Name: ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 9 s
Description: למד מעקב אחר פרמטרים מערכתיים והמודינמיקה הכבדית בעכברים באמצעות מערכת DI ותוכנת LabChart. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של לחץ דם, זרימת דם ולחץ ורידי מרכזי במחקר פיזיולוגי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך על ידי Ministery הגרמני הפדרלי לחינוך ולמחקר (BMBF) במימון &quot;כבד רשת וירטואלית&quot;. אני רוצה להודות לפרנק שוברט ורנה גומפרט ממרכז התקשורת של Jena חולים האוניברסיטאי על עזרתם בהפקת הווידאו ויצירת האנימציה ואיזבל Jank להקלטת אודיו.

שיכון וכל ההליכים שבוצעו היו בהתאם לבעלי החיים הגרמנים רווחה חקיקה. 1 חיישני כיול (מלאו אחר הוראות של היצרן עבור חיישני כיול) 1.1) כיול צנתר מילר. טרום להשרות את קצה הצנתר במים או תמיסת מלח סטרילית ל30 דקות לפני לאזן (איפוס) וכיול. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את חיישן מילר לערוץ millar1 של מגבר גשר והכנס את קצה חיישן מילר לעמודת מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את ערך העמודה מים ל0 CMH 2 O. בחלון תוכנה לניתוח נתונים, לבחור גשר להגביר ולאפס אותו. ניתן להגדיר 0 CMH O 2 הערך הבסיסי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את ערך העמודה מים ל20 CMH 2 O. הפעל חלון תוכנת התקדמות ניתוח נתונים, ולהפסיק. בחר &quot;יחידות&quot; בחלון של גשר להגביר, להגדיר את נקודת ההתחלה של 0 ו20 CMH 2 O בהתאם. התאם את &quot;היחידה&quot; לCMH &lt;תת&gt; 2 O. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כייל את millar2 למדידת CAP באותה הדרך (להגדיר שורת שתי בסיס 90 ו110 CMH 2 O). </li></ol> 1.2) כיול זרימת דם בדיקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את הבדיקה למים ללא יונים. חבר את הבדיקה עם מערכת זרימת הבדיקה transonic. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחלון תוכנה לניתוח נתונים, לבחור קלט להגביר לאפס את זרימת הבדיקה. התאם את היחידות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על הכפתור כדי &quot;ערוץ מבחן&quot; כדי לאסוף את האות: אם יש לו את האות 3-4 בארים, זה אומר האות היא טובה. במקרה אות טובה נרכשה, ניתן להמשיך את ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על הכפתור &quot;אפס ערוץ&quot; וערוץ קנה מידה כדי לראות אם הערך כבר מכויל או לא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על הכפתור כדי &quot;ערוץ מידה&quot; למדידה מאוחר יותר. </li></ol> 2 הכן את העכבר להליך הכירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר בתא אינדוקציה ולהרדים את העכבר עם 2% isoflurane ו0.3 מ&quot;ל / חמצן דקות. הפעולה יכולה להתבצע אם רפלקס נסיגת הבוהן הקמצוץ של העכבר הוא נעדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הפרווה של אזורים כירורגית, הכוללים את הצוואר והבטן השמאלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר על שולחן הניתוח ולתקן אותה באמצעות קלטות. השתמש במשחת וטרינר על עיניים כדי למנוע יובש בתקופת המבצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח כרית גזה מתחת לצוואר לחשיפה אופטימלית של שדה הפעולה של צוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את שדה פעולה ואת מקום gauzes מעוקר כדי לכסות את העכבר רק עוזב את שדה הניתוח פתוח. </li></ol> מדידת .3 פרמטרים ויטל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את מחטי א.ק.ג. מתחת לעור לתוך כפות של עכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את חיישן הנשימה מתחת לחלק האחורי של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את הבדיקה הטמפרטורה לתוך פי הטבעת של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשומה טמפרטורה, א.ק.ג. וקצב נשימה של העכבר בתוכנת ניתוח נתונים. </li></ol> .4 צוואר מבצע לSניטור לב וכלי דם ystemic 4.1) לנתיחה כלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את הקו האמצעי של הצוואר, הנקודה של עצם הבריח אמצע, את הזווית של לסת תחתונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך אורכי 2 סנטימטר מהזווית של לסת תחתונה עד לנקודת האמצע של עצם הבריח שהוא 0.5 ס&quot;מ לצד השמאלי של קו האמצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את בלוטת submandibular, הפוך אותו ולכסות אותו עם גזה ספוגה מלוחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את וריד הצוואר, לנתח אותו ולמקם את שלושה 6-0 תפרי משי תחת הווריד לקשירה וקיבוע מאוחר יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את שריר sternocleidomastoid, להפריד אותו מהבטן מעולה של בטן omohyoid והאחורית של שריר digastric, ולמשוך אותו עם מפשק לחשיפה קלה של עורק התרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את העורק הראשי ולמקם את שלושה 6-0 תפרי משי תחת העורק לקשירה וקיבוע מאוחר יותר. </li></ol> 4.2) זרימת דם בעורק תרדמת מדידה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את transonicלחקור סביב העורק הראשי, לשמור אותו יציב, ולייעל את הקשר באמצעות ג&#39;ל אולטרסאונד או מלוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשומה זרימת דם מהירות של עורק התרדמה כפי שמצוין על המסך הקטן של מכשיר transonic באמצעות תוכנת ניתוח נתונים </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הבדיקה לאחר סיום המדידה </li></ol> 4.3) מדידת לחץ בעורק תרדמה (CAP) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ולקשור את הקצה הדיסטלי של עורק התרדמה ומהדק קצה הפרוקסימלי שלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 2 תפרי קיבוע סביב העורק הראשי. השתמש 10-0 prolene לתפר השהייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קטן בקיר הקדמי של כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר מילר ולתקן את זה עם תפרים-הוצב מראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את CAP בתוכנת ניתוח נתונים. </li></ol> 4.4) זרימת דם מדידת וריד הצוואר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את וריד הצוואר ומניח את זרימת הבדיקה transonic כדי למדוד את קצב הזרימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את קצב הזרימה בתוכנת ניתוח נתונים. </li></ol> 4.5) מדידת לחץ ורידים מרכזי (CVP) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצמד את הקצה הפרוקסימלי של וריד הצוואר ולקשור את הקצה הדיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך חתך קטן באמצעות microscissors על הקיר הקדמי של כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את הקטטר מלא הנוזל ולתקן אותה עם קווי תפר-הוצב מראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את CVP בתוכנת ניתוח נתונים. </li></ol> .5 בטן מבצע לרכישת פרמטרים המודינמיים כבדית 5.1) זיהוי כלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך רוחבי בבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Eventerate המעיים בצד השמאל ולכסות עם גזה רטובה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את נחות וריד נבוב, וריד השער, עורק כבד הנפוץ ועורק כבד התקין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זרוק כמה מלח חם בבטן ועל פני השטח של המעיים כל 5 דקות במשך כל נוהל המעקב. </li></ol> 5.2 מדידה) של זרימת דם פורטל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את וריד השער. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 6-0 משי תחת וריד השער כדי להקל על הסרת הכלי בעת ביצוע זרימת הבדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את זרימת הבדיקה transonic סביב וריד השער ולמדוד את זרימת דם שיעורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את קצב הזרימה של וריד שער הדם. </li></ol> 5.3 מדידה) של זרימת עורק כבד נפוצה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את העורק הכבד הנפוץ בזהירות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח תפר אחד 6-0 משי סביב הספינה כדי להקל על ההרמה של כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את זרימת הבדיקה סביב העורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למדוד את זרימת הדם שלה ולרכוש את הנתונים. </li></ol> 5.4) מדידת לחץ וריד שער (PVP) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר סניף אחד של וריד mesenteric עם מעט תופעות סניפים, אשר מנקז ישר לתוך וריד השער. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ולקשור את הקצה הדיסטלי של וריד mesenteric נבחר. ודא כי קשירה קרובה לצינור המעיים. ולקשור סניפים הקטנים שלה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 2 fixing תפרים באמצעות 6-0 prolene סביב הווריד. הנקודה של הליך זה המפתח היא להימנע ממגע בעורק mesenteric כאשר ligating הווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצמד את הקצה הפרוקסימלי של וריד השער. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 2 תפרי שהייה באמצעות 10-0 prolene. דימום כמה יתרחש מאז תפר השהייה צריך לחדור את דופן כלי הדם של וריד mesenteric בסדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קטן בווריד באמצעות microscissor באלכסון בזווית של 45 מעלות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס קטטר מילר דרך וריד mesenteric לוריד הפורטל ולתקן אותה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את לחץ וריד שער. בסופו של ההליך, להקריב את העכברים על ידי exsanguination תחת הרדמה. </li></ol>

