Name: יישום של קרדית העכביש הבחין-Two Tetranychus urticae לאינטראקצית צמח-מזיקים ללימודים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: למד פרוטוקולים לאיסוף וזיהום צמחים בקרדית העכביש Tetranychus urticae לחקר אינטראקציות צמח-מזיקים. השיטה מאפשרת הערכה יעילה של נזקי צמחים באמצעות שיטת הרשת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

פרויקט זה מומן על ידי ממשלת קנדה באמצעות Genome Canada והמכון לגנומיקה של אונטריו (OGI-046), וקרן המחקר של אונטריו – מנהיגות גלובלית בגנומיקה ומדעי החיים GL2-01-035 (ל-M.G. ו-V.G.). T.V.L. הוא עמית פוסט-דוקטורט בקרן למחקר מדעי בפלנדריה (FWO).

1. תחזוקה של עכביש קרדית האוכלוסייה הערה: קרדית עכביש שגדל על קליפורניה כליה אדומה שעועית (Phaseolus vulgaris). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגדל צמחי שעועית מזרעים ל2-3 שבועות לפני שריצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Intermix הצמחים האלה עם צמחים שורצים; קרדית למבוגרים תהיה במהירות ליישב חומר צמחי טרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר צמחי שעועית שורצים ישנים כל 7-10 ימים, והחליף אותם עם צמחים טריים. </li></ol> 2. איסוף למבוגרים נקבה קרדית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרדית אוסף באמצעות שיטת כביסה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף קרדית, למקם את צמח שעועית טרי במגע עם צמחים נגועים 1 עד 2 ימים לפני הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש 20-30 צמחי שעועית טריים לאסוף 1,000 עד 2,000 קרדית נקבה בוגרת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון של Tween 20 ב0.001% משימוש במים ברז ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף צמחי שעועית נגועות בפתרון Tween 20, באמצעות 2 עד 3 צמחים בכל פעם. </li><li&gt; כל צמח הוא שטף 2-3x לאסוף את כל קרדית מעלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צעד להשלים 2.1.4 בתוך 10 דקות, כדי למנוע תמותת קרדית. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בידוד של קרדית נקבה הבוגרת על ידי סינון של ההשעיה קרדית דרך מסננות של גודל רשת מוגדרת <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את מסננות של גדלי הרשת הבאים: 500 מיקרומטר (כדי להסיר שאריות) ו300 מיקרומטר (לאסוף קרדית למבוגרים נקבה) (איור 1 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סנן את ההשעיה דרך מסננת מיקרומטר 500. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Refilter ההשעיה דרך מסננת מיקרומטר 300. קרדית נקבה בוגרת תישמר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טובלים מסננת 300 מיקרומטר עם קרדית נקבה בוגרת במים ברז נקיים כדי להסיר Tween 20. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מורחים קרדית בשכבה אחת בתחתית המסננת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במגבת נייר כדי להסיר את עודפי מים מהרשת והצדדים של המסננת. הערה: זה נעשה משום קרדית צריכה להתייבש במהירות על מנת להתאושש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את ההרכבה כפי שמוצג באיור 1ב &#39;; זה יאפשר קרדית לנוע בחופשיות, אבל ימנע מהם לברוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המסננת עם קרדית על גבי המסננת המשמשת כתמיכה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקף את המסננת תחתונה עם מים כדי למנוע קרדית מהפיזור. הערה: קרדית תתחיל מתאוששת לאחר כ 5 דקות. לאחר כ 30 דקות, מספר קרדית נעה מספיק כדי להתחיל אוסף (1D איור). קרדית צריכה להיות שנאסף במסגרת 1 שעות, כפי שהם מייצרים משי שיפריע לאוסף. </li></ol></li></ol> 3. צמח שריצה עם קרדית הערה: ברגע שקרדית נקבה בוגרת התאוששה, הם יכולים לשמש להתפשטות צמח. ישנן 2 שיטות המשמשות לשורצים צמחים ניסיוניים עם קרדית נקבה בוגרת:) בעזרת מברשת עדינה (סעיף פרוטוקול 3.1) ו ב) באמצעות משאבה או קו ואקום (סעיף פרוטוקול 3.2). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרדית ריצתה באמצעות מברשת הערה: התפשטות קרדית עכבישעם מברשת משמשת ליישום של עד 30 קרדית לכל צמח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במברשת שיער רכה עגולה אמנות גודל 00 או עדינה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרטב את המברשת במים ברז RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להרים את קרדית מן המסננת בעזרת קצה המברשת ולהעביר אותם למפעל. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרדית ריצה באמצעות משאבה הערה: התפשטות צמח עם קרדית שנאסף על ידי קו משאבה / ואקום משמשת כאשר יותר מ 30 קרדית מוחלות. לשיטה זו, ניתן להשתמש במשאבת ואקום לאיסוף רכיבי המיקרואלקטרוניקה או קו ואקום. זה חשוב כדי לשמור על זרימת האוויר הקבוע ושל כוח מספיק (2-4 psi). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף קצה פיפטה 1 מיליליטר לצינור המתחבר לקו משאבת ואקום או באמצעות קיצוץ 1.5 מיליליטר צינור צנטריפוגות בתחתית כמתאם בין צינור משאבה / ואקום והעצה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים פיסת מגבת נייר בין קצה פיפטה והמתאם (צינור צנטריפוגות 1.5 מיליליטר). הערה: המטרה של זה היא לקרדית מלכודת בתוך tהוא פיפטה קצה במהלך תהליך השאיפה וגם כדי להפחית את זרימת האוויר (איור 1 ג). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף קרדית ישירות מהמסננת באמצעות קצה פיפטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלופין, לאסוף קרדית אחד אחד מעלים נגועים באמצעות stereoscope. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר המספר הנדרש של קרדית כבר נאסף, הסר את קצה פיפטה מהצינור, ולוודא כי פיסת מגבת נייר בחלק האחורי של קצה פיפטה באין מפריע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף קרדית על ידי הקשה על קצה פיפטה ומקפץ בקרדית יחד. לאחר מכן, מניח אותם על העלה; בתוך שניות, קרדית תתחיל לפזר על העלה. </li></ol></li></ol> 4. הקלטה ונזק צמח הערכה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נזק צמח הקלטה הערה: לקבלת א thaliana, צמח נזק מוערך לאחר 4 ימים של האכלת קרדית. נזק נרשם כשטח פנים הכולל של כתמי chlorotic. למדידת נזק, כל שושנה היא לחתוך וסרוק.