Name: שיטה שונה לHeterotopic מאוס לב Transplantion (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-23T19:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 29 s
Description: למדו שיטת השתלת לב הטרוטופית בעכברים באמצעות מיקרוכירורגיה. טכניקה זו מאפשרת חקר דחיית שתלים ותאימות גנטית בין זני עכברים שונים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי המועצה הלאומית לבריאות והמחקר רפואי (NHMRC) של אוסטרליה פרויקט גרנט 1,029,205, על ידי קרן Microsearch של אוסטרליה, ועל ידי קרן המחקר הרפואי Myee קודרינגטון.

לפני תחילת ניסויים, לקבל אישור מועדת האתיקה הטיפול בבעלי חיים של המוסד הרלוונטי לניסויים המתוכננים. לשמור על עכברים בבהתאם לדרישות של המוסד שלך. הפרוטוקול הבא אושר על ידי ועדות אוניברסיטת סידני ונסיך מלכותי אלפרד חולים. לפני תחילת ניתוח, יש לנקות ביסודיות את כל המכשירים ועיקור על ידי שריה ב80% אתנול. מוסדות מסוימים קובעים מעוקר אולם זה יכול לגרום נזק למכשירי microsurgical קנס בטווח הארוך. איפה ציוד חד פעמי סטרילית שימוש אפשרי. 1. הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי עכבר עם isoflurane במכל אטום ואז למקם אותו פרקדן על לוח הפעלה, חיבור חרטום הרדמה במהירות. הלימות מבחן של הרדמה על ידי צובט את הרגל האחורית כדי להבטיח שאין רפלקס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את העור עם להב כירורגים ולעקר עם 80% אתנול. בנוסף, chlorhexidine 2% ב70% אלכוהול איזופרופיל יכול לשמש עבור עיקור עור. במהלך האינדוקציה של הרדמה ריכוז isoflurane הוא 3%, אך לצמצם את זה ל1-1.5% לצורך התחזוקה. לבצע התאמות קלות לריכוז זה כדי לשמור על נשימה סדירה וקצב לב. לשמור על טמפרטורה של החיה על כרית חימום. </li></ol> 2. מבצע תורם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך פתיחת בית החזה כדי לחשוף את הלב וכלי ידי חיתוך החזה באמצעות שני הצדדים של כלוב הצלעות מקצה הצלעות עד לבית השחי ואחרי קיצוץ רוחבי ברמה של xiphisternum כדי ליצור קיר דש חזה. הרם דש זה לצד הראש ולהצמיד אותו להפעלת הלוח. לקרוע את קרום הלב כדי לחשוף את הלב וכלי דם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את הווריד הנבוב הנחותים עם מלקחיים ביד אחת ועם להזריק אחר 1 מיליליטר הפרוקסימלי מלח heparinized קר ללב דרך IVC, ואז לשים מהדק עורק קטן על IVC לprevenזרימה לא של פתרון זלוף חזרה דרך חור המחט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בגזה וניצן כותנה, לחזור בו מהלב כלפי מטה כדי לחשוף את אב העורקים עולים ועורק ריאה. עובר להב אחד זוג microscissors דרך הערוץ האחורי (הסינוס רוחבי) לחבילה של אב העורקים ועורק ריאה וחתך את אב העורקים ועורק ריאה יחד ככל distally ככל האפשר כדי להבטיח אורך מספיק להשקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עניבה ולחלק את IVC, וריד נבוב ימני מעולה (SVC), עזבה SVC וורידים ריאתי באמצעות 6-0 חוט משי. לקשור את IVC והתקין SVC בנפרד ואז למקם אחורי חוט בודד ללב לכתר SVC עזב יחד עם ורידי ריאתי ולקשור אותו. קציר הלב מאתר התורם על ידי חיתוך כלי דיסטלי לקשרים, אז לשמור אותו בתמיסת מלח סטרילית קרה על 4 מעלות צלזיוס עד להשתלה. התוצאה היא מותו של התורם על ידי exsanguination. </li></ol> 3. מבצע נמען <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימינמען כאמור לעיל (סעיף 1). לגלח בזהירות בטן כדי למנוע גירוי, ולאחר מכן לבצע פיום בטן על ידי חתך קו האמצע מחיק לxiphisternum ולחזור בו שימוש במהדקי נייר התכופף כדי ליצור מפשקים. עטוף את המעי בגזה ספוג מלוחה סטרילית חמה ולחזור לפינה הימנית העליונה של הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לחשוף את אב העורקים אינפרא הכליות וIVC, לשחרר את המגזרים ארוזים של אב העורקים וIVC מעורק הכליה השמאלי ווריד להסתעפות הכסל על ידי החלוקה אותם מכלי המותני באמצעות מכשיר כויה. תשמור על עצמך שהכווייה היא בטמפרטורה הנכונה ומשמשת למספיק זמן כדי לחלק ולאטום את קצות כלי הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל מהדק כלי atraumatic קטן לאב העורקים ומגזרי IVC distally וproximally. עושה חתך בקיר הקדמי של אב העורקים על ידי ניקוב חור עם מחט 30 G הראשון; לאחר מכן לחתוך חתך אנכי עם microscissors כדי להתאים את הגודל של אב העורקים התורמים. לשטוף את לומן אב העורקים עם מלוחים heparinized כדי להסיר כל blקרישי ood. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להביא את הלב התורם לאתר הנמען מכוסה בגזה הספוגה בתמיסת מלח קר ולמקם אותו לצד הימני של הבטן. ודא אב עורקי התורם ממוקם בסמוך לחתך באב עורקי הנמען ועורק הריאה התורם ממוקם בסמוך לנמען IVC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Anastomose הצד מקצה לאב העורקים תורם לאב העורקים הנמען באמצעות ריצת 10-0 תפרי ניילון החל מהפינה הפרוקסימלית והתפירה בצדו השמאלי הראשון עד שמגיע לפינה המרוחקת מהמרכז, באיזה שלב של בעלי החיים הוא הסתובב דרך 180 °. בעדינות להזיז את הלב התורם לצד השמאל של הבטן כדי לחשוף את צדו הימני של אב העורקים ולהמשיך תפירה דרך צדו הימני של קיר אב העורקים מהקצה הדיסטלי לקצה הפרוקסימלי. לפני סגירת ההשקה של אב העורקים, בעדינות לשטוף את לומן עם מי מלח heparinized כדי להסיר כל קריש ואוויר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Anastomose עורק הריאה התורם (PA) קצה לצד עם הנמען IVC. עושה חתך vertically עם microscissors בקיר הקדמי של IVC באתר בהתאם להשקה העורק. Anastomose תורם הרשות לנמען IVC עם ריצת 10-0 תפרי ניילון החל מהקצה הדיסטלי של הקיר השמאלי בתוך לומן של IVC. לאחר שהגיע לקצה הפרוקסימלי, ימשיכו תפרים בצד ימין הקיר הקדמי עד הקצה הדיסטלי כדי להשלים את ההשקה. לפני סגירת ההשקה, בעדינות לשטוף את לומן כדי להסיר כל קרישים ואוויר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני ששחררתי את מהדק כלי, חתיכות מקום Gelfoam סביב אתרי ההשקה והפעילו לחץ עדין עם המוליך כותנה עד עצירת הדימום מושגת. בזמן revascularization, שחרר את המהדק דיסטלי הראשון, ואחריו את המהדק הפרוקסימלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר revascularization, להחיל מלוח חם על 37 מעלות צלזיוס לשתל חיצונית כדי לסייע להתאוששות שלה. השתל מתחיל בדרך כלל פרפור מייד וחוזר באופן ספונטני לקצב סינוס תוך כמה דקות. הזרק 0.6 מיליליטר חםתת עורי מלח כדי לשמור על לחות של הנמען. להזריק תת עורי עצירות לשיכוך כאבים לפני השלמת הניתוח </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את הפצע בבטן עם תפר ריצה נספג אחד 5-0 לשתי השכבות. התחל על ידי מילוי השכבה הפנימית ולהמשיך לאורך העור. </li></ol> 4. שחזור וניטור השתל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק אמפיצילין לטיפול מונע של זיהום ולמקם את הנמען על כרית חימום ב37 מעלות צלזיוס למשך החלמה. רוב בעלי החיים להתאושש במהירות ובדרך כלל שותים ולעתים קרובות אכילה בתוך 3 שעות. אם העכבר מראה סימנים של מצוקה, לבחון מקרוב כדי לקבוע גורם. אם אין סיבה ברורה, לטיפול בעצירות ולעקוב מקרוב. להתייעץ עם וטרינר אם תסמינים חמורים או נמשכים יותר מ -8 שעות ולשקול המתת חסד. אם יש צורך, לתת המשך 12 זריקות לשעה של עצירות עד סימפטומים לפתור. אם העכבר מראה סימנים של מצוקה לאחר 8 שעות, לתת 12 ממשיכיםזריקות לשעה של עצירות עד שהם פותרים. התייעץ עם הווטרינר אם תסמינים ממשיכים במשך יותר מ 48 שעות ולהרדים במידת צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על קצב לב שתל על ידי מישוש בטן ישיר ולהקליט את כוחו של קצב כ+ + + + לשתל בריא + לפעימה חלשה בשל דחייה מתקדמת ו-- כמכות שאינן בשל כדי להשלים את הדחייה של השתל. לפקח על עכברים יומיים ל10 הימים הראשונים, ולאחר מכן 3x בשבוע לתקופת הניסוי. </li></ol>

