Name: שימוש בשדה הפתוח המבוך כדי למדוד התנהגות כמו חרדה של תנועה ובעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-02-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 12 s
Description: למדו להשתמש בשדה הפתוח המבוך כדי למדוד התנהגות כמו חרדה ותנועה בעכברים. שיטה זו מאפשרת ניתוח כמותי של פעילות לocomotor ורמות חרדה באמצעות תוכנת מעקב וידאו.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לבריאות (NIH-2RO1NS033661) ועל ידי תחנת הניסויים החקלאיים של אלבמה (HATCH ALA021-1-09017).

הערה: כל הפרוצדורות שבוצעו כאן הוגשו ואושרו על ידי IACUC (Office of Compliance המחקר) ונערכו בעקבות הנחיות NIH. עכברים המשמשים בפרדיגמה הבדיקות התנהגותיות היו נאיביים ואינו משמש לבדיקות אחרות. סוג C57BL / 6 Wild והעכברים Knock Out שימוש בפרוטוקול זה תוארו בעבר 9 ואת הנתונים שהוצגו כאן הם מכתב היד ש. 1. הכנת לחדר הבדיקה ומכשירי שדה פתוחים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במבוך יחידה מרובה שדה פתוח (הפרנציסקאני) מורכב מארבעה תאי פעילות שימש לניתוח זה (איור 1). כל תא נמדד 50 סנטימטרים (אורך) x 50 סנטימטר (רוחב) x 38 סנטימטר (גובה) ונעשה מצפיפות גבוהה לבנה ופלסטיק שאינו נקבובי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרקם הקומות של המבוך למתיחה במהלך ניידות בעוד קירות מבוך היו חלקים. רביעים מבוך היו ריקים לגמרי לצורך בדיקה זו. בתמורה לשאר פרוטו זהcol, רבע אחד של המבוך המתואר לעיל להיות מנוצל כדי להדגים את הפרנציסקאני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נגב את החדר עם אתנול 95% לפני שימוש ולפני המבחנים הבאים כדי להסיר כל רמזים ריח שהותירו את עכבר הנושא הקודם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר אתנול להתאדות לחלוטין לפני בדיקת עכברים. פעולה זו עשויה להימשך 5-10 דקות בין כל פגישת בדיקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניתוח זה, השתמש בתוכנת SMART וידאו המעקב ממכשירי PanLab / הרווארד כדי להקליט ולהעריך תנועת עכבר. הערה: כל מצלמה מעקב וידאו מסחרית ותוכנה ניתן להשתמש כדי לעקוב אחר נושא הבדיקה ולהעריך את תוצאות ממבוך השדה הפתוח. זה מאוד חשוב עבור משתמש הקצה להבין כיצד לכייל ולהפעיל את התוכנה המשמשת לכל ניתוח פרטני. ללא קשר למצלמת הווידאו ותוכנת מעקב בשימוש, התוצאות הטובות ביותר מושגות כאשר המצלמה והתוכנה מכוילות נכון, בהתאם להוראות היצרן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע את בדיקות iסטנדרטי na מואר חדר מסוגל להכיל מנגנון המבוך והמחשב הדרוש להפעלת התוכנה. להשעות את מצלמת וידאו מעל המבוך או על ידי הצמדתו לתקרה או על ידי שימוש בכל מערכת תמיכה מוגבהת המאפשרת את עדשת המצלמה כדי לראות את אזור כולו המבוך (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כמנהל האנושי של המבחן, להיות בטוח שיש מספיק המקום בחדר להיות לחלוטין לא נצפים על ידי בדיקת הנושאים במבוך כדי שלא להשפיע על התנהגותם של העכברים. </li></ol> 2. הכנת התוכנה למדידת פעילות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את תוכנת וידאו המעקב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהתוכנה נפתחה, להזיז את הסמן לאפשרות &quot;מעקב Single-נושא&quot; הנמצאת בכרטיסייה &quot;Data Acquisition&quot; ולחיצה אחת כדי לפתוח אפשרות זו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר באפשרות &quot;רקע סטטי&quot; הממוקמת בחלק התחתון של המסך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הבחירה &quot;רקע סטטי&quot; הוא בחרn, יש צורך להשתמש בתוכנה כדי לקחת תמונה של המבוך לפני תוספת של נושאי הבדיקה. כדי לעשות