Name: שיטה פשוטה וזולה לקביעה קרה רגישות והסתגלות בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 35 s
Description: למדו את שיטת Cold Plantar Assay למדידת תגובה לקור בעכברים. שיטה זו מאפשרת הערכת רגישות יתר לקור, אנלגזיה והסתגלות תרמית במודלים התנהגותיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות לתרומות מכל מעבדת Gereau לעריכת כתבי היד. עבודה זו נתמכת על ידי קרנות NINDS 1F31NS078852 ל-DSB וקרן NINDS NS42595 ל-RWG.

כל פרוטוקולי העכבר היו בהתאם למכונים לאומי לבריאות הנחיות ואושרו על ידי ועדת בעלי החיים הלימודים של בית הספר לרפואה של אוניברסיטת וושינגטון (סנט לואיס, מיזורי). 1. הכנת צלחת הבדיקה ומארזים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנקות את משטח הזכוכית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Secure תרמי הבדיקה חוט T-הסוג אל פני השטח באמצע צלחת הזכוכית עם קלטת מעבדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את המארזים של בעלי החיים על צלחת הזכוכית בשורה אחת יחד אמצע הצלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השחל את תרמי הבדיקה דרך מתחם בעלי החיים המרכז ולחבר אל אוגר נתונים. הפעל אוגר נתונים על תוך כיבוי אוטומטי תכונת הכיבוי, ולצרף את אוגר נתונים למחשב באמצעות הכבל המסופק. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הקלטת טמפרטורת הצלחת במהלך הניסוי, לפתוח את התוכנה לוגר נתונים כדי להתחיל בהקלטת טמפרטורות צלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במידת צורך, להתאים את התוכנה מחדשכבל טמפרטורת צלחת אחת לשנייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתחיל בהקלטת טמפרטורות באמצעות התוכנה ארוזה עם אוגר נתונים התרמי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את המארז עם מוסיף שחור כדי למנוע אינטראקציה חזותית בין עכברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עמדה משקפת מתחת לזכוכית כך שהחלק התחתון של המארזים גלוי ממצב של ישיבה נוח. </li></ol> 2. התחממות / קירור צלחת הזכוכית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא תיבות אלומיניום עם מים מחוממים, קרח רטוב, או קרח יבש ולמקם אותם כראוי על צלחת הזכוכית (גם מנות רדיד אלומיניום מלאים בקרח יבש יכולות לשמש כדי לקרר את הזכוכית; איור 1) 2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדיקה ב 30 מעלות צלזיוס, מקם את קופסות האלומיניום כ 0.25 &#39;&#39; ממארזי בעלי החיים (איור 2) 2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר circulator מים מחומם בכל צד של צלחת הזכוכית. הגדר את circulator ל45-60 מעלות צלזיוס, ואותנודואר זה כדי למלא את תיבות אלומיניום עם זרם קבוע של מים חמים (איור 1 ג) 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את circulators כך שהמים החמים מתיבות האלומיניום מנקז ישירות בחזרה למאגר של circulator בכל צד (איור 1 ג) 2. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדיקה ב RT, לעזוב את התיבות ריק (איור 2) 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדיקה בגיל 17 ° C, למקם את התיבות כ 0.25 &#39;&#39; ממארזי בעלי החיים משני הצדדים ולמלא עם קרח רטוב (איור 2) 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדיקה ב 12 ° C, למקם את התיבות כ -1.25 &#39;&#39; ממארזים מכל צד ולמלא עם קרח יבש (איור 2) 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבדיקה ב5 מעלות צלזיוס, למקם את התיבות כ 0.25 &#39;&#39; ממארזים מכל צד ולמלא עם קרח יבש (איור 2) 2.<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר קירור הכוס בקרח יבש, לוודא שיש אוורור מספיק כדי למנוע הצטברות CO 2 בחדר. </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חכה לזכוכית להגיע לטווח הטמפרטורה הרצוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף את העכברים למארזים על הצלחת. הערה: מחולל רעש לבן ניתן להשתמש כדי להקטין מטרדי רעש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חכה לעכברים להסתגל. הערה: במתקן שלנו זה לוקח בערך 2.5 שעות, אך עשויים להשתנות באופן משמעותי המבוסס על דיור בעלי חיים ותנאי טיפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על הזכוכית במגוון הטמפרטורה הרצויה על ידי הבטחה כי התיבות נשמרות מלאה מים התחממו, קרח רטוב, או קרח יבש. הערה: עם המנגנון שלנו את התיבות צריכה להיות ומילא עם קרח בערך כל 90 דקות. הערה: למצב C ° 17, זה מועיל לרוקן את רוב המים מקופסות האלומיניום דרך חורי הניקוז לפני המילוי אותו עם קרח. זה יתייצב, ויחסי ציבור הטמפרטורה טובים יותרהצפת אירוע הערה: כמות הקרח היבש המדויקת משתנות עונתית, אבל באופן כללי שמירה על קופסות יותר מ ¼ מלאים לאורך כל אורכו של התיבה ישמור טמפרטורה קבועה. </li></ol> 3. בדיקת העכברים בטמפרטורות קבועות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחוץ לחדר התנהגותיות, למלא דלי קרח כמחצית מלאה של קרח יבש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בפטיש או פטיש, לרסק את הקרח היבש לאבקה דקה. הערה: מילוי יתר של הדלי יקשה לרסק את הקרח היבש באופן מלא באבקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות סכין גילוח ישר או מספריים, לחתוך את החלק העליון את מזרק 3 מיליליטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מחט 21 G, לתקוע 3 חורים בצדדים מנוגדים של המזרק (הכולל של 6 חורים). הערה: חורים אלה יקטינו את הלחץ שנוצר על ידי סובלימציה תוך דחיסת הקרח היבש. המזרק החתוך ניתן לעשות שימוש חוזר בניסויים מרובים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את המזרק, אבקת קרח יבשה, ושעון עצר שנערך ביד לחדר התנהגותיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למלא את תא מזרק חצי מלא של אבקת קרח יבשה. החזק את הקצוות של המזרק נגד אובייקט שטוח, ובתקיפות לדחוס את האבקה באמצעות הבוכנה. היזהר; בוכנת הפלסטיק עלולה לכופף או לשבור מהלחץ. אם זה יקרה, להחליף את הבוכנה של מזרק חדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להאריך את הקצה של גלולה הקרח היבשה הדחוסה עבר הקצה של המזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברי מבחן כי הם מלא במנוחה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על 30 מעלות צלזיוס, 23 ° C ו -17 ° C, עכברי מבחן שכל 4 כפות על הזכוכית ולא זזו, אבל לא ישן 19 באופן מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגיל 12 מעלות צלזיוס, 5 מעלות צלזיוס, עכברי מבחן, כי הם על 2 כפות או 4 כפות ולא זזו או לקפוץ. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השימוש במראות למיקוד, בעדינות אך בתקיפות לחצו על סומק גלולה השטוח על משטח הזכוכית מתחת לhindpaw העכבר (איור 1 א) 2. התחל היד-טיימר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעצור את שעון העצר ולהסיר את הכדור כאשר העכבר מתרחק מהזכוכית מקוררת. הערה: תנועת הנסיגה יכולה להיות אנכית או אופקית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם העכבר נע לזמן קצר מאוד כפה ולאחר מכן מחזיר אותו אל פני השטח הקירור, תמשיך עיתוי וגירוי עד העכבר עושה צעד קבוע משם. הערה: המעבדה שלנו משתמשת בזמן גירוי מקסימאלי של 20 שניות לעכברים ברוב המכריע של המקרים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על הליך בדיקה זו לפחות עד 3 ערכים על כל כף רגל של כל בעלי חיים שנאספו. ניסויים נפרדים בדיקת כפות הפוכות באותו העכבר על ידי לפחות 7 דקות, ומשפטים רצופים נפרדים על כל כף רגל אחת על ידי לפחות 15 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במידת הצורך, להשתמש בעוביים שונים של זכוכית כדי ליצור שיעורים שונים של קירור (איור 3) 1. הערה: שיעור הקירור קשור ביחס הפוך עם העובי של הזכוכית. </li></ol> 4. בדיקת העכברים במהלך קרה הסתגלות שימו לב: זה פרוטוקול חלופי המאפשר בדיקה כplat הזכוכיתדואר מתקרר, ולא פעם אחת הצלחת התייצבה והעכברים יש להתאים באופן מלא לסביבה הקרה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את ההוראות המופיעות בסעיף 1 להקמת המנגנון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את ההוראות המופיעות בסעיף 3 לקחת מידות בסיס בRT (איור 7 א) 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טרום לקרר את תיבות אלומיניום עם קרח יבש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע ששיהוי נסיגת בסיס נמדד, למקם את תיבות precooled על הצלחת כ -1.25 &#39;&#39; מהמארזים משני הצדדים (איור 7 א, חץ שכותרתו &quot;קרח יבש הוסיף&quot;) 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את ההוראות המופיעות בסעיף 3 כדי לבצע מדידות כצלחת הזכוכית מתקררת, במדידות לעתים קרובות ככל האפשר. </li></ol>

