Name: פרספקטיבה טכנית במחקר העץ-טבעת מודרנית - כיצד להתגבר על Dendroecological ואתגרי אנטומי עץ (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 33 s
Description: למד שיטות דגימה וניתוח אנטומי של עץ לחקר דנדרואקולוגיה. הפרוטוקול משתמש בנוזל לא-ניוטוני לייצוב תאים במהלך חיתוך במיקרוטום, ומאפשר ניתוח מיקרוסקופי מפורט של מבני העץ ופרמטרים אנטומיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות למאמציו של סנדרו לוצ'ינטי (שנקונג דאפלס, ציריך) לבניית המכשירים הדרושים כדי להבטיח התקדמות בהכנת הדגימה.

1. טכניקות דגימה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגימת Core <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעץ דגימה נובע, לחלץ לפחות שתי ליבות באמצעות corer תוספת מכל הגזע לנתח פיתוח הצמיחה שלה. לשנות את המיקום של דגימה על עצם את משימת המחקר, למשל, לשחזורי אקלים נפוצים לקחת מקבילי ליבות למדרון. כאשר עובד עם מינים טרופיים, תיקח לפחות שלוש או יותר ליבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש corer חידד תוספת (5, 10 או 12 מ&quot;מ קוטר) ולמקם את corer ניצב לציר הגובר של הגזע. הערה: כדי להיות עמדה מבוקרת ויציבה של corer, להשתמש דחפן, כדי למנוע תנועות של corer האחר מאשר הסיבוב שלה, כאשר קידוח אותו לעץ. נשא לגזע כל הדרך אליה ובאמצעות השעם. לעץ ליבה צפוף מאוד (כלומר, מינים טרופיים), משתמש בגוף המנסרים מחדש מיוחד עם מתאם של ליבות תוספת שתאפשרנה לאף יער צפוף ליבה כebenum Diospyrus (אבוני). &lt;/ Li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש חולץ ולהסיר את הליבה וכתוצאה מהעץ. לכבות את corer ולהסיר אותו מהגזע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף ID ספציפי לליבת חילוץ באמצעות עיפרון רך על ידי כתיבה על קלטת, אשר לאחר מכן ממוקמת ישירות על הליבה. חזור על התהליך בצד השני של הגזע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחסן שתי דוגמאות של העץ בצינורות פלסטיק או נייר או תיבות מיוחדות כדי למנוע כל נזק. הערה: קשיות נייר מועילות במיוחד בסביבות טרופיות, כי הם מונעים מליבות דפוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבסוף, הר הליבות (כיוון סיבים זקופים) על קורות תמיכה מעץ. השתמש בדבק עץ עמיד במים קרים ולתת להם להתייבש. הערה: לעולם אל הר הליבות על תומך עץ אם מטרת המחקר כוללת כימית נוסף, איזוטופ או ניתוח צפיפות. למטרות אלה, לתקן את הליבות בתעלות כבלים פתוחות או קרטון גלי פנים בודדים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגימת מיקרו-ליבה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במכשיר ניקוב מיוחדאו מחט עם פתיחה של 2 מ&quot;מ. בהתאם לעובי הקליפה להשתמש אזמל כדי להסיר חלק הכרחי של הקליפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המכשיר בניצב לציר גדל על הגזע כפי שתואר לעיל, ולהשתמש בפטיש כדי לחדור לעצה של הגזע לכ -2 סנטימטרים בעומק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את המחט כדי לשבור את ליבת מיקרו וכתוצאה מכך בתוך הכלי ולהסיר אותו מהגזע. אחסן את ליבות מיקרו בבקבוקוני microcentrifuge ולתייג אותם. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגימת דיסק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במקרים מיוחדים (ובמיוחד באזורים הטרופיים), למשל, כאשר דגימת גדמי עצים שנפלו ואו בכל הזדמנות אפשרית, לקחת דיסקים (חתכים בניצב לציר הגובר) עם מסור שרשרת. פשוט לתייג את הדיסקים ולאחסן אותם עד לניתוח נוסף. הערה: הליך דגימה זו מיושם לרוב לכל חומר יבש-מתים, היסטוריים, ארכאולוגיים ותת-מאובנים כמו גם מעץ קשה מאוד צפוף שאינו מאפשר השימוש בcorers תוספת. </li></ol&gt; </li></ol> הכנת 2. דוגמא <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלטש דיסקים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את הדיסקים במכונה ליטוש ולטחון את פני השטח תוך שימוש ברצף של המירוק עדין יותר ויותר, החל בנייר זכוכית של 80-חצץ, ואחריו 120, 220, 300-חצץ. ליטוש סופי עם 400-חצץ מספיק עבור רוב עצי מחט. לעץ קשה ומינים טרופיים במיוחד, שימוש מלטש גריסים עד 1,200 להבחין גבולות צמיחה-טבעת. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חיתוך משטחי מטוס על ליבות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את ליבות תוספת בבעל הליבה של microtome ליבה חדש שפותח מאפשר לחתוך משטחי מטוס על ליבות על כל המידה שלהם. הערה: תקן את הכיוון של הליבה בתוך המחזיק יש כיוון הסיבים של המדגם זקוף, שהוא בזווית ישרה לסכין של microtome. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את הליבה עד שמעט נוגע בלהב. משוך את הלהב, שהוא קבוע בהדרכת נושאות כדור מעל היקף הליבה למ&quot;קt את חלקו ראשון של הראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להדוף את הסכין מאחורי הליבה, להרים את בעל מדגם עם הליבה כ -10 מיקרומטר ולחזור על תהליך החיתוך. האם זה עד כשליש מהקוטר של הליבה הוא לקצץ כתוצאה מכך שטח מטוס רציף. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת חלקי מיקרו על ידי הוספת פתרון עמילן תירס. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניתוח תמונה מפורט של המבנה האנטומי, לתקן ליבות או דוגמאות אחרות התפלגו מדיסקים בבעל microtome. מקם את להב microtome, מודרך על ידי הדרכת מיסב של microtome מזחלת חדש שפותח בקצה העליון של המדגם ולמשוך מעליו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להדוף את הלהב להרים את המדגם של כ 20 עד 30 מיקרומטר ולמשוך את הלהב על המדגם שוב. חזור על תהליך זה עד שמשטח רציף על גבי המדגם נוצר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה את פני השטח וכתוצאה מכך עם פתרון קורנפלור (10 גרם של עמילן תירס, 8 מיליליטר של מים, ו- 7 גרם של glycero 100%l) עם מברשת נפוצה. הערה: הדגנים העמילן למלא את התאים הפתוחים של המדגם לייצב את המבנה לחיתוך הבא של החלקים הדקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את המדגם של 15 מיקרומטר, למקם את מברשת על פני השטח של המדגם ולמשוך את הלהב באיטיות לכיוון המדגם מתחיל לחתוך את קטע דק (מתחת למברשת). בעת גזירה, וכתוצאה מכך החלק מחליק על הלהב מונחה על ידי המברשת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר כל הסעיף הוא לחתוך, להסיר את סעיף מיקרו מהלהב עם מברשת ומים (כדי להפחית את החיכוך) ולמקם את הסעיף בשקופית זכוכית להכנה נוספת. כדי למנוע מהם הייבוש, לכסות אותם תוך שימוש בכמות קטנה של גליצרול (33% = חלק אחד של גליצרול 100% ושני חלקים של מים). </li></ol></li></ol> 3. הכנת Microslide <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכנת שקופיות קבועות הבא, לשטוף ראשון גליצרול מהסעיף מיקרו עם טפטפת ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכסות הרטוב section עם כמה טיפות של Safranin (1 גרם של אבקת Safranin מים + 100 