פרמטרים סריקה תיארו הם עבור סורק Epson V30 אבל ישמשו כנקודת פתיחה טובה לכל סורק דומה. שמור על פרמטרים סריקה קבועים לכל הניסויים המאפשרים השוואה בין ריצות ניסוי בודדות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כסה מיטת סורק עם גיליון שקיפות כדי למנוע את זיהום פני השטח סורק עם חומר צמחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים כל שושנה ומניחים על משטח הסורק, כך צד adaxial (עליון) של עלים מול מקור אור הסורק ואלמנט ללכוד. לחלופין, אם רוזטות צפופה מדי מכדי ללכוד עלים בודדים בלי חפיפה, לנתח את שושנה לתוך עלים או קבוצות של עלים שאינם חופפים עם מספריים עדינים בודדים לפני הנחת על מיטת הסורק. ניתן לסרוק רוזטות מרובה בו זמנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כסה רוזטות או עלים עם פיסת נייר לבן כדי למנוע דבקות וזיהום של מכסה הסורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כיסוי לסגור סורק ולבצע סריקה עם הפרמטרים הבאים: רזולוציה: 1,200 dpi; מצב צבע: Adobe RGB; בהירות: +25; סוג קובץ: JPEG באיכות מקסימלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור לניתוח נזק שלאחר מכן קבצי תמונה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כימות נזק צמח הערה: האזור של נזק מחושב באופן ידני באמצעות Photoshop. בשל הבדלים גדולים בצורת עלה ועוצמת הצבע של הסימפטומים כתוצאה מהאכלת קרדית, שיטות אוטומטיות היו לא אמינות. לפיכך, שיטת רשת משמשת כדי להעריך את נזק צמח: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את התמונה של הצמח עם פוטושופ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת שכבה חדשה, ולאחר מכן שכבת תמונה סרוקה עם רשת של 0.25 מ&quot;מ x 0.25 חטיבות מ&quot;מ (הצג או תצוגה - הצג - גריד, קיצור מקלדת Ctrl + &quot;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשכבה מעולפת, לסמן אזורי עלה פגומים באמצעות נקודה (להשתמש &quot;עיפרון הכלי&quot;, קיצור מקשי B). השתמש בנקודה אחת לכל ריבוע של הרשת שמתחתיו יש נזק המשתרע על יותר ממחצית מיחידת הרשת. הגודל של הנקודה מוגדר בפיקסלים (כלומר, </eמ &#39;&gt; 52 פיקסלים לנקודה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר כל הריבועים של הרשת שמראים נזק צמח מכסה לפחות מחצית מיחידת הרשת מסומנים בנקודה, להשתמש בכלי היסטוגרמה (חלון - היסטוגרמה) כדי לקבוע את המספר הכולל של פיקסלים על השכבה. כלי היסטוגרמה מאפשר לאדם למדוד את מספר הפיקסלים. מאז כל נקודה מיוצגת על ידי מספר קבוע וידוע של פיקסלים, כלי היסטוגרמה יהיה למדוד את המספר הכולל של פיקסלים, המייצג את המספר הכולל של נקודות, ובהרחבה, את המספר הכולל של ריבועים מסומנים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את מספר &quot;נקודות&quot; מסומנות על ידי שימוש בנוסחה: מספר הנקודות = מספר כולל של פיקסלים / מספר פיקסל לנקודה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את השטח הכולל של נזק על ידי הכפלת מספר הנקודות מסומנות בתמונה על ידי השטח של ריבוע 1 של הרשת, כנקודה אחת מתאימה למשבצת הראשונה של הרשת. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Jeppson, L. R., Keifer, H. H., Baker, E. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJeppson%2C+LR+%22Mites+injurious+to+economic+plants%22">Mites injurious to economic plants</a>. , University of California Press. (1975).</li>
<li>Migeon, A., Dorkeld, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spider+Mites+Web%3A+a+comprehensive+database+for+the+Tetranychidae%5BTitle%5D)+AND+%22http%3A%2F%2Fwww.montpellier.inra.fr%2FCBGP%2Fspmweb%22%5BJournal%5D)">Spider Mites Web: a comprehensive database for the Tetranychidae.</a> http://www.montpellier.inra.fr/CBGP/spmweb. , (2013).</li>
<li>Croft, B. A., Vandebaan, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecological+and+Genetic-Factors+Influencing+Evolution+of+Pesticide+Resistance+in+Tetranychid+and+Phytoseiid+Mites%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Appl+Acarol%22%5BJournal%5D)">Ecological and Genetic-Factors Influencing Evolution of Pesticide Resistance in Tetranychid and Phytoseiid Mites.</a> Exp Appl Acarol. 4, 277-300 (1988).</li>
<li>Van Leeuwen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+heteroplasmy+and+the+evolution+of+insecticide+resistance%3A+Non-Mendelian+inheritance+in+action%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial heteroplasmy and the evolution of insecticide resistance: Non-Mendelian inheritance in action.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105, 5980-5985 (2008).</li>
<li>Van Leeuwen, T., Vontas, J., Tsagkarakou, A., Dermauw, W., Tirry, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acaricide+resistance+mechanisms+in+the+two-spotted+spider+mite+Tetranychus+urticae+and+other+important+Acari%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochem+Molec%22%5BJournal%5D)">Acaricide resistance mechanisms in the two-spotted spider mite Tetranychus urticae and other important Acari: A review.</a> Insect Biochem Molec. 40, 563-572 (2010).</li>
<li>Dermauw, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cys-loop+ligand-gated+ion+channel+gene+family+of+Tetranychus+urticae%3A+Implications+for+acaricide+toxicology+and+a+novel+mutation+associated+with+abamectin+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochem+Molec%22%5BJournal%5D)">The cys-loop ligand-gated ion channel gene family of Tetranychus urticae: Implications for acaricide toxicology and a novel mutation associated with abamectin resistance.</a> Insect Biochem Molec. 42, 455-465 (2012).</li>
