מודל עכברוש של אחורי איסכמי אופטי נוירופתיה המושרית photochemically

מטרת סרטון זה היא להדגים מודל פוטוכימי של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית ולהעריך את השפעותיה עם חלציים לאחור של תאי גנגליון רשתית בחולים מעל גיל 50. נוירופתיה אופטית איסכמית היא הסוג הנפוץ ביותר של נוירופתיה אופטית חריפה. המצב יכול להופיע כאחד משני תת-סוגים בהתאם למקור אספקת הדם הספציפית המושפעת וההצגה הקלינית, נוירופתיה אופטית איסכמית קדמית או נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית.

בעוד שהפתוגנזה של נוירופתיה אופטית איסכמית קדמית נחקרה בהרחבה, נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית נותרה לא מובנת היטב בשל השכיחות הנמוכה שלה, הצגתה המשתנה וקריטריוני האבחון הלא מוגדרים כהלכה. יתר על כן, לא הוכח כי אף טיפול מונע או הופך ביעילות אובדן ראייה כתוצאה מנוירופתיה אופטית איסכמית קדמית או אחורית. לכן, מודל בעלי חיים הניתן לשחזור ואמין של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית הוא בעל ערך רב לחקר תהליך המחלה in vivo ובדיקת משטרי טיפול חדשים להגנה עצבית והתחדשות אקסונים פגיעה איסכמית הנגרמת כימית במיקרו-כלי הדם וכתוצאה מכך בצקת ופקקת וזוגנית יוצרת למעשה איסכמיה אזורית של רקמות.

נזק איסכמי מתפשט לאזורים שכנים ומחמיר עוד יותר על ידי דחיסה מיקרו-וסקולרית עקב בצקת וזוגנית נלווית. גרמנו באופן סלקטיבי לצורה זו של איסכמיה באמצעות מנהל העצב האופטי של באר כדי לשקף את הנזק שנגרם על ידי נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית. כאן y וואנג ודייל בראון מספקים הדגמה שלב אחר שלב של ההליך.

למיטב ידיעתנו, המודל של פגיעה איסכמית בעצב הראייה האחורי פותח עד כה מכיוון שמודל זה מייצר איסכמיה תוך הימנעות מטראומה פיזית. כך שניתן לחקות טוב יותר תהליכים פיזיולוגיים של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית. בסרטון זה, נדגים את כל ההליך של מודל הנציג שלנו של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית לאחר חשיפה כירורגית של עצב הראייה האחורי eryri bee.

צבע רגיש לצילום מוזרק לווריד וקרן לייזר ממוקדת על פני עצב הראייה. אינטראקציה פוטוכימית בין ארירי B ללייזר במהלך קרינת I פוגעת באנדותל כלי הדם וגורמת לחסימה מיקרו-וסקולרית בתיווך פקקת טסיות ודחיסת aous. הפגיעה האיסכמית שנוצרת מניבה גסיסה הדרגתית אך בולטת של תאי גנגליון ברשתית עקב אובדן קלט אקסונלי, פגיעה מרחוק הנגרמת ותוצאה רלוונטית מבחינה קלינית.

לייזר YA הפועל בהספק של 532 ננומטר ו-300 מילי-וואט בהספק מרבי. הבא הוא מסוק אלומה הפועל ב-250 הרץ, המשמש להפחתת ההספק הממוצע ל-7.5% מהספק השיא שלו. יש לנו תריס קרן סגורה ENC בדרך כלל עם חור קטן בקוטר 100 מיקרון שנקדח לתוכו כדי לייצר קרן כיוון חלשה כשהוא סגור.

הבא הוא עדשת פלאנו קמורה באורך מוקד של 25 סנטימטרים, ולבסוף, מנסרת זווית אדומה כדי לכוון את הקרן כלפי מטה אל עצב הראייה. לאחר שמקורה במקורה, קרן הלייזר עוברת דרך המסוק, ומפחיתה את ההספק הממוצע ל-7.5% מהשיא שלה. לאחר מכן קרן החיתוך מיורטת על ידי התריס, שכאשר הוא סגור מייצר קרן כיוון חלשה מאוד על ידי סינון מרחבי של הקרן דרך החור בקוטר 100 מיקרון.

הקרן החלשה הזו ממוקדת לאחר מכן על ידי העדשה ומופנית כלפי מטה דרך הזווית הנכונה. פריזמה על עצב הראייה האחורי החשוף I הקרינה מתחילה על ידי החלפת מסנן בטיחות לנתיב האופטי של מיקרוסקופ הפעלה, ולאחר מכן פתיחת תריס הקרן לאחר עיכוב של שנייה אחת. בשלב זה, קרן החיתוך בעוצמה מלאה ממוקדת ומכוונת כלפי מטה על עצב הראייה החשוף.

