Name: איבר מרוחק איסכמי אכשור קד: טכניקת neuroprotective במכרסמים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-02T10:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: למד שיטת איסכמיה מבוקרת בגפה האחורית של חולדות להגנה על הרשתית מפני פגיעת אור. טכניקת preconditioning מרוחקת זו מפעילה מנגנוני נוירופרוטקציה אנדוגניים ומספקת מודל אמין למחקר מנגנוני הגנה עצמית במערכת העצבים המרכזית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחבר אסיר תודה על עזרתה של גברת שרון ספאנה (אוניברסיטת סידני) בניטור, טיפול וניסויים במכרסמים. המחבר מבקש להודות לפרופ' יונתן סטון ולד"ר דן ג'ונסטון על הסיוע בהכנת כתב היד הזה. תמיכה במימון לדוקטורט ניתנה על ידי אוניברסיטת סידני והמרכז האוסטרלי למצוינות בראייה.

הצהרת אתיקה: הפרוטוקול כדלקמן הנחיות טיפול בבעלי החיים של אוניברסיטת סידני, AEC # 5657. אלחוש אושר על ידי ועדת אתיקה של בעלי החיים (אוניברסיטת סידני, # AEC 5657). 1. הכנת ציוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשתמש במעקב טמפרטורת עור בזמן אמת. לעבור על מחשב, וחומרת רכישת נתונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוכנת הטמפרטורה להרחיב הקלטה ולהתאים את הגדרת טמפרטורה לבין 30-35 מעלות צלזיוס ותדירות דגימה לכל 100 אלפית שניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אופציונאלי: מדחום רקטלי הכנס על מנת להבטיח טמפרטורת ליבה נותר יציב ב37.5 מעלות צלזיוס. </li></ol> 2. כיול של המד לחץ הדם הידני <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר שרוול זרוע ילוד לsphygmomanometer.Use גודל 2 שרוול לחולדת 250-550 גר &#39;. מתאם ייתכן שיהיה צורך לחבר את צינורות שרוול למד לחץ הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את האוויר השרוול או על ידי התרופפות שסתום שחרור אוויר או ניתוק צינורות שרוול מלהתאיםאו. להבטיח שאין לחץ נשאר בצינור ואת מחט מד הלחץ מוטלת על אפס בתוך האליפסה / המלבן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את הלחץ בין צינורות, מד לחץ ושרוול. לנפח את השרוול עם משאבות עדינות של הנורה האינפלציה עד שקורא על מד הלחץ 100 מ&quot;מ כספית. ודא לחץ נשאר קבוע. להוציא את האוויר השרוול ידי פתיחת ערך שחרור האוויר לאט. </li></ol> 3. הכנת בעלי החיים הערה: בעלי חיים, כי הם לעבור פציעת אור דורשים adaption הכהה בלילה שלפני איסכמיה מרחוק. בעלי חיים עוברים נזק קל דורשים גידול (אור 12 שעות: מחזור כהה (5 סוויטה דה לוקס)) אפל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע איסכמיה המרוחקת בשני מכרסמים ער או anesthetised. ודא שיש לי חיות טונוס שרירים בריאים. להבטיח זאת על ידי צביטת הגפיים האחורי העליונים כדי לאשר יש הווה שריר נאות. הגנה מושרה RIP מפני פגיעת אור נבדקה בחולדות בישיבה עד גיל 6 חודשים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת anesthetised לRIP <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק חולדות עם זריקת intraperitoneal של 60 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין ו -5 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine. בדוק את עומק ההרדמה על ידי הרחבת הרגל וצובט את העור בחלק התחתון של כף הרגל. יש בעלי החיים לא רפלקס אם הוא anesthetised עמוק. החל דמעות מלאכותיות כדי למנוע יובש בקרנית תוך תחת הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים חולדות בשתי כרית חום או במחזור צינורות דוד כדי לשמור על טמפרטורת גוף קבועה של 37.5 מעלות צלזיוס. מקם את העכברוש במצב שכיבה עם כריות כף הרגל של הגפיים התחתונים פונות כלפי מעלה. ימין או שמאל האיבר עשוי לעבור איסכמיה מרחוק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנה ערה לRIP הערה: ער ניסויים בבעלי החיים דורשים שני אנשים. אדם אחד מרסן את החיה והאדם השני מפעיל את מד לחץ דם הידני. הנסיינים חייבים להיות בטוחים כדי לבצע את ההליך כאיפוק מעלה את הסיכון לפגיעה במפעילים. החולדות שעברו איסכמיה מרחוק חייבת להיות מותנות to איפוק במדריך. בהתאם להנחיות האינטואיטיבית איפוק במדריך צריך להיות התקדמות מ 30 שניות עד למקסימום של 5 דקות על פני מספר השבועות. בעלי חיים ביישנים שלא מצליחים להסתגל לריסון ספר צריכים להיות מחוץ ניסויים ער. לבסוף, איפוק ידני עשוי לגרום ללחץ (ואפשרות להציג את בלבול למחקר) לבעלי חיים ומחזור דמה (מיקום של שרוול ללא דלקת) יש להשתמש כדי לפרש במדויק תוצאות מחקר RIP. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך מגבת לתוך 15 סנטימטרים x 30-50 סנטימטר ומניח חתיכת הקצה הקצר בניצב לעמוד השדרה של החולדה, כיסוי הראש לראש הגפיים האחורי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתחוב את הקצה הקצר מתחת לגופו של העכברוש בחוזקה ומתחיל לעטוף את העכברוש עם הקצה הארוך הנותר של מגבת. אבטח את בעלי החיים עטופים תחת הזרוע במצב שכיבה. אם החולדה מוחזקת ביד השמאל, לשחרר את האיבר תקין של החולדה מהמגבת. </li></ol></li></ol> o 4. יישוםבדיקה טמפרטורת עור F <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הארך את הרגל של העכברוש שהוא לעבור איסכמיה ולמקם את הבדיקה העור על השודד. מקם את הבדיקה העור למקסם את הקשר בין הבדיקה הטמפרטורה והעור. בתוקף לדחוף את החללית לשודדת הדרכים ולהדביק את החללית עם קלטת נייר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את מיקום הבדיקה עור על ידי מעקב הטמפרטורה בתוכנת הקלטת טמפרטורה. ודא שטמפרטורת העור היא בין 30-34 מעלות צלזיוס ונשארה יציב. עקוב אחר טמפרטורת העור במשך 1-2 דקות. התאם את הבדיקה העור אם הטמפרטורה היא יציבה או מתחת ל -30 מעלות צלזיוס. </li></ol> 5. איסכמיה