Name: השפעת דגם קליפת המוח מבוקר לפגיעה מוחית טראומטית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 30 s
Description: למד את מודל פגיעת קליפת המוח המבוקרת לחקר פגיעות מוח טראומטיות בעכברים. השיטה מאפשרת יצירת פציעות מוחיות מבוקרות וניתוחן באמצעות הדמיה והיסטוכימיה אימונולוגית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מימון מכבל אינדיאנה השדרה ומענקי מחקר פגיעה מוחי (SCBI 200-12), ראלף וו וגרייס מ &#39;וולטר פרס מחקר, אוניברסיטת אינדיאנה גרנט המחקר הביולוגי, RR025761 מענקי NIH ו1R21NS072631-01A.

טיפול בבעלי חיים C57 BL / 6 עכברי זכרים היו שוכן קבוצה והמשיכו בשעתי אור 12/12 / מחזור כהה עם חופשי גישה למזון ומים כהרצון. בעלי החיים המשמשים בפרוטוקול זה היו 10-12 שבועות. כל הנהלים בוצעו תחת פרוטוקולים שאושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטת אינדיאנה. 1. הכנת כירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר באמצעות תערובת קטמין / xylazine (87.7 מ&quot;ג / מיליליטר קטמין ו12.3 מ&quot;ג / מיליליטר Xylazine) ולנהל (1 מיליליטר / קילוגרם) באמצעות הזרקת ה-IP. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הראש של העכבר בין האוזניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל ג&#39;לי מבוסס נפט לעיניים של העכבר כדי למנוע התייבשות במהלך ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה את האזור המגולח עם יוד 10%. לאחר מכן להשתמש באתנול 70% לנקות את יוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן ראש העכבר במסגרת stereotactic באמצעות סורגי האוזן וצלחת ביס. להבטיח את המוח הוא יציב. </li></ol> 2. Craniectomy </p&gt; <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך אורכי באמצע הראש עם מספריים. השתמש במלקחיים כדי להחזיק את עור בצד השמאל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש המוליך כותנה שקצה כדי להסיר את הדם ורקמות על העצם כדי לחשוף את הגולגולת. לאפשר גולגולת חשופה לייבוש במשך דקות 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים כדי להפעיל לחץ ולהבטיח כי הגולגולת נשארת נייחת. זהה את ציוני דרך אנטומיים למבדה (היבט הזנב) וגבחת (היבט קדמי). לצייר עיגול במרכז למבדה וגבחת בקוטר 4 מ&quot;מ ו0.5 מ&quot;מ הרחק קו האמצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בתרגיל לחתוך לאורך המעגל המסומן. בעדינות לפוצץ אבק עצם משם. אין לקדוח לחלוטין דרך העצם על מנת למנוע פגיעה במאטר הדורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים כדי להסיר את העצם ולחשוף את מאטר הדורה. </li></ol> 3. Impaction מערכת ההשפעה כוללת תיבת בקרה כדי להגדיר פרמטרים השפעה, מפעיל לבצע הכליאה, ומסגרת stereotactic כדי לאבטח את המעשהuator וראש עכבר להשפעה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טרום להגדיר את המהירות של מפעיל עד 3 מ &#39;/ שנייה לפני הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טרום להגדיר עומק עיוות שונה כדי לגרום לחומרות פגיעה שונות. מעמקי עיוות של 0.0-.2 מ&quot;מ, 0.5-1.0 מ&quot;מ, ו1.2-2.0 מ&quot;מ יביאו TBIs קל, בינוני, וחמור, בהתאמה. פרוטוקול זה הסביר איך להגיע לפגיעה מוחית חמורה בינוני עם עומק עיוות של 1 מ&quot;מ באמצעות מהירות של 3 מ &#39;/ שנייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף את מפעיל לבעל במסגרת stereotactic ולהשתמש micromanipulators שיזיז אותו כדי לאבטח את הקצה העגול, שטוח של מפעיל (3 מ&quot;מ קוטר) במרכזו של אזור הגולגולת הפתוח. ואז להתאים את הקצה במקביל זווית אל פני השטח של אתר השפעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקים את נקודת האפס על ידי הזזת את מפעיל במודל המשתרע עד הקצה נוגע במשטח של אתר ההשפעה. ואז להגדיר את ערוץ Z בלוח בקרת stereotactic לאפס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחזור בו קצה impactorתוך כדי התנועה בו זמנית מפעיל למטה 1 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על כפתור ההשפעה להכות אתר פציעה ולהשיג עומק עיוות של 1 מ&quot;מ. </li></ol> 4. הפגיעה סגירת אתר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש אפליקטורים כותנה שקצהו כדי להסיר כל השפעת דם הבא, אבל אל תיגעו באזור הפציעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את העכבר על משטח חם כדי לשמור על טמפרטורת גוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שדימום הפסק, תפר את הפצע סגור. שים את בעלי החיים בחזרה לכלוב הנקי ולאפשר לו להתאושש מניתוח הלילה על הכרית החמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל עצירות 0.05-.10 מ&quot;ג / קילוגרם SQ כל שעות 8-12 במשך 2 ימים לאחר ניתוח. </li></ol>