מיליליטר) וAstrablue (0.5 גרם של אבקה הכחולה אסטרה + 2 מיליליטר של 100% חומצה אצטית מים + 100 מיליליטר) להבחין בין lignified ולא lignified מבנים, אלא גם כדי לשפר את הניגוד לניתוח תמונה שלאחר מכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תן את שאר סעיף 5 דקות מכוסות בצבע ולאחר מכן לשטוף אותו עם טפטפת ומים שוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהצבע מוגזם מוסר, מייבשים את הסעיף עם טפטפות על ידי שטיפתם עם רצף של 75% בדילול מלא, 96% ולבסוף 100% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טפטפות השימוש לשטוף את הדגימות בשקופית הזכוכית במקום להניח את הדגימות באמבטיה כדי לצמצם את זמן עיבוד לכשני עד 3 דקות לתהליך ההתייבשות כולו. הערה: התייבשות עם אתנול מונעת שבירות דגימות מהשבירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן לשטוף את הסעיף עם xylol 100%. הערה: קסילן הוא מסרטנת והאוורור הוא חובה במעבדה כאשר משתמשים בו. אחרמוצרים קיימים החלפת xylol, אבל אם יש כוונה לאחסן דגימות על פני תקופות זמן ארוכות יותר (שנים, עשרות שנים) לניתוח מחודש פוטנציאלי, אפרסמון קנדה (צעד 3.5.2) הוא מדיום ההטבעה היחידה שנשאר ברור מבלי לשנות צבע לאורך זמן. למרבה הצער לזם קנדה צריך להיות בשימוש בשילוב עם xylol. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל עוד xylol הופך חלבי (לבנבן), לחזור על תהליך ההתייבשות כפי שהוא לא מספיק מיובש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שxylol נשאר ברור, לכסות את הקטע עם ירידה של 100% בלזם קנדה ולכסות אותו עם מכסה זכוכית של לפחות בגודל של הסעיף. הערה: שים לב להסרת בועות אוויר בעדינות על ידי הלחיצה על מכסה הזכוכית למטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את שקופית מיקרו וכתוצאה מכך בין שתי רצועות פלסטיק עמיד בחום ולמקם אותו על צלחת מתכת. מניחים במשקל (למשל, מגנט) על גבי השקופית ללחץ כלפי מטה ולהשאיר את הסעיף שטוח במהלך תהליך הייבוש הבא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את השקופיות בתנור בC ° 60 במשך כ -12 שעות. לאחר 12 שעות, לקחת את השקופיות מהתנור ומניח אותם על מדף לתת להם להתקרר לRT (כ -20 מעלות צלזיוס). כאשר קריר, להסיר את המשקל ואת פס הפלסטיק ולנקות את השקופית באמצעות סכיני גילוח כדי להסיר את לזם קנדה העודפת. </li></ol> 4. לדמיין תוכן סלולארי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון Nawashin 25. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון (א) עם 5 גרם של חומצה כרומית, 50 מיליליטר של 96% חומצה אצטית, ו-320 מיליליטר של מים ללא יונים. הכן פתרון אחר (B) עם 200 מיליליטר של פורמלין עם 175 מיליליטר של מים ללא יונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבבים פתרון ופתרון B ביחס של 1: 1 כדי ליצור את פתרון Nawashin. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להמחיש את תוכן התא, לתקן את המדגם עם פתרון Nawashin ללעצור 10 דקות כל תהליכי הפירוק בתוך התא. הערה: הקיבעון שומר גרעין תא ומאפשר להערכת תוחלת חיים של תאים (תאי אריכות הימים = גרעינים הנוכחיים / גרעינים נעדרו; o הנוכחותהיעדר r של הגרעין מציין אם התא חי או מת). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר קיבוע, לשטוף את החלקים במים כדי להסיר את פתרון Nawashin באופן מלא לפני צביעתם עם כחול Safranin-אסטרה ולפני בנוסף מכתים אותם עם picric-אנילין הכחול (anilin מסיסים במים רוויים חלק 1 + 4 חלקים כחולים של 10% חומצת picric) . </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהירות לחמם את המדגם לכ -80 מעלות צלזיוס (בכל מקרה מתחת לנקודת רתיחה) כדי להאיץ את תהליך הצביעה. להתייבשות והטבעה של הדגימות לעקוב אחר פרוטוקול צעדים 3.4-3.8. </li></ol> 5. הכנת תמונות דיגיטליות של תכונות אנטומי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליצור תמונות דיגיטליות של משטחי ליבה לניתוח כלי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את מטוס משטח ליבה באמצעות microtome הליבה ולהכתים את פני השטח וכתוצאה שחורים פשוט על ידי שימוש סמן מורגשת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהצבע התייבש, לשפשף את פני השטח של הליבה בגיר לבן. לחץ על הגיר בתאים פשוט על ידי שפשוף הגיר מעלעל פני השטח באמצעות אצבע. כמו כן להסיר את עודפי גיר על ידי הליך זה. הערה: כתוצאה מכך קירות התא שחורים וחלקי לומן של הספינות הם לבנים. הניגוד הזה הוא תנאי מוקדם לניתוח תמונה אוטומטית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את הליבה מוכנה מתחת למיקרוסקופ דו עיני מצויד במצלמה דיגיטלית. קח רצף של מעט חופף (כ.) 10% תמונות מתחילות בצד אחד של הליבה עד שכל פני השטח הוא נתפס. לתפור את התמונות בודדות כדי ליצור תמונה של פני השטח הליבה מלאה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליצור תמונות דיגיטליות משקופיות מיקרו <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את שקופיות מיקרו ניקו מתחת למיקרוסקופ ולקחת חופפים תמונות מכל הסעיף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להגדיר הגדלה מסוימת בהתאם למבנים להיות מנותח, הנע בין 40X וגדלת 1,000X. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לתפור את התמונות בודדות כדי ליצור תמונה אחת שלמה של הסעיף. כדי להימנע מעיוותים אפשריות בתהליך התפירה, להשתמש &quot;; תכנית &quot;ברווחים מסוג עדשות אובייקטיביות עם מיקרוסקופ. </li></ol></li></ol> 6. תכונות כימות אנטומי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לזהות תאים וגבולות טבעת באמצעות ROXAS18 כלי ניתוח תמונה או תוכנה דומה, לטעון תמונה של סעיף מיקרו וכיול מרחבי הקשורים להשגת תוצאות כמותיות ביחידות מטריות מלאה. לחשב את כיול מרחבי על ידי מדידת מספר הפיקסלים בין הקשקשים של תמונות שלב מיקרומטר נלקחו בהגדלה זהה וחלוקת השווי מתקבל על ידי ריווח ההיקף ביחידות מטריות (לדוגמא 1000 מיקרומטר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר מתוך הרשימה (הניתנת בתוכנה) תצורה מתאימה לפני שמתחיל חלק האוטומטי של הניתוח. הערה: תצורה היא קבוצה מותאמת בעבר של הגדרות תכנית ש, למשל, לוקחת בחשבון את צבע ההכתמה של המדגם וטווח גודל ובצורה של התאים כדי להתגלות. תצורות מותאמות כךמאפשר לייצר תוצאות זיהוי אופטימליות למינים שונים ואיכויות תמונה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר אפשרויות נוספות כגון השימוש באזורים בתמונה שיש לכלול או לא לכלול להימנע, למשל, שוליים ריקים תמונה או סדקים במדגם, במידת צורך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל הניתוח על ידי לחיצה על הכפתור Analyze. אם בחר, להגדיר אזורים בתמונה שיש לכלול או לא לכלול שימוש בכלי מצולע, מלבן או העיגול. הניתוח האוטומטי הבא משתמש באלגוריתמים גמישים כדי לתקן כמה ליקויי תמונה (למשל, לעומת זאת עני) ולשפר את ניגוד המבוסס על איכות התמונה. </li></ol>

