Name: ייצור והשרשה של מדי עיבור Dual-אלמנט הזעיר למדידה בVivo במערכת העיכול התכווצויות במכרסמים. (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: למד לייצר מדי מאמץ דו-אלמנטיים למדידת התכווצויות שרירים חלקים במערכת העיכול של מכרסמים. שיטה זו מציעה פתרון בעלות נמוכה למחקר פיזיולוגי מדויק.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מימון מחקר התקבל באמצעות המכון הלאומי להפרעות ושבץ (NS049177 וNS087834) נוירולוגיות. המחברים מבקשים להודות תרומות האינטלקטואליות של ד&quot;ר פול בס מאוחר ועמיתיו לעיצוב המקורי של מדי העיבור; וקרול Tollefsrud לייצור והשיווק של מדי העיבור עד הפסקת הייצור בשנת 2010 כמו גם להתכתבותה תובנה.

<ol><li>Szarka, L. A., Camilleri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+measurement+of+gastric+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Gastrointest.+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Methods for measurement of gastric motility.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 296 (3), G461-G475 (2009).</li>
<li>Pascaud XB, F. A. U., Genton, M. J., Bass, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+miniature+transducer+for+recording+intestinal+motility+in+unrestrained+chronic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Endocrinol.+Metab.+Gastrointest.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A miniature transducer for recording intestinal motility in unrestrained chronic rats.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. Gastrointest. Physiol. 4 (5), 532-538 (1978).</li>
<li>Gourcerol, G., Adelson, D. W., Million, M., Wang, L., Tache, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+gastric+motility+by+brain-gut+peptides+using+a+novel+non-invasive+miniaturized+pressure+transducer+method+in+anesthetized+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Peptides%22%5BJournal%5D)">Modulation of gastric motility by brain-gut peptides using a novel non-invasive miniaturized pressure transducer method in anesthetized rodents.</a> Peptides. 32 (4), 737-746 (2011).</li>
<li>Américo, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+ACB+in+vitro+and+in+vivo+as+a+biomagnetic+method+for+measuring+stomach+contraction%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol.+Motil%22%5BJournal%5D)">Validation of ACB in vitro and in vivo as a biomagnetic method for measuring stomach contraction.</a> Neurogastroenterol. Motil. 22 (12), 1340-1374 (2010).</li>
<li>Fujitsuka, N., Asakawa, A., Amitani, H., Fujimiya, M., Inui, A. Chapter Eighteen - Ghrelin and Gastrointestinal Movement. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFujitsuka%2C+N+%22Ghrelin+and+Gastrointestinal+Movement%22">Ghrelin and Gastrointestinal Movement</a>. , Academic Press. 289-301 (2012).</li>
<li>Monroe, M. J., Hornby, P. J., Partosoedarso, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+vagal+stimulation+evokes+gastric+volume+changes+in+mice%3A+a+novel+technique+using+a+miniaturized+barostat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol.+Motil%22%5BJournal%5D)">Central vagal stimulation evokes gastric volume changes in mice: a novel technique using a miniaturized barostat.</a> Neurogastroenterol. Motil. 16 (1), 5-11 (2004).</li>
<li>Herman, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+noradrenergic+transmission+at+the+dorsal+motor+nucleus+of+the+vagus+involved+in+reflex+control+of+fundus+tone%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Characterization of noradrenergic transmission at the dorsal motor nucleus of the vagus involved in reflex control of fundus tone.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 294 (3), 720-729 (2008).</li>
<li>Gondim, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complete+cervical+or+thoracic+spinal+cord+transections+delay+gastric+emptying+and+gastrointestinal+transit+of+liquid+in+awake+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Spinal+Cord%22%5BJournal%5D)">Complete cervical or thoracic spinal cord transections delay gastric emptying and gastrointestinal transit of liquid in awake rats.</a> Spinal Cord. 37 (11), 793-799 (1999).</li>
<li>Van Bree, S. H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+inflammation+with+enhanced+brain+activation+contributes+to+more+severe+delay+in+postoperative+ileus%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol.+Motil%22%5BJournal%5D)">Systemic inflammation with enhanced brain activation contributes to more severe delay in postoperative ileus.</a> Neurogastroenterol. Motil. 25 (8), 540-549 (2013).</li>
<li>Qualls-Creekmore, E., Tong, M., Holmes, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastric+emptying+of+enterally+administered+liquid+meal+in+conscious+rats+and+during+sustained+anaesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol.+Motil%22%5BJournal%5D)">Gastric emptying of enterally administered liquid meal in conscious rats and during sustained anaesthesia.</a> Neurogastroenterol. Motil. 22 (2), 181-185 (2010).</li>
