Name: טכניקה כירורגית להשתלה של רקמות שתלי כלי דם מהונדסים ולאחר In vivo ניטור (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: למדו פרוטוקול השתלת כלי דם מהונדסים בכבשים עם ניטור זרימת דם ולחץ עורקי בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת מחקר מדויק של התאמה ושיקום כלי דם בגוף החי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהלאומיים ללב וריאות המכון (R01 HL086582) ותאי גזע מדע קרן ניו יורק (NYSTEM, # חוזה &#160; C024316) לSTA ואיורים DDS משמשים בוידאו יופיטר הושלמו על ידי ג &#39;ון נייקוויסט; Illustrator הרפואי מאוניברסיטת מדינת ניו יורק בבאפלו.

<ol><li>Goldman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+patency+of+saphenous+vein+and+left+internal+mammary+artery+grafts+after+coronary+artery+bypass+surgery%3A+Results+from+a+Department+of+Veterans+Affairs+Cooperative+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: Results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 44, 2149-2156 (2004).</li>
<li>Achouh, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+%285-+to+20-year%29+patency+of+the+radial+artery+for+coronary+bypass+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+And+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Long-term (5- to 20-year) patency of the radial artery for coronary bypass grafting.</a> The Journal of Thoracic And Cardiovascular Surgery. 140, 73-79 (2010).</li>
<li>Conklin, B. S., Richter, E. R., Kreutziger, K. L., Zhong, D. S., Chen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+a+novel+decellularized+vascular+xenograft%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Engineering+%26+Physics%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of a novel decellularized vascular xenograft.</a> Medical Engineering & Physics. 24, 173-183 (2002).</li>
<li>Zhu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+anti-atherosclerotic+tissue-engineered+blood+vessel+by+A20-regulated+endothelial+progenitor+cells+seeding+decellularized+vascular+matrix%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Development of anti-atherosclerotic tissue-engineered blood vessel by A20-regulated endothelial progenitor cells seeding decellularized vascular matrix.</a> Biomaterials. 29, 2628-2636 (2008).</li>
<li>Quint, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decellularized+tissue-engineered+blood+vessel+as+an+arterial+conduit%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Decellularized tissue-engineered blood vessel as an arterial conduit.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 108, 9214-9219 (2011).</li>
<li>Kaushal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+small-diameter+neovessels+created+using+endothelial+progenitor+cells+expanded+ex+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Functional small-diameter neovessels created using endothelial progenitor cells expanded ex vivo.</a> Nat Med. 7, 1035-1040 (2001).</li>
<li>Galatos, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+Analgesia+in+Sheep+and+Goats%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Clinics+of+North+America%3A+Food+Animal+Practice%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and Analgesia in Sheep and Goats.</a> Veterinary Clinics of North America: Food Animal Practice. 27, 47-59 (2011).</li>
<li>Okutomi, T., Whittington, R. A., Stein, D. J., Morishima, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+effects+of+sevoflurane+and+isoflurane+anesthesia+on+the+maternal-fetal+unit+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anesth%22%5BJournal%5D)">Comparison of the effects of sevoflurane and isoflurane anesthesia on the maternal-fetal unit in sheep.</a> J Anesth. 23, 392-398 (2009).</li>
<li>Swartz, D. D., Russell, J. A., Andreadis, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+of+fibrin-based+functional+and+implantable+small-diameter+blood+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Engineering of fibrin-based functional and implantable small-diameter blood vessels.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 288, H1451-H1460 (2005).</li>
<li>Niklason, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+arteries+grown+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Functional arteries grown in vitro.</a> Science. 284, 489-493 (1999).</li>
<li>Dahl, S. L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Readily+Available+Tissue-Engineered+Vascular+Grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Readily Available Tissue-Engineered Vascular Grafts.</a> Science Translational Medicine. 3, 68ra69(2011).</li>
<li>Wu, W., Allen, R. A., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast-degrading+elastomer+enables+rapid+remodeling+of+a+cell-free+synthetic+graft+into+a+neoartery%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Fast-degrading elastomer enables rapid remodeling of a cell-free synthetic graft into a neoartery.</a> Nature Medicine. 18, 1148-1153 (2012).</li>
<li>Saami, K. Y., Bryan, W. T., Joel, L. B., Shay, S., Randolph, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fate+of+an+endothelium+layer+after+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+vascular+surgery+%3A+Official+Publication%2C+the+Society+for+Vascular+Surgery+%5Band%5D+International+Society+for+Cardiovascular+Surgery%2C+North+American+Chapter%22%5BJournal%5D)">The fate of an endothelium layer after preconditioning.</a> Journal of vascular surgery : Official Publication, the Society for Vascular Surgery [and] International Society for Cardiovascular Surgery, North American Chapter. 51, 174-183 (2010).</li>
<li>Ueberrueck, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+ovine+and+porcine+animal+models+for+biocompatibility+testing+of+vascular+prostheses%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of the ovine and porcine animal models for biocompatibility testing of vascular prostheses.</a> Journal of Surgical Research. 124, 305-311 (2005).</li>
<li>Labbé, R., Germain, L., Auger, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+completely+biological+tissue-engineered+human+blood+vessel%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">A completely biological tissue-engineered human blood vessel.</a> The FASEB Journal. 12, 47-56 (1998).</li>
<li>Samaha, F. J., Oliva, A., Buncke, G. M., Buncke, H. J., Siko, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+clinical+study+of+end-to-end+versus+end-to-side+techniques+for+microvascular+anastomosis%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">A clinical study of end-to-end versus end-to-side techniques for microvascular anastomosis.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 99, 1109-1111 (1997).</li>
<li>Huang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+end-to-side+anastomosis+technique+for+hepatic+rearterialization+in+rat+orthotopic+liver+transplantation+to+accommodate+size+mismatches+between+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels.</a> European Surgical Research. 47, 53-62 (2011).</li>
<li>Peng, H., Schlaich, E. M., Row, S., Andreadis, S. T., Swartz, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Ovine+ex+vivo+Arteriovenous+Shunt+Model+to+Test+Vascular+Implantability%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%2C+Tissues%2C+Organs%22%5BJournal%5D)">A Novel Ovine ex vivo Arteriovenous Shunt Model to Test Vascular Implantability.</a> Cells, Tissues, Organs. 195, 108(2011).</li>
<li>Zilla, P., Bezuidenhout, D., Human, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prosthetic+vascular+grafts%3A+Wrong+models%2C+wrong+questions+and+no+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Prosthetic vascular grafts: Wrong models, wrong questions and no healing.</a> Biomaterials. 28, 5009-5027 (2007).</li>
<li>Berger, K., Sauvage, L. R., Rao, A. M., Wood, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Healing+of+Arterial+Prostheses+in+Man%3A+Its+Incompleteness%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Healing of Arterial Prostheses in Man: Its Incompleteness.</a> Annals of Surgery. 175, 118-127 (1972).</li>
<li>Byrom, M. J., Bannon, P. G., White, G. H., Ng, M. K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+the+assessment+of+novel+vascular+conduits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery+%3A+Official+Publication%2C+the+Society+for+Vascular+Surgery+%5Band%5D+International+Society+for+Cardiovascular+Surgery%2C+North+American+Chapter%22%5BJournal%5D)">Animal models for the assessment of novel vascular conduits.</a> Journal of Vascular Surgery : Official Publication, the Society for Vascular Surgery [and] International Society for Cardiovascular Surgery, North American Chapter. 52, 176-195 (2010).</li>
<li>Swartz, D. D., Andreadis, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+vascular+tissue-engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Animal models for vascular tissue-engineering.</a> Current Opinion in Biotechnology. 24, 916-925 (2013).</li>
<li>Liang, M. -S., Andreadis, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+fibrin-binding+TGF-%CE%B21+for+sustained+signaling+and+contractile+function+of+MSC+based+vascular+constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Engineering fibrin-binding TGF-β1 for sustained signaling and contractile function of MSC based vascular constructs.</a> Biomaterials. 32, 8684-8693 (2011).</li>
<li>Han, J., Liu, J. Y., Swartz, D. D., Andreadis, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+functional+effects+of+organismal+ageing+on+smooth+muscle+cells+derived+from+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Molecular and functional effects of organismal ageing on smooth muscle cells derived from bone marrow mesenchymal stem cells.</a> Cardiovascular Research. 87, 147-155 (2010).</li>
</ol>

אין גילויים לדווח.

