Name: חליטות עורק הראשי לpharmacokinetic וpharmacodynamic ניתוח של taxanes בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: למד שיטת חליטות עורק הראשי לניתוח פרמקוקינטי של taxanes בעכברים. שיטה זו מאפשרת אספקת תרופה מבוקרת דרך קתטר מותאם אישית ומשאבה אוטומטית, ומספקת ייצוג מדויק יותר של קצבי חליטה קליניים בהשוואה לשיטות מסורתיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות למתקן FCCC בעלי החיים במעבדה על תמיכתם בפרויקט זה. אנו מודים וולף מעבדות, Inc על עזרת בניתוח רמות פקליטקסל בפלזמה וברקמות. עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לבריאות מעניקה K01CA120091 לEHB, וCA06927 פוקס צ&#39;ייס במרכז הסרטן.

<ol><li>Gallo, J. M., Li, S., Guo, P., Ma Reed, K., J, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effect+of+P-Glycoprotein+on+Paclitaxel+Brain+and+Brain+Tumor+Distribution+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">The Effect of P-Glycoprotein on Paclitaxel Brain and Brain Tumor Distribution in Mice.</a> Cancer Research. 63 (16), 5114-5117 (2003).</li>
<li>Sonnichen, D. S., Relling, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+Pharmacokinetics+of+Paclitaxel%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Pharmacokinetics%22%5BJournal%5D)">Clinical Pharmacokinetics of Paclitaxel.</a> Clinical Pharmacokinetics. 27 (4), 256-269 (1994).</li>
<li>Gianni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+Pharmacokinetics+and+Metabolism+of+Paclitaxel+and+Its+Pharmacokinetic+%2F+Pharmacodynamic+Relationship+in+Humans%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Nonlinear Pharmacokinetics and Metabolism of Paclitaxel and Its Pharmacokinetic / Pharmacodynamic Relationship in Humans.</a> Journal Clinical Oncology. 13 (1), 180-190 (1995).</li>
<li>Sparreboom, A., Van Tellingen, O., Nooijen, W. J., Beijnen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+Pharmacokinetics+of+Paclitaxel+in+Mice+Results+from+the+Pharmaceutical+Vehicle+Cremophor+EL%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Nonlinear Pharmacokinetics of Paclitaxel in Mice Results from the Pharmaceutical Vehicle Cremophor EL.</a> Cancer Research. 56 (9), 2112-2115 (1996).</li>
<li>Sparreboom, A., Van Tellingen, O., Nooijen, W. J., Beijnen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+paclitaxel+and+metabolites+in+mouse+plasma%2C+tissues%2C+urine+and+faeces+by+semi-automated+reversed-phase+high-performance+liquid+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B%3A+Biomedical+Sciences+and+Applications%22%5BJournal%5D)">Determination of paclitaxel and metabolites in mouse plasma, tissues, urine and faeces by semi-automated reversed-phase high-performance liquid chromatography.</a> Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. 664, 383-391 (1995).</li>
<li>Bradshaw-Peirce, E. L., Eckhardt, S. G., Gustafson, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Physiologically+Based+Pharmacokinetic+Model+of+Docetaxel+Disposition%3A+from+Mouse+to+Man%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A Physiologically Based Pharmacokinetic Model of Docetaxel Disposition: from Mouse to Man.</a> Clinical Cancer Research. 13, 2768-2778 (2007).</li>
<li>Eiseman, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+Pharmacokinetics+and+Tissue+Distribution+of+Paclitaxel+in+CD2F1+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Chemotherapy+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Plasma Pharmacokinetics and Tissue Distribution of Paclitaxel in CD2F1 Mice.</a> Cancer Chemotherapy and Pharmacology. 34 (6), 465-471 (1994).</li>
