בדיקה לריח אפליה והרגלה בעכברים

כתב יד זה מתאר פרוטוקול לבחינת מערכת הריח של מכרסמים. מבחן ההתרגלות/אי-השבתה של חוש הריח יאפשר לחוקרים לקבוע אם עכבר מתרגל לריח המוצג שוב ושוב והאם העכבר מפגין חוסר התרגלות כאשר מוצג לו ריח חדש.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לספק שיטה לחקור את יכולתם של עכברים לזהות, להתרגל ולהתרגל לריחות חדשים וחברתיים כאחד. זה מושג על ידי הכנת סדרה של ריחות חדשים שאינם חברתיים, כגון תמציות על בסיס פירות ואגוזים וריחות חברתיים, כגון מצעי כלובים. השלב השני הוא להציג את הריחות לעכברים, החל משלושה ריחות חדשים ואחריהם שני ריחות חברתיים שונים.

במהלך כל ניסוי, התנהגות הרחרוח של העכברים מוערכת ומתועדת בסופו של דבר, מבחן הריח, ההבחנה והמגורים לחוש הריח משמש כדי להראות שבעל החיים יכול להגיב לריח חדש, יכול להתרגל לריח, ואז להדגים את היכולת להתרגל לריח כאשר מוצג לו ריח חדש או ריח חברתי אחר. השיטה הזו יכולה לשמש כדי לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח, כמו למשל אם החיה לא מגיבה לחיה חדשה או לגירוי חדש מאחר שהחיה הזו לא מסוגלת לזהות את הריח.

התחל להכין ריחות לא חברתיים על ידי הנחת כפפות ומילוי שלושה צינורות חרוטיים של 15 מיליליטר ב -10 מיליליטר מים. כל פיפטה מכניסה 100 מיקרוליטר תמצית שקדים לתוך הצינור הראשון, 100 מיקרוליטר תמצית בננה לתוך הצינור השני, ומשאירה את הצינור השלישי עם מים בלבד לשימוש כבקרה. לאחר מכן, השיגו שני כלובים שונים של עכברים שלא נוקו במשך שלושה ימים לפחות ומכילים מספר שווה של עכברים מאותו המין כמו הנבדקים.

השתמש במקלון צמר גפן כדי לנגב את תחתית הכלוב המלוכלך בצורה זיגזג. יש לנער את כל חומר המצעים המצורף מהספוגית ולהניח אותו עם הצד כלפי מטה לתוך צנצנת זכוכית גדולה עם מכסה הדוק. חזור על תהליך זה עד לקבלת שלוש ספוגיות משני הכלובים עבור כל עכבר שייבדק.

אחסן את הצנצנות בטמפרטורת החדר והשתמש במקלונים תוך ארבע עד שש שעות. על מנת לשמור על ריח חזק ועקבי, העבירו את כלובי דגימות הריח לחדר מחוץ לאזור הבדיקה ביום הניסוי. אין ללבוש ניחוחות או קרמים ריחניים ולהימנע מאכילת כל דבר בעל ריח חזק.

הכניסו את הריחות החברתיים והלא חברתיים המוכנים לחדר הבדיקה, יחד עם סרט מעבדה של צמר גפן טרי, בקבוק פסולת עם מכסה ושני טיימרים מיד לפני הליך הבדיקה. לבש כפפות נקיות ושקול את העכבר הראשון. לאחר מכן העבירו את העכבר לכלוב נקי עם מכסה תיל וללא בקבוק מים.

הנח את הכלוב באזור ללא ריחות או רעשים חריגים ואפשר לעכבר להתאקלם בכלוב החדש למשך 45 דקות. בתום תקופת ההתאקלמות, העבירו את העכבר בכלוב שלו לאזור הבדיקה והתחילו להתאקלם בעכבר נוסף. הנח את העכבר שהתאקלם בכלוב שלו על השיש בגובה נוח לצפייה בישיבה.

לאחר מכן, הכינו את אחד הריחות בסדר המתואר בפרוטוקול הטקסט עבור הריחות הלא חברתיים ב-100 מיקרוליטר של הריח על קצה ספוגית טרייה. מיד לפני השימוש. עבור הריחות החברתיים, הסר והשתמש באחת המקלונים שהוכנו בעבר מהצנצנות שלהם.

הרם את החלק העליון של החוט של הכלוב והכנס את הקצה הלא מבושם של צמר גפן לתוך פתח בקבוק המים מהצד התחתון של מכסה החוט. הימנע מלגעת בקצה הכותנה לכל דבר, כולל אצבעות כדי למנוע זיהום ריח. כאשר כסנטימטר אחד של ספוגית הריח נשאר בכלוב, הצמד את קצה העץ של הספוגית לצד התחתון של הכלוב באמצעות סרט מעבדה.

לאחר מכן הורד בעדינות את המכסה בחזרה לכלוב. כדי למנוע הפרעה, עכבר הבדיקה התחל מיד בתזמון של שתי דקות. שימוש בטיימר הראשון עם שעון העצר השני מתעד את הזמן המצטבר שעכבר הבדיקה מבלה ברחרוח הריח.

רחרוח פעיל מוגדר כאשר העכבר מכוון את אפו לעבר צמר גפן בטווח של שני סנטימטרים מהספוגית. בסיום הניסוי, הרם את מכסה החוט והסר בזהירות את צמר הגפן על ידי משיכתו כלפי מטה דרך הצד התחתון של המכסה. כדי להימנע ממגע של המכסה עם הקצה המכיל ריח של הספוגית, אטמו את המקלון המשומש בבקבוק הפסולת תוך מתן אפשרות לעכבר לנוח במשך דקה אחת, הכינו את ספוגית התורם הבאה.

הציגו כל ריח שלוש פעמים ברציפות למשך שתי דקות. בסיום כל הניסויים, רוקנו את בקבוק הפסולת המכיל את צמר הגפן המשומש בפח אשפה מחוץ לחדר הבדיקה והחזירו את העכבר לכלוב הביתי שלו. כל אחד מהריחות הוצג לראשונה לעכברים עם רקע C 57 שחור 6 J עם מצגות עוקבות של כל ריח.

העכברים בילו פחות זמן בחקירת הריח המרמז על מגורים. ניתן לראות את אותו דפוס של מגורים ואפליה עם הריחות החברתיים כמו עם הריחות הלא-חברתיים. אולם העכברים בילו זמן רב יותר בחקירת הריחות החברתיים.

כאשר אותם ריחות לא חברתיים הוצגו לזן רקע מעורב FVB זכר, נראה דפוס מגורים דומה. כל ריח חדש שהוצג נתקל בעלייה בהרחה פעילה, שפחתה עם כל הצגה של אותו ריח. עם זאת, עכברי FVB הראו דפוס שונה עם הריחות החברתיים מכיוון שלא הייתה ירידה משמעותית בזמן הרחרוח עם חשיפה חוזרת.

הנתונים מצביעים על כך שהעכברים אינם רגילים להצגות חוזרות ונשנות של שני הריחות החברתיים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתם אמורים להבין היטב כיצד לבחון את יכולתו של עכבר לזהות ריח חדש או חברתי שהתרגל לריח זה, ולאחר מכן להתרגל לריח זה כאשר מוצג ריח חדש.