Name: שימוש בChironomidae (כפולי כנף) גלמי Exuviae כמהיר Bioassessment פרוטוקול לגופי מים צפים-שטח (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 27 s
Description: למדו טכניקות לאיסוף ועיבוד גלמי עור Chironomidae צפים-שטח להערכת איכות מים. שיטה זו יעילה, כלכלית ומתאימה לכמעט כל סביבה מימית לניטור אקולוגי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מימון לחיבור ופרסום מאמר זה סופק באמצעות מענקים מרובים וחוזים לקבוצת Chironomidae המחקר (LC Ferrington, ג &#39;וניור, PI) במחלקה לאנטומולוגיה באוניברסיטת מינסוטה. תודה לנתן רוברטס לשיתוף תמונות עבודת שטח המשמשות כדמויות בוידאו הקשורים לכתב היד הזה.

1. הכנת חומרי גלם לאוסף שדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע את מספר דגימות SFPE שיש לאסוף מבוסס על עיצוב המחקר ולרכוש צנצנת אחת מדגם (למשל, 60 מיליליטר) עבור כל דגימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן שתי תוויות תאריך ויישוב לכל צנצנת מדגם. מקום אחד ובלהדביק בתוך אחר מחוץ לצנצנת. ודא שכל תווית תאריך ויישוב כוללת את הפרטים הבאים: ארץ, מדינה, מחוז, עיר, גוף מים, קואורדינטות GPS, תאריך, ושמו של אדם (ים) איסוף הדגימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף חומרים ספציפיים אחרים וציוד (ראה טבלה של חומרים / ציוד ספציפי). </li></ol> 2. אוסף שדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחזיק מגש זחל ביד אחת ומסנן באחר. טובלים את מגש הזחל למים שבו לצבור SFPE (למשל, הצטברות קצף, קשיים, צמחייה מתהווה, פסולת, חזרה מערבולות, ולאורך קצות בנק) (איור 2 א), יאפשר ואטאה, exuviae, ופסולת להיכנס למגש הזחל, ויוצקים את החומר הזה דרך המסננת. אם הדגימה במערכת lotic, תתחיל בסוף במורד הזרם מהישג יד המדגם ולעבוד במעלה הזרם (איור 2). אם דגימה במערכת lentic, מתחיל בקו החוף בכיוון הרוח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלב 2.1 במשך 10 דקות (או כהגדרה אחרת למשטר דגימה ספציפי) בתוך כל הישג יד מדגם מוגדר מראש (בדרך כלל 100-200 מ &#39;לדגימות שנאספו מזרמים, אבל תלוי בשטח הכולל של אתר הניטור הימי); לעבור בין אזורי הצטברות SFPE כמתאים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתרכז פסולת באזור אחד של המסננת באמצעות בקבוק להשפריץ מלאים במים מאתר המדגם וזהירות להעביר מדגם SFPE צנצנת מדגם מראש שכותרתו בעזרת מלקחיים וזרם של אתנול מבקבוק להשפריץ. מלא צנצנת מדגם עם אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 2.1-2.2 לכל הדגימות. </li></ol> קטיף 3. דוגמא הערה: שאר פרוטוקול זה נוגע לsubsample SFPE 300 וייתכן שיהיה צורך לשנות עבור גדלי subsample אחרים. ראה 9 הנחיות subsampling ותדר דגימה של Bouchard וFerrington להתאמת שיטות SFPE כדי לעמוד ביעדים ומשאבים ללמוד ספציפיים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקצות בקבוקון 1-DRAM עבור כל דגימת SFPE; להכין תווית תאריך ויישוב למקום בתוך כל בקבוקון ולמלא את בקבוקון ¾ מלא עם אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המכסה מצנצנת המדגם המקבילה ולבדוק exuviae גלמים מצורף. לשטוף בעדינות את תוכן את המכסה על צלחת פטרי באמצעות בקבוק להשפריץ מלא באתנול. אתר ולהסיר תווית מהחלק הפנימי של צנצנת המדגם באמצעות מלקחיים ולשטוף בעדינות את תוכן התווית על גבי צלחת פטרי. להגדיר תווית בצד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את התוכן של צנצנת הדגימה לתוך מגש זחל, שטיפה עם אתנול כדי להבטיח שאין SFPE יישאר בצנצנת המדגם. העבר חלק מexuviae, רזה גלמיםבשל, ואתנול מהמגש לצלחת פטרי. ודא שהמדגם מכוסה באתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את צלחת פטרי תחת מיקרוסקופ סטריאו. באופן שיטתי לסרוק את התוכן של צלחת פטרי לexuviae גלמים. בחר כל exuviae גלמים מהצלחת באמצעות מלקחיים ומקום לתוך הבקבוקון. אל תרים דגימות שנשברו (כלומר, אין לי לפחות מחצית cephalothorax והבטן), מיובש, או דחוס, כדי למנוע בעיות זיהוי מאוחר יותר. הערה: זיהוי למינים לעתים קרובות דורש שכל הדגימה היא הווה, אם כי במקרים מסוימים, זיהוי ברמת סוג עשוי להיות אפשרי עם דגימות חלקיות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צלחת מערבולת וסריקה לאיתור exuviae נוספת גלמים, לרבות כל שיכול להיות תקוע לצדדים של המנה, וכן, כל דגימות קטנות ושקופות שאולי לא להיות מזוהה בתחילה. חזור על פעולה עד שתי סריקות ברציפות לחשוף לא exuviae גלמים נוסף. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 3.3 ו3.4 עד 300 או כל exuviae גלמים כבר הרים. כאשר 300 exuviae גלמים כבר הרים, להחזיר את השאריות מצלחת פטרי למגש הזחל ולשטוף את צלחת פטרי עם אתנול. לאחר מכן, להעביר את השאריות ממגש הזחל לצנצנת המדגם הריקה, להוסיף תווית התאריך ויישוב, ולשים את המכסה על הצנצנת. לשמור או להשליך שאריות על פי פרוטוקולי פרויקט ספציפי. </li></ol> 4. לדוגמא מיון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יוצקים את כל הרים exuviae גלמים מהבקבוקון שכותרתו לתוך צלחת פטרי מלאה מספיק אתנול רק כדי לכסות את הדגימות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת מיקרוסקופ סטריאו, דגימות נפרדות לקבוצות מורפולוגיים שונות (כלומר, morphotaxa) ולמקם כל morphotaxon לבנפרד בקבוקונים שכותרתו מילאו 3/4 ה מלאים עם אתנול. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנצל מאפיינים מורפולוגיים חיצוניים להפריד morphotaxa chironomid. לדוגמא, מcephalothorax, להשתמש הבדלים בנוכחות, גודל, הצורה, וצבעוניות של גבשושיות כאפאליך, יבלות חזיתיות, setae החזיתי, וקרן בית חזה. מהבטן, להשתמש קוצים, hookrows, shagreen, setae, ושלוחות של מגזרי הבטן, בנוסף לאונות אנאלי להפרדת morphotaxa (איור 4 א). ראה Ferrington, et al. 5, Sæther 26, Pinder ו -27 רייס לתיאורים ודמויות של מאפיינים מורפולוגיים נוספים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש אתנול נוסף אם דגימות מתחילות להתייבש. </li></ol></li></ol> 5. שקופיות הרכבה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא גם אחד של צלחת רב גם לכל morphotaxon עם 95% אתנול. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח ייצוגים מרובים (לדוגמא, 25% בסך הכל) של כל morphotaxon להיות מותקן שקופית לתוך בארות בודדות של הצלחת. לאפשר דגימות לשבת היטב לפחות 10 דקות כדי ליבש מספיק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שקופיות תווית עם אתר מתאים, אוסף, וinformati זיהויב( איור 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שקופיות מקום במיקרוסקופ סטריאו. הערה: תבנית של השקופית המודבקת לשלב שימושית למיקום עקבי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים ירידה של Euparal בשקופית; להפיץ את Euparal כך שהוא קרוב לגודל של coverslip. השתמש אוורור נאות בעת עבודה עם Euparal. הערה: השתמש אוורור נאות בעת עבודה עם Euparal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להטביע נציג מmorphotaxon הראשון לEuparal באמצעות מלקחיים. הערה: כדי לבטל את אתנול עודף מהדגימה, באמצעות מלקחיים, לטפוח בעדינות על דגימת מעבדה מגבונים לפני הטבעתו בEuparal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את cephalothorax מהבטן באמצעות מלקחיים קנס שקצהו ו / או בדיקות לנתיחה (איור 4 א). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפצל את cephalothorax לאורך תפר ecdysial (איור 4) ולפתוח את cephalothorax כך שקצות התפר הם משני צדי מתרס (איור 4C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכוון גephalothorax כך שצד הגחון הוא פונה כלפי מעלה (איור 4C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את צד גב הבטן עד; מקום מייד מתחת לcephalothorax (איור 4C). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים coverslip על הדגימה. להחזיק coverslip בזווית, עם קצה אחד נוגע בשקופיות, ולאחר מכן נמוך יותר לאט ושחרר את coverslip להפחית היווצרות בועת האוויר. לחץ קל על coverslip כדי לשטח את הדגימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 5.3 דרך 5.7 לכל דגימות המיובשים. </li></ol> זיהוי 6. סוג <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע סוג של דגימות רכוב שקופיות באמצעות מיקרוסקופ מתחם. לזהות דגימות לסוג באמצעות מפתחות ואבחנות בWiederholm 28 וFerrington, et al. 5. במידת צורך, לאשר זיהוי רמה-משפחה באמצעות Ferrington, et al. 5. הערה: היו תיאורים רבים גנריות ותיקונים מאז Wiederholm 28 וFerrington,et al. 5, לכן, מפתחות ואבחנות אלה אינם שלמים וצריכים להשלים עם ספרות ראשונית. </li></ol>