זאת, להזיז את הסמן ללחצן &quot;התמונה&quot; הממוקם בחלק התחתון של המסך ולחיצה אחת. הערה: התוכנה תיקח תמונה של התרחיש ללא נושא הבדיקה שיופחת מהתמונה שצולמה במהלך תהליך המעקב. כתוצאה מכך רק התנועה של הנושא נותחה על ידי התוכנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שתמונת הרקע שצולמה מעל נמחקה לחלוטין על ידי תוכנת מעקב על ידי הזזת הסמן ללחצן &quot;הבדיקה&quot; הממוקם בחלק התחתון של המסך ולחיצה אחת. שדה לבן מוצק תוכלו לראות אם תמונת הרקע נמחקה לחלוטין מתמונת המעקב. אם תנאי תאורה לשנות או המבוך מועבר בטעות, אתה תראה &quot;צללים&quot; שחורים בתחום זה מצביע על שני התמונות לא עולות בקנה אחד באופן מושלם. כדי לתקן את המצב, פשוט חזור על STEp 2.4 לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר אישור הגדרות רקע, השתמש באפשרות התזמון כדי להגדיר את הדרך הזמן נשלט במהלך רכישה. כדי לעשות זאת, להזיז את הסמן לכרטיסיית &quot;התצורה&quot; ולחץ פעם אחת על הכותרת &quot;התזמונים&quot;. השתמש בחלון החדש שנפתח להיכנס פרמטרים ניסיוניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפרוטוקול זה, בחר באפשרות &quot;הזמן מתוכנת&quot; כתקופת מעקב 10 דקות. הגדר את &quot;התקופה חביון&quot; ל 5 שניות כדי לאפשר למשתמש הזמן למקם את העכבר במרכז המבוך ולהתרחק לפני תחילת המעקב. הזן את &quot;זמן הרכישה&quot; של 10 דקות למשך המבחן. הגדר את &quot;השליטה עצור&quot; מוגדרת &quot;כאשר זמן מתוכנת (10 דקות) הוא מעל&quot; אשר באופן אוטומטי לכבות את המצלמה ואת פונקצית המעקב של התוכנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזיז את הסמן ללחצן &quot;סגור&quot; אחרי כל התזמונים נקבעו כדי לסגור את החלון. כעת אתה מוכן להתחיל את הבדיקהing הליך. </li></ol> 3. מנהל ממבחן שדה הפתוח הערה: חבילת התוכנה המשמשת בפרוטוקול זה מאפשרת המעקב של עד 16 עכברים בודדים בכל פעם. על מנת להקל על השלמה וכאמור לעיל, הפרוטוקול שנדון כאן הוא לעכבר בודד באמצעות רבע אחד של הפרנציסקאני. לציוד בשימוש בפרוטוקול זה, מקסימום של 4 עכברים בודדים יכול להיות במעקב באמצעות כל רבע של המבוך. אם ניצול מבוך רב-מתחם, לאחר הצבת עכבר הנושא הראשון ברבע המוגדר שלה, למקם את העכברים שנותרו לרבע המבוך שלהם למעקב אחר הניתוח. למטרות פרוטוקול זה, הוראה נוספת תהיה ספציפית לרבע אחד של המבוך. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להביא את העכברים בכלובים בביתם מדיור חדרם לחדר הבדיקות. לאפשר לעכברים להסתגל להליך החדר למשך תקופה מינימאלית של 30 דקות לפני תחילת הבדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר מ &#39;בודדהאוז מהכלוב בבית על ידי בעדינות האחיזה בזנבו ומניח את העכבר באמצע מבוך השדה הפתוח בעת ההפעלה במקביל תוכנת SMART על ידי לחיצה אחת על כפתור Start כדי להתחיל לעקוב אחר תנועת עכבר. זה נורמלי לעכבר לעבור מייד לקירות הפריפריה של המבוך ועל תזמון הפרסום ומעקב לכידתו של העכבר צריך לחפוף כדי להקליט תנועה זו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר תנועה חופשית וללא הפרעה של עכבר הנושא בכל רבע בהתאמה של המבוך לתקופה אחת של 10 דקות שבמהלך זמן, תוכנת המעקב תרשום תנועה (איור 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתום תקופת המבחן, להרים את עכבר הנושא בעדינות, להסיר אותו מהמבוך ולהחזיר אותו לכלוב בבית שלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני ניקוי המבוך חזותי, לספור את כדורי Boli הצואה הנוכחיים במבוך וידני להקליט את המספרים לניתוח נוסף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל כדורי הצואה ולנגב את כל הנקודות של השתנה. לרסס את הרצפה וקירות של המבוך ברבע עם 