Name: נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 24 s
Description: למדו את שיטת ההתחדשות המושרה הקשר של התנהגות חיפוש אלכוהול מיזוג פבלובית בחולדות. מודל זה חוקר את השפעת רמזי הקשר על התמכרות ומסייע להבנת מנגנוני הישנות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי להתמכרות לאלכוהול ואלכוהוליזם (RO1 AA014925 הוענק לד"ר פטרישיה ה. ג'אנק מאוניברסיטת קליפורניה, סן פרנסיסקו, קליפורניה, ארה"ב), Fonds de recherche du Quebec – Santé (NC) ומועצת המחקר למדעי הטבע וההנדסה (NC, 387224-2010). הפרסום בגישה פתוחה של מאמר זה התאפשר הודות לחסות Med Associates Inc.

<ol><li>Field, M., Duka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cues+paired+with+a+low+dose+of+alcohol+acquire+conditioned+incentive+properties+in+social+drinkers%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Cues paired with a low dose of alcohol acquire conditioned incentive properties in social drinkers.</a> Psychopharmacology (Berl). 159, 325-334 (2002).</li>
<li>Litt, M. D., Cooney, N. L., Morse, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivity+to+alcohol-related+stimuli+in+the+laboratory+and+in+the+field%3A+predictors+of+craving+in+treated+alcoholics%29%5BTitle%5D)+AND+%22Addiction%22%5BJournal%5D)">Reactivity to alcohol-related stimuli in the laboratory and in the field: predictors of craving in treated alcoholics).</a> Addiction. 95, 889-900 (2000).</li>
<li>Pomerleau, O. F., Fertig, J., Baker, L., Cooney, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivity+to+alcohol+cues+in+alcoholics+and+non-alcoholics%3A+implications+for+a+stimulus+control+analysis+of+drinking%5BTitle%5D)+AND+%22Addict+Behav%22%5BJournal%5D)">Reactivity to alcohol cues in alcoholics and non-alcoholics: implications for a stimulus control analysis of drinking.</a> Addict Behav. 8, 1-10 (1983).</li>
<li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+findings+on+biological+factors+predicting+addiction+relapse+vulnerability%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Psychiatry+Rep%22%5BJournal%5D)">New findings on biological factors predicting addiction relapse vulnerability.</a> Curr Psychiatry Rep. 13, 398-405 (2011).</li>
<li>Conklin, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environments+as+cues+to+smoke%3A+implications+for+human+extinction-based+research+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Environments as cues to smoke: implications for human extinction-based research and treatment.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 14, 12-19 (2006).</li>
<li>Conklin, C. A., Robin, N., Perkins, K. A., Salkeld, R. P., McClernon, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximal+versus+distal+cues+to+smoke%3A+the+effects+of+environments+on+smokers%27+cue-reactivity%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Proximal versus distal cues to smoke: the effects of environments on smokers' cue-reactivity.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 16, 207-214 (2008).</li>
<li>Janak, P. H., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potent+effect+of+environmental+context+on+relapse+to+alcohol-seeking+after+extinction%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Addict+J%22%5BJournal%5D)">The potent effect of environmental context on relapse to alcohol-seeking after extinction.</a> Open Addict J. 3, 76-87 (2010).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Cone, J. J., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinstated+ethanol-seeking+in+rats+is+modulated+by+environmental+context+and+requires+the+nucleus+accumbens+core%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Reinstated ethanol-seeking in rats is modulated by environmental context and requires the nucleus accumbens core.</a> Eur J Neurosci. 28, 2288-2298 (2008).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Context-induced+relapse+of+conditioned+behavioral+responding+to+ethanol+cues+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Context-induced relapse of conditioned behavioral responding to ethanol cues in rats.</a> Biol Psychiatry. 64, 203-210 (2008).</li>
<li>Crombag, H. S., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renewal+of+drug+seeking+by+contextual+cues+after+prolonged+extinction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Renewal of drug seeking by contextual cues after prolonged extinction in rats.</a> Behav Neurosci. 116, 169-173 (2002).</li>
<li>Fuchs, R. A., Eaddy, J. L., Su, Z. I., Bell, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+of+the+basolateral+amygdala+with+the+dorsal+hippocampus+and+dorsomedial+prefrontal+cortex+regulate+drug+context-induced+reinstatement+of+cocaine-seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Interactions of the basolateral amygdala with the dorsal hippocampus and dorsomedial prefrontal cortex regulate drug context-induced reinstatement of cocaine-seeking in rats.</a> Eur J Neurosci. 26, 487-498 (2007).</li>
<li>Marchant, N. J., Hamlin, A. S., McNally, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+hypothalamus+is+required+for+context-induced+reinstatement+of+extinguished+reward+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lateral hypothalamus is required for context-induced reinstatement of extinguished reward seeking.</a> J Neurosci. 29, 1331-1342 (2009).</li>
<li>Zironi, I., Burattini, C., Aicardi, G., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Context+is+a+trigger+for+relapse+to+alcohol%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Context is a trigger for relapse to alcohol.</a> Behav Brain Res. 167, 150-155 (2006).</li>
<li>Sciascia, J. M., Mendoza, J., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blocking+dopamine+D1-like+receptors+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Blocking dopamine D1-like receptors attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 38, 418-427 (2014).</li>
<li>Chaudhri, N., Woods, C. A., Sahuque, L. L., Gill, T. M., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unilateral+inactivation+of+the+basolateral+amygdala+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Unilateral inactivation of the basolateral amygdala attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking.</a> Eur J Neurosci. 38, 2751-2761 (2013).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Schairer, W. W., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separable+roles+of+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+context-+and+cue-induced+alcohol-seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Separable roles of the nucleus accumbens core and shell in context- and cue-induced alcohol-seeking.</a> Neuropsychopharmacology. 35, 783-791 (2010).</li>