<ol><li>Menon, D. K., Schwab, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Position+statement%3A+definition+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Phys+Med+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Position statement: definition of traumatic brain injury.</a> Arch Phys Med Rehabil. 91 (11), 1637-1640 (2010).</li>
<li>Lighthall, J. W., Dixon, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Experimental models of brain injury.</a> J Neurotrauma. 6 (2), 83-97 (1989).</li>
<li>Dixon, C. E., Clfton, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+controlled+cortical+impact+model+of+traumatic+brain+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat.</a> J Neurosci Methods. 39 (3), 253-262 (1991).</li>
<li>Scheff, S. W., Baldwin, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morris+water+maze+deficits+in+rats+following+traumatic+brain+injury%3A+lateral+controlled+cortical+impact%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Morris water maze deficits in rats following traumatic brain injury: lateral controlled cortical impact.</a> J Neurotrauma. 14 (9), 615-627 (1997).</li>
<li>Smith, D. H., Soares, H. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+parasagittal+controlled+cortical+impact+in+the+mouse%3A+cognitive+and+histopathologic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A model of parasagittal controlled cortical impact in the mouse: cognitive and histopathologic effects.</a> J Neurotrauma. 12 (2), 169-178 (1995).</li>
<li>Hannay, H. J., Feldman, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+a+controlled+cortical+impact+model+of+head+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Validation of a controlled cortical impact model of head injury in mice.</a> J Neurotrauma. 16 (11), 1103-1114 (1999).</li>
<li>Natale, J. E., Ahmed, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+profile+changes+are+commonly+modulated+across+models+and+species+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Gene expression profile changes are commonly modulated across models and species after traumatic brain injury.</a> J Neurotrauma. 20 (10), 907-927 (2003).</li>
<li>Anderson, R. W., Brown, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+mechanics+and+axonal+injury+in+a+sheep+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Impact mechanics and axonal injury in a sheep model.</a> J Neurotrauma. 20 (10), 961-974 (2003).</li>
<li>Lighthall, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+cortical+impact%3A+a+new+experimental+brain+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Controlled cortical impact: a new experimental brain injury model.</a> J Neurotrauma. 5 (1), 1-15 (1988).</li>
<li>Chen, S., Pickard, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+cellular+pathology+after+controlled+cortical+impact+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Time course of cellular pathology after controlled cortical impact injury.</a> Exp Neurol. 182 (1), 87-102 (2003).</li>
<li>Long, J. B., Bentley, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blast+overpressure+in+rats%3A+recreating+a+battlefield+injury+in+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Blast overpressure in rats: recreating a battlefield injury in the laboratory.</a> J Neurotrauma. 26 (6), 827-840 (2009).</li>
<li>Clark, R. S., Schiding, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+accumulation+after+traumatic+brain+injury+in+rats%3A+comparison+of+weight+drop+and+controlled+cortical+impact+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Neutrophil accumulation after traumatic brain injury in rats: comparison of weight drop and controlled cortical impact models.</a> J Neurotrauma. 11 (5), 499-506 (1994).</li>
<li>Werner, C., Engelhard, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of traumatic brain injury.</a> Br J Anaesth. 99 (1), 4-9 (2007).</li>
<li>Colicos, M. A., Dixon, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed%2C+selective+neuronal+death+following+experimental+cortical+impact+injury+in+rats%3A+possible+role+in+memory+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Delayed, selective neuronal death following experimental cortical impact injury in rats: possible role in memory deficits.</a> Brain Res. 739 (1-2), 111-119 (1996).</li>
<li>Raghavendra Rao, V. L., Dogan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury+leads+to+increased+expression+of+peripheral-type+benzodiazepine+receptors%2C+neuronal+death%2C+and+activation+of+astrocytes+and+microglia+in+rat+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury leads to increased expression of peripheral-type benzodiazepine receptors, neuronal death, and activation of astrocytes and microglia in rat thalamus.</a> Exp Neurol. 161 (1), 102-114 (2000).</li>
<li>Gao, X., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+traumatic+brain+injury+promotes+neural+precursor+proliferation+without+increasing+neurogenesis+in+the+adult+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Moderate traumatic brain injury promotes neural precursor proliferation without increasing neurogenesis in the adult hippocampus.</a> Exp Neurol. 239, 38-48 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

