Name: עכבר דגם ריאה של פיצוי ריאות צמיחה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: למדו את מודל עכברי הפנאומונקטומיה לחקר צמיחת ריאה פיצויית. שיטה זו מאפשרת לחקור מנגנוני צמיחת האלוולרים ותהליכי התחדשות ריאתיים בביולוגיה התפתחותית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות לחטיבת השירותים הווטרינריים של בית החולים לילדים בסינסינטי על הסיוע. כתב היד הזה נתמך על ידי המכונים הלאומיים לבריאות K12 HD028827. אנה פרל, דוקטורט, לימדה את המחברים את ההליך הכירורגי הזה.

הצהרת שימוש בבעלי חיים:: הערה כל הנהלים במחקר זה נערכו באישור וביצוע ההנחיות של בעלי החיים המוסדיים השימוש וטיפול הוועדה (IACUC) בבית החולים לילדים בסינסינטי. עכברי זכרים שמונה שבועות בן C57BL / 6J התקבלו מג&#39;קסון מעבדות (Bar Harbor, ME) ואפשרו להסתגל לשבוע לפני שימוש אחד. עד ניתוח, בעלי חיים שוכנו במתקן מחסום הפתוגן ללא וסיפקו אוכל autoclaved וlibdium מודעת מים מסונן. כל כלוב עכבר סופק עם אוויר ומים ייעודיים, וחדרים נשמרו במחזור היום-לילה 12 שעות. בעקבות התאוששות מניתוח, עכברים נשמרו בכלובים עם צמרות מסוננות, ובלבד libidum מודעת אוכל autoclaved, ובלבד שמים מסוננים מבקבוק מים. 1. הכנה של מכשירים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך 6 מפשקי עור באמצעות אטבי נייר וסיכות. טוויסט יישר מהדקי נייר באנקס של סיכות נייר, leave תיל פלדה ישר 5 סנטימטר בקצה אחד ולעשות 0.5 סנטימטר בודד וו &quot;U&quot; בצורה בסוף החוט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך וילונות כירורגי מרובעים כ -15 x 15 סנטימטר באמצעות ניילון נצמד. הכן רוטב אחד לכל עכבר. שים מגדל נייר בין כל לעטוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את כל הכלים כירורגיים יחד עם ערימה של אריחי 12 x 12 אינץ &#39;פקק, גזה, וספוגיות כותנה שקצה. </li></ol> 2. עכבר הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרום להרדמה עם isoflurane 2%. לשקול בעלי חיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באזור הכנה כירורגית ייעודי לגלח בית חזה שמאלי ואזור צוואר עם מכונת גילוח חשמלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל ירידה של המשחה הדמעה המלאכותית לעיניו של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטהר צוואר ובית חזה שמאלי עם chlorhexidine ואלכוהול איזופרופיל. חזור פעמיים יותר. </li></ol> אינטובציה 3. העכבר Oro-קנה הנשימה ואוורור מכאני <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש מקום טכנאי כירורגית שאינו סטרילי פרקדן העכבר באזור הניתוח המחומם מראש.</li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר עומק ההרדמה על ידי תיעוד חוסר תגובה לקמצוץ כפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שטיפת ידיים ועוטים לבוש כירורגית, מסיכה, וכובע, דון כפפות מנתחים סטרילית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כורך ובאמצעות טכניקה האספטי, לעשות חתך אנכי 1 סנטימטר מעל אמצע הצוואר-הקדמי כדי לחשוף את הגרון. קל לחזור שרירי הרצועה עם משוננים מלקחיים מעוקלים סנטימטר, 10 ולחשוף את הגרון וקנה נשימה על ידי הפצת שרירי הרצועה עם הקצה של מספריים ישר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דרך הפה להכניס angiocatheter בוטה, קצה 22 G לאמצע קנה הנשימה (איור 1 א) וחזותי לאשר מיקום (איור 1). לשמור על ההרדמה ולאוורר באמצעות isoflurane 1-3% באמצעות מכונת הנשמה מכרסם (225 μl לשבץ; 200 סטוקס לדקה). להעסיק מגבלת לחץ של 15 סנטימטרים H 2 O. </li></ol> 4. עכבר ריאה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר בעמדת פַּחֶסֶת רוחב תקין עם מול האחורי של העכברהמפעיל (בצד שמאל למעלה). השתמש בניילון נצמד איטום עצמי כוילון סטרילי. חיתוך דרך הווילון, להשתמש במספריים מעוגלים היטה בוטים לעשות מקביל ארוך קיצוץ של 2 סנטימטר לצלעות בחלל צלע 4 th וה -5. הכנס את המספריים קצה מעוקל בוטים ולנתח את העור מצלעות הבסיס ושרירים הבין-. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחזור בו העור עם ארבעה מפשקים לחשוף מרובע 1.5 x 1.5 סנטימטר חלון כירורגית (איור 2 א). אבטח את המפשקים ללוח השעם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את הצלעות באמצעות מלקחיים מעוקלים, ולהשתמש בקצה אחד של המלקחיים המעוקלים להיכנס לחלל בית החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במייקרו-המספריים קצה הקהה, השתמש בלהב התחתון להיכנס לחלל בית החזה. ביצוע חתך 0.5 סנטימטר בין הצלעות וחזור על הפעולה בכיוון ההפוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות שני הכולים הכתיבה שנותרו, לפתוח את בית החזה בציר הקדמי-אחורית והמפשקים מאובטחים ללוח השעם (איור 2). </li> &lt;li&gt; שימוש שבקצו מלקחיים בוטים מעוקלים ביד השמאל, לתפוס את הריאה השמאלית ולעקור את החלק העליון של הריאה השמאלית רוחבי וinferiorly באמצעות פתיחת בית החזה עד עורק הריאה השמאלי והסמפונות נחשפים (איור 3 א &#39;, ב&#39;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחזיק המוליך microclip כלי הדם טיטניום הטעון ביד ימין עם הגוף של המוליך בכף וקצה מעוגל פונה אל כף היד (איור 3 ג), חלק את קצה המוליך לבית החזה לאורך העקמומיות של חלק האחורי של השמאל ריאות וקליפ הסמפונות עזבה ועורק ריאה (איור 3D). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המוליך אבל לשמור הריאה השמאלית חזר בו. אחוז במייקרו המספריים קצה הקהה ​​עם יד ימין וחתכתי את הסמפונות ודיסטלי עורק הריאה לקליפ ולהסיר ריאה שמאלית (איור 3E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מפשקי צלעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במלקחיים בוטים המעוקלים לצבוט את 1 סנטימטר של עור נחות incisiבאבל מעל לרמה של הסרעפת והכנס angiocatheter G 24 דרך העור ולתוך חלל בית החזה השמאלי (איור 4 א &#39;, ב&#39;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש 5-0 prolene תפר למקום שני תפרים שהופסקו סביב ה 4 ו -5 צלעות ה לסגור את חלל בית החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מפשקי העור. השתמש בשני סטים של מלקחיים כדי להתקרב לעור לאורך החתך ומדביק את העור סגור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר מזרק luer נעילת 3 מיליליטר לangiocatheter ולהסיר אוויר שייר על ידי יישום שאיבה עדינה ונסיגת angiocatheter. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדביק את החתך בצוואר נסגר באמצעות שני סטים של מלקחיים כמו קודם. </li></ol> 5. עכבר שאם ריאה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף את הריאה השמאלית כפי שצוין בפרוטוקול &quot;עכבר ריאה&quot;. הרם את כלוב צלעות עם מלקחיים בוטים מעוקלים כדי לאפשר לאוויר לתוך חלל החזה השמאלי (איור 5 א &#39;, ב&#39;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח angiocatheter G 24 לאף השמאלחלל racic כאמור לעיל נזהר שלא לפגוע הריאה השמאלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות 5-0 תפר prolene ונזהר שלא לנקב את הריאות (איור 5 ג), למקם את שני אורכים של חומר תפר לתוך 3 rd / 4 th וה -5 / 6 interspaces צלע ה (איור 5D). הנח את שני האורכים של חומר תפר לפני הקשירה כדי להפחית את הסיכונים של פריצת ריאה השמאלית. לקשור את חומר התפר לעשות שני תפרים שהופסקו (איור 5E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדביק את העור על החתך בבית החזה, להסיר אוויר שייר עם angiocatheter, ולהדביק את החתך בצוואר כאמור לעיל. </li></ol> 6. החייאה, שיכוך כאבים, ושחזור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כבה את isoflurane, ולנהל 0.1 מ&quot;ג / קילוגרם של עצירות ו0.5 מיליליטר של תת-עורית מלח הרגילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר נשימה ספונטנית לחדש, להסיר את הטובוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב עכבר עד שהוא שוב אמבולטורי. הליכה בדרך כלל resumes כמה דקות לאחר הסרת הטובוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר ב-27 מעלות צלזיוס חממה (חמצן humidified, 25%) כדי לשחזר O / N. הערה: אנו שמים כמה כדורים של האוכל רטוב עם מים על רצפת הכלוב ל24 שעות הראשונות שלאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל 0.1 מ&quot;ג / קילוגרם של עצירות בזריקת intraperitoneal פעמיים ביום למשך שלושה ימים לאחר ניתוח. הקפד לא לפתוח את האתר כירורגית בעת טיפול בבעלי חיים. </li></ol> 7. ניטור עכבר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול עכברים בבית 1, 3, 5, ו -7 ימים לאחר ניתוח. </li></ol>