<ol><li>Brenner, D. S., Golden, J. P., Gereau, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Behavioral+Assay+for+Measuring+Cold+Sensation+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+ONE%22%5BJournal%5D)">A Novel Behavioral Assay for Measuring Cold Sensation in Mice.</a> Plos ONE. 7 (6), 8(2012).</li>
<li>Brenner, D. S., Vogt, S. K., Gereau, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+to+measure+cold+adaptation+in+freely+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A technique to measure cold adaptation in freely behaving mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. , (2014).</li>
<li>Choi, Y., Yoon, T. W., Na, H. S., Kim, S. H., Chung, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+signs+of+ongoing+pain+and+cold+allodynia+in+a+rat+model+of+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Behavioral signs of ongoing pain and cold allodynia in a rat model of neuropathic pain.</a> Pain. 59 (3), 369-376 (1994).</li>
<li>Gauchan, P., Andoh, T., Kato, A., Kuraishi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+increased+expression+of+transient+receptor+potential+melastatin+8+in+oxaliplatin-induced+cold+allodynia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+letters%22%5BJournal%5D)">Involvement of increased expression of transient receptor potential melastatin 8 in oxaliplatin-induced cold allodynia in mice.</a> Neuroscience letters. 458 (2), 93-95 (2009).</li>
<li>Carlton, S. M., Lekan, H. A., Kim, S. H., Chung, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+manifestations+of+an+experimental+model+for+peripheral+neuropathy+produced+by+spinal+nerve+ligation+in+the+primate%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Behavioral manifestations of an experimental model for peripheral neuropathy produced by spinal nerve ligation in the primate.</a> Pain. 56 (2), 155-166 (1994).</li>
<li>Pizziketti, R. J., Pressman, N. S., Geller, E. B., Cowan, A., Adler, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+cold+water+tail-flick%3A+A+novel+analgesic+test+that+distinguishes+opioid+agonists+from+mixed+agonist-antagonists%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Rat cold water tail-flick: A novel analgesic test that distinguishes opioid agonists from mixed agonist-antagonists.</a> European Journal of Pharmacology. 119 (1-2), 23-29 (1985).</li>
<li>Pinto-Ribeiro, F., Almeida, A., Pego, J. M., Cerqueira, J., Sousa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+unpredictable+stress+inhibits+nociception+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+letters%22%5BJournal%5D)">Chronic unpredictable stress inhibits nociception in male rats.</a> Neuroscience letters. 359 (1-2), 73-76 (2004).</li>
<li>Karashima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPA1+acts+as+a+cold+sensor+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">TRPA1 acts as a cold sensor in vitro and in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (4), 1273-1278 (2009).</li>
<li>Knowlton, W. M., Bifolck-Fisher, A., Bautista, D. M., McKemy, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPM8%2C+but+not+TRPA1%2C+is+required+for+neural+and+behavioral+responses+to+acute+noxious+cold+temperatures+and+cold-mimetics+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">TRPM8, but not TRPA1, is required for neural and behavioral responses to acute noxious cold temperatures and cold-mimetics in vivo.</a> Pain. 150 (2), 340-350 (2010).</li>
<li>Allchorne, A. J., Broom, D. C., Woolf, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+cold+pain%2C+cold+allodynia+and+cold+hyperalgesia+in+freely+behaving+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+pain%22%5BJournal%5D)">Detection of cold pain, cold allodynia and cold hyperalgesia in freely behaving rats.</a> Molecular pain. 1, 36(2005).</li>
<li>Colburn, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuated+cold+sensitivity+in+TRPM8+null+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Attenuated cold sensitivity in TRPM8 null mice.</a> Neuron. 54 (3), 379-386 (2007).</li>
<li>Dhaka, A., Murray, A. N., Mathur, J., Earley, T. J., Petrus, M. J., Patapoutian, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPM8+is+required+for+cold+sensation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">TRPM8 is required for cold sensation in mice.</a> Neuron. 54 (3), 371-378 (2007).</li>
<li>Bautista, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+menthol+receptor+TRPM8+is+the+principal+detector+of+environmental+cold%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The menthol receptor TRPM8 is the principal detector of environmental cold.</a> Nature. 448 (7150), 204-208 (2007).</li>
<li>Obata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TrpA1+induced+in+sensory+neurons+contributes+to+cold+hyperalgesia+after+inflammation+and+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">TrpA1 induced in sensory neurons contributes to cold hyperalgesia after inflammation and nerve injury.</a> The Journal of Clinical Investigation. 115 (9), 2393-2401 (2005).</li>
<li>Tang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pirt+functions+as+an+endogenous+regulator+of+TRPM8%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+communications%22%5BJournal%5D)">Pirt functions as an endogenous regulator of TRPM8.</a> Nature communications. 4, 2179(2013).</li>
