Name: הערכת מעבדה של יעילות העברה הנקי התזונתית של קרוב בPCB לאגם פורל ( Salvelinus namaycush) מטרפו (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 24 s
Description: חקור הערכת יעילות העברה טרופית נטו של קונגנרים PCB לפורל אגמים (Salvelinus namaycush) מטרפו. שיטת מעבדה זו משתמשת בטרף טבעי וכרומטוגרפיית גזים-ספקטרומטריית מסה כדי לחקור דינמיקת מזהמים במערכות אקולוגיות מימיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומנה בחלקה על ידי ועדת הדיג של האגמים הגדולים ומכון משאבי המים של אניס. שימוש בשמות מסחר, מוצרים או חברות אינו מרמז על תמיכה של ממשלת ארה"ב. מאמר זה הוא תרומה 1867 של מרכז המדע של הסקר הגיאולוגי של האגמים הגדולים של ארה"ב.

ניסוי מעבדה .1 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השג את דגי הטרף להיות מוזן לדגים טורפים במהלך הניסוי. רצוי צריך להיות בשבי דג הטרף האלה בתחום, הקפוא, ומאוחסן בכ -30 C °. קחו למשל את פעילות דיג מסחרית כמקור פוטנציאלי לדגי הטרף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להציג את דג הטורף למכלי המעבדה שישמש לניסוי. עד 15 דגי טורף הוכנס לתוך כל אחד מטנקי 870-L, ועד 30 דגי טורף הוכנס לתוך כל אחד מטנקי 2,380-L במחקרים קודמים 16,18. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסתגל דג הטורף לדיאטה של ​​דגי טרף שנבחרו. ברגע שהתאקלם, דגי הטורף צריכים להישאר על דיאטה זו ל1-3 חודשים לפני תחילת הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח בצד דגימות של דגי טרף על ידי באופן אקראי בחירת 10 עד 20 דגימות מרוכבים מהקבוצה של דגי טרף. מספר דגי טרף במדגם מרוכבים יכול נע בין 3 עד 100, תלוי בגודל של הטרףדגים. כל דגימה מרוכבים צריכה להיות כפולה בשקית, קפוא, ומאוחסן בכ -30 C °. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליזום הניסוי על ידי הקרבת 30 עד 50% מהדגים בכל אחד מהטנקים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את הדגים, לערבב 8 גרם של Finquel עם 45 ליטר של מים במכל פלסטיק גדול ולאחר מכן למקם את הדג במכל עם פתרון Finquel. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מורדמים פעם, למקם את כל הדגים הקריבו מטנק אחד לשקית, שקית לאחר מכן לחצו פעמיים, וחנות בכ -30 ° C עד הזמן של העיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול כל אחד מהדגים שנותרו בכל אחד מהטנקים, ולהקליט את המשקולות; הרדמה סבירה להניח שתהיה צורך לנהל במשקל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להרדים את הדגים, לערבב 4.6 גרם של Finquel עם 45 ליטר של מים במכל פלסטיק גדול, ולאחר מכן למקם את הדג במכל עם פתרון Finquel. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חכה כמה דקות עד שחומר ההרדמה תיכנס לתוקף לפני שקילת הדגים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בכל יום של הניסוי, להפשירכמות המתאימה של דגי טרף, ולחתוך את דגי טרף לחתיכות במשקל של כ 1 עד 5 גרם. לשקול את כמות דגי טרף כדי להיות ממוקם בכל אחד מהטנקים, ולאחר מכן שחרר את חתיכות דג טרף לכל טנק ולאפשר לדגים טורפים על 1 שעות כדי להאכיל. ואז להסיר את כל מזון שלא נאכל, לאפשר מזון לייבוש באוויר במשך כ20 דקות, ולאחר מכן לשקול את המזון שלא נאכל לכל אחד מהטנקים. רשום את כמות המזון ממוקמת בטנק ואת כמות מזון שלא נאכל לכל אחד מהטנקים בכל יום. הערה: לניסוי הנציג, טרוטה הואכלו כמזון ממש כמו שהיה לצרוך בתקופה אחת האכלה בכל יום 18. עם זאת, הדגים טורפים יכולים גם להיות ממוקמים במנות קבועות 16,19. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסיים את הניסוי על ידי הקרבת כל הדגים טורפים שנותרו בכל אחד מהטנקים. להרדים את הדגים, לערבב 8 גרם של Finquel עם 45 ליטר של מים במכל פלסטיק גדול ולאחר מכן למקם את הדג במכל עם פתרון Finquel. הרשומה tהוא המשקל של כל אחד מהדגים הקריבו. לקבלת תוצאות אמינות, הניסוי חייב לרוץ ל100 ימים לפחות, רצוי לפחות 130 ימים. מניחים את כל הדגים מטנק לתוך תיק אחד, תיק לאחר מכן כפול, וחנות בכ -30 ° C עד מועד עיבוד. </li></ol> Homogenization 2 דגים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר קבוצה של דגים טורפים ו / או חומרים מרוכבים דגי טרף להפשרה. לאפשר מרוכבים להפשיר באופן חלקי. כל מרוכבים עשויים לדרוש 0.5-1 שעה לhomogenize. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות הבלנדרים המתאימים בגודל, homogenize כל אחד מהחומרים מרוכבים. עבור כל מרוכבים, למקם מדגם (50-100 ז) לhomogenate לתוך צנצנת ניקתה, ושטף אצטון, וכותרתו. לאחר מכן מכסה את הצנצנת ולאחסן את הצנצנת בכ -30 ° C עד למועד העיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף את כל הציוד המשמש לhomogenize הדגים, ולאחר מכן לשטוף היטב במים מזוקקים ומתנול, בין דגימות. </li></ol> .3 הפקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוקל 20.0 גרםשל מופשר רקמות דג הומוגני בכוס 200 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוסיף כ 40 גרם של נתרן גופרתי ומערבבים היטב עם מרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף פתרון ספייק פונדקאית המכיל קרוב ב30, 61, 161, ו166. ספייק בריכוז כי תשואות ריכוז סופי של 20 / מ&quot;ל ​​ng בתמצית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר המדגם להתייבש על RT תוך כדי ערבוב כל 20 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר את המדגם כדי להגיע עקביות של חול יבש, ובנקודה המדגם מוכן להפקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להגדיר את מנגנון חילוץ Soxhlet עם בקבוק 500 מ&quot;ל מכיל שבבי רתיחה טפלון, Soxhlet, וקבל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוסיף את תערובת דגים המיובש לאצבעון זכוכית עם תחתית דיסק-fritted