<ol><li>Aramaki, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-10+but+not+transforming+growth+factor-beta+is+essential+for+generation+and+suppressor+function+of+regulatory+cells+induced+by+intratracheal+delivery+of+alloantigen%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Interleukin-10 but not transforming growth factor-beta is essential for generation and suppressor function of regulatory cells induced by intratracheal delivery of alloantigen.</a> Transplantation. 79, 568-576 (2005).</li>
<li>Chen, R. H., Bushell, A., Fuggle, S. V., Wood, K. J., Morris, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+granzyme+A+and+perforin+in+mouse+heart+transplants+immunosuppressed+with+donor-specific+transfusion+and+anti-CD4+monoclonal+antibody%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Expression of granzyme A and perforin in mouse heart transplants immunosuppressed with donor-specific transfusion and anti-CD4 monoclonal antibody.</a> Transplantation. 61, 625-629 (1996).</li>
<li>Poulin, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-9+promotes+eosinophilic+rejection+of+mouse+heart+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Interleukin-9 promotes eosinophilic rejection of mouse heart allografts.</a> Transplantation. 76, 572-577 (2003).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Thorac.+Cardiovasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 57, 225-229 (1969).</li>
<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li>
<li>Larsen, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD40-gp39+interactions+play+a+critical+role+during+allograft+rejection.+Suppression+of+allograft+rejection+by+blockade+of+the+CD40-gp39+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">CD40-gp39 interactions play a critical role during allograft rejection. Suppression of allograft rejection by blockade of the CD40-gp39 pathway.</a> Transplantation. 61, 4-9 (1996).</li>
<li>Saitovitch, D., Bushell, A., Mabbs, D. W., Morris, P. J., Wood, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+induction+of+transplantation+tolerance+with+a+nondepleting+anti-Cd4+monoclonal+antibody+and+donor-specific+transfusion+before+transplantation.+A+critical+period+of+time+is+required+for+development+of+immunological+unresponsiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Kinetics of induction of transplantation tolerance with a nondepleting anti-Cd4 monoclonal antibody and donor-specific transfusion before transplantation. A critical period of time is required for development of immunological unresponsiveness.</a> Transplantation. 61, 1642-1647 (1996).</li>
<li>Callaghan, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+allograft+survival+by+inhibitory+FcgammaRIIb+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Regulation of allograft survival by inhibitory FcgammaRIIb signaling.</a> J. Immunol. 189, 5694-5702 (2012).</li>
<li>Qian, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+donor+MHC+Class+I+or+Class+II+antigen+deficiency+on+first-+and+second-set+rejection+of+mouse+heart+or+liver+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Impact of donor MHC Class I or Class II antigen deficiency on first- and second-set rejection of mouse heart or liver allografts.</a> Immunology. 88, 124-129 (1996).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+acceptance+of+mouse+kidney+allografts+is+associated+with+increased+Foxp3+expression+and+differences+in+the+B+and+T+cell+compartments%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Spontaneous acceptance of mouse kidney allografts is associated with increased Foxp3 expression and differences in the B and T cell compartments.</a> Transpl. Immunol. 24, 149-156 (2011).</li>
<li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+Heart+Transplantation+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Heterotopic Heart Transplantation in Mice.</a> J. Vis. Exp. , (2007).</li>
<li>Mottram, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrocardiographic+monitoring+of+cardiac+transplants+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Res%22%5BJournal%5D)">Electrocardiographic monitoring of cardiac transplants in mice.</a> Cardiovasc. Res. 22, 315-321 (1988).</li>
</ol>