השלבים הקריטיים ביותר ליצירת ההצלחה TBIs העקבי באמצעות מערכת השפעת המגנט אלקטרונית כדי לגרום CCI הם: 1) יציבות קיבוע ראש העכבר במסגרת stereotactic; 2) שהניבו באותו הגודל של חלון עצם בין עכברים והסרת העצם מבלי לפגוע הדורה מתחתיו במהלך craniectomy; 3) בצורה נכונה מיקום קצה ההשפעה במרכז השטח הפתוח והקמת נקודת האפס לפני להשפיע. ראש עכבר חייב להיות קבוע במסגרת stereotactic חזקה מאוד לפני הפגיעה. Loose קיבעון יפיק וריא...

פגיעה מוחית טראומטית (TBI) מוגדרת כשינוי בתפקוד המוח, או ראיות אחרות של פתולוגיה במוח, שנגרמו על ידי כוח חיצוני 1. TBIs להישאר בעיה בריאותית חמורה ברחבי העולם, במיוחד בארצות הברית. על פי המרכז לבקרת מחלות ומניעתן, לפחות 1.7 מיליון TBIs מתרחש מדי שנה בארצות הברית וכתוצאה מכך 30.5% מכל מקרי המוות הקשורים לפציעה. ב2000, העלויות רפואיות הישירות ועלויות עקיפות של TBIs הסתכמו משוער 76500000000 $ בארצות הברית לבדה. למרות התקדמות טכנולוגית וטיפולית בעשרות שנים שקדמו שיפרה את האיכות ואורך חיים של אלה הסובלים מTBIs, אין תרופות יעילות או טיפולים מונעים קיימות כיום. בשל המורכבות וההשפעות רחבות היקף של TBIs, כולל נגעי רקמות, מוות של תאים, וניוון האקסון, אין שתי פציעות הן זהות; וכך, אין מודל TBI הנוכחי לבעלי חיים במדויק מתרבהכל ההיבטים של TBI ראו כמו אצל בני אדם. עם זאת, מודלים של בעלי החיים שמספקים את היכולת לייצר פציעות כמעט זהות דרושה כדי לחקור את ההשפעות שונות של TBI בתקווה להבין עוד יותר את הביטויים הקליניים של TBIs. המודל המבוקר השפעת קליפת המוח (CCI) משתמש במערכת השפעה, כדי לספק השפעה פיזית לדורה חשופה של בעלי חיים. זה גורם TBIs החל מתון עד חמור דומה לאלה שחוו על ידי בני אדם. פגיעה זו התאפיינה ראשונה בחמוס 2 ומאוחר יותר הותאמה לשימוש בעכבר 3,4, העכבר 5-7, וכבשים 8. מאז האפיון הראשון, האתר של פציעה כבר הניח את שני מעל 2,9 קו האמצע ורוחב הקליפה 10. CCI מספק שיטה קלה ומדויקת של חקירת תופעות וטיפולים פוטנציאליים לTBIs. בנוסף למודל CCI, כלי הקשה נוזלים וירידה במשקל דגמים הם שיתוףmmonly משמש לייצור TBIs. עם זאת, מודלים אלו מגבלות הווה, כוללים פחות שליטה על פרמטרים פציעה, הפקת שינויי histopathalogical לא ראו בTBIs האנושי, ושכיחות גבוהה יותר של מוות בתאונה בעכברים 3,5,10. מודל גל ההדף משמש גם כדי לייצר TBIs. למרות שמודל גל ההדף לא לשחזר את