נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

הליך זה בוחן את יכולתו של הקשר הקשור לאלכוהול לעורר את חידוש התנהגות חיפוש האלכוהול הפבלובית. זה מושג על ידי הרגלה ראשונה של חולדות מנוסות באתנול לתאי מיזוג שהוגדרו לשני הקשרים ייחודיים. השלב השני של ההליך הוא עריכת מפגשי הכשרה להבחנה פבלובית בהקשר אחד שבו שני רמזים שמיעתיים שונים מאותתים על זמינות אלכוהול או היעדר אלכוהול.

הצעד השלישי הוא ביצוע הכשרה להכחדה. בהקשר השני שבו שני הרמזים השמיעתיים מוצגים ללא אלכוהול, השלב האחרון הוא להחזיר את החולדות להקשר האימון המקורי ולהציג את שני הרמזים השמיעתיים ללא אלכוהול. מניפולציה זו גורמת לחידוש התנהגות חיפוש אלכוהול המופעלת על ידי הרמז השמיעתי שהיה קשור בעבר לאלכוהול.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני הליכים קיימים כמו התניה אינסטרומנטלית, הוא שהיא מספקת מודל חייתי של התנהגות חיפוש אלכוהול המעוררת על ידי רמזים פבלוביים המנבאים אלכוהול. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ההתמכרות, כגון האם הקשר הקשור לאלכוהול מעורר הישנות לפני האימון, הרגיל את החולדות לחדר הבדיקות ולשני ההקשרים הסביבתיים שהן יחוו. העבר תמיד את החולדות מהמתקן לטיפול בבעלי חיים לחדר הבדיקות בצורה עקבית.

בפגישה הראשונה, השאירו את החולדות בחדר הבדיקה למשך 20 דקות כשאורות החדר מוארים והמאווררים בתאי הנחתת הקול דולקים לאחר 24 שעות. ערכו את מפגש ההרגלה השני כמו הראשון, אך כעת שקלו וטפלו בכל חולדה. ערכו את המפגש השלישי 24 שעות לאחר מכן.

לשם כך, הגדר כל תא מיזוג עם אחד משני שילובים ייחודיים של גירוי ריח חזותי ומישוש. כדי לספק הקשר עקבי, גירוי הריח צריך להיות הגירוי ההקשרי האחרון שנוסף לכל חדר. כדי למזער ערבוב של גירויים שונים של חוש הריח, סגור את דלתות החדרים ואת תא הנחתת הקול בו שוכן כל תא.

מיד לאחר החלת גירוי הריח לפגישה השלישית, שקלו כל חולדה והניחו אותה בתא המיזוג שלה למשך 20 דקות. מחצית מהחולדות צריכות לחוות הקשר אחד, והמחצית השנייה צריכה לחוות הקשר. שנית, כדי לסייע בשמירה על הצורך החיוני בעקביות בין החולדות לתאים שלהן, כדאי לסמן את החולדות במספר המזהה תא מסוים.

דקה אחת לאחר שכל החולדות הוכנסו לתאים שלהן, האירו את אור הבית בתאים במהלך 20 הדקות, רשמו את כל כניסות יציאת הנוזל שביצעו החולדות. לאחר מכן כבו את האורות, פרקו את החולדות והחזירו אותן למתקן הטיפול בהן. מאוחר יותר באותו יום, ערכו מפגש הרגלה רביעי כמעט זהה לשלישי בו ההקשר של תאי ההתניה הפוך.

לבסוף, לאחר כל מפגש ומפגש, יש לשטוף תמיד את מגשי האשפה ולוחות הרצפה של תאי המיזוג וצלחות הפטרי שאליהן הופעל גירוי הריח ההקשרי. השתמש רק בתמיסות ניקוי ללא ריח על בסיס שבועי. נקה את התאים בשלמותם לאימון זה.

חלקו את החולדות לשתי קבוצות עם אותה צריכת אתנול ממוצעת בשני מפגשי הגישה האחרונים שלהם לאתנול. קבוצה אחת מאומנת בהקשר אחד והשנייה מאומנת בהקשר. שניים. ההקשר המשמש לאימון הבחנה פבלובית מכונה הקשר A.במהלך מפגשים אלה, החולדות לומדות להבחין בין שני רמזים שמיעתיים שונים, אחד מזווג עם אתנול ואחד שלא.

אז השלב הראשון הוא הכנת מזרקים של 20 מיליליטר עם אתנול. עבור יציאות הנוזל, חבר את הצינור מהחלק האחורי של יציאת הנוזל למזרק הטעון. בעזרת מחט קהה טען כל מזרק למשאבה משלו מחוץ לתא הנחתת הקול.

לאחר מכן הפעילו את הצינור על ידי קידום ידני של המשאבה ונגב עודפי אתנול מיציאת הנוזל. עכשיו הביאו את החולדות לחדר בדיקות המעבדה. כמו במהלך ההתרגלות, שקלו כל חולדה לפני הכנסתה לתא המיזוג שהוקצה לה.

הקפד לבדוק שוב את תצורת ההקשר בכל תא והקפד לטעון את החולדה הנכונה בתא הנכון. חולדה שנחשפה להקשר הלא נכון או ל-CS פלוס שגוי עשויה להיות מושמטת מהמחקר. לאחר שכל החולדות נשקלות ונטענות, הפעילו את תוכנת המחשב השולטת באירועי האימון.