<li>Sparks, L. M., Sciascia, J. M., Ayorech, Z., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vendor+differences+in+alcohol+consumption+and+the+contribution+of+dopamine+receptors+to+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+Long-Evans+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Vendor differences in alcohol consumption and the contribution of dopamine receptors to Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in Long-Evans rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 231, 753-764 (2014).</li>
<li>Simms, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+access+to+20%25+ethanol+induces+high+ethanol+consumption+in+Long-Evans+and+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Intermittent access to 20% ethanol induces high ethanol consumption in Long-Evans and Wistar rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 32, 1816-1823 (2008).</li>
<li>Wise, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+ethanol+intake+in+rats+following+exposure+to+ethanol+on+various+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacologia%22%5BJournal%5D)">Voluntary ethanol intake in rats following exposure to ethanol on various schedules.</a> Psychopharmacologia. 29, 203-210 (1973).</li>
<li>Bouton, M. E., Westbrook, R. F., Corcoran, K. A., Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contextual+and+temporal+modulation+of+extinction%3A+behavioral+and+biological+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Contextual and temporal modulation of extinction: behavioral and biological mechanisms.</a> Biol Psychiatry. 60, 352-360 (2006).</li>
<li>Pavlov, I. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPavlov%2C+I+%22Conditioned+reflexes%3A+an+investigation+of+the+physiological+activity+of+the+cerebral+cortex%22">Conditioned reflexes: an investigation of the physiological activity of the cerebral cortex</a>. , Oxford University Press. Oxford, England. (1927).</li>
<li>Gibbon, J., Baldock, M. D., Locurto, C., Gold, L., Terrace, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+and+intertrial+durations+in+autoshaping%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Psychol+Anim+Behav+Process%22%5BJournal%5D)">Trial and intertrial durations in autoshaping.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 3, 264-284 (1977).</li>
<li>Holland, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CS-US+interval+as+a+determinant+of+the+form+of+Pavlovian+appetitive+conditioned+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Psychol+Anim+Behav+Process%22%5BJournal%5D)">CS-US interval as a determinant of the form of Pavlovian appetitive conditioned responses.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 6, 155-174 (1980).</li>
<li>Stein, L., Sidman, M., Brady, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Some+effects+of+two+temporal+variables+on+conditioned+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Anal+Behav%22%5BJournal%5D)">Some effects of two temporal variables on conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 1, 153-162 (1958).</li>
<li>Coleman, D. A., Hemmes, N. S., Brown, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+durations+of+conditioned+stimulus+and+intertrial+interval+in+conditioned+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Anal+Behav%22%5BJournal%5D)">Relative durations of conditioned stimulus and intertrial interval in conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 46, 51-66 (1986).</li>
<li>Schwarz-Stevens, K. S., Cunningham, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pavlovian+conditioning+of+heart+rate+and+body+temperature+with+morphine%3A+effects+of+CS+duration%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pavlovian conditioning of heart rate and body temperature with morphine: effects of CS duration.</a> Behav Neurosci. 107, 1039-1048 (1993).</li>
<li>Palm, S., Roman, E., Nylander, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+voluntary+ethanol+consumption+in+Wistar+rats+from+five+different+suppliers%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Differences in voluntary ethanol consumption in Wistar rats from five different suppliers.</a> Alcohol. 45, 607-614 (2011).</li>
<li>Gauvin, D. V., Moore, K. R., Holloway, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+rat+strain+differences+in+ethanol+consumption+reflect+differences+in+ethanol+sensitivity+or+the+preparedness+to+learn%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Do rat strain differences in ethanol consumption reflect differences in ethanol sensitivity or the preparedness to learn.</a> Alcohol. 10, 37-43 (1993).</li>
<li>Goodwin, F. L., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+taste+thresholds+for+ethanol%2C+saccharin%2C+and+quinine+solutions+in+three+strains+of+rats+nonselected+for+ethanol%3A+a+comparative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Relative taste thresholds for ethanol, saccharin, and quinine solutions in three strains of rats nonselected for ethanol: a comparative study.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 8, 216-224 (2000).</li>
<li>Goodwin, F. L., Bergeron, N., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+the+consumption+of+ethanol+and+flavored+solutions+in+three+strains+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Differences in the consumption of ethanol and flavored solutions in three strains of rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 65, 357-362 (2000).</li>
<li>Wilson, A. W., Neill, J. C., Costall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+differences+in+ethanol+preference+and+reinforced+behaviour%3A+a+comparison+of+two-bottle+choice+and+operant+self-administration+paradigms%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Strain differences in ethanol preference and reinforced behaviour: a comparison of two-bottle choice and operant self-administration paradigms.</a> Behav Pharmacol. 8, 37-46 (1997).</li>
<li>Yap, C. S., Richardson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extinction+in+the+developing+rat%3A+an+examination+of+renewal+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Extinction in the developing rat: an examination of renewal effects.</a> Dev Psychobiol. 49, 565-575 (2007).</li>
<li>Carew, M. B., Rudy, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+functions+of+context+during+conditioning%3A+a+developmental+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Multiple functions of context during conditioning: a developmental analysis.</a> Dev Psychobiol. 24, 191-209 (1991).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethanol+seeking+triggered+by+environmental+context+is+attenuated+by+blocking+dopamine+D1+receptors+in+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Ethanol seeking triggered by environmental context is attenuated by blocking dopamine D1 receptors in the nucleus accumbens core and shell in rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 207, 303-314 (2009).</li>
</ol>

