Name: עור מלא פגמים דגם להערכת כלי דם של Biomaterials בVivo (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: חקור הדמיה וכימות של כלי דם בחומרים הנדסיים בעור באמצעות מודל פגמי עור מלא בעכברים. שיטה זו מספקת הערכה יעילה וחסכונית של היווצרות כלי דם בתוך ביומטריאלים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

תבנית התחדשות עורי Integra סופקה באדיבות על ידי תאגיד Lifesciences Integra. מקורות של קרנות התומכות בעבודה: עבודה זו מומנו באופן חלקי מוקדם Translational II פרס CIRM-BMBF ומרכז FONDAP לרגולצית הגנום הן לJTE על ידי (Nr 15,090,007.).

.1 הכנת פיגומים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צור דגימות של הפיגומים באמצעות 12 מ&quot;מ אגרופים ביופסיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להציג את המולקולות ביו או תאים לפיגום, לנקז את הפיגומים על ידי בעדינות לוחץ אותם עם גזה סטרילית. ואז רעננות הפיגומים על ידי הוספת 160 μl של תמיסה המכילה מולקולות או תאים של העניין ביו. בדוק היטב את ההצלחה של bioactivation עם תאים באמצעות מבחני חילוף חומרים כגון מבחני MTT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במידת צורך, לתקן את התרכובות או תאים להיבדק בתוך הפיגום על ידי מתן אותם, למשל בפתרון הפיברין-תרומבין או הידרוג&#39;ל, שוב דרך להחזרת נוזלים כמתואר בשלב 1.2. הערה: שלב זה יכול להיות של מועיל כאשר תרכובות או תאים אינן מכאנית לצרף לחומר. אפשר גם לשלוט בדינמיקת שחרורו של התרכובות .. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את רשתות titanized, שתוצבנה תחת כל פיגום בכל קבוצת ניסוי ובקרה, על ידי חיתוךחתיכות גרם החוצה בצורה עגולה, כ 14 מ&quot;מ קוטר. הערה: רשת titanized עובדת כגבול פיזי הנדרש כדי לתחום הרקמה מחדש מהמיטה הפצע. </li></ol> 2 בעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני היישום של המודל שהוצג, להתייעץ חוקי הגנה על בעלי חיים המתאימים ולקבל אישור מהרשויות המקומיות. בעבודה זו, כל הניסויים בוצעו עם עכברים, על פי מעשה רווחת בעלי החיים הגרמני הנוכחי ואושרו על ידי ממשלת מחוז בוואריה העליונה (Regierung פון Oberbayern). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבחור בזהירות את בעלי החיים ומתח. למרות שהמודל הוקם לעכברים, זה יכול להיות מתורגם לבעלי חיים נפוצים אחרים, כגון חולדות, ארנבות או חזירים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במקרה שאתה עובד עם בעלי חיים פרווה, לגלח את הגב של בעלי החיים לפני ההשתלה של הפיגומים. הערה: עבודה זו משתמשת בעכברים של 6 עד 8 שבועות של גיל עם משקל גוף בין 20 גרם ו25 גרם, בגילים שונים אך וbיכולות לשמש גם משקולות ody. </li></ol> .3 הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תנהל את הפעילות בתנאים סטריליים. על מנת לשמור על טמפרטורת הגוף הנורמלית של בעל החיים, להשתמש במחצלת התחממות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני inhalative הרדמה בעלי החיים מקבלים Buprenorphin במינון של 0.05-0.1 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף, תת עורי כל שעה 8. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה בהרדמה inhalative (Isoflurane) או להחיל נהלי תקן מקבילים. לאשר הרדמה או על ידי לוחץ בעדינות את אצבעות רגליו של בעל החיים או באמצעות צביטת עור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע exsiccosis, להזריק 0.5 תת עורי תמיסת מלח פיסיולוגי מ&quot;ל בתחילת המבצע. </li></ol> .4 כריתת העור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה במצב שכיבה ולסמן את קו האמצע של הגב של העכבר עם עט קבוע קצה קנס (איור 1 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את אזור הכריתה. הנח את הפגמים באזור המוצג בFiguמחדש 1C. שים לב שאם הפגמים ממוקמים גם caudally, בעלי החיים נוטים יותר כדי להסיר את התחבושות ופיגומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צור עגול פגמים דו צדדיים באמצעות אגרוף ביופסיה 10 מ&quot;מ (איור 1). האגרוף צריך להיות בכפייה בזהירות על העור ואסור להשתמש בו כדי לחתוך לחלוטין דרך העור, אלא להתוות את אזור הכריתה (איורים 1 ג &amp; 1E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם בעדינות את העור הניכר עם מלקחיים ולחתוך לאורך המעגל המסומן באמצעות מספריים קנס כירורגית (איור 1F). במקרה של דימום, לדחוס בזהירות עם גזה סטרילית. תיאור צעד אחר צעד של הכריתה מוצג באיור 1. הערה: הפגם נוצר עם אגרוף קטן יותר מאשר אחד ליצירת הפיגומים, כדי לפצות הגדלה של הפגם בשל גמישות העור. </li></ol> .5 פיגום השרשה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מנת לפנות מקום לטיטהnized רשת, להאריך את ההפרדה של עור ורקמה בסיסית בגבולות הפצע ל2-4 מ&quot;מ (איור 2 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את titanized רשת לפגם באופן ישיר על מיטת הפצע ומתחת לקצות הפצע (איורים 2 א &amp; B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקום פיגומים ישירות על