<li>Qualls-Creekmore, E., Tong, M., Holmes, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-course+of+recovery+of+gastric+emptying+and+motility+in+rats+with+experimental+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol.+Motil%22%5BJournal%5D)">Time-course of recovery of gastric emptying and motility in rats with experimental spinal cord injury.</a> Neurogastroenterol. Motil. 22 (1), 62(2010).</li>
<li>Choi, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+gastric+emptying+in+nonobese+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Gastrointest.+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Determination of gastric emptying in nonobese diabetic mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 293 (5), G1039-G1045 (2007).</li>
<li>Adelson, D. W., Million, M., Kanamoto, K., Palanca, T., Tache, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordinated+gastric+and+sphincter+motility+evoked+by+intravenous+CCK-8+as+monitored+by+ultrasonomicrometry+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Gastrointest.+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Coordinated gastric and sphincter motility evoked by intravenous CCK-8 as monitored by ultrasonomicrometry in rats.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 286 (2), G321-G332 (2004).</li>
<li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+modulation+of+serotonergic%2C+cholinergic%2C+and+nitrergic+pathways+on+murine+fundic+size+and+compliance+measured+by+ultrasonomicrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Gastrointest.+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of modulation of serotonergic, cholinergic, and nitrergic pathways on murine fundic size and compliance measured by ultrasonomicrometry.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 290 (1), G74-G82 (2005).</li>
<li>Bass, P., Wiley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contractile+force+transducer+for+recording+muscle+activity+in+unanesthetized+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Contractile force transducer for recording muscle activity in unanesthetized animals.</a> J. Appl. Physiol. 32 (4), 567-570 (1972).</li>
<li>Holmes, G. M., Browning, K. N., Tong, M., Qualls-Creekmore, E., Travagli, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagally+mediated+effects+of+glucagon-like+peptide+1%3A+in+vitro+and+in+vivo+gastric+actions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Vagally mediated effects of glucagon-like peptide 1: in vitro and in vivo gastric actions.</a> J. Physiol. 587 (19), 4749-4759 (2009).</li>
<li>Tong, M., Qualls-Creekmore, E., Browning, K. N., Travagli, R. A., Holmes, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+spinal+cord+injury+in+rats+diminishes+vagally-mediated+gastric+responses+to+cholecystokinin-8s%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol.+Motil%22%5BJournal%5D)">Experimental spinal cord injury in rats diminishes vagally-mediated gastric responses to cholecystokinin-8s.</a> Neurogastroenterol. Motil. 23 (2), e69-e79 (2011).</li>
<li>Miyano, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+vagus+nerve+in+the+migrating+motor+complex+and+ghrelin-+and+motilin-induced+gastric+contraction+in+suncus%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The role of the vagus nerve in the migrating motor complex and ghrelin- and motilin-induced gastric contraction in suncus.</a> PLoS ONE. 8 (5), e64777(2013).</li>
<li>Holmes, G. M., Rogers, R. C., Bresnahan, J. C., Beattie, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thyrotropin-releasing+hormone+%28TRH%29+and+CNS+regulation+of+anorectal+motility+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Auton.+Nerv.+Syst%22%5BJournal%5D)">Thyrotropin-releasing hormone (TRH) and CNS regulation of anorectal motility in the rat.</a> J Auton. Nerv. Syst. 56, 8-14 (1995).</li>
<li>Ormsbee, H. S., Bass, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastroduodenal+motor+gradients+in+the+dog+after+pyloroplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Gastroduodenal motor gradients in the dog after pyloroplasty.</a> Am. J. Physiol. 230, 389-397 (1976).</li>
<li>Fukuda, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+gastric+motor+activity+after+abdominal+surgery+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol.+Motil%22%5BJournal%5D)">Impaired gastric motor activity after abdominal surgery in rats.</a> Neurogastroenterol. Motil. 17 (2), 245-250 (2005).</li>
<li>Browning, K. N., Babic, T., Holmes, G. M., Swartz, E., Travagli, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+re-evaluation+of+the+specificity+of+action+of+perivagal+capsaicin%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A critical re-evaluation of the specificity of action of perivagal capsaicin.</a> J. Physiol. 591 (6), 1563-1580 (2013).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים. הספקים המפורטים בכתב יד זה ניתנים לעיון בלבד.

