Name: צביעת חרקים למבחני התנהגות: התנהגות חיזור של הרדים דרוזופילה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: למד שיטת צביעה לא פולשנית לזיהוי פרטים בניסויים התנהגותיים בדרוזופילה. טכניקת צביעת המזון מאפשרת מעקב אחרי זכרים צבועים בניסויי חיזור ללא השפעה שלילית על ההתנהגות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להודות לאלכס Hitchen ומג בות &#39;לעזרתם עם ניסויי ההזדווגות. עבודה זו נתמכה על ידי NE מענק NERC / H015604 / 1 לTP.

1. הכנת Fly מזון עם צבעי מאכל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח בקבוקון תסיסנית סטנדרטי עם כ 20 מיליליטר של מזון בתחתית (איור 1). השתמש במתכון לתערובת מזון באמצעות 1 ליטר של מים רותחים הבא: 10 גרם של אגר, 85 גרם של דקסטרוז, 60 גרם קמח תירס, 40 גרם של שמרים, ומערבבים במשך 5 דקות של מבעבע. להוסיף 25 מיליליטר של nipagen 10% פעם אחת את התערובת מתקררת ל -75 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי האוכל התקרר והתמצק להוסיף שתי טיפות (כ 0.5-1 מיליליטר) של צבע מאכל הכחול לחלק העליון של המזון ומשתרע על פני השטח של הבקבוקון השלם (איור 1). השתמש בצבע בצבע שונה, אם העדיף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השאר את המזון ליומיים במקרר, כך שהצבע נספג על ידי השכבה העליונה של מזון; זה ימנע לחות מוגזמת פוגעת בזבובים בתקופת ההתבגרות. להוסיף חתיכה קטנה של נייר טישו אם לחות מוגזמת היא עדיין בעיה למחוק את לחות נוספת ולאחר מכן בהמשךהסר זאת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת זבובים על המזון בנפרד או בקבוצות. הערה: זבובים ירוויחו צביעת מעיים בתוך היום 1 של שיוצב על המזון. לחלופין, יבשיל באופן מלא זבובים על המזון הצבוע לפני הניסוי (התמותה המוגברת בתקופת ההתבגרות לא נצפתה מחשיפה לצבע מאכל). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק שהזבובים צבועים ניתן להבחין בקלות מהזבובים שאינם צבועים. אם הם לא יכולים להבחין, חזור על שלבים 1.1-1.4 או באמצעות ריכוז גבוה יותר של צבע, או צבע שונה. </li></ol> 2. שני ניסויים הזדווגות זכר שימוש מזון צביעה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לייצור צאצאים, הקים בקבוקונים המכילים מספר רב של זוגות של זבובים נשיים וגבריים (קבוצות קטנות של זכרים ונקבות גם מתאימים, למרות לטפל כדי למנוע צפיפות של זחלים). לאפשר לנקבות להטיל ביצים ולהעביר את הזבובים לבקבוקונים חדשים בכל 5-7 ימים. בקבוקוני חנות בטמפרטורה מתאימה למינים של עניין (ו C 22 °או ד פסאודו וד &#39; subobscura ו -25 מעלות צלזיוס למשך ד melanogaster). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני זבובים ניסיוניים איסוף להסיר את כל הזבובים מבקבוקוני האיסוף בשעה קבועה לפני איסוף זכרים ונקבות כדי להבטיח שהם יהיו בתולות (ד melanogaster - 6 שעות של 25 מעלות צלזיוס, ד &#39;פסאודו - 18 שעות על 22 מעלות צלזיוס, ו subobscura ד - 24 שעות על 22 מעלות צלזיוס). הערה: אם זבובים אינם בתולת הטיה רצון זה ההתנהגות שלהם בניסויי הזדווגות 15. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חנות וגברים בוגרים בנפרד ב -75 x 20 בקבוקוני פלסטיק מ&quot;מ סטנדרטיים (המכיל ~ 20 מיליליטר של מזון). זה ימנע את ההשפעות השליליות על גברים התנהגות הזדווגות וכושר ראה במינים מסוימים, כאשר זכרים נשמרים בקבוצות 16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף מחצית מהזכרים לטיפול הרצוי (CO 2 הרדמה במקרה זה). השתמש במזרן CO 2 או הקש כדי לחשוף את הזבובים לזמן הנדרש. מחצית חנות של males בכל טיפול במזון צבעוני עד ההזדווגות מתרחש. זה יגרום להם מבחינה ויזואלית להבחין במהלך ניסויי ההזדווגות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעברת זבובים להשתמש aspirator 17. לייבל כל בקבוקון לזהות שני טיפול ומצב הצבע של הזכר. כאן, להשתמש בארבעה טיפולים (הרדמה, שאינו בצבע = G-NC, הרדמה, = GC צבעוני, ללא הרדמה, ללא צבע, NG-NC, ולא הרדמה,, NG-C בצבע). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את הנקבות יצאו זה עתה לתוך צלוחיות מזון טריות להתבגר כקבוצות של 10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר זבובים בוגרים לגיל ההזדווגות (ד melanogaster - 3 ימים, ד &#39;פסאודו - 5 ימים, subobscura ד - 7 ימים 18 חנות זבובים בטמפרטורה מתאימה למינים הנחקרים (למשל, 22 מעלות צלזיוס במשך D. . פסאודו וsubobscura ד ו -25 מעלות צלזיוס במשך ד melanogaster). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז נקבות לבקבוקונים בודדים (המשךaining ~ 20 מיליליטר של מזון) יום 1 לפני משפט ההזדווגות להתאקלמות לבקבוקון ההזדווגות. תווית בקבוקונים אלה, כך שיכולים להיות מובחנים בקבוקונים. להיות זהיר כדי לעוור את הניסוי באמצעות תיוג ניטראלי (כלומר, 1 - 150), כך שהוא לא ניתן לנחש את זהותו של זבובים בכל בקבוקון. הערה: האדם שמציב את הזבובים לכל בקבוקון יצטרך לדעת את זהותו של הזבובים להציב בכל בקבוקון כפי שהם לב שהטיפול היה מוכתם. עם זאת, צופה מתבונן ההזדווגות לא צריך לדעת את זהותם. כדי לעשות יהיו צורך בלפחות שני הנסיינים זה, אחד להתקנה ולאחת להתבונן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתחיל ניסויי ההזדווגות בין 10 - 12 בבוקר, או בכל פעם שעולה בקנה אחד עם האור שנכנס במחזור האור / חושך הזבובים נחשפים ל( &quot;שחר&quot; לזבובים). הוסף שני זבובים ממין זכר לכל בקבוקון הזדווגות (המכיל נקבת זבוב אחד) באמצעות aspirator. ודא ששני זכרים מטיפולים שונים (הרדמה אושליטה) וכי יש כתמי מעיים כדי לעשות את זה אפשרי כדי להבדיל אותם מאחד לשני, ושים לב שגברים מוכתם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הזדווגות מתרחשת, להקליט את מעמדם של הגברים שבני זוג (או בצבע או לא - בצבע). אם הניסויים האחרונים עבור שעה 2, להניח הנקבה לא תתחבר. הערה: 2 שעות מתאימה למינים אלה, אבל תסיסנית אחרת עשויה להזדקק ליותר או פחות זמן. </li></ol> 3. ניסויים הזדווגות רווק בן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניסויים זכר אחד, לחזור על פרוטוקול 2 עם שני שינויים: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב 2.3 לא שומר זכרים על מזון צבעוני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב 2.7, להוסיף רק זכר אחד לכל בקבוקון. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב 2.8, להקליט את הזמן לטוס מתווסף לבקבוקון, הזמן צריכים להיות מוקלט מתחילה ההזדווגות וזמן ההזדווגות סיימה. מהערכים אלה, לחשב הזדווגות הצלחה, חביון, ומשך. </li></ol> ניתוח נתונים 4. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בחבילת סטטיסטיקה מתאימה לanaתמוגה. אם הנתונים הם נורמלים ויש רק שני טיפולים, להשתמש במבחני t או לינארי דגם מקביל כללי (GLM). לשני ניסויים גבריים, להשתמש בבדיקות הבינומי או GLM הבינומי שזמינים בכל חבילת סטטיסטיקה בסיסית. הערה: נתוני הדוגמא, כל הניתוחים בוצעו בגרסת 3.0.3 R 19. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדקו את נתוני חביון ההזדווגות ומשך הזדווגות לנורמליות, על ידי התוויית היסטוגרמות תדירות ומשך השהיה עבור כל טיפול 20, ושימוש במבחן לנורמליות כמו שפירו-וילק. אם זה לא נורמלי, להפוך אותו, או להשתמש בנתונים סטטיסטיים שווה ערך שאינו פרמטרית 20. הערה: נתוני דוגמא מהניסויים זכר יחידים לכניסת שינוי עמד בדרישות של נורמליות וסטיות שווה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הנתונים יכולים להיות מנורמלים, מבחני t שימוש לבחון הבדלים בין חביון ההזדווגות ומשך בניסויי הזדווגות זכר היחיד בעת שימוש בשני טיפולים 21. אם טיפולים מרובים משמשים,לנסות ניתוח שונה (ANOVA) 20. אם לא ניתן מנורמלים נתונים, נסה בדיקות הלא פרמטרית שווה 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בדיקות הבינומי לבדיקת השפעה של שני צבעי מאכל או 2 הרדמה CO בהצלחת ההזדווגות של זכרים מתחרים 20. אם טיפולים מרובים משמשים, כמו במקרה עם נתוני הדוגמא, השתמש GLM עם מבנה שגיאה הבינומי 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשני ניסויים גבריים בנתונים הדוגמא, השתמש GLMs עם מבני שגיאה הבינומי. אחד GLM בחן צבע כמשתנה תגובה (בצבע = 0 ולא בצבע = 1) עם מינים, מעמד גז, וטיפול בגז מצויד כvariables.One GLM הסבר בחן CO 2 כמשתנה תגובה (גז = 0 ולא הומתו בגז- = 1) עם מינים, מעמד צבע, וטיפול בגז מצויד. בכל מקרה, לייצר המודל המקסימאלי, ולבצע פישוט מודל המבוסס על AIC 20. </li></ol>

<ol><li>Parker, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+competition+and+its+consequences+in+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Sperm competition and its consequences in insects.</a> Biological Reviews. 45, 525-567 (1970).</li>
<li>Hosken, D. J., Stockley, P., Tregenza, T., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monogamy+and+the+battle+of+the+sexes%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Monogamy and the battle of the sexes.</a> Annual Review of Entomology. 54, 361-378 (2009).</li>
<li>Chapman, T., Liddle, L., John, K., Wolfner, M., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+cost+of+mating+caused+by+males+accessory+gland+fluids%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Female cost of mating caused by males accessory gland fluids.</a> Nature. 373, 241-244 (1995).</li>