<li>Lee, H., Iida, T., Mizuno, A., Suzuki, M., Caterina, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+thermal+selection+behavior+in+mice+lacking+transient+receptor+potential+vanilloid+4%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+neuroscience+the+official+journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Altered thermal selection behavior in mice lacking transient receptor potential vanilloid 4.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 25 (5), 1304-1310 (2005).</li>
<li>Pogorzala, L. A., Mishra, S. K., Hoon, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cellular+code+for+Mammalian+thermosensation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+neuroscience+the+official+journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The cellular code for Mammalian thermosensation.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 33 (13), 5533-5541 (2013).</li>
<li>Yalcin, I., Charlet, A., Freund-Mercier, M. -J., Barrot, M., Poisbeau, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiating+thermal+allodynia+and+hyperalgesia+using+dynamic+hot+and+cold+plate+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22The+journal+of+pain+official+journal+of+the+American+Pain+Society%22%5BJournal%5D)">Differentiating thermal allodynia and hyperalgesia using dynamic hot and cold plate in rodents.</a> The journal of pain official journal of the American Pain Society. 10 (7), 767-773 (2009).</li>
<li>Callahan, B. L., Gil, A. S., Levesque, A., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+mechanical+and+thermal+nociceptive+sensitivity+in+the+laboratory+mouse+by+behavioral+state%5BTitle%5D)+AND+%22The+journal+of+pain%3A+official+journal+of+the+American+Pain+Society%22%5BJournal%5D)">Modulation of mechanical and thermal nociceptive sensitivity in the laboratory mouse by behavioral state.</a> The journal of pain: official journal of the American Pain Society. 9 (2), 174-184 (2008).</li>
<li>Brenner, D. S., Golden, J. P., Vogt, S. K., Dhaka, A., Story, G. M., Gereau, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dynamic+set+point+for+thermal+adaptation+requires+phospholipase+C-mediated+regulation+of+TRPM8+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A dynamic set point for thermal adaptation requires phospholipase C-mediated regulation of TRPM8 in vivo.</a> Pain. , (2014).</li>
<li>Patwardhan, A. M., Scotland, P. E., Akopian, A. N., Hargreaves, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+TRPV1+in+the+spinal+cord+by+oxidized+linoleic+acid+metabolites+contributes+to+inflammatory+hyperalgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Activation of TRPV1 in the spinal cord by oxidized linoleic acid metabolites contributes to inflammatory hyperalgesia.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (44), 18820-18824 (2009).</li>
<li>Fujita, F., Uchida, K., Takaishi, M., Sokabe, T., Tominaga, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ambient+Temperature+Affects+the+Temperature+Threshold+for+TRPM8+Activation+through+Interaction+of+Phosphatidylinositol+4%2C5-Bisphosphate%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Ambient Temperature Affects the Temperature Threshold for TRPM8 Activation through Interaction of Phosphatidylinositol 4,5-Bisphosphate.</a> Journal of Neuroscience. 33 (14), 6154-6159 (2013).</li>
<li>Rohacs, T., Lopes, C. M., Michailidis, I., Logothetis, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PI%284%2C5%29P2+regulates+the+activation+and+desensitization+of+TRPM8+channels+through+the+TRP+domain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+neuroscience%22%5BJournal%5D)">PI(4,5)P2 regulates the activation and desensitization of TRPM8 channels through the TRP domain.</a> Nature neuroscience. 8 (5), 626-634 (2005).</li>
<li>Daniels, R. L., Takashima, Y., McKemy, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+the+neuronal+cold+sensor+TRPM8+is+regulated+by+phospholipase+C+via+the+phospholipid+phosphoinositol+4%2C5-bisphosphate%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+biological+chemistry%22%5BJournal%5D)">Activity of the neuronal cold sensor TRPM8 is regulated by phospholipase C via the phospholipid phosphoinositol 4,5-bisphosphate.</a> The Journal of biological chemistry. 284 (3), 1570-1582 (2009).</li>
<li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurokinin-1+receptor+enhances+TRPV1+activity+in+primary+sensory+neurons+via+PKCepsilon%3A+a+novel+pathway+for+heat+hyperalgesia%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+neuroscience+the+official+journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Neurokinin-1 receptor enhances TRPV1 activity in primary sensory neurons via PKCepsilon: a novel pathway for heat hyperalgesia.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 27 (44), 12067-12077 (2007).</li>
<li>Wang, H., Zylka, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mrgprd-expressing+polymodal+nociceptive+neurons+innervate+most+known+classes+of+substantia+gelatinosa+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+neuroscience+the+official+journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mrgprd-expressing polymodal nociceptive neurons innervate most known classes of substantia gelatinosa neurons.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 29 (42), 13202-13209 (2009).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף

ניתן להשתמש ב-CPA כדי להעריך רגישות לקור והסתגלות לקור בעכברים. הוא מספק דרך יעילה ומשתלמת למדוד תגובות קור בבעלי חיים לא מרוסנים ומתאקלמים במגוון רחב של טווחי טמפרטורות. הוא גם מספק תגובה התנהגותית חד משמעית עם משתנה פלט שניתן לכמת ולנתח בקלות. הוא כבר שימש להערכת שינויים ברגישות לקור הנגרמת על ידי דלקת1, פגיעה נוירופתית1, משככי כאבים1, נוקאאוט גנטי20 ומחקרי אבלציה גנטית של נוירונים26. ניתן לשנות אותו כדי למדוד תגובות למגוון קצבי קירור באמצעות עוביים שונים של ז...

מדידת היענות קרה במכרסמים היא חשובה לשיפור הבנתנו את המנגנונים האפשריים של רגישות קרה בבני אדם תחת שני תנאים נורמלים ופתולוגיים. קר Plantar Assay (CPA), שפותח במקור לפני מספר שנות 1, נועדה ליצור תגובות לשחזור, חד-משמעיות עכבריות התנהגות לגירוי קר נשא בRT. יותר שיפורים האחרונים של assay זה אפשרו את המדידה לשחזור של רגישות קרה במגוון רחב של טמפרטורות 2. שני הגרסאות גם נועדו להיות יחסית תפוקה גבוהה, וזול לשימוש. התקדמות רבה נעשה בהבנת המנגנונים של רגישות קרה באמצעות שיטות התנהגותיות אחרות. שיטה אחת היא מבחן אידוי אצטון, הכולל מספיג או ריסוס אצטון על כפת העכבר ומדידת משך זמן שמבלה העכבר מצליף 3,4 הכפה. לרוע המזל,התגובות לאידוי אצטון הם מבולבלות על ידי התחושה הרטובה והריח של אצטון. כמו כן, הגירוי הקר שחל במבחן אידוי אצטון יכול להשתנות בהתאם לכמות של אצטון מיושם, וקשה לכמת. לבסוף, יש לי עכברים ללא כל פגע תגובות מינימליות לאצטון בתחילת המחקר, מה שהופך את זה אי אפשר למדוד שיכוך כאבים בהיעדר רגישות יתר בשיטה זו. נוסף assay הקלאסי לתגובות קרות הוא assay קפיצי זנב, שבו זמן האחזור לנסיגה נמדד לאחר הזנב הוא שקוע ב5,6 מים קרים. בעוד התגובות התנהגותיות בassay זה הן חד משמעיות וassay מודד תגובות לטמפרטורה מסוימת, בעלי החיים חייבים להיות מרוסנים במהלך בדיקה, אשר יכולה לשנות את היענות קרה באמצעות מנגנוני מתח מושרה היטב תיארו משכך כאבים 7. כלי נוסף נפוץ הוא מבחן הצלחת הקר, המודד את ההתנהגותתגובות של עכברים אחרי שהם מונחים על צלחת מקורר פלטייה 8-10. בעוד כלי זה מספק מידע על תגובות של בעלי חיים בטמפרטורות מסוימות, יש לו גם נעשה שימוש לא עקבי; קבוצות שונות מדדו סוגים שונים של תגובות הכוללים מספר הקפיצות 8,11, חביון התגובה הראשונה 8,11- 13, ומספר הכפה מרים 11,13,14 עם תוצאות שונות מאוד. Assay הצלחת הקר הוא גם תפוקה נמוכה יחסית כמו שרק חיה אחת יכול להיבדק בכל פעם, וזה דורש מכשיר פלטייה יקר ושביר. מבחן העדפת טמפרטורת 2-הצלחת הוא נגזר נפוץ של מבחן הצלחת הקרה שמודד את הכמות היחסית של זמן שבעלי חיים להוציא על 2 צלחות מחוברות של טמפרטורות שונות 9,15- 17. assay הנפוץ דומה נוסף הוא assay שיפוע התרמית, שבו כמות הזמן שמבלים עכברים באזורי טמפרטורה שוניםהנע בין 5 ° C ו -45 ° C על צלחת מתכת ארוכה נמדד 16. בעוד מבחני אלה מאפשרים השוואה של טמפרטורות, לא ברור אם ההתנהגות מייצגת סלידת טמפרטורה או להעדפת טמפרטורה. לבסוף, assay הצלחת קרה הדינמי נעשה שימוש כדי למדוד כמה עכברים להגיב לשינויים בטמפרטורות הסביבה 18. שיטה זו כוללת הצבת עכברים במכשיר פלטייה RT וramping אותו עד 1 ° C תוך מדידה כמה העכברים לקפוץ או ללקק את כפותיהם בטמפרטורות צלחת שונות. אמנם זה בוחן כיצד עכברים להסתגל לסביבת קירור, הוא אינו מספק דרך לבדוק כמה עכברים להגיב לגירוי קר בהגדרה של טמפרטורת סביבה קרירה. בנוסף, הוא דורש ציוד יקר לביצוע ואינו מספק דרך להסתגל לעכברי ציוד הבדיקה לפני מדידת הרגישות הקרה שלהם. כדי להשלים את מבחני האלה, רו&quot;ח בדיקות acclimaתגובות טד לגירוי קור מוגדר היטב במגוון רחב של תחומי טמפרטורה, או בתהליך של הסתגלות לטמפרטורות סביבה קרה. זה יכול לבדוק עד 14 עכברים בכל פעם עם המנגנון הנוכחי שלנו, עם הפוטנציאל להיות scaled עד בזול לבדיקת תפוקה גבוהה.