הרשת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר את הפיגומים לקצות פצע הסמוכים עם 4 עד 6 קשרים יחידים, והשאיר את הקצוות מעט מעל הפיגום (איור 2 ג). הערה: יש להימנע משימוש בתפרים מתכלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתפור פצע שקוף הלבשה מעל הפגמים כדי להגן על הפיגום, ובמקביל לאפשר ניטור של אזור הפצע (איור 2 ד). </li></ol> .6 לאחר ניתוח טיפול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור עכבר אחד לכלוב כדי למנוע מניפולציה הדדית של ההלבשה ופיגומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעריך את המצב הכללי של בעלי החיים על בסיס יומי על ידי פעילות התבוננות מנוע, משקל גוף, סימנים של כאב, סובלנותלהלבשה ואוטומטית הטלת המום. גם לפקח על אזור הפצע לדימום, מקומי וסימנים מערכתיים של זיהום ואת עמדתו של הרוטב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מנת למזער את הכאב של בעלי החיים, להזריק Buprenorphin יומי במינון של 0.05-0.1 מ&quot;ג / קילוגרם משקל גוף או משככי כאבים שווי ערך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם העכבר מסיר או נזקי ההלבשה הפצע, להחליף או לצרף אותו בהרדמה. </li></ol> .7 המתת חסד וexplantation של הפיגום <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בנקודות זמן רצויים, להקריב בעלי החיים על ידי מינון יתר של Pentobarbital (150 מ&quot;ג / קילוגרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסמן את האתר של כריתת עור עם סמן קבוע, אשר צריך לכלול את הפיגומים וכמה שיותר את העכבר בחזרה עור כ( איור 3 א) האפשריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך את העור לאורך הקווים המסומנים במספריים או סכין מנתחים. לנתק את כל העור, כולל הפיגומים ורשת titanized, מהרקמה הבסיסית דרך הכנה בוטה (Fiתרשים 3 ב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את רקמת explanted השרועה על צלחת פטרי (איור 3 ג וד) </li></ol> .8 ויזואליזציה וכימות של רשת כלי הדם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שקוף: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת התקן שקוף, על ידי ההרכבה צלחת פטרי מעל מקור חזק של אור הלבן (100 הנורה סטנדרטית ואט). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את מצלמה דיגיטלית מעל transilluminator להשיג תמונות דיגיטליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הדגימות במהופך על צלחת פטרי על המכשיר השקוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את התמונות של הפיגומים מלאים במצב מקרו, כמו גם של אזורים שווים בגודלן של עור רגיל. לאחסן את התמונות בפורמט TIFF לניתוח דיגיטלי נוסף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את הרקמה לאנליזה ביוכימית או היסטולוגית נוספת. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פילוח דיגיטלי וכימות: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הורד והתקן את תוכנת VesSeg-הכלי, אשר ניתן להשיג frEE תשלום ב: <a href="http://www.isip.uni-luebeck.de/index.php?id=150&amp;L=2%255">http://www.isip.uni-luebeck.de/index.php?id=150&amp;L=2%255.</a> </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את התמונה עם תוכנת VesSeg-הכלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את האזור בתמונה מכוסה על ידי הפיגום לניתוח דיגיטלי (תמונה → בחר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להגדיל את החדות של כלי להשתמש באפשרות &quot;thresholding Hysteresis&quot; (תמונת מסנן → thresholding Hysteresis → שיפור כלי → Top Hat-שינוי → שיפור כלי חישוב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להמשיך עם הפילוח של מפת הכלי (גבולות סף → התמונה → מסנן → thresholding Hysteresis שיפור כלי). בחר את הסף הראשון (&quot;כיסוי כלי השיט&quot;), כך שכל פיקסל, וזה אפילו מרחוק כמו כלי-, יופיע תחת כותרת כלי. בחר את הסף השני (&quot;כיסוי רקע&quot;), כך שרק אלה פיקסלים שהם במיוחד יופיעו תחת כותרת כלי כמו ספינה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את הצעת הפילוח האוטומטית באופן ידני להוסיף כלי שאינם נתפסו ולחסל את המבנים חיוביים שגויים נפוצים, אשר בדרך כלל הם מבנים כגון שערות או תפרים ארוכים ודקים, כמו כלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את אורכו של כלי השיט והשטח הכולל המכוסה על ידי ספינות (סטטיסטיקת תמונת → התמונה → סטטיסטיקת תמונה בינארי). הערה: לחישוב הכלי-האורכים, כלים במפת כלי כתוצאה מכך הם דלילים לקווים ברוחב של פיקסל אחד 20. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את אזור עור הילידים תחת אותם הפרמטרים כמו הפיגומים, קביעת ערך של 100% לרקמות המקומיות ומתייחס הפיגום לשווי ש. לדוגמא, אם אחוז הפיקסלים הלבנים הוא 60% ברקמה הנורמלית ו30% בפיגום, זה היה מייצג כלי דם 50% מהפיגום. הערה: כיסוי כלי הלבן הצטרף לשטח של ריבוע סביב הפיגום. התאם את מספר consi כיסוי פיקסלים הלבניםדרינג שהשטח של המעגל הוא (R π x 2) הקטן יותר באופן משמעותי מאשר מרובע (4 x R 2). </li></ol>