מרחוק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את האוויר השרוול ולהבטיח את שסתום לחץ האוויר סגור. הארך את הרגל ורופפת להקיף את השרוול על הגפיים האחורי העליונים. השתמש באצבע והאגודל להאריך את הרגל ואת הספרות נמוכה יותר כדי לשמור על השרוול הרופף בעמדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעלות את לחץ השרוול של החיה anesthetised 160 מ&quot;מ כספית, ובחיות ערה increASE לחץ השרוול 180 מ&quot;מ כספית. הערה: לחץ דם anesthetised של חולדות נע 120-140 מ&quot;מ כספית ועולה ל 160 מ&quot;מ כספית כאשר מודע. להתחיל הקלטות טיימר וטמפרטורת רגל פעם אחת הוא הגיע בלחץ הנכון. הערה: טמפרטורת הרגל צריכה לרדת ב -2 מעלות צלזיוס לאחר 5 דקות של לחץ מתמיד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על המיקום של השרוול מעל &quot;הברך&quot; של בעלי החיים ברחבי איסכמיה. לחץ השרוול יתחיל לרדת לאחר כמה דקות, או אם האיבר של החולדה נע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוב ושוב לשאוב את הנורה האינפלציה בפרצים קצרים כדי לשמור על צרור קצר החוזר ונשנה לחץ שרוול הרצוי של שאיבה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסכמיה מרחוק יכולה להיות מועברת ברציפות בין 5 ל 15 דקות. פרוטוקול reperfusion איסכמיה כולל 2 תקופות של 5 דקות עם איסכמיה reperfusion 5 דקות חלף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את האוויר בלחץ השרוול על ידי שחרור שסתום לחץ האוויר. בדוק את שינוי הטמפרטורה במהלך פרו איסכמיהtocol. שחרר את השרוול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמשיך עם ניסויים פציעה. בעלי חיים תחת השפעת ההרדמה יצטרכו להיות ממוקמים על משטח חום. תמשיך לעקוב אחר בעלי חיים עד אמבולטורי. לא ניתן להחזיר בעלי חיים לדיור עד הליכה. </li></ol> 6. אור פגיעה - רשתית ניוון דגם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dark להתאים את החיות הלילה (שעות 12-15). מייד לאחר איסכמיה אוויר מרוחק או איסכמיה דמה מרחוק (ריסון בעלי חיים) בעלי חיים במקום דיור פרספקס עם מזון ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור על תאורת ניאון (1,000 לוקס) ממוקמת מעל דיור פרספקס שעה 9 בבוקר ל -24 שעות. בעקבות חשיפה לאור, להחזיר את בעלי החיים ללעמעם תאורה מחזורית למשך 7 ימים. </li></ol> נהלי איסכמיה 7. לאחר מרחוק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערכת חזון עם electroretinogram (ERG): הערה: הגדרת ERG ובזק פרוטוקול אחרי ברנדלי ואבן 26. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dark להסתגל חיות לילה (12-15 שעות). תחתלעמעם תאורה אדומה להרדים בעלי החיים על ידי זריקת intraperitoneal של קטמין ו xylazine (60 מ&quot;ג / קילוגרם ו 5 מ&quot;ג / קילוגרם, בהתאמה). Mydriatic (סולפט אטרופין 1.0%), הרדמה קרנית (proxymetacaine 0.5%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל לחות קרנית העין (פולימר קרבומר) יורדת באופן מיידי לקרנית. החל ג&#39;ל עיניים ב 20 דקות במרווחים לשמור על הידרציה קרנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצייר חוט קשור ברפיון סביב גלגל העין כדי לסייע הקלטות ERG יציבים. צג טמפרטורה באמצעות בדיקה רקטלית ולשמור על טמפרטורת הגוף של בעלי החיים ב37-37.5 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את הראש בתוך תחום שילוב Ganzfeld. הערה: Ganzfeld הוא גירוי אור לתכנות מלא, המספק הבזקים כהוא אחידים מנוריות לעין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשום את electroretinogram באמצעות אלקטרודה מחוייט פלטינה 4 מ&quot;מ חיובית נוגעת קלות הקרנית וקוטר 2 מ&quot;מ אלקטרודה גלולה Ag / AgCl מוכנס לתוך הפה. התייחסות הן לאלקטרודות מחט נירוסטההוכנס מתחת לעור לתוך העכוז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא אותות עם הגדרת להקה עוברת מ0.3-1,000 הרץ (-3 dB), עם רכישה בשיעור 2 קילוהרץ (מכשירים לספירה). לאחר הקלטת ERG יציבה הוקמה נושא בעלי החיים להסתגלות כהה 10 דקות לפני תחילת הקלטות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את פרוטוקול הבזק כפי שתואר בעבר על ידי ברנדלי ואבן 26. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתכנת את משך הבזק (השתמשנו הבזקים 1-2 אלפית שני בזמן), ולהגדיר את עוצמתו ל-4.4 ל -2.0 יומן סקוטי cd.sm -2. השתמש הבזקים בהירים (cd.sm 2.0 יומן הסקוטי -2, 1 ms) כדי למדוד את תפקוד הרשתית. במחקר זה היא ההשוואה בין שליטה, פציעה קלה ופציעה קלה עם RIP. </li></ol></li></ol></li></ol> 8. TUNEL Assay <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים בעלי חיים על ידי זריקת intraperitoneal של מנת יתר phenobarbital (100 מ&quot;ג / קילוגרם). Enucleate העיניים ולתקן paraformaldehyde 4%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף את העיניים בPBS לפני cyroprotectingעיני הלילה ב -30% סוכרוז (w / v). להטביע את העיניים במתחם OCT וחתוך למקטעים של 20 מיקרומטר sagittal באמצעות cryostat. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את assay TUNEL על סעיפי רשתית עם מכתים DAPI הבא הפרוטוקול של et al Maslim. 27 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש מיקרוסקופ פלואורסצנטי לספירת TUNEL של הרשתית. תאי TUNEL נרשמו מהשכבה החיצונית הגרעינית (ONL); השכבה החיצונית ביותר של הרשתית המכילה גרעיני קולטי האור. במחקר זה, ספירת TUNEL נעשתה בשלושה עותקים לכל עין, עם 5 עיניים לכל קבוצת טיפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמשו בכיוון אחד ANOVA לקבוצה סטטיסטית להשוות אמצעי שליטה, פציעה קלה, וחולדות פציעה + RIP אור. </li></ol>

