Name: שיטה לקבלת תאי סרטן השחלות ראשיים מתוך דגימות מוצקים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-04T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 58 s
Description: למד שיטה לבידוד תאי סרטן שחלות ראשיים מדגימות קליניות מוצקות. השיטה מאפשרת גידול תאים אפיתליאליים ללא זיהום פיברובלסטים לשבועות, ותומכת במחקר אונקולוגי ובבחירת טיפולים מותאמים אישית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות לצוות של מתקן רכש רקמות של אוניברסיטת מינסוטה לקבלת סיוע באיסוף דגימות רקמת מטופל. עבודה זו נתמכה על ידי תכנית משרד ההגנה חקר סרטן השחלות (OCRP) OC093424 לMB, על ידי מחקר רנדי מכונת גילוח למלחמה בסרטן והקרן הקהילתית לMB, על ידי השחלות הברית למלחמה בסרטן מינסוטה לMB ועל ידי הקרן לגינקולוגיה אונקולוגיה המחלקתית לייט. היו הממנים שום תפקיד בעיצוב מחקר, איסוף נתונים וניתוח, החלטה לפרסם או הכנה של כתב היד.

הצהרת אתיקה דגימות מוצקות של סרטן השחלות התקבלו ממתקן אוניברסיטת מינסוטה רכש רקמות (TPF) לאחר מוסדי מועצה לביקורת הוועדה: אישור דירקטוריון הסובייקט אנושי (IRB). 1. התקנה מגיב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכין מדיום DMEM שלם על ידי השלמת DMEM עם 10% FBS, ו100 יחידות פניצילין, סטרפטומיצין. אחסן את המדיום על 4 מעלות צלזיוס וחמה 37 מעלות צלזיוס לפני שימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> dispase aliquot השני באמצעי אחסון נפרד של 5-10 מיליליטר, כדי למנוע הקפאה מרובה מפשיר ולאחסן ב -20 מעלות צלזיוס במקפיא ללא nonfrost. </li></ol> 2. אוסף רקמות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף דגימות מוצקות של סרטן השחלות (~ 5 גרם בגודל) בזמן הניתוח מאזורי macroscopically זוהו כסרטן על ידי פתולוג. דגימות הקליניות מזוהה דה ונרשמו על פי פרוטוקולים מוסדיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח דגימות בסטרילי, scהמכסה REW, פוליפרופילן דגימות מיכל מלא ב30 מיליליטר של PBS קר כקרח. להעביר את הדגימות מהמעבדה לפתולוגיה כירורגית למעבדת המחקר לעיבוד על קרח, ובתוך 30 דקות מאיסוף דגימה (איור 1). </li></ol> 3. עיבוד רקמות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבודה בתנאים סטריליים, להעביר את הדגימות על צלחת פטרי (60 מ&quot;מ x 60 מ&quot;מ) המכיל 10 מיליליטר של PBS הטרי קר כקרח, ובאמצעות סכין סטרילי גילוח, לחתוך יותר לתוך החתיכות אפשריות (2 מ&quot;מ או פחות) הקטנות ביותר ( 2A דמויות ו2 ב &#39;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את הרקמות טחונות לתוך צינור חרוטי 15 מיליליטר מכיל 10 מיליליטר של prewarmed (37 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות) dispase השני (2.4 U / ml) בDMEM ולדגור על 5% CO 2 ו37 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות. כדי להבטיח עיכול מיטבי של הדגימות, להתסיס ידני תרחיף התא כל 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 30 דגירה דקות, העברה (באמצעותפיפטה סרולוגיות 10 מיליליטר) תרחיף התאים על גבי מסננת תא (70 רשת מיקרומטר) ממוקם על גבי צינור חרוטי 50 מיליליטר ולהחיל לחץ עדין נגד הרשת באמצעות בוכנת מזרק. לבטל את כל רקמת undissociated (שנותרה בחלק העליון של הרשת) ולאסוף את ההשעיה התא שהושגה בצינור חרוטי סטרילי 50 מיליליטר. צנטריפוגה ב320 XG במשך 7 דקות ב 4 ° C (איור 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בטל supernatant ו resuspend התא גלולה ב 10 מיליליטר של DMEM המכיל 10% FBS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה ההשעיה התא בצלחת פטרי ב 5% CO 2 ו37 ° C (איור 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שינוי הבינוני לאחר 24 שעות מהציפוי הראשוני. זה מאפשר להסרת פסולת הסלולר ורוב אריתרוציטים הווה בתרבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשנות את המדיום כל שלושה ימים בשבועיים שלאחר מכן, לאחר שהתרבויות של EOC העיקרי מוכנות ליישומים במורד הזרם. </li></ol>