<ol><li>Albuszies, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+increased+cardiac+output+on+hepatic+and+intestinal+microcirculatory+blood+flow%2C+oxygenation%2C+and+metabolism+in+hyperdynamic+murine+septic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock.</a> Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).</li>
<li>Bernhard, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphatidylcholine+molecular+species+in+lung+surfactant%3A+composition+in+relation+to+respiratory+rate+and+lung+development%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Respir.+Cell+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25 (6), 725-731 (2001).</li>
<li>Cheever, A. W., Warren, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+vein+ligation+in+mice%3A+portal+hypertension%2C+collateral+circulation%2C+and+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow.</a> 18, 405-407 (1963).</li>
<li>Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+increase+of+portal+pressure+during+the+acute+and+chronic+phases+of+murine+schistosomiasis+mansoni+and+its+reversibility+after+treatment+with+oxamniquine%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Trop%22%5BJournal%5D)">On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine.</a> Acta Trop. 89 (1), 13-16 (2003).</li>
<li>Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venous+resistance+increases+during+rat+anaphylactic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Venous resistance increases during rat anaphylactic shock.</a> Shock. 29 (6), 733-739 (2008).</li>
<li>Geerts, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+three+research+models+of+portal+hypertension+in+mice%3A+macroscopic%2C+histological+and+portal+pressure+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Exp.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation.</a> Int. J. Exp. Pathol. 89 (4), 251-263 (2008).</li>
<li>Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoperative+vital+and+haemodynamic+monitoring+using+an+integrated+multiple-channel+monitor+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats.</a> Lab Anim. 44 (3), 254-263 (2010).</li>
<li>Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+noninvasive+computerized+tail-cuff+system+for+measuring+blood+pressure+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice.</a> Hypertension. 25 (5), 1111-1115 (1995).</li>
<li>Kuga, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+local+autoregulation+of+cerebrovascular+blood+flow%3A+a+deep-brain+imaging+study+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol.%22%5BJournal%5D)">Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse.</a> J. Physiol.. 587 (Pt 4), 745-752 (2009).</li>
<li>Muraki, T., Strain Kato, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((difference+in+the+effects+of+morphine+on+the+rectal+temperature+and+respiratory+rate+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 89 (1), 60-64 (1986).</li>
<li>Nielsen, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+volume+measurement+in+mice+by+conductance+catheter%3A+evaluation+and+optimization+of+calibration%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration.</a> Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293 (1), H534-H540 (2007).</li>
<li>Sakamoto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+of+portal+hypertension+and+hepatic+blood+flow+in+cirrhotic+rats+by+oestrogen%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen.</a> Eur. J. Clin. Invest. 35 (3), 220-225 (2005).</li>
<li>Reverter, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+deep+sedation+on+the+accuracy+of+hepatic+and+portal+venous+pressure+measurements+in+patients+with+cirrhosis%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Int%22%5BJournal%5D)">Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis.</a> Liver Int. 34 (1), 16-25 (2014).</li>
</ol>