<ol><li>Meller, R., Simon, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerance+to+Ischemia-an+Increasingly+Complex+Biology%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">Tolerance to Ischemia-an Increasingly Complex Biology.</a> Translational Stroke Research. 4 (1), 40-50 (2013).</li>
<li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+delayed+remote+limb+ischemic+postconditioning%3A+role+of+mitochondrial+K-ATP+channels+in+a+rat+model+of+focal+cerebral+ischemic+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Protective effect of delayed remote limb ischemic postconditioning: role of mitochondrial K-ATP channels in a rat model of focal cerebral ischemic reperfusion injury.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 32 (5), 851-859 (2012).</li>
<li>Harkin, D. W., D'Sa, A., McCallion, K., Hoper, M., Campbell, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+before+lower+limb+ischemia-reperfusion+protects+against+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning before lower limb ischemia-reperfusion protects against acute lung injury.</a> Journal of Vascular Surgery. 35 (6), 1264-1273 (2002).</li>
<li>Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+with+ischemia+-A+delay+of+lethal+cell+injury+in+ischemic+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Preconditioning with ischemia -A delay of lethal cell injury in ischemic myocardium.</a> Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).</li>
<li>Barone, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+and+brain+tolerance+-+Temporal+histological+and+functional+outcomes%2C+protein+synthesis+requirement%2C+and+interleukin-1+receptor+antagonist+and+early+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning and brain tolerance - Temporal histological and functional outcomes, protein synthesis requirement, and interleukin-1 receptor antagonist and early gene expression.</a> Stroke. 29 (9), 1937-1950 (1998).</li>
<li>Roth, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+provides+complete+protection+against+retinal+ischemic+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Preconditioning provides complete protection against retinal ischemic injury in rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 39 (5), 777-785 (1998).</li>
<li>Wegener, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+ischemic+attacks+before+ischemic+stroke%3A+Preconditioning+the+human+brain%3F+A+multicenter+magnetic+resonance+imaging+study%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Transient ischemic attacks before ischemic stroke: Preconditioning the human brain? A multicenter magnetic resonance imaging study.</a> Stroke. 35 (3), 616-621 (2004).</li>
<li>Weih, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuated+stroke+severity+after+prodromal+TIA+-+A+role+for+ischemic+tolerance+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Attenuated stroke severity after prodromal TIA - A role for ischemic tolerance in the brain.</a> Stroke. 30 (9), 1851-1854 (1999).</li>
<li>Casson, R. J., Wood, J. P. M., Melena, J., Chidlow, G., Osborne, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+ischemic+preconditioning+on+light-induced+photoreceptor+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The effect of ischemic preconditioning on light-induced photoreceptor injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (3), 1348-1354 (2003).</li>
<li>Ettaiche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP-sensitive+potassium+channels+%28K-ATP%29+in+retina%3A+a+key+role+for+delayed+ischemic+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">ATP-sensitive potassium channels (K-ATP) in retina: a key role for delayed ischemic tolerance.</a> Brain Research. 890 (1), 118-129 (2001).</li>
<li>Gross, E. R., Gross, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligand+triggers+of+classical+preconditioning+and+postconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Ligand triggers of classical preconditioning and postconditioning.</a> Cardiovascular Research. 70 (2), 212-221 (2006).</li>
<li>Heurteaux, C., Lauritzen, I., Widmann, C., Lazdunski, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+adenosine%2C+adenosine-A1-receptors%2C+and+ATP-senstive+K%2B+channels+in+cerebral+ischemic+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Essential role of adenosine, adenosine-A1-receptors, and ATP-senstive K+ channels in cerebral ischemic preconditioning.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 92 (10), 4666-4670 (1995).</li>
<li>Dirnagl, U., Simon, R. P., Hallenbeck, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+tolerance+and+endogenous+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Neurosciences%22%5BJournal%5D)">Ischemic tolerance and endogenous neuroprotection.</a> Trends in Neurosciences. 26 (5), 248-254 (2003).</li>
<li>Ren, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+ischemic+post-conditioning+reduced+brain+damage+in+experimental+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Res%22%5BJournal%5D)">Remote ischemic post-conditioning reduced brain damage in experimental ischemia/reperfusion injury.</a> Neurol Res. 33 (5), 514-519 (2011).</li>
<li>Ren, C., Gao, X., Steinberg, G. K., Zhao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limb+remote-preconditioning+protects+against+focal+ischemia+in+rats+and+contradicts+the+dogma+of+therapeutic+time+windows+for+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Limb remote-preconditioning protects against focal ischemia in rats and contradicts the dogma of therapeutic time windows for preconditioning.</a> Neuroscience. 151 (4), 1099-1103 (2008).</li>
<li>Hu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+limb+remote+ischemic+preconditioning+contributes+neuroprotective+effects+via+activation+of+adenosine+A1+receptor+and+redox+status+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Noninvasive limb remote ischemic preconditioning contributes neuroprotective effects via activation of adenosine A1 receptor and redox status after transient focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Research. 1459, 81-90 (2012).</li>
<li>Jensen, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Ischemic+Preconditioning+Protects+the+Brain+Against+Injury+After+Hypothermic+Circulatory+Arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Remote Ischemic Preconditioning Protects the Brain Against Injury After Hypothermic Circulatory Arrest.</a> Circulation. 123 (7), 714-721 (2011).</li>
<li>Kuntscher, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+preconditioning+by+brief+extremity+ischemia+before+flap+ischemia+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ischemic preconditioning by brief extremity ischemia before flap ischemia in a rat model.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 109 (7), 2398-2404 (2002).</li>
<li>Kharbanda, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+limb+ischemia+induces+remote+ischemic+preconditioning+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Transient limb ischemia induces remote ischemic preconditioning in vivo.</a> Circulation. 106 (23), 2881-2883 (2002).</li>
<li>Perl, W., Cucinell, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LOCAL+BLOOD+FLOW+IN+HUMAN+LEG+MUSCLE+MEASURED+BY+A+TRANSIENT+RESPONSE+THERMOELECTRIC+METHOD%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">LOCAL BLOOD FLOW IN HUMAN LEG MUSCLE MEASURED BY A TRANSIENT RESPONSE THERMOELECTRIC METHOD.</a> Biophysical Journal. 5 (2), 211-230 (1965).</li>
<li>Vuksanovic, V., Sheppard, L. W., Stefanovska, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+relationship+between+level+of+blood+flow+and+skin+temperature+for+different+dynamics+of+temperature+change%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Nonlinear relationship between level of blood flow and skin temperature for different dynamics of temperature change.</a> Biophysical Journal. 94 (10), L78-L80 (2008).</li>