<ol><li>Schweingruber, F. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSchweingruber%2C+FH+%22Tree+Rings+and+Environment%3A+Dendroecology%22">Tree Rings and Environment: Dendroecology</a>. , Haupt. Bern. (1996).</li>
<li>Sheppard, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendroclimatology%3A+extracting+climate+from+trees%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdisciplinary+Reviews%3A+Climate+Change%22%5BJournal%5D)">Dendroclimatology: extracting climate from trees.</a> Wiley Interdisciplinary Reviews: Climate Change. 1, 343-352 (2010).</li>
<li>Wagenführ, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWagenf%C3%BChr%2C+R+%22Anatomie+des+Holzes%3A+Strukturanalytik+-+Identifizierung+-+Nomenklatur+-+Mikrotechnologie%22">Anatomie des Holzes: Strukturanalytik - Identifizierung - Nomenklatur - Mikrotechnologie</a>. , DRW-Verlag Weinbrenner. (1999).</li>
<li>Tennessen, D., Blanchette, R. A., Windes, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiating+Aspen+and+Cottonwood+in+Prehistoric+Wood+from+Chacoan+Great+House+Ruins%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Archaeological+Science%22%5BJournal%5D)">Differentiating Aspen and Cottonwood in Prehistoric Wood from Chacoan Great House Ruins.</a> Journal of Archaeological Science. 29, 521-527 (2002).</li>
<li>Rowell, R. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRowell%2C+RM+%22Handbook+of+Wood+Chemistry+and+Wood+Composites%22">Handbook of Wood Chemistry and Wood Composites</a>. , CRC Press, Taylor & Francis Group. Boca Raton, FL. (2005).</li>
<li>Kaennel, M., Schweingruber, F. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKaennel%2C+M+%22Multilingual+Glossary+of+Dendrochronology.+Terms+and+definitions+in+English%2C+German%2C+French%2C+Spanish%2C+Italian%2C+Portuguese+and+Russian%22">Multilingual Glossary of Dendrochronology. Terms and definitions in English, German, French, Spanish, Italian, Portuguese and Russian</a>. , Haupt. Berne. (1995).</li>
<li>Esper, J., Frank, D. C., Luterbacher, J., et al. A changing world: challenges for landscape research. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEsper%2C+J+%22On+selected+issues+and+challenges+in+dendroclimatology%22">On selected issues and challenges in dendroclimatology</a>. Kienast, F. , Springer. Dordrecht. 113-132 (2007).</li>
<li>Esper, J., Frank, D. C., Wilson, R. J. S., Büntgen, U., Treydte, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uniform+growth+trends+among+central+Asian+low+and+high+elevation+juniper+tree+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Trees%22%5BJournal%5D)">Uniform growth trends among central Asian low and high elevation juniper tree sites.</a> Trees. 21 (2), 141-150 (2007).</li>
<li>Frank, D. C., Nievergelt, D., Esper, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Summer+temperature+variations+in+the+European+Alps%2C+AD+755-2004%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Climate%22%5BJournal%5D)">Summer temperature variations in the European Alps, AD 755-2004.</a> Journal of Climate. 19 (2), 5606-5623 (2006).</li>
<li>Treydte, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Millennium-long+precipitation+record+from+tree-ring+oxygen+isotopes+in+northern+Pakistan%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Millennium-long precipitation record from tree-ring oxygen isotopes in northern Pakistan.</a> Nature. 440, 1179-1182 (2006).</li>
<li>Heinrich, I. Dendrogeomorphology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHeinrich%2C+I+%22The+Encyclopedia+of+Quaternary+Science%22">The Encyclopedia of Quaternary Science</a>. Elias, S. A. 2, Amsterdam, Elsevier. 91-103 (2013).</li>
<li>Verheyden, A., De Ridder, F., Schmitz, N., Beeckman, H., Koedam, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+time+series+of+vessel+density+in+Kenyan+mangrove+trees+reveal+a+link+with+climate%29%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">High-resolution time series of vessel density in Kenyan mangrove trees reveal a link with climate).</a> New Phytologist. 167, 425-435 (2005).</li>
<li>Abrantes, J., Campelo, F., García-González, I., Nabais, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+control+of+vessel+traits+in+Quercus+ilex+under+Mediterranean+climate%3A+relating+xylem+anatomy+to+function%5BTitle%5D)+AND+%22Trees%22%5BJournal%5D)">Environmental control of vessel traits in Quercus ilex under Mediterranean climate: relating xylem anatomy to function.</a> Trees. 27, 655-662 (2013).</li>
<li>Fengel, D., Wegener, G. W. ood Wood: Chemistry, Ultrastructure, Reactions. , Kessel Verlag, Remagen. (2003).</li>
<li>Heinrich, I., Gärtner, H., Monbaron, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tension+wood+formed+in+Fagus+sylvatica+and+Alnus+glutinosa+after+simulated+mass+movement+events%5BTitle%5D)+AND+%22IAWA-Journal%22%5BJournal%5D)">Tension wood formed in Fagus sylvatica and Alnus glutinosa after simulated mass movement events.</a> IAWA-Journal. 28 (1), 39-48 (2007).</li>
<li>Climate Change 2013: The Physical Science Basis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Contribution+of+Working+Group+I+to+the+Fifth+Assessment+Report+of+the+Intergovernmental+Panel+on+Climate+Change%22">Contribution of Working Group I to the Fifth Assessment Report of the Intergovernmental Panel on Climate Change</a>. Stocker, T. F., et al. , Cambridge University Press. Cambridge, United Kingdom and New York, NY. (2013).</li>
<li>Lucchinetti, S., Schweingruber, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+perspectives+for+wood+anatomical+analysis+in+Dendrosciences%3A+The+GSL1-microtome%29%5BTitle%5D)+AND+%22Dendrochronologia%22%5BJournal%5D)">New perspectives for wood anatomical analysis in Dendrosciences: The GSL1-microtome).</a> Dendrochronologia. 32 (1), 47-51 (2014).</li>
<li>Arx, G., Carrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ROXAS+-+a+new+tool+to+build+centuries-long+tracheid-lumen+chronologies+in+conifers%5BTitle%5D)+AND+%22Dendrochronologia%22%5BJournal%5D)">ROXAS - a new tool to build centuries-long tracheid-lumen chronologies in conifers.</a> Dendrochronologia. 32 (3), 290-293 (2014).</li>
<li>Schweingruber, F. H. Microscopic Preparation Techniques for Plant Stem Analysis. , Verlag Dr Kessel, Remagen. (2013).</li>
<li>Hoadley, R. B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHoadley%2C+RB+%22Identifying+wood%3A+Accurate+results+with+simple+tools%22">Identifying wood: Accurate results with simple tools</a>. , The Taunton Press. Newtown, CT. (1990).</li>
<li>Nievergelt, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+core-microtome.+A+new+tool+for+surface+preparation+on+cores+and+time+series+analysis+of+varying+cell+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22Dendrochronologia%22%5BJournal%5D)">The core-microtome. A new tool for surface preparation on cores and time series analysis of varying cell parameters.</a> Dendrochronologia. 28 (2), 85-92 (2010).</li>
<li>Von Schnakenburg, P., Bräuning, A., Helle, G. Detecting annual growth rhythms from high-frequency densitometry and carbon isotopes in tropical mountain rain forest trees in southern Ecuador. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVon+Schnakenburg%2C+P+%22Tree+Rings+in+Archaeology%2C+Climatology+and+Ecology%22">Tree Rings in Archaeology, Climatology and Ecology</a>. Elferts, D., Brumelis, G., Gärtner, H., Helle, G., Schleser, G. 6, GFZ Potsdam. Potsdam. 96-99 (2008).</li>
<li>Garcia Gonzalez, I., Fonti, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ensuring+a+representative+sample+of+earlywood+vessels+for+dendroecological+studies%3A+an+example+from+two+ring-porous+species%5BTitle%5D)+AND+%22Trees%22%5BJournal%5D)">Ensuring a representative sample of earlywood vessels for dendroecological studies: an example from two ring-porous species.</a> Trees. 22 (2), 237-244 (2008).</li>
<li>Fonti, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+global+change+through+plastic+responses+of+xylem+anatomy+in+tree+rings%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Studying global change through plastic responses of xylem anatomy in tree rings.</a> New Phytologist. 185 (1), 42-53 (2010).</li>
<li>Purvis, M. J., Collier, D. C., Walls, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPurvis%2C+MJ+%22Laboratory+techniques+in+Botany%22">Laboratory techniques in Botany</a>. , Butterworth, London. (1966).</li>
<li>Schneider, L., Gärtner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+advantage+of+using+non-Newtonian+fluids+to+prepare+micro+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Dendrochronologia%22%5BJournal%5D)">The advantage of using non-Newtonian fluids to prepare micro sections.</a> Dendrochronologia. 31 (3), 175-178 (2013).</li>
<li>De Ridder, M., Vanden Bulcke, J., Van Ackera, J., Beeckman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tree-ring+analysis+of+an+African+long-lived+pioneer+species+as+a+tool+for+sustainable+forest+management%5BTitle%5D)+AND+%22Forest+Ecology+and+Management%22%5BJournal%5D)">Tree-ring analysis of an African long-lived pioneer species as a tool for sustainable forest management.</a> Forest Ecology and Management. 304, 417-426 (2013).</li>
<li>De Ridder, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+tree-ring+based+comparison+of+Terminalia+superba+climate%E2%80%93growth+relationships+in+West+and+Central%5BTitle%5D)+AND+%22Trees%22%5BJournal%5D)">A tree-ring based comparison of Terminalia superba climate–growth relationships in West and Central.</a> Trees. 27 (5), 1225-1238 (2013).</li>
<li>Redband, W. S. ImageJ. , U.S. National Institutes of Health. Bethesda, Maryland, USA. Available from:
 