<li>Avent, T. D., Price, T. A. R., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-based+female+preference+in+the+fruit+fly+Drosophila+pseudoobscura%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Age-based female preference in the fruit fly Drosophila pseudoobscura.</a> Animal Behaviour. 75, 1413-1421 (2008).</li>
<li>Barron, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthetising+Drosophila.+for+behavioural+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Anaesthetising Drosophila. for behavioural studies.</a> Journal of Insect Physiology. 46, 439-442 (2000).</li>
<li>Moeers, A. O., Rundle, H. D., Whitlock, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+selection+and+bottlenecks+on+male+mating+success+in+peripheral+isolates%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Naturalist%22%5BJournal%5D)">The effects of selection and bottlenecks on male mating success in peripheral isolates.</a> The American Naturalist. 153, 437-444 (1999).</li>
<li>Ashburner, M., Thompson, J. N. The laboratory culture of Drosophila. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAshburner%2C+M+%22The+Genetics+and+Biology+of+Drosophila%22">The Genetics and Biology of Drosophila</a>. Ashburner, M., Wright, T. R. F. 2a, Academic Press. London. 1-109 (1978).</li>
<li>Powell, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPowell%2C+J+%22Progress+and+Prospects+in+Evolutionary+Biology%3A+The+Drosophila+Model%22">Progress and Prospects in Evolutionary Biology: The Drosophila Model</a>. , Oxford University Press. Oxford. (1997).</li>
<li>Moore, A. J., Moore, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Balancing+sexual+selection+through+opposing+mate+choice+and+male+competition%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+of+London%2C+series+B-Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Balancing sexual selection through opposing mate choice and male competition.</a> Proceedings of the Royal Society of London, series B-Biological Sciences. 266, 711-716 (1999).</li>
<li>Hollocher, H., Ting, C., Pollack, F., Wu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incipient+speciation+by+sexual+isolation+in+Drosophila+melanogaster.%3A+Variation+in+Mating+preference+and+Correlation+between+sexes%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution%22%5BJournal%5D)">Incipient speciation by sexual isolation in Drosophila melanogaster.: Variation in Mating preference and Correlation between sexes.</a> Evolution. 51, 1175-1181 (1997).</li>
<li>Perron, J. M., Huot, L., Corrivault, G. W., Chawla, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+carbon+dioxide+anaesthesia+on+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Effects of carbon dioxide anaesthesia on Drosophila melanogaster.</a> Journal of Insect Physiology. 18, 1869-1874 (1972).</li>
<li>Wu, C. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+isolation+in+Drosophila+melanogaster+%3A+A+possible+case+of+incipient+speciation%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+academy+of+sciences%22%5BJournal%5D)">Sexual isolation in Drosophila melanogaster : A possible case of incipient speciation.</a> Proceedings of the National academy of sciences. 92, 2519-2523 (1995).</li>
<li>Melcher, C., Pankratz, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candidate+gustatory+interneurons+modulating+feeding+behaviour+in+the+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">Candidate gustatory interneurons modulating feeding behaviour in the Drosophila brain.</a> PLoS Biology. 3, e305(2005).</li>
<li>Kalaw, V., Drapeau, M. D., Long, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+food+coloring+on+longevity+and+viability+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Dros.+Inf.+Serv%22%5BJournal%5D)">Effects of food coloring on longevity and viability of Drosophila melanogaster.</a> Dros. Inf. Serv. 85, 128-129 (2002).</li>