<ol><li>Rahaman, M. N., Mao, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-based+composite+tissue+constructs+for+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Stem cell-based composite tissue constructs for regenerative medicine.</a> Biotechnology and Bioengineering. 91 (3), 261-284 (2005).</li>
<li>Lutolf, M. P., Hubbell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+biomaterials+as+instructive+extracellular+microenvironments+for+morphogenesis+in+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Synthetic biomaterials as instructive extracellular microenvironments for morphogenesis in tissue engineering.</a> Nature Biotechnology. 23, 47-55 (2005).</li>
<li>Machens, H. G., Berger, A. C., Mailaender, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioartificial+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Cells+Tissues+Organs%22%5BJournal%5D)">Bioartificial skin.</a> Cells Tissues Organs. 167, 88-94 (2000).</li>
<li>Priya, S. G., Jungvid, H., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+tissue+engineering+for+tissue+repair+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B%3A+Reviews%22%5BJournal%5D)">Skin tissue engineering for tissue repair and regeneration.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 14, 105-118 (2008).</li>
<li>Papavasiliou, G., Cheng, M. H., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+for+vascularization+of+polymer+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Strategies for vascularization of polymer scaffolds.</a> Journal of Investigative Medicine. 58 (7), 838-844 (2010).</li>
<li>Laschke, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenesis+in+tissue+engineering%3A+breathing+life+into+constructed+tissue+substitutes%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering%22%5BJournal%5D)">Angiogenesis in tissue engineering: breathing life into constructed tissue substitutes.</a> Tissue Engineering. 12, 2093-2104 (2006).</li>
<li>Zhong, S. P., Zhang, Y. Z., Lim, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+scaffolds+for+skin+wound+healing+and+dermal+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdisciplinary+Reviews+Nanomedicine+and+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Tissue scaffolds for skin wound healing and dermal reconstruction.</a> Wiley Interdisciplinary Reviews Nanomedicine and Nanobiotechnology. 2 (5), 510-525 (2010).</li>
<li>Liu, G., Zhang, Y., Liu, B., Sun, J., Li, W., Cui, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+regeneration+in+a+canine+cranial+model+using+allogeneic+adipose+derived+stem+cells+and+coral+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Bone regeneration in a canine cranial model using allogeneic adipose derived stem cells and coral scaffold.</a> Biomaterials. 34 (11), 2655-2664 (2013).</li>
<li>Hansson, A., Di Francesco, T., Falson, F., Rousselle, P., Jordan, O., Borchard, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+and+evaluation+of+nanoparticles+for+directed+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Preparation and evaluation of nanoparticles for directed tissue engineering.</a> International Journal of Pharmaceutics. 439 (1-2), 73-80 (2012).</li>
<li>Sarkar, S. D., Farrugia, B. L., Dargaville, T. R., Dhara, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan-collagen+scaffolds+with+nano%2Fmicrofibrous+architecture+for+skin+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research+Part+A%22%5BJournal%5D)">Chitosan-collagen scaffolds with nano/microfibrous architecture for skin tissue engineering.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 18, (2013).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+roles+of+knitted+mesh-reinforced+collagen-chitosan+hybrid+scaffold+in+the+one-step+repair+of+full-thickness+skin+defects+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The roles of knitted mesh-reinforced collagen-chitosan hybrid scaffold in the one-step repair of full-thickness skin defects in rats.</a> Acta Biomaterials. 9 (8), 7822-7832 (2013).</li>
<li>Rizzi, S. C., Upton, Z., Bott, K., Dargaville, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+dermal+wound+healing%3A+biomedical+device+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Medical+Devices%22%5BJournal%5D)">Recent advances in dermal wound healing: biomedical device approaches.</a> Expert Review of Medical Devices. 1, 143-154 (2010).</li>
<li>des Rieux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+systems+delivering+VEGF+to+promote+angiogenesis+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">3D systems delivering VEGF to promote angiogenesis for tissue engineering.</a> Journal of Controlled Release. 150, 272-278 (2011).</li>
<li>Reckhenrich, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioactivation+of+dermal+scaffolds+with+a+non-viral+copolymer-protected+gene+vector%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Bioactivation of dermal scaffolds with a non-viral copolymer-protected gene vector.</a> Biomaterials. 32, 1996-2003 (2011).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Key+Regulatory+Roles+of+the+PI3K%2FAkt+Signaling+Pathway+in+the+Functionalities+of+Mesenchymal+Stem+Cells+and+Applications+in+Tissue+Regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">The Key Regulatory Roles of the PI3K/Akt Signaling Pathway in the Functionalities of Mesenchymal Stem Cells and Applications in Tissue Regeneration.</a> Tissue Engineering Part B Rev. 19, 516-528 (2013).</li>