95% אתנול ולנגב את עם מגבת נייר נקייה. אפשר פתרון אתנול לחלוטין לייבוש לפני בדיקת עכברים אחרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על התהליך עם העכבר הבא. </li></ol> 4. מדידה וניתוח של התנהגות בזמן בדיקת הנוהל הערה: למדידה, שלושה היבטים של התנהגות פתוחה שדם בקלות מאופיין בפרוטוקול זה (ראה דיון). הוראה קצרה על איך לגשת למדידות אלה בתוכנת מעקב הווידאו הבאה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במסך הראשי של תוכנת SMART, להזיז את הסמן ל&quot; Definition &quot;&quot; האזורים &quot;הכרטיסייה ולחיצה אחת כדי לפתוח את עורך Zone. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את ההוראות מפורטות במדריך למשתמש בתוכנת SMART מגדירים אזורים או רשתות לכיסוי על נתיבי המעקב. כאן, התוכנה הייתה משמשת להגדרת רשת 5 X 5 ריבועי 10 סנטימטרים מכסים את הרצפה של המבוך ( <strong&gt; איור 4). הקפד לשמור את קובץ האזור נוצר לפני סגירת עורך Zone. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במסך הראשי של תוכנת SMART, להזיז את הסמן לכרטיסייה &quot;ניתוח&quot; ולחיצה אחת כדי לפתוח את חלון ניתוח נתונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזיז את הסמן לכרטיסייה &quot;קובץ&quot; ולפתוח את קובץ Zone נוצר מעל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזיז את הסמן לכרטיסיית &quot;התצורה&quot; ולפתוח את האפשרות &quot;מסלול ניתוח&quot;. הפעולה זו תפתח את החלון &quot;תצורת ניתוח חד נושא&quot;. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזיז את הסמן לכרטיסייה &quot;רגילה&quot; ולהעביר את הפרמטר &quot;מרחק קילומטרז &#39;&quot; מתיבת הפרמטרים הזמין (בצד שמאל) לתיבה כולל פרמטרים (צד ימין). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזיז את הסמן לכרטיסיית &quot;אזורי המעברים&quot; ולהעביר את כל הפרמטרים המתאימים לתיבת הפרמטרים הכלולים כאמור לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שהתיבה &quot;מלא המסלול&quot; מסומנת בתחתית החלון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Move את הסמן ללחצן אישור וסגור את חלון תצורת ניתוח חד נושא. הערה: בהתאם לניתוח שרצונך לבצע, ניתן לבחור אפשרויות רבות אחרות בחלון זה לנתונים שלי מהניתוח. קראו את המדריך למשתמש מפורט של התכנית הספציפית שלך כדי לקבוע מה פרמטרים חשובים ביותר לניתוח של הנתונים שלך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בכרטיסיית הקובץ בפינה השמאלית העליונה של חלון התכנית, לפתוח את חלון מסלול הנושא יחיד ולמקם את סימון ליד כל המסלולים להיות מנותחים. להזיז את הסמן ללחצן הסימון בחלק העליון של החלון ולחץ כדי לסגור את חלון Track Explorer. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזיז את הסמן ללחצן &quot;לך&quot; בחלון ניתוח נתונים ולחיצה אחת ליזום ניתוח נתוני המסלול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח נתונים יכולים להיות פלט כמו גם קבצי טקסט ASCII או שזה יכול להיות מיוצא ישירות לתוך גיליון אלקטרוני Excel. השתמש בכלי הפלט של התוכנה אתה משתמש לפלט data לשימוש שלך. הערה: המרחק סה&quot;כ נסע ואת המשך זמן באזורים שצוינו יהיה הפלט הבא צעדי ניתוח נתונים שתוארו לעיל. שוב, הוא הדגיש כי הצעדים כדי להגיע למדידות אלה מיוצגים כאן יהיו שונים בהתאם לתוכנה למשתמש בשימוש. אבל המידע עצמו והפרשנות של התוצאות צריכים להיות עצמאי דומה של התוכנה בשימוש. כמו כן, ראוי לציין כי ההטיה מנהל מבחן מוסר מפרוטוקול זה ככל הנתונים שנאספו הוא לכמת נתונים שנמדדו על ידי התוכנה ולא למנהל. אם כך, אין אלמנט qualifiable לנתונים שנאספו כפי שתואר. </li></ol>