<ol><li>Southerland, M. T., Stribling, J. B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSoutherland%2C+MT+%22Biological+Assessment+and+Criteria%3A+Tools+for+Water+Resource+Planning+and+Decision+Making%22">Biological Assessment and Criteria: Tools for Water Resource Planning and Decision Making</a>. Davis, W. S., Simon, T. P. , Lewis Publishers. 81-96 (1995).</li>
<li>Merritt, R. W., Cummins, K. W., Resh, V. H., Batzer, D. P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMerritt%2C+RW+%22An+Introduction+to+the+Aquatic+Insects+of+North+America%22">An Introduction to the Aquatic Insects of North America</a>. Merritt, R. W., Cummins, K. W., Berg, M. B. , 4th edition, Kendall/Hunt Publishing Company. 15-37 (2008).</li>
<li>Ferrington, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFerrington%2C+LC+%22Sediment+and+Stream+Water+Quality+in+a+Changing+Environment%3A+Trends+and+Explanation%22">Sediment and Stream Water Quality in a Changing Environment: Trends and Explanation</a>. , International Association of Hydrological Sciences Press. 181-190 (1991).</li>
<li>Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFerrington%2C+LC+%22Freshwater+Animal+Diversity+Assessment+in+Hydrobiology%22">Freshwater Animal Diversity Assessment in Hydrobiology</a>. Balian, E. V., Lévêque, C., Segers, H., Martens, K. , Springer. Netherlands. 447-455 (2008).</li>
<li>Ferrington, L. C., Berg, M. B., Coffman, W. P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFerrington%2C+LC+%22An+Introduction+to+the+Aquatic+Insects+of+North+America%22">An Introduction to the Aquatic Insects of North America</a>. Merritt, R. W., Cummins, K. W., Berg, M. B. , 4th ed, Kendall/Hunt Publishing Company. 847-989 (2008).</li>
<li>Armitage, P. D., Cranston, P. S., Pinder, L. C. V. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArmitage%2C+PD+%22The+Chironomidae%3A+Biology+and+Ecology+of+Non-Biting+Midges%22">The Chironomidae: Biology and Ecology of Non-Biting Midges</a>. 572, Chapman & Hall. (1995).</li>
<li>Coffman, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Energy+Flow+in+a+Woodland+Stream+Ecosystem%3A+II.+The+Taxonomic+Composition+of+the+Chironomidae+as+Determined+by+the+Collection+of+Pupal+Exuviae%5BTitle%5D)+AND+%22Archiv+fur+Hydrobiologie%22%5BJournal%5D)">Energy Flow in a Woodland Stream Ecosystem: II. The Taxonomic Composition of the Chironomidae as Determined by the Collection of Pupal Exuviae.</a> Archiv fur Hydrobiologie. 71, 281-322 (1973).</li>
<li>Anderson, A. M., Ferrington, L. C. Proceedings of 18th International Symposium on Chironomidae on Fauna norvegica. Ekrem, T., Stur, E., Aagaard, K. 31, (2011).</li>
<li>Bouchard, R. W., Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effects+of+Subsampling+and+Sampling+Frequency+on+the+Use+of+Surface-Floating+Pupal+Exuviae+to+Measure+Chironomidae+%28Diptera%29+Communities+in+Wadeable+Temperate+Streams%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Monitoring+and+Assessment%22%5BJournal%5D)">The Effects of Subsampling and Sampling Frequency on the Use of Surface-Floating Pupal Exuviae to Measure Chironomidae (Diptera) Communities in Wadeable Temperate Streams.</a> Environmental Monitoring and Assessment. 181, 205-223 (2011).</li>
<li>Wilson, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+the+Effect+of+Sewage+Effluent+on+the+Oxford+Canal+Using+Chironomid+Pupal+Exuviae%5BTitle%5D)+AND+%22Water+and+Environment+Journal%22%5BJournal%5D)">Monitoring the Effect of Sewage Effluent on the Oxford Canal Using Chironomid Pupal Exuviae.</a> Water and Environment Journal. 8, 171-182 (1994).</li>
<li>Wentsel, R., McIntosh, A., McCafferty, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergence+of+the+Midge+Chironomus+tentans+when+Exposed+to+Heavy+Metal+Contaminated+Sediment%5BTitle%5D)+AND+%22Hydrobiologia%22%5BJournal%5D)">Emergence of the Midge Chironomus tentans when Exposed to Heavy Metal Contaminated Sediment.</a> Hydrobiologia. 57, 195-196 (1978).</li>
<li>Thienemann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Das+Sammeln+von+Puppenh%C3%A4uten+der+Chironomiden.+Eine+Bitte+um+Mitarbeit%5BTitle%5D)+AND+%22Archiv+fur+Hydrobiologie%22%5BJournal%5D)">Das Sammeln von Puppenhäuten der Chironomiden. Eine Bitte um Mitarbeit.</a> Archiv fur Hydrobiologie. 6, 213-214 (1910).</li>
<li>Anderson, A. M., Kranzfelder, P., Egan, A. T., Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survey+of+Neotropical+Chironomidae+%28Diptera%29+on+San+Salvador+Island%2C+Bahamas%5BTitle%5D)+AND+%22Florida+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Survey of Neotropical Chironomidae (Diptera) on San Salvador Island, Bahamas.</a> Florida Entomologist. 97, 304-308 (2014).</li>
<li>Coffman, W. P., de la Rosa, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taxonomic+Composition+and+Temporal+Organization+of+Tropical+and+Temperate+Assemblages+of+Lotic+Chironomidae%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Kansas+Entomological+Society%22%5BJournal%5D)">Taxonomic Composition and Temporal Organization of Tropical and Temperate Assemblages of Lotic Chironomidae.</a> Journal of the Kansas Entomological Society. 71, 388-406 (1998).</li>
<li>Brundin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transantarctic+Relationships+and+their+Significance%2C+as+Evidenced+by+Chironomid+Midges.+With+a+Monograph+of+the+Subfamilies+Podonominae+and+Aphroteniinae+and+the+Austral+Heptagyiae%5BTitle%5D)+AND+%22+Svenska+Vetenskapsakademiens+Handlingar%22%5BJournal%5D)">Transantarctic Relationships and their Significance, as Evidenced by Chironomid Midges. With a Monograph of the Subfamilies Podonominae and Aphroteniinae and the Austral Heptagyiae.</a> Svenska Vetenskapsakademiens Handlingar. 11, 1-472 (1966).</li>
<li>Anderson, A. M., Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+and+Resilience+of+Winter-Emerging+Chironomidae+%28Diptera%29+to+a+Flood+Event%3A+Implications+for+Minnesota+Trout+Streams%5BTitle%5D)+AND+%22Hydrobiologia%22%5BJournal%5D)">Resistance and Resilience of Winter-Emerging Chironomidae (Diptera) to a Flood Event: Implications for Minnesota Trout Streams.</a> Hydrobiologia. 707, 59-71 (2012).</li>
<li>Anderson, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFerrington%2C+LC+%22Contributions+to+the+Systematics+and+Ecology+of+Aquatic+Diptera-A+Tribute+to+Ole+A.+Saether%22">Contributions to the Systematics and Ecology of Aquatic Diptera-A Tribute to Ole A. Saether</a>. , Caddis Press. 99-105 (2007).</li>
<li>Bouchard, R. W., Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Winter+Growth%2C+Development%2C+and+Emergence+of+Diamesa+mendotae+%28Diptera%3A+Chironomidae%29+in+Minnesota+Streams%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Winter Growth, Development, and Emergence of Diamesa mendotae (Diptera: Chironomidae) in Minnesota Streams.</a> Environmental Entomology. 38, 250-259 (2009).</li>