גס או אצבעון נייר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 150 מ&quot;ל של הקסאן 50% וdichloromethane 50% לכוס המשמשת למדגם ומערבבים תוך גירוד הקירות של הכוס עם מרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את הממס לחלק העליון של Soxhlet עם הבקבוק המצורף ולאפשר לו לעבור בין Soxhlet וב<html> לבקבוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חוזר בשנית עם 150 מ&quot;ל שוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את Soxhlet עם הבקבוק המצורף אל גוף החימום ולצרף את הקבל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את גוף החימום ולהביא הממס לרתיחה עדינה, ואז לחלץ למינימום של 16 שעות כדי לוודא שמים קרים מסופקים למעבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שאפשר הממס להתקרר, לבדוק אם כל אחד מצלוחיות המדגם מכיל מים. עבור אלה צלוחיות המכילות מים, להוסיף נתרן גופרתי ולערבל עד שהמים נספגים על ידי נתרן גופרתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכז את המדגם באמצעות concentrator מדגם חנקן או התקנת Kaderna הדני (KD) כלי זכוכית עם אמבט מים חם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר המדגם להתאדות בהיקף של פחות מ 2 מ&quot;ל, ולאחר מכן להביא לנפח סופי של 5 מ&quot;ל באמצעות כביסות קטנות של הקסאן להעביר את הדגימה מכלי הזכוכית המשמשות לבקבוק מדידה 5 מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברה ל10 מ&quot;ל בקבוקון ותווית עם מידע מדגם. </li></ol>s = &quot;jove_title&quot;&gt; 4. לחלץ נקי-up <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן סיליקה ג&#39;ל acidified ידי הוספת 44 גרם של חומצה גופרתית המרוכזת לשל סיליקה ג&#39;ל מופעל 100 גרם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 10 גרם של סיליקה ג&#39;ל acidified לעמודת כרומטוגרפיה קטנה המכילה התוספת קטנה של צמר זכוכית בתחתית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 1 מ&quot;ל של תמצית מדגם לעמודה לאחר שלפני ניקוי העמודה עם 10 מ&quot;ל של הקסאן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Elute העמודה עם 20 מ&quot;ל של הקסאן ולאסוף בשפופרת זכוכית 20 מ&quot;ל מחודדת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את צינור הזכוכית על מכשיר מאייד חנקן (N-Vap) תחת זרם של חנקן ושקוע במים חמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתאדות פחות מ 1 מ&quot;ל אבל לא ליובש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוציאים ממנגנון N-Vap ולהעביר לבקבוק המדידה 1 מ&quot;ל עם כביסות קטנות של הקסאן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברה ל1.8 מ&quot;ל autosampler בקבוקון שכותרתו עם מידע מדגם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספייק 4 μl לסטנדרטים פנימיים לתוך הבקבוקון. המדגם הוא מוכן לניתוח עכשיו. </li></ol> .5 אנאלייסיס על ידי גז כרומטוגרפיה - ספקטרומטריית מסת השימוש שלילי כימי יינון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בסטנדרטים לכייל את המכשיר: הסטנדרטים זמינים בתערובות מורכבות מקבוצות של קרובים במופרד היטב. תערובות 1-5 כוללות כמעט את כל הקרובים במצא ב -1016 Arochlors, 1221, 1232 1242, 1248, 1,254, ו1260. מערבבים 1 משמש כתערובת כיול רב ברמה, וליניאריות מערכת אושר על ידי הכנה לפחות חמש רמות כיול בריכוזים בין 2 ל 100 ng / ml. תערובות 2-5 משמשות ככיולי נקודה אחת עבור כל משלימתו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת כרומטוגרפיה - מערכת ספקטרומטריית מסה במצב היינון הכימי השלילי עם מימן כגז המוביל (1 מ&quot;ל / דקה) ומתאן כגז מגיב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש התמזגה סיליקה, טור נימים (60 מ &#39;× 0.25 מ&quot;מ הקוטר פנימי) מצופה בDB-XLB בעובי סרט 0.25-מיקרומטר להפרדה. טמפרטורת תכנית תנור 60-212 ° C 25 מעלות צלזיוס / דקה, ולאחר מכן ל260 ° C ב1 ° C / min, ולאחר מכן ל280 ° C ב 4 ° C / דקה, עם זמן את האחיזה סופית של 4 דקות. יש להגדיר טמפרטורות מזרק וקו ההעברה ב280 ° C. הזרק 1 עד 2 μl של המדגם באמצעות מצב זריקת splitless. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את כל הסטנדרטים ודגימות בשיטה סטנדרטית הפנימית באמצעות 13 decachlorobiphenyl שכותרתו C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע בדיקה על הכיול הראשוני על ידי הפעלה סטנדרטי מקור שני וAroclors 1,242 ו1260, ולאחר מכן להשוות ערכים חזויים לקרובים בAroclor עם הסכומים שנצפו מהליך בדיקה זו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהליך הכיול הראשוני הושג בהצלחה ניתוח מלא, של כל הדגימות. הפעל כיול לבדוק כל עשר דגימות, באמצעות כל אחד מתערובות הכיול מהכיול הראשוני. </li></ol> .6 חישוב העברה יעיל הנקי הטרופית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את יעילות העברה תזונתית נטו, γ, עבור כל שילוב oטנק f ומשלימתו PCB באמצעות המשוואה הבאה: <img alt="משוואת 1" fo:content-width="2in" src="/files/ftp_upload/51496/51496eq1.jpg" /> , שבו [f PCB] היא ריכוז משלימתו PCB הממוצע של דג הטורף במכל בסוף הניסוי, f W היא המשקל הממוצע של הדגים טורפים במכל בסוף הניסוי, [PCB i] הוא ריכוז משלימתו PCB הממוצע של דג הטורף במכל בתחילת הניסוי, W הוא i המשקל הממוצע של הדגים טורפים בתחילת הניסוי, ואת כמות משלימתו PCB בלע מתייחסת למשקל של משלימתו PCB בליעה, בממוצע, על ידי כל אחד טרוטה בטנק במהלך הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את המכנה במשוואה לעיל על ידי הכפלת הריכוז הממוצע של משלימתו PCB בחומרים מרוכבים דגי טרף על ידי הכמות הממוצעת (במשקל) של דגי הטרף אכל לדגים טורפים בdur הטנקing את כל מהלך הניסוי. </li></ol>