 <a target="_blank" href="http://imagej.nih.gov/ij">http://imagej.nih.gov/ij</a> (1997).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

האתגרים של שילוב מוצלח ובר קיימא של האנטומיה עץ למחקר dendroecological הם, מלבד בעיות אנליטיות סעפת, בעיקר בשל היבטים טכניים. אתגרים אלה נעים בין דגימת עיקרון גישות ליצירת קטעי מיקרו באיכות גבוהה והניתוח שלאחר מכן 19. במבט הראשון, הדגימה של ליבות או אפילו דיסקים היא תהליך פשוט, כי כבר ידוע כבר שנים רבות. יש הרבה דברים שאפשר לעשות לא נכון וחוסר דיוק קטן בדגימה יכול לגרום לבעיות חמורות בשלבי ההכנה וניתוח שלאחר מכן. אי דיוקים קטנים כגון coring שהוא לא בדיוק בניצב לציר הגזע או לשימוש corer חידד מושלם הם לא בעיה, אם המטרה של המחקר מוגבל לתצלצל רוחב מדידות. עם זאת, כאשר מכוונים לניתוח מיקרוסקופי של הדגימות, כיוון דגימה שגוי עלול לגרום לעיוותים אופטיות שלקירות תא, ואילו השימוש בתוצאות corers בוטות בסדקי מיקרו בתוך הליבה. כתוצאה מכך, כאשר מנסים לחתוך קטעי מיקרו של ליבות אלה, החלקים הדקים פשוט מתפרקים והכנה יעילה היא כבר לא מובטחת. הדבר נכון גם עבור דגימת מיקרו-ליבה. קצה קהה יגרום לחץ גבוה כאשר אגרופן הוא שהוחדר לתוך עץ הגזע. כתוצאה מכך שכבת cambial תהיה דחוסה. תאי cambial (איור 5) וכתוצאה מכך הם לחץ ולא ניתן לנתח. דגימת דיסק היא אכן האסטרטגיה הטובה ביותר בעת ניתוח וריאציות צמיחה להתייחס לשינויים סביבתיים. למרבה הצער זה פשוט בלתי אפשרי לקחת דיסקים מכל העצים המיועדים לנדגמו לניתוח נוסף. אף על פי כן, במיוחד במקרה של מדעי זה נקרא דנדרוכרונולוגיה הטרופית, כמות מסוימת של דיסקי גזע יש צורך בשילוב עם ליבות תוספת. הדיסקים משמשים כבסיס להגדרת גבולות טבעת ולכך לתמוך בboundaries הוגדר על בסיס ניתוח ליבות תוספת 12,27,28. היתרונות והחסרונות של מלטש לעומת חיתוך לעתים קרובות דנו 1,11,21. כפי שהוזכר לעיל, ההליך הטוב ביותר תמיד תלוי בשאלת המחקר והפרמטרים כדי להיות מנותחים (מקרוסקופית או מיקרוסקופיים). אם ניתוח איזוטופי או כימי מוקרן בשלב עבודה נוספת, זה הוא בעל חשיבות עליונה שהאבק שוחק נוצר על ידי מלטש שעשוי למלא לתוך תא ומינה על כל המדגם, הוא הסיר בזהירות על ידי שאיבת אבק או אוויר בלחץ. חיתוך קטעי מיקרו הוא לכל מיקרוסקופי מנתח את הדרך המתאימה ביותר להכנת דגימות לניתוח נוסף. קודם כל, הסעיף מנותק המדגם, אז מה שיכול להישמר ללא זיהום כלשהו לניתוח נוסף פוטנציאלי. שנית סעיפים אלה מאפשרים למדידות ברזולוציה גבוהות של פרמטרים תא בודדים. יתר על כן, הימנעות הטבעת זמן רבטכניקה באמצעות פתרון קורנפלור 26 כדי לייצב את התאים היא יתרון גדול בחתך מיקרו. חסרון של חתך מיקרו הוא עדיין גודל המדגם המוגבל וכתוצאה מכך פעמים הכנה ארוכות. לסדרת ניתוחים בזמן אמת הולכת אחורה בזמן במשך מאות או אפילו אלף שנים, יש צורך בפיתוח נוסף מכשירים קיימים חיתוך 17,19, אלא גם עיבוד תמונה וניתוח 18. צעד ראשון לכיוון זה הוא הפיתוח של microtome הליבה 21, תחילת דרך ייצר לחתוך משטחי מטוס על ליבות (איור 1). הבדיקות האחרונות חשפו את היכולת לחתוך קטעי מיקרו של ליבות כל שימוש במכשיר זה (איור 1). קטעי מיקרו באיכות גבוהה לספק את העיקרון הבסיסי לניתוח תמונה יעיל. אם ניקח את התמונות תחת מיקרוסקופ הוא הליך נפוץ 19, אבל הניתוח האפקטיבי שלהם הוא עדיין משימה שצריכהלהיות מפותח נוסף 17. כל מערכות ניתוח התמונה הקיימות הן חצי אוטומטיות, כלומר, הם צריכים להיות פחות או יותר בשליטה בעוצמה על ידי הטכנאי. במקרים רבים, את התמונות צריכים להיות מתוקנות או אפילו תמונות חדשות צריכים להיעשות כדי לשפר בניגוד לרישום טוב יותר של המבנים על ידי התוכנה מבלי לשנות דופן תא עובי בתוך התמונה. כלי ניתוח תמונה מיוחדים כגון 18 רוחס, WinCell או סקריפטים ספציפיים לImageJ 29 מסוגלים לספק נתונים אנטומיים בסיסיים כמו מספר תא, ממד תא, דופן תא עובי ומיקום תא בתוך הטבעת השנתית. מדדים אנטומיים רבים נוספים שרלוונטיים בהקשר dendroecological ניתן לחשב ממדידות הבסיסיות אלה כגון גודל של הצינורות הגדולים, התפלגות גודל של צינורות, גודל earlywood או השורה הראשונה של צינורות, צפיפות עץ (אופטית), תוך שנתית פרופילים של גודל צינור וקיר תאעובי, ודפוסים של צינורות (בודדים, כפולות, וכו &#39;) קיבוץ. שימוש בתוכנה רוחס 18, את קווי המתאר של ומינה צינור (כלומר, תא ניצוח מים) וגבולות טבעת שנתיות מזוהים אוטומטי וחזותיים מיוצגים כשכבות על התמונה המקורית. אלגוריתמים לזיהוי לצינורות מבוססים על צבע, גודל וצורת מידע, אלגוריתמים לזיהוי לגבולות טבעת בהקשר המקומי של כל צינור. ארגז כלים מאפשר לנו לשפר באופן ידני את התוצאות הללו ישירות על ידי עריכת התכונות של השכבות, כלומר, מחיקה, הוספה ושינוי גבולות טבעת והצינור מתאר. לאחר עריכה, הפלט הסופי הנתונים, כוללים תא קיר עובי (עצי מחט), נוצר באופן אוטומטי והציל לגיליון אלקטרוני. באופן מלא מערכות אוטומטיות אינם זמינות כרגע, אפילו לא לעצי מחט מראה מבנה פשוט יחסית, אבל זה מטרה להתפתחויות עתידיות. זה הייתי מאוד תומך בפושילוב ll פרמטרים אנטומיים עץ סדרת זמן בניתוחים.