<li>Van Leeuwen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population+bulk+segregant+mapping+uncovers+resistance+mutations+and+the+mode+of+action+of+a+chitin+synthesis+inhibitor+in+arthropods%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Population bulk segregant mapping uncovers resistance mutations and the mode of action of a chitin synthesis inhibitor in arthropods.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 109, 4407-4412 (2012).</li>
<li>Dearden, P. K., Donly, C., Grbic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+pair-rule+gene+homologues+in+a+chelicerate%3A+early+patterning+of+the+two-spotted+spider+mite+Tetranychus+urticae%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Expression of pair-rule gene homologues in a chelicerate: early patterning of the two-spotted spider mite Tetranychus urticae.</a> Development. 129, 5461-5472 (2002).</li>
<li>Khila, A., Grbic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+silencing+in+the+spider+mite+Tetranychus+urticae%3A+dsRNA+and+siRNA+parental+silencing+of+the+Distal-less+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Development+genes+and+evolution%22%5BJournal%5D)">Gene silencing in the spider mite Tetranychus urticae: dsRNA and siRNA parental silencing of the Distal-less gene.</a> Development genes and evolution. 217, 241-251 (2007).</li>
<li>Grbic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mity+model%3A+Tetranychus+urticae%2C+a+candidate+for+chelicerate+model+organism%5BTitle%5D)+AND+%22BioEssays+%3A+news+and+reviews+in+molecular%2C+cellular+and+developmental+biology%22%5BJournal%5D)">Mity model: Tetranychus urticae, a candidate for chelicerate model organism.</a> BioEssays : news and reviews in molecular, cellular and developmental biology. 29, 489-496 (2007).</li>
<li>Grbic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genome+of+Tetranychus+urticae+reveals+herbivorous+pest+adaptations%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The genome of Tetranychus urticae reveals herbivorous pest adaptations.</a> Nature. 479, 487-492 (2011).</li>
<li>Kliebenstein, D., Pedersen, D., Barker, B., Mitchell-Olds, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+quantitative+trait+loci+controlling+glucosinolates%2C+myrosinase+and+insect+resistance+in+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of quantitative trait loci controlling glucosinolates, myrosinase and insect resistance in Arabidopsis thaliana.</a> Genetics. 161, 325-332 (2002).</li>
<li>Abe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+of+jasmonate+in+response+and+tolerance+of+Arabidopsis+to+thrip+feeding%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+%26+cell+physiology%22%5BJournal%5D)">Function of jasmonate in response and tolerance of Arabidopsis to thrip feeding.</a> Plant & cell physiology. 49, 68-80 (2008).</li>
<li>Whiteman, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mining+the+plant-herbivore+interface+with+a+leafmining+Drosophila+of+Arabidopsis%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+ecology%22%5BJournal%5D)">Mining the plant-herbivore interface with a leafmining Drosophila of Arabidopsis.</a> Molecular ecology. 20, 995-1014 (2011).</li>
<li>Goodspeed, D., Chehab, E. W., Min-Venditti, A., Braam, J., Covington, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arabidopsis+synchronizes+jasmonate-mediated+defense+with+insect+circadian+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Arabidopsis synchronizes jasmonate-mediated defense with insect circadian behavior.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109, 4674-4677 (2012).</li>
<li>Kim, J. H., Lee, B. W., Schroeder, F. C., Jander, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+indole+glucosinolate+breakdown+products+with+antifeedant+effects+on+Myzus+persicae+%28green+peach+aphid%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+journal+%3A+for+cell+and+molecular+biology%22%5BJournal%5D)">Identification of indole glucosinolate breakdown products with antifeedant effects on Myzus persicae (green peach aphid).</a> The Plant journal : for cell and molecular biology. 54, 1015-1026 (2008).</li>
<li>Adio, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosynthesis+and+defensive+function+of+Ndelta-acetylornithine%2C+a+jasmonate-induced+Arabidopsis+metabolite%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">Biosynthesis and defensive function of Ndelta-acetylornithine, a jasmonate-induced Arabidopsis metabolite.</a> Plant Cell. 23, 3303-3318 (2011).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+tomato+homolog+of+CORONATINE-INSENSITIVE1+is+required+for+the+maternal+control+of+seed+maturation%2C+jasmonate-signaled+defense+responses%2C+and+glandular+trichome+development%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">The tomato homolog of CORONATINE-INSENSITIVE1 is required for the maternal control of seed maturation, jasmonate-signaled defense responses, and glandular trichome development.</a> Plant Cell. 16, 126-143 (2004).</li>
<li>Kant, M. R., Ament, K., Sabelis, M. W., Haring, M. A., Schuurink, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+timing+of+spider+mite-induced+direct+and+indirect+defenses+in+tomato+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Differential timing of spider mite-induced direct and indirect defenses in tomato plants.</a> Plant Physiol. 135, 483-495 (2004).</li>
<li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+Image+to+ImageJ%3A+25+years+of+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9, 671-675 (2012).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