<li>Fedorovich, N. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+endothelial+progenitor+cells+in+prevascularized+bone+tissue+engineering%3A+development+of+heterogenous+constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+A%22%5BJournal%5D)">The role of endothelial progenitor cells in prevascularized bone tissue engineering: development of heterogenous constructs.</a> Tissue Engineering Part A. 16 (7), 2355-2367 (2010).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteogenesis+and+angiogenesis+of+tissue-engineered+bone+constructed+by+prevascularized+%CE%B2-tricalcium+phosphate+scaffold+and+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Osteogenesis and angiogenesis of tissue-engineered bone constructed by prevascularized β-tricalcium phosphate scaffold and mesenchymal stem cells.</a> Biomaterials. 36, 9452-9461 (2010).</li>
<li>Cuadra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+results+of+burned+hands+treated+with+Integra%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Plastic%2C+Reconstructive+%26+Aesthetic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Functional results of burned hands treated with Integra.</a> Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 65 (2), 228-234 (2012).</li>
<li>Wilcke, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF%28165%29+and+bFGF+protein-based+therapy+in+a+slow+release+system+to+improve+angiogenesis+in+a+bioartificial+dermal+substitute+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">VEGF(165) and bFGF protein-based therapy in a slow release system to improve angiogenesis in a bioartificial dermal substitute in vitro and in vivo.</a> Langenbecks Arch Surg. 392 (3), 305-314 (2007).</li>
<li>Condurache, A., Aach, T., Grzybowsky, S., Machens, H. G. Vessel segmentation and analysis in laboratory skin transplant micro-angiograms. Proceedings of the Eighteenth IEEE Symposium on Computer-Based Medical Systems. , 21-26 (2005).</li>
<li>Danner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+human+sweat+gland-derived+stem+cells+for+enhancing+vascularization+during+dermal+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">The use of human sweat gland-derived stem cells for enhancing vascularization during dermal regeneration.</a> Journal of Investigative Dermatology. 132 (6), 1707-1716 (2012).</li>
<li>Shaterian, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real+Time+Analysis+of+the+Kinetics+of+Angiogenesis+and+Vascular+Permeability+in+an+Animal+Model+of+Wound+Healing%5BTitle%5D)+AND+%22Burns%22%5BJournal%5D)">Real Time Analysis of the Kinetics of Angiogenesis and Vascular Permeability in an Animal Model of Wound Healing.</a> Burns. 35 (6), 811-817 (2009).</li>
<li>McDonald, D. M., Choyke, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+angiogenesis%3A+from+microscope+to+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Imaging of angiogenesis: from microscope to clinic.</a> Nature Medicine. 9 (6), 713-725 (2003).</li>
<li>Bergeron, L., Tang, M., Morris, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+vascular+injection+techniques+for+the+study+of+perforator+flaps%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">A review of vascular injection techniques for the study of perforator flaps.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 117, 2050-2057 (2006).</li>
<li>Schlatter, P., König, M. F., Karlsson, L. M., Burri, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+study+of+intussusceptive+capillary+growth+in+the+chorioallantoic+membrane+%28CAM%29+of+the+chicken+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">Quantitative study of intussusceptive capillary growth in the chorioallantoic membrane (CAM) of the chicken embryo.</a> Microvascular Research. 54 (1), 65-73 (1997).</li>
<li>Lehr, H. A., Leunig, M., Menger, M. D., Nolte, D., Messmer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dorsal+skinfold+chamber+technique+for+intravital+microscopy+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Dorsal skinfold chamber technique for intravital microscopy in nude mice.</a> American Journal of Pathology. 143 (4), 1055-1062 (1993).</li>
<li>Menger, M. D., Jäger, S., Walter, P., Hammersen, F., Messmer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+studies+on+the+microvasculature+of+transplanted+islets+of+Langerhans+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+microcirculation%2C+clinical+and+experimental%22%5BJournal%5D)">A novel technique for studies on the microvasculature of transplanted islets of Langerhans in vivo.</a> International journal of microcirculation, clinical and experimental. 9 (1), 103-117 (1990).</li>
<li>Laschke, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+spheroids+of+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+are+potent+initiators+of+blood+vessel+formation+in+porous+polyurethane+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional spheroids of adipose-derived mesenchymal stem cells are potent initiators of blood vessel formation in porous polyurethane scaffolds.</a> Acta Biomaterials. 9 (6), 6876-6884 (2013).</li>
<li>Egaña, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+human+mesenchymal+cells+to+improve+vascularization+in+a+mouse+model+for+scaffold-based+dermal+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+A%22%5BJournal%5D)">Use of human mesenchymal cells to improve vascularization in a mouse model for scaffold-based dermal regeneration.</a> Tissue Eng Part A. 15 (5), 1191-1200 (2009).</li>
<li>Condurache, A., Aach, T. Vessel segmentation in angiograms using hysteresis thresholding. Proceedings of the Ninth IAPR Conference on Machine Vision Applications. , 269-272 (2005).</li>
<li>Egaña, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+method+to+visualize+and+quantify+vascular+networks+in+native+and+tissue+engineered+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbecks+Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ex vivo method to visualize and quantify vascular networks in native and tissue engineered skin.</a> Langenbecks Archives of Surgery. 394, 349-356 (2009).</li>
</ol>