יש המחברים אין לחשוף.

השתלת לב עכבר היא שיטה microsurgical מאתגרת שדורשת מיומנות כירורגית רבה להורים. ההיבט המאתגר ביותר הוא בקוטר הקטן של הכלים. בנוסף, יש צורך להגביל את זמן פעולת נמען ודימום. הטכניקה להשתלת לב עכבר תוארה לראשונה על ידי קורי et al. ב1973 ולאחר מכן על ידי מוטרם et 12 אל. השינויים שלנו כוללים את הנקודות הבאות. ראשית, זלוף המיידי של תורם הלב עם מי מלח heparinized קר הבאים פתיחת בית החזה וחיתוך רוחב של אב העורקים ועורק ריאה צרור קצר לאחר זלוף מונע איס...

מודלים של בעלי החיים של השתלת איברים יכולים לספק מידע רב ערך לשיפור טיפול בחולי השתלה קליניים. מודלים עכבר הם שימושיים במיוחד עבור לומד את המנגנון החיסונית של דחיית השתלת איברים או קבלה בשל מגוון הרחב של עכברים וחומרים כימיים מסוימים לעכברים שאינם זמינים למודלים של בעלי חיים אחרים 1-3 מהונדסים גנטי. אתגר עם מודלים עכבר של השתלה הוא בגודל הקטן של התורמים ומקבלי הדורשים מיומנות טכנית רבה כדי להשיג תוצאות משביעות רצון. טכניקה תוארה לראשונה להשתלת heterotopic לבבות בחולדות 4 אשר הותאמה לאחר מכן להשתלת לב בעכבר על ידי קורי ואח&#39; 5. טכניקה זו כרוכה בהכנת הנמען טרם מבצע התורם ולא טפטוף של הלב התורם, אשר שניהם עשויים לסכן את ההישרדות של לב או לא המושתליםהוא הנמען. ההליך כבר בשימוש נרחב כפי שתואר במקור כדי לבחון את המנגנונים של דחיית שתל וסובלנות 6-8. אחרים יש להתאים את ההליך המקורי עכברוש לב ההשתלה של אונו ולינדסי להשתלת לב בעכברי 9,10. לאחרונה, טכניקה פורסמה לעכבר השתלת לב שהתגברה על חלק מהבעיות הקשורות לשיטה של קורי et 11 אל. הפרוטוקול מתואר כאן משלב השינויים שלנו, המבוססים על השיטה של מוטרם et 12 אל, הכוללים: בזלוף אתרו עם מלח heparinized קר מייד לאחר פתיחת בית החזה וביצוע פעולת התורם לפני ניתוח הנמען כדי למזער את זמן פעולה של נמען. בנוסף, אנו משתמשים במלחציים קטנים atraumatic כלי במקום 6-0 עניבות משי. למרות שיש לי מלחציים כלי החסרון של לקיחה יותר מקום הם יותר קל לשלוט מאשר קשרים, שלא צריכה להיות הדוק או רפוי מדיוהם פחות פשוטים כדי להסיר ממלחציים. השיטה שלנו משתמשת בתפר ריצה אחת להשקת כלי שיט, אם כי בלמידה הראשונית בשלבים חלופיים הוא להשתמש בתפרים להישאר בהפרוקסימלית ופינות דיסטלי כדי להבטיח שוויון של תפרים וכך patency של ההשקה.