<table><tbody><tr><td>בדיקת צמד תרמי מסוג T</td><td>Physitemp</td><td>IT-24p</td><td>משמש למדידת טמפרטורת פני השטח של הזכוכית (http://www.physitemp.com/products/probesandwire/)</td></tr> <tr><td>צלחת זכוכית</td><td>חברת זכוכית מקומית (בסנט לואיס, Stemmerich Inc)</td><td></td> <td>אנו משתמשים בזכוכית פיירקס (צף בורוסיליקט). המעבדה שלנו משתמשת בדרך כלל ב-1/4 אינץ', אך 3/16 אינץ' ו-1/8 אינץ' שימושיים גם</td></tr> לוגר <tr><td>נתונים תרמיים</td><td>Extech</td><td>EA15</td><td>Thermologger כדי לעקוב אחר טמפרטורת הזכוכית (http://www.extech.com/instruments/product.asp?catid=64&prodid=408)</td></tr> <tr><td>3 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>309657</td><td>החלק העליון מנותק, וקרח יבש נדחס במזרק כדי ליצור מחשב</td></tr> <tr><td></td><td>בדיקה קרהאם משתמשים בלוגר Extech, כל קופסאות</td> אלומיניום של <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>אוניברסיטת וושינגטון בסנט לואיס</td><td></td><td>הן באורך 3 אינץ', רוחב 4.5 אינץ' וגובה 3 אינץ' עם מכסה אטום.&nbsp; יש חור בגודל 1/2 אינץ' שנקדח בצד אחד קצר של כל קופסה, ליד התחתית. חורים אלה מתמלאים במעצורים מגומי כאשר הקופסאות מלאות בקרח רטוב או במים חמים.</td></tr><tr><td>סירקולטור מים מחומם</td><td>VWR</td><td></td><td>כל דגם סירקולטור מים עם משאבה יעבוד</td></tr><tr><td>21 גרם מחט</td><td>BD</td><td>305165</td><td>גודל המחט המדויק אינו חשוב</td></tr><tr><td>טיימר</td><td></td><td></td> יד <td>כל טיימר יד יעבוד</td></tr><tr><td>מראה</td><td></td><td></td><td>כל מראה שטוחה תעבוד</td></tr></tbody></table>

שיטה פשוטה וזולה לקביעה קרה רגישות והסתגלות בעכברים

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

רגישות יתר לקור היא בעיה קלינית חמורה, המשפיעה על תת-קבוצה רחבה של חולים וגורמת לירידה משמעותית באיכות החיים. בדיקת הכף הקרה מאפשרת הערכה אובייקטיבית וזולה של רגישות לקור בעכברים, ויכולה לכמת הן משככי כאבים והן רגישות יתר. עכברים מתאקלמים על צלחת זכוכית, וכדור קרח יבש דחוס מוחזק על משטח הזכוכית מתחת לכף האחורית. ההשהיה לנסיגה מזכוכית הקירור משמשת כמדד לרגישות לקור.
תחושת קור חשובה גם להישרדות באזורים עם שינויי טמפרטורה עונתיים, וכדי לשמור על רגישות בעלי חיים חייבים להיות מסוגלים להתאים את סף התגובה התרמית שלהם כך שיתאימו לטמפרטורת הסביבה. מבחן הכף הקרה (CPA) מאפשר גם לחקור הסתגלות לשינויים בטמפרטורת הסביבה על ידי בדיקת הרגישות לקור של עכברים בטמפרטורות הנעות בין 30 מעלות צלזיוס ל-5 מעלות צלזיוס. עכברים מתאקלמים כמתואר לעיל, אך לוחית הזכוכית מקוררת לטמפרטורת ההתחלה הרצויה באמצעות קופסאות אלומיניום (או חבילות נייר אלומיניום) מלאות במים חמים, קרח רטוב או קרח יבש. טמפרטורת הצלחת נמדדת במרכז באמצעות בדיקת צמד תרמי מסוג T נימה. לאחר שהצלחת הגיעה לטמפרטורת ההתחלה הרצויה, החיות נבדקות כמתואר לעיל.
בדיקה זו מאפשרת בדיקה של עכברים בטמפרטורות הנעות בין תמימות למזיקות. ה-CPA מניב תגובות התנהגותיות חד משמעיות ועקביות בעכברים לא פצועים וניתן להשתמש בו כדי לכמת רגישות יתר ומשככי כאבים. פרוטוקול זה מתאר כיצד להשתמש ב-CPA כדי למדוד רגישות יתר לקור, שיכוך כאבים והסתגלות בעכברים.

