Name: טכניקה למסך בוק האמריקאי להתנגדות לחרקי האשור Scale ( Fagisuga Cryptococcus לינד.) (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-05-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 47 s
Description: למד פרוטוקול סינון לזיהוי עמידות עצי בוק אמריקאיים לחרקי קשקשת הבוק Cryptococcus fagisuga. השיטה כוללת איסוף ביצים, הצמדתן לגזע והערכת התוצאות לאחר שנה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים בתודה להכיר מימון מניטור יער ארה&quot;ב ההערכה להגנת בריאות שירות יערות והתוכניות מיוחדות לפיתוח טכנולוגיה שתמך בהתפתחות, שינוי והיישום של הפרוטוקול המתואר כאן לזהות עצים, כי הם עמידים ורגישים לחרקים בקנה מידה אשור. כמו כן אנו מודים להולדן גנים בוטניים, Kirtland, אוהיו, לשותפות שלהם מתמשכת ותמיכה של התכנית שלנו אמריקאי אשור התנגדות ההקרנה.

1 צמח חומר:. למבוגרים שדה עצים, שתילי עציצים, או עציצים שתלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתחום בדיקות, בחר עצים בוגרים בריאים אמריקאים אשור שלא מראים סימנים של התפשטות בקנה מידה או מחלה לבדיקת התנגדות אפשרית. בעליל עצים רגישים גם צריכים להיות מזוהים כדי לשמש כביקורת (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדיקת שתילים או שתלים בעציץ, לאסוף ולנבוט beechnuts כפי שמתואר בקוך וקארי, 2004 או נצר שתל כמתואר בקארי ואח&#39;, 2013. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גדל שתילים או שתלים בשתילת תערובת אדמה מתוקנת עם 47 micronutrients גרם, 477 גרם דשן שחרור 15N-3.9P-9.9K האיטי, פרלייט גס 700 גרם ו75 סולפט האלומיניום גרם לכל 2.8 מ&quot;ק. תיק מטר. אם יש צורך בהמשך עונת הגידול, לדשן צמחים שבועיים עם 17N-1.3P-14.1K מסיס ב200 חנקן עמודים לדקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במהלך עונת הגידול, לשמור על צמחים בבית צל. מאפשר לצמחים ללכת רדומים מחוץ בסתיו לפני מעברםלמתקן אחסון בטמפרטורה מבוקר (~ 4 ° C) מנובמבר עד אפריל. </li></ol> 2. אוסף של אשור סולם ביצים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוכן שורץ-BBD, לבדוק עצים נגועים בכבדות (המזוהים בקלות על ידי המראה, 1A &quot;המסויד&quot; איור) עם זכוכית מגדלת יד כדי לאשר את קיומו של ביצים, בדרך כלל בשפע מאמצע יולי עד אמצע אוגוסט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במכחול להבריש בעדינות את גושי שעווה הלבנים של כנימות בוגרות, ביצים ופסולת אחרים, לתוך שקית איסוף ליטר אחד סגר פלסטיק (איור 1). לאסוף ממינימום של שלושה עצים שונים זה מזה לפחות 12 מ &#39;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במידת צורך, לאחסן ביצים בשקית האיסוף האטומה עד שבועיים ב 4 ° C. קלטת חתיכה קטנה (2.5 סנטימטר מרובע) של פוליאתילן מוקצף לח לחלק הפנימי של השקית כדי למנוע את הביצים מהתייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפריד את הביצים בקנה מידה (0.15 x 0.25 מ&quot;מ) מהמבוגרים (0.60 מ&quot;מ) וdebriים, לבנות מסננת באמצעות קטע קצר של 2 צינור PVC &#39;וצימוד לתמוך פיסה רבועה של 250 רשת ניילון מיקרון (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רוקן את התערובת של מבוגרים, שעווה, ביצים, ופסולת משקית האיסוף על גבי המסננת ולהשתמש במברשת צבע קטנה כדי לעודד בעדינות את הביצים לעבור דרך הרשת לתוך צלחת פטרי זכוכית בהמשך. יש להימנע ממאכלי פלסטיק פטרי כי הם מחזיקים את חשמל הסטטי יותר, מה שהופך את זה קשה להעביר את הביצים. ביצים לפני ואחרי הסנון מוצגות באיור 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתן לאחסן ביצים מטוהרים בצלחת פטרי על 4 מעלות צלזיוס במשך שבוע לפחות. כדי למנוע את הביצים מהתייבשות, קלטת פיסה לחה של קצף למכסה ולאטום עם Parafilm. </li></ol> 3. ביצת מבחני הכדאיות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להעריך את כדאיות ביצה, להשתמש במזרק 10 סמ&quot;ק ליישם טבעת דקה של וזלין סביב ההיקף של החלק התחתון של צלחת פטרי זכוכית 60 מ&quot;מ (איור 4 א </strong&gt;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר על 100 ביצים למרכז הזירה, הנח את המכסה על צלחת פטרי ולאטום עם Parafilm. לאפשר את צלחת פטרי האטום להישאר באין מפריע בטמפרטורת חדר למשך 2 שבועות, או 3 שבועות אם ביצים היו מאוחסנות על 4 מעלות צלזיוס לפני תחילת assay. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נימפות בקעו יהפכו תקועות בוזלין וניתן לספור בקלות, וביצים ריקות בקלות להבחין בין ביצים שעדיין לא בקעו לפי צבעם וברק (איור 4). חישוב כדאיות על ידי חלוקת מספר נימפות בסכום של הביצים הריקות בתוספת ביצים מלאה שנותרו. כדאיות טובה צריכה להיות ב75% עד 90% טווח הביצים בקע. </li></ol> 4. הקרנה בקנה מידה התנגדות של גדולים למבוגרים אשור עצים בשדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למבחן כמוני, לספור את 500 ביצים באמצעות מיקרוסקופ לנתח ובעזרת מרית קטנה בעדינות ומפזרים אותם על פני המרכז לפתוח תאי 10 x 15 x 1.3 מלבן של פוליאתילן מוקצף predampened, סנטימטר. אללצנן את הקצף, הרטבת אותו ואז לסחוט את מים רבים ככל האפשר. למבחן איכותי, ניתן לספור 500 ביצים והניחו בבקבוקון זכוכית קטן וקו &quot;מילוי&quot; נמשך, שניתן להשתמש כדי למדוד קבוצות נוספות של כ 500 ביצים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את כרית הקצף על גבי עץ הבדיקה עם צד הביצה פונה נגד לנבוח. להחזיק את הכרית במקום עם חבל, מחרוזת, חוט, חוט או חומרת פלסטיק מצופה. פלסטיק או חומר מבוסס מתכת אמור לשמש במקום חומרי סיבים טבעיים אשר בזז יותר בקלות על ידי חיות הבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קו העליון ואת הצדדים של פיסת סנטימטר חתוך מראש 23 x 30 של לעטוף אדים חדירים למים בית עם דבק סיליקון אצטט מבוססת ומניחים אותו על משטח בדיקת קצף. לחץ על הקצוות של לעטוף את בית העץ כדי ליצור חותם אטום למים. הנח חוט ניילון או חוט חומרה מצופה פלסטיק מסביב לעץ והבית לעטוף, כדי להחזיקו במקום בזמן שקבוצות הדבק (איור 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים מינימום של שנירפידות מבחן על כל עץ בדיקה, רצוי בצדדים מנוגדים של גזעו. בכל אתר, הנח כריות מבחן על לפחות 2 עצים רגישים (עם נגיעות בקנה מידה טבעית ברורות) כביקורת. לפני הצבת רפידות מבחן על עצי שליטה, להסיר כל חרקים באופן טבעי בקנה מידה או ביצים באמצעות משרד זיפי מברשת. הערה: רפידות קצף עם ביצים גם ניתן להציב על עצים לצורך ביצי היקף גידול, אשר יכול להיות מועילות במיוחד באזורים בהם רמת הנגיעות נמוכה. </li></ol> 5. הקרנה בקנה מידה התנגדות של שתילי עציצים או שתלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדיקה, בחר עצים בעציצים בקוטר מינימאלי של 1 סנטימטר (קליפר 5 ס&quot;מ מעל קו אדמה) שהם גבוהים מספיק כדי לקבל לפחות 2 רפידות מבחן נפרדות מוטלות עליהם. לגזום צד סניפים קטנים בעת צורך כדי לפנות מקום לרפידות המבחן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במיקרוסקופ לנתח לספור את 150 ביצים ולפזר אותם על פני חתוך ולח 2.5 x 7.6 x 1.3 סנטימטר תיקים עשויים לפתוח תאיםמשטח קצף Lene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להדביק משטח הקצף לשתיל עם צד הביצה נגד לנבוח, באמצעות חוט מצופה פלסטיק. לעטוף את הריבוע קטן של הבית לעטוף סביב השתיל בדיוק מעל הקצף ולאטום אותו עם סיליקון מבוסס אצטט (ראה איור 6 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כולל ידוע משפחות שתיל רגישות או שתלי שולטת. </li></ol> 6. איסוף נתונים הערה: כ 52-57 שבועות לאחר הצבת כריות הקצף וביצים על עצי הבדיקה, ניתן לאסוף נתונים. זה חשוב כי זה לא נעשה עד לאחר המבוגרים החלו להטיל ביצים, כך שהיכולת שלהם להתרבות ניתן לקבוע. על כמה עצים עמידים זה לא יוצא דופן לראות מספר קטן של מבוגרים להקים אך ללא רבייה מתרחשת. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוציא בזהירות את משטח הקצף ולספור את מספר הכנימות למבוגרים שהוקמו על הקליפה באמצעות יד או עדשת זכוכית מגדלת (10X). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר משטח הקצף מוסר, זה לא uncommon לחלק ממבוגרים ורוב אשכולות ביצה שהוריד מהעץ עם הקצף (ראה איור 7). באמצעות מיקרוסקופ לנתח, לספור את אשכולות הביצה ומבוגרים שנשארו מחובר למשטח הקצף. </li></ol>