<ol><li>Hall, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emotional+behavior+in+the+rat%3A+defecation+and+urination+as+measures+of+individual+differences+in+emotionality%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Emotional behavior in the rat: defecation and urination as measures of individual differences in emotionality.</a> J. Comp. Psychol. 18, 385-403 (1934).</li>
<li>Walsh, R. N., Cummins, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+test%3A+a+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Psychol.+Bull%22%5BJournal%5D)">The open field test: a critical review.</a> Psychol. Bull. 83, 482-504 (1976).</li>
<li>Prut, L., Belzung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+as+a+paradigm+to+measure+the+effects+of+drugs+on+anxiety-like+behaviors%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+of+Pharm%22%5BJournal%5D)">The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review.</a> Eur. J. of Pharm. 463, 3-33 (2003).</li>
<li>Choleris, E., Thomas, A. W., Kavaliers, M., Prato, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+detailed+ethological+analysis+of+the+mouse+open+field+test%3A+effects+of+diazepam%2C+chlordiazpoxide+and+an+extremely+low+frequency+pulsed+magnetic+field%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">A detailed ethological analysis of the mouse open field test: effects of diazepam, chlordiazpoxide and an extremely low frequency pulsed magnetic field.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 25, 235-260 (2001).</li>
<li>Ramos, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+anxiety%3A+do+I+need+multiple+tests%5BTitle%5D)+AND+%22TIPS%22%5BJournal%5D)">Animal Models of anxiety: do I need multiple tests.</a> TIPS. 29, 493-498 (2008).</li>
<li>Archer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tests+for+emotionality+in+rats+and+mice%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">Tests for emotionality in rats and mice: a review.</a> Anim. Behav. 21, 205-235 (1973).</li>
<li>Gray, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emotionality+in+male+and+female+rodents%3A+a+reply+to+Archer%5BTitle%5D)+AND+%22Brit.+J.+Psych%22%5BJournal%5D)">Emotionality in male and female rodents: a reply to Archer.</a> Brit. J. Psych. 70, 425-440 (1979).</li>
<li>Carola, V., D’Olimpio, F., Brunamonti, E., Mangia, F., Renzi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+elevated+plus-maze+and+open-field+tests+for+the+assessment+of+anxiety-related+behavior+in+inbred+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the elevated plus-maze and open-field tests for the assessment of anxiety-related behavior in inbred mice.</a> Behav. Brain Res. 134, 49-57 (2002).</li>
<li>Ramesh Babu, J., Seibenhener, M. L., Peng, J., Strom, A. L., Kemppainen, R., Cox, N., Zhu, H., Wooten, M. C., Diaz-Meco, M. T., Moscat, J., Wooten, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+inactivation+of+p62+leads+to+accumulation+of+hyperphosphorylated+tau+and+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Genetic inactivation of p62 leads to accumulation of hyperphosphorylated tau and neurodegeneration.</a> J. Neurochem. 106, 107-120 (2008).</li>
<li>Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thigmotaxis+as+an+index+of+anxiety+in+mice%3A+influence+of+dopaminergic+transmissions%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Thigmotaxis as an index of anxiety in mice: influence of dopaminergic transmissions.</a> Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).</li>
<li>Denenberg, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Open-field+behavior+in+the+rat%3A+what+does+it+mean%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Open-field behavior in the rat: what does it mean.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 159, 852-859 (1969).</li>
<li>Stanford, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+test%3A+reinventing+the+wheel%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Psychopharm%22%5BJournal%5D)">The open field test: reinventing the wheel.</a> J. Psychopharm. 21, 134-135 (2007).</li>
<li>Ennaceur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tests+of+unconditional+anxiety+%E2%80%93+pitfalls+and+disappointments%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Behav%22%5BJournal%5D)">Tests of unconditional anxiety – pitfalls and disappointments.</a> J. Phys. Behav. 135, 55-71 (2014).</li>
<li>Borta, A., Schwarting, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibitory+avoidance%2C+pain+reactivity%2C+and+plus-maze+behavior+in+Wistar+rats+with+high+versus+low+rearing+activity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Behav%22%5BJournal%5D)">Inhibitory avoidance, pain reactivity, and plus-maze behavior in Wistar rats with high versus low rearing activity.</a> J. Phys. Behav. 84, 387-396 (2005).</li>