מטרת דו&quot;ח זה היא לספק הליך אמין ושחזור לTEVs שתל של עניין בעורק התרדמה כבש. עורקי ראש יליד בעלי החיים המשמשים במודל זה היו 0.5-.75 מ&quot;מ עובי ו4.5-5 מ&quot;מ בקוטר חיצוני. הטכניקה הניתוחית שתוארה כאן הייתה מוצלחת להשתלת TEVs של גיאומטריות שונות מדידת .25-1 מ&quot;מ עובי, 4-5 מ&quot;מ קוטר חיצוני ו -4 סנטימטרים באורך בהצלחה רבה מוכיח יעיל עד משך 3 חודשים, נקודת הסיום המיועדת. השימוש בטכניקה ניתוחית זו אפשרה הרכישה של נתונים כדי שיהיה קל יותר לאסוף ועקבי יותר. <p class="...

המוקד העיקרי לפיתוח TEVs היה לספק תחליף להחלפת שתל אוטולוגי כאשר כלי אוטולוגי אינם זמינים ולהגביל תחלואת מראה תורם. לדוגמא, מספר עוקף עורק כלילי ניתוחים בשנה חרג 350,000 בארה&quot;ב, והמקור האידיאלי של שתלים מתאימים נשאר העורק השמאלי הפנימי החלב הקדמי שמאלי, יורד בעורקים הכליליים ווריד saphenous 1. מאז אנשים רבים הסובלים ממחלות לב וכלי דם לא יכולים להיות מתאימים עורקים וורידים להחלפת שתל אוטולוגי, פיתוח TEVs נעשה אפוא שדה אינטנסיבי של מחקר במשך עשרות שנות 1-6. בעוד ההנדסה ואופטימיזציה של TEVs הרומן עברו התקדמות רבות, דיווחו על טכניקות כירורגיות המועסקות להשתיל TEVs עצמם לא היו נושא לדיון אינטנסיבי כזה. במקום זאת, פרוטוקולים בנוגע להשתלת TEVs למודלים של בעלי חיים הם במידה רבה עזבועד למחקר חוקרים. כתב היד הבאה מדגימה כיצד להשתיל TEVs על ידי ניצול גישת השקה קצה לקצה. הליך זה היה מותאם על ידי שימוש בתבנית תפירה בהשקה ספציפית, ייצוב טכניקת תפר, אופטימיזציה של מתח אורך והתוספת של in vivo מכשור ניטור. שיטה זו עומדת בניגוד לכמה מהווריאציות רבות שהיה בשימוש בעבר. יתר על כן, הליך זה מתאר כיצד לרכוש פרמטרים כגון לחץ דם עורקים, TEV קוטר / עמידה וקצב הזרימה דרך TEV לאחר הניתוח עד explantation. איסוף נתונים זה מספק ניתוח הכרחי של TEV בזמן שהוא נמצא בתהליך של שיפוץ.