כל הליכי הניסוי אושרו על ידי ועדת האתיקה למחקר בבעלי חיים באוניברסיטת קונקורדיה והנם בהתאם להנחיות מהמועצה הקנדית על טיפול בבעלי חיים. פרסום הגישה הפתוחה של מאמר זה התאפשר בזכות חסות של מד Associates בע&quot;מ

תוצאות מהליך זה עולים כי גירויים סביבתיים בדידים שאופן שיגרתי מלווים משלוח אלכוהול יכולים לרכוש את היכולת לנהוג התנהגות שוחרת אלכוהול. הם גם מראים כי גירויים קונטקסטואליים הקשורים לזמינותו או היעדריו של אלכוהול לפני יכולים להדריך התנו תגובות התנהגותיות לרמזים אלכוהול חזוי בדידים. שלבים קריטיים בפרוטוקול הקשרים במשימה הנוכחית לשלב גירויים שהם חיצוניים לחולדה. עם זאת, מדינת interoceptive של העכברוש בבדיקה יכולה גם להוות &quot;הקשר&quot; שיכול להשפיע על חידוש 20. לכן חשוב להרגיל חולדות לכל נהלים שעלולים להתרחש לפני בדיקת ההתחדשות ולשנות את מצב interoceptive, כמו microinfusions תוך גולגולתי או זריקות מערכתיות. יתר על כן, התרגלות לmicroinfusions או זריקות מערכתיות צריכה להתנהל לפני שתי ההכחדה וPDT שלessions, כדי למנוע נהלים כאלה מלהפוך קשורים בשלב מסוים אחד של הניסוי. פרמטרים זמניים, כגון משך CS, מרווח CS-US, ומרווח intertrial (ITI), כבר מזמן ידועים להשפיע מותנים להגיב במגוון של פרדיגמות אוויר 21-26. באופן דומה, פרמטרים של זמן עשויים להשפיע על ההתבוננות בהשפעת החידוש בהליך שלנו. כל קבוצה של פרמטרים אחרים מאלה שצוינו בפרוטוקול חייבת להיות מאומתת במחקרי טייס ניסוי לפני שתמשיך להעסיק אותם בחקירות גדולות יותר. שינויים ופתרון בעיות המחקר קודם שנעשה מצא כי הכמות של אתנול שחולדות לצרוך בכלוב בבית יכולה להשתנות כפונקציה של הספק שממנו החולדות נרכשות 17,27. ספק הוא אפוא שיקול חשוב עבור שלב זה של המחקר. בדומה לכך, הבחירה של מתח חולדה צריכה להיות שותףnsidered בזהירות, שכן יש דיווחים רבים על הבדלי מתח בצריכת אתנול 28-31. העבודה קודמת בפרדיגמה אוויר מרתיעה הראתה כי הגיל ההתפתחותי של חולדות משפיע על התצפית של התחדשות של תגובת פחד מותנית הפבלובית 32. חוסר השפעת התחדשות בחולדות צעירות מאוד (צעיר יותר מיום הלידה 20) כבר הציע להיות בשל קידוד לקוי של מידע קונטקסטואלי 33. הגיל ההתפתחותי של חולדות שישמשו בהליך הנוכחי ולכן צריך להילקח בחשבון. חידוש הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה מותנית נצפה כאשר 10% 9,16, 15% 14, או 20% 15 פתרונות אתנול שמשו במהלך גישת אתנול כלוב בבית ושלבי PDT של הניסוי. חוקרים יכולים להשתמש בכל ריכוזים של אתנול אלה לצורך הקמת הליך זה בLaboratories. במהלך הרכישה של הכשרת אפליה הפבלובית זה חשוב לבדוק יציאות נוזל לאחר כל פגישה, כדי להבטיח שכל אתנול שנמסר כבר נצרך. השארת חולדות בתאי האוויר ל10 נוספות - 15 דקות לאחר כל פגישה ניתן לעשות זאת בשלב מוקדם בPDT לעודד צריכה של כל אתנול שלא צרך במהלך הפגישה. מספר החולדות עוזבים אתנול unconsumed בנמלים צריך לקטון PDT מתקדם. אם עד סוף חולדות PDT הם או (א) לא לצרוך את כל אתנול ו / או (ב) אינו מגיב ל+ CS אז צריכים להיות ירד נושאים אלה מהמחקר. רוב החולדות באופן מהימן להגיב יותר ל+ CS מאשר CS-. עם זאת, כמה חולדות עשויות להגיב ברמות גבוהות לשניהם הרמזים, ובכך לא הראו סימנים ברורות של אפליה. חולדות שמראות גבוהות מגיבות לשניהם + CS וCS- במהלך PDT לא ירד מהמחקר. מניסיוננו, נושאים אלה להראות אפליה מדהימהבמהלך הפגישה הראשונה הכחדה בהיעדר אתנול, המצביעה על כך הרמות גבוהות שלהם להגיב לCS- במהלך PDT מונעות על ידי הנוכחות של אתנול בנמל הנוזל. נושאים אלה נוטים גם להראות השפעות חידוש חזקות. מגבלות של ההליך בגלל מבחן החידוש מתבצע בהעדר אתנול, ערכי יציאה מותנים שהושרו על ידי + CS להפחית בהדרגה על פני פגישת המבחן. לפיכך, הסכום הכולל של התנהגות שנוצר במבחן, שכנגדה ניתן להעריך שינויים מושרה בניסוי, הוא נמוך למדי. כי במשימה זו מגיבה נוטה להיות גבוהה יותר בתחילת לעומת סוף פגישת הבדיקה, חשוב לבחון את ההשפעות של מניפולציות ניסיוני על מותנה להגיב על בסיס ניסוי על ידי משפט. כניסות לקיבול הנוזלים לספק המידה תלויה העיקרית במשימה זו. עם זאת, כניסת יציאה שגויה עלולה להיות registered אם בעל חיים הוא מספיק קרוב לקיבול הנוזלים כדי לשבור את קרן אינפרא אדום על פני פתיחת נמל הנוזל עם השפם שלו. בעוד תגובות נדירות, שגויות הן ברורות כמו עלייה דרמטית בנמל כולל ערכים ביחס לנושא של ההתנהגות במפגשים קודמים. צילום וידאו בעלי החיים יקל על זיהוי של תגובות שגויות אפשריות, ולאפשר לניתוחים מדויקים יותר של ההתנהגויות הוצגו על ידי החולדות בכל אימון ובדיקה. משמעות של טכניקה ביחס לשיטות קיימות / אלטרנטיביות חידוש מושרה הקשר של סמים התנהגות מסוימות לקבלת מידה רבה למד באמצעות משימת אוויר אינסטרומנטלי שבו המשתנה התלוי העיקרי הוא תגובה אופרנטית, כגון מנוף לחץ 8,34 או האף לתקוע 12. בהליך הנוכחי, התגובה מחפש סמים היא &quot;גישה מותנית&quot; ליציאת הנוזלים שהושרה על ידי מצגות של+ CS. תגובה זו סבירה שנרכשה באמצעות למידה הפבלובית, המהווה את תהליך הלמידה שמתווך את היווצרותם של קשרים בין גירויים הסביבתיים וההשפעות תרופתי של תרופות של התעללות בבני אדם. יישומים עתידיים משימה זו יכולה להיות בשימוש בשילוב עם neuropharmacology, כימיה של מוח optogenetics וללמוד את המנגנונים העצביים המעורבים בחידוש מושרה הקשר של מיזוג הפבלובית שוחר אלכוהול התנהגות 16. בנוסף, מנגנונים התנהגותיים ועצביים המסדירים את הרכישה והכחדה של מיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה יכולים להיחקר. לבסוף, משימה זו יכולה לשמש כדי לחקור מניפולציות של הכחדה שעלולה למנוע התחדשות, כיוון חשוב למחקר translational נועד להקטין את ההשפעה של תרופה קשורה הקשרים סביבתיים בתגובתיות לרמזים חזוי תרופה לאחר טיפול בחשיפת האות בaddi האנושיCTS.

נותר מפוכח הוא אתגר משמעותי העומד בפני אנשים הסובלים מהפרעות שימוש באלכוהול. התנזרות היא זמן של פגיעות להשפעה התנהגותית, פסיכולוגית ופיזיולוגית של גירויים סביבתיים שאופן שיגרתי מלווים שימוש באלכוהול, אשר יכול, באמצעות אוויר הפבלובית, להיות קשור עם שהכרות 1,2. חשיפה לרמזים חזוי אלכוהול יכולה לעורר תגובה מותנית כמו כמיהה אלכוהול, אשר עשוי לקדם התנהגויות שוחרות אלכוהול המאפשרות 3,4 הישנות. הרצפים הסטריאוטיפיים של התנהגות שיובילו לצריכת אלכוהול יכולים לגרום לסוגים מסוימים של גירויים שחוו באופן מיידי באופן שיגרתי לפני ההשפעות התרופתית של צריכת אלכוהול. לדוגמא, למראה, ריח והטעם של אלכוהול הם מאפיינים חושיים של אלכוהול שאופן מהימן להקדים שיכרון. בנוסף לרמזים כאלה, המכונים פרוקסימה &#39;הבדידה&#39; או &#39;הרמזים &#39;l, הקשרים סביבתיים שבו תרופות משמשות באופן קבוע יכולה גם לעורר תשוקה 5,6. חשיפה למיקומים פיזיים שבו סמים בעבר בשימוש ולכן עשוי להיות גורם קריטי להישנות 7. מודלים של בעלי החיים פותחו כדי לחקור את המנגנונים העצביים המתווכים את ההשפעה של הקשרים הקשורים לסמים בסמי התנהגות מסוימות לקבלה 8-13. ההליך המתואר במסמך זה מאפשר לחקירה כמה הקשרים הקשורים לצריכת אלכוהול יכולים לווסת שוחר אלכוהול התנהגות שהושרה על ידי אות בדידה, אלכוהול חזויה הפבלובית. הכשרת אפליה הפבלובית מתנהלת בהקשר סביבתי ספציפי, שבו חולדות מאומנים התנהגותית להבחין בין שני גירויים שמיעתיים מותנים, + CS שהוא זיווג עם אלכוהול, וCS- שאינו. לאחר מכן מפגשי הכחדה מתבצעים בהקשר אחר, שבו מגיב לCS+ מפחית כתוצאה מאלכוהול נמנעת. בהמשך לכך, reexposure ל, הקשר אימון הפבלובית האלכוהול קשור מפעיל עלייה סלקטיבית בהתנהגות שוחרת אלכוהול שהושרו על ידי + CS, ללא שינוי בתגובה לCS-. תוצאה זו, שיש לנו לשכפל 9,14-16 באופן עקבי, מרחיבה ממצאים מהליכי האוויר סייעו שבהקשרי תרופה כבר נמצאו כדי לעורר את ההתחדשות של תגובות אופרנטית הקשורים למשלוח הסמים 10,13.