<ol><li>Kurman, R. J., Visvanathan, K., Roden, R., Wu, T. C., Ie M, S. hih <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+detection+and+treatment+of+ovarian+cancer%3A+shifting+from+early+stage+to+minimal+volume+of+disease+based+on+a+new+model+of+carcinogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Obstet.+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Early detection and treatment of ovarian cancer: shifting from early stage to minimal volume of disease based on a new model of carcinogenesis.</a> Am. J. Obstet. Gynecol. 198 (4), 351-356 (2008).</li>
<li>Kuhn, E., Kurman, R. J., Shih, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+Cancer+Is+an+Imported+Disease%3A+Fact+or+Fiction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Obstet.+Gynecol.+Rep%22%5BJournal%5D)">Ovarian Cancer Is an Imported Disease: Fact or Fiction.</a> Curr. Obstet. Gynecol. Rep. 1 (1), 1-9 (2012).</li>
<li>Sarojini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+detection+biomarkers+for+ovarian%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Early detection biomarkers for ovarian.</a> J. Oncol. , (2012).</li>
<li>Shepherd, T. G., Theriault, B. L., Campbell, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nachtigal+M.W.+Primary+culture+of+ovarian+surface+epithelial+cells+and+ascites-derived+ovarian+cancer+cells+from+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Nachtigal M.W. Primary culture of ovarian surface epithelial cells and ascites-derived ovarian cancer cells from patients.</a> Nat. Protoc. 1 (6), 2643-2649 (2006).</li>
<li>Tsao, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+ovarian+surface+epithelial+cells+immortalized+by+human+papilloma+viral+oncogenes+%28HPV-E6E7+ORFs%29%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Cell.+Res%22%5BJournal%5D)">Characterization of human ovarian surface epithelial cells immortalized by human papilloma viral oncogenes (HPV-E6E7 ORFs).</a> Exp. Cell. Res. 218 (2), 499-507 (1995).</li>
<li>Auersperg, N., Maines-Bandiera, S. L., Dyck, H. G., Kruk, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+cultured+human+ovarian+surface+epithelial+cells%3A+phenotypic+plasticity+and+premalignant+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Lab.+Invest%22%5BJournal%5D)">Characterization of cultured human ovarian surface epithelial cells: phenotypic plasticity and premalignant changes.</a> Lab. Invest. 71 (4), 510-518 (1994).</li>
<li>Brewer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+model+of+normal%2C+immortalized+ovarian+surface+epithelial+and+ovarian+cancer+cells+for+chemoprevention+of+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Gynecol.+Oncol%22%5BJournal%5D)">In vitro model of normal, immortalized ovarian surface epithelial and ovarian cancer cells for chemoprevention of ovarian cancer.</a> Gynecol. Oncol. 98 (2), 182-192 (2005).</li>
<li>Sueblinvong, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment%2C+characterization+and+downstream+application+of+primary+ovarian+cancer+cells+derived+from+solid+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Establishment, characterization and downstream application of primary ovarian cancer cells derived from solid tumors.</a> PLoS One. 7 (11), (2012).</li>
<li>Rockwell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo-in+vitro+tumour+cell+lines%3A+characteristics+and+limitations+as+models+for+human+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Cancer+Suppl%22%5BJournal%5D)">In vivo-in vitro tumour cell lines: characteristics and limitations as models for human cancer.</a> Br. J. Cancer Suppl. 41 (4), 118-122 (1980).</li>
<li>Wong, C., Chen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development%2C+application+and+limitations+of+breast+cancer+cell+lines+to+study+tamoxifen+and+aromatase+inhibitor+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Steroid.+Biochem.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">The development, application and limitations of breast cancer cell lines to study tamoxifen and aromatase inhibitor resistance.</a> J. Steroid. Biochem. Mol. Biol. 131 (3-5), 83-92 (2012).</li>
</ol>

יש המחברים אין לחשוף.