<ol><li>Madenjian, C. P., Carpenter, S. R., Rand, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+are+the+PCB+concentrations+of+salmonine+individuals+from+the+same+lake+so+highly+variable%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Fisheries+and+Aquatic+Sciences%22%5BJournal%5D)">Why are the PCB concentrations of salmonine individuals from the same lake so highly variable?</a> Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 51 (4), 800-807 (1994).</li>
<li>Madenjian, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Net+trophic+transfer+efficiency+of+PCBs+to+Lake+Michigan+coho+salmon+from+their+prey%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Net trophic transfer efficiency of PCBs to Lake Michigan coho salmon from their prey.</a> Environmental Science and Technology. 32 (20), 3063-3067 (1998).</li>
<li>Thomann, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioaccumulation+model+of+organic+chemical+distribution+in+aquatic+food+chains%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Bioaccumulation model of organic chemical distribution in aquatic food chains.</a> Environmental Science and Technology. 23 (6), 699-707 (1989).</li>
<li>Calabrese, E. J., Baldwin, L. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCalabrese%2C+EJ+%22Performing+ecological+risk+assessments%22">Performing ecological risk assessments</a>. , Lewis. Boca Raton, Florida. (1993).</li>
<li>Madenjian, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+in+net+trophic+transfer+efficiencies+among+21+PCB+congeners%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Variation in net trophic transfer efficiencies among 21 PCB congeners.</a> Environmental Science and Technology. 33 (21), 3768-3773 (1999).</li>
<li>Jackson, L. J., Schindler, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Field+estimates+of+net+trophic+transfer+of+PCBs+from+prey+fishes+to+Lake+Michigan+salmonids%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Field estimates of net trophic transfer of PCBs from prey fishes to Lake Michigan salmonids.</a> Environmental Science and Technology. 30 (6), 1861-1865 (1996).</li>
<li>Gobas, F. A. P. C., Muir, D. C. G., Mackay, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+of+dietary+bioaccumulation+and+faecal+elimination+of+hydrophobic+organic+chemicals+in+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Dynamics of dietary bioaccumulation and faecal elimination of hydrophobic organic chemicals in fish.</a> Chemosphere. 17 (5), 943-962 (1988).</li>
<li>Madenjian, C. P., O’Connor, D. V., Rediske, R. R., O’Keefe, J. P., Pothoven, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Net+trophic+transfer+efficiencies+of+polychlorinated+biphenyl+congeners+to+lake+whitefish+%28Coregonus+clupeaformis%29+from+their+food%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Net trophic transfer efficiencies of polychlorinated biphenyl congeners to lake whitefish (Coregonus clupeaformis) from their food.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 27 (3), 631-636 (2008).</li>
<li>Isosaarl, P., Kiviranta, H., Lie, Ø, Lundebye, A. K., Ritchie, G., Vartiainen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accumulation+and+distribution+of+polychlorinated+dibenzo-p-dioxin%2C+dibenzofuran%2C+and+polychlorinated+biphenyl+congeners+in+Atlantic+salmon+%28Salmo+salar%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Accumulation and distribution of polychlorinated dibenzo-p-dioxin, dibenzofuran, and polychlorinated biphenyl congeners in Atlantic salmon (Salmo salar).</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 23 (7), 1672-1679 (2004).</li>
<li>Buckman, A. H., Brown, S. B., Hoekstra, P. F., Solomon, K. R., Fisk, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicokinetics+of+three+polychlorinated+biphenyl+technical+mixtures+in+rainbow+trout+%28Oncorhynchus+mykiss%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Toxicokinetics of three polychlorinated biphenyl technical mixtures in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss).</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 23 (7), 1725-1736 (2004).</li>
<li>Burreau, S., Axelman, J., Broman, D., Jakobsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+uptake+in+pike+%28Esox+lucius%29+of+some+polychlorinated+biphenyls%2C+polychlorinated+naphthalenes+and+polybrominated+diphenyl+ethers+administered+in+natural+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Dietary uptake in pike (Esox lucius) of some polychlorinated biphenyls, polychlorinated naphthalenes and polybrominated diphenyl ethers administered in natural diet.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 16 (12), 2508-2513 (1997).</li>
<li>Madenjian, C. P., DeSorcie, T. J., Stedman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogenic+and+spatial+patterns+in+diet+and+growth+of+lake+trout+in+Lake+Michigan%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Ontogenic and spatial patterns in diet and growth of lake trout in Lake Michigan.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 127 (2), 236-252 (1998).</li>
<li>Paterson, G., Whittle, D. M., Drouillard, K. G., Haffner, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Declining+lake+trout+%28Salvelinus+namaycush%29+energy+density%3A+are+there+too+many+salmonid+predators+in+the+Great+Lakes%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Fisheries+and+Aquatic+Sciences%22%5BJournal%5D)">Declining lake trout (Salvelinus namaycush) energy density: are there too many salmonid predators in the Great Lakes?</a> Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 66 (6), 919-932 (2009).</li>
<li>Madenjian, C. P., O’Connor, D. V., Nortrup, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+approach+toward+evaluation+of+fish+bioenergetics+models%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Fisheries+and+Aquatic+Sciences%22%5BJournal%5D)">A new approach toward evaluation of fish bioenergetics models.</a> Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 57 (5), 1025-1032 (2000).</li>
<li>Madenjian, C. P., Pothoven, S. A., Kao, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reevaluation+of+lake+trout+and+lake+whitefish+bioenergetics+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Great+Lakes+Research%22%5BJournal%5D)">Reevaluation of lake trout and lake whitefish bioenergetics models.</a> Journal of Great Lakes Research. 39 (2), 358-364 (2013).</li>
<li>Madenjian, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+lake+whitefish+bioenergetics+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a lake whitefish bioenergetics model.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 135 (1), 61-75 (2006).</li>
<li>Madenjian, C. P., O’Connor, D. V., Chernyak, S. M., Rediske, R. R., O’Keefe, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+chinook+salmon+%28Oncorhynchus+tshawytscha%29+bioenergetics+model%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Fisheries+and+Aquatic+Sciences%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a chinook salmon (Oncorhynchus tshawytscha) bioenergetics model.</a> Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 61 (4), 627-635 (2004).</li>
<li>Madenjian, C. P., David, S. R., Rediske, R. R., O’Keefe, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Net+trophic+transfer+efficiencies+of+polychlorinated+biphenyl+congeners+to+lake+trout+%28Salvelinus+namaycush%29+from+its+prey%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Net trophic transfer efficiencies of polychlorinated biphenyl congeners to lake trout (Salvelinus namaycush) from its prey.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 31 (12), 2821-2827 (2012).</li>
<li>Madenjian, C. P., O'Connor, D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+evaluation+of+a+lake+trout+bioenergetics+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Laboratory evaluation of a lake trout bioenergetics model.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 128 (5), 802-814 (1999).</li>
<li>Ballschmiter, K., Bacher, R., Mennel, A., Fischer, R., Riehle, U., Swerev, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+determination+of+chlorinated+biphenyls%2C+chlorinated+dibenzodioxins%2C+and+chlorinated+dibenzofurans+by+GC-MS%5BTitle%5D)+AND+%22HRC+Journal+of+High+Resolution+Chromatography%22%5BJournal%5D)">The determination of chlorinated biphenyls, chlorinated dibenzodioxins, and chlorinated dibenzofurans by GC-MS.</a> HRC Journal of High Resolution Chromatography. 15 (4), 260-270 (1992).</li>
<li>Madenjian, C. P., David, S. R., Pothoven, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+activity+and+energy+budget+balancing+algorithm+on+laboratory+performance+of+a+fish+bioenergetics+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Effects of activity and energy budget balancing algorithm on laboratory performance of a fish bioenergetics model.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 141 (5), 1328-1337 (2012).</li>
<li>Lieb, A. J., Bills, D. D., Sinnhuber, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accumulation+of+dietary+polychlorinated+biphenyls+%28Aroclor+1254%29+by+rainbow+trout%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Accumulation of dietary polychlorinated biphenyls (Aroclor 1254) by rainbow trout.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 22 (4), 638-642 (1974).</li>
<li>Niimi, A. J., Oliver, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+half-lives+of+polychlorinated+biphenyl+%28PCB%29+congeners+in+whole+fish+and+muscle+of+rainbow+trout+%28Salmo+gairdneri%29%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Fisheries+and+Aquatic+Sciences%22%5BJournal%5D)">Biological half-lives of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners in whole fish and muscle of rainbow trout (Salmo gairdneri).</a> Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences. 40 (9), 1388-1394 (1983).</li>
<li>Gobas, F. A. P. C., Wilcockson, J. B., Russell, R. W., Haffner, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+biomagnification+in+fish+under+laboratory+and+field+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Mechanism of biomagnification in fish under laboratory and field conditions.</a> Environmental Science and Technology. 33 (1), 133-141 (1999).</li>
<li>Dmitrovic, J., Chan, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+polychlorinated+biphenyl+congeners+in+human+milk+by+gas+chromatography+%E2%80%93+negative+chemical+ionization+mass+spectrometry+after+sample+clean-up+by+solid-phase+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B%22%5BJournal%5D)">Determination of polychlorinated biphenyl congeners in human milk by gas chromatography – negative chemical ionization mass spectrometry after sample clean-up by solid-phase extraction.</a> Journal of Chromatography B. 778 (1-2), 147-155 (2002).</li>
<li>Zorn, M. E., Gibbons, R. D., Sonzogni, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weighted+least-squares+approach+to+calculating+limits+of+detection+and+quantification+by+modeling+variability+as+a+function+of+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Weighted least-squares approach to calculating limits of detection and quantification by modeling variability as a function of concentration.</a> Analytical Chemistry. 69 (15), 3069-3075 (1997).</li>
</ol>