<li>Friberg, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+perception+of+female+mating+status%3A+its+effect+on+copulation+duration%2C+sperm+defence+and+female+fitness%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Male perception of female mating status: its effect on copulation duration, sperm defence and female fitness.</a> Animal Behaviour. 72, 1259-1268 (2006).</li>
<li>Lizé, A., Price, T. A. R., Heys, C., Lewis, Z., Hurst, G. D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extreme+cost+of+rivalry+in+a+monandrous+species+male+%E2%88%92+male+interactions+result+in+failure+to+acquire+mates+and+reduced+longevity%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+of+London%2C+series+B-Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Extreme cost of rivalry in a monandrous species male − male interactions result in failure to acquire mates and reduced longevity.</a> Proceedings of the Royal Society of London, series B-Biological Sciences. 281, 20140631(2014).</li>
<li>Yeh, S. -D., Chan, C., Ranz, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+differences+in+sperm+competitive+ability+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessing differences in sperm competitive ability in Drosophila.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), e50547(2013).</li>
<li>Holman, L., Freckleton, R. P., Snook, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+use+is+an+infertile+sperm%3F+A+comparative+study+of+sperm-heteromorphic+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution%22%5BJournal%5D)">What use is an infertile sperm? A comparative study of sperm-heteromorphic Drosophila.</a> Evolution. 62, 374-385 (2008).</li>
<li>R: A Language and Environment for Statistical Computing. , R Foundation for Statistical Computing. (2011).</li>
<li>Crawley, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+MJ+%22Statistics%3A+An+introduction+using+R%22">Statistics: An introduction using R</a>. , Wiley-Blackwell. Oxford, UK. (2005).</li>
<li>Dytham, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDytham%2C+C+%22Choosing+and+Using+Statistics%3A+A+Biologist%27s+Guide%22">Choosing and Using Statistics: A Biologist's Guide</a>. , Wiley-Blackwell, Oxford, UK. (2010).</li>
<li>Kaiser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+anaesthesia+by+carbon+dioxide+on+hatching+time+and+weight+at+eclosion+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Drosophila+Information+Service%22%5BJournal%5D)">Influence of anaesthesia by carbon dioxide on hatching time and weight at eclosion in Drosophila melanogaster.</a> Drosophila Information Service. 76, 92-93 (1995).</li>
<li>Rera, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+longevity+and+tissue+homeostasis+by+the+Drosophila.+PGC-1+homolog%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Modulation of longevity and tissue homeostasis by the Drosophila. PGC-1 homolog.</a> Cell Metabolism. 14, 623-634 (2011).</li>
<li>Crumpacker, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+micronized+fluorescent+dusts+to+mark+adult+Drosophila+pseudoobscura%5BTitle%5D)+AND+%22American+Midland+Naturalist%22%5BJournal%5D)">The use of micronized fluorescent dusts to mark adult Drosophila pseudoobscura.</a> American Midland Naturalist. 91, 118-129 (1974).</li>
<li>Jallon, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+few+chemical+words+exchanged+by+Drosophila+during+courtship+and+mating%5BTitle%5D)+AND+%22Behaviour+genetics%22%5BJournal%5D)">A few chemical words exchanged by Drosophila during courtship and mating.</a> Behaviour genetics. 14, 441-478 (1984).</li>
<li>Liimatainen, J. O., Jallon, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+cuticular+hydrocarbons+and+their+effect+on+courtship+in+Drosophila+virilis+and+D.+lummei%5BTitle%5D)+AND+%22Behaviour+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of cuticular hydrocarbons and their effect on courtship in Drosophila virilis and D. lummei.</a> Behaviour Genetics. 37, 713-725 (2007).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