<li>Schinkel, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normal+Viability+and+Altered+Pharmacokinetics+in+Mice+Lacking+mdr1-type+%28drug-transporting%29+P-glycoproteins%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Normal Viability and Altered Pharmacokinetics in Mice Lacking mdr1-type (drug-transporting) P-glycoproteins.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 94, 4028-4033 (1997).</li>
<li>Fraser, I. J., Dear, G. J., Plumb, R., L’Affineur, M., Fraser, D., Skippen, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Use+of+Capillary+High+Performance+Liquid+Chromatography+with+Electrospray+Mass+Spectrometry+for+the+Analysis+of+Small+Volume+Blood+Samples+from+Serially+Bled+Mice+to+Determine+the+Pharmacokinetics+of+Early+Discovery+Compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Rapid+Communications+in+Mass+Spectrometry%22%5BJournal%5D)">The Use of Capillary High Performance Liquid Chromatography with Electrospray Mass Spectrometry for the Analysis of Small Volume Blood Samples from Serially Bled Mice to Determine the Pharmacokinetics of Early Discovery Compounds.</a> Rapid Communications in Mass Spectrometry. 13 (23), 2366-2375 (1999).</li>
<li>Bateman, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+Animal+Usage+by+Serial+Bleeding+of+Mice+for+Pharmacokinetic+Studies%3A+Application+of+Robotic+Sample+Preparation+and+Fast+Liquid+Chromatography+%E2%80%93+Mass+Spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+B%3A+Biomedical+Sciences+and+Applications%22%5BJournal%5D)">Reduction of Animal Usage by Serial Bleeding of Mice for Pharmacokinetic Studies: Application of Robotic Sample Preparation and Fast Liquid Chromatography – Mass Spectrometry.</a> Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. 754 (1), 245-251 (2001).</li>
<li>Berndt, K., Vogel, J., Buehler, C., Vogt, P., Born, W., Fuchs, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+repeated+drug+infusion+into+the+femoral+artery+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab+Animal+Sci%22%5BJournal%5D)">A new method for repeated drug infusion into the femoral artery of mice.</a> J. Am. Assoc. Lab Animal Sci. 51 (6), 825-831 (2012).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Squibb+%26+Sons%2C+L.L.C.%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Information+for+TAXOL+%28Paclitaxel%29+Injection%22%5BJournal%5D)">Squibb & Sons, L.L.C.</a> Drug Information for TAXOL (Paclitaxel) Injection. , Bristol-Myers Squibb Company. (2011).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abraxis+BioScience+L.L.C%5BTitle%5D)+AND+%22Full+Prescribing+Information+ABRAXANE+for+Injectable+suspension+%28paclitaxel+protein-bound+particles+for+injectable+suspension%29+%28albumin-bound%29%22%5BJournal%5D)">Abraxis BioScience L.L.C.</a> Full Prescribing Information ABRAXANE for Injectable suspension (paclitaxel protein-bound particles for injectable suspension) (albumin-bound). , Celgene Corporation. (2013).</li>
<li>Fergusson, G., Ethier, M., Zarrouki, B., Fontés, G., Poitout, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Model+of+Chronic+Nutrient+Infusion+in+the+Rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat.</a> J. Vis. Exp. (78), (2013).</li>
</ol>