<ol><li>Strueby, L., Thebaud, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+review+of+respiratory+medicine%22%5BJournal%5D)">Advances in bronchopulmonary dysplasia.</a> Expert review of respiratory medicine. , (2014).</li>
<li>Donn, S. M., Sinha, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+understanding+and+management+of+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+fetal+%26+neonatal+medicine%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the understanding and management of bronchopulmonary dysplasia.</a> Seminars in fetal & neonatal medicine. 14, 332(2009).</li>
<li>Molen, T., Miravitlles, M., Kocks, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((COPD+management%3A+role+of+symptom+assessment+in+routine+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+chronic+obstructive+pulmonary+disease%22%5BJournal%5D)">COPD management: role of symptom assessment in routine clinical practice.</a> International journal of chronic obstructive pulmonary disease. 8, 461-471 (2013).</li>
<li>Seifert, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+shedding+and+tissue+regeneration+in+African+spiny+mice+%28Acomys%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Skin shedding and tissue regeneration in African spiny mice (Acomys).</a> Nature. 489, 561-565 (2012).</li>
<li>Vidal, P., Dickson, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+the+distal+phalanx.+A+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+hand+surgery%22%5BJournal%5D)">Regeneration of the distal phalanx. A case report.</a> Journal of hand surgery. 18, 230-233 (1993).</li>
<li>Potter, P. C., Levine, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+Regeneration+Following+Chronic+Suppurative+Osteitis+of+the+Distal+Phalanx%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+surgery%22%5BJournal%5D)">Bone Regeneration Following Chronic Suppurative Osteitis of the Distal Phalanx.</a> Annals of surgery. 80, 728-729 (1924).</li>
<li>McKim, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+the+Distal+Phalanx%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Medical+Association+journal%22%5BJournal%5D)">Regeneration of the Distal Phalanx.</a> Canadian Medical Association journal. 26, 549-550 (1932).</li>
<li>Brown, L. M., Rannels, S. R., Rannels, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implications+of+post-pneumonectomy+compensatory+lung+growth+in+pulmonary+physiology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Res%22%5BJournal%5D)">Implications of post-pneumonectomy compensatory lung growth in pulmonary physiology and disease.</a> Respir Res. 2, 340-347 (2001).</li>
<li>Holder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+and+compensatory+growth%5BTitle%5D)+AND+%22British+medical+bulletin%22%5BJournal%5D)">Regeneration and compensatory growth.</a> British medical bulletin. 37, 227-232 (1981).</li>
<li>Hsia, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+a+canine+model+of+compensatory+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Lessons from a canine model of compensatory lung growth.</a> Curr Top Dev Biol. 64, 17-32 (2004).</li>
<li>Butler, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+adult+lung+growth+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Evidence for adult lung growth in humans.</a> N Engl J Med. 367, 244-247 (2012).</li>
<li>Konerding, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+dependence+of+alveolar+angiogenesis+in+post-pneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Spatial dependence of alveolar angiogenesis in post-pneumonectomy lung growth.</a> Angiogenesis. 15, 23-32 (2012).</li>
<li>Kho, A. T., Liu, K., Visner, G., Martin, T., Boudreault, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+dedifferentiation+and+redevelopment+phases+during+postpneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Identification of dedifferentiation and redevelopment phases during postpneumonectomy lung growth.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, 542-554 (2013).</li>
<li>Wang, W., Nguyen, N. M., Guo, J., Longitudinal Woods, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+Monitoring+of+Compensatory+Lung+Growth+in+Mice+after+Pneumonectomy+via+%283%29He+and+%281%29H+Magnetic+Resonance+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Noninvasive Monitoring of Compensatory Lung Growth in Mice after Pneumonectomy via (3)He and (1)H Magnetic Resonance Imaging.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 49, 697-703 (2013).</li>
<li>Gibney, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+murine+post-pneumonectomy+lung+regeneration+by+18FDG+PET+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+research%22%5BJournal%5D)">Detection of murine post-pneumonectomy lung regeneration by 18FDG PET imaging.</a> EJNMMI research. 2, 48(2012).</li>
<li>Rawlins, E. L., Perl, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+a%27MAZE%27ing+world+of+lung-specific+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">The a'MAZE'ing world of lung-specific transgenic mice.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 46, 269-282 (2012).</li>
<li>Ochs, M., Muhlfeld, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+microscopy+of+the+lung%3A+a+problem-based+approach.+Part+1%3A+basic+principles+of+lung+stereology%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quantitative microscopy of the lung: a problem-based approach. Part 1: basic principles of lung stereology.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L15-22 (2013).</li>
<li>Ysasi, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+unilateral+diaphragmatic+paralysis+on+postpneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of unilateral diaphragmatic paralysis on postpneumonectomy lung growth.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L439-445 (2013).</li>
<li>Dane, D. M., Yilmaz, C., Estrera, A. S., Hsia, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separating+in+vivo+mechanical+stimuli+for+postpneumonectomy+compensation%3A+physiological+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">Separating in vivo mechanical stimuli for postpneumonectomy compensation: physiological assessment.</a> Journal of applied physiology. 114, 99-106 (2013).</li>
<li>Mortola, J. P., Magnante, D., Saetta, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expiratory+pattern+of+newborn+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">Expiratory pattern of newborn mammals.</a> Journal of applied physiology. 58, 528-533 (1985).</li>
<li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> Journal of applied physiology. 106, 984-987 (2009).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