<li>Meng, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upper+limb+ischemic+preconditioning+prevents+recurrent+stroke+in+intracranial+arterial+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Upper limb ischemic preconditioning prevents recurrent stroke in intracranial arterial stenosis.</a> Neurology. 79 (18), 1853-1861 (2012).</li>
<li>Souza, M. V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hind+limb+ischemic+preconditioning+induces+an+anti-inflammatory+response+by+remote+organs+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Hind limb ischemic preconditioning induces an anti-inflammatory response by remote organs in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 42 (10), 921-929 (2009).</li>
<li>Hixson, F. P., Shafiroff, B. B., Werner, F. W., Palmer, A. K. DIGITAL TOURNIQUETS - A PRESSURE STUDY WITH CLINICAL RELEVANCE. Journal of Hand Surgery-American. 11A (6), 865-868 (1986).</li>
<li>Hamer, P. W., McGeachie, J. M., Davies, M. J., Grounds, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evans+Blue+Dye+as+an+in+vivo+marker+of+myofibre+damage%3A+optimising+parameters+for+detecting+initial+myofibre+membrane+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Evans Blue Dye as an in vivo marker of myofibre damage: optimising parameters for detecting initial myofibre membrane permeability.</a> Journal of Anatomy. 200 (1), 69-79 (2002).</li>
<li>Brandli, A., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+ischemia+influences+the+responsiveness+of+the+retina%3A+observations+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthal+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Remote ischemia influences the responsiveness of the retina: observations in the rat.</a> Invest Ophthal Vis Sci. 55 (4), (2014).</li>
<li>Maslim, J., Valter, K., Egensperger, R., Hollander, H., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+oxygen+during+a+critical+developmental+period+controls+the+death+and+survival+of+photoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Tissue oxygen during a critical developmental period controls the death and survival of photoreceptors.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 38 (9), 1667-1677 (1997).</li>
<li>Grimm, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-induced+erythropoietin+in+the+hypoxic+retina+protects+against+light-induced+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">HIF-1-induced erythropoietin in the hypoxic retina protects against light-induced retinal degeneration.</a> Nature Medicine. 8 (7), 718-724 (2002).</li>
<li>Vander Heide, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinically+Useful+Cardioprotection%3A+Ischemic+Preconditioning+Then+and+Now%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology+and+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Clinically Useful Cardioprotection: Ischemic Preconditioning Then and Now.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 16 (3-4), 251-254 (2011).</li>
<li>Zhou, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Limb+Ischemic+Postconditioning+Protects+Against+Neonatal+Hypoxic-Ischemic+Brain+Injury+in+Rat+Pups+by+the+Opioid+Receptor%2FAkt+Pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Remote Limb Ischemic Postconditioning Protects Against Neonatal Hypoxic-Ischemic Brain Injury in Rat Pups by the Opioid Receptor/Akt Pathway.</a> Stroke. 42 (2), 439-444 (2011).</li>
<li>Hasegawa, J., Obara, T., Tanaka, K., Tachibana, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-density+presynaptic+transporters+are+required+for+glutamate+removal+from+the+first+visual+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">High-density presynaptic transporters are required for glutamate removal from the first visual synapse.</a> Neuron. 50 (1), 63-74 (2006).</li>
<li>Kanoria, S., Jalan, R., Seifalian, A. M., Williams, R., Davidson, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocols+and+mechanisms+for+remote+ischemic+preconditioning%3A+A+novel+method+for+reducing+ischemia+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Protocols and mechanisms for remote ischemic preconditioning: A novel method for reducing ischemia reperfusion injury.</a> Transplantation. 84 (4), 445-458 (2007).</li>
<li>Maier, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+depth+and+duration+of+mild+hypothermia+in+a+focal+model+of+transient+cerebral+ischemia+-+Effects+on+neurologic+outcome%2C+infarct+size%2C+apoptosis%2C+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Optimal depth and duration of mild hypothermia in a focal model of transient cerebral ischemia - Effects on neurologic outcome, infarct size, apoptosis, and inflammation.</a> Stroke. 29 (10), 2171-2180 (1998).</li>
<li>Reith, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+in+acute+stroke%3A+Relation+to+stroke+severity%2C+infarct+size%2C+mortality%2C+and+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Body temperature in acute stroke: Relation to stroke severity, infarct size, mortality, and outcome.</a> Lancet. 347 (8999), 422-425 (1996).</li>
<li>Barbe, M. F., Tytell, M., Gower, D. J., Welch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HYPERTHERMIA+PROTECTS+AGAINST+LIGHT+DAMAGE+IN+THE+RAT+RETINA.+%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">HYPERTHERMIA PROTECTS AGAINST LIGHT DAMAGE IN THE RAT RETINA. </a> Science. 241 (4874), 1817-1820 (1988).</li>
<li>Wang, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+degradation+in+mouse+retina+after+a+transient+ischemia+and+protective+effect+of+hypothermia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Neuronal degradation in mouse retina after a transient ischemia and protective effect of hypothermia.</a> Neurological Research. 24 (7), 730-735 (2002).</li>
<li>Tonkovic-Capin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+cardioprotection+by+isoflurane%3A+role+of+K%28ATP%29+channels%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 283 (1), H61-H68 (2002).</li>
<li>Pfenninger, E., Himmelseher, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+ketamine+on+a+cellular+level%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesist%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of ketamine on a cellular level.</a> Anaesthesist. 46, S47-S54 (1997).</li>
<li>Hirose, K., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BLOCKADE+OF+GLUTAMATE+EXCITOTOXICITY+AND+ITS+CLINICAL-APPLICATIONS%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochemical+Research%22%5BJournal%5D)">BLOCKADE OF GLUTAMATE EXCITOTOXICITY AND ITS CLINICAL-APPLICATIONS.</a> Neurochemical Research. 18 (4), 479-483 (1993).</li>
<li>Welberg, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychiatric+disorders%3A+Ketamine+modifies+mood+through+mTOR%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+reviews.+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Psychiatric disorders: Ketamine modifies mood through mTOR.</a> Nature reviews. Neuroscience. 11 (10), 666(2010).</li>
<li>Garcia, L. S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+administration+of+ketamine+induces+antidepressant-like+effects+in+the+forced+swimming+test+and+increases+BDNF+levels+in+the+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+%26+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Acute administration of ketamine induces antidepressant-like effects in the forced swimming test and increases BDNF levels in the rat hippocampus.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry. 32 (1), 140-144 (2008).</li>
<li>Wassle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+processing+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Parallel processing in the mammalian retina.</a> Nature Reviews Neuroscience. 5 (10), 747-757 (2004).</li>
<li>Hertle, D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+analgesics+and+sedatives+on+the+occurrence+of+spreading+depolarizations+accompanying+acute+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Effect of analgesics and sedatives on the occurrence of spreading depolarizations accompanying acute brain injury.</a> Brain. 135, 2390-2398 (2012).</li>
</ol>