יש לי המחברים אין לחשוף.

עירוי בעורק התרדמה הוא טכניקה משמעותית במחקר זה של הפרמקוקינטיקה פקליטקסל. עירוי בעורק התרדמה הוא שיטה להפצה במהירות בסמים לאורך מערכת הדם 14. עירוי שעה 3 הוא קרוב יותר חקיין של ממשל הקליני של תרופות כגון taxanes מאשר זריקות בולוס. הניתוח יכול להתבצע באופן אמין על ידי אדם אחד, זמן ניתוח הוא קצר יחסית, ואחוזי הצלחה&gt; 75%. לאחר דגימות שנאספו, הם חייבים להיות מנותחים על ידי השיטות המתאימות. אנחנו השתמשנו ספקטרומטר מסה כדי לקבוע את ריכוז פקליטקסל בדגימות פלזמה ורקמות. כדי...

עירוי תרופות דרך עורק התרדמה ניתן לבצע באופן אמין וreproducibly על ידי אופטימיזציה של ציוד וטכניקה. ההליך הוא לא מסובך, למרות שזה דורש בקרה טובה ותשומת לב לפרטים. טיפול ומיומנות מעולים יש צורך לבודד את העורק הראשי ולהכניס את הצנתר, אשר בדרך כלל ניתן לרכוש באמצעות תרגול. ניתוח על ידי טכנאי מנוסה לא יעלה על שעה אחת. לאחר ניתוח מוצלח, העכבר צריך להופיע נורמלי ובריא (אם כי העכבר עשוי להגיב לעירוי התרופה בפועל), ותרופה (ים) עשויה להיות מנוהלת במינון רציף, אחיד בשליטה. דגימות דם חייבות להילקח מאתר אחר מאשר העורק הראשי; דימומי רטרו מסלולית הוכיחו קל לאסוף ומניח את דעת לניתוח של ריכוזי תרופה. צנתרים של גודל אופטימלי וצורה הם נכס לא יסולא בפז בביצוע עירוי מוצלח 11. מצאנו commerciall זמין הצנתריםy לעתים קרובות להיות גדול ו / או גמיש מדי כדי לאפשר גישה נוחה לעורק הראשי עכבר מדי. זה הוכיח עדיף על צנתרים אופנה מצינורות פוליאתילן המשמשים לחיבור העכבר למזרק העירוי. כך, כל צינורות, המחברים והמחטים היו בממדים עולים בקנה אחד, שפשוט הרכבה עירוי. השימוש בטכניקה זו, אין צורך לדחוף את קצה הצנתר לתוך העורק מעבר לנקודה שבה עדיין גלוי, וזרימת דם לעורק הראשי לא שוחזרה עד לאחר קטטר תחילה מאובטח. הפעולה זו מפחיתה את הסכנות של ניקוב העורק או שיש קטטר נדחפו החוצה על ידי הלחץ הגבוה של זרימת דם. עיצוב קטטר במסמך זה אינו כולל &quot;להקפיץ&quot; להחזיק אותו במקום, ולכן הבטחת קטטר גם עם תפרים ואספלנית היא בראש סדר עדיפויות. חליטות עשויות להיות עדיפות על זריקות בולוס iv המשותפים, כטובות יותר חקיין של ממשל הקליני שלתרופות כגון taxanes 3, 12, 13. הטכניקה המתוארת כאן פותחו במקור כדי לאפשר לעירוי לתוך מודלים של עכברים שבי גישה לוריד הצוואר או הירך נמנעה בגלל צמיחת גידול החלב ו / או כלי דם יתר של אזור ההחדרה. שיטה זו עשויה לעתים להיות מתאימה גם בעכברים ללא גידול, למרות שבידוד וcatheterizing התרדמה הוא מעט יותר פולשנית, שמצאנו אותו עדיף על הצוואר, כי הנטייה של קיר הצוואר לקרוע הביאה הוספות וכישלונות כדי להשלים נכשלו יותר כמובן זמן 3 שעות. בעוד שהתוצאות מופיעות כאן הן מC57BL / 6-י (ב- הוליד בית) עכברים, השתמשנו בטכניקה זו כדי להחדיר בהצלחה פקליטקסל לכמה זנים של עכברים, כוללים FVB ומעורבים-זנים, כדי לעקוב הפרמקוקינטיקה במודלים של עכברים שהופעלו transgenically ללמטה לווסת פונקציות טרנספורטר סלולריות. דגימות הדם ורקמה שנאספו הראו רמות צפויות של paclitaxאל, בטווח של הרמות שנראו לאחר חליטות הצוואר 1. טכניקה זו ניתן לצפות כי עבודה לא פחות טובה במודלים של עכברים אחרים ועם פתרונות עירוי אחרים.