<ol><li>Houston, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+to+artificially+infest+beech+bark+with+the+scale%2C+Cryptococcus+fagisuga+%28Lindinger%29%5BTitle%5D)+AND+%22U.S.+Forest+Service%22%5BJournal%5D)">A technique to artificially infest beech bark with the scale, Cryptococcus fagisuga (Lindinger).</a> U.S. Forest Service. , Northeastern Forest Experiment Station. Broomhall, PA. (1982).</li>
<li>Houston, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((American+beech+resistance+to+Cryptococcus+fagisuga%5BTitle%5D)+AND+%22Proceeding%2C+IUFRO+beech+bark+disease+working+party+conference%22%5BJournal%5D)">American beech resistance to Cryptococcus fagisuga.</a> Proceeding, IUFRO beech bark disease working party conference. , U.S. Department of Agriculture, Forest Service, Northeastern Forest Experiment Station. Washington, D.C. 38-42 (1983).</li>
<li>Ehrlich, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+beech+bark+disease%3A+a+nectria+disease+of+Fagus%2C+following+Cryptococcus+fagi%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The beech bark disease: a nectria disease of Fagus, following Cryptococcus fagi.</a> 10, 593-692 (1934).</li>
<li>Papaik, M. J., Canham, C. D., Latty, E. F., Woods, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+an+introduced+pathogen+on+resistance+to+natural+disturbance%3A+beech+bark+disease+and+withdrow%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Effects of an introduced pathogen on resistance to natural disturbance: beech bark disease and withdrow.</a> 35, 1832-1843 (2005).</li>
<li>Miller-Weeks, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+of+beech+bark+disease+in+New+England+and+New+York%5BTitle%5D)+AND+%22Proceeding%2C+IUFRO+beech+bark+disease+working+party+conference%22%5BJournal%5D)">Current status of beech bark disease in New England and New York.</a> Proceeding, IUFRO beech bark disease working party conference. , U.S. Department of Agriculture, Forest Service, Northeastern Forest Experiment Station. Washington, D.C. 21-23 (1983).</li>
<li>Houston, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beech+bark+disease%3A+The+aftermath+forests+are+structured+for+a+new+outbreak%5BTitle%5D)+AND+%22J.+For%22%5BJournal%5D)">Beech bark disease: The aftermath forests are structured for a new outbreak.</a> J. For. 73, 660-663 (1975).</li>
<li>Twery, M. J., Patterson, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+beech+bark+disease+and+its+effects+on+species+composition+and+structure+of+northern+hardwood+stands+in+central+New%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Variations in beech bark disease and its effects on species composition and structure of northern hardwood stands in central New.</a> 14, 565-574 (1984).</li>
<li>Jakubus, W. J., McLaughlin, C. R., Jensen, P. G., McNulty, S. A., et al. Alternate year beechnut production and its influence on bear and marten populations. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJakubus%2C+WJ+%22Beech+Bark+Disease%3A+Proceedings+of+the+Beech+Bark+Disease+Symposium%22">Beech Bark Disease: Proceedings of the Beech Bark Disease Symposium</a>. Evans, C. A., et al. , U.S. Forest Service, Northern Research Station. Newtown Square, PA. 79-87 (2005).</li>
<li>Koch, J. L., Carey, D. W., Mason, M. E., Nelson, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+beech+scale+resistance+in+full-+and+half-sib+families%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+For.+Res%22%5BJournal%5D)">Assessment of beech scale resistance in full- and half-sib families.</a> Can. J. For. Res. 40, 265-272 (2010).</li>
<li>Koch, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beech+bark+disease%3A+The+oldest+%E2%80%9Cnew%E2%80%9D+threat+to+American+beech+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Outlooks+Pest+Manag%22%5BJournal%5D)">Beech bark disease: The oldest “new” threat to American beech in the United States.</a> Outlooks Pest Manag. 21, 64-68 (2010).</li>
<li>Koch, J. L., Mason, M. E., Carey, D. W., et al. Screening for resistance to beech bark disease: improvements and results from seedlings and grafted field selections. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKoch%2C+JL+%22Proceedings+of+the+4th+International+Workshop+on+Genetics+of+Host-Parasite+Interactions+in+Forestry%22">Proceedings of the 4th International Workshop on Genetics of Host-Parasite Interactions in Forestry</a>. Palmieri, K., et al. , U.S. Forest Service, Pacific Southwest Research Station. Albany, CA. (2012).</li>
<li>Leak, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fifty+year+impacts+of+the+beech+bark+disease+in+the+Bartlett+Experimental+Forest%2C+New+Hampshire%5BTitle%5D)+AND+%22Northern+J.+Appl.+For%22%5BJournal%5D)">Fifty year impacts of the beech bark disease in the Bartlett Experimental Forest, New Hampshire.</a> Northern J. Appl. For. 23, 141-143 (2006).</li>
<li>Koch, J. L., Carey, D. W., et al. Controlled cross-pollinations with American beech trees that are resistant to beech bark disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKoch%2C+JL+%22Proceedings+of+the+14th+Central+Hardwood+Forest+Conference%22">Proceedings of the 14th Central Hardwood Forest Conference</a>. Yaussy, D. A., et al. , U.S. Forest Service, Northeastern Research Station. 358-364 (2004).</li>
<li>Carey, D. W., Mason, M. E., Bloese, P., Koch, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hot+callusing+for+propagation+of+American+beech+by+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22HortSci%22%5BJournal%5D)">Hot callusing for propagation of American beech by grafting.</a> HortSci. 48, 620-624 (2013).</li>
<li>Koch, J. L., Carey, W. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+resistance+of+American+beech+to+beech+bark+disease%3A+knowledge+through+2004%5BTitle%5D)+AND+%22Beech+Bark+Disease%3A+Proceedings+of+the+Beech+Bark+Disease+Symposium%22%5BJournal%5D)">The genetics of resistance of American beech to beech bark disease: knowledge through 2004.</a> Beech Bark Disease: Proceedings of the Beech Bark Disease Symposium. Evans, C. A., et al. , U.S. Forest Service, Northern Research Station. Newtown Square, PA. 98-105 (2005).</li>
</ol>

החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

הנדרשים להצלחה של assay זה השלבים הקריטיים כוללים ביצוע בדיקת כדאיות על הביצים והשימוש בפקדים רגישים בכל אתר נבדק, ועם חומרים בעציצים. חשוב גם להשתמש בכרית מבחן יותר מפעם אחת לכל עץ או שתיל. מצאנו כי גם בשטח והן בבדיקות מבוקרות יותר על עציצים, מקור תכוף של טעות יכול להיות כישלון כרית. לדוגמא, בתחום, גם עם השינוי של מכסה את משטח הבדיקה עם הבית לעטוף כדי למנוע עודף לחות, מים זורמים במורד הגזע יכול להעדיף צד אחד של עץ ולגרום לאובדן של משטח בדיקה שלנו. <p class="jove_content" styl...

מחלה אשור קליפה (BBD) יש לו השפעה מזיקה על אשור אמריקאי בצפון אמריקה מאז כניסתה של החרקים פולשני בקנה מידה אשור, fagisuga Cryptococcus, במחוז הקנדי של נובה סקוטיה בסוף 1890s 3. מורכבת חרקי מחלה זו היא יזמה כאשר החרק בקנה מידה האשור מוסיף stylet ההאכלה שלה לתוך הקליפה יוצרת סדקים קטנים המספקים כניסה לזיהום על ידי אחד המינים במיקרוסקופ סטראו של פטרייה (ditissima מיקרוסקופ סטראו או faginata מיקרוסקופ סטראו). כתפטיר הפטרייה לגדול, אזורים גדולים של רקמה עלולים למות, בסופו חוגרים את העץ לגמרי. הנזק מהמחלה מחליש את העץ, מה שהופך אותו נוטה למצלמים ברוחות חזקות 4. רמת התמותה בגל הראשון של המחלה דווח להיות גבוה ככל 50% 5. עצים ששרדו לעתים קרובות מעוותים באופן חמור כcankers יוצר הפחתת ערכו של העץ כמוצר עץ.0, יש עצים מסוג זה נטייה לשורש הנבטה שמובילה להיווצרות של &quot;סבך אשור&quot; שמונע מין רצוי יותר אחר מהקמת, הפחתת הערך הכלכלי ואקולוגי של העמדה 6. למרות המחלה קליפת אשור אינה צפויה להוביל להכחדה של האשור האמריקאי, זה משנה לעמוד הרכב ובריאות שמוביל לירידה במזון ובית גידול ל7,8 חיות בר. ביציעים מושפעים BBD במשך שנים רבות, עצים שנותרו ללא כל סימפטומים של המחלה כבר דיווחו. ניסויים חיסון מלאכותיים הראו כי עצים אלה הם עמידים לחרקים בקנה מידה 2. ללא נגיעות בקנה מידה, יש הזדמנות קטנה לזיהום במיקרוסקופ סטראו, למזער את השפעתה של הפטרייה. תמותה בקנה מידה גדולה באשור אמריקאי עקב הזיהום במיקרוסקופ סטראו בהעדר התפשטות בקנה מידה לפני מעולם לאדווח, ולכן התנגדות לתוצאות חרקים בקנה מידה אשור בהתנגדות לBBD. מחקר שנערך לאחרונה בניהולו של BBD התמקד בזיהוי, התפשטות, רבייה, ושמירה של עצי אשור אמריקאים עם התנגדות לחרקים בקנה מידה אשור. מחקרים גנטיים הראו כי התנגדות לחרקים בקנה מידה היא תורשתית ובחירת רבייה זהירה של עצים עמידים יכולים לגרום לשיפור משמעותי בדור אחד 9. ממצא זה הגבירו את מאמציהם של מנהלי מדינה ויער לאומי בארצות הברית להקמת מטעי זרעים אזוריים של אשור אמריקאי עמיד לספק מקור זרע BBD עמיד גנטי מגוון לנטיעות שיקום 10,11. המחקר גם הצביע על כך שמניפולצית silvicultural גנטיקה עמדה על ידי הסרה של עצים ושימור עצים עמידים רגישים יכולה לגרום 9,12 שיפור עמדה. &lt;/ P&gt; ניהול של BBD באמצעות פעילויות שיפור עץ או באמצעות ביצוע המרשמים silvicultural דורש את היכולת לבחור וללהבחין בין עצים בקנה מידה עמידה ורגישה אשור. השיטות שהוצגו כאן הותאמו משיטה הוצגה לראשונה על ידי דייב יוסטון לחסן באופן מלאכותי שתילים עם ביצים בקנה מידה אשור 1. השיטה יכולה לשמש ככלי מיון לזהות לוקוסי תכונה כמותית (QTL) הקשורים להתנגדות או להבחין בין שתילים בעציץ עמידים ורגישים או ramets מורכב במחקרים גנטיים. לחלופין, ניתן להשתמש בו לסינון עצים בוגרים בתחום לזהות עצים עמידים לפיתוח מטע זרע, או שמירה בתחום. ניתן לזהות עצים רגישים והוסרו כדי למזער את השפעות מחלה.