<li>Hardwick, R. A., Cooper, P. D., Cranston, P. S., Humphrey, C. L., Dostine, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+and+Temporal+Distribution+Pattens+of+Drifting+Pupal+Exuviae+of+Chironomidae+%28Diptera%29+in+Streams+of+Tropical+Northern+Australia.+%5BTitle%5D)+AND+%22Freshwater+Biology%22%5BJournal%5D)">Spatial and Temporal Distribution Pattens of Drifting Pupal Exuviae of Chironomidae (Diptera) in Streams of Tropical Northern Australia. </a> Freshwater Biology. 34, 569-578 (1995).</li>
<li>Wilson, R. S., Bright, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Use+of+Chironomid+Pupal+Exuviae+for+Characterizing+Streams%5BTitle%5D)+AND+%22Freshwater+Biology%22%5BJournal%5D)">The Use of Chironomid Pupal Exuviae for Characterizing Streams.</a> Freshwater Biology. 3, 283-302 (1973).</li>
<li>Raunio, J., Paavola, R., Muotka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Emergence+Phenology%2C+Taxa+Tolerances+and+Taxonomic+Resolution+on+the+Use+of+the+Chironomid+Pupal+Exuvial+Technique+in+River+Biomonitoring%5BTitle%5D)+AND+%22Freshwater+Biology%22%5BJournal%5D)">Effects of Emergence Phenology, Taxa Tolerances and Taxonomic Resolution on the Use of the Chironomid Pupal Exuvial Technique in River Biomonitoring.</a> Freshwater Biology. 52, 165-176 (2007).</li>
<li>Ruse, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Acidification+Assessed+using+Chironomid+Pupal+Exuviae%5BTitle%5D)+AND+%22Fundamental+and+Applied+Limnology%22%5BJournal%5D)">Lake Acidification Assessed using Chironomid Pupal Exuviae.</a> Fundamental and Applied Limnology. 178, 267-286 (2011).</li>
<li>Rufer, M. R., Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sampling+Frequency+Required+for+Chironomid+Community+Resolution+in+Urban+Lakes+with+Contrasting+Trophic+States%5BTitle%5D)+AND+%22Boletim+do+Museu+Municipal+do+Funchal+%28Hist%C3%B3ria+Natural%29+Supplement%22%5BJournal%5D)">Sampling Frequency Required for Chironomid Community Resolution in Urban Lakes with Contrasting Trophic States.</a> Boletim do Museu Municipal do Funchal (História Natural) Supplement. 13, 77-84 (2008).</li>
<li>CEN. 15196, European Committee for Standardization. Brussels. 1-13 (2006).</li>
<li>Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection+and+Identification+of+Surface+Floating+Pupal+Exuviae+of+Chironomidae+for+Use+in+Studies+of+Surface+Water+Quality%5BTitle%5D)+AND+%22Standard+Operating+Procedure+No.+FW+130A%22%5BJournal%5D)">Collection and Identification of Surface Floating Pupal Exuviae of Chironomidae for Use in Studies of Surface Water Quality.</a> Standard Operating Procedure No. FW 130A. , (1987).</li>
<li>Saither, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glossary+of+Chironomid+Morphology+Terminology+%28Chironomidae+Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologica+Scandinavica+Supplement%22%5BJournal%5D)">Glossary of Chironomid Morphology Terminology (Chironomidae Diptera).</a> Entomologica Scandinavica Supplement. 14, 51(1980).</li>
<li>Pinder, L. C. V., Reiss, F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPinder%2C+LCV+%22Chironomidae+of+the+Holarctic+region.+Keys+and+Diagnoses+Part+2.+Pupa%22">Chironomidae of the Holarctic region. Keys and Diagnoses Part 2. Pupa</a>. Wiederholm, T. 28, Entomologica Scandinavica Supplement. 299-456 (1986).</li>
<li>Wiederholm, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWiederholm%2C+T+%22Chironomidae+of+the+Holarctic+region+-+Keys+and+Diagnoses%2C+Part+2%2C+Pupae%22">Chironomidae of the Holarctic region - Keys and Diagnoses, Part 2, Pupae</a>. 28, Entomologica Scandinavica Supplement. (1989).</li>
<li>Merritt, R. W., Webb, D. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMerritt%2C+RW+%22An+Introduction+to+the+Aquatic+Insects+of+North+America%22">An Introduction to the Aquatic Insects of North America</a>. , 4th edition, Kendall/Hunt Publishing Company. (2008).</li>
<li>Wilson, R. S., Ruse, L. P., Sutcliffe, D. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWilson%2C+RS+%22A+Guide+to+the+Identification+of+Genera+of+Chironomid+Pupal+Exuviae+Occurring+in+Britain+and+Ireland+%28including+Common+Genera+from+Northern+Europe%29+and+Their+Use+in+Monitoring+Lotic+and+Lentic+Fresh+Waters%22">A Guide to the Identification of Genera of Chironomid Pupal Exuviae Occurring in Britain and Ireland (including Common Genera from Northern Europe) and Their Use in Monitoring Lotic and Lentic Fresh Waters</a>. , Freshwater Biological Association. (2005).</li>
<li>Egan, A. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Communities+in+Freshwater+Coastal+Rock+Pools+of+Lake+Superior%2C+with+a+Focus+on+Chironomidae+%28Diptera%29%22">Communities in Freshwater Coastal Rock Pools of Lake Superior, with a Focus on Chironomidae (Diptera)</a>. , University of Minnesota. (2014).</li>
<li>Raunio, J., Heino, J., Paasivirta, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-Biting+Midges+in+Biodiversity+Conservation+and+Environmental+Assessment%3A+Findings+from+Boreal+Freshwater+Ecosystems%5BTitle%5D)+AND+%22Ecological+Indicators%22%5BJournal%5D)">Non-Biting Midges in Biodiversity Conservation and Environmental Assessment: Findings from Boreal Freshwater Ecosystems.</a> Ecological Indicators. 11, 1057-1064 (2011).</li>
<li>Kavanaugh, R. G., Egan, A. T., Ferrington, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+affecting+decomposition+rates+of+chironomid+%28Diptera%29+pupal+exuviae%5BTitle%5D)+AND+%22Chironomus%3A+Newsletter+on+Chironomidae+Research%22%5BJournal%5D)">Factors affecting decomposition rates of chironomid (Diptera) pupal exuviae.</a> Chironomus: Newsletter on Chironomidae Research. 27, 16-24 (2014).</li>
<li>Anderson, A. M., Stur, E., Ekrem, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+Morphological+Methods+Reveal+Cryptic+Diversity+and+Three+New+Species+of+Nearctic+Micropsectra+%28Diptera%3A+Chironomidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Freshwater+Science%22%5BJournal%5D)">Molecular and Morphological Methods Reveal Cryptic Diversity and Three New Species of Nearctic Micropsectra (Diptera: Chironomidae).</a> Freshwater Science. 32, 892-921 (2013).</li>
<li>Ekrem, T., Willassen, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+Tanytarsini+Relationships+%28Diptera%3A+Chironomidae%29+using+Mitochondrial+COII+Gene+Sequences%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Systematics+%26+Evolution%22%5BJournal%5D)">Exploring Tanytarsini Relationships (Diptera: Chironomidae) using Mitochondrial COII Gene Sequences.</a> Insect Systematics & Evolution. 35, 263-276 (2004).</li>
<li>Ekrem, T., Willassen, E., Stur, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+DNA+Sequence+Library+is+Essential+for+Identification+with+DNA+Barcodes%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Phylogenetics+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive DNA Sequence Library is Essential for Identification with DNA Barcodes.</a> Molecular Phylogenetics and Evolution. 43, 530-542 (2007).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