שינויי histopathalogical ראו בעקבות השפעה מכאנית, מודל זה אינו מדויק לייצר TBIs חווה במיוחד על ידי אנשי צבא 11. מודל השפעת קליפת המוח המבוקר הוא קל לשלוט בשל השליטה המדויקת על פרמטרים עיוות כגון זמן, מהירות, ואת עומק של השפעה 5. דיוק כזה עושה משכפלים את הפציעות כמעט זהות על פני קבוצה שלמה של בעלי חיים אפשריים יותר. והכי חשוב, CCI מתרבה TBIs עם תכונות ראו בTBIs אדם 12. עם זאת, אין מודל חיה יחיד שהוא לגמרי מוצלח בלשחזר את הספקטרום של צ&#39;אן פתולוגי המלאGES נצפה לאחר TBI. מחקר נוסף הוא הכרחי כדי לחשוף באופן מלא את השינויים אקוטיים וכרוניים המתרחשים לאחר TBI. שני סוגים של פציעות להתרחש בעקבות TBI: פציעות ראשוניות ומשנית. הפגיעה העיקרית מתרחשת ברגע של השפעה ואינה רגיש לטיפולים רפואיים; עם זאת, הפציעות משניות שנמשכות לאחר הפגיעה הראשונית כפופות לטיפולים 13. מודל השפעת קליפת המוח המבוקר מייצר את הפגיעה העיקרית, ובכך מאפשר לחוקרים כדי לחקור את ההשפעות של TBI וטיפולי פוטנציאל להשפעות פוטנציאליים ארוך טווח של פציעות משני. תחומי מחקר פוטנציאלי באמצעות מודל CCI כוללים מוות עצבי, בצקת מוחית, נוירוגנזה, אפקטים וכלי דם, שינויי histopathalogical, וגירעונות זיכרון ועוד 3,13-16.

<table><tbody><tr><td>פובידון-יוד 7.5%</td> <td>מוצר Purdue L.P.</td><td></td><td>קרצוף כירורגי</td></tr><tr><td>אפליקטורים עם קצה כותנה</td><td>הנרי שיין</td><td>100-6015</td><td>הסר דם ופסולת</td></tr><tr><td>מספריים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>14084-08</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>Forcept</td><td>Fine Science Tools</td><td>11293-00</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>Hemostat</td><td>Fine Science Tools</td><td>13021-12</td><td>ניתוח</td></tr><tr><td>נטענת נטענת מיקרו מקדחה</td><td>אלחוטית</td><td>58610</td><td>שלב עם קוצים ליצירת חלון העצם</td></tr><tr><td>קוצים למיקרו מקדחה</td> כלי <td>מדע עדינים</td><td>19007-05</td><td></td></tr><tr><td>תפר מונופילמנט</td><td>Ethicon</td><td>G697</td><td>תפר</td></tr><tr><td>טרט-אמיל אלכוהול</td><td>סיגמא</td><td>152463-250 מ"ל</td><td>ייצור 2.5% אברטין</td>2,2,2-טריברומו-אתנול</tr><tr><td></td><td>סיגמא</td><td>T48402-25G</td><td>ייצור 2.5% אברטין</td></tr></tbody></table>