וידאו זה מדגים פרוטוקולים משמשים כדי לבודד ושורצים צמחים עם מספר גדול של קרדית נקבה הבוגרת. למרות שהצגנו בפני פרוטוקול זה באמצעות א thaliana, ניתן להשתמש בו לכל מערכת אינטראקציה קרדית צמחים עכביש וכיום הוא מיושם בהצלחה גם על צמחי עגבניות וגפן (vinifera ויטיס). תשואות פרוטוקול תוצאות לשחזור, המציין כי קרדית נאספים ממצב פיסיולוגי דומה (איור 3). בעוד פרוטוקולים אלה הם פשוטים לביצוע...

אינטראקציה בין צמחים למזיקים היא נושא בעל חשיבות מדעית וכלכלית גדולה. זה מבחינה היסטורית נחקר באמצעות שני צמחי היבול (כגון עגבניות) וצמח המודל, א &#39; thaliana. בשני המקרים, רגישות של צמח לאוכלי עשב ניתן הייתה למדוד באופן ישיר דרך הערכה של פנוטיפ צמח לאחר התקף אוכלי עשב או בעקיפין באמצעות ההערכה של ביצועי מזיקים. מדידה ישירה של רגישות צמח נוצלו בעבר למספר מיני חרקים מזיקים באמצעות מגוון של שיטות. לדוגמא, herbivory של זחלי lepidopteran נמדד כהערכה של החלק מרקמות צמח שנצרכו על ידי שתי xylostella Plutella (עש Diamondback) או Trichoplusia ni (Looper כרוב) בעין בלתי מזוינת בעזרת רשת 12. כמו כן, ישנן שיטות שעושות שימוש בהדמיה דיגיטלית של נזק עלה עם ניתוח תמונת כמותית שלאחר מכן. שיטות כאלה היו בשימוש במחקריו של א &#39; אינטראקציה thaliana עם Frankliniella occidentalis (תריפס פרחים המערבי) 13, flava Scaptomyza (דרוזופילה כריית עלים) 14, וט ni 15. מדידות עקיפות של רגישות צמח נמצאות בשימוש נרחב במחקרים של אינטראקציה בין צמחים למזיקים. לדוגמא, רגישות של א &#39; thaliana לאפרסק Myzus כנימת persicae herbivory נבחנים בדרך כלל באמצעות ניתוח של פוריות מזיקים ותיאור של מורפולוגיה ברוטו של צמח אחרי האינטראקציה 16,17. עוד אינדיקטור עקיף טיפוסי של א &#39; רגישות thaliana למזיקים היא הערכת משקל יבשה או רטובה של אוכלי העשב. פרמטר זה משמש בדרך כלל כדי לאפיין תזונה צמחונית של lepidoterans, כגון פיאריס ראפא (לבן קטן), פ xylostella, או ט ני בזחל או גלמים שלהם בשלבי 15,17. קרדית עכביש תא התוכן Feeders. נזק הנגרם לקרדית מוכר כאוסף של כתמי chlorotic שטווח צבע לבן חיוורים ירוק. הרגישות של מארח מפעל לherbivory קרדית העכביש הוערכה או בעקיפין בעבר באמצעות הניתוח של ימי ביצועי קרדית עכביש לאחר שריצה-18,19, או ישירות באמצעות מורפולוגיה ברוטו של שבועות צמחים שלאחר שריצה 18 או באמצעות הדמיה דיגיטלית של עלים חשופים לקרדית במשך ימים עם ניתוח תמונה אוטומטי לאחר 19. שיטות אלה היו מפותחות ומשמשות למחקרים של אינטראקציות בין צמחי עגבניות וט urticae, ומשמש בדרך כלל מספר הקטן של קרדית עכביש (5-15 לכל טיפול), שנגבו מאוכלוסיית קרדית המעורבת והונחו על פני העלה בעזרת מברשת זיפים רכה. עם זאת, שיטות אלו אינן מתאימות למחקרים שבם מספר גדול יותר של קרדית צריך להיות מיושם. בנוסף, בעוד שעיבוד ישיר של תמונות עלה בתוכנת ניתוח תמונהכגון Adobe Photoshop (סן חוזה, קליפורניה) או 20 ImageJ יכולה לשמש לניתוח של נזק עגבניות, הפרוטוקולים האלה צריכים שינוי כדי להיות מיושמים על עלים שיש לי רפלקטיביות גדולה יותר של פני השטח או נצבעים באורח קל ויש לי trichomes הבולט מאוד ( למשל, thaliana א &#39;) שמפריעים לבחירה אוטומטית של נקודות chlorotic המציינות נזק צמח. יתר על כן, השלב ההתפתחותי של קרדית עכביש שיכול להיות מנוצל בקלות עם השיטות הקודמות מוגבל לנשים בוגרות והנפוצות ביותר לזיהוי בקלות ומונע ניצול של שלבי התפתחות אחרים. הצעד הקריטי הראשון לקראת ניתוח תפוקה גבוהה של אינטראקציה קרדית צמחים עכביש הוא להקים פרוטוקולים לשחזור, פשוט וחזקים לאתגר את צמחים עם קרדית עכביש ואמין להעריך את תוצאות אינטראקציה. בסרטון הזה, שיטה יעילה לאיסוף מהיר וקל של num גדולבער של קרדית נקבה בוגרת, היישום שלהם על מארח ניסיוני צמח, וההערכה של נזק הצמח בשל האכלת קרדית עכביש מתוארים. הפרוטוקול המובא מאפשר איסוף מהיר ויעיל של מאות אנשים בכל שלב התפתחותי (ביצים, זחלים, נימפות, זכרים בוגרים, ונשים) שיכול לשמש ליישום ניסיוני שלאחר מכן. בנוסף, ניתן ליישם פרוטוקולים אלה לכל צמח מארח קרדית, אבל באופן ספציפי הוכיחו במקרה של א &#39; thaliana.