<table><tbody><tr><td>גיליון רשת ניילון, 250 מיקרון</td><td><a href="http://www.amazonsupply.com/dp/B000FMWH1S/ref=sp_dp_g2c_asin" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> חלקים קטנים</a></td><td>CMN-0250-D</td><td>גודל פתחי הרשת: 250 מיקרון רבוע, אחוז שטח פתוח: 34, קוטר חוט: 180 מיקרון, רוחב: 24&amp;rdquo;אורך: 12&amp;rdquo;כמות במארז: 1</td></tr><tr><td>Tyvek Home Wrap</td><td><a href="http://www.lowes.com/pd_14582-2020-D13499991_0__" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> DuPont</a></td><td>D1349991</td><td>גליל בגודל 9 רגל x 150 רגל, ניתן לבקש לחתוך אותו לחצי.</td></tr><tr><td>קצף פוליאתילן, &amp;frac12;&amp;rdquo; עבה&amp;nbsp;</td><td><a href="http://www.colsfoam.com/apcfp/products.htm" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Columbus Foam Products</a></td><td></td><td>גליל של 2 רגל x 50 רגל</td></tr><tr><td>MetroMix 510</td><td><a href="http://sungro.com/products_displayProduct.php?product_id=118&amp;amp;brand_id=17" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Sun Gro Horticulture</a></td><td></td><td>2.8 רגל מעוקב (cu. ft.) נשערים, טורף (peat moss), ורמיקוליט, אפר נשערים, מנת דשן ראשונית (עם גבס), חנקן בשחרור איטי ו&amp;nbsp;גיר דולומיטי.</td></tr><tr><td>Osmocote Plus 15-9-12</td><td><a href="http://everris.us.com/product/15-9-12" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Everris</a></td><td>E903206</td><td>שחרור סטנדרטי של 3-4 חודשים</td></tr><tr><td>Sight Savers 10X</td><td><a href="http://www.amleo.com/Bausch---Lomb-Illuminating-Codington-Magnifier-10x/p/CM10/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Bausch &amp;amp; לומב</a></td><td>813434</td><td>עדשת קודינגטון (Coddington) מוארת בהגדלה של 10X</td></tr><tr><td>סטראאוסקופ שטח מיני של Nikon</td><td><a href="http://www.opticsplanet.com/nikon-fieldmicroscope.html" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Nikon</a></td><td>7314</td><td>הגדלה של 20X</td></tr><tr><td>סיליקון II שקוף</td><td><a href="http://www.midlandhardware.com/159538.html" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> הנדסה גנטית</a></td><td>159538</td><td>חלון שקוף 2.9 oz &amp;amp; איטום דלת</td></tr></tbody></table>

טכניקה למסך בוק האמריקאי להתנגדות לחרקי האשור scale (<em&gt; fagisuga cryptococcus</em&gt; לינד.)

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect (Cryptococcus fagisuga Lind.)

מחלה אשור קליפת תוצאות (BBD) ברמות גבוהות של תמותה ראשונית, והשאירה מאחורי עצי הניצולה שנחלשו מאוד ומעווה. המחלה היא ביוזמת האכלת פעילות של החרקים פולשני בקנה מידה אשור, Cryptococcus fagisuga, אשר יוצרים נקודות כניסה לזיהום על ידי אחד המינים במיקרוסקופ סטראו של פטרייה. ללא נגיעות בקנה מידה, יש הזדמנות קטנה לזיהום פטרייתי. שימוש בביצים בקנה מידה לשורצת באופן מלאכותי עצים בריאים בדוכנים בכבדות השפיעו BBD הראתה כי עצים אלה היו עמידים לחלק החרקים בקנה מידה של מורכבות המחלה 1. כאן אנו מציגים פרוטוקול שפיתחנו, המבוסס על הטכניקה המלאכותית שריצה על ידי יוסטון 2, אשר יכול לשמש מסך לעצים בקנה מידה עמידה בתחום ובקטן יותר שתילים ושתלים בעציצים. זיהוי של עצים בקנה מידה עמידה הוא מרכיב חשוב של ניהול BBD של דרך עץתוכניות שיפור ומניפולציה silvicultural.

איור 6 מראה שתיל עמיד (C) ושני שתילים רגישים (D, E) המציג דרגות שונות של רגישות. דוגמא למה שעץ בוגר רגיש נראה כמו 57 שבועות לאחר בדיקת נגיעות המלאכותית הוקמה מוצגת באיור 5. כשהקצף התקלף מהעץ, זה לא נדיר עבור כנימות ואשכולות הביצה שלהם כדי להישאר דבוק לקצף כפי שמוצגים באיור 7, ולכן זה חיוני כדי לאסוף נתונים משני העץ ומשטח הקצף . <...

מחלה קליפת אשור היא ביוזמת האכלת פעילויות של החרק בקנה מידה אשור שיוצרים נקודות כניסה פטרייתי בקליפה. עצים, כי הם עמידים לחרקים בקנה מידה הם גם מחלה עמידה. כאן אנו מציגים את הפרוטוקול שפיתחנו למסך עצי אשור פרט להתנגדות בקנה מידה אשור.