<li>Costall, B., Jones, B. J., Kelly, M. E., Naylor, R. J., Tomkins, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploration+of+mice+in+a+black+and+white+test+box%3A+validation+as+a+model+of+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Exploration of mice in a black and white test box: validation as a model of anxiety.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 32, 777-785 (1989).</li>
<li>Bouwknecht, J. A., Paylor, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pitfalls+in+the+interpretation+of+genetic+and+pharmacological+effects+on+anxiety-like+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Pharm%22%5BJournal%5D)">Pitfalls in the interpretation of genetic and pharmacological effects on anxiety-like behavior in rodents.</a> Behav. Pharm. 19, 385-402 (2008).</li>
<li>Webster, D. G., Baumgardner, D. J., Dewsbury, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Open+field+behavior+in+eight+taxa+of+muriod+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Bull.+Psychonom.+Soc%22%5BJournal%5D)">Open field behavior in eight taxa of muriod rodents.</a> Bull. Psychonom. Soc. 13, 90-92 (1979).</li>
<li>Wilson, R. C., Vacek, T., Lanier, D. L., Dewsbury, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Open+field+behavior+in+muroid+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Biol%22%5BJournal%5D)">Open field behavior in muroid rodents.</a> Behav. Biol. 17, 495-506 (1976).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotyping+of+transgenic+and+knockout+mice%3A+experimental+designs+and+evaluation+of+general+health%2C+sensory+functions%2C+motor+abilities+and+specific+behavioral+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice: experimental designs and evaluation of general health, sensory functions, motor abilities and specific behavioral tests.</a> Brain Res. 835, 18-26 (1999).</li>
<li>Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thigmotaxis+as+an+index+of+anxiety+in+mice.+influence+of+dopaminergic+transmissions%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Thigmotaxis as an index of anxiety in mice. influence of dopaminergic transmissions.</a> Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).</li>
<li>Miller, B. H., Schultz, L. E., Gulati, A., Su, A. I., Pletcher, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+characterization+of+a+genetically+diverse+panel+of+mice+for+behavioral+despair+and+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Phenotypic characterization of a genetically diverse panel of mice for behavioral despair and anxiety.</a> PLoS One. 5, e14458(2010).</li>
<li>Tannenbaum, B., Anisman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+chronic+intermittent+challenges+in+stressor-susceptible+and+resilient+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psych%22%5BJournal%5D)">Impact of chronic intermittent challenges in stressor-susceptible and resilient strains of mice.</a> Biol. Psych. 53, 292-303 (2003).</li>
<li>Lister, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethologically-based+animal+models+of+anxiety+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Ethologically-based animal models of anxiety disorders.</a> Pharmacol. Ther. 46, 321-340 (1990).</li>
<li>Kulesskaya, N., Voikar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+mouse+anxiety-like+behavior+in+the+light-dark+box+and+open-field+arena%3A+role+of+equipment+and+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Behav%22%5BJournal%5D)">Assessment of mouse anxiety-like behavior in the light-dark box and open-field arena: role of equipment and procedure.</a> Phys. Behav. 133, 30-38 (2014).</li>
<li>Han, H., Du, W., Zhou, B., Zhang, W., Xu, G., Niu, R., Sun, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+chronic+fluoride+exposure+on+object+recognition+memory+and+mRNA+expression+of+SNARE+complex+in+hippocampus+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Trace+Elem.+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of chronic fluoride exposure on object recognition memory and mRNA expression of SNARE complex in hippocampus of male mice.</a> Biol. Trace Elem. Res. 158, 58-64 (2014).</li>
<li>Barrow, P., Leconte, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+body+weight+on+open+field+and+swimming+maze+performance+during+the+post-weaning+period+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab.+Animals%22%5BJournal%5D)">The influence of body weight on open field and swimming maze performance during the post-weaning period in the rat.</a> Lab. Animals. 30, 22-27 (1996).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