סיפקנו תיאור מפורט ביותר של נהלי PNX PNX העכבר ועכבר דמה שדווחו עד כה. אנחנו עשינו את הקורא מודע לכמה מהמכשולים הנפוצים שחוקרים לומדים ההליך נפוץ להיתקל, ויש לנו התווינו כמה טכניקות שפותחו על ידי המעבדה שלנו כדי להקטין נגד המלכודות הללו. מעבדות אחרות ניצול מודל זה עשויות פיתחו שינויים בטכניקה אחרים או משתמשות במכשירים שונים. בעת הערכת הבדלים בטכניקות, חוקרים פרטיים יצטרכו להחליט אם הבדלים אלה משפיעים באופן משמעותי את תוצאות ניסוי. <p class="jove_content" style=";text-align:rig...

תפקידו העיקרי של הריאות הוא לספק לחמצן ופחמן דו-חמצני חילופי בין האורגניזם והאווירה. בבני אדם, שורה של תנאים מולדים ונרכשים להוביל לשטח ריאות מופחת וכתוצאה מכך תפקוד ריאות לקוי. למרות שורה של טיפולים כגון סטרואידים בשאיפה, מרחיבי סימפונות, חמצן, אוויר ואוורור מכאני כרוני משמשות כדי למתן את ההשלכות של תפקוד ריאות לקוי 1-3, הטיפול האידיאלי לתנאים אלה יקדם צמיחה מחודשת של רקמה תפקודית ריאות - כלומר, ריאות התחדשות. התחדשות רקמות של יונקים תועדה היטב. קוצני העכבר האפריקאי יכול להתחדש שטחים גדולים של עור ללא היווצרות צלקת 4. גדוד דיסטלי בבני אדם יכול להתחדש בעקבות פציעה או קטיעה 5-7. הריאה הבאה (PNX), צמיחת ריאות מפצה מתרחשת בעכברים 8, 9 חולדות, לעשותGS 10, ובני האדם 11. על פי הגדרה, צמיחת ריאות פיצוי כרוכה הרחבה לא רק של airspaces הקיים, אך מחדש septation של airspaces המוגדל אלה עם הרחבת זרימת הדם קשור 12. ניתוח ביטוי גנים הוכיח כי מודל זה משחזר רב של אירועי האיתות של התפתחות ריאות 13. ארבעה שבועות לאחר העכבר PNX, שטח פן alveolar הוא שווה ערך לזה של בעלי חיים דמה מופעלים 14. בכתב היד הזה, אנו מתארים את PNX העכבר ונהלי PNX דמה.

<table><tbody><tr><td>מוליך קליפ כלי דם 6 אינץ</td><td>'טלפלקס רפואי (WECK)</td><td>137062</td><td></td></tr><tr><td>אופק קטן טיטניום אדום קליפ</td><td>טלפלקס רפואי (WECK)</td><td>1201</td><td></td></tr><tr><td>דפוס צר 12 ס"מ מלקחיים מעוקלים</td><td>Fine Science Tools</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>מעוקל משונן 10 ס"מ מלקחיים Graefe</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק</td> <td>מחט CastroviejoFine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>מספריים פזילה ישרים 9 ס"מ (קצה קהה)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14075-09</td><td></td></tr><tr><td>ישר 8.5 ס"מ מספריים עדינים מוקשים</td><td>Fine Science</td><td>Tools 14090-09</td><td></td></tr><tr><td>ישר וקצה קהה Cohan-Vannas מספריים קפיציים</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-12</td><td></td></tr><tr><td>דבק עור</td><td>Gluture</td><td>32046</td><td></td></tr><tr><td>22 גרם אנגיוקטטר</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>24 גרם אנגיוקטטר</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3 מ"ל מזרק</td><td></td><td></td><td></td>נעילת לואר</tr><tr><td>4 מחזירים קצרים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 מחזירים ארוכים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 פרולן על מחט חיתוך מעוקלת</td><td>Ethicon</td><td>8698G</td><td></td></tr><tr><td>0.5 מ"ל מזרק על מחט</td><td></td><td></td><td></td> 27 גרם</tr> מלח <tr><td>רגיל</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Press-n-Seal לעטוף</td><td>את חברת מוצרי</td><td></td><td></td>שמחה</tr><tr><td>12 x 12 אינץ 'ערימת לוח פקק</td><td>אופיס דיפו</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% אתנול</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>בטדין</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>עכבר מאוורר</td><td>הוגו סאקס אלקטרוניק</td><td>Minivent Type 845</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane וופורייזר</td><td>OHMEDA</td><td>Excel 210 SE</td><td></td></tr><tr><td>משחת דמעות מלאכותית</td><td>Puralube</td><td>NDC: 17033-211-38</td><td></td></tr></tbody></table>