<table><tbody><tr><td>צינורות פוליאתילן "0.024 OD X 0.011 אינץ' ID&nbsp;</td><td>בריינטרי סיינטיפיק בע"מ</td><td>PE10</td><td></td></tr><tr><td>3 מחטים קהות (מד 30)</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td>תקע יציאת <td>נירוסטה NB-30</td><td></td></tr><tr><td>(מד 28)</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>PP-28</td><td>מעט גדול יותר ממזהה צינורות PE, כדי להתאים היטב ולשמור על אטימה הדוקה.</td></tr><tr><td>2 תקעי מחבר נירוסטה (מד 30)</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>C-30</td><td></td></tr><tr><td>שלושה מזרקים 1 סמ"ק</td><td>Becton, Dickinson and Co.</td><td></td><td></td>309659</tr><tr><td>תמיסת מלח סטרילית 0.9%</td><td>Hospira</td><td>0409-7984-37</td><td></td></tr><tr><td>Cath-Loc HGS תמיסת הפרין/גליצרול&nbsp;</td><td>בריינטרי סיינטיפיק בע"מ</td>תפר משי <td>HGS</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>SUT-S&nbsp; 113</td><td></td></tr><tr><td>מספריים ואנה (מיקרו-מספריים)</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>14122</td><td>לדגם זה יש קצה מעוקל, אך גם מספריים עם קצה ישר עובדים.</td></tr><tr><td>הרטמן מסקיטו מלקחיים המוסטטיים</td> מכשירים <td>מדויקים עולמיים</td><td>501705</td><td></td></tr><tr><td>Betadine Swabsticks</td><td>Perdue Products L.P.</td><td>BSWS1S</td><td></td></tr><tr><td>Bupivacaine</td><td>Hospira</td><td>0409-1160-01</td><td>עשוי להיות מוחלף בלידוקאין, או הרדמה מקומית דומה.</td></tr><tr><td>Paclitaxel</td><td>LC Laboratories</td><td>P-9600</td><td></td></tr><tr><td>מתנול</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>32213</td><td></td></tr><tr><td>צינורות נימיים מיקרו-המטוקריטים, Heparinized</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-362-566</td><td></td></tr><tr><td>איטום צינור מיקרו נימי&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>02-678</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J עכברים</td><td>פוקס צ'ייס מרכז הסרטן, מתקן חיות מעבדה מבית</td><td></td><td></td></tr><tr><td>API 4000 Q-Trap Mass Spetrometer</td><td>Applied Biosystems</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

חליטות עורק הראשי לpharmacokinetic וpharmacodynamic ניתוח של taxanes בעכברים

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

כאשר מציעים את השימוש של תרופה, שילוב תרופות, או אספקת סמים למערכת רומן, יש להעריך את הפרמקוקינטיקה של התרופה במודל המחקר. ככל שהשימוש במודלים של עכברים הוא לעתים קרובות צעד חיוני בגילוי תרופות פרה-קליני ופיתוח תרופות 1-8, יש צורך לתכנן מערכת להציג תרופות לעכברים במדים, אופן לשחזור. באופן אידיאלי, המערכת צריכה לאפשר איסוף דגימות דם במרווחים זמן קבוע על מסלול זמן מוגדר. היכולת למדוד ריכוזי תרופה על ידי ספקטרומטר מסה, אפשרה לחוקרים לעקוב אחר השינויים ברמות תרופה בפלזמה לאורך זמן בעכברים בודדים 1, 9, 10. במחקר זה, פקליטקסל הוכנס עכברים הטרנסגניים כעירוי דם מתמשך על פני שלוש שעות, ואילו דגימות דם נלקחו בו זמנית על ידי דימומי רטרו מסלולית בנקודות זמן מוגדר. חליטות עורק התרדמה הן חלופה פוטנציאלית לחליטות וריד הצוואר, כאשר גורמים כמוגידולי החלב או מכשולים אחרים לעשות חליטות הצוואר מעשיות. שימוש בטכניקה זו, ריכוזי פקליטקסל בפלזמה וברקמות השיגו רמות דומות בהשוואה לעירוי הצוואר. במדריך זה, אנו נדגים כיצד לצנתר את העורק הראשי בהצלחה על ידי הכנת קטטר מותאם למודל העכבר הבודד, ולאחר מכן להציג כיצד להוסיף ולהבטיח את הצנתר לתוך עורק הצוואר עכבר, חוט סוף הצנתר דרך חזרה צווארו של העכבר, ולחבר את העכבר למשאבה כדי לספק קצב מבוקר של זרם סמים. דימומי רטרו מסלולית נפח נמוך מרובים מאפשרים ניתוח של ריכוזי תרופה בפלזמה לאורך זמן.