<table><tbody><tr><td>מיקרוסקופ הפעלה&nbsp;</td><td>Leica, Heerbrugg, שוויץ</td><td>M651</td> מכונת <td>הרדמה הגדלה פי 10-25</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Vet Quip Pty Ltd, סידני, אוסטרליה</td><td>Vett3</td><td>מסוגל לספק תערובת של איזופלורן וחמצן באוויר&nbsp;</td></tr><tr><td>לוח הפעלה&nbsp;</td><td>חנות לחומרי בניין או ספק</td><td></td> משרדי <td>פקק צפוף או סינטטי המסוגל לקחת סיכות</td></tr><tr><td>מלח Heparinized (5 U/ml, 4 &deg; C)</td> <td>פייזר, ארה"</td>ב <td>FW25</td><td>במזרק 1 מ"ל עם מחט 23 גרם על קרח</td></tr><tr><td>מי מלח רגילים (37 מעלות; C)</td> <td>AstraZeneca Pty Ltd, אוסטרליה</td><td>4538</td><td>במזרק 1 מ"ל עם מחט 23 גרם על כרית חמה</td></tr><tr><td>תפרים 10- ניילון, 5-0 Vicryl</td><td>Ethicon, Inc. ניו ג'רזי, ארה"</td>ב <td>2870 גרם/J421H</td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג במי מלח 0.1 מ"ל</td>)<td>רקיט בנקיזר, סידני, אוסטרליה</td><td></td><td>במזרק 1 מ"ל עם מחט 23 גרם על קרח</td></tr><tr><td>אמפצילין (5 מ"ג/ק"ג ב-0.1 מ"ל מי מלח)</td><td>אספן, סידני, אוסטרליה</td><td></td><td>במזרק 1 מ"ל עם מחט 23 גרם על קרח</td></tr><tr><td>קצף ג'ל</td><td>Pharmacia & Upjohn Co. ארה"ב</td><td>801289304</td><td>חתוך לחתיכות קטנות</td></tr><tr><td>מכשיר צריבה בטמפרטורה גבוהה</td><td>מדטרוניק, ארה"ב</td><td>8444000</td><td></td></tr><tr><td>כרית חימום / טמפ' ימין</td><td>קנט סיינטיפיק קורפוריישן, טורינגטון, CT 06790</td><td></td><td></td></tr> <tr><td><חזק>מכשירי מיקרוכירורגיה: < / חזק ></td><td>שנחאי מכשירים רפואיים ושות 'בע"מ, &nbsp; &nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחזיקי מיקרו-מחטים</td><td>שנחאי, סין</td><td>WT2020</td><td></td></tr><tr><td>מיקרומספריים</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "</td><td>WT1020</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מלקחיים (קצה ישר)</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "</td><td>WA3010</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מלקחיים (קצה מעוקל)</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "</td>מהדקי מיקרו-יתושים <td>WA3020</td><td></td></tr><tr><td>(זוג אחד)</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "</td><td>W40350</td><td></td></tr><tr><td>מהדקים אטראומטיים מיקרו-כלי (זוג אחד)</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; "</td><td>W40130/W40150</td><td></td></tr></tbody></table>