השלבים הקריטיים ביותר לאוסף מוצלח SFPE מדגם, קטיף, מיון, הרכבה שקופיות, והזדהות הם: (1) איתור אזורים של הצטברות SFPE גבוהה בתחום המחקר באוסף שדה (איור 2 א); (2) סריקה באיטיות את התוכן של צלחת פטרי לגילוי של כל SFPE במהלך קטיף מדגם; (3) פיתוח המיומנות הידנית הצורך לנתח את cephalothorax מהבטן במהלך שקופיות הרכבה (איור 4 א); ו- (4) הכרת תווים מורפולוגיים מפתח של exuviae גלמי chironomid לזהות בצורה נכונה לסוג. <p class="jove_content" style=";text-...

תוכניות ניטור ביולוגיות, המשתמשות באורגניזמים חיים כדי להעריך את בריאות סביבתית, משמשות לעתים קרובות כדי להעריך את איכות מים או לפקח הצלחה של תוכניות שיקום מערכת אקולוגית. פרוטוקולי bioassessment מהירים (RBP) באמצעות מכלולי macroinvertebrate benthic היו פופולריים בקרב סוכנויות משאבי מים של מדינה מאז 1989 1. שיטות מסורתיות של דגימת macroinvertebrates benthic לRBPs, כגון טבילה-נטו, סמפלר Surber, והס סמפלר 2, יכול להיות גוזלים זמן רב, יקר, ואולי רק למדוד מכלולים מmicrohabitat בפרט 3. RBP יעילה, חלופית להפקת מידע ביולוגי על גוף מים מיוחד כרוכה אוסף של exuviae Chironomidae צפה משטח גלמים (SFPE) 3. Chironomidae (Insecta: כפולי הכנף), הידוע בכינוי ברחשים שאינם נושכים, זבובים holometabolous שמתרחשים בדרך כלל בסביבות מימיות לפני מתעורר כמו מבוגרים<html> 60; על פני המים. משפחת chironomid היא מינים-עשירים, עם כ -5,000 מינים המתוארים ברחבי העולם; עם זאת, כ -20,000 מינים מוערכים להתקיים 4. Chironomids שימושי בתיעוד מים ואיכות סביבה במערכות אקולוגיות ימיות רבות בגלל הגיוון שלהם הגבוה ורמות סובלנות הזיהום משתנים 5. יתר על כן, הם לעתים קרובות macroinvertebrates benthic השפע והנפוץ ביותר במערכות מים, בדרך כלל היוו 50% או יותר מהמינים בקהילה 5,6. בעקבות הופעתה של המבוגרים היבשתיים, exuviae גלמים (יצוק עור גלמים) נשאר צף על פני המים (איור 1). exuviae גלמים לצבור לאורך גדות או מאחורי חסימות דרך הפעולה של זרם רוח או מים ויכול להיות שנאסף בקלות ובמהירות לתת מדגם מקיף של מיני chironomid שהתפתחו במהלך 24-48 שעות הקודמות 7. ntent &quot;&gt; השפע היחסי וההרכב הטקסונומי של SFPE נאסף משקף איכות מים, בהתחשב בכך שכמה מינים מאוד זיהום סובלני, ואילו אחרים הם די רגישים 5 יש שיטת SFPE יתרונות רבים על פני שיטות דגימת chironomid זחל מסורתיות כוללים:. (1) מינימאלי , אם בכלל, הפרעת בית גידול מתרחשת באזור דגימה; (2) דגימות אינן מתמקדות באיסוף יצורים חיים, אלא העור שאינם מהחיים, כל כך את המסלול של דינמיקת קהילה אינו מושפעת; (3) זיהוי לסוג, ו לעתים קרובות מינים, הוא יחסית קלים ניתנו מפתחות ותיאורים 3 מתאימים; (4) איסוף, עיבוד, וזיהוי דגימות הוא יעיל וחסכוני בהשוואה לשיטות דגימה מסורתית 3,8,9; (5) exuviae נצבר מייצג מינים שמקורם מגוון רחב של מייקרו בתי גידול 10; (6) השיטה היא ישימה כמעט בכל סביבות מימיות, כולל נחלים ונהרות, שפכי נהרות, Lakes, בריכות, בריכות סלע, ​​וביצות; ו( 7) SFPE אולי להיות אינדיקטור רגיש יותר לבריאות מערכת אקולוגית כיוון שהם מייצגים אנשים שהשלימו את כל שלבים בוגרים ויצאו בהצלחה בבגרות 11. שיטת SFPE אינה גישה חדשה לאיסוף מידע על קהילות chironomid. שימוש בSFPE הוצע לראשונה על ידי 12 Thienemann בתחילת 1900. מגוון מחקרים השתמש SFPE לסקרים הטקסונומית (למשל, 13-15), מגוון ביולוגי ומחקרים אקולוגיים (למשל 7,16-19), והערכות ביולוגיות (למשל, 20-22). בנוסף, חלק מהמחקרים עסקו בהיבטים שונים של עיצוב המדגם, גודל מדגם, ומספר אירועי מדגם הנדרש להשגת רמות זיהוי השונות של מינים או genera (למשל, 8,9,23). מחקרים אלו מצביעים על כך שאחוזים גבוהים יחסית של מינים או genera יכולים להיות מזוהים עם effor המתוןלא או הוצאה הקשורים לעיבוד מדגם. לדוגמא, אנדרסון וFerrington 8 נקבעו כי על הסמך subsample 100-ספירה, נדרש 1/3 RD פחות זמן כדי לאסוף דגימות SFPE לעומת לטבול נטו דגימות. מחקר נוסף קבע כי 3-4 דגימות SFPE יכולות להיות מסודרות וזיהו עבור כל מדגם לטבול-רשת וכי דגימות SFPE היו יעילה יותר מדגימות לטבול-נקי במין גילוי כעושר מינים מוגבר 3. לדוגמא, באתרים עם עושר מיני ערכים של 15-16 מינים, היעילות לטבול-הנקי הממוצעת היו 45.7%, ואילו דגימות SFPE היו 97.8% 3 יעילים. חשוב לציין, שיטת SFPE כבר טופל באיחוד האירופי 24 (המכונה טכניקת exuviae גלמי chironomid (CPET)) ובצפון אמריקה 25 להערכה אקולוגית, אבל השיטה לא תוארה בפירוט. אחד יישומים של המתודולוגיה SFPE תוארו על ידי Ferrington, et al. <sעד&gt; 3; עם זאת, ההתמקדות העיקרית של מחקר זה הייתה להעריך את היעילות, יעילות, וכלכלה של שיטת SFPE. מטרת עבודה זו היא לתאר את כל השלבים של שיטת SFPE בפירוט, כולל איסוף דגימה, עיבוד מעבדה, שקופיות הרכבה, וזיהוי סוג. קהל היעד כולל סטודנטים לתואר שני, חוקרים, ואנשי מקצוע המעוניינים בהרחבת מאמצי ניטור איכות מים מסורתיים ללימודיהם.