להרחיב שדה המבוך הוא אחת מהפלטפורמות הנפוצות ביותר במחקרים התנהגותיים בעלי חיים. מספר הפרמטרים קונבנציונליים והאתולוגיה חשובים 2,4 ניתן לאסוף ולנתח בזמן ההופעה של הפרנציסקאני. נתונים אלה מאפשרים לחוקר למדוד התנהגויות הנעות בין פעילות של תנועה הכוללת להתנהגויות רגשיות הקשורות לחרדה 8. עם זאת, שימוש בהפרנציסקאני הוא לא בלי החסרונות שלה. נושא מבלבל אחת הוא מגוון הרחב של משתני סטטי שניתן לטפל בכל פגישת בדיקות. דוגמאות כוללות זמן, תנאי תאורה והכללת אובייקט רומן. ה...

מבוך השדה הפתוח (OFM) פותח לראשונה בשנת 1934 כמבחן למדידת רגשות במכרסמים1. הוא הגיע למעמד של אחד ממדדי ההתנהגות הנפוצים ביותר בפסיכולוגיה של בעלי חיים2. הוא מספק הערכה קלה ומהירה למדי של התנהגויות מוגדרות היטב שאינן דורשות הכשרה לנבדק ומעט מאוד הכשרה מיוחדת לאדם המנהל את המבחן. תכונות אלה הובילו לשימוש נרחב במבוך השדה הפתוח במחקר המורחב למיני בעלי חיים אחרים כגון עגלים, חזירים, ארנבות, פרימטים, דבורי דבש ולובסטרים3. חלק מהפופולריות שלו נובע מהעובדה שהמושגים הפסיכולוגיים והפיזיולוגיים העומדים בבסיס המבחנים הם בדרך כלל ישירים ומובנים היטב. לדוגמה, ההנחה היא שכוחות אבולוציוניים בחרו בתגובה נפוצה בבעלי חיים כך שרוב המינים מציגים פחד או תגובות בריחה מתווכות חרדה לגירויים ספציפיים. מכרסמים למשל, מראים סלידה מובהקת מסביבות גדולות, מוארות, פתוחות ולא ידועות4. אנו יכולים להניח שהם הותנו מבחינה פילוגנטית לראות סביבות מסוג זה כמסוכנות. כל התכונות הללו משולבות במבוך השדה הפתוח ומהוות את הבסיס לשימוש בו בבדיקת פרדיגמות התנהגותיות.
מבוך שדה פתוח מורכב מאזור מוקף קיר שגובהו מספיק כדי למנוע מהנבדק לברוח. צורות מבוך אופייניות הן עגולות או מרובעות עם שטח גדול מספיק, בהתבסס על גודל הנבדק, כדי לעורר תחושת פתיחות במרכז המבוך. ניתן לנקד מספר משתנים במבוך השדה הפתוח כאשר רוב הפרמטרים כוללים סוגים שונים של פעילות מוטורית2. אמבולציה היא ההתנהגות הנפוצה ביותר שנחקרה, אך ניתן למדוד גם אחרות כמו חביון או גידול. לרוב, התנהגות מכרסמים מנותחת במבוך חשוף. עם זאת, הוספת חפצים, אחד או רבים לרצפת המבוך, מוסיפה את היכולת לראות כיצד הנושא מקיים אינטראקציה עם גירויים נוספים חדשים2. פרמטרים רלוונטיים כאשר אובייקטים מוצגים הם בדרך כלל מספר הגישות לאובייקט או במקרים מסוימים, העדפה או סלידה מאובייקט אחד על פני אחר.
מבחני התנהגות רבים של חרדה מבוססים על פעילות הגוף והתנועה של בעל החייםהנבדק 5. פירוש מבחנים התנהגותיים לרגשות תוך הפרדת גורמים מבלבלים לא רגשיים, כגון פעילות מוטורית, היה נושא לוויכוח עז6,7. כפי שתואר במקור ה-OFM, ניתן להסיק שני מדדים של רגשות, פעילות תנועתית ומשקעי בולי צואתיים או עשיית צרכים1. עם זאת, שני המדדים הללו הוכחו בכמה מחקרים כלא קשורים התומכים במסקנה שרגשיות במכרסמים היא רב-ממדית5. ללא קשר, פערים בספרות לגבי מדדים אלה ורגשות או חרדה במודלים של עכברים עשויים להיות מיוחסים להבדלים בקריטריוני הניתוח או להבדלים בהליכי הבדיקה. מחקרים קישרו באופן חד משמעי תוצאות מניתוח OFM עם מדדים אחרים של חרדה בעת השוואת מודלים של עכברים8.