עבור האומדנים מדויקים ביותר של γ, הנסיין חייב להיות מסוגל לעקוב אחר שתי כמות המזון ממוקמת בכל אחד מהטנקים וכמות מזון שלא נאכל בכל אחד מהטנקים במהלך הניסוי בצורה מדויקת. כדי להשיג זאת, הנסיין חייב להיות מסוגל להסיר את כל מזון שלא נאכל מהטנקים ולקבוע במדויק את משקלו. בנוסף למעקב מדויק של המזון שנאכל בפועל על ידי דג הטורף, הערכה מדויקת של γ יכולה גם לסמוך על משך מספק של הניסוי. בהתחשב בכך שמחקרי מעבדה שצוטטו באופן נרחב שתוכננו במיוחד כדי להעריך את יעילות העברה תזונתית של PCBs לדוג מה...

מבין כל הגורמים המשפיעים על הקצב שבו דגים צוברים מזהמים, היעילות שבה דגים שומרים על מזהמים מהמזון שהם אוכלים היא אחת החשובות ביותר1-3. מודלים להערכת סיכונים פותחו כדי לחזות סיכונים עתידיים הן לאנשים והן לחיות בר שאוכלים דגים מזוהמים בתרחישים שונים של זיהום סביבתי, והאמינות של תחזיות אלה תלויה באופן קריטי בדיוק ההערכות של היעילות שבה דגים שומרים על מזהמים ממזונם.
היעילות שבה המזהם במזון שנבלע על ידי הטורף מועבר דרך דופן המעי ידועה כיעילות העברה טרופית גולמית5. חלק מכמות המזהם המועברת דרך דופן המעיים של הטורף עלולה בסופו של דבר ללכת לאיבוד באמצעות טיהור ו/או טרנספורמציה מטבולית. היעילות שבה המזהם במזון שנבלע על ידי הטורף נשמר על ידי הטורף, כולל כל הפסד עקב סילוק וטרנספורמציה מטבולית, ידועה כיעילות העברה טרופית נטו6.
נראה כי יעילות ההעברה הטרופית הגולמית של מזהמים אורגניים לדגים מטרפם משתנה בהתאם לתכונות הכימיות של המזהם, כולל שיוך שומנים כפי שנמדד על ידי מקדם חלוקת אוקטאנול-מים, Kow3,7. על פי קשר אמפירי שפותח על ידי תומן3, יעילות ההעברה הטרופית ברוטו גבוהה יחסית כאשר log Kow שווה לערך בין 5 ל-6. יעילות ההעברה הטרופית הגולמית יורדת באופן אקספוננציאלי בשיעור של 50% ליחידת לוג Kכאשר לוג Kעולה מ-6 ל-10, על פי יחס תומן3.
עם זאת, נראה כי יעילות ההעברה הטרופית הגולמית והנטו של קונגנרים ביפניל פולי-כלורי (PCB) לדגים מטרפם אינה עוקבת אחר הקשר של תומן3 ברוב המקרים. למרות שיעילות ההעברה הטרופית של קונגנרים PCB לדג לבן אגם (Coregonus clupeaformis) ממזונו עקבה אחר הקשר שהציע תומן8, יעילות ההעברה הטרופית של קונגנרים PCB הייתה רק חלשה או לא קשורה כלל ללוג Kow עבור סלמון אטלנטי (Salmo salar)9, טרוטת הקשת (Oncorhynchus mykiss)10, סלמון קוהו (Oncorhynchus kisutch)11ופייק צפוני (Esox lucius)11.,
המטרה הכוללת של מחקר זה הייתה להציג טכניקת מעבדה להערכת יעילות ההעברה הטרופית נטו של קונגנרים PCB לדג אוכל דגים מטרפו. טרוטת האגם (Salvelinus namaycush) נבחרה כדג אוכלי הדגים לניסוי שלנו מאחר שקל יחסית לתחזק את טרוטת האגם במיכלי מעבדה. Bloater (Coregonus hoyi) נבחר כדג הטרף שיואכלו לטרוטת האגם מכיוון שפורל האגם נאכל על ידי טרוטת האגם בסביבתו הטבעית12. בנוסף, קבענו אם יעילות ההעברה הטרופית נטו של טרוטת האגם שהוערכה מניסוי המעבדה שלנו עקבה אחר הקשר של תומן3. קבענו גם אם למידת הפעילות של טרוטת האגם הייתה השפעה משמעותית על יעילות ההעברה הטרופית נטו (γ) של קונגנרים PCB. מאמינים כי פעילות טרוטת האגם באגמים הגדולים של לורנטיאן גברה לאחרונה מכיוון ששינויים בשרשרת המזון גרמו לטרוטת האגם להקצות יותר אנרגיה לחיפוש מזון13. טרוטת האגם נאלצה להתאמן בקבוצה אחת של טנקים על ידי הכפפת טרוטת האגם לקצבי זרימה גבוהים יחסית, בעוד שטרוטת האגם האחרת הורשתה להישאר לא פעילה יחסית על ידי הכפפתם לקצבי זרימה נמוכים יחסית. לבסוף, נדונים הפרטים הספציפיים של נוהל המעבדה שלנו שיש לעקוב אחריהם בקפידה כדי להבטיח את רמת הדיוק הגבוהה ביותר בהערכות γ וכדי להפוך את תוצאות המעבדה לישימות בתחום, כמו גם כיוונים עתידיים למחקר המתבסס על טכניקת המעבדה שלנו. ניתן להעריך את יעילות ההעברה הטרופית נטו הן במעבדה והן בשטח, ויתרונות וחסרונות קשורים לשתי הגישות. הדיוק בהערכת γ תלוי בדיוק אומדן צריכת המזון. ניתן לקבוע במדויק את כמות המזון שאוכלים דגים במעבדה כאשר מקפידים על פרוטוקולים מתאימים, בעוד שכמות המזון שאוכלים דגים בשדה מוערכת בדרך כלל באמצעות מודלים ביו-אנרגטיים. לשימוש במודלים ביו-אנרגטיים כדי לגזור את כמות המזון הנאכלת יש פוטנציאל להכניס כמות משמעותית של אי ודאות להערכות צריכת המזון. מודלים ביו-אנרגטיים של דגים הוכחו כמעריכים את צריכת המזון ללא הטיה ניתנת לזיהוי במקרה של טרוטת האגם14,15, אך זוהתה הטיה ניכרת בהערכות המודל הביו-אנרגטי של צריכת מזון במקרה של דג לבן באגם15,16. מצד שני, הערכות של יעילות העברה טרופית נטו המוערכות במעבדה עשויות שלא להיות ישימות לשדה עקב הבדל בשיעורי ההזנה בין המעבדה לשדה17. עדויות הן מהמעבדה והן מהשטח מצביעות על כך שקצב ההזנה יכול להשפיע על γ14,17.
המתודולוגיה ששימשה במחקר הנוכחי להערכת γ במעבדה ישימה למצבים שבהם הדג הטורף ניזון מדגי טרף, וניתן לעקוב במדויק אחר כמות דגי הטרף שנאכלים על ידי הטורף. כדי להשיג זאת, על הנסיין לשקול את כל המזון לפני הכנסתו למיכל; והנסיין חייב להיות מסוגל להוציא את כל המזון שלא נאכל מהמיכל, ואז לשקול את המזון שלא נאכל. בנוסף, צריכה להיות זמינה חבילה נאותה של מערבלים ובלנדרים כדי להשיג מידה מספקת של הומוגניזציה של הדגימות של דגי טורף וטרף כאחד. לבסוף, מכשור כרומטוגרפיית הגז - ספקטרומטריית מסה המשמש לקביעת ריכוזי הקונגנר PCB חייב להיות מסוגל לזהות ולכמת קונגנרים בודדים של PCB בריכוזים נמוכים יחסית.