הפצת פקליטקסל כדלקמן דפוסים צפויים במשטר מינון 3 שעות של עירוי במהירות גבוהה 15 דקות, ואחרי עירוי במהירות נמוכה 165 דקות. איור 1 מציג השוואה של ריכוזי וריד הצוואר-עירוי פקליטקסל הפלזמה ועורק-חליטות התרדמה. ריכוזי פקליטקסל לרדת במהירות בדקות הראשונות שלאחר 15 עירוי בנפח גבוה ראשוני, ולאחר מכן להתמתן על דקות 150 הבאות. לשם השוואה, רמות פקליטקסל בעירוי עני להתחיל נמוך יחסית, ומרחפות למעלה ולמטה לאור...

שיטה זו פותחה במטרה לספק פתרון תרופתי קבוע באמצעות העורק הראשי, כדי להעריך את הפרמקוקינטיקה של תרופות חדשניות במודלים של עכברים.

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להחדיר תרופה מעניינת דרך עורק הצוואר כדי לנתח את הפרופיל הפרמקוקינטי של התרופה. זה מושג על ידי יצירת קטטר מותאם אישית מצינורות פוליאתילן ולאחר מכן אבטחת הקטטר בתוך עורק הצוואר של העכבר. לאחר מכן, העכבר מחובר למשאבת עירוי אוטומטית דרך קטטר עורק הצוואר.בשלב האחרון, התרופה מוזרקת לעכבר בקצב קבוע, ודגימות דם נאספות במרווחי זמן קבועים. בסופו של דבר, כרומטוגרפיה נוזלית, ספקטרומטריית מסה משמשת לקביעת ריכוז התרופה בתוך דגימות הרקמה והפלזמה. היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כגון בולוס, הזרקת וריד תוך צפקי או וריד זנב או עירוי צוואר, הוא שהיא מייצגת את שיעורי העירוי הקליני, כמו גם בדרך כלל קלה יותר לביצוע מאשר החדרת צוואר.שיטה זו יכולה לענות על שאלות מפתח בפרמקולוגיה, כגון מהי התפלגות in vivo של תרופה, או שאנו יכולים לקבוע אם מעכב או מודולטור משפיעים על תפקוד החלבון. כדי להכין קטטר לניסוי, ראשית, יש לבסס להבה יציבה נמוכה על מבער בנסן. לאחר מכן החזק חתיכת צינור קרוב ללהבה כדי לרכך את הפוליאתילן.כאשר הצינור מתחיל להימס, יש להפריד לאט את שני הקצוות ליצירת קטע דק של צינור, בקוטר של כ-0.25 מילימטרים. לאחר מכן, חותכים קצה משופע בצינור כ- 0.75 סנטימטרים לאורך החלק הדק, ואז מעבירים את הקצה במהירות דרך הלהבה כדי לגרום לו להיות מעוגל ומוגדל מעט. הקצה יתחבר מעט לאחור, מה שיעזור לעגן את הצינור במהלך ההחדרה לעורק.חותכים את הצינור 6.0 סנטימטרים מהנקודה בה הוא מתחיל לדלל כדי ליצור קטטר, ואז ממלאים מזרק המצויד במחט קהה עם 200 מיקרוליטר תמיסת הפרין. הכנס את המחט לקצה הרחב של הצנתר ומלא את הקטטר בהפרין. הקפדה על הימנעות מבועות.לאחר מכן אחסן את המחט והצנתר במקום סטרילי כדי לבודד את עורק הצוואר. התחל בביצוע חתך אורכי של סנטימטר אחד מעט מימין לקו האמצע של צוואר החיה, ולאחר מכן השתמש במלקחיים כדי להפריד את השומן והשריר ולחשוף את קנה הנשימה. עורק הצוואר עובר במקביל לקנה הנשימה.לאחר מכן, הפרד בזהירות את הפאשיה המכסה את העורק, ולאחר מכן משוך קלות את עצב ה-VA הצידה. הכנס את המלקחיים לחלל שבין עורק הצוואר לעצב ה- VA, ופתח בעדינות את המלקחיים כדי ליצור פער בחזית. משוך בזהירות את העצב הרחק מהעורק, פנה חלל מהמזלג בקצה הקדמי ליד הגרון לקצה האחורי החשוף הרחוק ביותר, ובודד לפחות שלושה מילימטרים של העורק.לאחר מכן השתמש במלקחיים כדי למשוך חוט תפר משי מתחת לעורק ולקשור קשר מאובטח כדי לסגור את העורק לכיוון הקצה הקדמי ככל האפשר. לאחר הנחת חוט שני, קשרו קשר נשלף כדי לסגור זמנית את העורק לכיוון הקצה האחורי ככל האפשר. לאחר מכן השתמש בחוט שלישי כדי לקשור קשר רופף מאוד בין שני התפרים הראשונים שישמשו לאבטחת הקטטר במהירות לאחר ההצבה.כדי להכניס את הקטטר, אחוז בקשר התפר התחתון כדי למשוך את העורק מעט מתוח. ואז לחתוך את העורק מעל וקרוב מאוד לתפר הקדמי. הקפידו לא לחתוך עמוק מדי.