הבנה טובה יותר של האטיולוגיה סרטן השחלות ופיתוח היא חיונית לשיפור התוצאות של נשים מושפעות מהמחלה ההרסנית הזאת. בהקשר זה, השימוש בהוקם ו&quot; זמין מסחרי &quot;שורת תאי סרטן השחלות הייתה ללא ספק שימושית מאוד. עם זאת, היום אנחנו יודעים ששורות תאי הסרטן אינן נציג של הגידול האנושי הם מקורם בהיבטים רבים, כולל חוסר ההטרוגניות 9,10. כאן אנו מדווחים שיטה מהירה ואמינה לבידוד ותרבית של תאי סרטן שחלות ראשוניים יש...

למרות השכיחות הנמוכה יחסית שלה, סרטן השחלות הוא הקטלני ביותר של מחלות גינקולוגיות והגורם המובילים החמישי של מקרי מוות מסרטן בקרב נשים 1,2. זאת, בעיקר בשל המחסור בכלים אמינים ומודלים שנאמנו לסכם ייזום והתקדמות המחלה 3. רוב הידע שלנו היום על סרטן השחלות היה אפשרי באמצעות השימוש בתאים הונצחו השחלות אפיתל פני השטח (IOSEs), שורות תאי סרטן השחלות וסרטן השחלות תאים ראשוניים התאוששו מ4-7 הנוזלים הרעיל. למרבה הצער, יש לו השימוש בם מספר מגבלות, כולל מספר השינויים הגנטיים ופנוטיפי הקשורים בתהליך הנצחה או במעברי מבחנה וההטרוגניות של האוכלוסייה כתוצאה מהכנת נוזלים רעילה. לכן, תאי סרטן השחלות עיקריים הנגזרים מדגימות מוצקות לזיהוי והספציפיים של סרטן השחלות מייצגים uniquכלי דואר לחקר התפתחות סרטן השחלות. הקשיים העיקריים המעורבים בתאים הממאירים אלה קבלת הם תוצאה של צמיחת יתר של תאי סטרומה או fibroblasts יחד עם הפסד של כדאיות וחוסר המוקדם של יכולת שגשוג בתרבות של תאי EOC אלה. כמה שיטות ליצירת תא בודד השעיות מגידולים מוצקים קיימות כיום, באמצעים מכאניים או ניתוק האנזימטית, לעומת זאת טכניקות מסוימות להניב כמות גדולה יותר של התוצאה המועדפת 8. כאן, אנו מראים כי עיכול אנזימטי עם dispase השני תוצאות בהתאוששות יעילה של תאי EOC קיימא, ללא פיברובלסטים. תרבויות EOC מה שהושגו הן רגישות מאוד למניפולציה גנטית ושימושיות גם בבדיקות סמים, מצביעים על כך שתרבויות EOC אלה מתאימות ליישומים רבים במורד הזרם.

<table><tbody><tr><td>1x PBS, סטרילי&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>מכסה בורג, מיכל דגימת פוליפרופילן, סטרילי</td><td>Thermo Scientific</td><td>02 1090</td><td></td></tr><tr><td>DMEM בינוני, סטרילי&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>11995-065</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי,</td> סטרילי <td>Thermo Scientific Hyclone</td><td>SH30396.03</td><td></td></tr><tr><td>100x פניצילין-סטרפטומיצין, נוזלי</td><td>Invitrogen</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II, סטרילי</td><td>Roche</td><td>04942 078 001</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים קטנים בעלי קצה דק ולהב אזמל,</td> מלקחיים סטריליים <td>של פישר סיינטיפיק</td>: <td>08-953E, להבים: 08-927-5D</td><td></td></tr><tr><td>מספריים קטנות לניתוח, סטרילי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>08-945</td><td></td></tr><tr><td>15 מ"ל צינורות עם מכסה חרוטי , בז BD סטרילי</td><td></td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינורות עם מכסה חרוטי סטרילי</td> BD <td>Falcon</td><td>352027</td><td></td></tr><tr><td>10 מ"ל פיפטה סרולוגית, סטרילי&nbsp;</td><td>קורנינג</td><td>13-678-11E</td><td></td></tr><tr><td>בוכנת מזרק 6 מ"ל, סטרילית&nbsp;</td><td>מסנן ניילון Tyco Healthcare</td><td>8881516911</td><td></td></tr><tr><td>(70 &mu; m ) מסננת תאים, סטרילית</td><td>BD Falcon</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>5 ס"מ צלחת פטרי, סטרילית&nbsp;</td><td>קורנינג</td><td>430166</td><td></td></tr><tr><td>צלחת פטרי 10 ס"מ, סטרילית&nbsp;</td><td>קורנינג</td><td>430167</td><td></td></tr></tbody></table>