<table><tbody><tr><td>מיכלי פיברגלס 870 ליטר</td><td>יחידות קפואות</td><td>RT-430-1</td><td></td></tr><tr><td>מיכלי פיברגלס 2,380 ליטר</td><td>יחידות קפואות</td><td>RT-630-1</td><td></td></tr><tr><td>טריקאין מתאן סולפונאט (פינקל)</td> <td>מעבדות כימיות ארג'נט, בע"מ</td><td>C-FINQ-UE-100G</td><td>יוגנול יכול לשמש גם כחומר הרדמה.</td></tr><tr><td>סכין שף אשלנד</td><td>סכו"ם שיקגו</td><td>מק"ט 1106336</td><td></td></tr><tr><td>קרש חיתוך</td><td>וויליאמס-סונומה</td><td>3863586</td><td></td></tr><tr><td>מיקסר וריקלי הובארט (40 ליטר)</td>מעבד מזון <td>הובארט תאגיד</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1.9 ליטר</td><td>רובוט קופה, בע"מ</td><td>RSI 2Y1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>שקיות פוליאתילן (גדלים שונים)</td><td>Arcan Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צנצנות Chem</td><td></td><td>220-0125</td><td></td></tr><tr><td>איזון אלקטרוני עומס עליון</td><td>מטלר טולדו</td><td>מטלר PM 6000&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>נתרן גופרתי, נטול מים - גרגירי</td><td>EMD</td><td>SX0760E-3</td><td></td></tr><tr><td>אצבעוני מיצוי זכוכית (45 מ"מ x 130 מ"מ)</td> <td>Wilmad-Lab Glass</td><td>LG-7070-114</td><td></td></tr><tr><td>שבבי טפלון רותחים</td><td>Chemware</td><td>919120</td><td></td></tr><tr><td>רכז דגימת חנקן Vap מהיר</td><td>Labconco</td><td>7910000</td><td></td></tr><tr><td>רכז חנקן N-Vap</td><td>אורגנומציה</td><td>112</td><td></td></tr><tr><td>כלי זכוכית מיצוי סוקסלט (500 מ"ל)</td><td>Wilmad-Lab Glass</td><td>&nbsp; LG-6900-104</td><td></td></tr><tr><td>הקסאן</td><td>בורדיק & ג'קסון&nbsp;</td><td>קט' 211-4</td><td></td></tr><tr><td>דיכלורומתאן</td><td>בורדיק & ג'קסון&nbsp;</td><td>קט' 300-4</td><td></td></tr><tr><td>סיליקה ג'ל</td><td>BDH</td><td>Cat. BDH9004-1 ק"ג</td><td></td></tr><tr><td>Labl Line 5000 מחמם מיצוי יחידות</td><td>מעבדה מכשירי</td><td></td><td></td>קו</tr><tr><td>Agilent 5973 GC/MS עם יינון כימי</td><td>Agilent</td><td>5973N</td><td></td></tr><tr><td>פתרון סטנדרטי פנימי&nbsp;</td><td>מעבדות איזוטופ קיימברידג'</td><td>EC-1410-1.2</td><td></td></tr><tr><td>תקני כיול קונגנרס PCB</td> עמודה <td>Accustandard</td><td>C-CSQ-SET</td><td></td></tr><tr><td>DB-XLB (60 מ' x 0.25 מ"מ, 0.25 מיקרון)</td><td>Agilent / J& רוחב</td><td>122-1262</td><td></td></tr></tbody></table>

הערכת מעבדה של יעילות העברה הנקי התזונתית של קרוב בpcb לאגם פורל (<em&gt; salvelinus namaycush</em&gt;) מטרפו

Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout (Salvelinus namaycush) from Its Prey