<table><tbody><tr><td>מבחן שדה פתוח רב יחידות</td><td>סן דייגו אינסטרומנטס, בע"מ</td><td>לבן 7001-0354</td><td>ניתן להשתמש בכל מבוך שדה פתוח יחיד או רב יחידות ניתן להשתמש בתוכנת</td></tr><tr><td>מעקב DT חכמה</td><td>PanLab/Harvard Apparatus</td><td>76-0695</td><td>ניתן להשתמש בכל תוכנת מעקב עם פרוטוקול זה</td></tr><tr><td>מקליט מצלמת וידאו Sony 990x</td><td>Sony</td><td>CCD-TRV328</td><td>ניתן לחבר כל מצלמת וידאו מתאימה למחשב להקלטת פרופילי מעקב.</td></tr></tbody></table>

שימוש בשדה הפתוח המבוך כדי למדוד התנהגות כמו חרדה של תנועה ובעכברים

Use of the Open Field Maze to Measure Locomotor and Anxiety-like Behavior in Mice

מודלים של בעלי חיים הוכחו כבעלי ערך רב לחוקרים המנסים לענות על שאלות הנוגעות למנגנוני ההתנהגות. מבוך השדה הפתוח הוא אחת הפלטפורמות הנפוצות ביותר למדידת התנהגויות במודלים של בעלי חיים. זוהי בדיקה מהירה וקלה יחסית המספקת מגוון מידע התנהגותי החל מיכולת אמבולטורית כללית ועד נתונים לגבי הרגשיות של בעל החיים הנבדק. בכל הנוגע למודלים של מכרסמים, ההליך מאפשר לחקור זנים שונים של עכברים או חולדות שגודלו במעבדה ונלכדו בטבע. הטכניקה גם מתאימה בקלות לחקירה של תרכובות פרמקולוגיות שונות להשפעות חרדה או חרדה. כאן, מפורט פרוטוקול לשימוש במבוך השדה הפתוח לתיאור התנהגויות עכברים ומבוצע ניתוח פשוט של יכולת תנועה כללית והתנהגויות רגשיות הקשורות לחרדה בין שני זנים של עכברי C57BL/6. בקצרה, באמצעות הפרוטוקול המתואר אנו מראים שעכברי Wild Type הפגינו פחות התנהגויות הקשורות לחרדה באופן משמעותי מאשר עכברי Knock Out תואמי גיל, בעוד ששני הזנים הפגינו יכולת אמבולטורית דומה.

המספר הממוצע של אנשים לזן של עכברים שנבדקו ברוב המקרים הוא כ 20 כדי ליצור רלוונטי סטטיסטי מספקת. עם זאת, מספר זה יכול להיות בטווח של 8-30 בהתאם לזמינות עכבר. בהתאם למדידה או השוואות הנדרשות, הוא גם נוח לשימוש נושאים באותו גיל. הפרמטר הספציפי הראשון וככל הנראה החשוב ביותר למדידה בשדה הפתוח המבוך הוא מרחק אמבולטורי כולל. בעוד יחידת המידה אינה רלוונטית לצורך השוואה, זה לרוב מתבטא במדידה מטרי (סנטימטר). בנתוני הניסוי...

פרוטוקול מסופק לשימוש במבוך שדה פתוח כדי לגשת לפעילות תנועתית כללית, חרדה ורגשות במודל של עכבר מעבדה.

Animal models have proven to be invaluable to researchers trying to answer questions regarding the mechanisms of behavior. The Open Field Maze is one of ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להציג את מבוך השדה הפתוח כפלטפורמה קלה לשימוש להמחשת התנהגות תנועתית כללית ולמדידה ספציפית של התנהגויות רגשיות הקשורות לחרדה. במודל שחוק. זה מושג על ידי הקמת פלטפורמת המבוך ומערכת מעקב המצלמה כדי למדוד את ההתנהגויות המעניינות.השלב השני הוא להכניס את נושא העכבר למבוך באופן שימזער רעשי רקע שמקבלת המצלמה. לאחר מכן, העכבר מותר לתנועה חופשית וללא הפרעה לאורך סגירת המבוך, הנלכדת על ידי המצלמה באמצעות תוכנת מעקב וידאו. השלב האחרון הוא ניתוח הנתונים המתקבלים מתוכנת המעקב כדי לקבוע הבדלים בפרמטרים המשמשים למדידת התנהגויות הקשורות לחרדה.בסופו של דבר, מבוך השדה הפתוח יכול לשמש למדידת פעילות תנועתית והתנהגויות הקשורות לחרדה כדי לקבל תובנה לגבי דפוסי התנהגות רגשית במודלים של מכרסמים. אחד היתרונות של טכניקה זו על פני השיטות הקיימות למדידת חרדה במודל מכרסמים כמו מבוך פלוס מוגבה, הוא מספר הפרמטרים האתולוגיים והקונבנציונליים שניתן למדוד במהלך מבחן בודד. כדי להכין את הניסוי, השיגו מבוך שדה פתוח או OFM.זה עשוי להיות מורכב ממבוך תא פעילות יחיד או מרובה. כל תא צריך להיות באורך של כ-50 סנטימטרים, רוחב 50 סנטימטרים וגובה של 38 סנטימטרים, וצריך להיות עשוי מרצפות פלסטיק בצפיפות גבוהה ולא נקבוביות של המבוך צריך להיות בעל מרקם למתיחה במהלך אמבולציה ומבוך קירות צריכים להיות חלקים כ

use-open-field-maze-to-measure-locomotor-anxiety-like-behavior

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

המבחן גבוהות מבוך פלוס הוא אחד המבחנים הנפוצים ביותר למדידת חרדה כמו התנהגות בעכברים. כאן, אנו מציגים סרט המראה את הליכי מפורט לביצוע הבדיקה.

מבוך פלוס גבוהות עבור עכברים

צעדי פלוס מבוך חרדה כמו התנהגות במכרסמים. ישנם שני ההפך סגור ושתי זרועות פתוחות מנוגדות; מכרסמים חרדה למנוע את זרועות הפתוחות. האזור המרכזי הוא לא לגמרי פתוח ולא סגור, כך שהזמן שבילה כאן הוא דו משמעי וקשה לפרש. כאן שינוי של הפרוטוקול בתוספת-מבוך ביטול תחום זה מתואר.