החוקרים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

ניטור של פרמטרים המודינמיים בכבד הוא כלי מחקר חשוב בHepatology וניתוח כיס המרה. רכישה של נתונים המודינמית כבד מסייעת לאפיין את ההשפעה של נהלי כיס המרה על מערכת הדם. רכישה של נתונים המודינמית כבד נחוץ גם כדי לחקור את ההשפעה של תרופות המשפיעות לחץ פורטל וזרימת פורטל, למשל, בהתאם לצורך במחקרי הערכת תרופות vasoactive. למרות גדליו הקטנים, את הפרמטרים החיוניים, מערכתיים ופרמטרים המודינמיים בכבד יכולים להיות במ...

המטרה הכללית של הווידאו הזה הייתה להדגים הליך ניטור בזמן אמת לרכישת פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים. הרציונל לפיתוח הליך זה הוא גדול הערך שלה עבור התערבויות ניסיוניות בעכברים שדורשים קבלת פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים. ההליך יכול להיות מיושם על בעלי חיים תמימים ובזמן או לאחר התערבות כירורגית ניסיונית hepato-מרה ניתנה, כגון כריתה חלקית, קשירת וריד שער והשתלה כבד. רכישה של נתונים המודינמית כבד במכרסמים דורשת הליך פולשני המוצע. לא ניתן להשיג זלוף כבד הלא פולשני. עם זאת, יש חלופות לרכישת לחץ הדם המערכתי. טכניקות ניטור כגון טכניקת שרוול זנב 8 כבר נוצלו לרכישת לחץ הדם בשני חולדות ועכברים. טכניקת שרוול הזנב יכולה להיות מיושמת בconsciבעלי חיים מפוקפקים. כאשר מודדים את לחץ הדם, את החיה צריכה להיות ממוקמת וקבוע בתנוחה לא נוחה ספציפית. במדריך של מכשיר זנב השרוול, היצרן קובע כי עכברים עלולים להיות עצבניים והדגישו שעשויה להפחית את זרימת הדם בזנב. תחת נסיבות ש, לחץ דם ההיקפי שנרכשו בזנב עשוי להיות נמוך בהרבה מלחץ הדם המרכזי. נוהל המעקב המלא בוצע עם צג מרובה ערוצים משולב באמצעות שורה של חיישנים לרכישת נתונים. לחץ הדם היה מתקבל על ידי הכנסת קטטר לתוך הכלי המתאים לאחר נתיחה זהירה מייקרו וחשיפה מתחת למיקרוסקופ. קצב הזרימה שנמדד על ידי הצבת זרימת בדיקה transonic מסביב לכל כלי. אנחנו כבר דיווחו נוהל מעקב במהלך ניתוח דומה לחולדות וכתוצאה מסדרה מקיפה של הנתונים המודינמית פיסיולוגיים דומים לSinglנתוני דואר דיווחו מקבוצות אחרות 7. לכן אנחנו נחשבים בהליך זה כדי לייצג את בסיס טוב להתאמת לעכבר, מינים פי 10 קטנים יותר מהחולדה. ההבדל העיקרי להליך העכברוש הוא השימוש בצנתרי מילר לרכישת נתונים בלחץ דם ולא מערכת צנתר מבוסס נוזל. נתוני זרימה גם נרכשו עם בדיקות זרימת transonic, רק אלה קטנים בהרבה לכלי עכברוש המקבילים. בשל גודלו הקטן של בעלי החיים, מכשור של עכברים הוא מאתגר מבחינה טכנית, אבל אפשרי. ברגע המכשור יושלם, רכישת נתונים וניתוח נתונים חיים העיקרי הוא פשוטה, שכן קובץ הגדרה מוגדר מראש יכול לשמש. קובץ ההגדרה יש להגדיר פעם אחת בתחילת סדרה של ניסויים וניתן לאחסן ולהשתמש בהם לכל הניסויים הבאים. עד עכשיו אנחנו מוחלים בהליך זה כדי להעריך את ההשפעות המודינמית כבד בניסויים חריפים. מדדנו CAP וPVP לפני ומייד לאחר 70% כריתה חלקית (PH) ובהידוק / ​​ניסויים מהדק-de. אנחנו הידקתי את רצועת hepato-התריסריון של האונה הימנית המייצגת 20% מהכבד המוני ואחרי הידוק קצר (5min) של החציון ואונה לרוחב שמאל מייצג לחלוטין 90% מהמסה הכבד. De-ההידוק התחיל עם שחרור המהדק מהאונה הימנית ואחריו לשחרר את החציון ואונה לרוחב עזבה. זמן הידוק מקסימאלי היה מתחת 10 דקות.