<table><tbody><tr><td>מתמר לחץ</td><td>Becton Dickinson</td><td>P23XL-1</td><td>כמות: 1+ (1 לכל עורק). משמש עם כיפות דיאפרגמה מלאות במים.</td></tr><tr><td>קופסת מגבר ומתמר</td><td>Gould</td><td>5900 כלוב מרכך אותות</td><td>כמות: 1. יש לכלול שני מתמרים ומגברים בכלוב. בעוד שיחידה ספציפית זו עשויה להיות מופסקת, מתמרי לחץ אחרים הזמינים מסחרית עם פלט BNC/אנלוגי יתקשרו עם ציוד הסונומטרי.</td></tr><tr><td>קונסולת T403 עם מודול מד זרימה פריוסקולרי TS420 (x2)</td> מודול <td>Transonic Systems</td><td>T403 ו-TS420 (x2)</td> <td>כמות: 1. בדיקות זרימה המודדות זרימה דרך כל אחד מעורקי הצוואר יתחברו לכל אחת מיחידות TS420.</td></tr><tr><td>יחידת מדידה אולטרסאונד דיגיטלית</td><td>סונומטריה</td><td>TR-USB</td><td>כמות: 1</td></tr><tr><td>בדיקת זרימה דיוק סדרת S 4&nbsp; מ"מ</td><td>טרנסוניק סיסטמס בע"מ</td><td>MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA</td><td>כמות: 2</td></tr><tr><td>1&nbsp; מ"מ מערכות סונומטריות גבישים</td><td>סונומטריים</td><td>1R-38S-20-NC-SH</td><td>כמות: 2-4 (2 לכל עורק)</td></tr> <tr><td>קטטר להשתלה</td><td>BD (בקטון דיקינסון)</td><td>&nbsp; 381447</td><td>כמות: 1+ (1 לכל עורק). קטטר נחתך ומאובטח לצינורות מיקרו-קדח, סטיילט משמש להחדרה.</td></tr><tr><td>Tygon Microbore Tubing</td><td>Norton Performance Plastics</td> <td>(AAQ04127) ניסוח S-54-HL</td><td>חתוך לאורך עבור סט הארכה</td></tr><tr><td>Luer Stub Adapter</td><td>BD (Becton Dickinson)</td><td>427564 (20 מד)</td> <td>כמות: 1+ (1 לכל קטטר עורקי)</td></tr> <tr><td>תקע הזרקת Surflo</td><td>Terumo</td><td>SR-IP2</td><td>כמות: 1+ (1 לכל קטטר עורקי)</td></tr> <tr><td>Meadox</td><td>PTFE (טפלון) לבד</td><td>19306</td><td>חתוך לגודל. ה-PTFE שהרגיש בשימוש במחקרים שלנו הופסק. עם זאת, חברות דומות כגון " רשת כירורגית" מציעים מוצרים שווי ערך.</td></tr></tbody></table>

טכניקה כירורגית להשתלה של רקמות שתלי כלי דם מהונדסים ולאחר<em&gt; in vivo</em&gt; ניטור

Surgical Technique for the Implantation of Tissue Engineered Vascular Grafts and Subsequent In Vivo Monitoring

הפיתוח של כלי רקמה מהונדסת (TEVs) הוא מקדם את יכולת TEVs באופן שיגרתי וביעילות שתל (4-5 מ&quot;מ קוטר) למודל של בעלי חיים גדולים. פרוטוקול צעד אחר צעד למיקום בין-positional של ההערכה הדיגיטלית TEV וזמן אמת של TEV ועורקי ראש ילידים מתואר כאן. הניטור בvivo מתאפשר על ידי ההשתלה של זרימת בדיקות, צנתרים וגבישים קוליים (מסוגל רישום דינמי שינויים בקוטר של TEVs המושתל ועורקי ראש מקוריים) בזמן הניתוח. ברגע שהושתל, חוקרים יכולים לחשב דפוסי עורקי זרימת דם, לחץ דם פולשני וקוטר עורק מניב פרמטרים כגון מהירות גל דופק, מדד augmentation, לחצי דופק ועמידה. רכישת נתונים מושגת באמצעות תוכנת מחשב יחידה לניתוח לכל אורך הניסוי. הנתונים לא יסולא בפז כזו מספק תובנה שיפוץ מטריצת TEV, resemblanCE לבקרה מקומית / דמה וביצועי TEV הכוללים in vivo.

יותר מ -30 כבשים עברו את הטכניקה הניתוחית שתוארה בדוח זה להשתלת TEVs (in press) 9. טבלה המרכזת את פעילות הכבשים האחרונה לאחר פרוטוקול אופטימיזציה מוצגת בטבלה 2. כל הכבשים התאוששו לאחר השתלת TEV ללא סיבוכים מסכנים חיים. אצל בעלי חיים מסוימים, סיסטיק נצפה בעורק ילידים ליד קצה צנתר עורקי השכינה. גידול משמעותי של דלקת עם הנוכחות של מכשור הוסיף לא נצפה. לעיתים נדירות (1 של 18 צנתרים), קטטר גרם לחסימה בזרימת דם דרך TEV. חסימה אחת, וזאת לאחר חודש אחד. סיבוכי ק...

