דור יעיל של כתבים במכות ספציפיים Lineage hiPSC עצבי באמצעות CRISPR / Cas9 ומערכת Nickase זוגי Cas9

10.5K צפיות

צוטט 5 פעמים

14:46 דק'

28 במאי 2015

10.3791/52539-v

28 במאי 2015

10.5K צפיות

* These authors contributed equally

כלי עריכת גנום כגון מערכת CRISPR (Clustered Regular Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas (CRISPR-associated) שיפרו מאוד את יעילות מיקוד הגנים בתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים אנושיים (hiPSCs). כתב יד זה מתאר פרוטוקול ליצירת מדווח hiPSC ספציפי לשושלת באמצעות רקומבינציה הומולוגית בסיוע מערכת CRISPR/Cas.

גלה סרטונים נוספים

Knockin

Chapters in this video

0:05

Title

1:54

Design of Targeting Vectors

2:41

Design and Vector Construction of sgRNAs for CRISPR/Cas9 System

5:20

Design and Construction of Cas9n Double Nickase sgRNA

8:06

Evaluation of sgRNAs by T7 Endonuclease1

11:03

In Silico Prediction of Potential Off Target Sites

12:32

Results: The T7E1 Assay is Used to Evaluate sgRNAs Prior to Transfecting hiPSCs

13:56

Conclusion

Related Videos