השפעת דגם קליפת המוח מבוקר לפגיעה מוחית טראומטית

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

בכל שנה יותר ממיליון אמריקאים סובלים מפגיעה מוחית טראומטית (TBI). בשילוב עם השכיחות של TBI ברחבי העולם, ההשפעות הפיזיות, הרגשיות, החברתיות והכלכליות הן מדהימות. לכן, יש צורך במחקר נוסף על ההשפעות של TBI וטיפולים יעילים. מודל ההשפעה המבוקרת בקליפת המוח (CCI) גורם לפגיעות מוח טראומטיות הנעות בין קלות לחמורות. שיטה זו משתמשת בפגיעה קשיחה כדי להעביר אנרגיה מכנית לדורה שלמה שנחשפה לאחר כריתת קרניקטומיה. ההשפעה נעשית תחת פרמטרים מדויקים במהירות מוגדרת כדי להשיג עומק דפורמציה שנקבע מראש. אף על פי שקיימים מודלים אחרים של TBI, כמו למשל ירידה במשקל וכלי הקשה נוזליים, CCI מדויק יותר, קל יותר לשליטה, והכי חשוב, מייצר פגיעות מוח טראומטיות דומות לאלה שנראות בבני אדם. אולם אף מודל TBI אינו מסוגל כיום לשחזר שינויים פתולוגיים זהים לאלה שנצפו במטופלים אנושיים. מודל CCI מאפשר לחקור את ההשפעות לטווח הקצר והארוך של TBI, כמו למשל מוות עצבי, ליקויי זיכרון ובצקת מוחית, כמו גם טיפולים טיפוליים פוטנציאליים ל-TBI.

מודל השפעת קליפת המוח המבוקר מייצר TBIs הנע בחומרה בין מתון עד חמור. לאחר השפעת כמות נפיחות גולגולת, דימום והעיוות גולגולתי באתר ההשפעה תגלה את חומרת פגיעה כתוצאה מפרמטרי המהירות ועומק עיוות. TBIs קל לגרום לנפיחות גולגולת באתר ההשפעה והדימום קל בשל הפרת הדורה המוגבלת. TBI מתון מפגין נפיחות גולגולת ודימום מוגבר עקב הפרת דורה על impaction (איור 1). ההבדל בין TBI בינוני וקשה עלול להיות קשה להבחין עד דמיינו על רקמות קבועות באמצעות מיקרוסקופ (איור 2); ...

פגיעות מוח טראומטיות (TBI) נשארות בעיה בריאותית חמורה. באמצעות מודל ניתוח פגיעה מבוקרת בקליפת המוח, ניתן לבצע מחקר על ההשפעות של TBI ושיטות טיפול אפשריות.