עצים, כמו גם שיחים, שיחים ננסיים, ואפילו עשבי תיבול, להראות דפוסי תגובת סעפת קשורים לשינויים בסביבה שלהם. דפוסים אלה היו כפופים לבוטניקה ופיזיולוגיה של צמח מאז אמצע המאה ה 19. אז, מחקר על צמחים עציים התמקד בעיקר בעצים וניתוח תיאורים של המבנה והשונה של טבעות שנתיות בהקשר אקולוגי 1. כאשר אנדרו Ellicott דאגלס המציא את טכניקת היכרויות הצולבות לעץ-טבעת מחקר 2, הקשר אקולוגי זה היה פחות או יותר דוכא על ידי היכולת החדשה לתאריך מדויק ממצאי עץ בארכיאולוגיה. צלב-היכרויות בפעם הראשונה אפשרו התארוך מדויק של טבעות עץ לשנה קלנדרית ועד עכשיו נחשבות כעמוד השדרה של מחקר עץ-טבעת בכל תחומי יישומה 1. במקביל, מאז סוף המאה ה -19, האנטומיה העץ התפתחה לדיסציפלינה מחקרית חשובה להתייחסד לתחומים רבים אחרים של מדעי טבע והוחלו 3. שני תחומים עיקריים שהוקמו: אנטומיה השיטתית עץ, אשר מהווה את הבסיס לזיהוי עץ בארכיאולוגיה 4, ואת האנטומיה העץ מיושמת, הקשורים לטכנולוגית עץ, פיזיולוגיה, פתולוגיה, ואקולוגיה 3.5. במחקר עץ-טבעת, dendroecology כיום מוגדר כנושא הכולל מחקרי עץ-טבעת קשורה מתמקדים במחקרים סביבתיים כגון תהליכי geomorphic (dendrogeomorphology), טמפרטורה ושחזורי ממטרים (dendroclimatology), שינויי מפלס מים (dendrohydrology) או אפילו תנודות קרחון ( dendroglaciology) 6. כהגדרה זו מציינת, ניתוחי עץ-טבעת הפכו חשובים יותר ויותר בתחום היכרויות ושחזור תהליכים סביבתיים כגון (i) תנאי אקלים בעבר על ידי ניתוח שינויים שנתי בטבעת-רוחב 7,8, עץ צפיפות 9 או 10 איזוטופים, או (Ii) tהוא להשנות מרווחים של תהליכי geomorphic 11. מחקרים מפורטים מאוד על אלה וריאציות טבעת רוחב והתוכן האיזוטופי שלהם להפגין את הצורך לנתח טבעות בפירוט רב יותר, כלומר, כדי ללמוד את המבנה האנטומי של הטבעות. עם זאת, מחקרים מפורטים של תכונות אנטומיים עץ בתוך הטבעות השנתיות הקשורים לשינויים סביבתיים הם נדירים 12,13. למרות שידועות בתכונות המיקרוסקופיות אלה 14, יש להם רק לעתים נדירות יושמו ברמה מיקרוסקופית למחקר dendroecological. יתר על כן, התזמון מדויק של תגובות צמיחה אלה בעצים גדלו באופן טבעי, חיוניים למטרות היכרויות מדויקות, כמעט ולא תעד לאחרונה 15. לגבי ההשפעות של התחממות כדור הארץ 16, השיפור של קיים ופיתוח של טכניקות חדשות כדי להקליט ולכמת תהליכים סביבתיים בעבר ובמתמשך נדרש, במיוחד במונחים של מחקר השפעת האקלים 11.על ידי הרחבת מחקר אנטומי עץ מסורתי לאנטומיה עץ מבוסס מבחינה אקולוגית 17, Dendro-מדענים יכולים לנתח פרמטרים חדשים ולפתח שיטות חדשות כדי להבין את ההשפעות קצרות טווח וארוך טווח של גורמים סביבתיים ספציפיים על האנטומיה של צמחים עציים 18. ידע מפורט על שינויים בפרמטרים שונים בתוך תא טבעות בודדות הקשורים לנהגים מסוימים (לדוגמא, כוחות מכאניים, וריאציות אקלים) הוא הדרישה הבסיסית להבנה השונות בהיווצרות טבעת עץ. בהשוואה למדידות טבעת-רוחב נפוצה, זיהוי וריאציות אנטומיים עץ דורש טכניקות הכנה מורכבות יותר ורחבה שדורשות הרבה עבודה וזמן. נהלים מפורטים של חיתוך מדגם, צביעה, והטבעה הם מגוונים והם תמיד תלויים במטרה של המחקר 19. לניתוח מקרוסקופית של רוחב טבעת בעצי מחט או מבנים אפילו למספר, גודל או distribution כלי מעץ קשה ב, את פני השטח של מדגם נפוץ מלוטש באמצעות נייר מחוספס קנס או מכונות ליטוש מיוחד 20. חסרון של שיטה זו הוא במילוי של התאים הבודדים עם אבק שמונע ניתוח מיקרוסקופי חצי אוטומטי נוסף 21. התוצאות הטובות ביותר עבור הכנת מדגם מקרוסקופית מושגות כאשר פני השטח מדגם נחתכים באמצעות סכין גילוח או אחר סכין חד. ואילו עבור מדגמים קטנים, סכיני גילוח הם כלי מושלם; דגימות גדולות יותר כליבות דורשות החיתוך של משטחי מטוס על פני כל ליבות המידה. בניגוד למלטש, התאים אינם מלאים באבק, המאפשר הכנה נוספת לניתוח תמונה רצוף. יתר על כן, לומן הפתוח התא, קירות התא לחתוך כראוי, ועל פני השטח המטוס מכלל המדגם לאפשר היישום של צפיפות בתדירות גבוהה 22 לכל ליבת המידה. לתמונת ניתוחים, את פני השטח של דגימות (תאקירות) יכולים להיות מוכתמים באמצעות דיו כהה ולאחר מכן ניתן יהיה לבצע את לומן התא הפתוח עם גיר לבן על מנת לשפר את הניגוד שבין דופן התא ואזור הלום 19,23. טכניקה פשוטה למדי זה מאפשרת הערכה מקרוסקופית בסיסית של מבני תא גדולים יותר למדידות גודל כלי דם. טכניקות אלה לחיתוך משטחי מטוס מספיקות לניתוחים מקרוסקופיים. לאנטומיים עץ מפורט ניתוח (כלומר, מיקרוסקופי), מיקרוסקופ אור מועברת היא השיטה הנפוצה ביותר שיושמה במדעי Dendro. תאי עצה להבחין בתהליכים מורכבים הכוללים קביעת סוג התא, חלוקת תא, התמיינות תאים, ולתכנת תאי מוות 24. מאז התזמון והקצב שבו תהליכים אלה מתרחשים לקבוע מאפיינים אנטומיים תא, תנאים סביבתיים המשפיעים על תהליכים אלה יכולים ליצור סטיות אנטומיים במבנה הטבעת. כתנאי חשוב לאלה לנתחים, קטעי מיקרו צריך להיות מוכנים עם 19 microtome. בעת הכנת דגימות עבור חתך, את הנראות של כיוון tracheid או סיבים היא קריטיות. השימוש ביד מונעת החלקת microtomes מומלץ לחתוך קטעי מיקרו כי טכניקה זו מאפשרת חלקים באיכות גבוהה בהתאם לצורך לתמונה מנתח 19. בהתאם למטרה הספציפית של מחקר מסוים, קטעי מיקרו נחתכים בניצב או מקביל במידת האורך של התאים. אז סעיפים אלה מצולמים מתחת למיקרוסקופ וממדים תא נמדדו באמצעות תמונה מיוחדת מנתחים תוכנה. עד לאחרונה, את היכולת להכין קטעי מיקרו הוגבלה לגודל מדגם קטן (כ 1 סנטימטר x 1 סנטימטר) בלבד. זה מקובל לנתח אירועים בודדים כמו הפרעות בשנים מסוימות, אבל טכניקה זו אינה מאפשרת ניתוח סדרת הזמן הממושך הנדרש לשחזורים סביבתיים. מאמץ זה יכול להיות רק להביןד באמצעות הפיתוח של נהלי הכנה חדשים, יעילים וכלכליים ושיטות אנליטיות. בשנים האחרונות, אנשי המעבדה עץ-הטבעת בWSL מכון המחקר השוויצרי הפדרלי בשוויץ החלו עבודה אינטנסיבית בנושא זה. כתוצאה מכך, מכשירים חדשים וטכניקות ניתוח פותחו כדי לתמוך ברעיון של שילוב תכונות אנטומיים עץ למגוון רחב של נושאי מחקר סביבתיים.

<table><tbody><tr><td>תוספת קורר</td><td></td><td></td><td>http://www.haglofinc.com/index.php?option=com_content&view=article & id=57& Itemid=88& lang=en</td></tr><tr><td>Core-Microtome</td><td></td><td></td><td>http://www.wsl.ch/dendro/products/microtomes/index_EN</td></tr><tr><td>מיקרוטום</td><td></td><td></td> מעבדה <td>http://www.wsl.ch/dendro/products/microtomes/index_EN</td></tr><tr><td>Trephor מיקרו קורר</td><td></td><td></td><td>http://intra.tesaf.unipd.it/Sanvito/trephorEn.asp</td></tr><tr><td>תמיסת</td><td></td><td></td> Nawashin <td>עשרה חלקים 1% חומצה כרומית, ארבעה חלקים 4% פורמלדהיד וחלק אחד חומצה אצטית</td></tr><tr><td>כחול פיקרי-אנילין חלק</td><td></td><td></td><td>אחד כחול אנילין רווי וארבעה חלקים טריניטרופנול מומס ב-95% אתנול</td></tr><tr><td>ספרנין</td><td></td><td></td><td>נוסחה אמפירית (סימון גבעה) C20H19ClN4&nbsp;</td></tr><tr>נוסחה אמפירית <td>בצבע כחול</td><td></td><td></td> אסטרה <td>(סימון גבעה) C47H52CuN14O6S3&nbsp;</td></tr><tr>נוסחה ליניארית <td>אתנול</td><td></td><td></td><td>CH3CH2OH&nbsp;</td></tr><tr><td>קסילול (קסילן)</td><td></td><td></td><td>נוסחה ליניארית C6H4(CH3)2&nbsp;</td></tr><tr><td>קנדה Balsam</td><td></td><td></td><td>פתרון הטמעה למיקרוסקופיה</td></tr><tr><td>תוכנת</td><td></td><td></td> Roxas <td>http://www.wsl.ch/dienstleistungen/produkte/software/roxas/index_EN</td></tr><tr><td>תוכנת</td><td></td><td></td> ImageJ <td>http://imagej.nih.gov/ij/</td></tr> <tr><td>WinCell</td><td></td><td></td><td>http://imagej.nih.gov/ij/</td></tr></tbody></table>

פרספקטיבה טכנית במחקר העץ-טבעת מודרנית - כיצד להתגבר על dendroecological ואתגרי אנטומי עץ

A Technical Perspective in Modern Tree-ring Research - How to Overcome Dendroecological and Wood Anatomical Challenges

מחקר Dendroecological משתמש במידע המאוחסן בטבעות עץ להבין איך עצים בודדים ואפילו מערכות אקולוגיות יער כולו הגיבו לשינויים סביבתיים ולבסוף לשחזר שינויים כאלה. הדבר נעשה על ידי ניתוח וריאציות צמיחה אחורה בזמן ומקשרים פרמטרים מפעל ספציפי שונים לרשומות (לדוגמא) בטמפרטורה. שילוב פרמטרים אנטומיים עץ בניתוחים אלו יחזקו שחזורים, אפילו עד להחלטת הפנים-שנתית. לפיכך, אנו מציגים פרוטוקול על איך לטעום, להכין, ולנתח דגימה מעץ לניתוחים מקרוסקופית משותפים, אלא גם עבור ניתוחים מיקרוסקופיים שלאחר מכן. יתר על כן אנחנו מציגים פתרון אפשרי לניתוח תמונות דיגיטליות שנוצרו מדגימות קטנות וגדולות משותפות לתמיכה בזמן סדרת ניתוחים. הפרוטוקול מציג את השלבים הבסיסיים כפי שהם כיום ניתן להשתמש. מעבר לכך, יש צורך מתמשך לשיפור טכניקות קיימות, ופיתוח של t החדשechniques, להקליט ולכמת תהליכים סביבתיים בעבר ובמתמשך. מחקר אנטומי עץ מסורתי צריך להיות מורחב כדי לכלול מידע אקולוגי לתחום זה של מחקר. זה יתמוך Dendro-מדענים שמתכוונים לנתח פרמטרים חדשים ולפתח שיטות חדשות כדי להבין את ההשפעות לטווח קצרות וארוכות של גורמים סביבתיים ספציפיים על האנטומיה של צמחים עציים.