<table><tbody><tr><td>פאוורלאב 16/30&nbsp;</td><td>מגבר גשר מרובע ADInstruments</td><td>PL3516</td><td></td></tr><tr><td>מגבר גשר</td><td>ADInstruments</td><td>FE224</td>&<td>nbsp;</td></tr><tr><td>Animal Bio Amp</td><td>ADInstruments</td><td>FE136</td><td></td></tr><tr><td>אלקטרודות מחט עבור FE136 (3 pk)</td> <td>ADמבנים</td><td>MLA1213</td><td></td></tr><tr><td>מודול מד זרימה פריבסקולרי</td><td>טרנסוני</td><td>TS420</td><td></td></tr><tr><td>Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB</td><td>טרנסוני</td><td>MA0.5PSB/MA1PSB</td><td></td></tr><tr><td>SPR-1000 צנתר לחץ</td><td>עכבר מכשירי Millar</td><td>841-0001</td><td></td></tr><tr><td>קטטר מלא בנוזלים&nbsp;</td><td>Terumo</td><td>SR+DU2619PX</td><td>26G, 0.64 פעמים; מספריים מיקרו 19 מ"מ</td></tr><tr><td></td><td>F&middot; S&middot; L</td><td>מס' 14058-09</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו סרפין</td><td>F&middot; S&middot; L</td><td>No.18055-05</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מהדקים מוליך</td><td>F&middot; S&middot; L</td><td>מס' 18057-14</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מלקחיים ישרים</td><td>F&middot; S&middot; L</td><td>מס' 00632-11</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מלקחיים מעוקלים</td><td>F&middot; S&middot; L</td><td>מס' 00649-11</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>F&middot; S&middot; L</td><td>מס' 12061-01</td><td></td></tr><tr><td>6-0 משי</td><td>אתיקון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6-0 פרולן</td><td>אתיקון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>7-0 פרולן</td><td>אתיקון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10-0 פרולן</td><td>אתיקון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מכשיר חיתוך זנב&nbsp;</td><td>מעבדת קנט סיינטיפיק</td><td></td><td>www.kentscientific.com</td></tr><tr><td>תרשים7</td><td>ADIתוכנה</td> לניתוח נתונים<td></td><td>&nbsp;</td></tr></tbody></table>

ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים

Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

השימוש במודלים של עכברים במחקר ניסיוני יש חשיבות עצומה ללימוד פיזיולוגיה של כבד והפרעות pathophysiological. עם זאת, בשל גודלו הקטן של העכבר, פרטים טכניים של הליך הניטור תוך הניתוחי המתאים לעכבר תוארו לעתים רחוקות. בעבר שכבר דווח בנוהל מעקב כדי לקבל פרמטרים המודינמית לחולדות. עכשיו, אנחנו מותאמים ההליך לרכישת פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים בעכברים, מינים פי עשר קטנים יותר מחולדות. סרט זה מדגים את המכשור של בעלי החיים, כמו גם את תהליך רכישת הנתונים הדרושים כדי להעריך פרמטרים המודינמיים מערכתיים וכבדים בעכברים. פרמטרים חיוניים, כולל טמפרטורת גוף, קצב נשימה וקצב לב נרשמו לאורך כל ההליך. פרמטרים המודינמית מערכתיים מורכבים של לחץ בעורק התרדמה (CAP) ולחץ מרכזי ורידים (CVP). פרמטרים זלוף כבדית כוללים פורטל vלחץ עין (PVP), קצב זרימת פורטל וכן את קצב הזרימה של העורק המשותף בכבד (טבלת 1). מכשור ורכישת נתונים כדי להקליט את הערכים נורמלים הושלמו בתוך 1.5 h. פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים נשארו בטווח נורמלי במהלך הליך זה. הליך זה הוא מאתגר אבל אפשרי. יש לנו כבר מיושם בהליך זה כדי להעריך פרמטרים המודינמיים בכבד בעכברים נורמלים, כמו גם במהלך 70% כריתה חלקית ובאונת כבד הידוק ניסויים. אומר PVP לאחר כריתה (n = 20), הייתה 11.41 ± 2.94 CMH 2 O שהיה גבוה באופן משמעותי (P &lt;0.05) מאשר לפני הכריתה (6.87 ± 2.39 CMH 2 O). התוצאות של אונת כבד מהדקת ניסוי הצביעו על כך שנוהל מעקב זה הוא רגיש ומתאים לאיתור שינויים קטנים בלחץ פורטל וקצב זרימת פורטל. לסיכום, הליך זה הוא אמין בידיהם של מיקרו מנתח מנוסה אבל צריך להיות מוגבל לexperiments לאן עכברים נחוצים ביותר.