עכבר דגם ריאה של פיצוי ריאות צמיחה

Mouse Pneumonectomy Model of Compensatory Lung Growth

בבני אדם, שיבוש בתיקון ועיצוב מחדש של ריאות פגועות תורם לשורה של הפרעות ריאה חריפות וכרוניות שעלולות בסופו של דבר להוביל לנכות או למוות. מודלים של בעלי חיים מבוססי פציעות של תיקון והתחדשות ריאות מוגבלים על ידי תגובות ספציפיות לפציעה, מה שמקשה על ההבחנה בין שינויים הקשורים לתגובת הפציעה ופתרון הפציעה לבין שינויים הקשורים לתיקון ריאות והתחדשות ריאות. עם זאת, השימוש במודלים של בעלי חיים לזיהוי מסלולי איתות תיקון והתחדשות אלה הוא קריטי לפיתוח טיפולים חדשים שמטרתם לשפר את תפקוד הריאות לאחר פגיעה בריאות. מודל כריתת הריאות של העכבר משתמש בצמיחת ריאות מפצה כדי לבודד את אותות התיקון וההתחדשות הללו על מנת להגדיר בצורה ברורה יותר מנגנונים של ספטציה מחדש של המכתשית. כאן, אנו מתארים את הטכניקה שלנו לביצוע כריתת ריאות של עכבר וכריתת ריאות דמה. ניתן להשתמש בטכניקה זו בשילוב עם מעקב אחר שושלת או מודלים אחרים של עכברים טרנסגניים כדי להגדיר מנגנון מולקולרי ותאי של תיקון והתחדשות ריאות.

. חלקה של PNX ומשקולות עכבר מזויף פעל מסופקת באיור 6 בידיים שלנו, הישרדות היא באופן עקבי 95-100% עבור שתי pneumonectomy PNX והעמדת פן. לתיאורים של איך הריאה הימנית מחדש גדל במודל זה וכמובן הזמן הצפוי, אנחנו מפנים את הקורא לכתבי יד של גיבן et al. 15 וet al וואנג. 14 יש להימנע מכמה ממכשולים נפוצים לבצע בהצלחה את נהלי pneumonectomy דמה PNX העכבר ועכבר. <p ...

כריתת ריאות בעכבר היא מודל נפוץ לצמיחת ריאות מפצה. ניתן להשתמש בהליך זה בשילוב עם מעקב אחר שושלת או מודלים של עכברים טרנסגניים כדי להבהיר את המנגנונים הבסיסיים.

In humans, disrupted repair and remodeling of injured lung contributes to a host of acute and chronic lung disorders which may ultimately lead to ...