הנהלים שהוצגו כאן מאפשרים מעבדות בודדות לפברק מדי עיבור זעיר רגיש ליישומים ביולוגיים כוללים, אך לא מוגבל ל, תנועתיות קיבה ומעיים בחיות מעבדה קטנות. מאז הייצור המסחרי של מדי עיבור אלה חדל, מעבדות חוקרים פונקציה במערכת העיכול מוגבלות לטכניקות אחרות אשר לא יכול להרשות למגוון רחב של יישומים ניסיוניים שזמינים. דוח זה מספק תיאור מעודכן ומפורט יותר של טכניקות שתוארו קודם לכן 15. טקסט וידאו נלווה מתייחסים באופן ספציפי פתרונות למכשולים נפוצים שהוכרנו במהלך פיתוח ושליטה בתהליך הי...

מחקרי ניסויים ששיא בתנועתיות מערכת העיכול vivo (GI) על פני מספר תנאי ניסוי יישאר כלי רב עוצמה להבנת התהליכים התקינים וpathophysiological הבסיסיים דרושים הומאוסטזיס תזונתי. באופן מסורתי, מתודולוגיות ניסיוניות רבות, חלקם עם קווי דמיון לאלה שנמצאו בפרקטיקה קלינית 1, להיות מועסקת לכמת באופן ישיר משינויים בשיעור GI התכווצות 2-5, לחץ intraluminal 6, 7, או המעבר במערכת העיכול של סמנים שאינם נספגים 8, 9 או איזוטופים יציבים 10-12. לכל אחת מהטכניקות הללו יתרונות וחסרונות ייחודיים, שטופלו בעבר בספרות. לדוגמא, השירות של מנומטריה הבלון לכמת שינויי לחץ נחקר בשל עמידתו העצמית של חומר הבלון תוך התאוששות במערכת העיכול של סמני nonabsorbable דורשת הרדמת חסד האנימה הניסיוניתl לנקודת נתונים יחיד. לאחרונה, דווח היישום והאימות של קטטר לחץ דם זעיר שמציע שיטה לא ניתוחית לניטור התכווצות קיבה בחולדות ועכברים 3. בעוד מתמר לחץ להציב orogastrically מבטל למעשה משתנים מבלבלים על תפקוד מערכת העיכול על ידי הימנעות מפעולות כירורגיות פולשניות, גישה כזו מתאימה רק להכנות בהרדמה. יתר על כן, חוסר ההדרכה חזותית אינו מאפשר מיקום של המתמר בתוך אזורים הספציפיים של הקיבה עולה בקנה אחד. ככזה, יישום זה מוגבל לקיבה או המעי הגס מאז הדמיה, בשילוב עם חוט המתמר יחסית נוקשה, בתוך התריסריון או מעי עקום הוא לא אופציה. באופן דומה, biosusceptometry הנוכחי טכניקת biomagnetic החלופית (ACB) קבלה תוקף לניתוח התכווצות GI 4. בעוד טכניקת ACB מספקת ap לא פולשניתproach למדידת התכווצויות במערכת העיכול, ACB סובל ממגבלה דומה שבשימוש במדיה מגנטי זיהוי בליעה אינו מאפשר רישום מדויק של אזורים הספציפיים של מערכת העיכול. מגבלה זו ניתן להתגבר באמצעות ההשתלה כירורגית של סמנים מגנטיים. עם זאת, טכניקת ACB מחייבת כי בעל החיים להיות מורדם לאיסוף נתונים. Ultrasonomicrometry כבר מועסק בכמה GI לומד 13, 14 כדי לנצל את גודלו הקטן, מרחבי, ויתרונות זמניים של משדר גביש / מקלטים פיזואלקטריים. גלים של התכווצות שריר חלק בקיבה לא יהיו אירוע בתדירות גבוהה ולהתרחש בשיעור של כ 3 - מחזורים / 5 דקות. לכן, היתרונות זמניים של sonomicrometry עשויים להיות מיותרים כדי להצדיק את העלות. יתר על כן, בעוד שתנועה ליניארית נמדדה במדויק עם sonomicrometry, מגבלות הוצגו לגבי נתונים במערכת העיכול מדויקיםפרשנות שעלולה להיגרם כתוצאה מהשתלת מספר מספיק של גבישים 14. בהתבסס על העיצובים המקוריים של באס ועמיתים 2, 15 פרוטוקול דמיין זה מתעד את ייצור צעד אחר צעד ויישום ניסיוני של מיניאטורי, מדי עיבור אלמנט כפול שיש להם רגישות גבוהה וגמישות להקלטת התכווצויות שריר חלק לאורך כל מערכת העיכול באופן מלא יותר בדרכי. הממדים של אלמנטי מד העיבור מתאימים לכל יישום מכרסם מאז רגישות וגודל של מד העיבור המוגמר התלויים ביותר על גיליונות סיליקון מתמצתים את האלמנטים. מדי עיבור אלו מותאמים בקלות ליישום אקוטי וכרוני במודלים של בעלי חיים במעבדה בהרדמה ומתנהגים בחופשיות ובכך לספק טכניקה יחידה לכימות התכווצויות שריר חלק.