פרמטרים חיוניים של העכברים כגון קצב נשימה וקצב לב הם ללא ספק הרבה יותר גבוהים מאשר בחולדה. אומר לחץ דם מערכתי ולחץ וריד הצוואר דומה לערכי חולדה ואפילו דומים לנתונים האנושיים. נתונים המודינמית בדיה הם ללא ספק שונים. השגנו ערכים נורמלים מ8 עכברים. זרימת דם פורטל בעכברים נורמלים נעה בין 1.6-2.3 מ"ל / דקה. לזרום בעורק הכבד הנפוץ נע 0.10-.35 מ"ל / דקה. לחץ וריד שער בבעלי חיים נורמלים היה במגוון הרחב 4.4-11.2 CMH ...

הסרט הזה מדגים כיצד לרכוש פרמטרים המודינמיים מערכתיים וכבדים בעכברים. כל הניטור כולל רכישה של פרמטרים חיוניים, לחץ מערכתי בדם, לחץ ורידים מרכזיים, קצב זרימת עורק כבד נפוץ, ולחץ וריד שער, כמו גם את קצב זרימת הפורטל בעכברים.

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. ...

בסרט זה מודגם הליך הניטור של המודינמיקה מערכתית וכבדית ועכברים. הניטור כולל רכישת פרמטרים חיוניים, לחץ דם מערכתי, לחץ ורידים מרכזיים, לחץ וריד פורטלי, כמו גם קצב זרימת הפורטל בעכברים. מה שדרוש להליך הניטור המלא הוא מחשב עם תרשים מעבדה שבע, מיקרוסקופ סטריאו ומכונת הרדמה ומערכת DI.רכיבים מערכת DI. הרכיבים כוללים זמן מעבר, כלי דם, מד זרימה, מעבדת חשמל וגשר מרובע. לצורך רכישת נתונים, אנו זקוקים גם לטמפרטורה ולמרכך אותות א.ק.ג להקלטה, טמפרטורת הכוונה ודופק.הנה המכשירים שאנחנו צריכים. חומרי התפרים הדרושים לנו הם שישה אפס משי, שש אפס פרולין, שבע אפס פרולין, 10 אפס פרולין. זהו חיישן הטמפרטורה, חיישן האק"ג וחיישן הנשימה.זוהי בדיקת זרימת הדם, MA PSB אחד למדידת קצב הזרימה של וריד הפורטל. זוהי בדיקת זרימת הדם, MA 0.5 PSB למדידת קצב הזרימה של עורק הגוף המשותף, עורק הצוואר ווריד הגוף. זהו תיאטרון Milli C, מתמר לחץ רגיש ביותר למדידת לחץ הדם.כיול תיאטרון Milli C. חבר חיישן מילר אחד לשני הערוצים של מילר, המוגדר לרכישת לחץ וריד פורטל. הכנס את קצה חיישן מילר למילימטר עמוד המים.ראשית, הגדר את ערך עמודת המים לאפס סנטימטר מים בתרשים מעבדה חלון שבע. בחר גשר, הגברה ואפס אותו.הפעל את ההתקדמות ולאחר מכן עצור. וכך נוכל להביא את הערך הבסיסי לאפס סנטימטר מים.לאחר מכן הגדר את ערך עמוד המים ל -20 סנטימטר מים. הריצו את ההתקדמות ואז עצרו כאן. מוצג קו הבסיס של עמוד מים 20 סנטימטר.בחר יחידות בחלון. הגדר את קו הבסיס של מים אפס ו -20 סנטימטר לערך המתח המתאים. כוונן את היחידה לסנטימטר כיול בדיקת זרימת דם במים.הכניסו את הגשושית למים נטולי יונים. חבר את הגשושית עם מערכת בדיקת זרימה טרנסונית וחלון מנגולד מעבדה. בחר קלט amplify כדי לאפס את בדיקת הזרימה.התאם את היחידות. לחץ על הכפתור כדי לבדוק את הערוץ כדי לאסוף את האות. אם לאות יש שלושה עד ארבעה פסים, זה אומר שהאות טוב.במקרה שנרכש אות טוב, נוכל להמשיך הלאה. לחץ על הכפתור כדי לראות ערוץ כביש וערוץ קנה מידה כדי לראות אם הערך כויל או לא. לחץ על הכפתור כדי למדוד ערוץ למדידה מאוחרת יותר והפוך את העכבר עם 2% ISO פלואור ו-0.3 מיליליטר לדקה חמצן.תקן את העכבר על שולחן הניתוחים בעזרת כרית חימום. הניחו כרית גזה מתחת לצוואר לחשיפה אופטימלית של שדה הניתוח. הכנס את מחטי האק"ג תת עורית להפסקה.הנח את חיישן הנשימה מתחת לגב העכבר. הנח את בדיקת הטמפרטורה לתוך פי הטבעת של העכבר. רשום את טמפרטורת העכבר, א.ק.ג וקצב הנשימה במעבדה.תרשים שבע ניתוח צוואר לניטור קרדיווסקולרי מערכתי. לחטא את צוואר העכבר. זהה את הקו האמצעי של הצוואר, הנקודה האמצעית של עצם הבריח, זווית הלסת התחתונה.בצע חתך אורכי של שני סנטימטרים מזווית הלסת התחתונה לנקודה האמצעית של עצם הבריח, כ- 0.5 סנטימטר בצד שמאל של קו האמצע. אנימציה זו תדגים את האנטומיה של הצוואר. אנו יכולים לזהות את הבלוטה התת-לסתית מיד לאחר פתיחת החתך.לאחר הפיכת הבלוטה התת-לסתית, אנו יכולים לזהות את הווריד האולרי החיצוני ואת ענפיו. מתחת לווריד האולרי אנו יכולים לראות את שכבת השריר, כולל שריר המסטואיד הלאטו החזה, הבטן העליונה של האומוהיואיד ושריר ההיואיד החזה. לאחר משיכת השרירים הללו הצידה, אנו יכולים לזהות את עורק הצוואר בהתמקדות מיוחדת בעורק הצוואר ובווריד ה-ula החיצוני.שני כלים אלה נחוצים להחדרת הסדים. כאן נדגים את ההליך הכירורגי. ראשית, מנתחים את תת הבלוטה, הופכים אותה ומכסים אותה בגזה גרבית מלוחה.אנו יכולים לזהות את וריד האולה החיצוני. מנתחים מיד את וריד האוגלה ומניחים 3 6 0 תפרי משי, אחד לקשירה והשניים האחרים לקיבוע. שחרר את דופן כלי הדם על ידי חיתוך רקמת השומן על פני הווריד.הקפד לא לפגוע בדופן הכלי, אחרת זה יגרום לדימום חמור. לאחר מכן הפרד את שריר המסטואיד החזה של אפלטון, הבטן העליונה של שריר האומוהיואיד ושריר הירכתיים של השריר. משוך את שריר המסטואיד החזה הצידה בעזרת מפרק.