מטרת פרוצדורה זו היא לבצע פנאומונקטומיה שמאלית כדי להשרות צמיחה פיצויית של הריאה הימנית. הדבר מושג תחילה על ידי ביצוע תורקוטומיה שמאלית וחשיפת ההילום השמאלי. השלב השני של הפרוצדורה הוא ליגציה של ההילום השמאלי והעורק הריאתי השמאלי.השלב השלישי הוא הסרת הריאה השמאלית. השלב האחרון הוא סגירת התורקוֹטוֹמיה (פתח בבית החזה). ניתן להשתמש במודל פנומונקטומיה בעכבר לצמיחה מפצה של הריאה בשילוב עם טכניקות ביומטריות או ביוכימיות אחרות כדי להגדיר את המנגנונים של צמיחה והתחדשות של נאולבולישיטה זו יכולה להשיב על מספר שאלות מפתח בתחום התפתחות וההסגירה של הריאות, כגון מהם התהליכים התאיים המרכזיים המעורבים בתהליך ההפרדה (septation) ואילו תהליכים תאיים מולקולריים קריטיים נחוצים כדי להפעיל מחדש את תהליך ההפרדה? באופן כללי, חוקרים שאינם מנוסים בטכניקה זו עלולים להיתקל בקשיים באחד מכמה שלבים מרכזיים. הם עשויים להיתקל בקושי בביצוע קנולציה של הקנה.הם עשויים להיתקל בקושי ביצירת חלון כירורגי הולם. הם עשויים להיתקל בקושי בזיהוי הקילום (hilum) ובסגירתו, וכן עשויים להיתקל בקושי בהימנעות מפגיעה בריאה השמאלית במהלך תורקומיות דמה (sham thoracotomy). את הפרוצדורה זו ידגים Shang Lu, עוזר מעבדה בכיר במעבדתי. לאחר השראת הרדמה בעכבר באמצעות 2% isof fluorine, יש לגלז את אזור החזה השמאלי והצוואר בעזרת מכשיר גילוח חשמלי, למרוח פומדת דמעות מלאכותיות על עיני העכבר ולחטא את האזור על ידי ניגוב עם chlorhexidine שלוש פעמים, לאחר מכן עם isopropyl alcohol שלוש פעמים, ולבסוף שוב עם Chlorhexidine.שלוש פעמים. אששו את עומק ההרדמה על ידי תיעוד של היעדר תגובה לצביטה חזקה לאחר ביצוע חתך אנכי של one centimeter מעל מרכז הצוואר הקדמי כדי לחשוף את הלרינקס; השתמשו בפינצטה משוננת של 10 centimeter כדי להסיט קלות את שרירי הרצועה (strap muscles). לאחר מכן, השתמשו בקצות מספריים ישרים כדי להרחיב את שרירי הרצועה.בשלב הבא, הכניסו דרך הפה קטטר אנגיו עם קצה קהה במידה 22 למרכז הקנה, ואשרו חזותית את המיקום דרך החתך. הניחו את העכבר על מאוורר למכרסמים ושמרו על הרדמה באמצעות 2% isof fluorine, עם הגבלת לחץ של 15 centimeters.Water. מקמו את העכבר המורדם במצב שכיבה צדית ימין, כאשר הצד השמאלי של הגב פונה למבצע הפעולה.מקמו ניילון נסגר עצמית על גוף העכבר ככיסוי סטרילי. השתמשו במספריים עגולים קמורים כדי לבצע חתך באורך שני סנטימטרים במקביל לצלעות במרווח הבין-צלעי הרביעי והחמישי. לאחר מכן, הכניסו את חוד המספריים והפרידו את העור מהצלעות ומשרירי הבין-צלעות שמתחתיו.הנח ארבעה רטראקטורים על העור כדי ליצור חלון ניתוחי בגודל 1.5 על 1.5 סנטימטרים. הדק כל רטראקטור ללוח השעם. השתמש בפינצטה מעוקלת כדי לנתח עד לצלעות, ולאחר מכן בצע דיסקציה קהה של המרווח הבין-צלעי.כדי לחשוף את הצלעות הרביעית והחמישית, השתמשו בקצה אחד של פינצטה קמורה כדי ליצור חור למעבר לחלל בית החזה. כעת, השתמשו בלהב התחתון של מספרי מיקרו בעלי קצוות קהים כדי ללחוץ לאורך החתך עד שהלהב התחתון יחדור לחלל בית החזה. בצעו חתך של 0.5 סנטימטר בין הצלעות ולאחר מכן חזרו על הפעולה בכיוון ההפוך.לאחר מכן, פתחו את בית החזה לאורך הציר הקדמי-אחורי על ידי החדרת שני מקרבים וקיבועם ללוח השעם. כעת טענו את applicator של המיקרו-קליפ. לאחר מכן, בעזרת פינצטה בעלת קצה קהה ומעוקל המוחזקת ביד הלא-דומיננטית, תפסו את הריאה השמאלית והזיזו את החלק העליון שלה לצד (לטרלית) ולמטה דרך הטורקוטומיה, עד לחשיפת העורק הראתי והסימפונה (bronchus) השמאליים.