באינטראקציה בין הקרן לדבורת האתין המומסת בזרם הדם, אור הלייזר הירוק של 5 32 ננומטר נספג ביעילות על ידי המחזור וצבע B והפלואורסצ הוא חמצן מולקולרי צהוב המתנגש במולקולת צבע במצב משולש, קבל את אנרגיית העירור שלו והופך לחמצן במצב יחיד, שהוא תגובתי מאוד. לאחר מכן, חמצן ה-CT מחמצן ישירות את האנדותל של כלי הדם וגורם לנזק מנוקב למחסום, מה שמושך באופן ספציפי טסיות דם וגם מקל על דליפת פלזמה לפרנכימה. תהליך נזק זה מוביל אפוא לחסימת כלי דם על ידי פקקת וכן על ידי בצקת וזוגנית עקב דחיסה מיקרו-וסקולרית, הסולם גורם להתרחבות הנגע מעבר לעומק החדירה של אור הלייזר.

אם הטכניקה נעשית כהלכה, תרומבין הטסיות לא יכיל סיבים. ובכך מבדיל שיטה זו בתהליך קרישת כף הרגל התלוי בחום הרבה פחות. הפעלה של עוצמת שיא גבוהה משפרת את עומק החדירה האפקטיבי לעצב הראייה הזוהר תוך הפחתת ההספק הממוצע ל-7.5% באמצעות קרן.

קיצוץ עוזר להבטיח שתהליך כימי בכף הרגל ולא תרמי גורם לפגיעה ברקמות לחולדות המורדמות שלנו עם הזרקה תוך-צפקית של הקטמין דיאז בקוקטייל. לאחר ההרדמה מניחים בעדינות את הלשון קדימה כדי למנוע חנק, מגלחים את אתרי הניתוח ומורחים שכפול, הגדלה לשתי העיניים כדי למנוע משיכת קרנית במהלך הניתוח. העריכו את שלבי ההרדמה כדי להבטיח שהחיה לא תרגיש כאב במהלך הניתוח.

התחל בצנתור של וריד הירך. לפני הליכים כירורגיים, חבר צינור באורך מעוקר ושטוף מלח למזרק ML אחד המכיל תמיסת 2% eryri B שנמדדה מראש. במינון של 20 מיליגרם לק"ג משקל גוף, הרכיבו את המזרק למשאבת עירוי המוגדרת לקצב של 600 מיקרוליטר לדקה.

נקו את מקום הניתוח על ידי ניגוב האזור עם 10% פובידון יוד, ואחריו 70% אתנול. בצע חתך בבסיס הירך הימנית באמצעות להב מספר 15. חותכים ומורחים דרך הממברנה במספריים ומפרידים את השריר בעזרת מלקחיים עד שענף וריד הירך נראה לעין.

המשיכו לנתח כלפי מטה בעזרת מספריים ומלקחיים לפי הצורך כדי להפריד את הכלי מהרקמות שמסביב לפי הצורך. נקה את אזור הניתוח עם BSS סטרילי קר כדי להקל על הדמיה של הווריד. הפרד בזהירות את המעטפת המקיפה את הווריד, העורק והעצב מהרקמה הבסיסית.

לאחר מכן בודד את הווריד בדיסקציה קהה לצדדיו. העבירו שתי רשימות מחטים תפרי ניילון מתחת לווריד על ידי הרמה זהירה של הכלי, הנחת מלקחיים עדינים מתחת ותפיסתם ומשיכתם לרוחב. קשרו את הווריד הדיסטלי בחוזקה וצרו קשר רופף סביב הווריד הפרוקסימלי.

בצע חתך חלקי של הווריד ליד הקשירה הדיסטלית והרחיב לפי הצורך בעזרת מלקחיים המחזיקים את דופן הווריד בחיתוך, הכנס בזהירות את צינור הסומק המלוח לתוך הכלי. לאחר מכן הדק את הקשר הפרוקסימלי הרופף סביב הצינור. עוגן את הצינור במקומו על ידי קשירתו לתפר הדיסטלי.

לאחר בדיקת איכות הצנתור ווידוא שהוא נקי מחסימות או נזילות, יש לסגור זמנית את החתך באמצעות תפרים כדי להגן על הצנתור והרקמות. הכן את אתר הניתוח עם תמיסת ניקוי יוד 10% פון ואתנול 70%. בצע חתך לאורך העור מאחורי העין בעזרת להב מספר 15, ואז חותך את רקמת החיבור בעזרת מספריים נקע ונציה.

המשך לנתח דרך רקמת החיבור לאורך החבילה העליונה של העצם האופטית. הקפד להימנע מהפרעה לכלי הדם המקומיים. לנתח דרך רקמה אופטית עד להדמיה של שריר פי הטבעת העליון.

עצב הראייה נמצא מתחת. הוא מושך את דש העור ואת רקמת החיבור לרוחב וכלפי מטה. העין תסתובב קדימה והחוצה.

הכניסו בזהירות זוג מלקחיים חדים והרחיבו אותם במקביל לעצב על מנת לחשוף אותו. רשת כלי המיקרו המזינים אותו תהיה ממוקדת במהלך הקרנת לייזר. הקפד להרכיב משקפי בטיחות בצבע כתום בכל עת בזמן הפעלת מכשיר הקרנת הלייזר כדי להגן על עצמך מפני אור הלייזר.

