Name: הפגנה של דגם פצע עור העכברוש איסכמי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-01T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 35 s
Description: למד ליצור מודל פצע איסכמי בעכברושים באמצעות כלי ביופסיה סטרילי ורפידת סיליקון. שיטה זו מאפשרת חקר מנגנוני ריפוי פצעים כרוניים ומספקת מודל שחזור לחקר עתידי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות לתמיכה במימון מאוניברסיטת דרום פלורידה, המחלקה לכירורגיה (מאק וו, MD, PhD).

הערה: אישור לכל נהלים בבעלי החיים המוצגים להלן התקבל מאוניברסיטת הדרום פלורידה הוועדה של טיפול בבעלי חיים (IACUC) ולציית לכל הדרישות של צער בעלי החיים החוק והמדריך לטיפול ושימוש בחי מעבדה. 1. הכנת גיליונות סיליקון ומכשירי ניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רצועות חתוכות (10.5 סנטימטרים x 3.0 סנטימטרים) של אי-חיזקו 0.01 עובי, יריעות סיליקון כיתה רפואית ולעקר באמצעות החיטוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנקות ולחטא מכשירי ניתוח (מספריים, מלקחיים ווילאות או מגבות כדי ליצור שדה סטרילי במהלך ניתוח) מתאימים. </li></ol> 2. בעלי חיים ניסויי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בזכר בוגר או חולדות נקבות במשקל בטווח 250-350 g מתקבל ממגדל מסחרי. אם חולדות בגילים מנוצלות, הם צריכים להיות ≥350 g כדי להבטיח את הישרדות טובה יותר לאחר ניתוח. לפני תחילתו של כל ניסויים להסתגל כל בעלי החיים לפחות7 ימים בתנאים סטנדרטיים של מחזור אור-חושך 12 שעות עם כרצונך מזון ומים. </li></ol> 3. הרדמה, שיכוך כאבים לפני ניתוח והכנת Operative <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרום הרדמה כללית על ידי שימוש בisoflurane 3% -4% באמצעות תא אינדוקציה ולשמור (באמצעות שימוש בחרטום) בשעה 1% -2% עם O 2 במהלך הכנת עור וניתוחים. לפקח על עומק ההרדמה על ידי התבוננות בשיעור ועומק הנשימה, קמצוץ interdigital או רפלקס מצמוץ palpebral. הערה: בשלב זה, משחה וטרינר יכולה להיות ממוקמת על העיניים כדי למנוע יובש ואילו בעלי החיים נמצאים תחת הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלט רחוק מיקום כירורגים באזור סטרילי, למקם את העכברוש במצב שכיבה ולגלח את dorsum עם קוצץ מבסיס הצוואר ומטה כ -11 סנטימטרים. סטנסיל עם סמן קבוע, את קווי המתאר ל3.0 סנטימטרים x 10.5 סנטימטרים הדש (ראו איור 1 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז את העכבר לsurgica נקי, המיועדאזור l המצויד בכרית חימום אושרה ווילאות כירורגי סטרילי או מגבות. להזריק 5 מ&quot;ג / קילוגרם Ketoprofen תת עורי לפני החתכים הניתוחיים הראשונים לטיפול בכאב. נוזלים נוספים (מלוח) יכולים להינתן (עד 5 סמ&quot;ק) תת עורי במידת הצורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את העור עוד יותר על ידי השטיפה ראשונה עם 70% אלכוהול איזופרופיל והשני עם chlorhexidine 0.2%, ולאחר מכן להחיל סדינים מעוקרים כדי ליצור שדה סטרילי. גם 10% povidone- יוד (פולידין) ניתן להשתמש. הערה: אנטיביוטיקה (אמפיצילין ב 15 מ&quot;ג / קילוגרם) יכולה להיות מנוהלת תת עורי, אבל אם טכניקות ספטית טובות משמשות היא אינה נדרשת. </li></ol> 4. יצירת פצעי excisional וBipedicled דש <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בכלי סטרילי, חד פעמי 6 מ&quot;מ ביופסיה, ליצור שני פצעים &quot;איסכמי&quot; עגולים במרכז אזור הדש המיועד (איור 1). העומק של הפצע צריך להיות עד ל( לא דרך) fascia הבסיסי של קארנו מִרפָּדשריר sus (הבלעה 1B איור). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים להרים את העור באמצע המתווה הפצע שנוצרה על ידי הביופסיה ולאחר מכן להשתמש במספרי איריס (עם טיפים מעוגלים) שיחתכו את החתיכה העגולה של רקמה (כולל שריר carnosus מִרפָּד). התוצאה תהיה בעובי מלא פצע עם fascia כבסיס של הפצע. הערה: הרקמה נכרתה (תקעי פצע) ניתן להצמיד קפואה בחנקן נוזלי או קבוע ב 10% O נאגר פורמלין / N לעיבוד מאוחר יותר כשליטה, עור רגיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צור דש bipedicled על ידי ביצוע חתכים עם אזמל סטרילי בכל צד של הפצעים איסכמיים לאורך הקווים מצוירים מראש (איור 1 ג), כי הם 10.5 סנטימטר אורך ו -3.0 סנטימטר זה מזה. עומק החתכים צריך להיות עד לשרירי paraspinous. בעזרת המספריים איריס, להפריד fascia carnosus מִרפָּד משרירי paraspinous, להיות זהיר, כדי לשמור על fascia שלם בשם &quot;הבסיס&quot; של האגרופים מ&quot;מ 6 (Figure 1D). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח 1 גיליון סיליקון מראש לחתוך סטרילית ולמקם אותו בין fascia carnosus מִרפָּד ושרירי paraspinous (איור 1E) להבטיח שהגיליון לא יתקפל או לקפל. שימוש בתפרים שחורים, שאינם נספגים (גודל 4.0) לסגור את שני החתכים על ידי עיגון גיליון סיליקון לעור עם לפחות 8 תפרים נקטעו בכל צד, לאורכו של הדש (איור 1F ו1G). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בכלי סטרילי, חד פעמי ביופסיה, ליצור שני פצעים פנימיים שליטה &quot;אינם איסכמי&quot; (עד fascia הקדמי של שריר carnosus מִרפָּד) 1 סנטימטר לרוחב הפצעים איסכמיים בכל צד של הדש (איור 1G). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח שליט מתחת לפצעים ולקחת את תמונות דיגיטליות למטרות מדידת פצע (ראה איור 3 א). בשלב זה, את זרימת דם (זלוף) יכולה להיות במעקב על ידי שימוש בליזר דופלר או מניפולציות אחרות (מיקום תרופתי מקומי) שבוצעו.</li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל דבק נוזלי אושר שתי גולגולת וזנב לפצעים וסרט שקוף הלבשה כדי לשמור על סביבת הפצע לח ונקי (סטרילי). הלבשה נוספת עשויה להיות ממוקמת בסוף הזנב של הדש כדי למנוע את החיה מהסרת תפרי הזנב ביותר. </li></ol> נהלים 5. לאחר ניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח בעלי חיים בכלובים (שוכנו בנפרד) מצוידים במתקני האכלה רדודים כדי למנוע מהאתר כירורגית מתחכך המזין. לא צריכים להשאיר בעלי חיים ללא השגחה או חזרו לחברה של בעלי חיים אחרים, עד שהם יחזרו להכרה מספיק כדי לשמור על כיבה sternal ולהציג תנועה תכליתית. מחצלות חימום צריכה להיות ממוקמות מתחת מחצית מהכלוב עד 2 ימים במהלך התאוששות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטיפול בכאב לאחר הניתוח, לנהל Ketoprofen (5 מ&quot;ג / קילוגרם) תת עורי לבעלי חיים בוקר ו1x ליום הבא שללאחר ניתוח עד 48 שעות. גם לבעלי חיים צריכים להיות במעקב יומי לסימנים מתמשכים של כאב, ירידה במשקל או זיהומים באתר ניתוח. </li></ol> 6. מדידות פצע לאחר שינויים וגימור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדדו פצעים איסכמיים ולא-איסכמי לעתים קרובות בהרדמה כללית באמצעות isoflurane ב -3% -4% באמצעות תא אינדוקציה ומתוחזק (דרך חרטום) בשעה 1% -2% עם O 2 כמו בשלב 3.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את האיפור בעדינות כדי לא למשוך את הדבק מהעור. בשלב זה תמונות דיגיטליות נוספות נלקחות למדידות פצע, טיפול מקומי מוחל מחדש, הדמיה דופלר הלייזר (LDI) או מניפולציות אחרות המבוצעות בהתאם לצרכיה של החוקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל דבק והלבשה נקייה ולאפשר לבעלי החיים להתאושש כמו בשלב 5.1. </li></ol> 7. פצע איסוף והמתת חסד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסכמי קציר ופצעים שאינם איסכמי (בימי החוקר ימצאו לנכון) ואילו בעלי החיים הוא בהרדמה כללית באמצעות isoflurane ב -3% -4% באמצעות indתא uction ומתוחזק (דרך חרטום) בשעה 1% -2% עם O 2 כמו בשלב 3.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות אזמל, לבצע כריתה בצורת ריבוע סביב הפצע לכלול כמה רקמות בריאות סביב הפצע. הנח את הכריתה ל1.5 מיליליטר הצמד צינור כובע ולהצמיד הקפאה בחנקן נוזלי (חנות ב -80 ° C) לצורך הניתוח מולקולרי עתיד או לדגור ב 10% O נאגר פורמלין / N ב RT לעיבוד היסטולוגית. הערה: ניתן גם לחתוך חתכים בפצע במחצית לספק יותר דגימות לבדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הסרת רקמת פצע, להרדימו בשיטה שאושרה של CO 2 שאיפה. </li></ol>