לאחר מכן נוכל לזהות את עורק הצוואר. נתח את עורק הצוואר והניח שלושה תפרים לקיבוע וקשירה עם שש מדידת זרימת דם בעורק הצוואר אפס. הנח את הגשושית הטרנסונית MA 0.5 PSB סביב עורק הצוואר.שמור על יציבות. ייעל את המגע באמצעות ג'ל אולטרסאונד או מי מלח. רשום את קצב זרימת הדם של עורק הצוואר כפי שמצוין על המסך הקטן של המכשיר הטרנסוני.בעזרת תרשים מעבדה שבע, הסר את הגשושית לאחר השלמת המדידה. מדידת לחץ עורק הצוואר קושרת את הקצה הדיסטלי של מהדק עורק הצוואר. סופו הקרוב.קושרים את תפרי הקיבוע באופן רופף למועד מאוחר יותר. תיקון תיאטרון מליה הנח תפר הרמה אחד באמצעות 10 אפס פרולין על הקיר הקדמי. כדי להקל על פתיחת החתך, בצע חתך קטן בדופן הקדמית של הכלי.הכנס את תיאטרון מליה ותקן אותו. שחרר את המהדק. רשום את לחץ עורק הצוואר באמצעות תרשים שמאלי של מדידת זרימת דם של שבעה ורידים אולו.מדוד את זרימת הדם של וריד האולו באמצעות חבל זרימה טרנסוני MA 0.5 P sb. רשום את קצב הזרימה. הסר את הגשושית לאחר השלמת המדידה, מדידת לחץ ורידים מרכזי מהדק את הקצה הפרוקסימלי של הווריד האולרי כמו לקשור את הקצה הדיסטלי.חותכים חתך קטן בעזרת מספריים מיקרו. הכנס את הקטטר המלא בנוזל, תקן אותו בעזרת קווי תפר שהונחו מראש. שחרר את המהדק.רשום את הלחץ הוורידי המרכזי ניתוח בטן לרכישת המודינמיקה של הכבד. בצע חתך רוחבי בבטן. הוציאו את המעיים לצד שמאל וכסו אותו בגזה רטובה.לאחר הוצאת המעיים, אנו יכולים לזהות את הווריד הנבוב התחתון, וריד הפורטל, עורק הכבד המשותף ומדידת זרימת הדם הנכונה של עורק הכבד. נתח את וריד הפורטל. הנח שישה תפרי משי אפס מתחת לווריד הפורטל כדי להקל על הרמת הכלי.הנח את בדיקת הזרימה MA PSB אחד סביב הכלי. מדוד את קצב זרימת הדם שלו. רשום את הנתונים, הסר את הבדיקה.לאחר השלמת המדידה, מדידת זרימת עורק הכבד המשותף, זהה את עורק הכבד המשותף, נתח אותו בזהירות. הנח 1 6 0 תפר משי כדי להקל על הרמת הכלי. הנח את בדיקת הזרימה MA 0.5 PSB.מדוד את זרימת הדם שלו ורכוש את הנתונים. הסר את הגשושית לאחר השלמת פורטל המדידה, מדידת לחץ וריד, בחר ענף אחד של הווריד המזנטרי עם מעט ענפי אתר, המתנקז היישר לווריד הפורטל כפי שמוצג במקום האנימציה. שני תפרים מקבעים סביב הווריד.מאוחר יותר הם ישמשו לתיקון מקום הארז המילי. שני תפרים באמצעות 10 אפס פרולין. אנו יכולים גם להניח תפר הרמה אחד על הקיר הפנימי של הווריד, מה שאמור להקל על הרמת הקיר הקדמי.כדי לפתוח את החתך במלואו, בצע חתך קטן על הווריד בעזרת מספריים מיקרו. הכנס את ה-milli CED לווריד המזנטרי. התקדמו למפגש וריד הפורטל כדי לרכוש את וריד הפורטל לחץ.כעת נדגים את ההליך הכירורגי של מדידת הפורטל. לחץ ורידים קושר את הקצה הדיסטלי של הווריד המזנטרי שנבחר. ענפים קטנים קשורים הניחו שני תפרים מקבעים באמצעות שישה אפס פרולין.נקודת המפתח בהליך זה היא הימנעות מנגיעה בעורק המזנטרי. בעת קשירת מהדק הווריד, הקצה הפרוקסימלי של הווריד. הנח שני תפרים להישאר באמצעות 10 אפס פרולין משני צידי הווריד.יתרחש דימום מסוים מכיוון שתפרי השהייה צריכים לחדור לדופן כלי הדם של הווריד המזנטרי העדין. השתמש במיקרוס עדין כדי לבצע חתך קטן באלכסון בזווית של 45 מעלות. הכנס את תיאטרון ה-milli C בעדינות ותקן אותו.שחרר את המהדק. הכנס את תיאטרון ה-milli C עד שהגיע למפגש וריד הפורטל רשום את לחץ וריד הפורטל. הקטרד יכול להישאר במקומו עד לסיום הליך הניסוי.למרות הפרמטרים החיוניים בגודל הקטן, ניתן לנטר המודינמיקה מערכתית וכבדית גם בעכברים. עד כה, הליך זה בו השתמשנו מתאים להערכת השפעות המודינמיות של הכבד בניסויים אקוטיים או סופיים. כבר אספנו פרמטרים המודינמיים נורמליים של עכברים ויישמנו הליך זה על כריתת כבד חלקית של 70% והידוק לולאת כבד.ניסוי לצפייה בשינויים בזלוף הכבד. פרמטרים חיוניים כמו קצב נשימה, קצב לב הם כמובן הרבה יותר גבוהים מאשר באדום, כלומר לחץ דם מערכתי ולחץ ורידים אולאליים דומים כמו באדומים ואפילו דומים לנתונים אנושיים. הנתונים ההמודינמיים של הכבד הם כמובן שונים.זרימת הדם הכוללת והנורמלית נעה בין 1.6 ל-2.3 מיליליטר לדקה הזרימה בעורק הכבד נעה בדרך כלל בין 0.1 ל-0.35 מיליליטר לדקה. לחץ השער הוא בטווח שבין 4.4 ל-11.2 סנטימטר מים, הלחץ הממוצע של וריד הפורטל לפני ואחרי 70% כריתת כבד חלקית עם 6.9 ו-11.4 סנטימטר מים, שהיה במקביל לשינויים בבני אדם או בחיות ניסוי אחרות. זה מצביע על כך שהליך ניטור ישיר זה רגיש ומדויק להערכת פרמטרים המודינמיים אלה.תוצאות ניסוי אונת הכבד הראו כי ניתן לזהות את השינויים הקטנים של זלוף הכבד על ידי הליך ניטור זה. לכן, ניתן להשתמש בהליך זה בתחומי מחקר ניסיוניים רבים כגון ניתוחי כבד והתערבות תרופתית לתיעוד שינויים המודינמיים. לאחר מכן.