טכניקה להערכת מעבדה של יעילות נטו תזונתית העברה (γ) של biphenyl polychlorinated קרוב ב( PCB) לדגי piscivorous מהטרף שלהם מתוארת במסמך זה. במהלך ניסוי מעבדה 135 יום, האכלנו מנופח (Coregonus hoyi) שנתפס באגם מישיגן לטרוטה (namaycush Salvelinus) המשיך בשמונה טנקי מעבדה. המנופח הוא טרף טבעי עבור טרוטה. בארבעת הטנקים, קצב זרימה גבוה יחסית היה בשימוש על מנת להבטיח פעילות גבוהה יחסית על ידי טרוטה, ואילו קצב זרימה נמוך שימש בארבעה טנקים האחרים, המאפשר לפעילות טרוטה נמוכה. על בסיס טנק אחר טנק, כמות המזון נאכלה על ידי טרוטה בכל יום של הניסוי נרשמה. כל טרוטה נשקלה בהתחלה והסיום של הניסוי. ארבעה עד תשע טרוטה מכל אחד משמונת הטנקים הוקרבו בתחילת הניסוי, וכל פורל 10 האגם שנותר בכל אחד מהטנקים היו euthanized בסוף הניסוי. אנחנו נקבע ריכוזים של 75 קרובים בPCB בטרוטה בתחילת הניסוי, בטרוטה בסוף הניסוי, ובbloaters מוזנים לטרוטה במהלך הניסוי. בהתבסס על המדידות הללו, γ חושב שלכל אחד מן 75 קרובים בPCB בכל אחד משמונת הטנקים. אומר γ חושב שלכל אחד מן קרוב בPCB 75 לטרוטה שני פעילה ולא פעילה. בגלל הניסוי חזר על עצמו בשמונה טנקים, השגיאה סטנדרטית על משמעות γ יכול להיות מוערך. תוצאות מסוג זה של ניסוי שימושיות במודלים להערכת סיכון ללחזות את עתיד סיכון לבני אדם וחיות בר אכילת דגים מזוהמים בתרחישים שונים של זיהום סביבתי.

טרוטה הראתה כמות משמעותית של צמיחה במהלך הניסוי, כטרוטה הראשונית אומרת משקולות נעות 694-907 g כאשר טרוטה הסופית אומרת משקולות נעות בין 853 ל1,566 גר &#39;(טבלת 1). כמות המזון הממוצעת הנצרכת על ידי טרוטה במהלך הניסוי 135 היום נעה בין 641 ל2,649 גרם. אומר ריכוזי משלימתו PCB בטרוטה עלה במהלך הניסוי, כריכוזים ממוצעים PCB משלימתו נעו 0.01-7.14 ng / g (בסיס רטוב במשקל) בתחילת הניסוי ואילו ריכוזים הממוצעים PCB משלימתו נעו .03-29.31 על ידי מסקנה של הניסוי (טבלה 2)...

טכניקה להערכת מעבדה של יעילות נטו תזונתית העברת biphenyl polychlorinated הקרוב ב( PCB) לדגי piscivorous מהטרף שלהם מוצגת. על מנת למקסם את תחולתה של תוצאות המעבדה לשדה, דגי piscivorous צריכים להיות מוזנים דגי טרף שנאכלים בדרך כלל בתחום.

הערכת מעבדה של יעילות העברה הנקי התזונתית של קרוב בPCB לאגם פורל (<em&gt; Salvelinus namaycush</em&gt;) מטרפו

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from ...