התגובות התנהגותיות שהושרו מעכברים מתחילים ב 30 מעלות צלזיוס, 23 ° C, 17 ° C, ו- 12 ° C הן (איור 4 א) 20 לשחזור מאוד. על מנת למדוד את הגירוי הקר המופק תחת hindpaw, עכברים מורדמים עם קטמין / xylazine / קוקטייל acepromazine וכפותיהם הובטחו על הזכוכית על גבי תרמי נימה T-הסוג (איור 4) 20. הזכוכית מקוררת או מחומם למגוון בדיקות הרצוי. למרות הצלחת מקוררת באופן אחיד לאורכו של הצלחת (איור 5 א &#39;) 2, יש לצ...

בדיקת הכף הקרה (CPA) מודדת היענות לקור בין 30 מעלות צלזיוס ל-5 מעלות צלזיוס, ויכולה גם למדוד הסתגלות לקור. פרוטוקול זה מתאר כיצד להשתמש ב-CPA כדי למדוד רגישות יתר לקור, שיכוך כאבים והסתגלות בעכברים.

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

המטרה הכללית של הליך זה היא למדוד את התגובה לקור של עכברים. הדבר משיג תחילה על ידי קירור או חימום של הזכוכית לטמפרטורה הרצויה. השלב השני הוא התאמת העכברים עד שהם במצב של מנוחה.השלב השלישי הוא דחיסת אבקת קרח יבש לכדור בתוך מזרק. השלב הסופי הוא בדיקת העכברים באמצעות כדור קרח היבש וסטופר למדידת זמן השהייה עד לנסיגה. בסופו של דבר, מבחן המשטח הקר משמש למדידת תגובה לקור והסתגלות בעכברים הפועלים באופן חופשי.היתרון המרכזי של הבדיקה שלנו על פני בדיקות קיימות כיום, כגון בדיקת האצטון ובדיקת הפלטה הקרה, הוא היכולת לבחון הן רגישות-יתר והן אלגזיה בבסיס (baseline) תחת מגוון נסיבות סביבתיות. אף ששיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי התגובה לקור של העכברים, ניתן להשתמש בה גם במערכות אחרות כגון קופים, חולדות ובני אדם. את הפרוצדורה יעגים דניאל ברנר, סטודנט לתואר שני במעבדה שלי.לאחר ניקוי משטח הזכוכית, הצמדו את חיישן הטרמוקפל מסוג T למרכז לוח הזכוכית באמצעות סרט הדבקה למעבדה. הניחו את תאי הגידול של בעלי החיים על לוח הזכוכית בשורה אחת במרכזו. לאחר מכן, השחילו את חיישן הטרמוקפל דרך תא הגידול המרכזי וחברו אותו לנתב הנתונים (data logger).הפעל את רשם הנתונים ובטל את תכונת הכיבוי האוטומטי. חבר את רשם הנתונים למחשב באמצעות הכבל המצורף. הפרד בין תאי בעלי החיים באמצעות תוספים שחורים כדי למנוע אינטראקציות חזותיות בין העכברים, ומקם מראות מתחת לזכוכית כדי לאפשר צפייה בחלק התחתון של התאים.כדי להתחיל בבדיקה, הניחו קופסאות אלומיניום על לוח הזכוכית משני צדי בעל החיים, כאשר המארבים נמצאים במרחק קבוע. אם הבדיקה מתבצעת בטמפרטורה של 30 °C, חברו סירקולטורים של מים מחוממים לקופסאות האלומיניום שהוצבו במרחק של 0.25 inches ממארב בעל החיים. מלאו את הקופסאות במים עד למחציתם כאשר חורי הניקוז סתומים.מקמו את המסובבים כך שהמים החמים מהקופסאות מאלומיניום ינוזלו ישירות חזרה למאגר של המסובב בכל צד. יהיה עליכם להוסיף מים לכל מסובב. לאחר מילוי קופסאות המתכת, כוון את המסובבים ל-45 עד 60 degrees Celsius ומלאו את קופסאות האלומיניום בזרם קבוע של מים חמים.כאשר הזכוכיתים מגיעים לטווח הטמפרטורה הרצוי, הניחו את העכברים במארזים שעל הפלטה. אפשרו לעכברים להסתגל למכשיר ולטמפרטורה. עכברים אלו יסתגלו למשך 2.5 שעות.לקראת סיום תקופת ההסתגלות, מלאו דלי קרח עד למחציתו בקרח יבש והשתמשו בפטיש כדי לרסק את הקרח היבש לאבקה. בצעו זאת מחוץ לחדר ההתנהגות כדי למנוע הפרעה לעכברים. לאחר מכן, השתמשו בלהב תער או במספריים כדי לחתוך את החלק העליון של מזרק בנפח 3 mL.לאחר מכן, השתמש במחט בכילון (gauge) 21 כדי ליצור שתי סדרות של שלושה חורים בצדדים מנוגדים של המזרק, במטרה להפחית את הלחץ הנוצר כתוצאה מסבלימציה בעת דחיסת הקרח היבש בחזרה בחדר ההתנהגות; מלא את תא המזרק עד למחציתו באבקת קרח יבש. הצמד את הקצה החתוך של המזרק לאובייקט שטוח ודחוס את האבקה בחוזקה באמצעות הבוכנה. דחף את קצה גליל הקרח היבש הדחוס כך שיבלוט מעבר לשפת המזרק.