שיטה שונה לheterotopic מאוס לב transplantion

A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion

עכברים משמשים לעתים קרובות כתורמים להשתלת לב ומקבלי במחקרים של אימונולוגיה השתלה בשל מגוון הרחב של עכברים הטרנסגניים וחומרים כימיים זמינים. קושי מוצג בשל גודלו הקטן של בעלי החיים ואת האתגרים טכניים רבים של המיקרו המעורב בהשתלת לב. בפרט, שיעור גבוה של כשל טכני מוקדם לאחר ההשתלה עלול להיגרם כתוצאה ממותו של נמען ולסיבוכים שלאחר ניתוח כגון שיתוק גפיים האחורי או לב אינו פועם. הנה, את הטכניקה השלמה להשתלת לב עכבר heterotopic הוא הוכיח, הכולל קצירת לב התורם וההשתלה הבאה שלה לעכבר נמען. לב התורם שנקטפו מייד לאחר בזלוף אתרו עם מי מלח קר heparinized וחיתוך רוחב של אב העורקים עולים ועורק ריאה. פעולת הנמען כרוכה הכנה של אב העורקים בבטן ונחות וריד נבוב (IVC), ואחריוהשקה קצה לצד של אב העורקים תורם עם אב עורקי הנמען באמצעות microsuture הריצה 10-0 אחת והשקה דומה של עורק הריאה התורם עם הנמען IVC. לאחר הניתוח של בעלי החיים מוזרקים עם 0.6 מיליליטר תת עורי מלח רגיל ואפשרו להתאושש על כרית חימום 37 מעלות צלזיוס. התוצאות מ227 השתלות לב עכבר מסוכמות עם שיעור הצלחה ב48 שעות של 86.8%. של כשלי 13.2% בתוך 48 שעות, 5 (2.2%) שיתוק האחורי איבר, 10 (4.4%) חווה היה לב אינו פועם בשל להרכיב פציעה ו / או פקקת איסכמי, בעוד 15 (6.6%) מתו בתוך 48 שעות .

לאחר תקופת הכשרה ראשונית, 227 מקרים של עכבר השתלת לב heterotopic בקבוצה שלנו נותחו. שיעור ההצלחה בתוך שעות 24 הראשונות היה 90.3% וב48 שעות זה היה 86.8%. של 30 כישלונות (13.2%) תוך 48 שעות, 5 (2.2%) שיתוק גפיים האחורי מנוסה והורדם, 10 (4.4%) היה לב אינו פועם עקב פציעת איסכמיה השתל ו / או פקקת, בעוד 15 (6.6%) מתו תוך 48 שעה. חלק survivals שתל הניסיוני מוצג בטבלה 1 עם מגוון רחב של שילובי מתח. השתלת לב בין אותו התורם ומתח נמען התקבלה לטווח ארוך ואילו השתלות בין זנים ש...

טכניקה מודגמת עבור ההליך המיקרו-כירורגי להשתלה הטרוטופית של לבבות בעכברים, כולל שיטות פשוטות לקצירת תורם ואנסטומוזיס של כלי הדם המקבל.

שיטה שונה לHeterotopic מאוס לב Transplantion

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להשתיל לב מעכבר תורם לעכבר מקבל. דבר זה מושג תחילה על ידי הוצאת הלב מחזה התורם ואחסונו בתמיסת סלין קרה. השלבים הבאים הם השתלת הלב בבטנו של המקבל ולאחר מכן ניטור דופק הלב המשתול.לבסוף, דחיית השתלה מאובחנת באמצעות בדיקה ויזואלית וניתוח פתולוגי. בסופו של דבר, התוצאות מראים כי לבבות שהושתלו בין זני עכברים שאינם קרובי משפחה נדחים, בעוד שלבבות שהושתלו בתוך אותו זן מתקבלים. הדגמה וידאו ארוכה של מדידה זו היא קריטית, שכן השלב המיקרו-כירורגי קשה ללמידה בשל הגודל הקטן מאוד של בעלי החיים התורמים והמקבלים.ההליך הכירורגי המורכב הכרוך בכך והצורך בשיפור הדיוק והמהירות בביצוע הפעולות ברסיפיינט מחייבים לוודא תמיד שכל הכלים נקיים באופן יסודי ועוברים סטריליזציה באמבט ethanol 80%. מומלץ מאוד להשתמש בציוד סטרילי חד-פעמי. לאחר הרדמת עכבר התורם בתא isof fluorine, יש להניחו במנח גב על לוח הניתוח.לאחר מכן, חברו במהירות את קונוס האף תוך מתן חומר הרדמה. ודאו את איכות ההרדמה באמצעות צביטה בכף רגל אחורית. אם אין תגובת רתיעה, התחילו בגילוח העור באמצעות להב כירורגי.לאחר מכן, עקרו את העור באמצעות שלושה ניגובים לסירוגין של 2%Chlorhexidine ב-70%isopropyl alcohol לאורך כל הניתוח. עקבו חזותית אחר הנשימה ודופק הלב של בעל החיים. התאימו את אספקת ה-isoflurane בהתאם.התחילו בביצוע תורקוטומיה

a-modified-method-for-heterotopic-mouse-heart-transplantion

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הלב heterotopic העכבר מודל השתלת הוכח על ידי חוקרים רבים להיות שיטה חשובה לחקר המנגנונים של דחייה התגובה החיסונית. עם זאת, טכניקות מעורבות עדיין מאתגרת. על ידי שינוי שיטות סטנדרטיות יש לנו הצלחה עם יותר מ 1000 השתלות.

