצאנו, פרוטוקול מבוסס על זה מכשירי ניתוח החלטות המבוססות על עיכוב מאמץ החלטות המבוססות בחולדות לנוע חופשי.

T-maze אוטומטית המבוסס על המנגנון ופרוטוקול לניתוח עיכוב מאמץ מבוססות החלטות בחולדות העברה חינם

פרוטוקול זה מודד מרחבי למידה וזיכרון באמצעות המבוך בארנס. פרדיגמה עלמה במצוקה הרומן משמשת להערכת פעילות גינקולוגיות והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים.

ניתוח מרחבי למידה והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים באמצעות בארנס מבוך פרדיגמות עלמה במצוקה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מבוך הניתן להגדרה מחדש, מערכת ייחודית לבדיקת ניווט מרחבי ופנוטיפים התנהגותיים במכרסמים. יכולת ההסתגלות של מערכת מבוך זו מאפשרת ביצוע ניסויים שונים בסביבה פיזיקלית אחת. הקלות של סידור מחדש של מבנים מייצרת תוצאות ניסוי אמינות וניתנות לשחזור.

שימוש במערכת מבוך הניתנת להגדרה מחדש כדי לשפר את יכולת השחזור של בדיקות ניווט מרחביות במכרסמים

רוב ניסויי ההתנהגות של מכרסמים תוכננו במקור עבור חולדות. בשל ההבדלים ההתנהגותיים בין חולדות לעכברים, לעיתים נדרשים שינויים עבור עכברים. אנו מציגים שיטה לבדיקת זיכרון עבודה מרחבי בעכברים, תוך מזעור הלחץ במהלך מטלת זיכרון העבודה.

משימת זיכרון עבודה מרחבי מעוררת תיאבון לעכברים במבוך רדיאלי חצי אוטומטי בעל 8 זרועות, המפחיתה את אסוציאציות הזיכרון המפחיד במבוך

אנו מדגימים את התועלת של התנהגות בניית קן בעכברי מעבדה כאינדיקטור לרווחה. ניקוד קן הוא טכניקה רגישה המשתנה על ידי טמפרטורה, מחלה ותוקפנות. הזמן להשתלב במבחן קן (TINT) הוא הערכה פשוטה בצד הכלוב שיכולה לזהות כאב לאחר הניתוח.

בניית קן כאינדיקטור לבריאות ורווחה בעכברי מעבדה

ניטור ממושך והמקיף של עכברים בסביבת כלוב-הבית מספק הבנה עמוקה יותר של התנהגות חריגה במודלים עכבריים של מחלות מוח. מאמר זה מתאר את ההתנהגות המשולבת התחנה (INBEST) כמרכיב המרכזי בניתוח התנהגות עכשווי.

ההתנהגות phenotyping של מודלי Murine מחלות עם ההתנהגות המשולבת התחנה (INBEST)

כתב יד זה מתאר פרוטוקול לבחינת מערכת הריח של מכרסמים. מבחן ההתרגלות/אי-השבתה של חוש הריח יאפשר לחוקרים לקבוע אם עכבר מתרגל לריח המוצג שוב ושוב והאם העכבר מפגין חוסר התרגלות כאשר מוצג לו ריח חדש.

בדיקה לריח אפליה והרגלה בעכברים

למדו להעריך למידה מרחבית וזיכרון במכרסמים באמצעות מבוך בארנס יבשתי. שיטה זו מציעה חלופה פחות מלחיצה למבוך מים ומאפשרת מעקב אחר שיפור ביצועים לאורך זמן.

בארנס מבוך אסטרטגיות בדיקה עם קטן ומודלים מכרסמים גדולים

גלה סרטונים נוספים