כעת, בדקו את העכברים שארבע כפות רגליהם נמצאות בתוך הזכוכית והם אינם זזים, אך אינם ישנים לחלוטין. בעזרת המראות למיקוד, לחצו בעדינות אך בנחישות את הפלט плоסית צמוד למשטח הזכוכית מתחת לכף רגל האחורית של העכבר. במקביל, לחצו על כפתור ההפעלה של הטיימר.כאשר העכבר מתרחק מהזכוכית המקוררת, בין אם בצורה אנכית או אופקית, יש לעצור את הטיימר ולהסיר את כדור הקרח היבש. עם זאת, אם העכבר מזיז את כף הרגל למשך זמן קצר מאוד ואז מחזירה אותה למשטח הקירור, יש להמשיך בתזמון ובגירוי עד שהעכבר יבצע תנועה קבועה הרחק מהמשטח. אם העכבר אינו מתרחק מהזכוכית המקוררת, יש להפסיק את הגירוי לאחר 20 שניות.חזור על הליך בדיקה זה עד שייאספו לפחות שלושה ערכים מכל כף רגל של בעל החיים לבדיקת עכברים בטמפרטורה של 17 degrees Celsius. חזור על הניסוי כפי שהודגם, אך במקום למלא את קופסאות האלומיניום במים חמים, השתמש בקרח רטוב והצב את הקופסאות במרחק של כ-0.25 inches מהכלובים לצורך בדיקת העכברים. בטמפרטורה של 12 degrees Celsius, נעשה שימוש בקרח יבש, אך הקופסאות ממוקמות במרחק של 1.25 inches מהכלובים.פרוטוקול חלופי זה בוחן את העכברים בעוד טמפרטורת הפלטה יורדת, במקום לאחר שהיא התייצבה. דבר זה מאפשר לנו לבחון את הסתגלות העכברים בזמן שהיא מתרחשת לאחר הגדרת המערך הניסיוני. כפי שנעשה בעבר, בצעו את הניסוי כפי שפורט קודם לכן כדי לקחת מדידות בטמפרטורת החדר.לאחר שמדדו את זמני השיהוי (latencies) הבסיסיים בטמפרטורת החדר, מלאו את קופסאות האלומיניום הריקות בקרח יבש, בהתאם לנהלים שהודגמו קודם לכן, והניחו אותן במרחק של 1.25 inches מהמארזים משני הצדדים. לבסוף, חזרו על הניסוי כדי למדוד את זמני השיהוי בזמן שהלוח הזכוכית מתקרר.ביצוע מדידות בתדירות הגבוהה ככל האפשר. גרף זה מציג את ממוצע זמן ההשהיה עד לנסיגה (withdrawal latency) עבור עכברים שהחלו ב-12 °C, 17 °C, 23 °C או 30 °C. זמני ההשהיה עד לנסיגה עקביים בכל הטמפרטורות.ניתן למדוד השפעות משככות כאבים באמצעות מבחן ה-cold planter כפי שמוצג כאן. הזרקה תת-עורית של 1.5 milligrams per kilogram מורפין מעלה את זמן השהיית הנסיגה של עכברים 30 דקות לאחר ההזרקה, כפי שנמדד באמצעות two-way ANOVA עם מבחן post-hoc של Bonferroni כ-60 דקות לאחר ההזרקה. אין הבדל מובהק בין הקבוצה שהוזרקה מורפין לקבוצה שהוזרקה סלין.ניתן למדוד כאן גם רגישות יתר בעכברים. הזרקה תוך-כפית של 10 µL של fros adjuvant מלא מפחיתה באופן משמעותי את זמן השהיית הנסיגה של העכברים שעתיים ושלוש שעות לאחר ההזרקה, כפי שנמדד באמצעות two-way ANOVA עם מבחן bonferroni post-hoc. לאותם עכברים ניתנו הזרקות תת-עוריות של מורפין לאחר ארבע שעות, וכל זמני השהיית הנסיגה ב-4.5 שעות היו גבוהים באופן משמעותי בהשוואה לשלוש שעות, כפי שנמדד באמצעות one-way ANOVA עם מבחן done it's post hoc.לאחר שהמורפין עבר מטבוליזם, 5.5 שעות לאחר ההזרקה, לעכברים שהוזרק להם CFA עדיין היו זמני תגובה (withdrawal latencies) קצרים יותר מאשר לעכברים שהוזרק להם סליין, כפי שנמדד באמצעות ANOVA דו-כיווני עם מבחן post-hoc של בונפרוני. ניתן למדוד בזמן אמת את ההסתגלות לשינויים בסביבה מקוררת באמצעות בדיקה זו. לעכברי פרא (Wild type) יש את אותו זמן תגובה בעוד לוחת הזכוכית מתקררת, מה שמרמז שהם מסתגלים לטמפרטורות קרירות מהר יותר מכפי שניתן למדוד באמצעות CPA, שבו לא נמצאו הבדלים מובהקים בין אף אחת מהקבוצות.עם זאת, כאשר העכברים הוזנקו ב-U 7 3 1 2 2 כדי לחסום את הידרוליזת PIP two, זמן התגובה שלהם קצר יותר ככל שטמפרטורת הפלטה יורדת, מה שמרמז על פגיעה בהסתגלות. לאחר השליטה בטכניקה, ניתן לבצע אותה בחמישה שעות, כולל זמן ההסתגלות. לאחר צפייה בסרטון זה, תגיעו להבנה טובה של האופן שבו ניתן למדוד תחושת קור והסתגלות בעכברים ערים המתנהגים באופן חופשי. זכרו שעבודה עם קרח יבש עלולה להיות מסוכנת במיוחד, ויש להבטיח אוורור נאות ופינוי אוויר תקין במהלך שיטה זו.