לאחר מכן, אחזיזו ביד הדומיננטית את משכפל מיקרו-קליפס הכלי הדם מטיטניום הטעון, כאשר גוף המפעיל מונח בכף היד והקצה המעוקל פונה הרחק מכף היד. החליקו את קצה המפעיל אל תוך בית החזה לאורך הקימור של ההיבט האחורי של הריאה השמאלית, והסבו קליפס על הסיבכי השמאלי ועל העורק הריאתי. הוציאו את המפעיל אך השאירו את הריאה השמאלית במצב רטרוקציה.אחזו במספרי מיקרו בעלי קצה קהה ביד ימין, גזרו את הסיבוב (bronchus) ואת העורק הריאתי הדיסטליים לקליפס והסירו את הריאה השמאלית. לאחר הסרת הריאה, הוציאו את מותרי הצלעות. לאחר מכן, השתמשו בפינצטה קהה קמורה כדי להרים סנטימטר אחד של עור נחית אל החתך אך מעל גובה הסרעפת, והחדירו קטטר אנגיו בכי মাপ 24 דרך העור אל תוך חלל בית החזה השמאלי.בשלב הבא, מקבעים שתי תפרים רציפים מסוג 5-0 פרולין מסביב למספר 4 ו-5 של הצלעות. כדי לסגור את חלל בית החזה, מסירים את מותרי העור ומשתמשים בשתי סטים של פינצטות כדי לקרב את העור לאורך החתך, ומשתמשים בדבק רקמות כדי להדביק את העור לסגירה. לבסוף, מחברים מזרק לו-לוק (lu lock) בנפח 3 milliliter לקטטר האנגיו, ומסירים אוויר שנותר על ידי הפעלת שאיבה עדינה ונסיגת קטטר האנגיו.סיימו באמצעות הדבקת הצוואר, כאשר החתך נסגר באמצעות שתי מערכות של פינצטות, בדומה לסגירת החתך בבית החזה. לאחר חשיפת הריאה השמאלית של העכבר המורדם כפי שהודגם קודם לכן, השתמשו בפינצטות עקומות וקהות כדי להרים את כלוב הצלעות ולאפשר לאוויר להיכנס לחלל החזה השמאלי. הכניסו קטטר ורידי (angio catheter) במידה 24 לחלל החזה השמאלי כפי שהודגם קודם לכן, תוך הקפדה שלא לפגוע בריאה השמאלית. השתמשו בתפר פרולין במידה 5/0, תוך הקפדה לא לנקב את הריאה.השחילו שני קטעי חוט תפירה למרווחי הצלעות השלישית והרביעית, ולמרווחי הצלעות החמישית והשישית. מקמו את שני קטעי חוט התפירה לפני הקשירה כדי להפחית את הסיכון לבקע של הריאה השמאלית. קשרו את חוט התפירה כדי ליצור שני תפריים נפרדים.הדביקו את העור מעל החתך בחזה. הוציאו אוויר שנותר באמצעות קטטר אנגיו (angio catheter) והדביקו את החתך בצוואר כפי שהודגם קודם לכן. הפסיקו את מתן ה-isof fluorine וספקו 0.1 milligrams per kilogram של buprenorphine ו-0.5 milliliters של תמיסת סליין נורמלית תת-עורית.כאשר הנשימה הספונטנית חוזרת, הוציאו את הפתיל האנדוטראכיאלי. עקבו אחר העכבר עד שיהיה מסוגל להתנייד. ההליכה בדרך כלל שבה מספר דקות לאחר הוצאת הפתיל האנדוטראכיאלי.יש להניח 0.1 milligrams per kilogram של buprenorphine בהזרקה תוך-פריטונית פעמיים ביום למשך שלושה ימים לאחר הניתוח. יש לנטר את בעל החיים בקפידה במהלך שלושה ימים אלה, ולהקפיד שלא לפתוח את אזור הניתוח בעת הטיפול בבעלי החיים. תמונה זו מראה ירידה במשקל לאחר הניתוח.24 שעות לאחר הניתוח, עכברי הפנומוסומיה יאבדו בממוצע 1.5 גרם ועכברי הביקורת (sham) יאבדו בממוצע 1.1 גרם. שתי הקבוצות מחזירות את משקלן הטרום-ניתוחי עד היום השלישי לאחר הניתוח. תמונה פלואורסצנטית זו מראה צביעה אימונופלואורסצנטית של tropo elastin באונה העזר תחת תנאי ביקורת.כאן מוצגת אימונופלורסצנציה של tropo elastin באונה העזר 72 שעות לאחר הפנומוטומיה, כאשר חללי אוויר קיימים הוגדלו. תמונת אימונופלורסצנציה סופית זו של TRO Elastin מראה את האונה העזר ארבעה שבועות לאחר הפנומוטומיה. שימו לב לצמיחת האונה ולשיקום.לאחר צפייה בסרטון זה, תהיו בעלי הבנה טובה כיצד לבצע את מודל הפנומונקטומיה בעכברים לצורך חקר צמיחה מפצה של הריאה, וכיצד לבצע תורקוטומיה מדמה (sham thoracotomy), המשמשת כביקורת להליך זה.