סכסוך של הצהרת ריבית: כל המחברים: אין גילויים פיננסיים: אף אחד מהמחברים יש אינטרס כלכלי בכל אחד מהמוצרים, המכשירים, או התרופות שהוזכרו בכתב היד הזה.

יש צורך בהקמת גישות מוצלחות בשיפור זלוף דם במבני רקמה מהונדסת, הדורש פיתוח שיטות אמינות חדשות ללמוד את תהליכי כלי הדם בתוך החומרים הביולוגיים. שיטות נפוצות להכנת כלי דם פיגום גלוי vivo לשעבר כוללות שימוש במיקרוסקופ, אשר מספק כלי ברזולוציה גבוהה. ברוב המקרים, אם כי, בשיטה זו מוגבלת לניתוח של אזורי רקמה קטנים ונוטה להיות יקר זמן רב. יתר על כן, לעתים קרובות כולל תיוג משוכלל ושיטות צביעה, שבו לא ניתן להבחין בין כלי דם perfused מאינם פונקציונליים אלה 22. שיטות בשימו...

בעשורים האחרונים, הנדסת רקמות נפתחה אופציה טיפולית חדשה שתחליף את מומי רקמה עם תאים של הגוף עצמו 1. על מנת לתמוך בתהליך הפיזיולוגי של התחדשות רקמות, פיגומים מעוצבים כמבנה מתכלה, המספק תרחיש שבו תאים מהמיטה הפצע יכולים לגדול ולשחזר את הפגם 2,3. כלי דם בלתי מספקים נחשב למכשול העיקרי, אשר מחזיק בגב פריצת הדרך הקלינית של פיגומי bioartificial 4. עם ingrowth של תאים, הביקוש לחומרים מזינים וחמצן עליות וכלי דם של החומר הופך להיות חיוני. כלי דם בלתי מספקים או מתעכבים ולכן יכולים להוביל לנימק של מוצרי רקמות מהונדסות 5 מרכזי. בנוסף, כלי דם מספקים לתאים המוסמכים חיסוניים ולהסיר את שאריות חילוף חומרים באזור ההתחדשות. שיעורי זיהום גבוהים והתחדשות נמוכה הם רקחלק מההשלכות של זלוף דם בלתי מספק נצפו בהנדסת רקמות, המיועדות להיות נמנע על ידי הגדלת כלי הדם של הפיגומים 6,7. כמה אסטרטגיות שמטרתם לשפר את מיקוד כלי דם על עצם את תפקיד המפתח של החומר הביולוגי עצמו ומייקרו של הפיגום. יש מאמצי מחקר אינטנסיביים לפיתוח גישות חדשות בהעברת תהליך הריפוי מתיקון להתחדשות, ובכך (מחדש) יצירת רקמה עם המאפיינים הפיסיולוגיים הקרובים ביותר לאחד כדי להיות משוחזר 8,9. Biomaterials שנחקרו והוערכו בכל הקשור לפוטנציאל ההתחדשות שלהם כלול קולגן, פיברין, chitosan ו10,11 אלגינט. ניתן להשתמש בחומרים ביולוגיים אלה ושילוב כעמוד השדרה לבניית פיגומים חדשים תוך שימוש באסטרטגיות שונות כגון decellularization רקמה, הרכבה עצמית, דיגום מהיר וelectrospinning 12. כדי enhאהה יכולת ההתחדשות של הגוף עצמו, יכולים להיות bioactivated פיגומים. השילוב של צמיחת angiogenic רקומביננטי גורמי 13 או גן וקטורי קידוד לגורמים כגון 14 הראו כדי לשפר את כלי הדם של הפיגום. השימוש בתאי גזע הוכח באופן נרחב כדי להיות אסטרטגיה מבטיחה לשפר את כלי הדם, שבו תאי סטרומה mesenchymal ובתאי האנדותל צברו את מירב תשומת הלב 15,16. גישות אחרות מנסות לבנות מבנים המכילים רשתות כלי טרומיות לפני ההשתלה 17. למרות מאמצים אינטנסיביים בעיצוב פיגום ביו ההפעלה שלהם, אין אסטרטגיה השתפרה כלי דם ברמה משמעותית מבחינה קלינית ו, למעט תחליפי עורי בפציעות לשרוף מסיביות, התרגום של חומרים מהונדסים לשגרה הקלינית מתרחש רק בהיסוס 18 . אחת הסיבות לכך שכלי דםשל מבני רקמות מלאכותיים עדיין היא בעיה בלתי פתורה, הוא הקושי להעריך את ההצלחה של טכנולוגיות חדשות בin vivo גישות. למרות שניסויים במבחנה עשויים לספק תובנות חשובות של פוטנציאל כלי הדם של פיגומים, מודלים של בעלי החיים מתאימים נדרשים ללמוד פרמטרים מרכזיים כגון ההתאמה הביולוגית של החומר, את הבטיחות ויעילות של הטיפול ו, בעלת חשיבות מיוחדת, כלי הדם של הרקמות לבנות. לכן, כלים אמין לחזות ולכמת רשתות כלי דם בגוף חי הן חיוניים. במחקר זה אנו מציגים שיטה פשוטה ואמינה המאפשרת הדמיה וכימות של רשת כלי הדם בתוך פיגומי explanted. שיטה זו מבוססת על שקוף רקמה ופילוח דיגיטלי. מאחר ושיטה זו אינה פולשני, היא מאפשרת ניתוחים מולקולריים והיסטולוגית נוספים של חומר היעד.

<table><tbody><tr><td>Ethilon P-3 13 מ"מ 3/8 מעגל 5-0</td><td>Ethicon, נורדרשטט, גרמניה</td><td>698G</td><td>Ethilon polyamid-6 תפר חיתוך מדויק נקודתי</td></tr> הפוך <tr><td>ביופסיה אגרופים (10 מ"מ)</td><td>Xiomedics, Acuderm inc., פורט לודרדייל, פלורידה, ארה"ב</td><td>P1050</td><td></td></tr><tr><td>אגרופי ביופסיה (12 מ"מ)</td><td>Xiomedics, Acuderm inc., פורט לודרדייל, פלורידה, ארה"ב</td><td>P1250</td><td></td></tr><tr><td>מצלמה דיגיטלית&nbsp;</td><td>Ricoh , הנובר, גרמניה</td><td>Cx1</td><td></td></tr><tr><td>Gazin Mullkompresse&nbsp;</td><td>Lohmann und Rauscher, Neuwied, גרמניה</td><td>13622</td><td>גזה סטרילית (10 ס"מ x 10 ס"מ)</td></tr><tr><td>פיגום דו-שכבתי על בסיס קולגן (8' x 10')</td><td>Integra Life Science Corporation, פליינסבורו, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td>88101</td><td></td></tr><tr><td>איזופלורן, גז נוזלי להרדמה אינהלטיבית&nbsp;</td><td>בקסטר, Unterschleissheim, גרמניה</td><td>100196040</td><td></td></tr><tr><td>פנטוברביטל, 16 גרם / 100 מ"ל</td><td>Fa. Merial, Hallbergmoos</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nuri Nu/Nu עכברים עירומים, CrLNU-Foxn1nu</td><td>Charles River, Sulzfeld, גרמניה</td><td>קוד זן 088</td><td>עכברים עירומים אתימיים, בני 6 עד 8 שבועות ומשקל גוף בין 20 ל-25 גרם&nbsp;</td></tr><tr><td>בופרנורפין (0.3 מ"ג/מ"ל)</td><td>Essex Pharma GmbH, מינכן, גרמניה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>רשת טיטניזציה (15 ס"מ x 15 ס"מ), אקסטרלייט</td><td>PFM Medical AG, K&ouml; ln, גרמניה</td><td>6000029</td><td></td></tr><tr><td>Tissucol Duo S Immuno 2 מ"ל</td><td>בקסטר גרמניה GmbH, Unterschlei&szlig; heim, גרמניה</td><td>B1332020110614</td><td>תמיסת פיברין-תרומבין&nbsp;</td></tr><tr><td>וילון דבק שקוף (30.5 ס"מ על 26 ס"מ)KCI</td> <td>Medical Products, Wimborne Dorset, UK</td><td>M6275009/10</td><td></td></tr></tbody></table>