הנתונים אלה מראה כי ההשפעה של ההרדמה CO 2 אינה עולה בקנה בין מינים, עם שניים משלושה מינים מראים השפעה מועטת. התוצאות שלנו מראות תיוג עם צבע מזון הייתה השפעה נמוכה יותר על הצלחת הזדווגות זכר מאשר CO 2 הרדמה לד melanogaster. ניסויים אלה מראים כי צבעים מאכל יכול בקלות ובזול לשמש לזבובי תווית עבור מבחני הזדווגות מעורבים זכרים מרובים. של מיני תסיסנית שלושה מודל נבחן, רק ד &#39; melanogaster הראה השפעה של CO 2 הרדמה על ביצועי הזדווגות במצב תחרותי. בניגוד לכך, אף אחד מהמינים הראה השפעה של אוסף על גז בניסויי הזדווגות אחת במונחים של זמן אחזור הזדווגות, בניגוד לתוצאות קודמות לד melanogaster 5. ההשפעה של תחרות ולכן יכולה להיות הדגשת השפעות עדינות יותר כושר של הרדמה CO 2, שהם רק לזיהויתחת מצבים שבם יש תחרות גברית-גברית. חשיפה באוסף מוקדם ויום אחד לפני המשפט יש לו השפעה שלילית על היכולת של גברים של ד &#39; melanogaster כדי לקבל הזדווגות. חשיפה יומיים לפני המשפט זאת לא הראתה כל השפעה. שני ד פסאודו וד &#39; subobscura לא הראה שום השפעה של חשיפה לגז בכל אחד מהניסויים. הסבר אחד הוא שד melanogaster היה פגיע לחשיפה המוקדמת לCO 2 כי זה חייב להיות שנאסף מוקדם יותר בחיים (0-6 שעות ישנות) מאשר המינים האחרים על מנת להבטיח זכרים בתולה. ד כאן גברי melanogaster בגיל זה עלול להיות רגיש יותר כמו הציפורן של הזבוב עדיין התקשות, בהשוואה למינים האחרים שיש לו יותר לציפורן שלהם להקשיח. באופן כללי, זה תומך ברעיון כי ההשפעות של CO 2 הרדמה הן מינים ספציפיים וחוקרים צריכים הולם לבחון את ההשפעה של מיני היעד שלהם. Currently, רוב העבודה על ההשפעה של CO 2 הרדמה בוצע על melanogaster תסיסנית 5,11,22 ולכן לא יכול להיות מתאים לפנות למינים קרובים אחרים. השיטה לא פולשנית החלופית שהוצגה כדי לבדל את הזבובים היא צבע מזון. תוצאות מצביעות על עבר את הטיפול הזה אין כל השפעה בכל המינים שנבדקו. עם זאת, בעוד שהשימוש בו היה מוצלח במתן סמן זול וגלוי בקלות להבחנה בין יחידים יש לציין שהצבע היה קל יותר להבחין בד פסאודו וד &#39; subobscura מאשר בד המחברים melanogaster. קודמים השתמשו בכמה צבעים (אדום, ירוק וכחול) 4,6. מצאנו צביעה כחולה להיות הקל ביותר להבחין בכל המינים, במיוחד ד פסאודו וד &#39; subobscura. שימוש במספר צבעים שעלולים היה לאפשר ניסויים מורכבים יותר עם לנשור רבים מסומן בנפרדs. עם זאת, בדיקות ראשוניות של צבעים שונים הן חיוניות, כמו כמה צבעים מאכל לא מצליחים לצבוע את הזבובים, אולי מתעכלים כאשר הוא נצרך. צבעים אחרים יכולים להיות השפעה רעילה ולהפחית הישרדות של הזבובים, ויש להימנע 14). שיטות צביעת מזון חלופיות באמצעות כתמים יקרים יותר יש גם שימשו לבחינת שלמות מעיים לד melanogaster 23. אלה עשויים לספק חלופה, אם כי יקרים יותר, שיטת צביעת 23. שיטת הצבע היא מהירה כמו CO 2 גזיר אגף כפי שניתן לאחסן זבובים על מזון צבוע מאוסף. הספיגה של המזון הייתה מהירה (~ 3 שעות), כך O האחסון / N על מזון צבעוני יהיה גם מספיק כדי לסמן זבובים, המשמש במחקרים אחרים 6. עם זאת, משך הזמן של הצביעה הוא קצר יחסית (~ 4 - 5 שעות) בהשוואה לחיתוך כנף (קבוע) או אבק ניאון לציון (10 - 12 ימים) 24. כמיני דרוזופילהלהשתנות במראה, צבעים שונים יהיו פחות או יותר יעיל למינים שונים, וכפי שכמה זנים (למשל, מוטציות נוק-אאוט) יכולות להיות חשופות לשינויים בדיאטה, כל שימוש בצבע דורש בדיקה ראשונית של האפקטיביות שלה במיוחד אם כבר חשיפה ארוכת לצבעים יכולה להיות רעילה 14. בניגוד למחקר של Kalaw et al. 14, לא מצאנו תמותה משמעותית לאחר האחסון במשך ימים רבים על מזונות צבעוניים לד melanogaster (3 ימים), ד &#39; פסאודו (5 ימים), או ד &#39; subobscura (7 ימים), ככל הנראה בשל ההבדל בצבע משמש. השלב הקריטי לשימוש מוצלח של טכניקת הצבע הוא צעד 1.5, אימות שהצבע שנבחר עובד היטב עם המינים ומתח בשימוש. טכניקה חלופית כרוכה החלת אבק בצבע לצד החיצוני של הזבוב לפני השימוש בניסויי שדה 24. שיטה זו נעשתה שימוש למעקב אחר אנשים בt בשל השדהo משך סימון והקלות המונית לציון טס 24. למרות שיש לנו באופן מפורש שנבדקו בשיטה זו בניסויי הזדווגות, זה יהיה חשוב לבחון תופעות שיכול להיות לי אבק על החושים החשובים בהזדווגות, במיוחד ב -25 דרוזופילה, 26. במינים, לעומת זאת, שבו צביעת מעיים אינה אפשרית, שיטות אלה יכולים להיות מתאימות. לסיכום מצאנו כי בשתיים משלושת המינים שנבדקו (ד &#39;פסאודו-וsubobscura ד) לא הייתה השפעה של כל אחד מצאה CO 2 הרדמה או צבעי מאכל על יכולת הזדווגות של זכרים. לד melanogaster השפעה שלילית של CO 2 הרדמה זוהתה, אך צבעי מאכל לא השפיעו על הזדווגות הצלחה במין זה. בסך הכל, בשיטת הצבע מספקת שיטה לא פולשנית פשוטה וזולה לזיהוי תסיסנית פרט שהוא שווה ערך או טוב יותר מאשר שיטות שדורשות CO 2 הרדמה. זהסביר להניח בשיטה זו תעבוד על פני מגוון של מינים.