בדוק את החריץ כדי לוודא שהפתח אינו חסום. הסר את הקטטר המלא בהפרין ממחט המזרק, ולאחר מכן הקפד לא ליצור כיסי אוויר גדולים. בשני הקצוות, תפעל את הקטטר כדי למקם את הקצה המשופע בזווית נוחה כלפי מטה ומעט לכיוון היד הדומיננטית.לאחר מכן, תוך כדי אחיזה בתפר, כדי לשמור על העורק מתוח מעט, הכנס בעדינות את הקטטר לתוך החריץ. לאחר מכן השתמש במלקחיים כדי לתפוס את קשר התפר הקדמי ולמשוך בעדינות את העורק כלפי מטה מעל הצנתר. שחרר בזהירות את הקטטר ואת התפר הקדמי.לאחר מכן הדק את הקשר האמצעי כדי להדק את הצנתר קרוב לכניסת הקטטר לעורק תוך הקפדה לא לחסום את הזרימה דרך הצנתר. צור קשר משולש הדוק עם התפר האמצעי, ולאחר מכן השתמש בתפר הקדמי כדי להדק את הקטטר במקומו מתחת לכניסה לעורק. כעת השתמש בתקע מחבר כדי לחבר כבל מלח לצנתר והקפד לא ליצור בועות.לאחר מכן אחוז בקצוות התפר האחורי ומשוך אותו בעדינות כדי לשחרר את הקשר, תמרן את התפר במורד העורק ומעל קצה הקטטר מבלי להסיר את החוט. הדם אמור לזרום לתוך הצנתר כאשר הזרימה נראית ללא הפרעה. השתמש בחוט מהתפר האחורי כדי לקשור קשר נוסף מעט מעל התפר האמצעי.לאחר מכן שטוף את צנתר הדם והשתמש בהמוסטט כדי להדק את קצה הצנתר קרוב לתקע המחבר. החזר את המחבר לתקע יציאה כדי לאטום את קצה הצנתר ולהסיר את המוסטט. לאחר מכן השתמש בזוג מלקחיים אחד כדי להחזיק את הקטטר ממש מתחת לתפר הקדמי, ומלקחיים אחרים כדי ללחוץ קיפול לתוך הקטטר כך שהוא יתכופף בקלות הצידה לאחר יצירת קיפול שני.באותו אופן, סובב את העכבר על צדו השמאלי ונקה את האזור שמתחת וימין מאחורי אוזן החיה עם 70% אתנול ויוד פובידון. לאחר חיטוי האזור, בצע חתך קטן של ארבעה מילימטרים בעור. לאחר מכן השתמש במלקחיים כדי להחזיק את דש הרקמה פתוח ולהפעיל בדיקה חלולה קהה מתחת לעור כדי ליצור תעלה דרך הלחי לחלל בצוואר.השתמש במלקחיים כדי לפנות בזהירות מקום ליציאת הגשושית, ולאחר מכן השחיל בעדינות את תקע היציאה והצנתר דרך הגשושית אל חור היציאה. הקפד לא לרסק או לכווץ כלי דם או איברים כלשהם לאחר שהחיה הורשתה להתאושש במשך 30 עד 60 דקות, חבר מחט קהה לקצה אחד של חתיכת צינור פוליאתילן באורך 40 סנטימטר ויציאת מחבר לקצה השני. ואז משוך את התרופה המעניינת למזרק בקוטר פנימי ידוע.חבר את המחט למזרק וטען את התרופה דרך המחט והצינור. לאחר מיקום המזרק במשאבה, על פי הוראות היצרן, יש להניע את המשאבה כך שהתרופה תזרום בצורה חלקה מהמחבר. חבר אז כדי לחבר את החיה למשאבה, החזק את העכבר יציב והשתמש בהמוסטט כדי clamp הצנתר קרוב לתקע היציאה.לבסוף, החלף את התקע במחבר המחובר למזרק ולצינור. נהל במהירות משאבה מהירה כדי לנקות את נפח הצנתר, ולאחר מכן עבור מיד לקצב העירוי הרצוי. באיור ראשון זה, מוצגת השוואה של ריכוז הפלזמה של פקליטקסל לאחר עירוי וריד הצוואר ועירוי עורק הצוואר.ריכוז התרופה יורד במהירות ב-15 הדקות הראשונות לאחר עירוי ראשוני בנפח גבוה ולאחר מכן מתייצב במהלך 150 הדקות הבאות. לשם השוואה, רמות הפקליטקסל בעירוי גרוע מתחילות נמוכות יחסית ומרחפות למעלה ולמטה לאורך כל הבדיקה, ככל הנראה עקב חסימה בקו מוקדם בעירוי. כאן, הרמות היחסיות של פקליטקסל בכבד, במוח ובפלזמת הדם בתום עירוי של שלוש שעות מוצגות כצפוי, החיה מציגה קשירת חלבון פלזמה גבוהה, יחד עם ריכוזים נמוכים של תרופה ברקמת המוח לאחר שליטה, טכניקה זו אמורה להימשך 45 עד 60 דקות אם היא מבוצעת כראוי.לאחר הצפייה בסרטון, אתה אמור להבין היטב כיצד לבודד עורק צוואר, להכניס קטטר ולבצע עירוי.