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לייצר פגיעות מוח טראומטיות באמצעות מודל ההשפעה המבוקרת של קליפת המוח. זה מושג על ידי הרדמה ראשונה והכנת עכבר לניתוח. השלב השני של ההליך הוא ביצוע כריתת קרניקטומיה C.השלב השלישי הוא הגדרת מערכת ההשפעה עם הפרמטרים הרצויים. השלב האחרון הוא להשפיע על המוח החשוף. בסופו של דבר, התוצאות יכולות להראות את חלל הפגיעה בקליפת המוח באמצעות הדמיה של המוח המנותח ואימונוהיסטוכימיה.בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו מכיוון שהם מתקשים ליצור פגיעות מוח עקביות. מי שידגים את ההליך יהיה ד"ר שאנג גאו, עמית מחקר במעבדה שלנו. לאחר ההרדמה, עכבר מגלח את ראשו בין האוזניים, מנקה את העור החשוף עם קרצוף לסירוגין של 10% יוד ו-70% אתנול.לאחר מכן, הקפידו לשמן את העיניים כדי שלא יתייבשו. לאחר מכן תקן את העכבר במסגרת הסטריאוטקטית, תוך שימוש בסרגלי האוזניים ובצלחת הנשיכה. הראש צריך להיות יציב מאוד.התחל את כריתת הקרניקטומיה עם חתך אורכי באמצע הראש בעזרת מספריים. לאחר מכן השתמש בהמוסטט כדי להחזיק את העור לצד בעזרת אפליקטור עם קצה כותנה מגב, נקה וחשוף את עצם הגולגולת. הניחו לו להתייבש דקה לפני שתמשיכו.לאחר הייבוש, השתמש במלקחיים כדי להפעיל לחץ על הגולגולת. וודאו שהתכשיר נשאר ללא תנועה. זהה את ציוני הדרך של למבדה וברג מה.ואז במרכזם, צייר עיגול בקוטר ארבעה מילימטר שנמצא חצי מילימטר מקו האמצע. לאחר מכן קדחו לאורך העיגול המסומן כדי להקל על שבירת העצם, אך אל תחדרו לדורה מאטר. הסר את האבק לפי הצורך.לאחר מכן השתמש במלקחיים כדי לשבור את מעגל העצם, ולחשוף את הדורה מאטר. כריתת קרניקטומיה C היא השלב הקריטי ביותר. הפקת פרמטרים עקביים של חלון העצם תאפשר חומרת פציעה עקבית.ודא שנעשה שימוש טוב בגודל, במהירות ובכוח המקדחה המתאימים. קידוח מערכת ההשפעה משתמשת במפעיל כדי לבצע את הפגיעה בגולגולת ויש לה כמה פרמטרים שיש להגדיר. הגדר את מהירות המפעיל לשלושה מטרים לשנייה.לאחר מכן, אבטח את המפעיל למסגרת הסטריאוטקטית. באמצעות המניפולטורים המיקרו מקם את המפעיל ברוחב שלושה מילימטרים לאזור הגולגולת הפתוח. לאחר מכן כוונן את קצה המפעיל כך שיהיה מקביל למשטח הפגיעה.כדי להגדיר את נקודת האפס, הארך את המפעיל והורד אותו עד שהקצה פשוט נוגע במיקום הפגיעה. הגדר את ערוץ Z המתאים במסגרת לאפס. כעת משוך את הקצה במקרה זה מילימטר אחד.לאחר מכן הגדר את עומק העיוות עבור הפגיעה המוחית הטראומטית המתאימה, שתזיז את המפעיל. לאחר מכן לחץ על כפתור הפגיעה כדי לבצע את הפציעה לאחר הפגיעה. נקו את כל הדם בעזרת אפליקטור עם קצה כותנה, אך אל תיגעו בפציעה.העבר את העכבר למשטח חם ועקוב אחר הפציעה כאשר הדימום פסק, תפר את הפצע ולאחר מכן החזר את העכבר בחזרה לכלוב נקי על כרית חמה ואפשר לו להתאושש שם למשך הלילה. לאחר הפגיעה, כמות הנפיחות, הדימום ועיוות הגולגולת חושפת את חומרת הפציעה האמיתית. פריצה מוגבלת עד מלאה של הדורה תעשה הבדל גדול בכמות הדימום ותגרום ל-TBI קלה עד בינונית.קיבוע הרקמה והתבוננות בה במיקרוסקופיה מבחין בקלות בין TBI בינונית וחמורה. הנה nis. צביעת L משמשת להשוואת ביקורת לעכבר שקיבל חלל TBIA בינוני שמשתרע עמוק לתוך קליפת המוח.ניתן להשתמש במודל זה כדי לחקור השמצות כאלה, כמו גם מוות עצבי ושינויים היסטופתולוגיים אחרים הנגרמים על ידי פגיעות מוחיות לאחר שליטה, ניתן להשלים טכניקה זו תוך 15 דקות אם היא מבוצעת כראוי.

controlled-cortical-impact-model-for-traumatic-brain-injury

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פגיעה מוחית טראומטית (TBI) במודל עכבר. עכבר מורדם עם גולגולת חשופה נלקח כדי ליצור פתח בגולגולת, ולאחר מכן נגרמת פגיעה מבוקרת בקליפת המוח באמצעות מכשיר פגיעה. הפגיעה פוגעת ברקמת המוח וגורמת לפגיעה בתפקוד הקוגניטיבי ובקואורדינציה המוטורית.

יצירת מודל עכברי של פגיעה מוחית טראומטית באמצעות מכשיר אימפקטור

זעזוע מוח מציג את הסוג הנפוץ ביותר של פגיעה מוחית טראומטית. לכן, מודל של בעלי חיים עם זעזוע מוח חוזר, המשכפל את המאפיינים החשובים של פציעה במטופלים, עשוי לספק אמצעי לחקר זעזוע מוח בצורה קפדנית, מבוקרת ויעילה.