<ol><li>Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+wound+repair%3A+Are+they+cutting+it%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+dermatology%22%5BJournal%5D)">Animal models of wound repair: Are they cutting it.</a> Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).</li>
<li>Dorsett-Martin, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+models+of+skin+wound+healing%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+repair+and+regeneration+%3A+official+publication+of+the+Wound+Healing+Society+%5Band%5D+the+European+Tissue+Repair+Society%22%5BJournal%5D)">Rat models of skin wound healing: a review.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).</li>
<li>Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+wound+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Dermatol+Res%22%5BJournal%5D)">Animal models for wound repair.</a> Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).</li>
<li>Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+for+use+in+wound+healing+research%3A+A+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue%29%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+and+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue).</a> Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).</li>
<li>Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+and+validation+of+an+ischemic+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+repair+and+regeneration+%3A+official+publication+of+the+Wound+Healing+Society+%5Band%5D+the+European+Tissue+Repair+Society%22%5BJournal%5D)">Optimization and validation of an ischemic wound model.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).</li>
<li>Loots, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+cellular+infiltrate+and+extracellular+matrix+of+chronic+diabetic+and+venous+ulcers+versus+acute+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+investigative+dermatology%22%5BJournal%5D)">Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds.</a> The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).</li>
<li>Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+collagen+metabolism+and+delayed+healing+in+a+novel+model+of+ischemic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds.</a> Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).</li>
<li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+mechanistic+validation+of+delayed+healing+rat+wounds+as+a+model+for+human+chronic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+and+Regeneration%22%5BJournal%5D)">Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds.</a> Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).</li>
<li>Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbaric+oxygen+attenuates+apoptosis+and+decreases+inflammation+in+an+ischemic+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+investigative+dermatology%22%5BJournal%5D)">Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model.</a> The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).</li>
<li>Zhang, Q., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbaric+oxygen+reduces+matrix+metalloproteinases+in+ischemic+wounds+through+a+redox-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+investigative+dermatology%22%5BJournal%5D)">Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism.</a> The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).</li>
<li>Moor, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consequences+of+age+on+ischemic+wound+healing+in+rats%3A+altered+antioxidant+activity+and+delayed+wound+closure%5BTitle%5D)+AND+%22Age+%28Dordrecht%2C+Netherlands%29%22%5BJournal%5D)">Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure.</a> Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).</li>
<li>Roy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+preclinical+model+of+chronic+ischemic+wound%29%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+genomics%22%5BJournal%5D)">Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound).</a> Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).</li>
<li>Biswas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+inducible+microRNA+210+attenuates+keratinocyte+proliferation+and+impairs+closure+in+a+murine+model+of+ischemic+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).</li>
<li>Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD109%2C+a+novel+TGF-beta+antagonist%2C+decreases+fibrotic+responses+in+a+hypoxic+wound+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model.</a> Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