הפעל את הלייזר והתאם את עוצמות השיא והממוצעות מספר דקות. לפני כל הליכי ההקרנה. הנח בעדינות את החיה על המכשיר ומקם אותה כך שקרן הכיוון תאיר ליד אתר החשיפה לעצב הראייה.

לאחר מכן חשוף מחדש בזהירות את אורך עצב הראייה בעזרת מלקחיים עדינים בקצה הראיה. בצע התאמות קטנות במיקום כך שקרן הכיוון תפגע בעצב הראייה בין שלושה לארבעה מילימטרים מאחורי ראש עצב הראייה. הזרקו את התמיסה של 2% רוזין B באמצעות הפעלת משאבת העירוי ואפשרו לה להסתובב במשך מספר שניות במהלך תקופה זו בטיפה קטנה של BSS כדי להרטיב את פני עצב הראייה.

לאחר אימות מיקום קרן הכוונה, הפעל את מסנן הבטיחות הנשלט על ידי מתג כף הרגל ואחריו הקרנת לייזר והקרין למשך 90 שניות. יש להבחין בפלואורסצנציה צהובה המופיעה ככתום דרך המסנן מהמשטח העליון של העצב, ויש להפוך את הקרינה לאחידה על פני עצב הראייה. עם התאמות מיקום קלות של החולדה, מסנן הבטיחות ייפתח אוטומטית לאחר הקרנה.

במקרים מסוימים ניתן להבחין בדימום מיקרו, להקל על המתיחה על שרירי העין הנוספים, להחזיר את העין למצב ניטרלי ולסגור את החתך בתפרים קטועים. חותכים את התפרים המחזיקים בצנתור וריד הירך ומשוכים בזהירות את הצינור. קשרו היטב את וריד הירך הפרוקסימלי כדי למנוע דליפה וסגרו את החתך בתפרים קטועים.

מרחו משחה אנטיביוטית על שני החתכים ובדקו את שלמות כלי הדם של הווריד המרכזי ברשתית ובעורק. החזירו את החיה לכלוב מחומם ונקי להחלמה, תנו משככי כאבים לאחר הניתוח וטפלו בחיה. בהתאם להנחיות המוסד לטיפול בבעלי חיים.

בדוק לעתים קרובות את בעל החיים לאחר הניתוח כדי לוודא שמקום החתך נקי וללא זיהום, להעריך כאב ולספק תרופות נאותות נגד כאבים ולעקוב אחר האכלה מתאימה והתנהגויות אחרות. ניתן להשתמש בהדמיה קונפוקלית של חודשים שטוחים ברשתית כדי לכמת את ההישרדות של תאי משחק ברשתית לאחר אינדוקציה של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית באמצעות רטרו ליפין של מתרחבים בהשוואה לחיות ביקורת. פחות תאי עז פרחים קיימים בבעלי חיים שבועיים לאחר אינדוקציה אחת של PI.

לא נצפה הבדל משמעותי בין מספר תאי הגנגליון ברשתית בשליטה על בעלי החיים המדומים. זה מצביע על כך שאובדן תאי כנופיית הרשתית נגרם על ידי שילוב של B וקרינת לייזר ולא על ידי האנרגיה התרמית מהלייזר בלבד. החלק הקריטי ביותר בהליך הוא חשיפה והקרנה של עצב הראייה.

יש צורך בדיסקציה זהירה על מנת למנוע נזק לעצב על ידי מלקחיים בקצה הדק של הכריש או על ידי מתיחה בעורק העין. הזן את עצב הראייה כמילימטר אחד מראש עצב הראייה. אם חשוב לקרינה במרחק של שלושה עד ארבעה מילימטרים מראש עצב הראייה, להגביל את האיסכמיה לאספקת הנימים המספקת את העצב ולא לעורקים ולכל אחד מענפיו המזינים את הרשתית הפנימית, יש צורך בבדיקה אנדוסקופית כדי להבטיח את שלמות כלי הדם של עורק הרשתית המרכזי והווריד לאחר ההליך עם פרמטרים מוגדרים מראש לקרינת לייזר.

למודל זה יש מהלך זמן הניתן לשחזור של מוות תאים שכן עוצמת השיא ומשך ההקרנה הם שני גורמים קובעים לנזק איסכמי. ניתן לבצע שינוי חומרה של פרמטרים אלה כדי להתאים את חומרת התוצאה של נזק לתאי גרעיני הרשתית למטרות מחקר שונות עם אופטימיזציה נוספת. מודל זה מספק פלטפורמה חדשה למחקר על פתוגנזה ושינויים מולקולריים של נוירופתיה אופטית איסכמית אחורית וניתן להשתמש בו לסינון תרופות לטיפול במחלות איסכמיות אלה ואחרות של מערכת העצבים המרכזית.