<table><tbody><tr><td>חומר צמחי:</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>שעועית אדומה קליפורניה</td><td>סטוקס, תורולד, ON, קנדה</td><td></td><td>בת שבועיים, נגועה היטב בקרדית עכביש יומיים או שלושה לפני השימוש. ניתן להשתמש בזנים אחרים של Phaseolus vulgaris.</td></tr><tr><td>כימיקלים:</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9416</td><td>פתרון מלאי 1% מוכן כדי לפשט את הצעת המחיר</td></tr> של <tr><td>מי</td><td></td><td></td> ברז <td>בטמפרטורת החדר, הלם חום וקור משפיעים על שיעור ההישרדות והביצועים של הקרדית</td></tr><tr><td>חומרים וציוד אחרים:</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>מגש</td><td></td><td></td><td></td>פלסטיק</tr><tr><td>סט מספריים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>כוסות</td><td></td><td></td><td></td>2 ליטר</tr><tr><td>מגבות</td><td></td><td></td><td></td>נייר</tr><tr><td>סטים של מסננות</td><td>תוצרת הבית</td><td></td><td>הוראות מפורטות זמינות</td></tr><tr><td>מברשת</td><td></td><td></td><td></td>דקה</tr><tr><td>פיפטות</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>קצות</td><td></td><td></td> פיפטה <td>0.2 ו-1 מ"ל</td></tr><tr><td>1.5 מ"ל צינורות צנטריפוגה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>משאבת</td><td></td><td></td> אוויר <td>משאבה מסוג אקווריום עם זרימת אוויר הפוכה. ניתן להשתמש בקו ואקום. ירידת הלחץ הנדרשת היא כ. 2-4 psi</td></tr><tr><td>סורק סטריאוסקופ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Epson</td><td>V30</td><td>כל סורק שטוח המאפשר מידה נחוצה של שליטה על איכות הסריקה. אנו משתמשים ב- Epson V30 לניסויים שלנו.</td></tr><tr><td>מחשב</td><td></td><td></td><td>Windows או OS X PC התואם לחומרת הסורק ולתוכנת Adobe Photoshop.</td></tr><tr><td>תוכנת Adobe Photoshop</td><td>Adobe Systems Inc., סן חוזה, קליפורניה, ארה"ב</td><td>שונות</td><td>כל גרסה עם כלי היסטוגרמה כלולה.</td></tr></tbody></table>

יישום של קרדית העכביש הבחין-two<em&gt; tetranychus urticae</em&gt; לאינטראקצית צמח-מזיקים ללימודים

Application of Two-spotted Spider Mite Tetranychus urticae for Plant-pest Interaction Studies

קרדית העכביש שני המנומרת, Tetranychus urticae, הוא אוכלי עשב arthropod polyphagous בכל מקום שייזון ממגוון רחב להפליא של מינים, עם יותר מ 150 של ערך כלכלי. זה מזיקים עיקריים של גידולים בחממות, בעיקר בהסולניים ודלועיים (למשל, עגבניות, חצילים, פלפלים, מלפפונים, קישואים) ונוי חממה (למשל, ורדים, חרציות, ציפורנים), גידולי שדה שנתי (כגון תירס, כותנה, סויה, וסלק סוכר), ובתרבויות רב שנתית (אספסת, תותים, ענבים, הדרים, ושזיפים) 1,2. בנוסף לpolyphagy הקיצוני שהופך אותו למזיק חקלאי חשוב, ט יש urticae נטייה לפתח עמידות למגוון רחב של חומרי הדברה וacaricides המשמשים לשליטתה 3-7. ט urticae הוא אורגניזם ניסיוני מצוין, שכן יש מחזור חיים מהיר (7 ימים ב27 ° C)ויכול להישמר בקלות בצפיפות גבוהה במעבדה. שיטות לassay ביטוי גנים (כולל הכלאה באתרו ומכתים נוגדן) וכדי להשבית את הביטוי של גנים אנדוגניים קרדית עכביש באמצעות התערבות RNA פותחו 8-10. לאחרונה, כל רצף הגנום של ט &#39; urticae כבר דיווח, יצירת הזדמנות לפתח אוכלי עשב המזיק הזה כאורגניזם מודל עם משאבי גנומי מקבילים שכבר קיימים בחלק ממפעליה מארח (thaliana ארבידופסיס וlycopersicum Solanum העגבניות) 11. יחד, אורגניזמים מודל אלה יכולים לספק תובנות לתוך בסיסים מולקולריים של אינטראקציות בין צמחים למזיקים. הנה, שיטה יעילה לאיסוף מהיר וקל של מספר גדול של קרדית נקבה הבוגרת, היישום שלהם על מארח מפעל ניסיוני, וההערכה של נזק הצמח בשל האכלת קרדית עכביש מתוארות. הפרוטוקול המובא enables אוסף מהיר ויעיל של מאות אנשים בכל שלב התפתחותי (ביצים, זחלים, נימפות, זכרים בוגרים, ונשים) שיכול לשמש ליישום ניסיוני שלאחר מכן.