עור מלא פגמים דגם להערכת כלי דם של biomaterials<em&gt; בvivo</em

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

כלי דם בלתי מספקים נחשב לאחד הגורמים העיקריים המגבילים את ההצלחה הקלינית של מבני רקמות מהונדסות. על מנת להעריך אסטרטגיות חדשות שמטרתם לשפר את כלי הדם, שיטות אמינות נדרשות לבצע בצמיחה של כלי דם חדשים לתוך פיגומים ביו המלאכותי לעין ולכמת את התוצאות. במהלך השנים של השנים האחרונות, הקבוצה שלנו הציגה מודל פגם עור מלא המאפשר ההדמיה הישירה של כלי דם על ידי שקוף ומספק את האפשרות של כימות באמצעות פילוח דיגיטלי. במודל זה, אחד בניתוח יוצר פגמי עור מלאים בחלק האחורי של עכברים ומחליף אותם עם החומר שנבדק. יכולים גם להיות משולבים מולקולות או תאים של עניין בחומרים כאלה כדי ללמוד ההשפעה הפוטנציאלית שלהם. לאחר זמן תצפית של בחירה של האדם עצמו, חומרי explanted להערכה. פצעים דו צדדיים לספק את האפשרות של ביצוע השוואות פנימיות הבלמזער חפצים בין אנשים, כמו גם של הפחתת מספר בעלי החיים הדרושים למחקר. בהשוואה לגישות אחרות, השיטה שלנו מציעה ניתוח פשוט, אמין וחסכוני. אנחנו צריכים ליישם את המודל הזה ככלי שגרתי לביצוע הקרנה ברזולוציה גבוהה בעת בדיקת כלי דם של חומרים ביולוגיים שונים וגישות ביו הפעלה.

פגם עור אמין דו צדדי מלא ניתן ליצור בעכבר (איור 1) שבו העור יכול להיות מוחלף על ידי חומר ביולוגי תחת מחקר (איור 2). כאן, אין סיבוכים עיקריים שנצפו במהלך או לאחר ההליך האופרטיבי, לא סימנים מקרוסקופית של זיהום או תגובת גוף זרה. במקרים נדירים, פיגום הולך לאיבוד כאשר עכבר מסיר אותו. התכווצות פצע מעולם לא נצפתה (איור 3). שקוף רקמה אפשר להדמיה ברורה של מבנים וכלי דם של עד 30 מיקרומטר ברוחב, בדגימת רקמה שלמה שכללה את שניהם, רקמות ילידים ...

כלי דם הוא מפתח לגישות בהנדסת רקמות מוצלחת. לכן, טכנולוגיות אמינות נדרשות כדי להעריך את ההתפתחות של רשתות כלי דם ברקמות מבנים. כאן אנו מציגים שיטה פשוטה, יעיל וחסכונית כדי לחזות ולכמת כלי דם בגוף חי.