השתלת הלב Heterotopic ב עכברים

מודל השתלת לב בצוואר הרחם העכברי הוא גם מתאים חיסוני, כמו גם מחקרי פציעת reperfusion איסכמיה. שינינו את התהליך תוך שימוש בטכניקת שרוול שאינו תפר וביצעו יותר מ 1,000 השתלות מוצלחות עם גישה זו.  במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.

עכברי צוואר הרחם לב השתלת דגם שימוש בטכניקת חפתים השתנה

כתב היד מתארת ​​את הצעדים הנדרשים כדי לבצע את השתלת לב heterotopic בעכבר.

טכניקת השתלות Murine Heterotopic לב

טכניקת השרוול מקצרת ומקלה על המודל של השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכברים על ידי הימנעות מאנסטומוזות תפרים מאתגרות מבחינה טכנית של כלי דם קטנים. הפרטים הטכניים המוצגים במאמר וידאו זה אמורים לאפשר לחוקרים לבסס מודל זה במעבדותיהם.

Heterotopic צוואר הרחם לב השתלה בעכברים

אנו מציגים גישה הצינור הפנימי לטכניקת השרוול של העכבר צוואר הרחם הטרוסקסואלים השתלת לב כדי לעזור אוורט הספינה על השרוול. שיתוף פעולה בין שני מנתחים. מנוסים מקצר את זמן...

אופטימיזציה של טכניקת השרוול עבור השתלת לב מוריין

טכניקה חדשנית לשחזור מעגל הדם במודל הטרוטופי של השתלת לב עכבר בטן מודגמת.

שחזור מעגל הדם במודל השתלת לב של עכבר בטן

בפרוטוקול הנוכחי, מודל השתלת לב עכבר משמש לחקירת מנגנון דחיית אלוגרפט לבבי. במודל השתלת לב הטרוטופי זה, יעילות הניתוח משופרת, והישרדותם של שתלי לב מובטחת על ידי אנסטומוזה מקצה לקצה של צוואר הרחם של השתלת לב באמצעות טכניקת שרוול שונה.

טכניקת שרוול שונה למודל השתלת לב הטרוטופי של עכבר צוואר הרחם

מודלים להשתלת לב עכברים מייצגים כלי מחקר חשובים לחקר אימונולוגיה של השתלות. הפרוטוקול הנוכחי מפרט השתלת לב צווארית הטרוטופית של עכברים הכוללת מיקום של אזיקים על עורק הצוואר המשותף של המושתל ועל גזע עורק הריאה של התורם כדי לאפשר זרימת דם למינרית.

השתלת לב צוואר הרחם הטרוטופית בעכבר תוך שימוש באזיקי כלי דם

המאמר הנוכחי מתאר טכניקה שונה להשתלת לב הטרוטופית וסקולרית עם טכניקה אספטית מעודכנת, שיכוך כאבים והרדמה.

פרוטוקול השתלת לב הטרוטופי מורין מותאם לסטנדרטים עכשוויים של טכניקה אספטית, הרדמה ושיכוך כאבים

פרוטוקול זה מציג טכניקת אנסטומוזה פשוטה מקצה לצד להשתלת לב צוואר הרחם בעכברים, ומספק מודל חזק וניתן לשחזור ללימוד אימונולוגיה של השתלות.

השתלת לב עכבר הטרוטופית צווארית באמצעות טכניקת אנסטומוזה מקצה לצד לחקר אימונולוגיה של השתלות

למדו שיטת השתלת לב הטרוטופית בעכברים באמצעות מיקרוכירורגיה. טכניקה זו מאפשרת חקר דחיית שתלים ותאימות גנטית בין זני עכברים שונים.

שיטה שונה לHeterotopic מאוס לב Transplantion

גלה סרטונים נוספים