<table><tbody><tr><td>אלמנט מד מתח</td><td>מיקרו-מדידות (קבוצת מוצרי Vishay)</td><td>EA-06-031-350</td><td>&nbsp; דפוס ליניארי, נייר כסף, מד מתח לניתוח מתח (2 נדרשים) <a href="http://www.vishaypg.com/micro-measurements/">www.vishaypg.com/micro-measurements/</a> or <a href="http://www.vishaypg.com/docs/11070/031ce.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11070/031ce.pdf</a></td></tr><tr><td>דבק אפוקסי-פנולי</td><td>M-bond 610</td><td>דבק לשימוש כללי להדבקת אלמנטים</td> <td>של מד מתח<a href="http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf</a></td></tr><tr><td>3 חוט מבודד מוליך</td><td>336-FTE</td><td>מד עדין, חוט גמיש לשימוש כללי</td><td><a href="http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf</a></td></tr><tr><td>ערכת ממס שטף ורוזין</td><td>ערכת</td> <td>AR FAR-2 M-Fluxשטף הלחמה נוזלית</td><td><a href="http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf</a></td></tr><tr><td>הלחמה</td><td>361A-20R-25</td><td>ממוטב ומומלץ עבור יישומי מד מתח</td><td><a href="http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf">http://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf</a></td></tr><tr><td>Gold</td><td></td> מגע שקע PlasticsOne <td>E363/0</td><td>עבור הדום אלקטרודה <a href="http://www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=407">http://www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=407</a></td></tr><tr><td>הדום אלקטרודה</td><td>MS363</td><td>פלטפורמה מאובטחת למגעי חוטים</td><td><a href="http://www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=499">http:// כבל www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=499</A</td></tr><tr><td>>6 חוטים</td><td>363 תקע עם ויניל SL/6</td><td>כבל מצופה ויניל טרומי (באורכים מותאמים אישית) עם מתאם תקע כדי להתאים את הדום האלקטרודה וזיזי הלחמה משומרים בקצה</td><td></td>המסוף</tr><tr><td>תרכובת יציקת גומי סיליקון</td><td>EIS מוצרי חשמל</td><td>Elan Tron E211</td><td>מדיום עציצים למפרקי הלחמת חוטים <a href="http://www.eis-inc.com/">http://www.eis-inc.com</a></td></tr><tr><td>HOTweezers</td><td>Meisei Corporation</td><td>Model 4B</td><td>מסירי בידוד חוטים <a href="http://www.impexron.us/">http://www.impexron.us</a></td></tr><tr><td>תחנת הלחמה</td><td>Weller (Apex Tool Group)</td><td>WES 51</td><td>ציוד הלחמה באיכות גבוהה <a href="http://www.apexhandtools.com/weller/index.cfm">http://www.apexhandtools.com/weller/index.cfm</a></td></tr><tr><td>זמין דרך http://www.eis-inc.com או http://www.amazon.com</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>יריעת סיליקון</td><td>Trelleborg פתרונות איטום Northborough-Life Sciences</td><td>Pharmelast 20-20</td><td>עטיפת אלמנטים של מד מתח 10 B Forbes Road Northborough, MA 01532 (800) 634-2000</td></tr><tr><td>Amplifier</td><td>Experimetria Ltd</td><td>AMP-01-SG</td><<td>br/> <a href="http://experimetria.com/Biological_amplifiers.php">http://experimetria.com/Biological_amplifiers.php</a></td></tr></tbody></table>

ייצור והשרשה של מדי עיבור dual-אלמנט הזעיר למדידה<em&gt; בvivo</em&gt; במערכת העיכול התכווצויות במכרסמים.

Fabrication and Implantation of Miniature Dual-element Strain Gages for Measuring In Vivo Gastrointestinal Contractions in Rodents.

תפקוד לקוי של מערכת העיכול נותר גורם עיקרי לתחלואה ותמותה. ואכן, תנועתיות מערכת העיכול (GI) בבריאות ובמחלות נותרה תחום מחקר פרודוקטיבי עם למעלה מ-1,400 מחקרים בבעלי חיים שפורסמו בחמש השנים האחרונות בלבד. פותחו טכניקות רבות לכימות פעילות השרירים החלקים של הקיבה, המעי הדק והמעי הגס. טכניקות in vitro ו-ex vivo מציעות כלים רבי עוצמה למחקרים מכניסטיים של תפקוד מערכת העיכול, אך מחוץ להקשר של המערכות המשולבות הטבועות באורגניזם שלם. בדרך כלל, מדידת התכווצויות שרירים חלקים של הקיבה כללה תכשיר מורדם יחד עם הכנסת חיישן לחץ הממוקם בניתוח, עומס לחץ סטטי כגון בלון מנופח קלות או על ידי ניפוח הקיבה בנוזל תחת משוב מבוקר ברוסטטי. עם זאת, רבות מהגישות הללו מציגות חסרונות ייחודיים הן לגבי פרשנות התוצאות והן לגבי הישימות לשימוש in vivo במודלים מודעים של חיות ניסוי. השימוש במדי מתח דו-אלמנטיים שהוצמדו למשטח הסרוזלי של מערכת העיכול הציע יתרונות ניסיוניים רבים, שעשויים להמשיך לעלות על החסרונות. מכיוון שמדדים אלה אינם זמינים מסחרית, מצגת וידאו זו מספקת מדריך מפורט שלב אחר שלב לייצור העיצוב הנוכחי של מדדים אלה. מד המתח המתואר בפרוטוקול זה הוא תכנון לרישום תנועתיות הקיבה בחולדות. עיצוב זה שונה לתיעוד פעילות שרירים חלקים לאורך כל מערכת העיכול ודורש רק וריאציה עדינה בייצור הכולל. כלולים נתונים מייצגים מכל מערכת העיכול וכן דיון בשיטות ניתוח, פרשנות נתונים והצגתם.

נציגי נתונים מעכברוש Thiobutabarbital-הרדים מוצגים באיור 2. העקבות העליונים מייצגת את התכווצויות קורפוס קיבה מהחולדה בתקופת ממשל גזע המוח של הורמון thyrotropin שחרור (TRH, 100 pmol), הפפטיד ידוע לשיפור תנועתיות 3, 19. זה מראה צירים תחילת המחקר לפני העלייה בפעילות השרירים phasic קיבה חלקה. הערה: ניתוח של פסגות אלה בהתכווצויות קיבה בצע את הנוסחה המקורית שהומצאה על ידי אורמסבי והבס 20 <p class="jove_content" style=";text-align:right;directio...

המדידה in vivo של התכווצויות שרירים חלקים לאורך מערכת העיכול של חיות מעבדה נותרה טכניקה רבת עוצמה, אם כי לא מנוצלת כראוי. מדי מתח גמישים עם שני אלמנטים אינם זמינים מסחרית ודורשים ייצור. פרוטוקול זה מתאר בניית מדי מתח אמינים וזולים להשתלה חריפה או כרונית במכרסמים.

ייצור והשרשה של מדי עיבור Dual-אלמנט הזעיר למדידה<em&gt; בVivo</em&gt; במערכת העיכול התכווצויות במכרסמים.

Gastrointestinal dysfunction remains a major cause of morbidity and mortality. Indeed, gastrointestinal (GI) motility in health and disease remains an ...