עור מלא פגמים דגם להערכת כלי דם של Biomaterials<em&gt; בVivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא ויזואליזציה של כלי דם במבנים מהנדסי רקמה. הדבר מושג על ידי יצירת פגם עורי מלא וסטנדרטי בגבם של עכברים. לאחר מכן, דגימה של החומר מהנדס הרקמה מושתלת בתוך הפגם העורי.לאחר מכן, בסוף זמן התצפית, השתיל מושתל ומוצב במכשיר לתאורה חולפת (trans illumination). לבסוף, מצולמות תמונות ברזולוציה גבוהה של הרשת הוורידית באמצעות מצלמה דיגיטלית סטנדרטית. בשלב הסופי, הרשת הוורידית מנותחת באמצעות סגמנטציה דיגיטלית וכימות בעזרת תוכנת Vest egg tool.היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כגון מיקרוסקופיה, טומוגרפיה ממוחשבת או דימות בתהודה מגנטית, הוא שהיא מאפשרת ויזואליזציה וכימות יעילים מבחינת זמן וסיבתיות של תהליכים כליים בתוך ביו-חומרים, תוך התמקדות בכל הכליים התפקודיים החדשים. שיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי התווסדות כלי דם (ווסקולריזציה) בחומרים להחלפת דרמה. ניתן ליישם אותה גם על אורגניזמי מודל אחרים או לשימוש במחקר של ווסקולריזציה באיברים אחרים.בתחילה, השתמשו במנקבי ביופסיה של 12 מילימטר כדי להכין דגימות של פיגומים (scaffolds), למשל מחומרי החלפה דרמליים מבוססי קולגן בקר; גזרו פיסות רשת טטין עגולות בקוטר 14 מילימטר להנחה תחת כל פיגום. לאחר הרדמת העכבר, בדיקת עומק ההרדמה באמצעות צביטה בבהו, והסרת הפרווה מהגב בהתאם לפרוטוקול הכתוב, מקמו את בעל החיים בתנוחת שכיבה על הבטן והשתמשו בטוש קבוע בעל חוד דק כדי לסמן את קו האמצע של גב העכבר.הגדירו אזור כריתה שאינו רחוק מדי מהגוף, כדי למנוע מהבעל חיים להסיר את הפיגום (scaffold). באמצעות מחץ ביופסיה (biopsy punch) של 10 מילימטר, צרו פגמים דו-צדדיים עגולים על ידי לחיצה זהירה של המחץ כנגד העור. כדי להגדיר את אזור הכריתה באמצעות פינצטה, הרימו בעדינות את העור המסומן והשתמשו במספריים כירורגיים כדי לבצע חיתוך לאורך המעגל המסומן.במקרה של דימום, השתמשו בגזה סטרילית כדי להפעיל לחץ עדין על האזור כדי לפנות מקום לרשת ה-Titanic. הרחיבו את ההפרדה בין העור לרקמה התוכה בגבול הפצע ובשני עד ארבעה מילימטרים נוספים. מקמו את הרשת בתוך הפגם, ישירות על מיטת הפצע ותחת שולי הפצע.לאחר מכן, הנח את הפיגומים ישירות על הרשת. השתמש בארבעה עד שישה קשרים בודדים כדי לתפור את הפיגום, כך ששולי הפצע הסמוכים יישארו מעט מעל הפיגום. לאחר מכן, תפר תחבושת פצע שקופה מעל הפגמים כדי להגן על הפיגום תוך מתן אפשרות לניטור של אזור הפצע.העריכו מדי יום את מצבו הכללי של בעל החיים על ידי ניטור הפעילות המוטורית, משקל הגוף, סימני כאב, סבילות לתחבושת ואוטו-מוטילאציה (פגיעה עצמית). כמו כן, נטרו את אזור הפצע כדי לבדוק דימום, סימנים מקומיים ומערכתיים לזיהום ואת מיקום התחבושת. לאחר מכן, בצעו המתה לבעל החיים בנקודת הזמן הרצויה.בהתאם לפרוטוקול הכתוב, השתמש בטוש קבוע כדי לסמן את אתר החיתוך הכולל את הפיגומים. השתמש במספריים או בסכין מנתחים כדי להגריר את העור לאורך הקווים המסומנים באמצעות חיתוך קהה, הפרד את כל העור, כולל הפיגומים והרשת, מהרקמה שמתחתיו, והנח את הרקמה מתוחה הפוך בתוך צלחת פטרי. כדי להדמיץ את הדגימה, הנח אותה מעל מכשיר תאורה תחתונה.במצב מאקרו, צלם את הפיגומים השלמים ואזורים בגודל שווה של עור נורמלי, ושמור את התמונות בפורמט TIFF לצורך ניתוח דיגיטלי בהמשך. לאחר הורדת התוכנה ves EQ tool, פתח תמונה ובחר אזור עניין (region of interest) לניתוח על ידי לחיצה על מקש ה-backspace. לאחר מכן לחץ על invert.כדי להדמיות של הרשת כלי הדם בצבע לבן, בחרו ב-image vessel enhancement filter hysteresis thresholding top hat transformation, וחשבו את ה-vessel enhancement בכל השלבים הקודמים. גללו כדי להגדיל או להקטין את התמונה. בצעו סגמנטציה למפת כלי הדם על ידי בחירת ה-threshold הראשון או ה-vessel coverage, כך שכל פיקסל שדשמי למראה של כלי דם יסומן ככלי דם.לחצו על calculate. כדי להקדימב את הבחירה שלכם, בחרו את הסף השני או את כיסוי הרקע כך שרק פיקסלים הדומים במיוחד לכלי דם יסומנו ככלי דם. כדי לחשב את אורך כלי הדם ואת השטח הכולל שהם מכסים, לחצו על image, image statistics ו-binary image statistics.את אורך כלי הדם מומלץ להעריך בצורה המיטבית על ידי דילול מוקדם של הרשת הווסקולרית לרוחב של פיקסל אחד. לשם כך, יש לעבור למסנני מורפולוגיה של תמונה ולביצוע שלד (skeletonizing) לפני החישוב. היחס בין שטח כלי הדם לאורך כלי הדם נותן ערך לגודל כלי הדם באזור העניין.במידת הצורך, הסר ארטיפקטים על ידי בחירת כלי הדם הרלוונטיים בלבד. תחת מצב הבחירה, לחץ על backspace כדי להעתיק את כלי הדם שנבחרו לתמונה חדשה. לבסוף, נתח את אזור העור הטבעי תחת אותם פרמטרים כמו עבור הפיגום, הקצה ערך של 100% לרקמה הטבעית והשווה את הפיגום לערך זה.לדוגמה, אם אחוז הפיקסלים הלבנים הוא 30% ברקמה הנורמלית ו-15% בפיגום (scaffold), הדבר מייצג וסקולריזציה של 50% מהשטח הכולל של הפיגום. שימו לב כי הערכים תואמים לשטח התמונה כולה. לכן, יש לתקן זאת בהתאם לשטח האזור שנבחר כפי שמוצג כאן.שבועיים לאחר השתלת הרקמה, הארה בתאורה נגד-אור (trans illumination) אפשרה ויזואליזציה ברורה של מבנים כליים ברוחב של עד 30 micrometers בדגימת רקמה שלמה שכללה הן רקמה טבעית והן פיגומים (scaffolds) מושתלים. באמצעות סגמנטציה דיגיטלית לניתוח הרקמה שהוצאה, נצפו רמות וסקולריזציה של 62.28 plus or minus 8.6% בפיגום בהשוואה לעור הטבעי. בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור ליצור פגמים מלאים בעור שניתן לשחזרם ולקבע את הביומטריאל לפצע באופן מהימן.בעקבות הליך זה, ניתן להשתמש ברקמה המורחבת לניתוחים נוספים כגון היסטולוגיה או ביטוי של RNA וחלבונים.

a-full-skin-defect-model-to-evaluate-vascularization-biomaterials

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

אנחנו מציגים אימונוהיסטוכימיה כל הר לייזר מיקרוסקופיית confocal עם תיוג מרובים לניתוח רשת סבוכה היווצרות כלי דם בעור איבר עכבר עובריים.