monitoring-of-systemic-and-hepatic-hemodynamic-parameters-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אקו Transthoracic מציעה שיטה לא פולשנית להערכת תפקוד הלב בעכברים. שילוב של אולטראסאונד דופלר שיטות הדמיה ניתן להשתמש כדי להשיג מדידות ממדי של הלב ואת זרימת הדם intracardiac, אשר יחדיו מספקים הערכה של הסיסטולי והדיאסטולי לב וביצועים.

אקו Transthoracic ב עכברים

מטרת פרוטוקול זה היא להעריך את לחץ הדם המערכתי בעכברים הנעים בחופשיות באמצעות מכשירי רדיו-טלמטריה מושתלים.

מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה

דימום בלתי מבוקר, גורם חשוב לתמותה בקרב חולי טראומה, יכול להיות מעוצב באמצעות חתך כבד רגיל במודל Murine. מודל זה גורם איבוד דם עקבית, הישרדות, ומאפשר בדיקות סוכני המוסטטי. מאמר זה מספק את שלב אחר שלב תהליך לבצע מודל זה יקר.

הלם Hemorrhagic בלתי מבוקר מעוצב באמצעות laceration הכבד בעכברים עם ניטור ההודינמי בזמן אמת

כאן נתאר פרוטוקול מפורט למדידות פולשנית של פרמטרים והמודינמיקה כולל הפורטל לחץ, זרימת הדם splanchnic ספיקת הדם מערכתית על מנת לאפיין את התסמונת הפורטל עם יתר לחץ דם אצל חולדות.

אפיון והמודינמיקה פולשנית של התסמונת פורטל-יתר לחץ דם אצל חולדות זה קשה וחיוור.

כאן אנו מתארים ומשווים שתי עמדות לקבלת השקפה של ארבעה קאמריים בעכברים. תנוחות אלה מאפשרות את כימות התפקוד הימני של הפונקציה, לספק תוצאות דומות, ניתן להשתמש לסירוגין.

המדידה האקוקרדיוגרפית של פרמטרים של הימני החדרית בעכבר

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבצע הערכה פולשנית הומודינמיקה של החדר הימני והעורק הריאתי בעכברים באמצעות גישה לניתוח פתוח בחזה.

פולשנית הערכה היפודינמית עבור מערכת המוח הימני ואת ההיפוקסיה המושרה לחץ דם ריאתי בעכברים

פרוטוקול זה מספק הליך שלב אחר שלב לביצוע מתן מינון בולוס תוך ורידי מרובים וניטור המודינמי פולשני בעכברים. חוקרים יכולים להשתמש בפרוטוקול זה לבדיקת תרכובת טיפולית עתידית ליתר לחץ דם בעורק הריאה.

מינון בולוס תוך ורידי מרובים והערכה המודינמית פולשנית במודל יתר לחץ דם של עורק ריאתי בעכבר הנגרם על ידי היפוקסיה

פעימות הורמון luteinizing (LH) הוא סימן היכר של תפקוד הרבייה. אנו מתארים פרוטוקול להפעלה מרחוק של אוכלוסיות נוירונים ספציפיות הקשורות לאיסוף דם אוטומטי סדרתי. טכניקה זו מאפשרת אפנון הורמונלי מתוזמן, ריבוב ומזעור השפעות מניפולציה על רמות LH בבעלי חיים הנעים בחופשיות מודעת, וללא הפרעה.

הפעלה עצבית מרחוק יחד עם דגימת דם אוטומטית כדי לגרום ולמדוד הורמון luteinizing במחזור בעכברים

אולטרסאונד דופלר מהיר במיוחד (UFUS) עם רזולוציה מרחבית גבוהה (100 מיקרומטר) ורגישות מייצג שיטת הדמיה לא פולשנית מתאימה להשגת סקירה איכותית מקיפה של כלי הדם בכבד. UFUS גם מקל על מדידות כמותיות של המיקרו-כלי דם, במטרה לשפר את ההבנה שלנו לגבי מנגנוני מחלות כלי דם.

הדמיה וכימות של כלי הדם בכבד של עכברים באמצעות אולטרסאונד דופלר מהיר במיוחד

אובדן של רפלקס ליישר שימש עוד פונדקאית התנהגותיות סטנדרטית לחוסר הכרה, המכונה גם היפנוזה, בחיות מעבדה. שינויים ברגישות לחומר הרדמה נדיפים הנגרמים על ידי התערבויות תרופתיים יכולים להיות מזוהים עם מערכת מבוקרת בקפידה תפוקה גבוהה הערכה, אשר עשוי להיות מותאמת לאספקה ​​של כל טיפולי בשאיפה.

הערכת שינויים בנדיפות כללית הרדמה רגישות של עכברים לאחר התערבות תרופתי מקומית או מערכתית

למד מעקב אחר פרמטרים מערכתיים והמודינמיקה הכבדית בעכברים באמצעות מערכת DI ותוכנת LabChart. שיטה זו מאפשרת מדידה מדויקת של לחץ דם, זרימת דם ולחץ ורידי מרכזי במחקר פיזיולוגי.

ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים

גלה סרטונים נוספים