שיטה לקבלת תאי סרטן השחלות ראשיים מתוך דגימות מוצקים

Method for Obtaining Primary Ovarian Cancer Cells From Solid Specimens

כלים אמינים לחקירת ייזום סרטן השחלות ואת ההתקדמות נחוצים בדחיפות. בעוד שהשימוש בשורות תאי סרטן השחלות נשאר כלי רב ערך להבנת סרטן השחלות, יש השימוש בם מגבלות רבות. אלה כוללים את חוסר ההטרוגניות והשפע של שינויים גנטיים הקשורים passaging הממושך במבחנה. כאן אנו מתארים שיטה המאפשרת להקמה מהירה של תאי סרטן שחלות ראשוניים ליצור דגימות קליניות מוצקות שנאספו בזמן הניתוח. השיטה מורכבת מהכפפת דגימות קליניות לעיכול אנזימטי ל30 דקות. ההשעיה התא בודדת מותרת לגדול ויכולה לשמש ליישומים במורד הזרם, כולל הקרנת סמים. היתרון של שורות תאי סרטן השחלות עיקריות על שורות תאי סרטן השחלות הוקמו הוא שהם מייצגים את הדגימות הקליניות הספציפיות המקוריות הם נגזרים וניתן להפיק מן האתרים שונים אם פרימהסרטן השחלות ר&quot;י או גרורתי.

דגימות קליניות טריות של סרטן השחלות נאספות לאחר הניתוח (איור 1) וחותכים לחתיכות קטנות (2A דמויות ו2B) המהוות את תרחיף התא. זה מאפשר חשיפה אופטימלית של הדגימות לטיפול אנזימטי. תרחיף תא חשוף לעיכול אנזימטי וטופחו על C ° 37 ל30 דקות. במהלך זמן הדגירה slurry הופך עכור יותר ויותר (במיוחד לאחר כל תסיסה) וזה סימן של disaggregation רקמות. בסוף זמן הדגירה, התרחיף מועבר על גבי מסננת תא להפריד תאי EOC מכל רקמת undissociated (איור 3). ההשעיה ...

מחקר זה מתאר שיטה מפורטת לבידוד ואפיון של תאי סרטן שחלות ראשוניים מדגימות קליניות מוצקות. דגימות קליניות בסרטן השחלות חשופים לעיכול אנזימטי לקבל סרטן קיימא, ללא פיברובלסטים אפיתל השחלות תאים (EOC) מתאים במיוחד עבור יישומים במורד הזרם.

Reliable tools for investigating ovarian cancer initiation and progression are urgently needed. While the use of ovarian cancer cell lines remains a ...