בעשרות השנים האחרונות יש כבר עניין גובר באופן מיני בחירה ותחרות בין הזכרים השפעה על האבולוציה 1,2. ניסויים בהתנהגות חיזור שיחקו תפקיד חשוב בפיתוח ובדיקת תאוריות של ברירה מינית 3,4. במינים של סוג מסוימים דרוזופילה, מחקר באמצעות, תרם רב להבנה של בחירה והתנהגות מיניות. עם זאת, חשוב לבדוק האם טכניקות נפוצות עשויות באופן מלאכותי להטות את התוצאות של ניסויי הזדווגות סטנדרטיים 5,6. אלחוש משמש לעתים קרובות לטיפול וזיהוי בניסויים 7. לדוגמא, זבובים נאספים בדרך כלל לפני ההזדווגות, או מיון לגנוטיפים או טיפולים ניסיוניים באמצעות פחמן דו חמצני הרדמה (CO 2). בניסויים שבם שני אנשים או יותר צריכים להיות מכובדים, הוא מנהג נפוץ לְאַלחֵשׁ flies וחלק קליפ של האגף מעל לזהות כל קבוצה בודדת או טיפול 5,8. זה חיוני, עם זאת, כדי להבין כיצד CO 2 ישפיע טיפול על התנהגות. ההשפעה של CO 2 הרדמה נבדקה בדרוזופילה melanogaster שבן גברים נחשף ל- CO 2 לקחו באופן משמעותי יותר להזדווג וכולל הייתה הצלחת הזדווגות נמוכה מזכרים או זכרים-מורדם אינם מורדמים באמצעות חשיפה ל5 קרים. השפעה זו נצפתה גם כאשר ההרדמה יושמה ביום של הניסוי וכאשר זבובים קיבלו יום אחד להתאושש. עם זאת, מחקר זה היה מוגבל בניסויי בחינה היחידה שבו זכר יחיד שהוצג לכל נקבה 5. תרחיש מציאותי יותר הוא לנקבה להיתקל זכרים מרובים 9,10, המאפשרת תחרות בין זכרים, שעשוי לאפשר זיהוי של הפסדים עדינים יותר של כושר גברי עקב הרדמה. השימוש בהרדמת CO 2 גם להיותen נמצא להפחית פוריות ואריכות ימיו של ד &#39;למבוגרים melanogaster כאשר הם נחשפים זמן קצר לאחר eclosion, כמקובל בעת איסוף בתולה טס 11. חלופה ל- CO 2 הרדמה היא לסמן זבובים על ידי האכלה להם אוכל בצבע עם צבע 4,6,10,12,13. צבע זה נכנס למעיים של הזבוב וגלוי דרך הבטן, המאפשר זבובים צבעוניים כדי להבחין בין זבובים צבועים, או מזבובים שכותרתו עם צבע שונה. שיטות שונות בכיצד ניתן ליישם את זה: להתווסף ישירות למזון 12, באמצעות שמרים משלימים להדביק צבוע 6, או באמצעות חשיפה לרומן צבוע מצע מזון 13. טכניקות לציון אלה מופיעים להראות שום השפעה על ביצועי 4,6 הזדווגות. עם זאת, נייר ישירות בוחן את ההשלכות של אותו צבע מאכל על מבוגר ד melanogaster מצא הפחתה משמעותית בתוחלת חיים 14. העבודה קודמת התמקדה גם ALMost כולו על ד &#39; melanogaster, הן בנוגע להשפעות של CO 2 הרדמה 5,11 וצבע מאכל 14 שיטות. נכון לעכשיו, יש מעט מידע על איך CO 2 הרדמה או השימוש בצביעת מעיים משפיעה על התנהגות החיזור של דרוזופילה אחרת. המחקר הבא מעריך את ההשפעה של CO 2 הרדמה על התנהגות החיזור של שלושה מינים של דרוזופילה (melanogaster ד, ד &#39;פסאודו, וsubobscura ד). ההשפעה של איסוף זבובים על CO 2 נבדקה בשני שני ניסויי הזדווגות זכר אחד ו. ההשפעה של CO 2 נמצאה גם לגוון בד melanogaster 5 ותקופות זמן אחזור כל כך שונות בין החשיפה ל- CO 2 והזדווגות נבדקו. אלטרנטיבה לציון שיטה לגזיר הרדמה ואגף: השימוש בצבעי מזון להכתים את הזבובים גם העריכו.