שימוש 20-30 צמחי שעועית שורצים, אחד יכול לאסוף סביב 2,000 קרדית נקבה בוגרת באמצעות הנפות. הזמן הנדרש לשורץ 10 צמחים עם 20 קרדית לכל צמח הוא כ 15 דקות אם בעזרת מברשת להעביר קרדית. שילובים של שיטות איסוף ויישום מוצגים באיור 2. פרוטוקול זה מייצר תוצאות לשחזור של נזק צמח, הוכחת כי קרדית נאספים ממצב דומה פיסיולוגי ומתאים למחקרי אינטראקציה קרדית צמחים עכביש (איור 3). כדי להעריך שחזור פ...

פרוטוקולים להכנה יעילה של דגימות אחידות של קרדית עכביש, התפשטות של צמחים ניסיוניים, והערכה של נזק צמח, כפי שנדרש למחקרים של אינטראקציה בין צמחים למזיקים פותחו.

יישום של קרדית העכביש הבחין-Two<em&gt; Tetranychus urticae</em&gt; לאינטראקצית צמח-מזיקים ללימודים

The two-spotted spider mite, Tetranychus urticae, is a ubiquitous polyphagous arthropod herbivore that feeds on a remarkably broad array of species, with ...

המטרה הכללית של הליך זה היא לאסוף במהירות ובאמינות קרדיתים אדומות בשלב התפתחותי נתון. הדבר משיג תחילה על ידי גידול קרדיתים על צמחי שעועית. לאחר מכן, מזריעים את צמח הניסוי בנקבות קרדיתים באמצעות מכחול או משאבה, בהתאם למספר הקרדיתים שיש להעביר לצמח בודד.השלב הסופי הוא כימות ידני של נזקי הצמח באמצעות שיטת הרשת בתוכנה לעריכה גרפית. לבסוף, נעשה שימוש בניתוח סטטיסטי כדי להראות רגישות דיפרנציאלית של קווי צמחים או אקוטיפים לתקיפת קרמיטיים. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות הוא שהיא מספקת שיטה יעילה לאיסוף מהיר וקל של מספר רב של נקבות קרמיטיים בוגרות, יישומן על צמח מאכיל ניסויי, והערכת נזקי הצמח כתוצאה מהזנת הקרמיטיים.הפרוטוקול המוצג מאפשר איסוף מהיר ויעיל של מאות פרטים בכל שלב התפתחותי, אשר ניתנים לשימוש ביישומים ניסויים בהמשך. כדי להתחיל, גדלו צמחי שעועית אדומה מקליפורניה מזרעים במשך שבועיים עד שלושה לפני ההדבקה; ערבבו צמחים אלה עם צמחים מדובקים. קרציות בוגרות יתיישבו במהירות על חומר הצומח הטרי.הסיר צמחי שעועית נגועים ישנים כל שבעה עד 10 ימים והחלף אותם בצמחים טריים כדי לאסוף קרמיות באמצעות שיטת השטיפה. הנח צמח שעועית טרי במגע עם צמחים נגועים יום אחד עד יומיים לפני הניסוי. השתמש ב-20 עד 30 צמחי שעועית טריים כדי לאסוף 1000 עד 2000 קרמיות נקבות בוגרות.ביום הניסוי, גזרו את השפשופים. השתמשו בצמחי שעועית נגועים בבסיסם, ולאחר מכן שטפו את צמחי השעועית הנגועים, שניים עד שלושה צמחים בכל פעם, בתמיסת tween 20 בריכוז 0.001%. יש לשטוף כל צמח שתיים עד שלוש פעמים כדי לאסוף את כל השפשופים מהעלים.עבדו בטווח זמן של 10 דקות כדי למנוע תמותה של הקריות. לאחר מכן, הכינו נפה של 500 מיקרומטר להסרת שריריים ונפה של 300 מיקרומטר לאיסוף קריות בוגרות נקבות. סננו את התמיה דרך נפת ה-500 מיקרומטר, ולאחר מכן סננו שוב את התמיה דרך נפת ה-300 מיקרומטר.קרציות נקבה בוגרות נותרים במסננת אם הצטמצמה בה כמות רבה מדי של קצף. ניתן לשטוף את הקרציות בעדינות תחת זרימה איטית של מי ברז בטמפרטורת החדר. טבול מסננת של 300 מיקרומטר עם קרציות נקבה בוגרות במי ברז נקיים כדי להסיר את ה-Tween 20, ופרוס את הקרציות בשכבה אחת בתחתית המסננת.השתמשו בנייר סופג כדי להסיר עודפי מים מהרשת ומדפנות הנפה, כדי שהקרציות יוכלו להתייבש במהירות ולהתאושש. לאחר מכן, הניחו את הנפה עם הקרציות מעל נפה המשמשת כתמיכה. הקיפו את הנפה התחתונה במים כדי למנוע מהקרציות להתפזר.פעולה זו תאפשר לקרמיות לנוע בחופשיות, אך תמנע מהן לברוח. הדבקה של קרמיות ספיידר באמצעות מכחול משמשת להחדרת עד 30 קרמיות לצמח. השתמשו במכחול אמנות עגול בעל שיער רך, בגודל 00 או דק יותר.הרטיבו את המברשת במי ברז בטמפרטורת החדר. אספו בעדינות קרציות מהנפה באמצעות קצה המברשת והעבירו אותן לצמח. כאשר מועברים יותר מ-30 קרציות, מושג הדבקת הצמח בקרציות שנאספו באמצעות קו שואב ואקום.