כל ניתוחי dendroecological תלויים בדגימות מדויקות, לא משנה אם דיסקים, ליבות, או ליבות מיקרו נלקחות. לשם כך, המכשירים צריכים להיות בצורה מושלמת (חידדה בצורה מדויקת), כדי למנוע סדקי מיקרו בתוך מדגם העץ. בעת הכנת משטחים על ליבות תוספת, השימוש בmicrotome ליבה חיוני. היכולת יש תאים פתוחים, שיכול להיות מטופלים נוספים כדי לשפר בניגוד לתמונת בדיקות ומדידות גודל כלי (איור 1), היא צעד חשוב ראשון לקראת אימוצו של מבנים אנטומיים לזמן סדרת ניתוחים. לפעמים הצפיפות של מדגם פרקט מונעת את השימוש בmicrotome. במקרה זה ליטוש נכון וההסרה הבאה של נסורת מוגזמת מכלי עם מדחס או ואקום היא האפשרות הטובה ביותר. לניתוח מפורט יותר של מבני תא קטנים יותר כמו earlywood וtracheids latewood בעצי מחט, קטעי מיקרו באיכות גבוהה יש צורך. כאן, potentiחפצי אל כגון קירות תא משניים שפשטו את קיר הצורך העיקרי שיש להימנע מן (איור 2). אם החפצים הללו מתרחשים בתמונות הדיגיטליות, ניתוח אוטומטי של ממדי התא הוא כבר לא אפשרי. החפצים אז צריכים להיות מתוקנים באופן ידני, וזה זמן רב, וברוב המקרים תוצאות במדידות לא נכונות של ממדי תא. היישום הפשוט של נוזל ללא הניוטונית, כלומר, פתרון עמילן תירס, לחלק העליון של המדגם תומך ביציבות המבנה, תוך צמצום ההתרחשות של חפצים למינימום (איור 2) 26. יישום זה של עמילן תירס, מתאים לכל דגימות העץ כוללים מינים טרופיים, הופך את יישומו של נוהל ההטבעה על הדגימות לפני החיתוך מיותר. קטעי מיקרו מאפשרים קביעה מאובטחת יותר של טבעות שנתיות. הדבר נכון במיוחד במקרה של עצי מחט גוברות על המגבלות טבעיות שלהם, כלומר &lt;/ Em&gt;, בקו העצים באזורים אלפיניים גבוהים. מאוד טבעות צרות הן תכופות וקשים לזהות macroscopically (איור 3). במקרים קיצוניים, הטבעות מורכבות משורה אחת או שתיים מתאי earlywood ושורה אחת של תאי latewood שטוחים, אשר חסרים (בניגוד לתאי latewood נפוצים) קירות תא מעובה. לשם כך הם טובים יותר או אפילו גלויים רק בעת שימוש בחלקי מיקרו. יתר על כן, יכולות להיות מובחנות תנודות צפיפות מגבולות טבעת בצורה ברורה יותר, אשר מפשטת את זיהוי של טבעות שנתיות במיוחד בים התיכון והאזורים הטרופיים (איור 3). בניתוח תמונות בהגדלה של 40X או גבוה יותר, תאים בודדים גלויים והעובי של קירות התא שלהם הוא גם לזיהוי. תוכנת ניתוח אוטומטית למחצה מאפשרת המדידה של פרמטרים ספציפיים לאורך שבילים מוגדרים הבאים לכיוון הפיתוח של הזמן ומרחב שלהם (איור 4). עם זאת, צ&#39;אןGES של פרמטרים בודדים כגון לום התא או תא קיר עובי ניתן לקבוע מעל כל טבעת שנתית (איור 4) במידה. ניתן לעשות זאת לכל הטבעות הגלויות בתוך התמונה וזה תומך בצורך בניתוח סדרת הזמן ממושך באופן מלא. גם ניתוחי תמונה ניתן להשתמש כדי לקבוע את השלבים ההתפתחותיים של טבעות שנתיות בתוך תקופת הצמחייה (איור 5). כאשר מנתח את דמותו של סעיף מוכתם בSafranin והכחול-אסטרה באמצעות אור מקוטב, אפילו בשלבים השונים של lignification, מתחיל בפינות החיצוניות של קירות התא עד lignification המלא של דופן התא המשני, להיות גלוי. סיבה לכך הוא קירות תא lignified (בוגרים) לזרוח באור מקוטב (איור 5). מידע מפורט יכול להיות קשור לנתונים סביבתיים המתועדים לתקופה הצמחייה המתאימה כדי לקבוע למשל relati אקלים צמיחה מפורט יותר<html> onship. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/52337/52337fig1.jpg" /> איור 1. דוגמאות לסעיף מיקרו ומשטח מטוס מוכן של אלון כולל טבעת רוחב ומדידות גודל כלי שמאל:. חלק החיצוני ביותר של ליבת תוספת אלון. הליבה בקוטר 5 מ&quot;מ נחתכה באמצעות microtome ליבה. המשטח היה אז מוכתם שחור באמצעות סמן המורגש ותאים היו מלאים בגיר לבן לאחר הכתם היה יבש. מימין: הגרף המצביע על מדידות טבעת רוחב וגודל הכלי נעשו על פני השטח של הליבה מוצגת בפינה השמאלית. לא היו צורך בחלקים מיקרו לעשות מדידות אלה בשל פני השטח ברורים שנוצרו על ידי microtome הליבה (שונה אחרי 21). תחתון: סעיף Micro מנותק ליבת תוספת, מוכתם, מיובש וקבוע בלזם קנדה. עובי: 20 מיקרומטר, אורך: 25 סנטימטר.<html> g &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/52337/52337fig2.jpg" /> איור 2. תמונות של חלקי מיקרו לחתוך ללא ייצוב לעומת לחתוך קטע באמצעות פתרון עמילן תירס שמאל:. סעיף מיקרו מראה חיתוך חפצים בtracheids earlywood של כוניפאר. המדגם לחתוך ללא הטבעה וכתוצאה מכך הקירות משניים ולא דקים של תאי earlywood פוצלו מהקיר הראשי (חיצים כחולים). מימין: סעיף מיקרו ללא חפצים כלשהם בtracheids earlywood של כוניפאר. סעיף זה (מדגם זהה כפי שמוצג בצד השמאל) נחתך לאחר יישום פתרון קורנפלור עם מברשת על גבי משטח המדגם. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52337/52337fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <html> ove_content &quot;fo: לשמור-together.within-page =&quot; תמיד &quot;&gt; <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/52337/52337fig3.jpg" /> . איור 3. דוגמאות לגבולות טבעת שנתיות כמעט לא מורגש שמאל: סעיף מיקרו של ליבת תוספת (כאן: decidua Larix) מראה גבול טבעת (חץ שחור) שצוין על ידי שורה אחת של תאי latewood שטוחים ללא כל עיבוי של קירות התא. טבעת זה לא תהיה גלויה macroscopically. מימין: תנודות Intra-שנתי צפיפות (חץ לבן) הם נפוצות במינים ים-תיכוניים (סעיף מיקרו: Quercus אילקס). השינוי ההדרגתי של מבנה התא לכיוון latewood וחזרתי למבנה earlywood (חץ לבן) מאפשר הבחנה תנודות צפיפות מגבולות טבעת אמיתית (חץ שחור). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52337/52337fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> הין-page = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/52337/52337fig4.jpg" /> איור 4. איור של אזור לומן ומדידות עובי דופן בתוך טבעת שנתית של כוניפאר למעלה:. תמונה חותך המראה את תוצאות למופת של ניתוח רוחס בעץ-טבעת של Pinus sylvestris (אורן סקוטי). גבולות טבעת מוצגים בצהוב ומתווים של ומינה tracheid בציאן. לקובץ אחד רדיאלי (ומינה tracheid הכחולה) עובי דופן התא שנמדד מיוצג על ידי עיגולים אדומים. סרגל קנה מידה = 100 מיקרומטר שחור. תחתון:. שינויי פנים-שנתי באזור לום tracheid ותא-קיר tracheid עובי לטבעת השנתית כולו <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52337/52337fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/52337/52337fig5.jpg" /> איור 5. examplדואר של טבעת שנתית יוצרים. התמונה שנלכדה תחת מיקרוסקופ אור עם אור מקוטב ממייקרו-סעיף מוכתם Safranin והכחול-אסטרה מתקבל ממייקרו-ליבה שנדגמו ב -7 ליולי, 2007 מdecidua Larix גדלה ב Lötschental ב1,300 מ &#39;מעל פני ים. על מיקרו-סעיף זה תאי cambial, התאים בשלב ההתרחבות, התאים בשלב קיר העיבוי והתאים הבוגרים הם מוכרים. הרוחב משיק של התמונה מכסה ~ 1 מ&quot;מ של חתך העצה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52337/52337fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

כאן אנו מציגים פרוטוקול המתאר כיצד לדגום דגימות עץ להערכה כוללת של מבני הגידול שלהן. מתוארות טכניקות הכנה והדמיה מאקרו ומיקרוסקופיות הנחוצות ליצירת מערך נתונים אנטומי ודנדרואקולוגי של עץ משוכפל היטב וברזולוציה גבוהה.