טכניקה למסך בוק האמריקאי להתנגדות לחרקי האשור Scale (<em&gt; Fagisuga Cryptococcus</em&gt; לינד.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להבחין בין עצי נשקיד אמריקאיים העמידים למחלת קליפת הנשקיד לבין אלו הרגישים לה. דבר זה מושג תחילה על ידי איסוף כנימות קשקש בוגרות וביציהן ישירות מעצי נשקיד אמריקאיים. השלב השני הוא השגת סבב ביצים הומוגני על ידי הפרדתן מהבוגרים וממשקעים אחרים.בשלב הבא, סופרים את הביצים, מניחים אותן על רפידות ספוג ומצמידים אותן לקליפת הגזע של עצי הניסוי. במקביל, מוקמים ניסויים לאישור חיוניותן של הביצים. כעבור כשנה, מסירים את רפידות הניסוי וסופרים את מספר הבוגרים ואת מקבצי הביצים.בסופו של דבר, טכניקה זו להדבקה מלאכותית של עצי נפה (beach trees) עם כנימת הנפה (beach scale insect) משמשת לזיהוי עצים העמידים והרגישים למחלת קליפת הנפה (beach bark disease). היתרון של טכניקה זו על פני זו שפותפה בעבר על ידי דייב יוסטון להדבקה מלאכותית של כנימות הוא שהטכניקה שלנו עושה שימוש בעצי ביקורת ובבדיקות חיוניות של ביצים, והיא כמותית וניתנת לשחזור במידה מספקת למחקרים גנטיים. שיטה זו יכולה לסייע בקבלת החלטות לניהול מחלת קליפת הנפה על ידי קביעה אילו עצים עמידים למחלה ויש להשאירם במהלך הקציר, או מי עשויים להיות המועמדים המתאימים ביותר להכללה במשתבצת זרעים של עצי נפה אמריקאיים עם עומס גבוה של כנימת הנפה.ניתן לזהות את החרקים בקלות לפי מראהם הלבנני. השתמשו בזכוכית מגדלת ידנית כדי לאשר את נוכחותם של ביצים, שבדרך כלל מצויות בשפע מאמצע יולי ועד אמצע אוגוסט. הדביקו שקית איסוף פלסטית נסגרת בנפח של גאלון אחד לגזע עץ נגוע, והשתמשו במברשת צבע כדי להבריש בעדינות את גושי השעווה הלבנים של כנימות המגן הבוגרות, הביצים ופסולת אחרת לתוך השקית.אספו ביצים מלפחות שלושה עצים שונים, המרוחקים זה מזה לפחות 12 מטרים. הרטיבו פיסה של ספוג פוליאתילן בגודל 2.5 סנטימטרים רבוע והדביקו אותה לדופן הפנימית של השקית כדי למנוע מהביצים להתייבש. לאחר מכן, אטמו את השקית.נשפו לתוך השקית כדי להוסיף כרית אוויר מגנה עבור הובלת הביצים. ניתן לאחסן את הביצים בשקית האיסוף האטומה למשך עד שבועיים בטמפרטורה של 4°C. כדי להפריד את ביצי הקשקש מהבוגרים ומפסולת, הכינו נפה על ידי דחיסה.פיסה מרובעת של רשת ניילון בסינון של 250 micron בין קטע קצר של צינור PVC שני אינץ' לבין מחבר. הניחו צלחת פטרי מזכוכית מתחת לנפה ולאחר מכן רוקנו את תערובת הבוגרים, ביצי השעווה והפסולת משקית האיסוף אל תוך הנפה. לאחר מכן, השתמשו במברשת צבע קטנה כדי לעודד בעדינות את הביצים לעבור דרך הרשת אל תוך צלחת הפטרי מזכוכית שמתחתיה.כדי למנוע מהביצים להתייבש, הדביקו פיסת ספוג לחה למכסה ואטמו אותה עם פאראפילם. ניתן לאחסן את הביצים המטוהרות בצלחת פטרי בטמפרטורה של 4°C למשך שבוע לפחות. כדי להשיג כנימות מדרג (scale insects) חיות, ראשית עליכם להיות מסוגלים לזהות את החרקים הבוגרים המטילים ביצים ולהפריד אותם מהביצים באמצעות תהליך השאיבה.לבסוף, עליך להיות מסוגל לאשר את חיוניותן של ביצים אלו באמצעות בדיקת חיוניות לביצים. כדי להעריך את חיוניות הביצים, השתמש במזרק של 10 cc כדי למרוח טבעת דקה של וזלין מסביב להיקף התחתון של צלחת פטרי מזכוכית בקוטר 60 מילימטר. אסוף כ-100 ביצים בעזרת שפכטל והעבר אותן למרכז הטבעת.לאחר מכן, הניחו את המכסה על פטרי dish ואטמו אותו באמצעות perfil. השאירו את פטרי dish האטום ללא הפרעה בטמפרטורת החדר למשך שבועיים, או שלושה שבועות אם הביצים אוחסנו ב-4 °C. לאחר שבועיים עד שלושה שבועות, השתמשו במיקרוסקופ דיסקציה כדי לספור את מספר הנימפות שבקעו, אשר לרוב ניתן למצוא דבוקות בוואזלין.לאחר מכן, ספרו את מספר הביצים שלא בקעו, שהן אטומות וצהבהבות, ואת מספר הביצים שבקעו, שהן בהירות יותר ושקופות. חשבו את החיוניות על ידי חלוקת מספר הנימפות שבקעו בסכום הביצים הריקות בתוספת הביצים שנותרו ללא בקיעה. חיוניות טובה צריכה להיות בטווח של 75 עד 90% של ביצים שבקעו.בדיקות שטח של טווחים לבדיקת עמידות לכינקדן החוף. ניתן לבצע את הבדיקה בחרקים באופן כמותי על ידי ספירה של 500 ביצים באמצעות מיקרוסקופ הפרדה נייד, אם נדרשת בדיקה איכותית בלבד. הניחו את 500 הביצים בבקבוקון קטן עם קו מילוי שניתן להשתמש בו למדידת סדרות נוספות של כ-500 ביצים.