<html> ריפוי פצעים בחולדות היה לעתים קרובות הנושא לוויכוח בשל יכולתם לרפא את הפצעים נגועים ושיעור גבוה של שונות interanimal 5. אחת מהמטרות המקוריות של המודל במהלך פיתוחו היה כדי להקטין וריאציה זו. שינויים ברוחב של הדש, צמצום מספר הפצעים במיקום ספציפי (התמקד בדש עם מיקום קרניו-הזנב עקבי) והכנסה של גיליון סיליקון השיג מטרה זו. ריפוי פצע על ידי התכווצות גם צומצם וריפוי על ידי epithelialization, כמו אצל בני אדם, היא התוצאה הנמדדת. התאמה של המודל לזן של עכברים שונה, כלומר...

פיתוח תרופות יעיל ותרופות ריפוי פצע אחרות דורשים מתאימים בדגמי vivo, למרות בעיות ידועות בתרגום ממצאים במודלים של בעלי חיים לטיפולים אנושיים 1. להלן תיאור של פרוטוקול מפורט לשימוש במודל עכברים של ריפוי עור איסכמי פצע לחקור מנגנונים שעוד יותר את ההבנה של ריפוי פצע פתולוגי. מיני החולדה, לעתים קרובות מועסק בשל הזמינות רחבה, גודלה והטבע הצייתן משמש לפצע לימודי ריפוי כפי שהוא גדול מספיק כדי לספק שטח עור מתאים לפציעת incisional וexcisional, הדמיה ורקמות אוסף 2. עם זאת יש לקחת בחשבון זהיר שהעור של עכברים ובני אדם הוא שונים מבחינה אנטומית, עם חולדות שהופנו לבעלי חיים רופפים עור כ. מאפיין מובהק זה מאפשר להתכווצות פצע, ולא epithelialization לתרום באופן משמעותי לסגירת העור של העכברים wounds 2. בנוסף, הנוכחות של שריר carnosus מִרפָּד תת-עורי בחולדות, תורמת לריפוי על ידי שתי היווצרות ההתכווצות וקולגן 3,4. הבחנות אנטומיים חשובות מאוד אלה נחשבו בפיתוח מודל פצע עור איסכמי חולדה ושינויים ספציפיים יושמו כדי להקטין התכווצות פצע ולהפחית את ההשפעה של השריר carnosus מִרפָּד 5. בכיבי רגל סוכרתיים, כיבים ברגלי ורידים, וכיבי לחץ, ריפוי מתעכב ופצעים אלה נחשבים כרוניים. הפצעים מתאפיינים בדלקת מופרזת, המונעת את הפצע מהתקדמות לשלבים הבאים של תיקון פצע 6. אחד הגורמים העיקריים בהתפתחות של פצע כרוני הוא איסכמיה המקומית רקמה (זרימת דם מופחתת) 5 תורמת לחוסר היכולת לנקות את הדלקת. בזמן שבמהלכו מודל זה היה מפותח ותקף (ב2003-4), לא היו מודלים של בעלי חיים סטנדרטיים שיכול לספק מספיק רקמה לבדיקת אינדוקציה של אנגיוגנזה במיטת הפצע, שלב מפתח בריפוי פצע נורמלי והמוטיבציה לפיתוח מודל זה 5. שאמרו, המודל שהוצג כאן הוא שינוי של מודל פצע איסכמי המתואר במקור על ידי שוורץ et al. 7 ולאחר מכן השתמש בצורה שונה על ידי et al חן. 8 במודל פצע איסכמי שונה, שינויים נעשו כדי לעקוף את המאפיינים אנטומיים שהוזכרו לעיל של העכברוש שיובילו לריפוי על ידי התכווצות ולא epithelialization: (1) שני פצעי excisional עובי מלאים נוצרים בתוך דש עור הגב וbipedicled שריר carnosus מִרפָּד מוסר מהפצע למיטה על ידי לנתח בדיוק מעל fascia השריר. (2) יש הדש עצמו ממדים צרים יותר, על מנת להבטיח שאספקת דם היא אקראית ופצעים הממוקמים בנקודת האמצע של tהוא הדש הוא איסכמי. (3) גיליון סיליקון מוחדר מתחת לדש, מניעת readherence וreperfusion של הדש מהרקמה בסיסית. התכווצות פצע מוגבלת (לא בוטל) על ידי עיגון או תפירת הדש לגיליון סיליקון 5. לאחרונה המודל נעשה שימוש במחקרים שנעו בין השפעות לחץ חמצן על פצע איסכמי ריפוי 9,10 לריפוי פצע איסכמי בצעיר לעומת חולדות בגילי 11 והוכיח להיות מודל אמין של איסכמיה רקמות הממושכת. הממדים של הדש bipedicled גם הותאמו לזני עכברוש שונים, כוללים ספראג Dawley (ארוך 11 סנטימטרים על ידי 2 סנטימטרים רוחב) וחולדות F344 (ארוך 10.5 סנטימטר על 3.0-3.5 סנטימטרים רוחב) ומינים אחרים, ובכלל זה חזירים 12 ועכברים 13,14. סרט הווידאו הזה מנצל את מתח החולדה טהור F344 בהפגנה של מודל פצע עור איסכמי. אישור לכל נהלים בבעלי החיים המוצגים להלן היה להשיגed מאוניברסיטת הדרום פלורידה הוועדה של טיפול בבעלי חיים (IACUC) ולציית לכל הדרישות של צער בעלי החיים החוק והמדריך לטיפול ושימוש בחי מעבדה.