<table><tbody><tr><td>עגלת שירות כבדה</td><td>Rubbermaid</td> <td>#4520-88</td><td>משמשת להובלת חולדות בכלוב הביתי שלהן מחדר המושבה לחדר ההתנהגות או למתקנים אחרים</td></tr><tr><td>חולדות, חולדות לונג-אוונס</td><td>הרלן</td><td></td><td>שקלו 220-240 גרם עם הגעתם</td></tr><tr><td>סולם אוהאוס</td><td>פישר</td><td>#S402421</td><td>לשקילת חולדות; טרפו תחילה את תחתית מיכל הפלסטיק, ואז הכניסו את החולדה לתוכו כדי לשקול אותו</td></tr><tr><td>שבבי בטא, אספן</td><td>הרלן</td><td>#7090A</td><td>מצעים לכלוב ביתי</td></tr><tr><td>Nylabone</td><td>Bio-Serv</td><td>#K3580</td><td>העשרה הניתנת בכלוב הביתי</td></tr><tr><td>צ'או מכרסמים הניתן לחיטוי</td><td>Agribrands, Charles River</td><td>#5075</td><td>להאכלת חולדות</td></tr><tr><td>מכסה כלוב בר תיל</td><td>Ancare</td><td>#R20SS2B</td><td>בהתאמה אישית עם שני חריצים עבור &nbsp; בקבוקים</td></tr><tr><td>תחתית כלוב</td><td>Ancare</td><td>#R20PC</td><td>לשכן חולדות</td></tr><tr><td>פקקים</td><td>Ancare</td><td>#8.5</td><td>פקקי גומי לחסימת פתח בבקבוקי מים וצילינדרים מדורגים; הולך עם צינורות לגימת נקודות כדוריות&nbsp;</td></tr><tr><td>צינורות כדוריים, באורך 1.5 אינץ'</td><td>Ancare</td><td>#TD-99</td><td>מוכנסים לפקקים, מאפשרים לחולדות לשתות מבקבוקי מים וצילינדרים מדורגים</td></tr><tr><td>בקבוקי מים</td><td>Ancare</td><td>#FSPC8HT</td><td>קיבולת 473 מ"ל (16 אונקיות), צריך להיות חסום עם פקק</td></tr><tr><td>צילינדרים מדורגים, 100 מ"ל</td><td>פישר</td><td>#0300741</td><td>להכיל אתנול במהלך חשיפה לאלכוהול בכלוב הביתי; יש לחתוך את הקצה הפיה כדי לאפשר חסימה עם פקקים</td></tr><tr><td>סולם מטלר</td><td>טולדו</td><td>#MS6001S</td><td>לשקילת בקבוקי מים ובלוני אתנול</td></tr><tr><td>צינורות פוליאתילן, קוטר פנימי 1/32 אינץ', &nbsp; עובי דופן 1/32 אינץ', קוטר חיצוני 3/32 אינץ' פישר</td><td></td> <td>#14-169-1A</td><td>לחיבור מזרק אתנול 20 מ"ל ליציאת נוזל</td></tr><tr><td>מחט, 18 גרם, אורך 1.5 אינץ'</td><td>פישר</td><td>#B305199</td><td>כדי לחבר צינורות פוליאתילן למזרקי אתנול; צריך להגיש</td></tr><tr><td>מזרקים, 20 מ"ל, Luer-Lok פישר לא סטרילי</td><td></td><td>#1482316J</td><td>להכיל אתנול על משאבות הנוזל; צריך להיות מחובר לצינורות הפוליאתילן על ידי מזרקי מחט 18 גרם 1 1/2</td></tr><tr><td>, 60 מ"ל, Luer-Lok לא סטרילי</td><td>פישר</td><td>#14-820-11</td><td>כדי לשטוף צינורות פוליאתילן לאחר הפעלות PDT</td></tr><tr><td>משאבת מזרק במהירות אחת, 3.33 סל"ד</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-018MD</td><td>להחזיק מזרקי אתנול של 20 מ"ל ולספק</td></tr><tr><td>יציאת נוזל</td> אתנול <td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-254-CB</td><td>כדי לאפשר אספקת אתנול במהלך מפגשי PDT; מחובר למזרקי אתנול עם צינורות פוליאתילן</td></tr><tr><td>גלאי אינפרא אדום כניסה לנמל</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-215M</td><td>קבוע משני הצדדים של יציאת נוזלים; צריך 2 לכל יציאת נוזל</td></tr><tr><td>תאורת בית, 28 וולט, 100 mA</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-135M</td><td>מספקת תאורה כללית בתא מיזוג</td></tr><tr><td>מודול קליקר</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-225SM</td><td>גירוי שמיעתי לתא מיזוג</td></tr><tr><td>מחולל רעש לבן עם רמקול</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#PHM-100</td><td>גירוי שמיעתי לתא מיזוג</td></tr><tr><td>רצפת בר</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A-GF</td><td>כדי ללכת עם מעיל ספסל תא בדיקה מודולרי</td></tr><tr><td>, סופג</td><td>VWR</td><td>#89126-790</td><td>נייר סופג להכנסה למגש מתכת, צריך לחתוך כך שיתאים למגש המתכת</td></tr><tr><td>יריעת פוליקרבונט, עובי 1/8 אינץ', 12-5/8 אינץ' x 10 אינץ'</td> <td>ג'ונסטון פלסטיק</td> <td>#30102515</td><td>כדי ליצור תוספת רצפה שקופה חלקה המשמשת להקשר 1. צריך לחתוך לחתיכות 11.5 אינץ' x 12.25 אינץ'</td></tr><tr><td>יריעת אלומיניום מחוררת, עובי 0.063 אינץ', 48 אינץ' x 96 אינץ', 0.250 אינץ' חורים x 0.375 אינץ' מרכזי</td><td>אניקה פלדה</td><td></td><td>כדי ליצור תוספת רצפה מחוררת המשמשת להקשר 2. יש לחתוך לחתיכות 11.5 אינץ' x 12.25 אינץ'</td></tr><tr><td>קרטון שחור, עובי 0.053 אינץ', 28 אינץ' x 44 אינץ'</td> <td>עומר דסרס</td><td>#P1909</td><td>לבניית לוחות המכסים את התקרה, הדלת והקיר האחורי של תא המיזוג בהקשר 1. צריך לחתוך לגודל. כל תא זקוק לשלושה לוחות בגודל של כ-11.5 אינץ' x 13.25 אינץ'. ניתן לחבר את הלוחות לצד הצר יותר באמצעות סרט דביק.</td></tr><tr><td>סרט דביק בעל חוזק לכל מטרה, 1.88 אינץ' x 45 יארד.</td><td>סרט</td><td></td> ברווז <td>חומר דבק לחיבור לוחות הקרטון השחורים המשמשים לכיסוי הקיר האחורי, התקרה והדלת בהקשר 1.</td></tr><tr><td>תא בדיקה מודולרי</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A</td><td>תא מיזוג</td></tr><tr><td>תא הנחתת קול</td> Med <td>Associates Inc.</td><td>#ENV-200R3AM</td><td>מגיע עם מאוורר 28 וולט DC מותקן (#ENV-025F)</td></tr> <tr><td>צלחת פטרי</td><td>פישר</td><td>#08748B</td><td>תחתון בלבד, כדי להכיל את התמיסה המרוססת המספקת את גירוי הריח; צריך להיות מרוכז במגש המתכת בתאי מיזוג חבילת</td></tr><tr><td>ממשק PCI</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#DIG-700P2-R2</td><td>מחבר ארון ממשק שולחני למחשב; כולל כרטיס ממשק אחד, כרטיס פענוח אחד, כבל סרט אחד וכבל חשמל 1 28 וולט DC</td></tr><tr><td>ארון שולחן גדול וספק כוח</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SG-6510D</td><td>משמש להכיל את 12 הכרטיסים הכלולים ב-SmartCrtrl 8 כניסה, 16 חבילת פלט</td></tr><tr><td>SmartCtrl 8 כניסה, 16 חבילת פלט</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#DIG-716P2</td><td>משמש לחיבור ובקרה של המכשירים בתא המיזוג. החבילה כוללת את כל הכבלים, מודול הממשק ולוח החיבור.</td></tr><tr><td>תוכנת Med PC IV</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SOF-735</td><td>תוכנה להפעלת תוכניות. צריך להתקין במחשב.</td></tr><tr><td>צג LG, LCD 19 אינץ'</td><td>חנות מחשבים קונקורדיה</td><td>#W1942TQ-BF</td><td>צג מחשב; ללכת עם מחשב עם Med PC IV</td></tr><tr><td>HP Z200 Tower Workstation</td><td>חנות מחשבים קונקורדיה</td><td>#BZ788US#ABA</td><td>מחשב עליו מופעל Med PC IV</td></tr><tr><td>Benzaldehyde, &ge; 99%</td><td>Les produits chimiques OMEGA Chemical Company Inc.</td><td>#B37-50</td><td>לדלל במי ברז לריח הקשר שקדים</td></tr><tr><td>שמן לימון, בכבישה קרה, California</td><td>Sigma Aldrich</td><td>#W262528-1KG-K</td><td>לדלל במי ברז לריח הקשר לימון</td></tr><tr><td>אלכוהול אתילי, 95%</td> <td>אלכוהול</td><td></td> מסחרי <td>מדלל במי ברז לריכוז הרצוי</td></tr></tbody></table>

נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

הקשרים סביבתיים שבו תרופות של התעללות נצרכות יכולים לעורר תשוקה, תגובה ממוזג הפבלובית סובייקטיבית שיכול להקל על תרופת התנהגות מסוימת לקבלה וחזרה מהירה במשתמשים בסמים מתנזרים. פיתחנו הליך לחקור את התהליכים התנהגותיים ועצביים המתווכים את ההשפעה של הקשר על אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות. בעקבות הסתגלות לטעם והשפעות תרופתית של אתנול 15% בכלוב בבית, חולדות הארוכות אוונס גבריים לקבל הכשרה הפבלובית אפליה (PDT) בתאי אוויר. בכל מפגש (שני עד שישי) PDT יומי, 16 ניסויים כל אחד משני גירויים שמיעתיים 10 שניות שונות מותנים להתרחש. במהלך גירוי אחד, + CS, 0.2 מ&quot;ל של 15% אתנול מועבר ליציאת נוזלים לצריכה דרך הפה. הגירוי השני, CS-, לא יחד עם אתנול. מעבר הפעלות, כניסות לנמל הנוזלים במהלך עליית CS +, ואילו ערכים במהלך CS- יתייצבו ברמה נמוכה יותר, מצביעים על כך שprediעמותת ctive בין + CS ואתנול נרכשה. במהלך PDT כל תא מצויד בתצורה ספציפית של גירויים חזותיים קונטקסטואליים, חוש הריח ומישוש. בעקבות PDT, אימון הכחדה מתבצע באותו חדר שכעת מצויד בתצורה של גירויים קונטקסטואליים שונה. + CS וCS- מוצגים כמו קודם, אבל אתנול הוא נמנע, מה שגורם לירידה הדרגתית בערכי נמל ב+ CS. בבדיקה, חולדות ממוקמות בחזרה לתוך הקשר PDT ומוצגות עם + CS וCS- כמו קודם, אך ללא אתנול. מניפולציה זו מעוררת עלייה חזקה ובררנית במספר כניסות נמל שבוצעו במהלך האלכוהול חזוי CS +, ללא שינוי בלהגיב במהלך CS-. אפקט זה, המכונה התחדשות מושרה הקשר, ממחיש את היכולת רבת עוצמה של הקשרים הקשורים לצריכת אלכוהול כדי לעורר התנהגות שוחרת אלכוהול בתגובה לרמזים אלכוהול הפבלובית.