mouse-pneumonectomy-model-of-compensatory-lung-growth

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Bronchiolitis סותם היא הפגיעה המפתח להישרדות ארוכת טווח של השתלת ריאה וחוסר מודל קליני חזק מונע בחינת immunopathogenesis bronchiolitis סותם. שלא כמו אחרים השתלות איברים מוצקים, vascularized העכבר השתלת ריאות יש רק לאחרונה פותחו. כאן אנו מציגים מודל שפותח באופן עצמאי שלנו bronchiolitis סותם לאחר ההשתלה Murine אחת הריאות orthotopic.

פיתוח Bronchiolitis סותם במודל Murine של השתלת ריאות Orthotopic

כאן אנו מציגים פרוטוקול למדידה פשוטה ואמינה של עקומת הלחץ-נפח של הריאות בעכברים, ומראה שהיא רגישה מספיק כדי לזהות שינויים פרנכימליים פנוטיפיים בשתי פתולוגיות ריאה נפוצות, פיברוזיס ריאתי ואמפיזמה. מדד זה מספק אמצעי לכמת את השינויים המבניים של הריאה עם פתולוגיה מתפתחת.

מדידה של עקומת לחץ-נפח ריאות עכבר

מחקר זה מתאר את הדור מוצלחת של מודל חדש של בעלי חיים מחלת ריאות חסימתית כרונית (COPD) על ידי חשיפת שוב ושוב עכברים ריכוזים גבוהים של אוזון.

דור של מחלת ריאות חסימתית כרונית מודל בעכברים על ידי חשיפה חוזרת ונשנית האוזון

אזור פני השטח הפנימי של הריאות (ISA) הוא קריטריון קריטי להערכת מורפולוגיה ריאות ופיזיולוגיה במחלות ריאה ו-התחדשות שנגרם על ידי פציעה. אנו מתארים כאן שיטה סטנדרטית שיכולה למזער את הטיה המדידה עבור השב"כ הן ריאות pneumonectomy ריאות מודלים השתלת עכבר פרוטה.

שיטה מתוקננת למדידת שטח הפנים של הריאות הפנימיות באמצעות דלקת ריאות של עכבר והשתלת תותב

כריתת ריאה מכרסם השמאלית היא טכניקה יקר במחקר יתר לחץ דם ריאתי. כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לתאר את הליך כריתת ריאה עכברוש וטיפול לאחר הניתוח כדי להבטיח מינימלי התחלואה והתמותה.

כריתת ריאה השמאלית בשילוב עם Monocrotaline או Sugen כמודל של יתר לחץ דם ריאתי אצל חולדות

כאן, אנו מציגים אופטימיזציות למודל השתלת ריאות של חולדות המשמשות לשיפור התוצאות. אנו מספקים מדריך מידות לאזיקים המבוסס על משקל הגוף, אסטרטגיית מדידה לבירור החלל הבין-קוסטליהרביעי , ושיטות לסגירת פצעים ואיסוף נוזלים ורקמות BAL (שטיפת סימפונות).

מודל השתלת ריאה של חולדה של איסכמיה חמה / פגיעה ברפרפוזיה: אופטימיזציות לשיפור התוצאות

אנו מציגים מודל ריאות חזיר ex vivo להדגמת מכניקת ריאות ותמרוני גיוס נאדיות למטרות הוראה. ניתן להשתמש בריאות במשך יותר מיום אחד (עד חמישה ימים) עם שינויים מינימליים במשתנים מכניקת הריאות.

אקס ויוו מודל ניסויי חזירי ללימוד והוראת מכניקת ריאות

פרוטוקול זה מתאר את הפיתוח של מודל חזרזיר יילודים של פגיעה ריאתית חריפה המדגים אירועים פתוגניים מוקדמים המתרחשים בריאה המוקדמת, כולל כמות פעילי שטח תת-מספקת, היפראוקסיה, אוורור בלחץ גבוה ודלקת, כדי להקל על הבנת הטריגרים המולקולריים של דיספלזיה ברונכופולמונרית ולשפר את התרגום הטיפולי.

פיתוח מודל פגיעת ריאות חריפה של חזרזיר יילודים המשחזר את הסביבה המוקדמת של ריאות פגים

מאמר זה מתאר שיטת striaghforward ויעילה של intubating עכברים למדידת תפקוד הריאתי או החדרה ריאתי, שמאפשרת לעכברים להתאושש ולהיחקר בתקופות מאוחרות יותר. ההליך כרוך מקור אור סיב אופטי יקר שמאיר ישירות לקנה נשימה.

שיטה פשוטה של ​​אינטובציה ריאות המאוסות

ההדמיה אולטרה סאונד לאבחון הוכיחה להיות יעיל באבחון מחלות בדרכי הנשימה שונות בבני אדם ובעלי חיים. אנו מדגימים פרוטוקול אולטרסאונד מקיף מנוצל על ידי המעבדה של ד"ר זואו לנתח קינטיקה סרעפת במיוחד במודלים של עכבר. זו גם טכניקת מחקר לא פולשנית שיכול לספק מידע כמוני על תפקוד שרירים בדרכי הנשימה בעכבר.

אולטראסאונד הדמיה לאבחון של תפקוד העכבר דיאפרגמה

למדו את מודל עכברי הפנאומונקטומיה לחקר צמיחת ריאה פיצויית. שיטה זו מאפשרת לחקור מנגנוני צמיחת האלוולרים ותהליכי התחדשות ריאתיים בביולוגיה התפתחותית.

עכבר דגם ריאה של פיצוי ריאות צמיחה

גלה סרטונים נוספים