<table><tbody><tr><td>אתנול</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>S25309B&nbsp;</td><td>70-95%</td></tr><tr><td>בקבוקי כביסה מפלסטיק</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>0340923B</td><td></td></tr><tr><td>צנצנת לדוגמא</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>0333510B</td><td>זכוכית או פלסטיק, 60 מ"ל מומלץ</td></tr><tr><td>מסננת בדיקה</td><td>Advantech</td><td>120SS12F</td><td>מגש זחלים בגודל רשת 125 מיקרון</td></tr><tr><td></td><td>BioQuip</td><td>5524</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ</td><td></td><td></td><td></td>סטריאו</tr> לבן <tr><td>בקבוקוני מעטפת זכוכית</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>0333926B</td><td>טפטפת פלסטיק בגודל 1 דראם</td></tr><tr><td>Thermo</td><td>Scientific</td><td>1371110</td><td>30 עד 35 טיפות/מ"ל</td></tr><tr><td>מלקחיים עדינים</td><td>BioQuip</td><td>4524</td><td>#5</td></tr><tr><td>צלחת פטרי</td><td>קרולינה</td><td>741158</td><td>זכוכית או פלסטיק</td></tr><tr><td>צלחת מרובת בארות</td><td>Thermo Scientific</td><td>144530</td><td>זכוכית או פלסטיק</td></tr><tr><td>זכוכית מיקרו-שקופיות</td><td>תרמו 3010002 מדעי</td><td></td><td>בגודל 3 x 1 אינץ'</td></tr><tr><td>החלקות כיסוי זכוכית</td><td>Thermo Scientific</td><td>12-519-21G</td> מדיום הרכבה <td>Euparal עגול או מרובע</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>BioQuip</td><td>6372B</td><td></td></tr><tr><td>עט פיגמה</td><td>BioQuip</td><td>1154F</td><td>בדיקה שחורה</td></tr><tr><td></td><td>BioQuip</td><td>4751</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark מקצועי ומסחרי;</td><td>ברקוד 34120</td><td></td></tr></tbody></table>