גישה לסירוגין אתנול בכלוב בבית: צריכת אתנול (ז / קילוגרם) ועליית העדפת אתנול על פני הפעלות של גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית, בדרך כלל להגיע לרמות יציבים בתוך 8 - 12 מפגשים (איור 1). בערכת הנתונים מוצגת באיור 1, צריכת אתנול יציבה בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של גישת אתנול כלוב בבית נעה 1.33-6.44 גר '/ קילוגרם לחולדות בודדות. שלב צריכת אתנול כלוב בבית של הניסוי ניתן לעצור פעם אחת גרם / צריכת קילוגרם יש התייצבה, וחולדות נשמרות ברמה יציבה זה של שתייה למספר המפגשים. כדי לנתח את הנתונים מהשלב הזה, לבצע ניתוח חוזר ונשנה-צעדים נפרדים של שונות (ANOVA) על פני הגורם בתוך-הנושא של מפגש לצריכת אתנול (ז / קילוגרם) והעדפת אתנול. סכמטי של הליך חידוש מושרה הקשר: כל שלב שלהליך ניסיוני (PDT, הכחדה, מבחן חידוש) מתואר באיור 2. ראה כותרת איור לפרטים נוספים. ניתוח מדדים ונתונים תגובה: בכל שלבי ההתנהגות מתוארים להלן, תגובות כניסת יציאה שנעשו במהלך + CS וCS- הם מנורמלים עם התייחסות מראש CS תגובות כניסת בסיס יציאה. כדי ליצור את אמצעי CS מנורמלים, להפחית את מספר ערכי יציאה שנעשו במהלך מרווח הבסיס טרום CS (שניות 10 מייד לפני תחילת CS) ממספר ערכי נמל שבוצעו במהלך המצגות של + CS וCS-. CS + המנורמל ואמצעי CS- מנורמלים לשמש כמדדים של התנהגות שהושרו באופן ספציפי על ידי מצגות CS, מוגבהות מעל רמות בסיס. לנהל חוזרים ונשנים-צעדים נפרדים ANOVA עם גורמי הנושא בתוך והנשנים של פגישה וסוג CS (CS + לעומת CS-) לPDT ושלבי הכחדה. להשוואות בין שלב (PDT, הכחדה, לחדשאל מבחן), נתוני שימוש בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של PDT והכחדה והמפגש של נתוני בדיקת חידוש אחד בחזרו-אמצעי ANOVA. לעקוב אחר השפעות משמעותיות עיקריות ואינטראקציות, מבחני t post hoc שימוש למדגמים בלתי תלויים או לזווג שמתוקנות להשוואות מרובות. קריטריון למשמעות מוגדר בα = 0.05. PDT: תגובות כניסת נמל לעליית CS + על פני מפגשי PDT, ואילו תגובות כניסת יציאה לCS- יישארו נמוכות ויציב, הכוללים. שים לב שתגובות כניסת היציאה לCS- עלול להגביר מעט כבר בפגישות הראשונות של אימון PDT; עם זאת, ערכי יציאה שנעשו בתגובה לCS- יתייצבו ברמה נמוכה בהרבה מאלה שנעשו בתגובה ל+ CS. אפליה מוצלחת היא שמעידה העלאה משמעותית מבחינה סטטיסטית בערכי יציאה במהלך CS + בהשוואה לCS- (איור 3). תוצאה זו מצביעה על כך שמיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה יש להיותen הוקם ל+ CS, אבל לא CS-. הכחדה: תגובות כניסת נמל ל+ CS לרדת בהדרגה על פני מפגשי הכחדה. תגובות כניסת נמל לCS- יישארו נמוכות ויציבה על פני מפגשי הכחדה. באופן אידיאלי, מופלה להגיב הוא בוטל על ידי סוף אימון הכחדה, כפי שמעידים על חוסר הבדל משמעותי סטטיסטי בין ערכי נמל ל+ CS וCS-. עם זאת, אין זה נדיר עבור מידה מסוימת של מופלה להגיב להישאר, אפילו בסוף אימון הכחדה. במקרה זה, חשוב לוודא שתגובות כניסת יציאה ל+ CS בסוף אימון הכחדה מבחינה סטטיסטי נמוכים מתגובות כניסת יציאה ל+ CS בתחילת ההכחדה, כמו גם בסוף PDT (איור 3) . דפוס זה של תוצאות מצביע על כך שהמיזוג הפבלובית אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלת כבה באופן משמעותי. מבחן חידוש מושרה הקשר: נמלתגובות כניסה לעליית CS + במבחן החידוש מושרה הקשר, ביחס לערכי נמל CS + נצפו בסוף אימון הכחדה. גידול זה הוא סלקטיבי ל+ CS, כערכי יציאה לCS- יישארו ללא שינוי. בנוסף, ערכי יציאה ל+ CS מבחינה סטטיסטי גבוהים בהשוואה לערכי יציאה לCS- במבחן החידוש מושרה הקשר (איור 4). אישור סטטיסטי של השוואות של ערכי CS + יציאה בין ההכחדה ובדיקה, כמו גם השוואות של CS + וערכי יציאת CS- בתוך מבחן, מצביע על התחדשות סלקטיבית של מיזוג הפבלובית התנהגות שוחרת אלכוהול הנגרמת על ידי הקשר האלכוהול קשור במבחן. <img alt="איור 1" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig1highres.jpg" width="400"> איור 1 הסלמה של צריכת אתנול והעדפה הנגרמת על ידי גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית. ממוצע &amp;177 #; SEM () צריכת אתנול (ז / קילוגרם) והעדפת אתנול (B) על פני 12 מפגשים של גישת אתנול לסירוגין בכלוב בבית. שני הצעדים להגדיל בדרך כלל על פני פגישות ולאחר מכן לייצב. צריכת אתנול יציבה בממוצע על פני שתי הפגישות האחרונות של גישת אתנול כלוב בבית נע 1.33-6.44 גר '/ קילוגרם לחולדות בודדות. נתונים אלה התקבלו באמצעות חולדות זכרים הארוך אוונס שתיית 15% (V / V) אתנול. <img alt="איור 2" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" width="400"> . איור 2 סכמטי של ההליך ניסיוני ההליך מורכב משלושה שלבים: הכשרת אפליה הפבלובית, הכחדה, ומבחן חידוש (PDT) הנגרם על ידי הקשר. במהלך כל מפגש PDT, חולדות לקבל 16 ניסויים של גירוי אחד שמיעתי מותנה (CS +) שמסמן את המשלוח של אתנול ו16 ניסויים שלגירוי שני שמיעתי (CS-) שאינו קשור למשלוח אתנול. מפגשי PDT יתקיימו בהקשר, מורכבים מתצורה ספציפית של חזותי, חוש הריח, וגירויים מישוש. במהלך פגישות הכחדה, שמתנהלות בהקשר B, מורכב מקבוצה של גירויים חזותיים, חוש הריח, ומישוש שונה, + CS וCS- מוצגים אבל אתנול הוא נמנע. למבחן חידוש מושרה הקשר, חולדות חזרו להקשר, ו+ CS וCS- מוצגים ללא אתנול. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig3highres.jpg" width="400"> איור 3 רכישה והכחדה של m להגיב לאתנול מיזוג הפבלובית. ממוצע מופלים ± SEM ערכי נמל מנורמלade במהלך + CS וCS- פני PDT (מפגשי 1 - 18) בהקשר והכחדה (מפגשי 19 - 26) בB. הקשר נתונים אלה התקבלו באמצעות חולדות ארוך אוונס גבריים, התאמנו עם 10% (v / v) אתנול כגירוי הבלתי מותנה (US) שהוצג בשיתוף עם + CS במהלך PDT. * P &lt;0.05, CS + לעומת CS-. איור שפורסם במקור בChaudhri, Sahuque, וJanak (2008). שימוש באישור מElsevier. <img alt="איור 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig4highres.jpg" width="500"> איור 4 חידוש הערכים להגיב לאתנול מיזוג הפבלובית. ממוצע ± SEM נמל מנורמל נעשו במהלך + CS וCS- במפגשי PDT בהקשר, הפעלות הכחדה בהקשר B, ובדיקת חידוש בהקשר א נתונים הם מעשה הקשר בממוצע לכל שני המפגשים האחרונים של PDT והכחדה; מבחן החידוש הוא פגישה אחת. אלההנתונים התקבלו באמצעות חולדות ארוך אוונס גבריים, התאמנו עם 10% (V / V) אתנול כגירוי הבלתי מותנה (US) שהוצג בשיתוף עם + CS במהלך PDT. * P &lt;0.05; ** P &lt;0.001, CS + לעומת CS-. #p &lt;0.05, CS + PDT לעומת CS + הכחדה. ^ P &lt;0.05, הכחדת CS + לעומת מבחן CS +. איור שפורסם במקור בChaudhri, Sahuque, וJanak (2008). שימוש באישור מElsevier.

הליך ללמוד את היכולת של הקשר סביבתי אלכוהול קשור להפעלת החידוש של אלכוהול התנהגות מסוימת לקבלה בחולדות מתוארת.