המטרה הכללית של הליך זה היא לבודד ולאפיין תאי סרטן שחלה ראשוניים מדגימות קליניות מוצקות. הדבר משיג תחילה על ידי איסוף דגימת הגידול השחלאי והנחתה בצלחת פטרי. השלב השני הוא חיתוך הדגימה לחתיכות והעברתן למבחנה קונית עם ריאגנטים לעיכול לצורך אינקובציה.בשלב הבא, תסביב התאים מועבר דרך מסנן שבו נאספים התאים בלבד. לצורך סרכוז, השלב הסופי הוא השלכת הנוזל העליון (supernatant) והשעיה מחדש של התאים במצע גידול להדגרה למשך לילה. בסופו של דבר, תאי סרטן השרירית של השחורה יגדלו בתרבית במשך שבועות, מה שמאפשר יישומים המשכיים. שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום סרטן השחלה, כגון מהי אפשרות הטיפול הטובה ביותר עבור כל מטופל באופן אינדיבידואלי.להשלכות של טכניקה זו יש משמעות עבור הטיפול בסרטן השחלה, מכיוון שהיא מאפשרת שימוש בתרביות תאים ריאליסטיות יותר, שהן רגישות מאוד למניפולציה גנטית ומועילות יותר לבדיקות סריקת תרופות. לתחילת העבודה, יש להוסיף ל-500 milliliters של DMEM (modified eagle's medium) כ-10% fetal bovine serum או FBS ו-1% penicillin, streptomycin או ps. יש לאחסן את המצע בטמפרטורה של ארבעה degrees Celsius.אסוף את הדגימה מחדר הניתוח והעבר אותה בקרח למעבדה בתוך מיכל ההובלה. הנח את הדגימה תחת מtaf בטיחות ביולוגית. העבר את הדגימה משפופרת קונית של 50 milliliter לצלח פטרי של 60 millimeter על 60 millimeter המכיל 10 milliliters של PBS טרי וקר מאוד.בשלב הבא, בעזרת להב תער סטרילי, חתכו את הדגימה לחתיכות בגודל של שני מילימטרים או פחות. לאחר מכן, התניעו את ה-DMEM עם שפופרת משחת Dispase בתוך שפופרת קונית של 15 ml. העבירו את הרקמות הקצוצות אל שפופרת תערובת ה-DMEM Dispase 2.לאחר מכן, דגרו את הדגימה ב-5% carbon dioxide וב-37 degrees Celsius למשך 30 דקות. ערבבו ידנית את תרחיף התאים מדי חמש דקות כדי להבטיח עיכול אופטימלי. לאחר הדגירה, העבירו את תרחיף התאים דרך מסננת תאים עם רשת של 70 micrometer המונחת על מבחנה קונוית של 50 milliliter.הפעל לחץ עדין כנגד הרשת באמצעות בוכנת מזרק, השלף וסלק כל רקמה שלא עברה דרך הרשת, ואסוף את תגלי השביעות התאיים שהתקבלו אל תוך מבחנה קונית סטרילית בנפח 50 milliliter. לאחר מכן, בצע סתירה (centrifugation) של המבחנה הקונית ב-320 times G למשך שבע דקות בטמפרטורה של ארבע degrees Celsius.שפכו את הנוזל העליון והשביו את משקע התאים ב-10 milliliters של DMEM המכיל 10%FBS ו-1%ps. לאחר מכן, העבירו את תגלי התאים לצלקת פטרי והדגירו את התגלי ב-5%carbon dioxide וב-37 degrees Celsius. החליפו את המצע 24 שעות לאחר הזריעה הראשונית כדי להסיר את השאריות התאיות ואת מרבית האריתרוציטים שנמצאים בתרבית.לבסוף, החליפו את המצע מדי שלושה ימים במהלך השבועיים הבאים, שלאחריהם תרביות תאי EOC ראשוניים יהיו מוכנות ליישומים המשכיים. מיד לאחר הזריעה, תאי סרטן השרירית של השחלה או תאי EOC יופיעו כתלייות של תאים בודדים ובצבירים, עם שפע של אריטרוציטים ושאריות תאים.תרבית תאי EOC שלושה ימים לאחר הזריעה מראה מקבצי תאי EOC חצי-נ adherent ופחות זיהום של אריתרוציטים. שבוע לאחר הזריעה הראשונית, תרבית תאי ה-EOC הופכת למקבץ תאים דמוי מערבולת המתפשט על פלסטיק תרבית הרקמה. ניתן לראות את המורפולוגיה האפיתליאלית הטיפוסית דמוית ריצוף (cobble stone) בשכבה אחת (monolayer) מלאה (confluent) של תאי EOC לאחר 14 ימים בתרבית.לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה טובה של האופן שבו מבודדים ומאפיינים תאי סרטן שחלה ראשוניים מדגימות קליניות מוצקות.

method-for-obtaining-primary-ovarian-cancer-cells-from-solid-specimens

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Heterotypic תלת ממדי<em&gt; במבחנה</em&gt; מידול של אינטראקציות stromal-אפיתל בייזום והתקדמות סרטן השחלות

פרוטוקול זה מתאר טכניקה להכנת דגימות על ידי תרבית משותפת של צמחי שחלה עם תאי סרטן החצוצרה. דגימות אלה מוצגות באמצעות ספקטרוסקופיית מסות הדמיה, או IMS, כדי לזהות חילופי מולקולות קטנות בין התאים והרקמות המובילים להתפתחות הגידול.

מידול תקשורת סרטן השחלות לצורך הדמיה ניתוח ספקטרומטריית מסות: שיטה לזיהוי מתקשרים כימיים של מולקולות קטנות בהתפתחות גידול שחלות גרורתי

בסרטון זה אנו מתארים שיטה לבידוד ואפיון תאי סרטן שחלה ראשוניים מדגימות רקמת גידול שחלתית מוצקה. תאי סרטן האפיתל המתקבלים באמצעות פרוטוקול זה מתאימים להבנת התהליכים שעלולים להוביל להתחלת סרטן השחלות ולהתפתחותו.