<table><tbody><tr><td>יריעות בדרגה רפואית Sil-Tec</td><td>מוצרים טכניים בע"מ</td><td>500-3</td><td>לא מחוזק, עובי 0.01 אינץ '</td></tr><tr><td>מספריים מיני איריס, 8 ס"מ, מעוקל,</td><td>SS World Precision Instruments</td><td>#503671</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon תפרי ניילון Ethicon</td><td></td><td>1964G</td><td>שחור, גודל 4.0, PC-3 16&nbsp; מחטי מ"מ (3/8 מעגל)</td></tr><tr><td>לייזר דופלר הדמיה</td><td>מור מכשירים</td><td>moorLDI2-IR</td><td>צילום זרימת דם סטנדרטי: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>להורדה בחינם</td><td>http://rsb.info.nih.gov/ij/</td></tr> <tr><td>Mastisol</td><td>Henry Schein</td><td>Cat # 7289210</td><td>פישר סיינטיפיק NC9774929</td></tr><tr><td>Tegaderm</td><td>התמחויות רפואיות&nbsp;</td><td>3M1624W</td><td>פישר NC9922128 מדעי</td></tr></tbody></table>

הפגנה של דגם פצע עור העכברוש איסכמי

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

הנטייה לפצעים כרוניים בבני אדם עולה עם הזדקנות, תנאי מחלה כמו סוכרת ותפקוד לב וכלי דם פגום, ולחץ תמידי עקב חוסר תנועה. מודלים של בעלי החיים פותחו ניסיון שכדי לחקות את התנאים האלה לצורך קידום ההבנה של המורכבות של פצעים כרוניים שלנו. המודל המתואר כאן הוא מודל דש עור איסכמי חולדה המאפשר הפחתה ממושכת של זרימת דם וכתוצאה מכך פצעים שהפכו איסכמי ודומה פנוטיפ כרוני פצע (כלי דם מופחתים, דלקת מוגברת וסגירת פצעים מתעכבת). הוא מורכב מדש גב bipedicled עם 2 פצעים איסכמיים ממוקמים במרכז ו -2 פצעים אינם איסכמי לרוחב הדש כפקדים. בנוסף רומן למודל דש עור איסכמי זה הוא המיקום של גיליון סיליקון מתחת לדש שמתפקד כמחסום וסד למניעת revascularization ולהפחית התכווצות כלרפא את הפצעים. למרותדיון של שימוש בחולדות לריפוי פצע לימודים בשל ההבדלים אנטומיים ופיסיולוגיים שונים לגמרי שלהם בהשוואה לבני אדם (כלומר, הנוכחות של שריר carnosus מִרפָּד, תוחלת חיים קצרה, מספר הגדל של זקיקי שיער, וביכולתם לרפא את הפצעים נגועים) השינויים מועסקים במודל זה הופכים אותו לאלטרנטיבה יקרה לדגמי דש עור איסכמי שפותחו בעבר.