מודל פגיע ראש החוזרים מזעזע של עכברים

פרוטוקול זה מדגים מתודולוגיות עבור מודל העכבר של פגיעה במוח הגולגולת טראומה טראומטית השתלת הגוף האנושי המושרה pluripotent שפעה התאים הנגזר לתוך האתר פציעה. מבחנים התנהגותיים והיסטולוגיים של תוצאות מהליכים אלה מתוארים גם בקצרה.

מבוקרת מודל השפעה בקליפת המוח של פגיעה במוחו של העכבר עם השתלת הטיפולית של האדם המושרה Pluripotent תא גזע תאים הנגזרים

כאן אנו מתארים פרוטוקול עבור האינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית מורמין באמצעות ראש פתוח השפעה בקליפת המוח.

מודל מורנה של השפעה בקליפת המוח הנשלטת על אינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית

דימום אינטרפרנכימלי ודלקת עצבית המלווה בחבלה מוחית עלולים לגרום לפגיעה מוחית משנית חמורה. פרוטוקול זה מפרט מודל השפעה קליפתית מבוקרת עכבר (CCI) המאפשר לחוקרים לחקור דימום, קונטוזיה ותגובות חיסוניות פוסט-טראומטיות ולחקור טיפולים פוטנציאליים.

מודל השפעה קליפת המוח מבוקרת פרה-קלינית עבור דימום טראומטי, חבלה ודלקת עצבית

הפרוטוקול מתאר פגיעה מוחית טראומטית קלה במודל עכבר. בפרט, פרוטוקול שלב אחר שלב לגרימת פגיעת ראש סגורה קלה בקו האמצע ואפיון מודל בעלי החיים מוסבר במלואו.

מודל ראש סגור מבוקר אלקטרומגנטי של פגיעה מוחית טראומטית קלה בעכברים

כאן, הוא מדגים כיצד מודל של פגיעת ראש סגור ער יכול לשמש לבחינת ההשפעות של פגיעה מוחית טראומטית קלה חוזרת ונשנית (r-mTBI) על פלסטיות סינפטית בהיפוקמפוס. המודל משכפל תכונות חשובות של r-mTBI בחולים ומשמש בשילוב עם אלקטרופיזיולוגיה חוץ גופית .

הערכת שינויים בפלסטיות סינפטית באמצעות מודל פגיעת ראש סגורה ערה של פגיעה מוחית טראומטית קלה

פרוטוקול זה מציג מודל עכברי שונה של פגיעה מוחית טראומטית קלה חוזרת ונשנית (rmTBI) הנגרמת באמצעות שיטת פגיעת ראש סגור (CHI). הגישה כוללת חלון גולגולת דליל וכלי הקשה נוזליים כדי להפחית את הדלקת הנגרמת בדרך כלל על ידי חשיפה לקרומי המוח, יחד עם שיפור יכולת השחזור והדיוק במידול rmTBI במכרסמים.

מודל עכבר שונה של פגיעה מוחית טראומטית קלה חוזרת ונשנית המשלבת חלון גולגולת דליל וכלי הקשה נוזליים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להקמת מודל של בעלי חיים עם פגיעת ראש סגורה המשחזר את תוצאת הדימוי העצבי של פגיעה מוחית טראומטית קלה לא מסובכת עם מבנה המוח השמור בשלב החריף וניוון מוחי ארוך טווח. הדמיית תהודה מגנטית אורכית היא השיטה העיקרית המשמשת לראיות.

פיתוח מודל פגיעה מוחית טראומטית קלה לא מסובך ששונה בשיטת ירידה במשקל והוכח על ידי הדמיית תהודה מגנטית

מודל Murine לפגיעה ריאות הנגרמת ההנשמה הוא כלי חשוב ללמוד פציעה ריאות...

לחץ אוורור מבוקר כדי לגרום פגיעה ריאות חריפה על עכברים

למד את מודל פגיעת קליפת המוח המבוקרת לחקר פגיעות מוח טראומטיות בעכברים. השיטה מאפשרת יצירת פציעות מוחיות מבוקרות וניתוחן באמצעות הדמיה והיסטוכימיה אימונולוגית.

השפעת דגם קליפת המוח מבוקר לפגיעה מוחית טראומטית

גלה סרטונים נוספים