למחבר אין מה לחשוף.

איסכמיה גפיים אחוריות מכרסמים הייתה מושרה בהצלחה עם מד לחץ דם ידני ולאזוק את אספקת neuroprotection לקולטני האור ברשתית. ממצא עקבי עם הגנת אוויר מושרה איסכמי של קולטני האור מפגיעת אור 9,28. בעיקרו של דבר, איסכמיה מרחוק גורמת מחסור בחמצן לרקמות קצר. לפיכך, יש נפשית מראש איסכמי מרוחק דמיון רב לאוויר איסכמי או סובלנות איסכמי מכונה לחלופין, נפשית מראש חוסר חמצן, ובמידה מסוימת, פעילות אנאירובית. תאים מגיבים ...

הישרדותם של רוב, אולי כל, רקמות לנוכח לחץ מטבולים ניתן לשפר על ידי אוויר מראש עם תקופה של איסכמיה sublethal 1,2. נפשית מראש איסכמי (IP) במונחים מעשיים הוא החשיפה של רקמה לאיסכמיה sublethal, לפני חוויות רקמת לחץ חמור יותר, כגון עלבון איסכמי שלאחר מכן. במודלים של בעלי חיים, IP מספק הגנה מדהימה למוח, הרשתית, לב וריאות 3-6. במקביל, תצפיות בחולי שבץ מוחי הראו קשר בין פיגועים הקודמים איסכמי חולפים ותוצאות קליניות טובות יותר 7,8. IP גם מגן קולטני האור ברשתית מפציעות שאינן איסכמי 9. היעילות של IP ברקמות ופציעות שונות מצביעה על כך שהוא מפעיל מנגנון מולד של תא הישרדות נוכחת בכל הרקמות. נפשית מראש איסכמי של שריר הלב כבר הציע לי השפעות מגנות דרך upregulationשל גורם היפוקסיה מושרה (HIF), ידוע להסדיר רבים מסלולים מטבוליים באמצעות שחרור אדנוזין או באמצעות פתיחת ערוצי אשלגן ATP במיטוכונדריה 10,11. ערוצי שחרור אדנוזין ואשלגן ATP הם מעורבים באיסכמיה מוחית אבל, חקירות מנגנוני ההגנה העצביות של אוויר איסכמי עד כה התמקדו בשינויים באנטי-הפעלת יתר רעילה, מסלולים אנטי-אפופטוטיים ואנטי דלקתיים 12,13. בסך הכל, הבנה של התהליך המולקולרי של אוויר להגנה על תאי עצב איסכמי היא מוגבלת. ניסיונות נפשית מראש איסכמי מרחוק להתנות איברים מרוחקים חשובים ביותר (לב, מוח, ריאות) על ידי יצירת איסכמיה ברקמות פחות קריטיות. נפשית מראש מרחוק איסכמי (RIP) באמצעות הגפיים האחוריות הודגם להיות neuroprotective במודלים של מכרסמים של שבץ 14-17. השיטה שתוארה על ידי מספקת prot פשוט, אמין ולא פולשניocol גרימת RIP. הרוב המכריע של פרוטוקולי RIP כרוך הגפיים האחורי, כנראה משום שעורק הירך ממוקם בגפיים האחורי העליונים ניתן לזהות בקלות והגישה להידוק כירורגית ויישום חוסם עורקים. במחקרי איסכמי איבר פולשני לחקר המוח והגנת עור, איסכמיה מושרה על ידי הפרדת עורק הירך מרצועות המפשעה ומהדק את עורק הירך 2,15,18. איסכמיה כתוצאה מהידוק עורק או כבילת איבר או הירך אושרה על ידי שינויים באיבר כולל אובדן של דופק, ירידה בחמצון וירידה בטמפרטורת עור. איסכמיה מרחוק יכולה להיות מאושרת על ידי האובדן של דופק באמצעות דופלר לייזר או דופלר אולטרה סאונד 17-19. טמפרטורת עור יכולה לשמש כחלופה לדופלר למרות מערכת היחסים היא אינו ליניארי 20,21. הקלטות טמפרטורה מדויקות הן דבר שבשגרה במעבדות ופחיתלהיות משולב בקלות לתוך מחקרי איסכמי מרחוק. אלטרנטיבה לירך מהדקת ניתוח היא האינדוקציה של איסכמיה באמצעות חוסם עורק. יישום חוסם עורקים מייצר איסכמיה דומה לזה שהושג עם הידוק כלי; Kutchner et al. לעומת עורק הירך פולשנית מהדק לחוסם עורק שאינו פולשני ומצא שני השיטות הופסקו זרימת דם לאיבר ונזק לעור מופחת במודל ניתוח פלסטי של איסכמיה דש עור 18. איזוק או הרגל או זרוע והעלאת לחץ השרוול לעיל לחץ דם הסיסטולי נמצא להיות מגן מפני נזק איסכמי בחזירים ובני אדם 17,19,22. חוסם עורקים גישות שונים לגרימה מרוחקת איסכמי כולל שימוש בשרוול לחץ דם או 17,22,23 גומייה. עם זאת, השימוש בגומייה כדי לגרום לאיסכמיה הוא שיטה בטוחה, פוטנציאל עלייה נותנת לסכום מוסדר של לחץ באיבר, עם עליות בלחץ מעל 500 מ&quot;מ כספית מוקלט בבני אדם 24. יתר על כן, איסכמיה האיבר באמצעות גומייה מובילה לנזק לשרירים בחולדות לאחר הסרת הלהקה 23, כפי שהוערך על ידי אוונס הכחול צבע, סמן vivo של חדירות myofiber 25. לעומת זאת, משלוח של לחץ מבוקר לחוסם העורק יכול להיות מושגת באמצעות שרוול לחץ דם קשור ל17,19,22,26 מד לחץ דם. במחקר זה, מודל פציעה קל של ניוון קולטי האור שימש כדי להדגים את היעילות של נוירו נפשית מראש איסכמי מרחוק. איסכמיה מרחוק הייתה מושרה באופן מיידי לפני פציעה קלה, ומנעה ניוון קולטי האור הבא כפי שאושרה על ידי בדיקת תפקוד רשתית. הווידאו הנלווה ידגים את היישום של איסכמיה המרוחקת לא פולשנית.