עבור שיטה זו, חברו ראש פיפטה של 1 מיליליטר לצינור המתחבר למשאבה או לקו הוואקום באמצעות מבחנה צנטריפוגה של 1.5 מיליליטר. גזרו את התחתית כך שתשמש כמתאם בין צינור הוואקום של המשאבה לבין ראש הפיפטה, והניחו פיסת נייר סופג בין ראש הפיפטה למתאם. מטרתו של הנייר היא ללכוד את הקרצומים בתוך ראש הפיפטה במהלך תהליך השאיבה, וכן להפחית את זרימת האוויר, לצורך איסוף קרצומים ישירות מהנפה באמצעות ראש הפיפטה.לחלופין, אספו את הקרמיות אחת אחת מעלים נגועים באמצעות סטראוסקופ. לאחר שאסוף את מספר הקרמיות הנדרש, הוציאו את קצה הפפית מהשפופרת, תוך כדי הגבשה שפיסת נייר הספיגה בחלק האחורי של קצה הפפית נשארת ללא הפרעה.אספו את הקרציות על ידי הקשה על קצה הפפיטה וריכוזן יחדיו. לאחר מכן, הניחו אותן על העלה. בתוך שניות, הקרציות יתחילו להתפזר על פני העלה.כדי לתעד נזקים לצמח, כסו את משטח הסורק בדף שקיפות למניעת זיהום של פני השטח של הסורק בחומר צמחי. גזרו רוזטה שלמה והניחו אותה על משטח הסורק.כך שהצד האדקסילי (axial) של העלים פונה אל הסורק. מקור האור ואלמנט הלכידה, ניתן לסרוק מספר רוזטות בו-זמנית. לחלופין, אם הרוזטות צפופות מדי מכדי ללכוד עלים בודדים ללא חפיפה, יש לחתוך את הרוזטה לעלים בודדים או לקבוצות של עלים שאינם חופפים בעזרת מספריים עדינים לפני הנחתם על הסורק.כסו את הרוזטות או העלים בפיסת נייר לבן כדי למנוע הידבקות וזיהום של מכסה הסורק. סגרו את מכסה הסורק ובצעו סריקה ברזולוציה של 1,200 DPI, כאשר הבהירות מוגדרת ל-plus 25 וסוג הקובץ מוגדר לאיכות מקסימלית של jpeg. שמרו את קבצי התמונה לצורך ניתוח הנזקים בהמשך.כדי לכמת את הנזק לצמח, פתחו את תמונת הצמח ב-Photoshop. צרו שכבה חדשה. לאחר מכן, הניחו על התמונה הסרוקה רשת של 25 millimeter על 25 millimeter.חלוקה של 25 מילימטרים בשכבה עליונה. סמן אזורי עלה פגומים באמצעות נקודה עם כלי העיפרון. השתמש בנקודה אחת עבור כל ריבוע ברשת למטה שבו הנזק מכסה יותר ממחצית מיחידת הרשת.גודלו של ה-. מוגדר בפיקסלים. כאשר כל ריבועי הרשת המראים נזק לצמח המכסה לפחות מחצית מיחידת הרשת מסומנים בנקודה, נעשה שימוש בכלי היסטוגרמה כדי לקבוע את מספר הפיקסלים בשכבה המייצגת את מספר הנקודות, ובכך את המספר הכולל של הריבועים המסומנים.חשבו את מספר הנקודות המסומנות על ידי חלוקת מספר הפיקסלים הכולל במספר הפיקסלים לנקודה. חשבו את שטח הנזק הכולל על ידי הכפלת מספר הנקודות המסומנות בתמונה בשטח של ריבוע אחד ברשת, שכן נקודה אחת תואמת לריבוע אחד ברשת. גרף זה מציג את שטח הנזק שנמדד בצמחי AANA בני שלושה שבועות.ארבעה ימים לאחר החלה של 20 נקבות של קרדית מגן. תוצאות הנזק לצמח הן הניתנות לשחזור, מה שמעיד על כך שהקרדיות שנאספו נמצאות במצב פיזיולוגי דומה ומתאימות למחקרי אינטראקציה בין קרדית מגן לצמח. גרף זה מציג את שטח הנזק שנמדד בצמחי AANA בני שלושה שבועות ארבעה ימים לאחר החלה של 20 נקבות של קרדית מגן.כדוגמה ליישום ניסיוני, נבחנו שונות טבעית ורגישות לקרסניות, אוry, בשלושה aana ess באמצעות יישום של 20 נקבות של קרסניות לכל צמח בעזרת מברשת רטובה ותיעוד הנזק ארבעה ימים לאחר ההדבקה. ניתן להציג את נתוני הכמות של הנזק כגרף עמודות או כתרשים קופסה, ולנתח אותם באמצעות השיטה הסטטיסטית המתאימה. בדוגמה זו, הרגישות לקרסניות or bry משתנה באופן משמעותי בין הסשנים.ניתן להשלים את שלבי הבידוד וההדבקה תוך 30 דקות, בהתאם למספר הדגימות ולבחירת זרימת העבודה. חשוב לזכור כי אין להטביל את הקרמיות בתמיסת 20 למשך יותר מ-10 דקות. ניתן להשתמש בבידוד באמצעות מערכת זריעה כדי להשיג פракציות של קרמיות בשלבי התפתחות שונים, אשר ניתנות לשימוש במגוון ניסויים, לא רק בתחום האינטראקציה בין מזיקים לצמחים, אלא גם בפיזיולוגיה של התפתחות ובביולוגיה מולקולרית.

application-two-spotted-spider-mite-tetranychus-urticae-for-plant

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

כתב יד זה מדגים ודן בשימוש בטכניקות סקר הרגישות חומרי הדברה לזהות התנגדות לפנות וחומרי הדברה מזיקים arthropod מערכתי.