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

הליך זה בוחן את יכולתו של הקשר הקשור לאלכוהול לעורר את חידוש התנהגות חיפוש האלכוהול הפבלובית. זה מושג על ידי הרגלה ראשונה של חולדות מנוסות באתנול לתאי מיזוג שהוגדרו לשני הקשרים ייחודיים. השלב השני של ההליך הוא עריכת מפגשי הכשרה להבחנה פבלובית בהקשר אחד שבו שני רמזים שמיעתיים שונים מאותתים על זמינות אלכוהול או היעדר אלכוהול.הצעד השלישי הוא ביצוע הכשרה להכחדה. בהקשר השני שבו שני הרמזים השמיעתיים מוצגים ללא אלכוהול, השלב האחרון הוא להחזיר את החולדות להקשר האימון המקורי ולהציג את שני הרמזים השמיעתיים ללא אלכוהול. מניפולציה זו גורמת לחידוש התנהגות חיפוש אלכוהול המופעלת על ידי הרמז השמיעתי שהיה קשור בעבר לאלכוהול.היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני הליכים קיימים כמו התניה אינסטרומנטלית, הוא שהיא מספקת מודל חייתי של התנהגות חיפוש אלכוהול המעוררת על ידי רמזים פבלוביים המנבאים אלכוהול. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ההתמכרות, כגון האם הקשר הקשור לאלכוהול מעורר הישנות לפני האימון, הרגיל את החולדות לחדר הבדיקות ולשני ההקשרים הסביבתיים שהן יחוו. העבר תמיד את החולדות מהמתקן לטיפול בבעלי חיים לחדר הבדיקות בצורה עקבית.בפגישה הראשונה, השאירו את החולדות בחדר הבדיקה למשך 20 דקות כשאורות החדר מוארים והמאווררים בתאי הנחתת הקול דולקים לאחר 24 שעות. ערכו את מפגש ההרגלה השני כמו הראשון, אך כעת שקלו וטפלו בכל חולדה. ערכו את המפגש השלישי 24 שעות לאחר מכן.לשם כך, הגדר כל תא מיזוג עם אחד משני שילובים ייחודיים של גירוי ריח חזותי ומישוש. כדי לספק הקשר עקבי, גירוי הריח צריך להיות הגירוי ההקשרי האחרון שנוסף לכל חדר. כדי למזער ערבוב של גירויים שונים של חוש הריח, סגור את דלתות החדרים ואת תא הנחתת הקול בו שוכן כל תא.מיד לאחר החלת גירוי הריח לפגישה השלישית, שקלו כל חולדה והניחו אותה בתא המיזוג שלה למשך 20 דקות. מחצית מהחולדות צריכות לחוות הקשר אחד, והמחצית השנייה צריכה לחוות הקשר. שנית, כדי לסייע בשמירה על הצורך החיוני בעקביות בין החולדות לתאים שלהן, כדאי לסמן את החולדות במספר המזהה תא מסוים.דקה אחת לאחר שכל החולדות הוכנסו לתאים שלהן, האירו את אור הבית בתאים במהלך 20 הדקות, רשמו את כל כניסות יציאת הנוזל שביצעו החולדות. לאחר מכן כבו את האורות, פרקו את החולדות והחזירו אותן למתקן הטיפול בהן. מאוחר יותר באותו יום, ערכו מפגש הרגלה רביעי כמעט זהה לשלישי בו ההקשר של תאי ההתניה הפוך.לבסוף, לאחר כל מפגש ומפגש, יש לשטוף תמיד את מגשי האשפה ולוחות הרצפה של תאי המיזוג וצלחות הפטרי שאליהן הופעל גירוי הריח ההקשרי. השתמש רק בתמיסות ניקוי ללא ריח על בסיס שבועי. נקה את התאים בשלמותם לאימון זה.חלקו את החולדות לשתי קבוצות עם אותה צריכת אתנול ממוצעת בשני מפגשי הגישה האחרונים שלהם לאתנול. קבוצה אחת מאומנת בהקשר אחד והשנייה מאומנת בהקשר. שניים. ההקשר המשמש לאימון הבחנה פבלובית מכונה הקשר A.במהלך מפגשים אלה, החולדות לומדות להבחין בין שני רמזים שמיעתיים שונים, אחד מזווג עם אתנול ואחד שלא.אז השלב הראשון הוא הכנת מזרקים של 20 מיליליטר עם אתנול. עבור יציאות הנוזל, חבר את הצינור מהחלק האחורי של יציאת הנוזל למזרק הטעון. בעזרת מחט קהה טען כל מזרק למשאבה משלו מחוץ לתא הנחתת הקול.לאחר מכן הפעילו את הצינור על ידי קידום ידני של המשאבה ונגב עודפי אתנול מיציאת הנוזל. עכשיו הביאו את החולדות לחדר בדיקות המעבדה. כמו במהלך ההתרגלות, שקלו כל חולדה לפני הכנסתה לתא המיזוג שהוקצה לה.הקפד לבדוק שוב את תצורת ההקשר בכל תא והקפד לטעון את החולדה הנכונה בתא הנכון. חולדה שנחשפה להקשר הלא נכון או ל-CS פלוס שגוי עשויה להיות מושמטת מהמחקר. לאחר שכל החולדות נשקלות ונטענות, הפעילו את תוכנת המחשב השולטת באירועי האימון.חמש דקות לתוך התוכנית, אור הבית בכל תא מואר בכל מפגש, 16, עשר שניות התפרצויות של רעש לבן ו-16, עשר שניות של רעש נקישה. עבור כל חולדה, ייעד אחד מהגירויים השמיעתיים הללו לאתנול ואזן את הכינויים הללו על פני שני הקשרי ההתניה במהלך שש השניות האחרונות של ה-Cs, בנוסף, המשאבה מספקת 0.2 מיליליטר אתנול ליציאת הנוזל. הגדר את הגירויים בלוח זמנים משתנה של 67 שניות כדי לבצע מפגש של שעה.רשום את כל ערכי יציאת הנוזל החל מ-10 שניות לפני Cs, במהלך Cs ו-10 שניות לאחר cs. כמו כן, רשום את המספר הכולל של כניסות יציאת נוזלים שבוצעו עבור כל מפגש ההדרכה של האפליה הפבלובית. בסיום הפגישה, כבו את אורות הבית והחזירו את החולדות למתקן הטיפול בבעלי חיים בתאי המיזוג.בדוק את יציאות הנוזל כדי לוודא שהחולדות צרכו את 3.2 מיליליטר האתנול שהועבר במהלך הפגישה. זכור לבדוק את יציאות הנוזל לאחר שהחולדות הוצאו מהתאים כדי לוודא שהן צורכות את חולדות האתנול שאינן צורכות את האתנול וגם מראות רמות נמוכות של כניסות יציאות במהלך CS פלוס ייתכן שיהיה צורך להוריד מהמחקר. נקה את תאי המיזוג כרגיל.נקה את הצינור על ידי שטיפתו תחילה במים, ולאחר מכן באמצעות מזרק ריק של 60 מיליליטר כדי להעביר דרכו אוויר. חזור על המפגשים מדי יום עד שהחולדות יבחינו בין שני הגירויים השמיעתיים כפי שמצוין על ידי תגובות כניסת היציאה. צפויה עלייה סלקטיבית בכניסות יציאות ל-CS plus שמתייצבת תוך 16 עד 20 מפגשים.למפגשי ההכחדה. יש להגדיר את תא ההתניה של כל חולדה עם הקשר שונה מזה ששימש במהלך אימון הבחנה פבלובית. ההקשר שבו מתבצעת ההכחדה מכונה הקשר ב'.ערכו את מפגשי ההכחדה בדיוק כמו מפגשי ההבחנה באמצעות אותה תוכנת מחשב, אך אל תספקו אתנול במהלך CS Plus.לצורך עקביות, המשאבות עמוסות במזרקים ריקים של 20 מיליליטר המחוברים לתא באמצעות צינורות ללא אתנול. בצעו את מפגשי ההכחדה מדי יום עד שהחולדות יפסיקו להבחין בין CS פלוס למינוס. זה יכול להימשך כשמונה מפגשים כמו תמיד, נקה את הציוד לפי הצורך לפני שתמשיך לבדיקת החידוש.חיוני שתהיה ירידה משמעותית בכניסות לנמלים במהלך CS פלוס בסוף אימוני ההכחדה בהשוואה להתחלה. מבחן ההתחדשות המושרה בהקשר משתמש באותה תצורת הקשר תא ששימשה במהלך אימון ההבחנה הפבלובית, שהוא הקשר שונה מזה של אימון ההכחדה. מבחן חד פעמי זה מבוצע באופן זהה למפגש אימון אפליה פבלובית, אלא שלא מועבר אתנול והמזרקים ריקים.השתמש באותה תוכנת מחשב כדי להציג את הגירויים השמיעתיים. התוצאה הצפויה היא חידוש התנהגות חיפוש אלכוהול סלקטיבית ל-CS בתוספת ניקוי הציוד בסוף הבדיקה. כמו בעבר, כאשר ניתנה לחולדות גישה תקופתית לסירוגין לאתנול בכלובים הביתיים שלהן, צריכת האתנול והעדפת האתנול עלו לרמות יציבות לאחר שמונה עד 12 מפגשי אימון.במהלך אימוני ההבחנה הפבלובית, תגובות הכניסה לנמל ל-CS פלוס גדלו לאורך מפגשי האימון, הייתה עלייה קלה בתגובה ל-CS מינוס, אך החולדות למדו להבחין בין שני הרמזים השמיעתיים במהלך אימון ההכחדה, תגובות הכניסה לנמל ל-CS פלוס ירדו בהדרגה בעוד התגובות ל-CS מינוס נותרו נמוכות. כאשר החולדות הוחזרו להקשר הקשור לאימוני הבחנה פבלוביים, התרחשה עלייה סלקטיבית בכניסות לפורט במהלך CS פלוס ביחס לתוצאות לאחר אימון ההכחדה. לעומת זאת, לא היה שינוי בתגובה ל-CS מינוס.תוצאות אלה מדגימות שהתנהגות חיפוש אלכוהול הנגרמת על ידי רמז דיסקרטי יכולה להיות מווסתת חזק על ידי הקשר סביבתי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב שהחוקר לא ישתמש בבשמים, קולונים או מוצרים ריחניים אחרים. חולדות הן יצורים בעלי חוש ריח גבוה ורמזי ריח הקשורים לחוקר יכולים להפריע להתנהגות במשימה זו בעקבות שיטה זו, ניתן לבצע הליכים אחרים כמו עירויי מיקרו תוך גולגולתיים על מנת לענות על שאלות נוספות כגון באילו אזורים במוח מעורבים.ההקשר גרם לחידוש של חיפוש אלכוהול מותנה פבלובי.