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא להעריך את יעילות ההעברה הטרופית נטו של קונגנרים PCB לטרוטת האגם מטרפו, ולאחר מכן לקבוע אם למידת הכלור או למידת מסיסות השומנים של קונגנר ה-PCB יש השפעה על יעילות ההעברה הטרופית נטו שלו. זה מושג על ידי ביצוע ניסוי מעבדה שבו פורל האגם ניזון ממזון טבעי כמו בלו במשך תקופה של ארבעה חודשים לפחות. כשלב שני, נעשה שימוש במיצוי וניקוי כדי לחלץ את ה-PCB מרקמות פורל האגם והבלו ולהכין את התמציות להליך הכימות.לאחר מכן נעשה שימוש בספקטרומטריית מסה של כרומטוגרפיית גז באמצעות יינון כימי שלילי על מנת לקבוע את ריכוזי הקונגנרים של PCB ברקמות הדגים. התוצאות מראות כי יעילות ההעברה הטרופית נטו של קונגנרים PCB לטרוטת האגם מטרפו אינה מושפעת באופן משמעותי ממידת הכלור של קונגנרים PCB. התוצאות מראות גם כי נראה כי לפעילות טרוטת האגם אין השפעה משמעותית על יעילות ההעברה הטרופית נטו.היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו הזרקת המזהם ישירות לדגי ה-SIV או למזון של דגי ה-SIV, הוא שדגי ה-SS צוברים את המזהם באופן המחקה בצורה הטובה ביותר את תהליך הצטברות המזהמים בדגי הברזל בסביבתם הטבעית. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית מכיוון ששלבי הריכוז והמיצוי דורשים זהירות רבה כדי להתבצע בצורה נכונה. שלבים אלה נלמדים בצורה הטובה ביותר באמצעות התבוננות חזותית.מי שידגים את ההליך הזה יהיה ג'ים אוקיף, כימאי מהמעבדה שלי. ראשית יש להפשיר כמות מתאימה של דגי טרף שאוחסנו בעבר במקפיא שלילי של 30 מעלות צלזיוס. חותכים את דג הטרף המופשר לחתיכות במשקל של כ-1 עד 5 גרם בעזרת סכין שף.לאחר מכן, שקלו את כמות דגי הטרף שיש להניח בכל אחד מהמכלים והשליכו את החתיכות לכל מיכל. לאחר שאפשרו לדג הטורף להאכיל במשך כשעה, הוציאו את המזון הנאכל והניחו לו להתייבש באוויר למשך כ-20 דקות. לאחר שקילת המזון החדש, רשום את כמות המזון המונחת בכל מיכל ואת כמות המזון הנאכל עבור כל אחד מהמיכלים.לאחר הקרבה והקפאה של הדגים הטורפים, בחר קבוצה של חומרים מרוכבים של דגי טורף, דגים או דגי טרף להפשרה, ואפשר לחומרים מרוכבים להפשיר חלקית באמצעות הומוגניזציה בגודל המתאים. כל אחד מהחומרים המרוכבים. עבור כל קומפוזיט הכניסו דגימה של 50 עד 100 גרם של ההומוגנט לצנצנת נקייה, אצטון, שטופה ומסומנת.לאחר מכסה הצנצנת, יש לאחסן אותה בטמפרטורה שלילית של 30 מעלות צלזיוס עד למועד העיבוד למיצוי. שוקלים 20 גרם רקמת דגים הומוגנית מופשרת בכוס של 200 מיליליטר, ואז בכ-40 גרם נתרן גופרתי ומערבבים היטב עם מרית. הוסף תמיסת ספייק חלופית המכילה CONGENERS 30, 61, 161 ו-166 בריכוז המניב ריכוז סופי של 20 ננוגרם למיליליטר.בתמצית. הניחו לדגימה להתייבש בטמפרטורת החדר תוך כדי ערבוב כל 20 דקות לאחר שהדגימה הגיעה לעקביות של חול יבש. הקים מכשיר מיצוי סולי עם בקבוק של 500 מיליליטר המכיל שבבי רתיחה טפלון, גרב, sl ומעבה.לאחר מכן מוסיפים את תערובת הדגים המיובשים לאצבעון זכוכית עם תחתית דיסק גסה. מוסיפים 150 מיליליטר של תמיסה מעורבת מראש של 50% הקסאן ו-50% כלורו מתאן לכוס המשמשת לדגימה ומערבבים תוך כדי גירוד דפנות הכוס. בעזרת מרית, העבירו את הממס לחלק העליון של הסולית, ואפשרו לו לעבור דרך הסוליט לתוך הבקבוק.לאחר חזרה על השלב הקודם, הניחו את הגרב המוארת עם הבקבוק המצורף על גוף חימום והצמידו מעבה. לאחר מכן, הפעל את גוף החימום, והביא את הממס לרתיחה עדינה. לאחר מכן חלץ את הממס למשך 16 שעות לפחות, וודא כי מים קרים מסופקים למעבים.לאחר שהממס התקרר, בדוק אם אחת מצלוחיות הדגימה מכילה מים. לצלוחיות המכילות מים מוסיפים נתרן גופרתי ומערבבים עד שהמים נספגים. לאחר מכן, רכז את הדגימה באמצעות רכז דגימת חנקן.לאחר שהדגימה בנפח של פחות משני מיליליטר, העבירו את הדגימה לבקבוק נפחי של חמישה מיליליטר. לאחר מכן הביאו את הנפח הסופי לחמישה מיליליטר על ידי שימוש בחמש עד שבע שטיפות קטנות של הקסאן כדי להעביר את הדגימה הנותרת מכלי הזכוכית הקודמים לבקבוק הנפחי. בשלב זה, העבירו את הדגימה לבקבוקון של 10 מיליליטר ותייגו אותה עם המידע לדוגמה.הכן סיליקה ג'ל מחומצן על ידי הוספת 44 גרם חומצה גופרתית מרוכזת ל 100 גרם סיליקה פעילה. לאחר מכן הוסף 10 גרם מג'ל הסיליקה המחומצן לעמוד כרומטוגרפיה קטן המכיל פקק קטן של צמר זכוכית בתחתית. לאחר ניקוי מוקדם של העמודה עם 10 מיליליטר הקסאן, הוסף אליו מיליליטר אחד מתמצית הדגימה, הוציא את העמודה עם 20 מיליליטר הקסאן ואסוף את הדגימה בצינור זכוכית מחודד של 20 מיליליטר.לאחר מכן, הנח את צינור הזכוכית על מאייד חנקן או מכשיר NVAP מתחת לזרם חנקן וטבל אותו במים חמים. לאחר שהדגימה רוכזה לפחות ממיליליטר אחד, העבירו אותה לבקבוק נפח של מיליליטר אחד. לאחר מכן הביאו את הנפח הסופי למיליליטר אחד על ידי שימוש בשתיים עד שלוש שטיפות קטנות של הקסאן כדי להעביר את הדגימה הנותרת מהצינור לבקבוק הנפח.לאחר מכן, העבר את הדגימה לבקבוקון דגימה אוטומטי של 1.8 מיליליטר המסומן במידע המדגם. הוסף לבקבוקון ארבעה מיקרוליטרים של התקן הפנימי המתאים, שבמקרה זה הוא שומר דקה-כלורו. אתה משתמש בתקנים המתאימים כדי לכייל את המכשיר.לאחר מכן הגדר את מערכת ספקטרומטריית המסה של הכרומטוגרפיה במצב יינון כימי שלילי עם מימן כגז הנשא במיליליטר אחד לדקה ומתאן כגז המגיב. השתמש בעמודת נימי סיליקה התמזגה המצופה DB XLB ב-0.25. עובי סרט מיקרומטר להפרדה.הזרקו מיקרוליטר אחד עד שניים מהדגימה באמצעות מצב הזרקה מפוצלת. בשלב זה, נתח את כל התקנים והדגימות בשיטה הסטנדרטית הפנימית באמצעות פחמן 13 המסומן DECA chloro b fennel. בצע בדיקה של הכיול הראשוני על ידי הפעלת תקן מקור שני וחץ כלור 1242 ו-1260, ולאחר מכן השווה את הערכים החזויים עבור קונגנרים של כלור החץ עם הכמויות שנצפו מהליך בדיקה זה.לאחר שהליך הכיול הראשוני הושלם בהצלחה, השלם את הניתוח של כל הדגימות. הפעל בדיקת כיול כל 10 דגימות באמצעות כל אחת מתערובות הכיול מהכיול הראשוני. טרוטת אגם טרה הראתה צמיחה משמעותית כטרוטת האגם הראשונית.המשקלים הממוצעים נעו בין 694 ל-907 גרם בעוד שהמשקל הממוצע של פורל האגם הסופי נע בין 853 ל-1,566 גרם. ריכוזי ה-PCB Congener הממוצעים בטרוטת האגם עלו במהלך הניסוי עבור כל ה-PCB. יעילות ההעברה הטרופית הממוצעת נטו עבור טרוטת האגם הפעילה לא הייתה שונה באופן משמעותי מטרוטת האגם הלא פעילה.טרוטת אגם פעילה שמרה על קונגנרים PCB מהמזון שהם צרכו כמעט באותה יעילות כמו טרוטת אגם לא פעילה עבור 66 מתוך 75 קונגנרים PCB. שגיאת התקן לגבי האומדן הממוצע של יעילות העברה טרופית נטו הייתה קטנה עבור שישה מתוך תשעת קונגנרים אחרים של PCB. שגיאות התקן לגבי האומדן הממוצע של יעילות ההעברה הטרופית נטו היו נמוכות למדי מכיוון שמידת הכלור המוגברת אומדנים של יעילות ההעברה הטרופית נטו הראו ירידה קלה.עם זאת, יעילות ההעברה הטרופית נטו לא השתנתה באופן משמעותי עם מידת הכלור של קונגנרים PCB כאשר KOW log גדל, יעילות ההעברה הטרופית נטו ירדה באופן אקספוננציאלי. קצב ירידה זה היה שונה משמעותית מאפס, אך היה שווה ל-7% ליחידת KOW. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להעריך את יעילות ההעברה הטרופית נטו של קונגנרים CB לדגים מהטרף שלהם באמצעות ניסוי מעבדה שבו הדגים האוסיים ניזונים ממזון טבעי.אל תשכח שעבודה עם ממיסים אורגניים כגון הקסאן ודי כלורו מתאן עלולה להיות מסוכנת ותמיד יש לנקוט באמצעי זהירות כגון אוורור נאות בעת ביצוע הליך זה.

laboratory-estimation-net-trophic-transfer-efficiencies-pcb-congeners

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

המבדק זה מעסיק דגים טורפים מודל כדי להעריך את הנוכחות של מטבוליטים האכלה-הרתעה מתמציות אורגניות של הרקמות של יצורים ימיים בריכוזים טבעיים באמצעות מטריצת מזון דומה מבחינה תזונתית.