פרספקטיבה טכנית במחקר העץ-טבעת מודרנית - כיצד להתגבר על Dendroecological ואתגרי אנטומי עץ

Dendroecological research uses information stored in tree rings to understand how single trees and even entire forest ecosystems responded to ...

המטרה הכללית של הניסוי הבא היא להפיק דגימות עץ משוכפלות היטב ובעלות רזולוציה גבוהה. מערכי נתונים אנטומיים ללימוד השפעותיהם של זמן וגורמים סביבתיים על צמיחת עצים ושיחים. מטרה זו מושגת באמצעות שימוש בנוזל נונ-ניוטוני לייצוב תאי הצמח במהלך חיתוך במיקרוטום, מה שמאפשר ניתוח מיקרוסקופי מפורט של הדגימות כשלב שני.החתכים המיקרוסקופיים נצבעים בצביעה כפולה כדי להקל על ההבחנה בין תאים מעוייצים לתאים שאינם מעוייצים, ולאחר מכן מצולמים תמונות דיגיטליות של הדגימות. לבסוף, ניתן לבצע ניתוחים ממוחשבים מבוססי-תאים של צמיחת הצמח וניתוחי סדרות עיתיות נלוות כדי לאפשר הערכה של הפרמטרים האנטומיים הרלוונטיים של העץ. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות הוא שבניגוד לשיטות אחרות, התאים אינם ממולאים בנסורת, מה שמוביל לדגימות באיכות ברורה בהרבה לצורך ניתוח תמונות.בנוסף, הוספת נוזל לא-ניוטוני לתאים במהלך החיתוך מאפשרת להימנע מהטכניקה הגוזלת זמן של הטמעת הדגימה בפרפין. המיקרוטומים החדשים שנראה בסרטון פותחו במעבדה שלנו בשיתוף עם Lu Netti של Shang Dubs וציריך. הם בולטים בזכות יציבות גבוהה של המערכת המנחה, המאפשרת חיתוך של דגימות גדולות ודחוסות.לדגימת ליבה מגזעי עצים. התחילו בהנחת מקדח ליבה (increment core) מחודד בניצב לציר הצמיחה של גזע העץ. לאחר מכן, סובבו את המקדח פנימה והשתמשו בקוצב (extractor) כדי להוציא את דגימת הליבה שהתקבלה מהעץ.סמנו את הליבה באמצעות מזהה (ID) ספציפי בעזרת עיפרון רך על פני השטח של הליבה, וחזרו על הפעולה בצדו השני של הגבעול לאחר שכל הדגימות נאספו. אחסנו את הליבות המסומנות במיכל מתאים כדי להגן עליהן מפני נזקים במהלך ההובלה. לאחר החזרה למעבדה, הצמידו את דגימות הליבה בכיוון הסיבים, במצב אנכי, על קורות תמיכה מעץ באמצעות דבק נגרים עמיד במים, והניחו להן להתייבש לצורך דגימה של מיקרו-ליבות.ראשית, השתמשו באיזמל כדי להסיר חלק מהקליפה לפי הצורך. לאחר מכן, מקמו מכשיר דגימה ייעודי בניצב לציר הצמיחה על הגבעול כפי שהודגם, והשתמשו בפטיש כדי לחדור אל xylem של הגבעול לעומק של כ-2 cm. סובבו את מכשיר הדגימה כדי לשבור את הגליל המיקרוסקופי שנוצר בתוך הכלי.לאחר מכן, הוצא את הליבה מהגבעול ואחסן אותה במבובת מיקרו-צנטריפוגה עם סימון. כדי לחתוך פני שטח שטוחים במדגם ליבה, התחל בקיבוע ליבת הגדילה הרלוונטית במחזיק הליבות של מיקרוטום ליבות שפותח לאחרונה לחיתוך משטחים מישוריים של ליבות לאורך כל היקפן. לאחר מכן, הרם את הליבה עד שתגע קלות בלהב, המקובע על מיסב כדורי לאורך הליבה, ומשוך את הלהב כדי לחתוך את החלק הראשון של ראש הליבה.בשלב הבא, דחפו את הסכין מאחורי הליבה. הרימו את מחזיק הדגימה בכ-10 מיקרון וחזרו על פעולת החיתוך עד שייחתך כשליש מקוטר הליבה, כך שיתקבל משטח חלק ורציף.עבור ניתוח תמונה מפורט של המבנה האנטומי של הדגימות, יש להכין חתכים מיקרוסקופיים באמצעות סוג אחר של מיקרוטום. ראשית, קבעו את דגימת הגליל הרלוונטית במחזיק הדגימות של המיקרוטום. לאחר מכן, מקמו את להב המיקרוטום בהנחיית מיסבי הכדור ומשכו את הלהב מעל הגליל.דחפו את הלהב לאחור כדי להרים את הדגימה ב-20 עד 30 microns. לאחר מכן, משכו את הלהב מעל הדגימה. חזרו על תהליך זה עד שייווצר משטח רציף בחלקו העליון של הדגימה.כעת, בעזרת מברשת צבע, כסו את הפני השטח שנוצרו בתמיסת עמילן תירס. לאחר מכן, הרימו את הדגימה ב-15 microns והניחו את המברשת על פני השטח של הדגימה. משכו את הלהבים באיטיות לעבר הדגימה כדי להתחיל חיתוך דק מתחת למברשת, והשתמשו במברשת כדי להנחות את הפלח על פני השטח של הלהב כאשר כל הפלח נחתך.השתמשו במברשת אחרת ובמים כדי להסיר את הרקמה מהלהב והניחו אותה על תבנית זכוכית כדי לאפשר הבחנה בין המבנים המועצים לשאינם מועצים. שטפו את הגליצרין במים באמצעות פיפטה. לאחר מכן, כסו את החתך הרטוב בכמה טיפות של תערובת של saffron ו-astro blue.לאחר חמש דקות, שטפו את הצבעים במים ולאחר מכן בצעו דהידרציה מיידית של הסניט באמצעות טיפולים עוקבים באתנול. לאחר טיפול הדהידרציה באתנול, שטפו את הסניט שוב ושוב ב-100%xol. ברגע שה-xol נשאר צלול.כסו את הרקמה בטיפה של 100% Canada balsam ובזכוכית כיסוי, תוך הקפדה להימנע מבועות אוויר. לאחר מכן, הניחו את התוצר – למסלול מיקרוסקופי – בין שני פסי פלסטיק עמידים לחום והניחו אותו על פלטה ממתכת. הניחו משקולת מעל הזכוכית כדי לשמור על החתך שטוח, ואז הכניסו את הזכוכית לתנור בטמפרטורה של 60 degree Celsius.לאחר 12 שעות, יש להניח לסלייד להתקרר לטמפרטורת החדר, ולאחר מכן להסיר את המשקולת ואת רצועת הפלסטיק. לבסוף, יש לנקות את הסלייד באמצעות להבי תער כדי להסיר שאריות של בלסם. לפי נהלי החיתוך והצביעה שהוצגו קודם לכן, ניתן להכין סוגים שונים של דגימות בגדלים ובצורות שונות, וכן להשתמש במחזיקים מיוחדים עבור הליבה כדי ליצור תמונות דיגיטליות של פני השטח של הליבה לצורך ניתוח כלי דם. ראשית, חתכו את מישור פני השטח של הליבה באמצעות המיקרוטום לליבות כפי שהודגם זה עתה, והשתמשו בטוש לבד כדי לצבוע את פני השטח שנוצרו בשחור.ברגע שהצבע מתייבש, שפשפו את פני השטח של הליבה בגיר לבן ולאחר מכן לחצו את הגיר לתוך התאים באמצעות אצבע. הסירו שאריות גיר עודפות, ולאחר מכן הניחו את הליבה על המשטח של מיקרוסקופ בינוקולרי המצויד במצלמה דיגיטלית, והתחילו מצד אחד של הליבה. כעת רכשו רצף של תמונות חופפות באופן חלקי עד שכל פני השטח יתועדו.לאחר מכן, חברו את התמונות הבודדות כדי ליצור תמונה מלאה של פני השטח של הגליל, במטרה להפיק תמונות דיגיטליות מהשקופיות המיקרוסקופיות. הניחו את השקופית על במת המיקרוסקופ ובחרו בהגדלה המתאימה למבנים המיועדים לניתוח. לבסוף, רכשו תמונות חופפות של החתכים המורכבים על השקופיות המיקרוסקופיות הנקיות, כפי שהודגם זה עתה עבור דגימת פני השטח של הגליל, וחברו את התמונות ליצירת תמונה אחת מלאה של החתך.היכולת להשיג תאים פתוחים היא שלב ראשון וחשוב לקראת התאמת מבנים דנדרו-אקולוגיים אנטומיים לניתוח סדרות עתיות. לצורך ניתוח מפורט יותר של טרכיאות בעץ מוקדם או בעץ מאוחר בעצי מחט, נדרשים כאן חתכים מיקרוסקופיים באיכות גבוהה. יש להימנע מארטפקטים פוטנציאליים כגון דפנות תאים שבורות.יישום של נוזל לא-ניוטוני על הדגימה, כגון תמיסת עמילן התירס שהודגמה כעת, תומך ביציבות מבנה התא. חתכים מיקרוסקופיים מאפשרים קביעה בטוחה יותר של טבעות שנתיות. הדבר נכון במיוחד עבור עצי מחט הגדלים בגבוליים הטבעיים שלהם.כפי שניתן לראות כאן, טבעות צרות מאוד הן שכיחות אך קשה לזיהוי באופן מאקרוסקופי. במקרים קיצוניים, הטבעות מורכבות משורה אחת או שתיים של תאים, שייתכן שיהיו גלויות רק בשימוש בחתכים מיקרוסקופיים. בניתוח תמונות בהגדלות גבוהות, ניתן לראות תאים בודדים.תוכנה לניתוח חצי-אוטומטי מאפשרת לקבוע שינויים בפרמטרים בודדים, כגון עובי דופן התא, עבור כל הטבעות הנראות בתמונה, מה שמעיד על הצורך בניתוח סדרות זמן מורחב. צביעה כפולה של חתכים מיקרוסקופיים מאפשרת ויזואליזציה של שלבי הלגניפיקציה השונים. מידע זה יכול להצמידם לאחר מכן לנתונים סביבתיים של תקופת הצמיחה הרלוונטית כדי לקבוע קשר מפורט יותר בין האקלים לצמיחה לאחר פיתוחו.טכניקה זו סללה את הדרך עבור חוקרים בתחום האקולוגיה של DRO לחקור פרמטרים אנטומיים שונים של עצים ושיחים. שימוש בשיטה זו מקצר באופן דרסטי את הזמן הדרוש להפקת חתכים גדולים ובאיכות גבוהה. יש לנקוט תמיד באמצעי זהירות, כגון עבודה תחת מנדף כימי וענידת כפפות, בעת ביצוע הליך זה.לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה לגבי האופן שבו ניתן להפיק מערכי נתונים אנטומיים בעלי רזולוציה גבוהה ושחזוריות טובה לתמיכה בניתוח סדרות עיתיות.