המטרה הכוללת של ההליך הבא היא להדגים ייצור של מד מתח כפול אלמנט. זה מושג על ידי הדבקה ראשונה לאנשים מיושרים, רכיבי מד מתח של אלמנט יחיד. בשלב השני, חוטי החיבור מורכבים ומולחמים לאלמנטים המודבקים, תוך הקפדה לא לפגוע בחומר הגיבוי ובאלמנט המד.לאחר מכן, מכלול האלמנט הכפול מוטבע בין שכבות של יריעת סיליקון ליצירת מד מתח גמיש, אטום למים וניתן לשימוש חוזר. בשלב האחרון, המד משולב עם מחבר יציב לצימוד מאובטח למגבר גשר מתאים. בסופו של דבר, ניתן להשתמש במד המיוצר כדי לתעד את הקצב והגודל היחסי של התכווצויות in vivo לאורך מערכת העיכול.לאחר ששולטים בייצור מדי המתח הבודדים, המדדים מציעים אפשרות בעלות נמוכה יחסית לשימוש לאורך אזורים מרובים במערכת העיכול המעניינים את החוקר. לטכניקת מד המתח יש מספר יתרונות על פני שיטות חלופיות כמו שימוש במנומטרים של בלון, מתמרי לחץ או פיסו, משדרי גביש חשמליים ומקלטים שכן ניתן להשתמש במדדי המיתרים באופן חריף בנבדקים מורדמים או להיות מושתלים באופן כרוני להקלטות ארוכות טווח בבעלי חיים ערים המתנהגים בחופשיות. כדי לייצר את מד המתח של האלמנט הכפול, התחל בהצמדת פיסת נייר דביקה קטנה ונקייה כשהצד הדביק פונה כלפי מעלה על שולחן העבודה.לאחר מכן אבטח את האלמנטים למשטח העבודה כדי להגביל כל תנועה או זיהום לא רצוי של האלמנטים. לאחר מכן, אחוז בכל אלמנט בתורו עם זוג מלקחיים מספר חמש, ולאחר מכן נקה את החלק האחורי של סרטי היסוד עם אלכוהול איזופרופיל. לאחר שאפשרת לאלמנטים להתייבש באוויר, השתמש במברשת שיער גמל נקייה 10 אפס מתחת למיקרוסקופ סטריאו כדי למרוח סרט דק של דבק פנולי אפוקסי על גב אחד האלמנטים.לאחר מכן הנח מיד את החלק האחורי הנגדי של האלמנט השני על הדבק ויישר את רשתות נייר הכסף. מכניסים את האלמנטים המודבקים לתנור של 50 עד 60 מעלות צלזיוס למשך הלילה כדי לרפא את האפוקסי במלואו. למחרת בבוקר השתמש בסכין גילוח חד קצוות כדי לקצץ את האלמנטים הכפולים המודבקים לגודל סופי של שלושה על שלושה מילימטרים, והימנע מקיצוץ החלק העליון של האלמנטים.לאחר מכן, פרק גדיל קלוע של 30 סנטימטר של חוט בעל שלושה מוליכים לשלושת החוטים המרכיבים אותו. לאחר מכן כדי ליצור כבל בעל ארבעה חוטים זוג ראשון, אחד החוטים הבודדים המתקבלים עם חוט בצבע בהיר הכלול באורך שני של 30 סנטימטר של חוט שלושה מוליכים. לאחר מכן, הפשיטו כמילימטר אחד של בידוד טפלון משני קצוות כל חוט והשתמשו בשטף הלחמת רוזין מופעל ובהלחמה בטמפרטורה נמוכה.פח החוט מסתיים בעיפרון הלחמה, ואז שטף את רפידות ההלחמה בצד אחד של האלמנט הכפול המלוכד בעזרת מברשת נקייה של 10 אפס והלחמה עופרת אחת בודדת ואחד המוליכים המשותפים הזוגיים לכרית ההלחמה. לאחר חזרה על התהליך בצד הנגדי, וודא שכבל החוט המשותף שנותר מולחם לרפידה מול הכבל המשותף המקורי, השתמש במברשת נקייה טבולה בממס שרף כדי להסיר כל שטף שיורי לאחר הליך הניקוי. לרפא חלקית שרף אפוקסי גומי סיליקון שני חלקים למשך 20 עד 30 דקות.לאחר מכן הלחמו מחברי שקע זהב לקצוות החופשיים של מובילי החוט ובודדו את מפרקי ההלחמה על רפידות הלחמת האלמנט בשכבה דקה של השרף. לאחר מכן, חותכים שלוש חתיכות של יריעת סיליקון בעובי 0.5 מילימטר לריבועים של 15 מילימטר על 15 מילימטר ומנקים את הסיליקון במים מזוקקים. לאחר מכן חותכים את אחת היריעות לצורת U כדי להכיל את מכלול האלמנט הכפול הסופי מבלי לעוות את שכבת הסיליקון העוטפת, את המשטחים הפנימיים של יריעות הסיליקון החופשיות עם דבק סיליקון שקוף, ולאחר מכן סנדוויץ' את מכלול האלמנט הכפול בתוך החריץ ואת היריעות החיצוניות המיושרות.