שימוש בchironomidae (כפולי כנף) גלמי exuviae כמהיר bioassessment פרוטוקול לגופי מים צפים-שטח

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

פרוטוקולי bioassessment מהירים באמצעות מכלולי macroinvertebrate benthic שימשו בהצלחה על מנת להעריך את השפעות אדם על איכות מים. למרבה הצער, שיטות מסורתיות benthic זחל דגימה, כגון הטבילה-נטו, יכולות להיות זמן רב ויקר. פרוטוקול חלופי כרוך אוסף של exuviae Chironomidae צפה משטח גלמים (SFPE). Chironomidae היא משפחה עשיר במינים של זבובים (כפולי כנף) שלבים שבשלה מתרחשים בדרך כלל בבתי גידול מימיים. chironomids המבוגר לצאת מהמים, משאיר את עורות גלמים, או exuviae, צף על פני המים. Exuviae לעתים קרובות מצטבר לאורך גדות או מאחורי חסימות על ידי פעולה של זרם הרוח או מים, שבו הם יכולים להיות שנאספו כדי להעריך גיוון ועושר chironomid. Chironomids יכול לשמש כמדדים ביולוגיים חשובים, שכן כמה מינים הם יותר סובלניים לזיהום יותר מאחרים. לכן, הרכב השפע ומינים היחסי של SFPE נאסף לשקףשינויים באיכות מים. כאן, שיטות הקשורות לאוסף שדה, עיבוד מעבדה, שקופיות הרכבה, וזיהוי של SFPE chironomid מתוארות בפירוט. יתרונות של שיטת SFPE כוללים הפרעה מינימאלית באזור דגימה, איסוף דגימה יעיל וחסכוני ועיבוד מעבדה, קלות זיהוי, תחולה כמעט בכל סביבות מימיות, ומידת פוטנציאל ליותר רגישה ללחץ מערכת אקולוגית. מגבלות כוללות חוסר היכולת לקבוע שימוש microhabitat זחל וחוסר יכולת לזהות exuviae גלמים למינים אם הם לא היו קשורים עם זכרים בוגרים.

איור 1 מדגים את מחזור החיים chironomid; שלבים בוגרים (ביצה, זחל, גולם) בדרך כלל מתקיימים ב, או קשור קשר הדוק עם, סביבה מימית. עם השלמת שלב החיים הזחל, הזחל בונה מקלט דמוי צינור ומייחס את עצמו עם הפרשות משי למצע שמסביב והתגלמות מתרחשת. ברגע מבוגר הפיתוח התבגר, הגולם משחרר את עצמו ושוחה אל פני השטח של המים שבו המבוגרים יכולים לצאת מexuviae גלמים. Exuviae מתמלא אוויר, ומכוח שכבת שעווה חיצונית של הציפורן, הוא נשאר צף על פני המים עד חיידקים מתחילים לפרק את שכבת השעווה....

פרוטוקולי הערכה ביולוגית מהירה המשתמשים במקרו-חסרי חוליות בנטיים משמשים לעתים קרובות לניטור והערכת איכות המים. פרוטוקול יעיל כולל אוספים של Chironomidae exuviae גולם צף על פני השטח (SFPE). כאן מתוארות טכניקות לאיסוף שדה, עיבוד מעבדה, הרכבת שקופיות וזיהוי של Chironomidae SFPE.

שימוש בChironomidae (כפולי כנף) גלמי Exuviae כמהיר Bioassessment פרוטוקול לגופי מים צפים-שטח

