Polyacrylamide Gels for Invadopodia and Traction Force Assays on Cancer Cells

Rachel J. Jerrell; Aron Parekh

doi:10.3791/52343

ג'לים polyacrylamide לInvadopodia וגרירת חיל מבחני בתאי הסרטן

JoVE Journal
Medicine

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Medicine

Polyacrylamide Gels for Invadopodia and Traction Force Assays on Cancer Cells

ג'לים polyacrylamide לInvadopodia וגרירת חיל מבחני בתאי הסרטן

Full Text

12,689 Views

08:48 min

January 4, 2015

DOI: 10.3791/52343-v

Rachel J. Jerrell¹, Aron Parekh¹

¹Department of Otolaryngology,Vanderbilt University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

קשיחות מכאנית במייקרו-הסביבה של הגידול ממלא תפקיד מכריע בהתנהגות נהיגה ממארת על ידי הגדלת פעילות invadopodia וactomyosin התכווצות. ג'לים באמצעות polyacrylamide (PaaS), יכולים להיות מנוצלים מבחני invadopodia וכוח המתיחה ללמוד את המאפיינים פולשנית והתכווצות של תאי סרטן בתגובה למטריצת קשיחות.

המטרה הכוללת של הליך זה היא ליצור ג'לים פולי אקרילאמיד שניתן להשתמש בהם הן במבחני פולש, פודיה וכוח משיכה כדי לחקור את התכונות הפולשניות וההתכווצות של תאים סרטניים. זה מושג על ידי הפעלה ראשונה של החלקות הכיסוי של 14 מילימטר בעולמות של כלי פריחת זכוכית כדי להבטיח שג'לי הפולי אקרילאמיד קשורים לזכוכית. לאחר מכן, פתרונות פולי אקרילאמיד לשתי הבדיקות מוכנים להניב ג'לים בעלי קשיחות או תכונות מכניות שונות.

לאחר מכן מכינים את מבחני הפודיה שפלשו עם שכבה דקה של מטריצה חוץ-תאית עם תווית פלואורסצנטית כדי לזהות פירוק. לבסוף, הבדיקות נזרעות בתאים סרטניים לדגירת לילה, ולאחר מכן קיבוע וצביעה של הפולש, לוחות פודיה והדמיית תאים חיים של לוחות כוח המתיחה. בסופו של דבר, מיקרוסקופיה פלואורסצנטית משמשת להדמיית פולש, פודיה ופירוק מטריצה חוץ-תאית.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos