איבר מרוחק איסכמי אכשור קד: טכניקת neuroprotective במכרסמים

המטרה הכוללת של הליך זה היא לספק איסכמיה בגפה האחורית שמתנה רקמות מרוחקות כנגד לחץ שלאחר מכן. לדוגמא, הרשתית מפני פגיעה קלה. זה מושג על ידי כיול ראשון של מד המונומטר הידני של אינגל

לאחר מכן, החיה מורדמת ומונחת על כרית חימום. ואז מורחבת רגלו האחורית של החיה והשרוול מונח למקומו. לבסוף, איסכמיה מרחוק מתבצעת על ידי ניפוח השרוול עם המשאבה, ניפוח השרוול וחזרה על התהליך בפעם השנייה.

בסופו של דבר, כאשר מיושמים לפני פגיעת אור, איסכמיה מרחוק משמשת כדי להראות שיפור בתפקוד הרשתית ובמספר קולטני האור העוברים אפופטוזיס. שיטה זו יכולה לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח, כגון כיצד מושרה הגנה עצמית עם התניה מוקדמת איסכמית מרחוק לביצוע מעקב אחר טמפרטורת העור בזמן אמת. פתח את תוכנת הקלטת הטמפרטורה, התאם את הגדרת הטמפרטורה בין 30 ל-35 מעלות צלזיוס, ואת תדירות הדגימה לכל 100 אלפיות השנייה באמצעות שרוול זרוע יילודים בגודל 2 עבור חולדה במשקל 250 עד 550 גרם, חבר את השרוול למד הלחץ של ה-fome באמצעות מתאם במידת הצורך.

לאחר מכן, רוקן את השרוול על ידי שחרור שסתום שחרור האוויר או ניתוק צינור השרוול מהמתאם. ודא שלא נשאר לחץ בצינור ומחט המונומטר מונחת באפס בתוך המלבן הסגלגל. לאחר מכן כדי לבדוק את הלחץ בין הצינור, מד לחץ ושיעול.

השתמש במשאבות עדינות של נורת הניפוח כדי לנפח את השרוול עד שהמנומטר קורא 100 מיליגרם כספית. לאחר שווידאתם שהלחץ נשאר קבוע, רוקנו את השרוול על ידי פתיחה איטית של שסתום שחרור האוויר לאחר רדת החשיכה, והתאימו את החיה בהתאם לפרוטוקול הטקסט. ודא שיש לו טונוס שרירים טוב על ידי צביטה של הגפה האחורית העליונה כדי לאשר שיש מספיק שריר.

לאחר הרדמת בעל החיים על פי פרוטוקול הטקסט, בדוק את עומק ההרדמה על ידי הארכת הרגל וצביטת העור בחלק התחתון של כף הרגל. לאחר מכן מרחו דמעות מלאכותיות. הנח את החולדה על כרית חימום או על צינורות דוד מים במחזור במצב נוטה כאשר כריות כף הרגל של הגפיים התחתונות פונות כלפי מעלה.

כדי ליישם את בדיקת טמפרטורת העור, האריכו את רגל החולדה שתעבור איסכמיה והניחו היטב את בדיקת העור על כרית כף הרגל, ומקמו אותה כדי למקסם את המגע בין בדיקת הטמפרטורה לעור. לאחר מכן השתמש בסרט נייר כדי להדביק את הגשושית. בדוק את מיקום בדיקת העור על ידי מעקב אחר הטמפרטורה בתוכנת הקלטת הטמפרטורה למשך דקה עד שתיים.

ודא שטמפרטורת העור היא בין 30 ל-34 מעלות צלזיוס ונשארת יציבה. אחרת, כוונן את הגשושית לביצוע איסכמיה מרחוק. התחל עם שרוול מנופח וודא ששסתום לחץ האוויר סגור.

הארך את הרגל והקיף באופן רופף את השרוול בגפה האחורית העליונה. השתמש באצבע המורה ובאגודל כדי להאריך את הרגל ואת האצבעות התחתונות כדי לשמור על השרוול המשוחרר במקומו. כעת, העלו את לחץ השרוול ל-160 מילימטרים של כספית.

לאחר הגעה ללחץ הנכון, התחל את הטיימר ואת רישומי טמפרטורת כף הרגל. טמפרטורת כף הרגל צריכה לרדת בשתי מעלות צלזיוס לאחר חמש דקות של לחץ קבוע, לשאוב שוב ושוב את נורת הניפוח בהתפרצויות קצרות כדי לשמור על לחץ השרוול הרצוי ולשמור על מיקום השרוול מעל הברך של החיה לאורך כל האיסכמיה. ספק איסכמיה מרחוק באופן רציף למשך חמש דקות.

לאחר מכן שחרר את שסתום לחץ האוויר לחמש דקות זלוף לפני שתחזור על האיסכמיה המרוחקת. לאחר השלמת ההליך, רוקן את לחץ השרוול על ידי שחרור שסתום לחץ האוויר. בדוק את שינוי הטמפרטורה במהלך פרוטוקול איסכמיה.

לאחר מכן שחרר את השרוול. הניחו את החיה על כרית חימום והמשיכו לעקוב עד לאמבולטוריה. כאשר החיה הולכת, החזירו אותה לבית.

לבסוף לבצע פציעה קלה ולבצע את בדיקת המנהרה. על פי פרוטוקול הטקסט כפי שניתן לראות בבירור כאן, שרוול לחץ דם הממוקם מעל הברך המוגבה ליותר מ-160 מילימטר כספית עוצר את זרימת הדם לגפה האחורית. היעדר זרימת הדם הביא לירידה בטמפרטורת כף הרגל שהייתה נמוכה מטמפרטורת הליבה של החיה, וזו עלתה לאחר שהשרוול התרוקן בהתאם למצב הדרוש ל-RIP.

באיור זה, האלקטרורטינוגרמה המותאמת לחושך או ERG מחולדה רגילה מוגבהת עמומה הראתה קולטן אור גדול ותגובת רשתית פנימית להבזק בהיר שבוע לאחר פגיעת אור. הקלטות ה-ERG הראו ירידה חמורה במשרעת ביחס לביקורת, מה שמשקף את אובדן קולטני האור, עם זאת, התניה מוקדמת של הגפה האחורית באיסכמיה באמצעות פרוטוקול רפרפוזיה של שתיים על חמש דקות מיד לפני שהאיסכמיה הגנה על קולטני האור מפני פגיעת אור. פאנל זה מראה כי אמפליטודות ה-R-I-P-E-R-G היו גדולות יותר מפגיעה קלה באור בלבד עם הפחתה קלה בגל A.

לבסוף, שרוול הממוקם מתחת לברך אינו מגן על קולטני האור מפני פגיעות אור כפי שמשתקף במשרעות ה-ERG המופחתות הנראות כאן. ניתן לבצע שיטות כמו התניה איסכמית מרחוק על מנת לענות על שאלות נוספות כגון מהם המנגנונים של הגנה עצבית אנדוגנית וכיצד ניתן ליישם איסכמיה מרחוק כדי לשפר את התפקוד מפגיעה וניוון של מערכת העצבים המרכזית.