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

המטרה הכללית של נוהל זה היא לתאר את הטכניקות לאיסוף ועיבוד של דגימות של chiro nominee, surface floating pupil ex לצורך הערכת איכות המים. דבר זה מושג תחילה על ידי איסוף דגימות שטח של Chiron pupil ex מסביבות מימיות. בשלב השני, נבחרת תת-דגימה של 300 פרטים מכל דגימת שטח, והדגימות מופרדות לקבוצות מורפולוגיות נפרדות.בשלב האחרון, נציגים מרובים מכל קבוצה מורכבים על עלויות זכוכית למיקרוסקופ. לבסוף, הדגימות מזוהות לרמת הסוג או המין כדי להעריך את תנאי איכות המים. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון דגימה מסורתית של מקרו-בנימיים בנטיים, הוא שאיסוף ועיבוד הדגימות הם יעילים, חסכוניים וישימים כמעט בכל הסביבות המימיות.השימוש בטכניקה זו מספק מידע בעל ערך למחקרי ניטור ביולוגי ויכול להעניק תובנות לגבי האופן שבו אתרים משתנים לאורך זמן עקב הפרעות, אירועי זיהום או שינויי אקלים. למרות שאנו מתמקדים באופן שבו ניתן להשתמש בטכניקה זו בבית גידול של נחל, ניתן ליישמה בקלות גם על מערכות מימיות אחרות כגון נהרות, אגמים, בריכות, נחלים, מפגשי נהר עם ים או בריכות סלע. לפני היציאה לשטח, הצמידו תווית תאריך ומיקום אחת בחלק הפנימי, ותווית אחת בחלק החיצוני של כל צנצנת דגימה עבור כל דגימה שיש לאסוף.לאחר מכן, עבור כל דגימה, כאשר מגש זחלים ביד אחת ונפה ביד השנייה, טבל את מגש הזחלים למים שבהם מצטברת הפרשת האישון, עד שהפרשת האישון והפסולת נכנסות למגש הזחלים או לדגימה דרך הנפה. לאחר 10 דקות של איסוף, השתמש בבקבוק מלא במים שנלקחו מהדגימה כדי לרכז את כל הפסולת באזור אחד של הנפה. לאחר מכן, באמצעות פינצטה וזרם של אתנול, העבר בזהירות את הפרשת האישון לצנצנת הדגימה המתאימה המסומנת מראש, ומלא את הצנצנת באתנול.כדי להתחיל בבחירת הדגימות, הניחו תווית תאריך ומיקום מתאימה בתוך מבחנת Dr Vial אחת עבור כל דגימה של הפרשת אישון ומלאו את המבחנה עד לשלושה רבעים באתנול. לאחר מכן, הסירו את המכסה מצנצנת הדגימה המתאימה ובדקו אם קיימות הפרשות אישון הדבקות למכסה. בעזרת בקבוק התזה של אתנול, שטפו בעדינות את התוכן מהמכסה אל תוך צלחת פטרי.לאחר מכן, הסירו את התווית מדופן צנצנת הדגימה. שטפו בעדינות את תכולת התווית אל תוך פטרי dish, והניחו את התווית בצד. לאחר מכן, העבירו את תכולת צנצנת הדגימה לתבנית זחלים לבנה ושטפו את הצנצנת באתנול כדי להבטיח שלא נותרו בתוכה הפרשות מהאישון.העבירו את שאריות הפרשת האישון והאתנול מתוך תבנית הזחלים אל צלחת פטרי. ודאו שהדגימה מכוסה באתנול. לאחר מכן, הניחו את צלחת הפטרי תחת מיקרוסקופ סטריאו וסרקו את הצלחת באופן שיטתי כדי לאתר את האורגניזמים.בשלב הבא, השתמשו בפינצטה כדי להעביר את הפרשת האישון מהצלחת אל המבחנה המתאימה. השתדלו להימנע מבחירת הפרשות אישון שבורות או יבשות כדי למנוע בעיות זיהוי מאוחר יותר. לאחר שכל הפרשות האישון הנראות לעין הועברו, סובבו וסרקו את הצלחת שלוש פעמים נוספות כדי למצוא דגימות נוספות, כולל כאלו שעלולות להיות דבוקות לדפנות הצלחת.לאחר שבחרת 300 פופיליות, החזר את השאריות מכלית הפטרי למגש הלרוואות ושטוף את כלית הפטרי באתנול. לאחר מכן, העבר את השאריות ממגש הלרוואות לצנצנת דגימה ריקה. הוסף לצנצנת תווית עם התאריך והמיקום, וסגור את המכסה על הצנצנת לצורך מיון הדגימות.שפוך את תמצית האישונים מהבקבוק המסומן לתוך צלחת פטרי הממולאת בכמות אתנול המספיקה לכיסוי מלא של הדגימות. לאחר מכן, תחת מיקרוסקופ סטריאו, השתמש במאפיינים המורפולוגיים החיצוניים של ה-Chiron Pub ex כדי להפריד את הדגימות למורפויות, והעבר את המורפויות השונות לבקבוקים מסומנים בנפרד. המלא את הבקבוקנים עד לשלושת רבעי גובהם באתנול. לדוגמה, כאשר מסווגים לפי ה-Celi thax, השתמש בהבדלים בנוכחות, בגודל, בצורה ובצבע של קרן החזה כדי להבחין בין הדגימות.אם הסיווג מתבצע לפי הבטן, השתמשו בקוצים, בשערות ובמ spurs של מקטעי הבטן והאונה האנלית לצורך הפרדה מורפולוגית. לאחר המיון, מלאו באחת מבבובותיה של פלטה רב-בבובותית (multi well plate) עבור כל טקסון מורפולוגי 95% ethanol, והניחו נציגים מרובים של כל טקסון מורפולוגי בבבובות נפרדות בפלטה למשך 10 דקות לפחות כדי לאפשר ייבוש מספיק. לאחר מכן, בזמן שהדגימות מתייבשות, סמנו שקופיות עם פרטי האיסוף מהאתר והמידע הזיהו במטרה להכין את הדגימות.הדביקו תבנית של זכוכית כיסוי לבמה של המיקרוסקופ והניחו זכוכית כיסוי מעל לתבנית זו. לאחר מכן, פזרו טיפה של URL על הזכוכית כך שתהיה בקירוב בגודל של כיסוי זכוכית, והשתמשו בפינצטה כדי להקיש בעדינות נציג מהאקסון המורפי הראשון על ניגב מעבדה להסרת עודפי אתנול. כעת, הטמיעו את הדגימה ב-URL והשתמשו בפינצטה בעלת קצוות דקים ובמחט דיסקציה כדי להפריד את ה-sepha thax מהבטן.ההיבט המאתגר ביותר בפרוצדורה זו הוא פיתוח המיומנות הידנית הנדרשת להפרדת ה-cephalon thax מהבטן במהלך הרכבת הפיתוח על השקופית. כדי להבטיח הצלחה בדיסקציה, השתמשו בפינצטה בעלת חוד דק או במוטות דיסקציה כדי להפריד את ה-exe בין ה-cephalic thax למקטע הבטני הראשון. כפי שהודגם, פחלו את ה-cephalic thax לאורך ה-esal suture.לאחר מכן פתחו את בית החזה הראשוני (cephalic thorax) כך ששולי התפר יהיו בצדדים מנוגדים, וכיוונו אותו כך שהצד הוונטרלי (ventral) פונה כלפי מעלה. מקמו את הבטן כאשר הצד הדורסלי (dorsal) פונה כלפי מעלה, מיד מתחת לבית החזה הראשוני. לאחר מכן, החזיקו זכוכית כיסוי בזווית כך שקצה אחד יגע בעריסה, והורידו אותה באיטיות כדי לצמצם את היווצרות בועות האוויר.לבסוף, לחצו קלות על זכוכית הכיסוי כדי לשטח את הדגימה והשתמשו במיקרוסקופ אור כדי לקבוע את הסוג של הדגימה המורכבת על השקופית. בגרפים אלו מוצגות עקומות הצטברות טקסונומיות עבור דגימות pupil ex שנאספו מ-16 אגמים עירוניים במינסוטה, כדי לקבוע את מספר המינים באופן כללי בתוך כל אגם. כל קו נתונים מייצג את אחד האגמים, וכל נקודת נתונים מייצגת דגימה חודשית שנאספה מאפריל עד אוקטובר 2005, המדגימה כי איסוף של ארבע דגימות לכל אגם חשף את רוב קהילת ה-Chiron וזיהה וריאציות עונתיות חשובות בתוך האגמים. ניתן להשתמש במחקרי ניטור ארוכי טווח של chirons כדי להעריך שינויי אקלים באגמים ברחבי מינסוטה, שכן שינויים במשתנים סביבתיים כגון עומק האגם וריכוז הפספורס יכולים להשפיע על סך המינים שזוהו לאורך גרדיאנט של כימיות אגמים.ואכן, כפי שמוצג בגרף זה, המספר המצטבר של המינים שנפגשו עולה ככל שיחס ריכוז הפוספור הממוצע לעומק הממוצע עולה. השלב הקריטי ביותר לאיסוף מוצלח של הפרשות אישונים הוא איתור אזורים של הצטברות גבוהה של הפרשות בתוך אזור המחקר. בעת תחילת הדגימות במעבדה, חשוב לסרוק את תכולת צלחת הפטרי באיטיות, שכן חלק מהדגימות עשויות להיות בעלות פיגמנטציה קלה ולהיצמד לדפנות הצלחת.לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה לגבי אופן האיסוף והעיבוד של דגימות פלנקטון צף מהשכבה העליונה של המים עבור פרויקטים שמטרתם ניטור והערכה של איכות המים.