a-procedure-to-observe-context-induced-renewal-pavlovian-conditioned

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

מודלים בבעלי חיים של נסיגה, המכונה הליכי השבה, נעשה שימוש נרחב כדי ללמוד את התפקיד של הלחץ הישנות כדי לחפש סמים. כאן אנו מדווחים על שיטה של ​​גרימת מחדש של קוקאין המחפשים בחולדות מעבדה באמצעות חשיפות חריפה על footshock, קלה חשמלי לסירוגין.

נוהל לימוד החזרה Footshock-induced של קוקאין מחפשים אצל חולדות מעבדה

בתגובה לאותות מזון או תרופות לזווג עליות במהלך תקופה של התנזרות זה עשוי להתייחס רגישות מוגברת להתנהגויות הישנות. כאן אנו פרט בהליך להערכת זה "דגירה של השתוקקות" אצל חולדות אשר למילוי עצמי סוכרוז.

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

הליך המאפשר הדגמה של הגדלת החזקה של סמים המבקשים בחולדות מוגבלות מזון מתואר. לאחר אימון הרואין מנהל עצמי, חולדות לעבור תקופת התנזרות, בסביבה נקיה מסמים, שבמהלכו הם אסירי מזון מוגבל. מבקשי תרופה נבדקו ולאחר מכן בסביבה הקשורים בסמים.

פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות

פרוטוקול זה מתאר שיטה חדשה ויעילה ליזום אופרנטית במהירות להגיב עבור אתנול בחולדות כי בניגוד שיטות סטנדרטיות, אינו מחייב מצוקת המים או סוכרזית / סוכרוז דהייה ליזום להגיב.

שיטה להערכת מאפייני החיזוק של אתנול בחולדות ללא מצוקת מים, סכרין Fading או הדרכת גישה מורחבת

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לעורר התנהגות גישה מותנית פבלובית בחולדות. ניתן להשתמש בהליך זה כדי למדוד הבדלים אינדיבידואליים בנטייה להתקרב ולייחס בולטות תמריצים לרמזים הקשורים לתגמול ולחקור פגיעות התמכרות.

הדרכת גישה אלפה הפבלובית בחולדות

מעקב eyeblink התניה קלאסית (ECC) נעשה שימוש כדי להעריך בהיפוקמפוס תלויי למידה associative בחולדות למבוגרים שהיו מנוהל ריכוז גבוה (11.9% v/v) של אלכוהול במהלך התפתחות המוח neonatal מוקדמת. באופן כללי, ECC שגרות הן כלי אבחון קול לגילוי חוסר תפקוד המוח על-פני הגדרות רבות הביו-רפואית ופסיכולוגית.

השימוש של התניה קלאסית Eyeblink מעקב כדי להעריך תפקוד בהיפוקמפוס במודל של עכברים של אלכוהול עוברית ספקטרום הפרעות

כתב יד זה מתאר הליך אחזור של זיכרון יציב זכרונות חזקים פרס ואני משכתב אותם עם counterconditioning לפני reconsolidation שלהם.

הליך אחזור מונחה שגיאה של חיזוי יציב ושכתובם הפרס Maladaptive זכרונות של שתיינים מסוכנים

פרוטוקול זה מתאר את העדפה המקום ממוזגים (CPP) כמודל של relapse. הליך זה מאפשר את המדידה של relapse בחיות מעבדה, שקילת ההשפעה של התרופה-הקשורים רמזים סביבתיים כמו התשוקה והוא relapse בשנת מכורים נמנעים כרגע המוקד של תוכניות טיפול שימוש בסמים.

החזרה של שוחרת סמים בעכברים באמצעות הפרדיגמה העדפה המקום ממוזגים

כאן, פרוטוקול העדפה (CPP) מורפיום ממוזגים המקום מתואר למדוד דגירה של השתוקקות אצל חולדות.

פרוטוקול העדפה המקום ממוזגים למדידת דגירה של השתוקקות אצל חולדות

מתואר הליך המדגים הישנות חריפה של מחסור חריף במזון לחיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש. מודל התנזרות שהוטל על ידי עונש יושם בהצלחה תוך שימוש בלוח הזמנים של שרשרת החיפוש ולקחת לניהול עצמי של הרואין. לאחר מכן מבוצעות בדיקות לחיפוש הרואין לאחר 24 שעות של לחץ על מחסור במזון.

הליך לחקר הישנות כתוצאה מלחץ של חיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש

למדו את שיטת ההתחדשות המושרה הקשר של התנהגות חיפוש אלכוהול מיזוג פבלובית בחולדות. מודל זה חוקר את השפעת רמזי הקשר על התמכרות ומסייע להבנת מנגנוני הישנות.

נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

גלה סרטונים נוספים