a-technical-perspective-modern-tree-ring-research-how-to-overcome

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

אפיון שחיקה של dendrogeomorphology בדרך כלל התמקדה במדויק מציאת שעת ההתחלה של חשיפה הבסיס, על ידי בחינת מאקרוסקופית או שינויים ברמת התא הנגרם על ידי חשיפה. כאן, אנו מציעים תיאור מפורט של טכניקות הרומן שונות כדי להשיג יותר מדויק שחיקת המחירים מנתונים microtopographic ומדויקים.

מעבדה ופרוטוקול שדה עבור הערכת גיליון שחיקת המחירים מ- Dendrogeomorphology

כאן אנו מציגים פרוטוקול כיצד להימנע מסדקים זעירים בליבות ההגדלה על ידי הפעלת מקדחה אלחוטית עם מכפיל מומנט כדי למזער בעיות בעת ניקוד עצים, כמו גם את השפעתו על הכנת מקטעי מיקרו ארוכים. פרוטוקול זה כולל גם הליך לחידוד הקורים בשטח.

זרימת עבודה מתקדמת ללקיחת ליבות הגדלה באיכות גבוהה - טכניקות והתקנים חדשים

כאן אנו מראים כיצד לעבד ליבות עץ עם שרשרת כלים טומוגרפיה ממוחשבת רנטגן. למעט מיצוי כימי למטרות מסוימות, אין צורך בטיפול מעבדה פיזי נוסף. שרשרת הכלים יכולה לשמש להערכות ביומסה, לקבלת נתוני רוחב MXD/טבעות עצים וכן לקבלת נתונים כמותיים על אנטומיה של עץ.

ניתוח ליבת עץ עם טומוגרפיה ממוחשבת רנטגן

אנו מציגים פרוטוקול לשימוש בתושבות המודפסות בתלת-ממד כדי לתקן ליבות תוספות בשטח ללא צורך לפרוק ולהדביק אותן על תושבות עץ. מחזיק ה-GSC החדש מאפשר למקם את הליבות במיקרוטום ליבה כדי לחתוך את פני השטח שלהן ולהעביר אותן ישירות ללכידת תמונה דיגיטלית.

זרימת עבודה חדשה לדגימה ודיגיטציה של ליבות הפרש קבוע 

מאמר זה מתאר את העיצוב, בנייה, ותפקוד של מתקן 1,000 מ '2 המכיל 24 חלקות 33.6 מ 2 שדות בודדים מצוידות למדידת נפחי נגר סך הכל עם זמן ואוסף של subsamples נגר במרווחים שנבחרו לכימות של מרכיבים כימיים במים ניגר מ מדשאות בית מדומה.

עיצוב ובנייה של מתקן מחקר ניגר עירוני

שיטת EPA 1615 משתמשת במסנן אלקטרו-פוזיטיבי כדי לרכז אנטרו-וירוסים ונורו-וירוסים במי הסביבה ובמי השתייה. כתב יד זה מתאר את הליך איסוף הדגימות לניתוחי שיטה 1615.

EPA שיטת המדידה של 1615. Enterovirus ומופע norovirus במים על ידי תרבות וRT-qPCR. I. איסוף דגימות וירוסים

כדי להקל על המאמץ בחיפוש אחר ניסוחים חסכוניים וידידותיים יותר לסביבה של דבקי עץ מבוססי מוצר טבעי, עבודה זו מדגימה את ההכנה והבדיקה של דבקי עץ מבוססי זרעי צמחים. פרוטוקול זה מאפשר להעריך מוצרים חקלאיים מבוססי זרעי צמחים כמועמדים מתאימים להחלפת דבקי עץ על בסיס סינתטי.

הכנה ובדיקה של דבקי עץ מבוססי ארוחת זרעי צמח

כאן אנו מציגים הליך לכימות אנטרו-וירוס ונורו-וירוס במי סביבה ושתייה באמצעות PCR כמותי של שעתוק הפוך. התאוששות הנגיף הממוצעת ממי תהום עם הליך סטנדרטי זה משיטת EPA 1615 הייתה 20% עבור נגיף הפוליו ו-30% עבור נורו-וירוס עכברים.

EPA שיטת המדידה של 1615. Enterovirus ומופע norovirus במים על ידי תרבות וRT-qPCR. חלק שלישי. איתור וירוסים על ידי RT-qPCR

חלבונים משמשים לעתים קרובות לסימון פרוקי רגליים למחקר פיזור. מודגמות שיטות למתן סימני חלבון פנימיים וחיצוניים על פרוקי רגליים. טכניקות זיהוי סימני חלבון, באמצעות בדיקות אימונוסורבנט עקיפות או סנדוויץ' מקושרות לאנזים (ELISAs), מומחשות גם כן.

ניהול וזיהוי סימני חלבון על פרוקי רגליים לחקר פיזור

ניתן לשנות את העדפות התנהגות האכלה בבעלי חיים כדי ליישם תוכנית ניהול מרעה בגידולי עץ. כאן, אנו מציגים פרוטוקול להצגת מינון ליתיום כלוריד לאחר אכילת צמח חדש הגורם לסלידה מטעם מותנה.

כיצד ליצור סלידת טעם הותנה מַרעִית העטיפות בגידולים וודי עם מעלי גירה קטנות

למד שיטות דגימה וניתוח אנטומי של עץ לחקר דנדרואקולוגיה. הפרוטוקול משתמש בנוזל לא-ניוטוני לייצוב תאים במהלך חיתוך במיקרוטום, ומאפשר ניתוח מיקרוסקופי מפורט של מבני העץ ופרמטרים אנטומיים.

פרספקטיבה טכנית במחקר העץ-טבעת מודרנית - כיצד להתגבר על Dendroecological ואתגרי אנטומי עץ

גלה סרטונים נוספים