carotid-artery-infusions-for-pharmacokinetic-pharmacodynamic-analysis

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

זה מתאר ניתוח חלקי קשירת הראש, מה שגורם תנאי הזרימה מופרע והתפתחות טרשת עורקים הבאות (בעוד שבועיים) עם כלי דם, ניאו intraplaque (ארבעה שבועות) בעורק התרדמה המשותף העכבר. כמו כן, אנו מתארים שיטה חדשה של בידוד RNA מן התרדמה אינטימה, מתן RNA הטוהר גבוהה האנדותל.

המודל של טרשת עורקים Flow-induced מופרע על העורק הראשי עכבר ידי קשירת חלקי שיטה פשוטה של ​​בידוד RNA מן התרדמה האנדותל

השרוול הצרת המוצגים במאמר זה נועד לגרום לטרשת עורקים בעורק התרדמה Murine משותף. בשל בצורת חרוט של לומן הפנימי שלה את האזיק מושתל יוצרת אזורים מוגדרים היטב של מתח נמוך, גזירה גבוהה oscillatory מפעילה את התפתחות טרשת עורקים של פנוטיפים דלקתיות שונות.

השרשה של קאף הראש מפעילה שאר מתח טרשת עורקים המושרה עכברים

מקור: Leda, A. R., et al. טכניקת עירוי מיקרו-כירורגיה של עכבר להעברת חומרים ממוקדים למערכת העצבים המרכזית דרך עורק הצוואר הפנימי. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים הליך מיקרו-כירורגי שנועד להקל על עירוי ממוקד של חומר בדיקה למוח דרך עורק הצוואר הפנימי (ICA). ההליך כולל תפירה מדויקת ומניפולציה של כלי הדם כדי להגביל זמנית את זרימת הדם, מה שמבטיח אספקה מבוקרת. צינור נימי מוחדר לעורק הצוואר החיצוני (ECA) ומתקדם לכיוון ההתפצלות. עם העירוי, החומר עוקף את זרימת הדם המערכתית, חוצה את מחסום הדם-מוח ומשיג...