מבחן הסמטאות הרצוף של חרדה בעכברים וחולדות

סרטון זה מתאר את מבחן התנהגות השדה הפתוח המשמש לבחינת תנועה כללית והרגלי חקר במכרסמים.

מבחן התנהגות בשדה פתוח: שיטה להערכת הרגלי תנועה וחקירה כלליים

מבוך בארנס היבשתי נעשה שימוש נרחב כדי למדוד את יכולת ניווט המרחבי לגירויים המעטה מרתיעים תגובה. במשך ימים רצופים, ביצועים (למשל השהיה לאתר כלוב בריחה) של נבדקי ביקורת משתפרת, מעיד על למידה וזיכרון רגילים. הבדלים בין חולדות ועכברים מחייבים שינויי מנגנון ומתודולוגיה המפורטים כאן.

בארנס מבוך אסטרטגיות בדיקה עם קטן ומודלים מכרסמים גדולים

השטח הפתוח מגדל המבוך (OFTM) הוא מבוך נוצר כדי ללמוד את המנגנונים התנהגותיים ועצביים של למידה מרחבית (למשל, במקומה או למידת תגובה) בחולדות. מבוך זו שימושי במיוחד לנסיינים שרוצים להשתמש בפרדיגמה מבוך לא מלחיצה לחקור למידה מרחבית במחקר שלהם.

מקום ותגובה למידה בשטח הפתוח מגדל המבוך

התנהגויות מוגבלות וחוזרות על עצמן מסדר גבוה יותר משבשות את חייהם של אנשים מושפעים.  התנהגויות אלה מאתגרות למידול במכרסמים, מה שמקשה על מחקר ביו-רפואי בסיסי על טיפולים או התערבויות פוטנציאליים ל-RRBs.  כאן אנו מתארים חקר אובייקטים חדשים כמבחן פוטנציאלי ל-RRBs מסדר גבוה יותר בעכברים.

חיפושי אובייקט רומן בתור Assay פוטנציאל התנהגויות חוזרות מסדר גבוה של עכברים

פרוטוקול זה מודד מרחבי למידה וזיכרון באמצעות המבוך בארנס. פרדיגמה עלמה במצוקה הרומן משמשת להערכת פעילות גינקולוגיות והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים.

ניתוח מרחבי למידה והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים באמצעות בארנס מבוך פרדיגמות עלמה במצוקה

סוללה מבחן התנהגותי מקיף של מיומנויות מוטוריות, רוח — לרבות אינטראקציה חברתית, דיכאון וחרדה – קוגניציה מיועד המבדק חוזרות ונשנות של שינויים התנהגותיים הקשורים ניוון מוחיים הקשורים בעכברים.

סוללה בדיקה התנהגותית להערכה חוזרת ונשנית של מיומנויות מוטוריות, מצב רוח, קוגניציה בעכברים

עם מניפולציה אופטוגנטית של אוכלוסיות עצביות ספציפיות או אזורים במוח, התנהגות ניתן לשנות עם רזולוציה זמנית ומרחבית גבוהה בבעלי חיים נעים בחופשיות. באמצעות כלים אופטוגנטיים שונים בשילוב עם סיבים אופטיים מושתלים כרונית, ניתן לבצע מגוון של אפנון עצבי ובדיקות התנהגותיות.

מניפולציה אופטוגנטית של פעילות עצבית לווסת את ההתנהגות בעכברים נעים בחופשיות

מכרסמים אינם מסוגלים לדווח על תסמיני מיגרנה. כאן, אנו מתארים פרדיגמת בדיקה הניתנת לניהול (בדיקות שדה בהירות/כהות ופתוחות) למדידת סלידה קלה, אחד הסימפטומים הנפוצים והמטרידים ביותר בחולים עם מיגרנות.

חקירת התנהגות דמוית מיגרנה באמצעות סלידה קלה בעכברים

כתב יד זה מציג סדרה של מבחנים התנהגותיים הניתנים לשחזור כדי לאמת מודל עכבר של תסמונת אנג'למן.

אפיון התנהגותי של מודל עכבר תסמונת אנג'למן

למדו להשתמש בשדה הפתוח המבוך כדי למדוד התנהגות כמו חרדה ותנועה בעכברים. שיטה זו מאפשרת ניתוח כמותי של פעילות לocomotor ורמות חרדה באמצעות תוכנת מעקב וידאו.

שימוש בשדה הפתוח המבוך כדי למדוד התנהגות כמו חרדה של תנועה ובעכברים

גלה סרטונים נוספים