<table><tbody><tr><td>סדרת זהב DuraShock מד לחץ דם אנרואיד</td><td>יד Welch Allyn</td><td>DS56</td><td>מד לחץ דם ידני</td></tr><tr><td>יילוד [גודל 2] 1 צינור, 10 חבילות</td><td>Welch Allyn</td><td>5082-102-1</td><td>שרוול לחץ דם לגפיים</td></tr><tr><td>מתאם נעילת Luer</td><td>Welch Allyn</td><td>5082-178</td><td>מתאם לשרוול ילודים</td></tr><tr><td>תרמיסטור תרמיסטור AD</td><td>מכשירים</td><td>ML 309</td><td>יחידת טמפרטורת עור</td></tr><tr><td>בדיקת טמפרטורת עור</td><td>AD Instruments</td><td>MLT 422/A</td><td></td></tr><tr><td>Powerlab, חומרת רכישה 4 ערוצים</td><td>AD Instruments</td><td>PL 35044</td><td></td></tr><tr><td>מערכת שמיכות הומותרמית עם בדיקה גמישה</td><td>Harvard Appartus</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>מגבת</td><td></td><td></td><td>אופציונלית: איסכמיה מרחוק ער</td></tr><tr><td>איזופלו - 100% איזופלורן (250 מ"ל)</td> <td>Abbot Animal Health</td><td>05260-05</td><td>אופציונלי: איסכמיה מרחוק הרדמה אינהלטיון</td></tr><tr><td>קטמיל - קטמין 100 מ"ג/מ"ל (50 מ"ל)</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>אופציונלי: איסכמיה מרחוק הרדמה להזרקה</td></tr><tr><td>קסיליום - קסילזין 100 מ"ג/מ"ל (50 מ"ל)</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>אופציונלי: איסכמיה מרחוק הרדמה להזרקה</td></tr></tbody></table>

איבר מרוחק איסכמי אכשור קד: טכניקת neuroprotective במכרסמים

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

איסכמיה sublethal מגנה על רקמות מפני איסכמיה לאחר מכן, חמורה יותר באמצעות גברת הביטוי של מנגנונים אנדוגניים ברקמה הפגועה. איסכמיה sublethal גם הוכחה upregulate מנגנוני הגנה ברקמות מרוחקות. תקופה קצרה של איסכמיה (5-10 דקות) בגפיים האחורי של יונקים גורמת תגובות של הגנה עצמית במוח, הריאות, הלב והרשתית. ההשפעה ידועה כנפשי מראש מרוחק איסכמי (RIP). זוהי דרך טיפולית מבטיחה להגן על איברים חיוניים, וכבר נמצאה בניסויים קליניים לפציעות לב והמוח. פרסום זה מדגים שיטה מבוקרת, פולשנית של קבלת איבר - במיוחד הגפיים האחורי של חולדה - איסכמי. שרוול לחץ דם שפותח לשימוש בילודים אדם מחובר למד לחץ דם ידני ומשמש להפעלת לחץ מ&quot;מ כספית 160 סביב החלק העליון של הגפיים האחורי. בדיקה נועדה לזהות טמפרטורת עור משמשת כדי לוודא ischemi, על ידי הקלטת הירידה בטמפרטורת עור נגרמת על ידי חסימה נגרם לחץ של עורקי הרגל, והעלייה בטמפרטורה העוקבת שחרור של השרוול. שיטה זו של RIP מקנה הגנה לרשתית העכברוש מפני נזק הנגרם על-אור בהיר וניוון.

שרוול לחץ דם גבוה למעל 160 מ"מ כספית עוצר את זרימת דם לגפיים האחורי כפי שניתן לראות בבירור באיור 1. חוסר חמצון רקמות הביא הפחתת טמפרטורת הרגל של בעל החיים לפרוטוקול איסכמיה reperfusion (איור 2). טמפרטורת הרגל (33 מעלות צלזיוס) הייתה נמוכה מטמפרטורת ליבה ומופחתת באופן מהימן בגובה שרוול לחץ (31 מעלות צלזיוס) עולה כאשר השרוול היה מנוכה (32 מעלות צלזיוס). אחת פציעת אור 1,000 סוויטה דה לוקס נמסרה לעמעם העלתה חולדות לבקן עם או בלי נפשית מראש איסכמי מרחו...

נפשית מראש איסכמי מרחוק (RIP) הוא שיטה של ​​רקמות אוויר נגד לחץ מזיק. הקמנו שיטה של ​​איסכמיה מרחוק בגפיים האחורי, על ידי ניפוח שרוול מד לחץ דם למשך 5-10 דקות. יכולות ההגנה העצביות של RIP הוכחו במודל של ניוון רשתית במכרסמים.