לחץ בעדינות על כל עודפי הסיליקון ובועות האוויר מהמרכז כלפי חוץ. מהדקים בזהירות את המכלול המכוסה בין שני בלוקים של מלאי מוט מתכת למשך 24 שעות כדי להבטיח עובי אחיד והיעדר עיוות למחרת, והשאיר את עודפי הסיליקון לאורך גבולות ההרכבה, חיזק את מפרק ההלחמה של שקע הזהב. מחברים על חוט ההדקים הבודד מובילים עם שלושה מילימטרים של צינורות כיווץ, מיישרים את הצינור בתוך כן אלקטרודה מפלסטיק לפני השימוש הראשון במד מתח חדש.חתוך את עודפי הסיליקון מגבולות המד כדי להשיג את המידות הרצויות הסופיות. הקפד לא לפגוע באלמנט הכפול או בכבלי החוט. לאחר מכן אבטח את הדום והחוטים עם צינורות כיווץ בקוטר 0.125 ו-0.25 אינץ' כדי למנוע ניתוק במהלך הניסוי.כדי להשתיל את מד המתח הכפול, התחל בשימוש במחט מעגל שמינית מספר 14 מתחדדת 0.3 כדי להשחיל את ארבע הפינות של מד המתח באורכים של ארבעה עד חמישה סנטימטרים של ארבעה תפרי משי סטריליים אפס או פחות. לאחר מכן, לאחר ביצוע קטע לפרוטומיה, שרירי הבטן הישר לאורך המרפק הליניארי המחבר כדי למנוע דימום. לאחר מכן צור קו אמצע שטחי מאוד בצפק הקודקודי כדי למנוע קרע בקרביים הבטניים הבסיסיים באמצעות אפליקטורים ספוגים בכותנה מלוחים.הניחו בזהירות את הבטן על ריפוד גזה ספוג מלח בקצה החתך בבטן. שמירה על האיבר במקומו האנטומי יישר את הרשת של מד המתח המכוסה במקביל לסיבי השריר החלק העגולים. לאחר מכן בעזרת התפרים המושחלים בעבר ומחט מעגל שמינית מספר 14 מתחדדת 0.3, חבר את פינות המד למשטח הגחון של גוף הקיבה.כעת התחל את תבנית התפרים של המד לאורך העקמומיות הגדולה יותר של הקיבה ליד גבול הפונדוס קורפוס, והמשך לאורך גבול זה לעבר העקמומיות הקטנה יותר כדי להשיג את התוצאות הטובות ביותר. ה-ci rosa העומד בבסיס מד המתח לא צריך להיות רפוי כמו בתמונה זו וגם לא מתוח יתר על המידה כמו בתמונה זו. לאחר הנחת התפר, השתמשו באפליקטורים עם קצה כותנה ספוג במי מלח כדי להחזיר את הקיבה למקומה האנטומי.עבור דגם אקוטי חיצוני, מד המתח מוביל בקצה הקיפוד של חתך קו האמצע לפני סגירת חתך הבטן. לאחר מכן סגור את שרירי פי הטבעת ואת עור הבטן עם שלושה תפרי ניילון אפס נפרדים. אבטח את החוטים החופשיים לבעל החיים כדי לספק הפגת מתח במהלך מניפולציה של החיה או מחבר חוט המסוף.לבסוף, הנח את החיה במסגרת סטריאוטקסית כדי לתמוך בראש ולהרים את פלג הגוף העליון כדי להפחית את חפצי הנשימה במהלך ההקלטה. שמירה על טמפרטורת פי הטבעת על 37 פלוס מינוס מעלה אחת צלזיוס באמצעות כרית חימום מבוקרת משוב. נתונים מייצגים של חולדה מורדמת Aobut Barbital מוצגים בגרף.העקבה העליונה מייצגת את התכווצויות קורפוס הקיבה מהחיה במהלך מתן הורמון משחרר תירוטרופין בגזע המוח, פפטיד ידוע המשפר תנועתיות, וממחיש את רמות ההתכווצות הבסיסיות לפני העלייה בפעילות השריר החלק של הקיבה. העקבה השנייה מדגימה ירידה בטונוס השריר החלק בקיבה הבסיסית מאותה חיה. בתגובה לצד תורם תחמוצת החנקן נתרן ניטרופרס, ניתן להשתמש באות מתח זה כדי להפיק את העומס הסטטי המקביל בגרמים.נתונים מייצגים אלה מדגימים את היכולות הדו-כיווניות של מד מתח דו-אלמנטי שהוצמד כראוי לרוזה הקיבה. העקבה השלישית מייצגת את התכווצויות השרירים החלקים הבסיסיים שנרשמו על ידי מד מתח תת-מיניאטורי שנתפר על פני השטח של התריסריון של חולדה בצום. בניסוי מייצג זה, הכיוון של אלמנטים של מד המתח היה גם במקביל לשריר המעגלי של התריסריון.בזמן שמד המתח על מערכת העיכול, חשוב לזכור לתפור את המד עם הפרעה מינימלית של השתן וכלי הדם. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לייצר מדי מתח תת-זעירים תוך הימנעות מכמה מהמלכודות המוקדמות הקשורות להיבטים מאתגרים יותר מבחינה טכנית של התהליך כגון הלחמה דיסקרטית של רכיבים קטנים ועדינים.