Bioassays עבור ההתנגדות הדברה ניטור

וידאו זה מסביר מנגנוני עמידות הצמח הפונדקאי herbivory ומדגים מבחן אין ברירה כי הערכות את התרומה היחסית של antibiosis וסובלנות spittlebug...

אפיון מנגנוני ההתנגדות אוכלי עשב: Spittlebugs על Brachiaria Spp. כדוגמה

כתב היד הזה מתאר חיישן אופטי multispectral כי זיהה פגיעה ביעילות כותנת עונה מוקדם שורץ מלאכותי עם צפיפויות שונות של אוכלוסיות עכביש קרדית שני-מנוקדים.

הערכת חישה מרחוק של נזק עכביש קרדית דו הבחין על כותנה חממה

כאן אנו מדווחים על השלבים השונים המעורבים בפיתוח המבוסס על ידע של קוטל חיטוי יעיל, כולל הבידוד, הזיהוי, ההקרנה וההבחנה של הפטרייה האנטומופתוגנית ה"מתאימה ביותר ", Metarhium anisopliae , לשליטה על מזיקים לחרקים בחקלאות .

פיתוח של<em&gt; מטריציום anisopliae</em&gt; כמקוטלת חיידקים: מהבידוד לביצועי שדה

לוחות תמותה לאפשר כימות של מקורות ושיעורי התמותה בקרב אוכלוסיות החרקים ולתרום להבנת, חיזוי, מניפולציה הדינמיקה באוכלוסייה של agroecosystems. שיטות ביצוע וניתוח טבלאות עוקבה מבוסס החיים בשדה של חרק עם חיים לא בוגר sessile שלבים מוצגים.

מתודולוגיית פיתוח טבלאות החיים עבור חרקים Sessile בשימוש השדה כנימת עש הטבק, כנימת עש הטבק, כותנה כמו מערכת מודל

המוצג כאן הוא פרוטוקול כדי לקבוע את מספר הטריפ ואת טורפים חרק הפיראטים בגידולים על תאריכים מרובים בניסויים בשטח. כמו כן, מומחש היא כיצד לקבוע את היעילות של טקטיקות ניהול נגד הנאה ולהעריך את היתרונות של באגים הפיראט דקה.

דגימה להערכת פרנקליאלה מיני פרחים ומינים טורפים בניסויי שדה

Micro-CT הוא כלי לא הרסני שיכול לנתח מבנים צמחיים בתלת מימד. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את הכנת הדגימה כדי למנף מיקרו-CT לניתוח מבנה ותפקוד צמחים טפיליים. מינים שונים משמשים כדי להדגיש את היתרונות של שיטה זו בשילוב עם תכשירים ספציפיים.

מינוף סריקת מיקרו-CT לניתוח אינטראקציות טפיליות בין צמח למארח

פרוטוקול זה מציג מערכת ביו-אסאי אופטימלית של עלים מנותקים להערכת היעילות של פטריות אנטומופתוגניות (EPF) נגד כנימת החרדל (Lipaphis erysimi (Kalt.)), חרק פרתנוגנטי. השיטה מתארת את תהליך איסוף הנתונים במהלך ניסויים בצלוחית פטרי, ומאפשרת לחוקרים למדוד באופן עקבי את האלימות של EPF נגד כנימות חרדל וחרקים פרתנוגנטיים אחרים.

הערכת ההשפעה של פטריות אנטומופתוגניות נגד חרק פרתנוגנטי, כנימת חרדל, Lipaphis erysimi (Kalt.)

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להפקת ארס מ Trichogramma dendrolimi באמצעות מארח מלאכותי שנוצר עם סרט פוליאתילן ותמיסת חומצות אמינו.

הפקת ארס מהצרעה הטפילית Trichogramma dendrolimi באמצעות פונדקאי מלאכותי

הוקם פרוטוקול בדיקה ביולוגית של עלים מנותקים לגידול המוני של תריפס צ'ילי בשיטת עלים מנותקים שונה במיכלי זכוכית המכילים אגר, מה שמבטיח הישרדות גבוהה והתפתחות מסונכרנת. מערכת זו מאפשרת סינון יעיל של אלימות פטריות אנטומופתוגניות כנגד זחלי כוכב 2 ומספקת אספקת תריפס אמינה להערכות מעבדה, חממה ושדה.

הקמת מערכת גידול תריפס צ'ילי (Scirtothrips dorsalis Hood) לבדיקת אלימות של פטריות אנטומופתוגניות

למד פרוטוקולים לאיסוף וזיהום צמחים בקרדית העכביש Tetranychus urticae לחקר אינטראקציות צמח-מזיקים. השיטה מאפשרת הערכה יעילה של נזקי צמחים באמצעות שיטת הרשת.

יישום של קרדית העכביש הבחין-Two

גלה סרטונים נוספים