מעבדה מבדק-האכלת דגים לבחינת פעילות Antipredatory של משני מטבוליטים מהרקמות של אורגניזמים ימיים

שילוב של גידול מיקרו-אצות עם גז פליטה תעשייתי יכניס בסופו של דבר מתכות כבדות ותרכובות אנאורגניות אחרות למצע הגידול. מחקר זה מציג הליך המשמש לקביעת גורלן הסופי וההשפעה של מתכות כבדות ומזהמים אנאורגניים על צמיחת Nannochloropsis salina הגדל בפוטו-ביו-ריאקטורים.

כימות של מתכות כבדות ומזהמים אורגניים אחרים בפרודוקטיביות של מייקרו

מדידת ההשפעות של מזהמים סביבתיים על התנהגות הדגים הוא לעתים קרובות סובייקטיבי מאתגר במיוחד כשדנים נקודות קצה sublethal. אנו מתארים שיטות כוללות טכנולוגיית וידאו לכמת התנהגות שחייה של חדקן הלבן בשלב מוקדם בחיים (חדקן transmontanus) במהלך ואחרי 96 חשיפות hr אקוטיות לריכוזים שונים של נחושת.

כימות התנהגות שחי דגים בתגובה לחשיפה אקוטית של נחושת מהימית באמצעות וידאו בסיוע מחשב דיגיטלי ניתוח תמונה

תרכובות לשבש האנדוקרינית (EDC) להוות סיכון ממשי של הסביבה המימית. מתקני טיהור שפכים עירוניים הם תורמים עיקריים העצמה אסטרוגניים של מים עיליים. המתודולוגיה הניתן במאמר זה מאפשר הערכה של היעילות וההתאמה של תהליכי טיפול בשפכים ביחס להסרת EDC.

שימוש בסוללה של שיטות כימיות Ecotoxicological עבור הערכת היעילות של תהליכי טיפול בשפכים להסיר אסטרוגניים און

הנפוץ ביותר ניתוח תוכן הבטן של macroinvertebrates הם חזותיים. הדורשים ידע אינטנסיבי ונעשית מורפולוגי של אורגניזמים טרף, הם מתגעגעים טרף גוף רך, בשל comminution חזקה של טרף, הם כמעט בלתי אפשרית עבור אורגניזמים מסוימים, כולל amphipods. אנו מספקים נתונים היסטוריים, רומן גישות גנטיות עבור macroinvertebrate טרף זיהוי בתזונה של amphipods.

פרוטוקול המעבדה הגנטית ניתוחים תוכן הבטן של הימית Macroinvertebrates באמצעות קבוצה ספציפית rDNA תחל

המטרה העיקרית של מחקר זה היא לתקנן ולבדוק את שיטת פנאומטיים (בנוכחות אוויר) של איסוף ביצים פורל הקשת, פורל חום. שיטה זו מאפשרת יעילים ופשוטים אוסף הביצים ללא צורך עיסוי הבטן דגים.

האפקטיביות של פירוק אוויר בדגים Salmonid שני, פורל הקשת (Oncorhynchus Mykiss) ופורל חום (Salmo Trutta מורפיום fario)

בעבודה זו, אנו מתארים של bioassay אקוטית, כרונית, multigenerational ללמוד את ההשפעות של לחצים יחיד ומשולבים על דגים גמבוזיים טורקיז Nothobranchius furzeri. פרוטוקול זה תוכנן כדי ללמוד היסטוריה-החיים תכונות (התמותה, צמיחה, פוריות, משקל) ומקסימום תרמי קריטי.

פרוטוקול עבור סימן ובדיקות כרונית Ecotoxicity של דגים גמבוזיים טורקיז Nothobranchius furzeri

בריאות הדגים פראי יכול לשמש כמחוון של בריאות המערכת האקולוגית הימית. הערכות בריאות דגים מבוסס-necropsy לספק תיעוד של פצעים גלויים או מומים, הנתונים המשמשים לחישוב מדדי מצב, כמו גם את ההזדמנות כדי לאסוף את רקמות מיקרוסקופיים, ביטוי גנים והערכת אחרים מעמיק יותר ניתוחים.

הערכת הבריאות מבוסס necropsy דגים פראי

מאמר זה מסביר בפירוט גישה שיטתית להערכת זמינות מיקרו-מינרלית בסלמון אטלנטי. המתודולוגיה כוללת כלים ומודלים עם מורכבות ביולוגית גוברת: (1) ניתוח דגימה כימית, (2) מסיסות במבחנה, (3) מחקרי ספיגה בקווי תאים, ו-(4) במחקרי דגי vivo.

הערכת זמינות המינרלים בהזנות דגים בשיטות משלימות המודגמת עם הדוגמה של אבץ בסלמון אטלנטי

מוצג כאן הוא פרוטוקול של תא בודד, מיקרוסקופ מבוססי הטכניקה המבוססת לכמת שיעורי המרעה באיקריוטיס טורף מימיים עם דיוק גבוהה ורזולוציה מטקמי.

בקטריה מתויג חיידקים כנותב כדי לחשוף מסלולים הרומן של זרימת פחמן אורגנית במסגרת אקולוגית מימיים

פרוטוקול זה הוא לקביעת שומנים במי ים ודגימות ביולוגיות. שומנים בסינון מופקים עם כלורופורם או תערובות של כלורופורם ומתנול במקרה של מוצקים. מחלקות השומנים נמדדות על ידי כרומטוגרפיה של שכבה דקה עם זיהוי יינון להבה והסכום שלהם נותן את תכולת השומנים הכוללת.

קביעת שיעורי השומנים והשומנים הכוללים בדגימות ימיות

חקור הערכת יעילות העברה טרופית נטו של קונגנרים PCB לפורל אגמים (Salvelinus namaycush) מטרפו. שיטת מעבדה זו משתמשת בטרף טבעי וכרומטוגרפיית גזים-ספקטרומטריית מסה כדי לחקור דינמיקת מזהמים במערכות אקולוגיות מימיות.

הערכת מעבדה של יעילות העברה הנקי התזונתית של קרוב בPCB לאגם פורל (

גלה סרטונים נוספים