פרוטוקול צעד-אחר-צעד למיקום בין-positional של כלי רקמה מהונדסת (TEVs) לעורק הראשי של כבשים באמצעות השקה והערכה דיגיטלית בזמן אמת מקצה-לקצה בvivo עד הקרבת בעלי חיים.

טכניקה כירורגית להשתלה של רקמות שתלי כלי דם מהונדסים ולאחר<em&gt; In vivo</em&gt; ניטור

The development of Tissue Engineered Vessels (TEVs) is advanced by the ability to routinely and effectively implant TEVs (4-5 mm in diameter) into a large ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לספק פרוטוקול הניתן לשחזור להשתלה כירורגית של שתלי כלי דם ומכשור חדשני בעורק הצוואר. זה מושג על ידי כריתה ראשונה, קטע מעורק הצוואר המקומי בכבש. השלב השני הוא לתפור בשתל כלי הדם המכונה כאן כלי מהונדס רקמות או TEV באמצעות תפרים קטועים פשוטים ולבסס אנסטומוזיס.לאחר מכן, קטטר בדיקת זרימה. וכך גבישים מטריים מאובטחים על עורק הצוואר ושתל כלי הדם. בסופו של דבר, לאחר ההשתלה, הליך זה מאפשר לרשום שינויים בקוטר, זרימת הדם ולחצים עורקיים in vivo למשך הניסוי.ממדידות אלו ניתן לעקוב אחר תאימות דינמית, מהירות גל דופק ופרמטרים המודינמיים אחרים כדי לעקוב אחר שיפוץ in vivo. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מספקת פרוטוקול השתלת כלי דם אופטימלי ומפורט שיכול להפוך לפרקטיקה סטנדרטית, ובכך למזער את השונות הכירורגית ולספק אמצעי ללימוד שיפוץ in vivo. באופן כללי, אנשים חדשים בשיטה זו עשויים להיאבק מכיוון שהם עשויים שלא להכיר את הפרטים של הליך ההשתלה האופטימלי ואת החשיבות של ניטור השתלת כלי דם, התאמה ושיפוץ in vivo.שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום התפתחות שתלי כלי דם וביולוגיה, כגון תנאים אופטימליים של הנדסת רקמות כלי דם ושיפוץ ומחלות של שתלי כלי דם. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על טיפול בהחלפת כלי דם מכיוון שהיא מספקת הליך למחקר טוב יותר של התפתחות שתלים וסקולריים ליישומים קליניים. באמצעות שיטה זו, אנו יכולים לספק תובנות לגבי חקר הנדסת רקמות איברים שלמים ושיפוץ כלי דם ומחלות כגון יתר לחץ דם או אפילו השתלת איברים שלמים.הרעיון הזה עלה לנו לראשונה כאשר השתמשנו במודל שאנט עורקי ex vivo כדי להעריך את התנאים האופטימליים להתפתחות שתל כלי דם מהונדס רקמות. הדגמה חזותית של שיטה זו חיונית מכיוון שמיקום התפרים והמכשור הוא קריטי לסבלנות ולרכישת נתונים מוצלחת. כדי להתחיל בהליך זה, גרמו לכבשים להרדמה והכינו את הכבשים לניתוח.כמתואר בפרוטוקול הטקסט, בצע חתך של כ-12 סנטימטר לאורכו מעל צוואר קו האמצע הגחוני באמצעות צריבה חשמלית. לאחר מכן, בודד את עורקי הצוואר השמאלי והימני על ידי הסרת רקמת חיבור. בעזרת טכניקת דיסקציה קהה, הושיטו יד מתחת לווילון הסטרילי וסובבו את ראש הכבשה כך שניתן יהיה לדמיין את צד הצוואר מתחת לווילון.השתמש בהמוסטט מעוקל בשמונה סנטימטרים כדי לחפור דרך החלל התת עורי בין חתך הצוואר בקו האמצע הגחוני לצד הצוואר. פתח וסגור את המוסטט כדי לנתח בצורה בוטה חלל לצינור לרוחב של כ -1.5 סנטימטרים. הושיטו יד מתחת לווילון הסטרילי ובצעו חתך של 1.5 ס"מ דרך העור מעל קצות ההמוסטט בעזרת להב סטרילי מספר 11.העבירו את צינור הטיגון המכיל את כל החיווט והצינורות דרך המנהרה התת עורית. החזק את החוטים והצינורות מעל הווילון הסטרילי. לאחר מכן הושט יד מתחת לווילון כדי להסיר את צינור הטיגון החיצוני מהצוואר, וחשוף את החיווט המושתל כשהוא עוזב את צוואר הכבשה.משוך קווים בודדים החוצה כדי למזער כל רפיון בחלל התת עורי. השאירו מספיק מרחק כדי לחבר כראוי את המכשור לעורק. לאחר הנחת בדיקות זרימת הדופלר ומתן הפרין כמתואר בפרוטוקול הטקסט, מהדקים את עורק הצוואר באמצעות מהדקי כלי דם שאינם מוחצים וכורתים חלק באורך של כארבעה סנטימטרים.תפר את כלי הרקמה המהונדס או TEV במקומו באמצעות תפרים קטועים פשוטים עם סגסוגת 7.0 פרולין F. תפר מונופילמנט כפול. ראשית, יש לעגן ארבע נקודות של ה-TEV לעורק המקומי על ידי הנחת שני תפרים מנוגדים בשני הקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים.לאחר מכן הוסיפו עוד חמישה עד שישה תפרים בצד השטחי של הקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים. כדי להתחיל את האנסטומוזיס בו זמנית, סובב את מהדקי כלי הדם 180 מעלות, החזר את המתח על תפרי העיגון, והוסף חמישה עד שישה תפרים קטועים נוספים לקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים בצד המסתובב של ה-TEV. לאחר שה-TEV נתפר היטב במקומו, סובב אותו בחזרה למקומו המקורי והסר את מהדקי כלי הדם בזה אחר זה, מהדק דיסטלי תחילה.לאחר מכן, תפר גבישים קוליים של מילימטר אחד לצדדים מנוגדים של ה-TEV. באמצעות 7.0, צנתר פרולין את העורק באמצעות קטטר שונה בגודל 18 עם רובד ארוג טפלון. תפרו את הפלאק לדופן העורק עם 5.0 ב-theon כדי לשלוט בכל דימום.השתמש בציקלון כדי להדביק את צינור המיקרו לקטטר שנשטף במי מלח. לאחר מכן, אבטח קווים וחוטים מושתלים לשרירים הסמוכים באמצעות משי 2.0 ומחט מתחדדת. כדי לעשות זאת, מקם את חוט בדיקת זרימת כלי הדם במקביל לכלי עם הגשושית והחוט מאריך את הגולגולת, ואז מבצע פניית פרסה לכיוון השרירים הרוחביים.אבטח את החוט לשרירים סמוכים באמצעות משי 2.0 על מחט מתחדדת בשני מיקומים כך שהחוט או בדיקת הזרימה לא יוכלו להפעיל עומס כלשהו על הכלי. לאחר מכן תפר את חוטי הקריסטל וקו הצנתר העורקי לשרירים הרוחביים, מה שמאפשר כ-1.5 סנטימטרים של רפיון בדומה לשלבים הקודמים לאבטחת קבוצת בדיקת הזרימה את כל החוטים והקווים יחד ולעגן אותם לשרירים ממש לפני היציאה דרך המנהרה התת עורית. בדומה ל-S הקודם, סגור את אזור הניתוח עם תפר 2.0 ויקריל בשכבות באמצעות דפוס תפר רץ על הפאשיה והתת-עור ותפר מזרן רץ על העור.סגור את החתך של 1.5 סנטימטר בצוואר הגב סביב החוטים והקווים החיצוניים באמצעות 2.0 ויקריל ומחט חיתוך. לבסוף, הנח חוטי בדיקת זרימה, קווי קטטר וחוטי קריסטל קוליים לתוך כיס שנתפר היטב לעור הכבשים. ראה את פרוטוקול הטקסט לטיפול בכבשים לאחר הניתוח הנח כבשים בעגלה ניידת כדי להבטיח ריסון נאות.זה מאפשר לכבשים להישאר רגועים ומודעים מבלי לפגוע בחומרה. הסר את כל החוטים והקווים מהשקית וחבר אותם למכשירי הניטור. חבר את הזרימה.בדיקה למד זרימה, הגבישים הקוליים של מילימטר אחד לקופסת A-T-R-B-U-S-B וקווי הצנתר למתמרי לחץ. כייל את בדיקות הזרימה ומתמרי הלחץ. לפני רכישת נתונים.השתמש באוסילוסקופ כדי לכוונן את מדידת הגביש של SOE. על פי פרוטוקול היצרן, רשום את הנתונים באמצעות תוכנת מחשב כאן. החצי העליון בצבע לבן מתאים ל-TEV המושתל ואילו החצי התחתון בצבע אדום מתאים לעורק הדמה או המקורי הן עבור ה-TEV והן עבור ה-sham.קצב זרימת הקוטר ולחץ הדם העורקי נרשמים. שידור חי לאחר הקלטה למשך דקה אחת לפחות ללא הפרעות. ייצא נתונים אלה לניתוח מפורט יותר.לאחר מכן נתק את כל החוטים והנח אותם בחזרה לתוך השקית התפורה על צוואר הכבשה. המוצג. להלן ההקלטה החיה in vivo של קצב הזרימה בקוטר ולחץ הדם העורקי של ה-TEV, שעשויה להיות מתועדת למשך הניסוי. אופטימיזציה של השתלת שתלים בכלי הדם.שימוש בטכניקה כירורגית זו מאפשר לחוקרים לשלול טעות כירורגית כגורם לכישלון השתל לאחר שליטה, טכניקה זו יכולה להיעשות תוך שעתיים וחצי עד שלוש. אם מושתל TEV אחד או עד שש וחצי שעות. אם יש להשתיל גם דמה ומכשור אוטולוגי של TEV בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לשמור על רמה נאותה של נוגדי קרישה.השתמש בחומרים מרחיבי כלי דם דיוק אופטימלי במיקום התפר האנטומוטי בעקבות הליך זה. ניתן לבצע שיטות אחרות כגון צביעה חיסונית על מנת לענות על שאלות נוספות כגון נדידת תאים והתמיינות תאים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להשתיל כלי מהונדסים רקמות בעורק הצוואר של כבשה, כמו גם כיצד לעקוב אחר זרימת הדם העורקית, לחץ הדם ושינויים בשתל כלי הדם, קוטר in vivo.אל תשכח שעבודה עם כבשים ובעלי חיים גדולים אחרים לשימוש בסביבה ניסיונית צריכה לעקוב אחר אמצעי זהירות ספציפיים למין. אם אתה מתכנן לעבוד עם בעלי החיים הגדולים הללו למחקרים שלך, ודא שאתה מאומן כראוי לטפל בבעלי חיים אלה בצורה בטוחה ואתית. תודה שצפית בסרטון שלנו.