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לספק איסכמיה בגפה האחורית שמתנה רקמות מרוחקות כנגד לחץ שלאחר מכן. לדוגמא, הרשתית מפני פגיעה קלה. זה מושג על ידי כיול ראשון של מד המונומטר הידני של אינגל.לאחר מכן, החיה מורדמת ומונחת על כרית חימום. ואז מורחבת רגלו האחורית של החיה והשרוול מונח למקומו. לבסוף, איסכמיה מרחוק מתבצעת על ידי ניפוח השרוול עם המשאבה, ניפוח השרוול וחזרה על התהליך בפעם השנייה.בסופו של דבר, כאשר מיושמים לפני פגיעת אור, איסכמיה מרחוק משמשת כדי להראות שיפור בתפקוד הרשתית ובמספר קולטני האור העוברים אפופטוזיס. שיטה זו יכולה לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח, כגון כיצד מושרה הגנה עצמית עם התניה מוקדמת איסכמית מרחוק לביצוע מעקב אחר טמפרטורת העור בזמן אמת. פתח את תוכנת הקלטת הטמפרטורה, התאם את הגדרת הטמפרטורה בין 30 ל-35 מעלות צלזיוס, ואת תדירות הדגימה לכל 100 אלפיות השנייה באמצעות שרוול זרוע יילודים בגודל 2 עבור חולדה במשקל 250 עד 550 גרם, חבר את השרוול למד הלחץ של ה-fome באמצעות מתאם במידת הצורך.לאחר מכן, רוקן את השרוול על ידי שחרור שסתום שחרור האוויר או ניתוק צינור השרוול מהמתאם. ודא שלא נשאר לחץ בצינור ומחט המונומטר מונחת באפס בתוך המלבן הסגלגל. לאחר מכן כדי לבדוק את הלחץ בין הצינור, מד לחץ ושיעול.השתמש במשאבות עדינות של נורת הניפוח כדי לנפח את השרוול עד שהמנומטר קורא 100 מיליגרם כספית. לאחר שווידאתם שהלחץ נשאר קבוע, רוקנו את השרוול על ידי פתיחה איטית של שסתום שחרור האוויר לאחר רדת החשיכה, והתאימו את החיה בהתאם לפרוטוקול הטקסט. ודא שיש לו טונוס שרירים טוב על ידי צביטה של הגפה האחורית העליונה כדי לאשר שיש מספיק שריר.לאחר הרדמת בעל החיים על פי פרוטוקול הטקסט, בדוק את עומק ההרדמה על ידי הארכת הרגל וצביטת העור בחלק התחתון של כף הרגל. לאחר מכן מרחו דמעות מלאכותיות. הנח את החולדה על כרית חימום או על צינורות דוד מים במחזור במצב נוטה כאשר כריות כף הרגל של הגפיים התחתונות פונות כלפי מעלה.כדי ליישם את בדיקת טמפרטורת העור, האריכו את רגל החולדה שתעבור איסכמיה והניחו היטב את בדיקת העור על כרית כף הרגל, ומקמו אותה כדי למקסם את המגע בין בדיקת הטמפרטורה לעור. לאחר מכן השתמש בסרט נייר כדי להדביק את הגשושית. בדוק את מיקום בדיקת העור על ידי מעקב אחר הטמפרטורה בתוכנת הקלטת הטמפרטורה למשך דקה עד שתיים.ודא שטמפרטורת העור היא בין 30 ל-34 מעלות צלזיוס ונשארת יציבה. אחרת, כוונן את הגשושית לביצוע איסכמיה מרחוק. התחל עם שרוול מנופח וודא ששסתום לחץ האוויר סגור.הארך את הרגל והקיף באופן רופף את השרוול בגפה האחורית העליונה. השתמש באצבע המורה ובאגודל כדי להאריך את הרגל ואת האצבעות התחתונות כדי לשמור על השרוול המשוחרר במקומו. כעת, העלו את לחץ השרוול ל-160 מילימטרים של כספית.לאחר הגעה ללחץ הנכון, התחל את הטיימר ואת רישומי טמפרטורת כף הרגל. טמפרטורת כף הרגל צריכה לרדת בשתי מעלות צלזיוס לאחר חמש דקות של לחץ קבוע, לשאוב שוב ושוב את נורת הניפוח בהתפרצויות קצרות כדי לשמור על לחץ השרוול הרצוי ולשמור על מיקום השרוול מעל הברך של החיה לאורך כל האיסכמיה. ספק איסכמיה מרחוק באופן רציף למשך חמש דקות.לאחר מכן שחרר את שסתום לחץ האוויר לחמש דקות זלוף לפני שתחזור על האיסכמיה המרוחקת. לאחר השלמת ההליך, רוקן את לחץ השרוול על ידי שחרור שסתום לחץ האוויר. בדוק את שינוי הטמפרטורה במהלך פרוטוקול איסכמיה.לאחר מכן שחרר את השרוול. הניחו את החיה על כרית חימום והמשיכו לעקוב עד לאמבולטוריה. כאשר החיה הולכת, החזירו אותה לבית.לבסוף לבצע פציעה קלה ולבצע את בדיקת המנהרה. על פי פרוטוקול הטקסט כפי שניתן לראות בבירור כאן, שרוול לחץ דם הממוקם מעל הברך המוגבה ליותר מ-160 מילימטר כספית עוצר את זרימת הדם לגפה האחורית. היעדר זרימת הדם הביא לירידה בטמפרטורת כף הרגל שהייתה נמוכה מטמפרטורת הליבה של החיה, וזו עלתה לאחר שהשרוול התרוקן בהתאם למצב הדרוש ל-RIP.באיור זה, האלקטרורטינוגרמה המותאמת לחושך או ERG מחולדה רגילה מוגבהת עמומה הראתה קולטן אור גדול ותגובת רשתית פנימית להבזק בהיר שבוע לאחר פגיעת אור. הקלטות ה-ERG הראו ירידה חמורה במשרעת ביחס לביקורת, מה שמשקף את אובדן קולטני האור, עם זאת, התניה מוקדמת של הגפה האחורית באיסכמיה באמצעות פרוטוקול רפרפוזיה של שתיים על חמש דקות מיד לפני שהאיסכמיה הגנה על קולטני האור מפני פגיעת אור. פאנל זה מראה כי אמפליטודות ה-R-I-P-E-R-G היו גדולות יותר מפגיעה קלה באור בלבד עם הפחתה קלה בגל A.לבסוף, שרוול הממוקם מתחת לברך אינו מגן על קולטני האור מפני פגיעות אור כפי שמשתקף במשרעות ה-ERG המופחתות הנראות כאן. ניתן לבצע שיטות כמו התניה איסכמית מרחוק על מנת לענות על שאלות נוספות כגון מהם המנגנונים של הגנה עצבית אנדוגנית וכיצד ניתן ליישם איסכמיה מרחוק כדי לשפר את התפקוד מפגיעה וניוון של מערכת העצבים המרכזית.

remote-limb-ischemic-preconditioning-neuroprotective-technique

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

ההליך הכירורגי לזירוז של איסכמיה hindlimb החד צדדית באה לידי ביטוי, עם אישור של איסכמיה על ידי הדמיה זלוף דופלר לייזר.

דגם Murine של איסכמיה Hindlimb

יש מצטבר ראיות, שנפשי מראש איסכמי (PC) - אתגר איסכמי שאינו מזיק למוח - מעניק הגנה זמנית לעלבון איסכמי מזיק שלאחר מכן. הקמנו הבילטרלי חסימת עורק תרדמה משותפת (BCCAO) כגירוי נפשית מראש כדי לגרום לסובלנות איסכמי מוקדם (IT) לאיסכמיה מוחית מוקדי חולפים (הנגרם על ידי חסימה של עורק מוח אמצעי, MCAO) בC57BL6 / י עכברים.

ספיגה דו צדדי משותף עורק תרדמה כגירוי נפשית מראש מספיק כדי לגרום סובלנות איסכמי מוקדמת לאיסכמיה מוחית מיקוד

מקור: Zheng, Y., et al. מודלים ניסיוניים לחקר ההגנה העצבית של התניה חומצית מפני איסכמיה מוחית. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את היישום של התניה לאחר חומצה (APC) כדי להעריך את ההשפעות הנוירו-פרוטקטיביות שלה מפני פגיעה איסכמית במודל עכבר של חסימת עורק המוח האמצעי (MCAO). הוא מתאר את השלבים הכרוכים ברפרפוזיה במודל MCAO ויישום APC במהלך רפרפוזיה, כדי להפחית אקסיטוטוקסיות, מתח חמצוני ומוות עצבי.

 הערכת ההשפעות הנוירו-פרוטקטיביות של התניה חומצית במודל עכבר של איסכמיה מוחית

מקור: Poinsatte, K., et al., כימות הגנה נוירו-וסקולרית בעקבות התניה מוקדמת היפוקסית חוזרת וחסימת עורק מוח אמצעי חולף בעכברים. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים את השיטה של התניה מוקדמת היפוקסית חוזרת (RHP) על ידי חשיפת עכבר למחזורי היפוקסיה מבוקרים לפני גרימת שבץ איסכמי. הניסוי מעריך את השפעותיו על יציבות מחסום הדם-מוח, הסתגלות עצבית ודלקת.

הסתגלות עצבית להתניה מוקדמת היפוקסית חוזרת בעכברים

מקור: Brandli, A. התניה מוקדמת איסכמית של גפיים מרוחקות: טכניקה נוירו-פרוטקטיבית במכרסמים. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים פרוטוקול התניה איסכמית לא פולשנית של גפיים בחולדות כדי לגרום להגנה עצבית מערכתית. ההליך כולל חסימת עורקים מבוקרת ורפרפוזיה, המפעילה מסלולי לחץ תאיים המשחררים גורמי הגנה. גורמים אלה משפרים את העמידות בפני פגיעות איסכמיות ומטבוליות באיברים מרוחקים כמו המוח והרשתית.

התניה מוקדמת איסכמית לא פולשנית של גפיים במודל חולדה להגנה עצבית

האלקטרורטינוגרמה (ERG) היא פוטנציאל חשמלי שנוצר על ידי הרשתית בתגובה לאור. מאמר זה מתאר כיצד להשתמש ב-ERG כדי להעריך את תפקוד הרשתית, בחולדות מותאמות לחושך, וכיצד ניתן להשתמש בו כדי להעריך התערבות נוירו-פרוטקטיבית, במקרה הנוכחי התניה איסכמית מרחוק.

שימוש בelectroretinogram כדי להעריך את התפקוד ברשתית מכרסמים וההשפעות המגנות של האיבר המרוחק איסכמי אכשור קד

פרוטוקול זה מתאר התניה מוקדמת היפוקסית חוזרת ונשנית, או חשיפות קצרות להיפוקסיה מערכתית המפחיתות את נפחי האוטם והפרעה במחסום הדם-מוח בעקבות חסימה חולפת של עורק המוח האמצעי בעכברים. הוא גם מפרט כימות כפול של נפח האוטם והפרעה במחסום הדם-מוח לאחר שבץ מוחי כדי להעריך את היעילות של הגנה נוירו-וסקולרית.

כימות של הגנת עצבים וכלי דם בעקבות חסימת עורק חוזר חוסר חמצן אכשור קד וחלוף התיכון מוחין של עכברים

לב החולדה המבודד הוא מודל מתמשך לפגיעה באיסכמיה. כאן, אנו מתארים את תהליך קצירת הלב הפועם מחולדה באמצעות קנולציה של אבי העורקים באתרה, זלוף לנגנדורף של הלב, סימולציה של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה וצביעה על אוטם כדי לאשר את היקף העלבון האיסכמי.

אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש Langendorff-perfused

אינדוקציה כירורגית של איסכמיה של הגפיים האחוריות בעכבר שימושית לבחינת אנגיוגנזה, אולם זה נפגע בזני עכברים מסוימים המולדים המציגים נמק רקמות המושרה על ידי איסכמיה. מתוארות שיטות לגרימת איסכמיה תת-חריפה בגפיים באמצעות מכווצים אמרואידים כדי לעקוף בעיה זו באמצעות אינדוקציה של חסימת עורקים הדרגתית.

שיטות חריפה subacute Murine Hindlimb איסכמיה

Accic postconditioning מגן מפני איסכמיה מוחית. כאן אנו מציגים שני מודלים לביצוע APC. הם מושגים בהתאמה על ידי העברת פרוסות corticostriatal למאגר חומצי לאחר מחסור בגלוקוז חמצן במבחנה ועל ידי שאיפה 20% CO 2 לאחר חסימת עורק המוח התיכון in vivo .

מודלים ניסיוניים לחקר הנוירו-פרוטקציה של התסמינים החומציים נגד איסכמיה מוחית

פרוטוקול זה מדגים כיצד לבצע קטיעה מתחת לברך בחולדות ולבצע מיד חידוש שרירים ממוקד (iTMR) כדי לחקור אסטרטגיות לטיפול ומניעת כאב הקשור לקטיעה ולהבנה טובה יותר של מנגנוני הכאב הקשורים לקטיעה.

מודל כריתת גפה אחורית מתחת לברך של עכברוש ועצבוב שרירים ממוקד מיידי

למד שיטת איסכמיה מבוקרת בגפה האחורית של חולדות להגנה על הרשתית מפני פגיעת אור. טכניקת preconditioning מרוחקת זו מפעילה מנגנוני נוירופרוטקציה אנדוגניים ומספקת מודל אמין למחקר מנגנוני הגנה עצמית במערכת העצבים המרכזית.

איבר מרוחק איסכמי אכשור קד: טכניקת neuroprotective במכרסמים

גלה סרטונים נוספים