לאחר מכן, הרטיבו מלבן של ספוג פוליאתילן תאי פתוח, וסחטו ממנו כמה שיותר מים. באמצעות שפכטל מעבדה מתכתי קטן, פזרו בעדינות את 500 הביצים במרכז הספוג הלח. כעת הביצים מוכנות לשימוש לצורך הדבקה מלאכותית.בחרו עצי חוף אמריקאיים בוגרים ובריאים שאינם מראים סימנים של כנימות שריון, נגיעות או מחלה. קשרו חבל ניילון סביב עץ הניסוי, ולאחר מכן הניחו את רפידת הספוג על העץ כאשר צד הביצים פונה כלפי הקליפה. החליקו את החבל מעל הרפידה כדי להדק אותה.החליקו רפידה שנייה מתחת לחבל בצד הנגדי של העץ. יש להניח לפחות שתי רפידות על כל עץ. יש להשתמש בחומר מפלסטיק או ממתכת במקום בחבל, בחוט או בחוט שמיש, כיוון שאחרונים אלו נאספים בקלות רבה יותר על ידי חיות בר. חתוך מראש.קחו פיסה של 23 על 30 סנטימטרים של כיסוי בית חדיר לאדים ועמיד למים, ודבקו את החלק העליון והצדדים בעזרת דבק סיליקון מבוסס אצטט. לאחר מכן, הניחו את כיסוי הבית מעל משטח הבדיקה מספוג והדביקו את הקצוות לעץ כדי ליצור אטימה עמידה למים. כרכו חוט ניילון או תיל מצופה פלסטיק סביב העץ וכיסוי הבית כדי להחזיק את הכיסוי במקומו בזמן שהדבק מתייבש; בחרו עצים הרגישים באופן גלוי שישמשו כביקורות.השתמשו במברשת בעלת סיבים קשיחים כדי להסיר כנימות שריון או ביצים המופיעות באופן טבעי מהאזור שבו תמוקם פד הבדיקה. לאחר מכן, מקמו פדי בדיקה על לפחות שני עצים רגישים בכל אתר בדיקה. התחילו בגידול שתילים או הרכבות בתערובת קרקע עשירה.בדיקת שתילים בעציצים או ייחורים מתבצעת בבית נטיעות מוצל בשלב מאוחר יותר של עונת הגידול. יש לדשן את הצמחים מדי שבוע לפי הצורך במהלך עונת הגידול, ולהחזיק את הצמחים בבית נטיעות מוצל. יש לאפשר לצמחים להיכנס לתקופת תרדמה בחוץ במהלך הסתיו לפני העברתם לאחסון בטמפרטורה של 4 °C.במהלך החודשים נובמבר עד אפריל, לאחר שנה עד שנתיים, כאשר הגזע גבוה מספיק כדי שניתן יהיה להניח עליו לפחות שתי רפידות בדיקה נפרדות, וקוטרו המינימלי הוא 1 ס"מ כפי שנמדד באמצעות קליפר בגובה 5 ס"מ מעל קו הקרקע. כאשר הוא מוכן לבדיקה, גזמו ענפים צדדיים קטנים לפי הצורך כדי לפנות מקום לרפידות הבדיקה. השתמשו במיקרוסקופ דיססקציה כדי לספור 150 ביצים ופזרו אותן על רפידת ספוג פוליאתילן בעלת תאים פתוחים, שנגזרה מראש והורטבה.הצמידו את רפידת הספוג לשתיל כאשר צד הביצה פונה אל הקליפה, באמצעות תיל מצופה פלסטיק. עטפו ריבוע קטן של יריעת איטום למבנה (house wrap) סביב השתיל, מעט מעל הספוג, ואטמו אותו בעזרת סיליקון על בסיס אצטט. עבור הביקרים, הצמידו רפידות ספוג המכילות ביצים למשפחות שתילים או השתמרים ידועים כרגישים.בערך לאחר שנה. לאחר הנחת רפידות הספוג על העצים, הסר בזהירות את רפידת הספוג מהשתיל או מהעץ הבוגר. לאחר מכן, השתמש בעדשה ידנית או בזכוכית מגדלת פי 10 כדי לספור את מספר כנימות הפסילה הבוגרות שהתבססו על הקליפה.בעת הסרת רפידת הספוג, מקובל שחלק מהבוגרים ומרבית צברי הביצים יישלפו מהעץ יחד עם הספוג. ספרו תחת מיקרוסקופ דיסקציה את צברי הביצים ואת הבוגרים הדבוקים לרפידת הספוג. כאן מוצג שתיל עמיד.הקוים השחורים מציינים את גבולות רפידת הספוג. לא נראה נזק של פלישה לקליפת העץ. שני השתילים הרגישים הנראים כאן מראים דרגות שונות של רגישות.כאן מוצג עץ בוגר רגיש 57 שבועות לאחר הדבקה מלאכותית. העצים הודבקו באופן מלאכותי בביצי כנימות של ה-beach scale ביער הלאומי אלגהני (Allegheny National Forest) בפנסילבניה, ובפארק המדינה לוטון (Luton State Park) במישיגן. גרף זה משווה בין עצים עמידים לעצי ביקורת רגישים.מספר העצים שנבדקו בכל קבוצה מופיע בסוגריים. מספר הבוגרים לכל 100 ביצים שסופקו חושב כממוצע עבור כל העצים בתוך הקבוצה. למרות שישנה שונות רבה במספר הבוגרים שהתבססו על העצים הרגישים, נצפו הבדלים ברורים בין העצים הרגישים לעצים העמידים.בעת ביצוע טכניקה זו, חשוב לוודא כי עטיפת הבית (house wrap) אטומה היטב לעץ. פעולה זו תמנע הצטברות מוגברת של לחות על רפידת הספוג, דבר שעלול לפגוע במבחן. לאחר צפייה בסרטון זה, תוכלו לאסוף ולטהר ביצי של כנימות פשפש ולהשתמש בהן להקמת ניסויים לבדיקה האם עץ חוף עמיד או רגיש לכנימות הפשפש.כינמת הקשקשת היא חלק מקומפלקס גורם מחלה הכולל פטרייה, אשר מובילים יחד למחלת קליפת החוף.

a-technique-to-screen-american-beech-for-resistance-to-beech-scale

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

אנו מתארים עלות נמוכה, גבוה שיטת התפוקה למסך לפעילות endoglucanase פטרייתי...

הקרנת תפוקה גבוהה של פעילות Endoglucanase פטרייתיים ב Escherichia coli</em

פרוטוקול זה מדגים שתי שיטות חיסון להציג entomopathogen...

הקמת Entomopathogens פטרייתיים כEndophytes: לקראת ההדברה ביולוגית Endophytic

אנו מספקים טכניקה לשימור פלום עצים שלם והכנתו לתצפית.  אנו יוצרים מנגנון שנקרא כריך פלואם שמאפשר החדרה והתבוננות בפרוקי רגליים, מיקרובים ואורגניזמים אחרים שמאכלסים רקמות פלום.

טכניקת לימוד של פרוקים-רגליים וקהילות חיידקים בתוך רקמות עץ

קונסורציומים חיידקים בתוך bumble דבורים כוורות להעשיר ולשמר אבקה של דבורה הזחלים. באמצעות רצף הדור הבא, יחד עם המעבדה, המבוסס על שדה ניסויים, כתב יד זה מתאר פרוטוקולים המשמשים כדי לבדוק את ההשערה כי שאריות פטריות לשנות את microbiome אבקה, ודמוגרפיה המושבה, המוביל בסופו של דבר אל המושבה הפסד.

אמפירית, Metagenomic, שיטות חישוביות להאיר את מנגנוני הבריאות דבורה איזה פשרה קוטלי פטריות

מלכודות יעילה למשוך וללכוד את בורר אפר אמרלד (EAB) הם מרכיב של זיהוי וניהול זה המזיק פולשני. מלכודות דרגשים, מניחים בשמש מלאה ליד עצים אפר, לשלב רמזים חזותיים, חוש הריח, והיו ללכוד EAB מאשר עיצובים אחרים למלכודת במשפטי שדה.

בניית שתי מלכודות לגילוי מוקדם של אפר אמרלד בורר

ניטור מקיף של קפה ברי בורר ודינמיקה הצמח הפונדקאי היא חיונית לאיסוף נתונים נוף ברמת כדי לשפר את ניהול של המזיק זה פולשני. כאן, אנו מציגים עבור ניטור המדעי של קפה ברי בורר תנועה, התפשטות, תמותה, פנולוגיה צמח קפה, מזג אוויר וניהול משק באמצעות נתונים אלקטרוניים ניידים הקלטה יישום פרוטוקול.

פרוטוקול הוואי עבור ניטור המדעי של קפה ברי בורר: מודל עבור קפה Agroecosystems ברחבי העולם

פרוטוקול זה מציג שיטה להערכת קצב ההאכלה של הסרטן משעמם העץ, לימנוריה, על ידי מדידת ייצור כדורי צואה. שיטה זו מיועדת לשימוש במעבדות שאינן מומחיות ויש לה פוטנציאל להשתלב בפרוטוקולי בדיקה סטנדרטיים, כדי להעריך עמידות עץ משופרת בתנאים ימיים.

בדיקה מהירה של עמידות של עץ להתכלות על ידי סרטנים מעץ ימי משעמם

כאן אנו מציגים פרוטוקול המבוסס על מערכת פיתיון תולעי הארוחות (Tenebrio molitor) ששימשה לבידוד ובחירה של פטריות אנטומופתוגניות (EPF) מדגימות קרקע. נוסחת מספר קונידיה יעילה (ECN) משמשת לבחירת EPF עמיד בפני מתח גבוה המבוסס על מאפיינים פיזיולוגיים לבקרת מזיקים מיקרוביאלית בתחום.

בידוד ובחירה של פטריות אנטומופתוגניות מדגימות קרקע והערכה של אלימות פטרייתית נגד מזיקי חרקים

שיטה המשתמשת בפירות קפה ירוקים (GFs) פותחה כדי לבחון את הרעילות של קוטלי חרקים נגד בור פירות יער הקפה (CBB). קוטלי חרקים או חומרים רעילים יושמו על GFs מחוטאים לפני או אחרי התפשטות CBB. הוערכו תמותת חרקים, דחייה ויכולת רבייה, בנוסף לפרמטרים אחרים.

מתודולוגיה לבדיקת סוכני בקרה וקוטלי חרקים כנגד היפותנאמוס של ברי ברי הקפה

כאן אנו מציגים פרוטוקול לקבלת פטריות אנטומופתוגניות מבורר עצים ביער ודרך חלופית להעריך את פעילותן האנטומופתוגנית באמצעות חרק מודל קולאופטרן. שיטה זו יעילה ונוחה לחקר משאבים פטרייתיים אנטומופתוגניים ממזיקים חרקים משעממי עץ ביערות טבעיים.

בידוד, זיהוי התנהגותי והערכת פתוגניות של פטריות אנטומופתוגניות מבורר עצים ביער

אנו מספקים פרוטוקול שלב אחר שלב להערכת עמידות צפצפה לפתוגנים של אפטות גזע באמצעות שיטת חיסון עלי in vivo . שיטה זו מתאימה במיוחד להערכה בקנה מידה גדול של עמידות למחלת Cytospora chrysosperma ו- Botryosphaeria dothidea canker בצאצאי גידול צפצפה בסין.

חיסון עלי Vivo: שיטה חלופית להערכת עמידות המחלה של שיבוטים היברידיים בגידול צפצפה של מחלת אפטות גזע

למד פרוטוקול סינון לזיהוי עמידות עצי בוק אמריקאיים לחרקי קשקשת הבוק Cryptococcus fagisuga. השיטה כוללת איסוף ביצים, הצמדתן לגזע והערכת התוצאות לאחר שנה.

טכניקה למסך בוק האמריקאי להתנגדות לחרקי האשור Scale (

גלה סרטונים נוספים