surgical-technique-for-implantation-tissue-engineered-vascular-grafts

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

הקבוצה שלנו פיתחה תרבות bioreactor מערכת המחקה את מדגיש pulsatile פיזיולוגיות של מערכת הלב וכלי הדם להתחדש מושתלת בקוטר קטן שתלי כלי דם.

הנדסה ביולוגית המבוססת דם שתלי שימוש bioreactor pulsatile

שיטה טיטניום זריעת דם biomaterials ליצור קשר עם תאים עצמיים ו biocompatibility בדיקות מתואר. שיטה זו משתמשת ובתאים אנדותל צינורות טיטניום, זורעים בתוך דקות של ניתוח ההשתלה לתוך חזירי venae cavae. טכניקה זו ניתנת להתאמה מכשירים רבים אחרים ביו מושתלת.

עצמיים אבי האנדותל Cell-מתזמן טכנולוגיה בדיקה biocompatibility עבור התקנים לב וכלי דם במודל חיה גדולה

כדי לשפר את הידע של היווצרות neotissue תאית ומולקולרית שלנו, מודל עכברי של TEVG פותח לאחרונה. השתלים הושתלו שתלי כחציצת וריד נבוב infrarenal בעכברי C57BL / 6. מודל זה משיג תוצאות דומות לאלה שהושגו בחקירה הקלינית שלנו, אבל לאורך זמן כמובן הרבה מקוצר.