Whole-mount עבור ניתוח immunohistochemical vasculature לימב עובריים עור: מערכת מודל לחקר המורפוגנזה מסעף דם בעובר

המטרה של פרוטוקול זה היא לבנות עור תלת מימדי בעובי מלא, הדומה לעור טבעי. עם מכשיר פציעה אוטומטי שנבנה במיוחד, ניתן ליצור פצעים מדויקים וניתנים לשחזור תחת שמירה על סטריליות.

דור של עור בעובי מלא תלת ממדי Equivalent ואוטומטי פציעה

נכון להיום, פגמים ברקמות עבות משוחזרים בדרך כלל על ידי מריחת דשי רקמות אוטולוגיות או רקמות מהונדסות. בפרוטוקול זה אנו מציגים שיטה חדשה להנדסת דש רקמה וסקולרי הנושא עוקץ אוטולוגי, שישמש כתחליף לדשים אוטולוגיים.

דש שריר כלי דם מהונדס

זהו קו מנחה לבניית רקמת כלי דם in vivo באמצעות לולאה עורקית מיקרו-כירורגית או תצורת פדיקל זורם בתוך תא הנדסת רקמות. ניתן להשתמש ברקמות כלי הדם שנוצרות להתחדשות איברים והחלפת פגמים ברקמות, כמו גם לבדיקת תרופות ומודלים של מחלות.

הנדסת רקמות ידי עצמותי כלי דם בתוך<em&gt; In vivo</em&gt; הנדסת רקמות קאמרית

אנו מתארים גישה מיקרו עבור הדור של בלופ arteriovenous (AV) כמודל לניתוח כלי דם in vivo בסביבה מבודדת היטב מאופיין. מודל זה הוא לא רק שימושי עבור חקירת אנגיוגנזה, אלא גם מתאים באופן אופטימלי עבור הנדסה vascularized axially ורקמות להשתלה.

Arteriovenous (AV) Loop במודל בעלי חיים קטנים לחקר אנגיוגנזה והנדסת רקמות כלי דם

סרטון זה מדגים מודל לחקר התפתחות היפרפלזיה מיואינטימלית לאחר ניתוח אינטרפוזיציה ורידית בחולדות.

וריד ביון דגם: מודל מתאים ללמוד patency מעקף

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול להמחיש כלי דם היווצרות ויוו ואת בזמן אמת ב- 3D פיגומים על ידי מיקרוסקופ multiphoton. אנגיוגנזה פיגומים מהונדסים נחקרה מודל פגם מאתר calvarial עצם קריטי. עוד כלי דם חדשים התגלו בקבוצה טיפול יותר שולטת.

אנגיוגנזה להמחיש באמצעות מיקרוסקופ Multiphoton Vivo ב מהונדסים גנטית לגרדום 3D-PLGA/nHAp Calvarial תיקון פגם קריטי של העצם

כאן, שני מודלים מורתיים ריפוי הפצע מתוארים, אחד שנועד להעריך את התגובה התאית הפצע ריפוי והשני כדי לכמת את שיעור סגירת הפצע. שיטות אלה ניתן להשתמש עם דגמי מחלות מורכבות כגון סוכרת כדי לקבוע מנגנונים של היבטים שונים של ריפוי הפצע המסכן.

הערכה של ריפוי בפצע חריפה באמצעות השרכה העור מפוליויניל כוהל של הרקמה העורית והזנב Excisional הפצע מודלים.

אנו מציגים פרוטוקול מפורט כדי ליצור מודל קסנוגרפט murine של מום ורדי. מודל זה מבוסס על הזרקה תת עורית של תאים אנדותל נגזר המטופל המכיל HYPER-activating TIE2 ו / או מוטציות גן PIK3CA. נגעים Xenograft מקרוב לסיכום התכונות ההיסטופתולוגיות של רקמת חולה VM.

מודל קסנוגרפט נגזר ממטופל למום ורדי

מטרת פרוטוקול זה היא לתאר את הדור ואת הניתוח הנפחי של שווה ערך לעור אנושי וסקולרי באמצעות טכניקות נגישות ופשוטות לתרבות ארוכת טווח. ככל האפשר, הרציונל לצעדים מתואר כדי לאפשר לחוקרים את היכולת להתאים אישית בהתבסס על צרכי המחקר שלהם.

דור של שווה ערך לעור אנושי בהרכבה עצמית

פרוטוקול זה מתאר את הטכניקה הכירורגית לקצירת מודל פרפורטור אנושי המבוסס על הפדיקל העמוק של עורק אפיגסטרי תחתון, המיועד למחקר ניסוי.

מודל ניסויים של DIEP אנושי לחקירת אסטרטגיות שימור עבור אלוגרפטים מרוכבים וסקולריים ופלפים חופשיים

חקור הדמיה וכימות של כלי דם בחומרים הנדסיים בעור באמצעות מודל פגמי עור מלא בעכברים. שיטה זו מספקת הערכה יעילה וחסכונית של היווצרות כלי דם בתוך ביומטריאלים.

עור מלא פגמים דגם להערכת כלי דם של Biomaterials

גלה סרטונים נוספים