העברת חומרים ממוקדים למוח העכבר באמצעות עירוי לעורק הצוואר הפנימי

אנו מתארים כאן את השיטה של הדמיה מבוססת מיקרוסקופיה פלואורסצנטית קונפוקלית סיבית (FCFM), המספקת מצב חדשני להבנת תופעות פיזיולוגיות ברמה התאית והתת-תאית בנבדקים בבעלי חיים.

בעקבות כימותרפיה כלי דם רעילות - בזמן אמת<em&gt; In vivo</em&gt; הדמיה של ירידת ערך כלי

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקת עירוי מיקרו-כירורגית של עכבר, המעבירה ביעילות חומרים ישירות למוח דרך עורק הצוואר הפנימי.

טכניקה אינפוזיה Microsurgery עכבר למשלוח ואלכוהול ממוקד לתוך מערכת העצבים המרכזית דרך עורק התרדמה הפנימי

גרורה במוח הפך צורך רפואי דחוף כמו השכיחות שלה גדלה תוך אופציות טיפוליות נותרו פליאטיבי. יצירת מודלים של בעלי חיים הניסיונות של גרורות במוח באמצעות זריקת intracarotid העורקת של תאי סרטן מקל מחקרים מכניסטית של ביולוגית המחלה והערכת משטרי התערבות רומן.

Cell הזרקת הסרטן Intracarotid לייצר מודלי עכבר של המוח גרור

אנו מציגים שיטה לבידוד תאי אנדותל וגרעינים מלומן של עורקי הצוואר של עכברים החשופים לתנאי זרימה יציבים או מופרעים כדי לבצע ניסויים באומיקה חד-תאית.

בידוד תאי אנדותל מהלומן של עורקי הצוואר של עכברים לניסויים רב-תאיים חד-תאיים

גרורות במוח הן גורם לתחלואה קשה ולתמותה בחולי סרטן. רוב המודלים של עכברי גרורות במוח מסובכים על ידי גרורות מערכתיות מבלבלות ניתוח של תמותה ותוצאות התערבות טיפולית. מוצג כאן פרוטוקול להזרקת קרוטיד פנימית של תאים סרטניים המייצר גידולים תוך גולגולתיים עקביים עם גידולים סיסטמיים מינימליים.

מידול גרורות במוח על ידי הזרקת עורק הצוואר הפנימי של תאים סרטניים

גידולים במערכת העצבים המרכזית (CNS) הם הגורם המוביל למוות הקשור לסרטן בקרב ילדים, וטיפולים מבוססי מערכת החיסון נבדקים יותר ויותר עבור חולים בניסויים קליניים. פרוטוקול זה מתאר שיטות להשתלת צינורית לוקו-אזורית בעכברים לצורך הערכה פרה-קלינית של עירויים אימונותרפיים המכוונים לגידולים במערכת העצבים המרכזית.

השתלת צינורית תוך גולגולתית עבור קולטן אנטיגן כימרי טורי (CAR) עירוי תאי T בעכברים

תיקון עורק התרדמה במודל עכברי לאחר הזרקה מחזיר את זרימת הדם לעורק מבלי להשפיע לרעה על פיזור החומר המוזרק. תיקון אתר ההזרקה מאפשר זריקות עוקבות דרך אותו עורק ומונע איסכמיה מוחית בזני עכברים חסרי מעגל שלם של וויליס.

הקלה על הזרקות חוזרות תוך קרוטיד במודלים של עכברים על ידי טכניקת תיקון אתר הזרקה חדשנית

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה כירורגית סטנדרטית לאינדוקציה של מפרצת צוואר במודל עכברי באמצעות ניתוח כירורגי יחיד.

מודל עכברי של היווצרות מפרצת קרוטיד

למד שיטת חליטות עורק הראשי לניתוח פרמקוקינטי של taxanes בעכברים. שיטה זו מאפשרת אספקת תרופה מבוקרת דרך קתטר מותאם אישית ומשאבה אוטומטית, ומספקת ייצוג מדויק יותר של קצבי חליטה קליניים בהשוואה לשיטות מסורתיות.

חליטות עורק הראשי לpharmacokinetic וpharmacodynamic ניתוח של taxanes בעכברים

גלה סרטונים נוספים