a-simple-inexpensive-method-for-determining-cold-sensitivity

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

כאן אנו מתארים הליך אמין ופשוט מהירה כדי לקבוע את הטמפרטורה הנמוכה ביותר שבה חולדות או עכברים מראים התנהגות...

קביעה מהירה של סף nociceptive תרמי בעכברים סוכרתיים

מדידות פון פריי אלקטרוניות הן אלטרנטיבה יעילה ומשופרת לחוטי פון פריי הקלאסיים, מכיוון שהן מאפשרות מדידה מהירה ומדויקת של שינויים בספי הנסיגה המכאניים של מכרסמים לגירוי לחץ המופעל ברציפות לפני ואחרי אירוע דלקתי.

מדידת שינויים במגע רגישות בכף הרגל האחורית של עכברים באמצעות מנגנון אלקטרוני פון פריי

תגובות אלרגיות, המתאפיינות בהפעלת תאי מאסט ובזופילים, מונעות על ידי הקישור הצולב של IgE והשחרור של מתווכים מעודדי דלקת. הערכה כמותית של תגובות אלרגיות יכולה להיות מושגת על ידי שימוש בצבע כחול אוונס לעקוב אחר שינויים בחדירות כלי דם לאחר אתגר אלרגן.

מדידת אנפילקסיס המקומי בעכברים

כתב יד זה מתאר פרוטוקול לבחינת מערכת הריח של מכרסמים. מבחן ההתרגלות/אי-השבתה של חוש הריח יאפשר לחוקרים לקבוע אם עכבר מתרגל לריח המוצג שוב ושוב והאם העכבר מפגין חוסר התרגלות כאשר מוצג לו ריח חדש.

בדיקה לריח אפליה והרגלה בעכברים

אנו מציגים מבחן ריח פשוט ובלתי מוטה בעכברים. עם פרוטוקול זה ניתן להעריך אפליה, העדפה, הימנעות ורגישות לריח חדש בהשוואה למים במפגשים התנהגותיים בודדים. שיטה זו מיועדת לנסיין יחיד והניתוח מבוסס על עיבוד וידאו בעזרת מחשב.

פשוט וחוש ריח בדיקה לעכברים בסיוע מחשב

כאן אנו מדגימים assay הרומן ללמוד nociception קר הזחלים תסיסנית. assay זה מנצל בדיקה שהותקנה פלטייה מסוגל ליישם גירוי קור מוקד רעיל וכתוצאה מכך התנהגויות קרות ספציפיות הניתנות לכימות. טכניקה זו תאפשר דיסקציה תאית ומולקולרית נוספת של nociception הקר.

Assay רומן עבור הקרה Nociception ב<em&gt; דרוזופילה</em&gt; זחלים

במאמר זה אנו מספקים פרטים עבור שיטות ייצור, בקרת איכות של חלבון רקומביננטי פיוז'ן IL4-10. אנו גם מראים כיצד לבחון את היעילות של חלבון זה כדי לפתור כאבים במודל של עכברים של כאבים דלקתיים.

פיתוח חומרים לטיפול בכאב כרוני

כאן אנו מציגים שיטה חדשה כדי למדוד במדויק את הבדלי טמפרטורה גוף פסיבי אנפילקסיס מערכתית (PSA), מזון אלרגיה העכבר מודלים באמצעות מד חום אינפרא אדום... הליך זה שוכפל במדויק בתוצאות ה-PSA הקודמת.

מדידה טמפרטורת גוף העכבר באמצעות מד חום אינפרא אדום במהלך אנפילקסיס מערכתית פסיבי והערכה אלרגיה למזון

עכברים וחולדות מושתלים בניתוח במשדרי טמפרטורה מרוחקים ולאחר מכן מורגלים לסביבת הבדיקה ולהליך. שינויים בטמפרטורת השרירים נמדדים בתגובה לגירויים פרמקולוגיים או קונטקסטואליים בכלוב הביתי או במהלך פעילות גופנית שנקבעה (כלומר, הליכה על הליכון במהירות קבועה).

מדידת תרמוגנזה של שרירי השלד בעכברים ובחולדות

רגישות יתר למגע (CHS) היא מודל ניסיוני של מורין של דרמטיטיס מגע אלרגי (ACD). CHS מבוסס על רגישות עם hapten תגובתי על ידי צביעת העור המגולח של החזה והבטן, עם אתגר עור אוזן לאחר מכן עם hapten מדולל, הגורם לתגובת נפיחות כי הוא מוערך בדרכים שונות.

צור רגישות יתר כמודל מורין של דרמטיטיס מגע אלרגי

למדו את שיטת Cold Plantar Assay למדידת תגובה לקור בעכברים. שיטה זו מאפשרת הערכת רגישות יתר לקור, אנלגזיה והסתגלות תרמית במודלים התנהגותיים.

שיטה פשוטה וזולה לקביעה קרה רגישות והסתגלות בעכברים

גלה סרטונים נוספים