חמש דקות לתוך התוכנית, אור הבית בכל תא מואר בכל מפגש, 16, עשר שניות התפרצויות של רעש לבן ו-16, עשר שניות של רעש נקישה. עבור כל חולדה, ייעד אחד מהגירויים השמיעתיים הללו לאתנול ואזן את הכינויים הללו על פני שני הקשרי ההתניה במהלך שש השניות האחרונות של ה-Cs, בנוסף, המשאבה מספקת 0.2 מיליליטר אתנול ליציאת הנוזל. הגדר את הגירויים בלוח זמנים משתנה של 67 שניות כדי לבצע מפגש של שעה.

רשום את כל ערכי יציאת הנוזל החל מ-10 שניות לפני Cs, במהלך Cs ו-10 שניות לאחר cs. כמו כן, רשום את המספר הכולל של כניסות יציאת נוזלים שבוצעו עבור כל מפגש ההדרכה של האפליה הפבלובית. בסיום הפגישה, כבו את אורות הבית והחזירו את החולדות למתקן הטיפול בבעלי חיים בתאי המיזוג.

בדוק את יציאות הנוזל כדי לוודא שהחולדות צרכו את 3.2 מיליליטר האתנול שהועבר במהלך הפגישה. זכור לבדוק את יציאות הנוזל לאחר שהחולדות הוצאו מהתאים כדי לוודא שהן צורכות את חולדות האתנול שאינן צורכות את האתנול וגם מראות רמות נמוכות של כניסות יציאות במהלך CS פלוס ייתכן שיהיה צורך להוריד מהמחקר. נקה את תאי המיזוג כרגיל.

נקה את הצינור על ידי שטיפתו תחילה במים, ולאחר מכן באמצעות מזרק ריק של 60 מיליליטר כדי להעביר דרכו אוויר. חזור על המפגשים מדי יום עד שהחולדות יבחינו בין שני הגירויים השמיעתיים כפי שמצוין על ידי תגובות כניסת היציאה. צפויה עלייה סלקטיבית בכניסות יציאות ל-CS plus שמתייצבת תוך 16 עד 20 מפגשים.

למפגשי ההכחדה. יש להגדיר את תא ההתניה של כל חולדה עם הקשר שונה מזה ששימש במהלך אימון הבחנה פבלובית. ההקשר שבו מתבצעת ההכחדה מכונה הקשר ב'.ערכו את מפגשי ההכחדה בדיוק כמו מפגשי ההבחנה באמצעות אותה תוכנת מחשב, אך אל תספקו אתנול במהלך CS Plus.

לצורך עקביות, המשאבות עמוסות במזרקים ריקים של 20 מיליליטר המחוברים לתא באמצעות צינורות ללא אתנול. בצעו את מפגשי ההכחדה מדי יום עד שהחולדות יפסיקו להבחין בין CS פלוס למינוס. זה יכול להימשך כשמונה מפגשים כמו תמיד, נקה את הציוד לפי הצורך לפני שתמשיך לבדיקת החידוש.

חיוני שתהיה ירידה משמעותית בכניסות לנמלים במהלך CS פלוס בסוף אימוני ההכחדה בהשוואה להתחלה. מבחן ההתחדשות המושרה בהקשר משתמש באותה תצורת הקשר תא ששימשה במהלך אימון ההבחנה הפבלובית, שהוא הקשר שונה מזה של אימון ההכחדה. מבחן חד פעמי זה מבוצע באופן זהה למפגש אימון אפליה פבלובית, אלא שלא מועבר אתנול והמזרקים ריקים.

השתמש באותה תוכנת מחשב כדי להציג את הגירויים השמיעתיים. התוצאה הצפויה היא חידוש התנהגות חיפוש אלכוהול סלקטיבית ל-CS בתוספת ניקוי הציוד בסוף הבדיקה. כמו בעבר, כאשר ניתנה לחולדות גישה תקופתית לסירוגין לאתנול בכלובים הביתיים שלהן, צריכת האתנול והעדפת האתנול עלו לרמות יציבות לאחר שמונה עד 12 מפגשי אימון.

במהלך אימוני ההבחנה הפבלובית, תגובות הכניסה לנמל ל-CS פלוס גדלו לאורך מפגשי האימון, הייתה עלייה קלה בתגובה ל-CS מינוס, אך החולדות למדו להבחין בין שני הרמזים השמיעתיים במהלך אימון ההכחדה, תגובות הכניסה לנמל ל-CS פלוס ירדו בהדרגה בעוד התגובות ל-CS מינוס נותרו נמוכות. כאשר החולדות הוחזרו להקשר הקשור לאימוני הבחנה פבלוביים, התרחשה עלייה סלקטיבית בכניסות לפורט במהלך CS פלוס ביחס לתוצאות לאחר אימון ההכחדה. לעומת זאת, לא היה שינוי בתגובה ל-CS מינוס.

תוצאות אלה מדגימות שהתנהגות חיפוש אלכוהול הנגרמת על ידי רמז דיסקרטי יכולה להיות מווסתת חזק על ידי הקשר סביבתי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב שהחוקר לא ישתמש בבשמים, קולונים או מוצרים ריחניים אחרים. חולדות הן יצורים בעלי חוש ריח גבוה ורמזי ריח הקשורים לחוקר יכולים להפריע להתנהגות במשימה זו בעקבות שיטה זו, ניתן לבצע הליכים אחרים כמו עירויי מיקרו תוך גולגולתיים על מנת לענות על שאלות נוספות כגון באילו אזורים במוח מעורבים.

ההקשר גרם לחידוש של חיפוש אלכוהול מותנה פבלובי.