השתלה של וריד נבוב חציצת שתל נחותה בעכבר דגם

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר שתלי כלי רקמה מהונדסת, כי הם פונקציונליים להשתלה לעכברים על ידי זריעה כפולה תאי גזע pluripotent מושרה באופן חלקי (PiPSC) - נגזר תאי שריר חלק וPiPSC - תאי האנדותל נגזרו על bioreactor פיגום כלי decellularized.

דור והארכת כלי רקמות מהונדסות במודל עכבר

נכון להיום, פגמים ברקמות עבות משוחזרים בדרך כלל על ידי מריחת דשי רקמות אוטולוגיות או רקמות מהונדסות. בפרוטוקול זה אנו מציגים שיטה חדשה להנדסת דש רקמה וסקולרי הנושא עוקץ אוטולוגי, שישמש כתחליף לדשים אוטולוגיים.

דש שריר כלי דם מהונדס

זהו קו מנחה לבניית רקמת כלי דם in vivo באמצעות לולאה עורקית מיקרו-כירורגית או תצורת פדיקל זורם בתוך תא הנדסת רקמות. ניתן להשתמש ברקמות כלי הדם שנוצרות להתחדשות איברים והחלפת פגמים ברקמות, כמו גם לבדיקת תרופות ומודלים של מחלות.

הנדסת רקמות ידי עצמותי כלי דם בתוך<em&gt; In vivo</em&gt; הנדסת רקמות קאמרית

אנו מתארים גישה מיקרו עבור הדור של בלופ arteriovenous (AV) כמודל לניתוח כלי דם in vivo בסביבה מבודדת היטב מאופיין. מודל זה הוא לא רק שימושי עבור חקירת אנגיוגנזה, אלא גם מתאים באופן אופטימלי עבור הנדסה vascularized axially ורקמות להשתלה.

Arteriovenous (AV) Loop במודל בעלי חיים קטנים לחקר אנגיוגנזה והנדסת רקמות כלי דם

כלי דם מהונדסים Scalable ישפרו ישימות קליניות. באמצעות מדריכי 3D מודפס ניכרים בקלות, טבעות של שריר חלק בכלי דם נוצרו ומוערמות לצורה צינורי, ויצרו שתל וסקולרית. שתלי יכול להיות בגודל כדי לענות על המגוון של ממדים עורקים אנושיים כלילית פשוט על ידי שינוי גודל המדריך מודפס 3D.

Scaling של שתלי כלי דם שהונדס בשיטות מדריכי 3D מודפס ואת שיטת נחת הטבעת

כאן, אנו מציגים שיטה electrospinning ששונה כדי להמציא PCL שתלי כלי הדם עם נקבוביות גדולות וסיבים עבים, לתאר את פרוטוקול כדי להעריך את הביצועים ויוו במודל של עכברים של החלפת העורק הראשי.

השרשה שתלי כלי הדם Electrospun עם אופטימיזציה מבנה במודל חולדה

כאן, מוצג פרוטוקול להשתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת השרוול, המספק מודל בעל חיים מתאים לחקירת מנגנוני התחדשות רקמות כלי הדם.

השתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת שרוול

מחקר זה מציג מודל חזירי להערכת שתלים בקוטר קטן בעורקי הירך. המודל מחקה את הדינמיקה של כלי הדם האנושיים ומעריך באופן מקיף את סבלנות השתל, המודינמיקה ושיפוץ כלי הדם. הוא מציע פלטפורמה רבת ערך לבדיקת שתלי כלי דם ולניטור שלהם באמצעות אולטרסאונד דופלר ואנגיוגרפיה.

השתלת שתל כלי דם בעצם הירך במודל חזירים לבדיקת שתלי כלי דם בקוטר קטן

למדו פרוטוקול השתלת כלי דם מהונדסים בכבשים עם ניטור זרימת דם ולחץ עורקי בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת מחקר מדויק של התאמה ושיקום כלי דם בגוף החי.

טכניקה כירורגית להשתלה של רקמות שתלי כלי דם מהונדסים ולאחר

גלה סרטונים נוספים