fabrication-implantation-miniature-dual-element-strain-gages-for

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

בדו"ח זה אנו מדגימים טכניקות שיכולות לשמש כדי לחקור את הביולוגיה של סרטנים במעי האחורי. אנו מראים כיצד לנתח בטן סרטנים ותחקור את קשורה, פיזיולוגיה מודולציה של פעילות. פעילות כוח peristaltic של התכווצויות נמדדים באמצעות מתמר כוח.

ניסויים פיזיולוגיים עם במעי האחורי סרטן הנהרות: תרגיל מעבדה סטודנטים

הערכת תנועתיות המעי במעי הגס שפן ניסיונות דיסטלי עם צג תנועתיות מערכת העיכול (GIMM) היא גישה ישירה ופשוטה ללמוד להעריך כמותית הנעה תנועתיות במערכת העיכול.

צג תנועתיות מערכת העיכול (GIMM)

ileus לאחר הניתוח (POI) הוא סיבוך של ניתוח בטן מוביל לתחלואה ואשפוז ממושך. בגלל אסטרטגיות מניעות או טיפול חסרות מחקר התעצם הוא הכרחי. לכן הקמנו מודל עכבר סטנדרטי וריאלי כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של POI וללמוד אפשרויות טיפוליות פוטנציאליות.

הערכה תפקודית של תנועתיות מעיים ודלקת דופן מעי במכרסמים: ניתוח בדגם סטנדרטי של מניפולצית מעיים

כלים חדשים למחקר mechanobiology יש צורך להבין כיצד מכאניים מפעילה מסלולים ביוכימיים, מעורר תגובות ביולוגיות. כאן, אנחנו ראווה שיטה חדשה עבור סלקטיבית גירוי מכני של חיות קיבוע עם מלכודת microfluidic ומאפשר הדמיה ברזולוציה גבוהה של תגובות הסלולר.

שימוש בהתקן מיקרופלואידיקה גירוי מכני, רזולוציה גבוהה הדמיה של C. elegans

המוצג כאן הוא פרוטוקול עבור ייצור של מערכת הוהשתלות עבור בהקלטה vivo כרונולוגי של פוטנציאל אלקטרומגנט מעורר וספונטני. המערכת חלה על חקירת שימור של שרירי הגרון לאחר פגיעת העצבים.

מערכת ולוהשתלות לכרוני בVivo האלקטרומגרפיה

מאמר זה מפרט כיצד לבצע in vivo (באמצעות מערכי אלקטרודות משטח ומחט) ו- ex vivo (באמצעות תא דיאלקטרי) מיופיוגרפיה של עכבה חשמלית על שריר גסטרוקנמיוס המכרסמים. הוא ידגים את הטכניקה הן בעכברים והן בחולדות ויפרט את השינויים הזמינים, (כלומר, בעלי חיים שמנים, גורים).

ביצוע מיוגרפיה של עכבה חשמלית In Vivo ו - Ex Vivo במכרסמים

פרוטוקול זה מתאר ייצור ידני והשתלה כירורגית של אלקטרודות אלקטרומיוגרפיות (EMG) בשרירי הגפיים הקדמיות של עכברים כדי לרשום את פעילות השרירים במהלך ניסויי התנהגות קבועים בראש.

רישום פעילות שרירי הפורלימב בעכברים עם ראש קבוע עם אלקטרודות EMG מושתלות כרוניות

מטרתנו הייתה לספק מדריך מעודכן וקל למעקב על ייצור ובדיקה של אלקטרודות אלקטרומיוגרפיה אפימיסיאליות. לשם כך, אנו מספקים הוראות למיקור חומרים והדרכה מפורטת של תהליך הייצור והבדיקה.

פיתוח אלקטרודת אלקטרומיוגרפיה אפימיסיאלית בעלות נמוכה: זרימת עבודה פשוטה לייצור ובדיקה

מוצג פרוטוקול להתקנה והכנה של אלקטרודות תוך שריריות, יחד עם מכשיר מדידה ממוזער הניתן להרכבה על בעלי חיים לניתוח אלקטרומיוגרפיה (EMG) במחקרי תנועה. מערכת זו מאפשרת שידור אלחוטי של נתוני EMG בזמן אמת לחקירת התאוששות תנועה בחולדות מודל שבץ.

מערכת מדידת אלקטרומיוגרפיה לבישה בזמן אמת לבעלי חיים קטנים

Decellularization זלוף היא שיטה חדשנית לייצור פיגומים כבד כל כך שומרת על הרכב תאי מטריקס של איברים ארכיטקטורה. בזאת, השיטה של ​​הכנת פיגומים איבר שלם באמצעות decellularization זלוף ואכלוס הבאים עם hepatocytes מתואר. שתלי כבד פונקציונליים להשתלה ניתן להפיק באמצעות טכניקה זו.

Decellularization ו Recellularization של כבדים שלמים

למד לייצר מדי מאמץ דו-אלמנטיים למדידת התכווצויות שרירים חלקים במערכת העיכול של מכרסמים. שיטה זו מציעה פתרון בעלות נמוכה למחקר פיזיולוגי מדויק.

ייצור והשרשה של מדי עיבור Dual-אלמנט הזעיר למדידה

גלה סרטונים נוספים