השגת תאי סרטן שחלות ראשוניים מדגימות מוצקות: שיטה לתרבית תאי סרטן שחלות אפיתל מדגימות גידול בשחלות

פלישת תאי סרטן השחלות לmesothelial הבטנה של הצפק היא תהליך דינמי לאורך זמן. ניצול מנתח בזמן אמת, את היכולת פולשני של תאי סרטן שחלות במודל תא שיתוף תרבות אליפטית-mesothelial ניתן לכמת על פני תקופות זמן ממושכות, המספקת תובנות גורמים המסדירים את התהליך גרורתי.

הערכה של קובץ מצורף סרטן השחלות אליפטית ופלישה של תאי mesothelial בזמן אמת

תאים יוזמי גידול (TICs) עשויים להוות מטרה טיפולית בת קיימא לטיפול בסרטן השחלות, מחלה חוזרת וקטלנית מאוד. אנו מציגים פרוטוקול לתנאי תרבית המעשירים את אוכלוסיית התאים הגידולית הזו.

בהעשרת מבחנה של תאי ייזום-גידול סרטן השחלות

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבניית מודל תלת מימדי במבחנה של רירית חלל הצפק, המורכב מתאי מזותל אנושיים ראשוניים ופיברובלסטים בשכבות עם מטריצה חוץ-תאית, ככלי לחקירת הדבקה, פלישה והתפשטות של תאי סרטן השחלות.

דוגמנות השלבים המוקדמים של סרטן השחלות הפצה בתרבות Organotypic של אדם חלל הבטן

כדי להבהיר את תהליך רב שלבי של הפצת הצפק של קרצינומה השחלות, המחקר הנוכחי מציג מודל ניסיוני בעכברים של התפתחות גידולים המקורי וגרורות הצפק באמצעות חיסון orthotopic עם תאים סרטניים אלה.

Murine ניסיוני דגם של התפתחות גידולים מקורית גרור הצפק<em&gt; דרך</em&gt; Orthotopic הרכבה עם קרצינומה של תאי השחלות

אורגנואידים שמקורם בחולה (PDO) הם תרבית תלת ממדית (3D) שיכולה לחקות את סביבת הגידול במבחנה. בסרטן שחלות סרוסי בדרגה גבוהה, PDOs מייצגים מודל לחקר סמנים ביולוגיים וטיפולים חדשים.

יצירה וטיפוח של אורגנואידים שמקורם בסרטן השחלות הסרוסי ברמה גבוהה

אנו מציגים פרוטוקול שניתן להשתמש בו לביצוע בדיקות תרופתיות טיפוליות עם אורגנואידים מסרטן השחלות שמקורם במטופלות.

מודלים אורגנואידים שמקורם בחולות סרטן השחלות לבדיקת תרופות פרה-קליניות

פרוטוקול זה מתאר את הקמתו של מודל אקס ויו תלת-ממדי (3D) של אינטראקציה בין תאים סרטניים ל-omentum. המודל מספק פלטפורמה להבהרת מנגנונים מעודדי גידול בתוך נישת השומן ולבדיקת טיפולים חדשניים.

מודל Ex Vivo של סרטן השחלות גרורות פריטוניאליות באמצעות Omentum אנושי

פרוטוקול זה מציע מסגרת שיטתית להקמת אורגנואידים של סרטן השחלות משלבי מחלה שונים ונותן מענה לאתגרים של שונות ספציפית למטופלת כדי להגדיל את התשואה ולאפשר התרחבות חזקה לטווח ארוך ליישומים הבאים. הוא כולל שלבים מפורטים לעיבוד רקמות, זריעה, התאמת דרישות מדיה וצביעה אימונופלואורסצנטית.

אסטרטגיה לביו-בנקאות של אורגנואידים של סרטן השחלות: טיפול בהטרוגניות הבין-אשפוזית על פני תת-סוגים היסטולוגיים ושלבי מחלה

למד שיטה לבידוד תאי סרטן שחלות ראשיים מדגימות קליניות מוצקות. השיטה מאפשרת גידול תאים אפיתליאליים ללא זיהום פיברובלסטים לשבועות, ותומכת במחקר אונקולוגי ובבחירת טיפולים מותאמים אישית.

שיטה לקבלת תאי סרטן השחלות ראשיים מתוך דגימות מוצקים

גלה סרטונים נוספים