פרוטוקול מודל ריפוי עכברוש איסכמי פצע צריך לקחת כ 20 דקות לכל בעל חיים אם ביצע ביעילות. לפני היישום של הלבשת המודל אמור להופיע כפי שהוא מיוצג באיור 1G. זה יהיה חשוב כדי לוודא שהדש ופצעי bipedicled בי הם איסכמי. מתח חמצן תת עורי (PscO 2) ברמה של הפצעים כבר נמדד במהלך האימות של מודל זה 5 על ידי הצבת אלקטרודה polarographic ברקמה התת עורית בין שני פצעי איסכמי. 2 ערכי PscO היו בטווח ביקורתי איסכמי (20-40 מ&quot;מ כספית). מאז הפיתוח של מ...

החולדה, בשל הגודל, הזמינות, וההתנהגות לא הצייתנית שלה, נוצלה כמודל מחקר במשך שנים רבות. המטרה של פרוטוקול זה היא לנצל את החולדה כמודל ריפוי עור פצע איסכמי לספק תובנה חשובה הפתופיזיולוגיה של פצעים כרוניים.

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא ליצור מודל פצע איסכמי הניתן לשחזור. הדבר מושג תחילה באמצעות שימוש בכלי ביופסיה מסוג punch סטרילי ליצירת שני פצעים איסכמיים על ידי כריתה בתוך קו המתאר של השflap שסומן על גב החולדה. לאחר מכן, נוצר flap עם שני גבעולים (bi pedicled flap) על ידי ביצוע שני חתכים לאורך הקווים שסוממו מראש, לצדי שני הפצעים האיסכמיים.לאחר מכן מרימים את השflap עם שני גבעולים (bi pedicled flap) ומניחים גיליון סיליקון סטרילי בין הפסציה לשרירים כדי לתמוך בפצעים ולמנוע צמיחה חוזרת של כלי דם. לבסוף, שתי החתכים נסגרים ושני פצעי ביקורת לא-איסכמיים (non-ischemic control wounds) נוצרים לצדי קווי התפרים. לבסוף, נעשה שימוש בצילום דיגיטלי כדי להראות שינויים בגודל הפצע לאורך זמן.דופלר לייזר משמש להדגמת שינויים בזרימת הדם, ובסיום, רקמות מהפצע נגזרות לצורך היסטולוגיה ואנליזה מולקולרית. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון פלפ McFarland, הוא שהיא מהווה מודל הניתן לשחזור של איסכמיה מתמשכת עם פצעים פתוחים, אליהם ניתן להוסיף סוכנים טופיקליים, והם ניתנים למחקר הן באמצעות היסטולוגיה והן באמצעות אנליזה מולקולרית. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית.שלבי כריתת הפצע והנחת התפרים הם קשים למדי ללמידה. קל מדי ליצור פצעים עמוקים מדי, ויש לתפור את המשטח מבלי לעוות את הפצעים. לתחילת העבודה, חתוך

demonstration-of-the-rat-ischemic-skin-wound-model

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פיתחנו שיטה פולשנית ליצור אוזן איסכמי ארנב מודל הפצע על ידי חלוקת עורק העצבים המרכזית ואת צרור neurovascular גולגולתי. מנהרה תת עורית ואז חותך את כל רקמות תת עורית. הליך זה גורם הפרעה העור מינימלי בטוח לשימוש בבעלי חיים חולי סוכרת.

טכניקה פשוטה לייצור דגם פצע איסכמי

מודל עכברי של ריפוי פצע עורי שניתן להשתמש כדי להעריך את התרכובות טיפוליות בהגדרות פיסיולוגיות וpathophysiological.

מודל עכברי של ריפוי פצע

העברת רקמה חינם הוא מועסק באופן נרחב בניתוח שחזור כדי לשחזר את הצורה ותפקוד בעקבות כריתה וטראומה אונקולוגי. Preconditioning רקמה זו לפני הניתוח עשויה לשפר את התוצאה. מאמר זה...