use-chironomidae-diptera-surface-floating-pupal-exuviae-as-rapid

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

בסרטון זה, אנו מתארים את בדיקת מגע הזחל כדי להעריך את הרעילות של אנטגוניסט קולטן דופמין amitriptyline על זחלי השלב השלישי instar של יתושים, וקטורים ידועים של כמה מחלות זיהומיות בבני אדם. הערכת תמותת הזחלים בעת הדגירה עם ריכוזי אמיטריפטילין שונים על פני מרווחי זמן שונים מסייעת לקבוע את ריכוזו הקטלני 50.

בדיקת מגע זחלים: הליך להערכת תמותת זחלי יתושים בעקבות מגע ישיר עם תרכובת זחלי בדיקה

אנו מציגים את VacuSIP, שיטה פשוטה, לא פולשנית ואמינה לדגימה נקודתית נקייה ומדויקת של מים. המערכת פותחה והוערכה לאיסוף בו-זמני של המים הנשאפים והנשפים על ידי מזיני תרחיף בנתיים באתרם, כדי למדוד בצורה נקייה הסרה והפרשה של חלקיקים ותרכובות מומסות.

VacuSIP, שיטת INEX משופרת<em&gt; באתרו</em&gt; מדידה של חלקיקים מומס תרכובות מעובד על ידי האכלת השעית Active

פרוטוקול זה מתאר את השימוש sump מטליות וניתוח בוצה של דג זברה מערכות, מה שמוביל גילוי מוגברת בהשוואה לשימוש הבלעדי של זקיפים לזהות פתוגנים כגון Aeromonas hydrophila, Mycobacterium spp.  Pseudocapillaria tomentosa. מערכת לפקח tomentosa פ ביצים בהסגר גם מוצע.

הקרנת איכות הסביבה של Aeromonas hydrophila, Mycobacterium spp. Pseudocapillaria tomentosa במערכות דג זברה

מאמר זה מסכם את תכונות התכנון ואת האפקטיביות של מערכות הטיפול המטפלות במי גשמים עירוניים ובזרמת השקיה כדי להסיר חומרי הדברה ומזהמים אחרים הקשורים לרעילות מימית.

מערכות טיפול צמחי להסרת מזהמים המשויכים לרעלת פני המים בחקלאות ובנוף העירוני

היכולת לזהות במדויק התמלילים או חלבונים ברקמות דרוזופילה הוא קריטי עבור הלומדים שלהם שפע ולוקליזציה הקשורות לתהליך הפיתוח. הנה התיאור של תהליך פשוט לנתח כנפיים הגולמי. אלה כנפיים יכול לשמש כדוגמאות מספר טכניקות (אימונוהיסטוכימיה, PCR assay, וכו ').

שיטה מהירה ויעילה לנתח הגולמי כנפי דרוזופילה מתאים Immunodetections או מבחני ה-PCR

הנפוץ ביותר ניתוח תוכן הבטן של macroinvertebrates הם חזותיים. הדורשים ידע אינטנסיבי ונעשית מורפולוגי של אורגניזמים טרף, הם מתגעגעים טרף גוף רך, בשל comminution חזקה של טרף, הם כמעט בלתי אפשרית עבור אורגניזמים מסוימים, כולל amphipods. אנו מספקים נתונים היסטוריים, רומן גישות גנטיות עבור macroinvertebrate טרף זיהוי בתזונה של amphipods.

פרוטוקול המעבדה הגנטית ניתוחים תוכן הבטן של הימית Macroinvertebrates באמצעות קבוצה ספציפית rDNA תחל

בחיי עיר bioindications מאפשרות קביעת ההתאמה של סביבת מאסל בסכנת הכחדה מינים. אנו מתארים שתי שיטות בהתבסס על החשיפה לנוער של צדפות פנינים מים מתוקים בתוך כלובים אל נהר oligotrophic בתי גידול. שתי השיטות מיושמות משתנים עבור מים פתוחים וסביבות מים hyporheic.

Bioindication בדיקות של התאמת הסביבה זרם עבור צעירים מים מתוקים פנינה מולים בשיטות בחשיפה באתרו

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול לחקור את ההעדפה להתגלמות של הזחלים בוגרים של Ectropis grisescens בתגובה בקרקע גורמים (למשל, סוג המצע ותוכן לחות) באמצעות בחירה bioassays. אנו מציגים גם פרוטוקול של bioassays לא-הבחירה כדי לקבוע את הגורמים המשפיעים על ההתנהגויות להתגלמות, שאירים של א grisescens.

הבחירה ו- Bioassays לא-הבחירה ללמוד את העדפה להתגלמות והצלחה הופעתה של Ectropis grisescens

פרוטוקול זה מציג שיטה להערכת קצב ההאכלה של הסרטן משעמם העץ, לימנוריה, על ידי מדידת ייצור כדורי צואה. שיטה זו מיועדת לשימוש במעבדות שאינן מומחיות ויש לה פוטנציאל להשתלב בפרוטוקולי בדיקה סטנדרטיים, כדי להעריך עמידות עץ משופרת בתנאים ימיים.

בדיקה מהירה של עמידות של עץ להתכלות על ידי סרטנים מעץ ימי משעמם

המאמר מבוסס על יצירת פרוטוקול מותאם לסריקה, זיהוי, מיון וזיהוי אובייקטים דיגיטליים המתאימים למקרו-חסרי חוליות של נהרות בנטיים באמצעות הליך הדמיה חצי אוטומטי. הליך זה מאפשר רכישה של התפלגויות הגודל האינדיבידואליות ומדדי הגודל של קהילת מקרו-חסרי חוליות תוך כשעה.

עיבוד תמונה אוטומטי לקביעת מבנה גודל הקהילה של מקרו-חסרי חוליות בנהרות

למדו טכניקות לאיסוף ועיבוד גלמי עור Chironomidae צפים-שטח להערכת איכות מים. שיטה זו יעילה, כלכלית ומתאימה לכמעט כל סביבה מימית לניטור אקולוגי.

שימוש בChironomidae (כפולי כנף) גלמי Exuviae כמהיר Bioassessment פרוטוקול לגופי מים צפים-שטח

גלה סרטונים נוספים