באתרו מדף רוחבי Rectus abdominis Myocutaneous: מודל עכברוש של הפגיעה reperfusion איסכמיה Myocutaneous

החלון של חדר skinfold הגב העכברי הציג מדמיין אזור של איסכמיה המתמשכת האקוטית של כנף musculocutaneous. היתרי Intravital עלית מיקרוסקופ פלואורסצנטי להערכה ישירה וחוזרת ונשנית של נימי הדם והכימות של פרמטרים המודינמיים. נוסף יכולים להיות מתואמות מורפולוגיים ותוצאות המודינמית עם ניתוחים היסטולוגית ומולקולריים.

פגיעה ברקמות איסכמי בהגבו skinfold לשכת העכבר: דגם דש עור לחקור איסכמיה מתמיד חריפה

אנו מתארים יישום לא פולשנית ויוו הדמיה פרוטוקול מאופין בעיצוב חסכוני, ניצול L-012, chemiluminescent הלומינול-אנלוגי, כדי להמחיש ולכמת מינים חמצן תגובתי (ROS) שנוצר במודל של עכברים excisional פצע.

אין ויוו הדמיה של מינים חמצן תגובתי ב מאתר פצע מודל

כאן, אנו מתארים מודל טרום קליני בעלי חיים ללמוד את הפתופסולוגיה של פציעה איסכמיה-reperfusion בניתוח מיקרו-מיחזור. זה מודל העור חינם המודל מבוסס על כלי שטחית caudal האפיקיבה בחולדה עשויה גם לאפשר הערכה של טיפולים שונים תרכובות לנטרל את איסכמיה-reperfusion נזק הקשורות לפציעה.

מודל מפרה קליני לחקר איסכמיה-reperfusion פציעה במיקרו-כירורגיה משחזרת

מטרת המחקר הזה היתה לפתח מודל מורטין של ריפוי פצע כוויות. כוויה תרמית המושרה על העור החלק של עכברים באמצעות תבנית פליז מחומם מראש. הרקמה הנשרפה הייתה מצופה בשתל עור שנקטפו מזנבו של עכבר תורם דומה גנטית.

מודל מורנה של פצע צריבה שוחזר עם שתל העור Allogeneic

מודל פצעי הסוכרת הנגרמים על ידי סטרפטוזוצין בחולדות SD זכרים הוא כיום המודל הנפוץ ביותר לחקר ריפוי פצעים בסוכרת מסוג I. פרוטוקול זה מתאר את השיטות המשמשות לבניית מודל זה. הוא גם מציג ומתייחס לאתגרים פוטנציאליים ובוחן את ההתקדמות ואת המאפיינים האנגיוגניים של פצעים סוכרתיים.

פרוטוקול לבניית מודל פצע חולדה של סוכרת מסוג 1

פרוטוקול זה מתאר קציר, תפירה וניטור של דשים פאשיוקוטניים בחולדות המאפשרים הדמיה טובה ומניפולציה של זרימת הדם דרך כלי הדם האפיגסטריים התחתונים השטחיים באמצעות הידוק וקשירת כלי הירך. זה קריטי למחקרים הכוללים התניה מוקדמת איסכמית.

דש ציר עורק אפיגסטרי נחות שטחי לחקר השפעות התניה איסכמית במודל חולדה

מתואר מודל פצע מעור עכברוש המאפשר הערכה של תרופות שונות בתנאים פיזיולוגיים או פתולוגיים בשלבים שונים של תהליך ההחלמה. בנוסף, מפורט פרוטוקול לביצוע פלנימטריה ידנית למעקב אחר קצב התכווצות הפצע במהלך תיקון הרקמות.

מודל פצע עור כירורגי לעכברוש: גישה למחקרי ריפוי פצעים והערכת ביוחומרים

למד ליצור מודל פצע איסכמי בעכברושים באמצעות כלי ביופסיה סטרילי ורפידת סיליקון. שיטה זו מאפשרת חקר מנגנוני ריפוי פצעים כרוניים ומספקת מודל שחזור לחקר עתידי.

הפגנה של דגם פצע עור העכברוש איסכמי

גלה סרטונים נוספים