<table><tbody><tr><td>צינורות פלסטיק</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>TWT-200-061G</td><td>צינורות אחרים עשויים להתאים, אולם עליהם להתאים לקצה פיפטה של 1 מ"ל.</td></tr><tr><td>רשת עדינה</td><td>כל סדקית</td><td></td> - <td>רשת וילון עדינה מתאימה</td></tr><tr><td>קצות פיפטה 1 מ"ל</td><td>VWR</td><td>83007-376</td><td>מותגים שונים של קצות פיפטה יתאימו</td></tr><tr><td>בקבוקוני פלסטיק</td><td>Sarstedt</td><td>58.49</td><td>ניתן להשתמש גם בבקבוקונים או בקבוקים גדולים יותר.</td></tr><tr><td>כדורי כותנה</td><td>לואיס פתרונות רפואיים</td><td>28170</td><td>גודל הכותנה ישתנה בהתאם לגודל הבקבוקונים המשמשים</td></tr><tr><td>צבע מאכל</td><td>כחול Thesugarcraftcompany-צבעי</td><td></td> <td>צבע ומותגים אחרים יכולים להיות בעלי תוצאות משתנות.</td></tr><tr><td>CO2 טנק</td><td>BOC</td><td>BOC 40VK</td><td></td></tr><tr><td>סמני שארפי</td><td>Steadtler</td><td>Lumocolor 313 S</td><td>ניתן להשתמש בצבעים שונים, אך Lumocolor S נותנים שילוב מצוין של עמידות ועדינות</td></tr><tr><td>שעון עצר</td><td>Salter</td><td>SL3920</td><td>כל שעון עצר עם תצוגה דיגיטלית טובה יהיה בסדר</td></tr></tbody></table>

צביעת חרקים למבחני התנהגות: התנהגות חיזור של הרדים<em&gt; דרוזופילה</em

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

ניסויי הזדווגות באמצעות תסיסנית תרמו רב להבנה של בחירה והתנהגות מיניות. ניסויים לעתים קרובות דורשים שיטות פשוטות, קלה וזולה להבחין בין פרטים במשפט. טכניקה סטנדרטית לכך היא CO 2 הרדמה ולאחר מכן תיוג או אגף גזיר כל זבוב. עם זאת, זה פולשני והוכח משפיע על התנהגות. טכניקות אחרות השתמשו בצבע לזהות זבובים. מאמר זה מציג שיטה פשוטה ולא פולשנית לתיוג תסיסנית המאפשרת להם להיות מזוהים בנפרד בתוך ניסויים, באמצעות צבע מאכל. שיטה זו משמשת בניסויים שבו שני גברים להתחרות להזדווג עם נקבה. צביעה אפשרה זיהוי מהיר וקל. היה, עם זאת, כמה הבדל בכוחו של הצבע על פני שלושת המינים שנבדקו. הנתונים מוצגים מראים את הצבע יש השפעה נמוכה יותר על התנהגות חיזור מאשר CO 2 בmelano דרוזופילהגסטר. ההשפעה של ההרדמה CO 2 מוצגת לסמוך על המינים של דרוזופילה, עם ד &#39; פסאודו וד &#39; subobscura מראה שום השפעה, ואילו ד הזכרים melanogaster הפחיתו הצלחת הזדווגות. שיטת הצבע המוצגת הינה ישימה למגוון רחב של עיצובים ניסיוניים.

שני ניסויי הזדווגות זכר - ההשפעה של CO 2 הרדמה על התנהגות חיזור המודל הטוב ביותר מצא להסביר את השונות בהשפעה של CO 2 הרדמה הכיל מינים כגורם (עם ד &#39;פסאודו-וsubobscura ד התמזגו כפי שהם לא הראו הבדלים בין אחד לשנייה). בד פסאודו וד &#39; subobscura לא הייתה השפעה משמעותית של CO 2 הרדמה על הצלחה בשני ניסויי הזדווגות זכר (Z = 1,589 0.087, P = .931). לד melanogaster, גברים נחשפו ל- CO 2 הרדמה היו הצלחה נמוכה באופן משמעותי הזדווגות (Z1,589 = 2.467, P = 0.014). הייתה שם גם אינטראקציה מובהקת בין מינים וטיפול (χ 2 1,589 = 6.83, P = 0.009) עם השפעה גדולה יותר שיראו כאשר ד melanogaster נחשף לגז באוסף או יום 1 לפני ניסויים (טבלת 1). Howevאה, ד &#39; זכרים melanogaster נחשפו ל- CO 2 יומיים לפני המשפט הניסיוני לא הראה השפעה של CO 2. שני ניסויי הזדווגות זכר - האפקט של צביעה במעיים על התנהגות חיזור פישוט מודל לא הראה כל השפעה משמעותית של צבע מאכל שנמצאה עבור כל אחד משלושת המינים (P&gt; 0.1). כאשר טיפול או מעמד גז נכלל בניתוח אלה גם לא היו משמעותיים (P&gt; 0.1). הפרופורציות של הזדווגויות מוצלחות לזבובים בצבע על פני טיפולים מוצגות בטבלה 2. ההבדל בצבע בין הזבובים המשיך צבעוני ומזון צבוע שניתן לראות באיור 1. העצמה של צבע מאכל המעיים הייתה גדולה יותר בד פסאודו וד &#39; subobscura מאשר בד melanogaster. ניסויי הזדווגות בודדים - ההשפעה של שימוש CO 2 הרדמה על מ &#39;ating התנהגות לא היה הבדל בהשהית הזדווגות לכל אחד משלושת המינים כאשר CO 2 הרדמה שימשה לאיסוף לאחרונה יצא מבוגרים. נמצאה השפעה של משך הזדווגות בד subobscura כאשר הוא נחשף ל- CO 2 יומיים לפני ניסויי הזדווגות (איורים 2 ו -3; טבלה 2). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig1.jpg" /> צילום איור 1. מראה בקבוקים של צבע וללא צבעוני Fly מזון () והכוח של מעיים סוג צבע בזכר ד Subobscura (B). <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig2.jpg" /> רווח סמך איור 2. Mean ו -95% להזדווגות Latency למיני שלושת נחקרו בניסויי גבר רווק, כאשר הזכרים היו לטשטשד (ברים אור) או (ברים אפלים) לא מורדמים כאשר נאסף כבתולות לפני בגרות מינית. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig3.jpg" /> איור 3. Mean ורווח סמך של 95% עבור משך הזדווגות למיני שלושת נחקרו בניסויי גבר רווק, כאשר הזכרים היו מורדמים (ברים אור) או לא מורדם (ברים אפלים) כאשר נאספו כבתולות לפני בגרות מינית. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> טיפול </td><td> מינים </td><td> ניסויי מס &#39; </td><td> זבובי מס &#39;צבעוניים שהזדווגו </td><td> p-value </td><td> זבובי מס &#39;הגז שהזדווגו </td><td> p-value </td></tr><tr><td rowspan="3"> אוסף בCO 2 </td><td> ד מל </td><td> 73 </td><td> 36 </td><td> 1 </td><td> 27 </td><td> .0344 </td></tr><tr><td> PSE ד </td><td>79 </td><td> 41 </td><td> .8221 </td><td> 44 </td><td> .3682 </td></tr><tr><td> תת ד </td><td> 71 </td><td> 40 </td><td> .3425 </td><td> 33 </td><td> .6353 </td></tr><tr><td rowspan="3"> נחשף ל- CO 2 18 שעות לפני </td><td> ד מל </td><td> 57 </td><td> 28 </td><td> 1 </td><td> 19 </td><td> .0163 </td></tr><tr><td> PSE ד </td><td> 65 </td><td> 32 </td><td> 1 </td><td> 31 </td><td> .8043 </td></tr><tr><td> תת ד </td><td> 68 </td><td> 38 </td><td> .3961 </td><td> 35 </td><td> .9036 </td></tr><tr><td rowspan="3"> נחשף ל- CO 2 2days. </td><td> ד מל </td><td> 56 </td><td> 19 </td><td> .0222 </td><td> 32 </td><td> .3497 </td></tr><tr><td> PSE ד </td><td> 70 </td><td> 32 </td><td> .5504 </td><td> 33 </td><td> .7202 </td></tr><tr><td> תת ד </td><td> 56 </td><td> 29 </td><td> .8939 </td><td> 26 </td><td> .6889 &lt;/ Td&gt; </tr></tbody></table> טבלה 1. תוצאות משני ניסויי זכר בחירה בכל המינים הטיפולים ונבדקו. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מינים </td><td> תכונה </td><td> df </td><td> t-ערך </td><td> p-value </td></tr><tr><td rowspan="2"> ד melanogaster </td><td> חביון </td><td> 58 </td><td> 1.379 </td><td> 0.174 </td></tr><tr><td> משך </td><td> 58 </td><td> 1.243 </td><td> 0.221 </td></tr><tr><td rowspan="2"> ד &#39;פסאודו- </td><td> חביון </td><td> 109 </td><td> .419 </td><td> .676 </td></tr><tr><td> משך </td><td> 109 </td><td> .436 </td><td> .664 </td></tr><tr><td rowspan="2"> subobscura ד </td><td> חביון </td><td> 83 </td><td> 0.098 </td><td> .922 </td></tr><tr><td> משך </td><td> 83 </td><td> 1.767 </td><td> 0.081 </td></tr></tbody></table> טבלת 2. תוצאות מניסויים יחיד הזדווגות בוחנים את ההשפעה של האוסף בCO 2 אלחוש על Latency ההזדווגות ומשך. בדיקות בוצעו על שלושה מינים של דרוזופילה (melanogaster ד, ד &#39;פסאודו-וsubobscura ד).

פרוטוקול זה מתאר דרך פשוטה וחסכונית לזהות באופן אינדיבידואלי דרוזופילה או חרקים אחרים. נתוני הדגמה החוקרים את הצלחת ההזדווגות על פני שלושה מינים של דרוזופילה מראים כי שיטה זו דומה או טובה יותר מהשימוש בהרדמת CO2.

Mating experiments using Drosophila have contributed greatly to the understanding of sexual selection and behavior. Experiments often require simple, easy ...

המטרה הכללית של הליך זה היא להפוך חרקים למובחנים באופן חזותי זה מזה בדרך לא פולשנית, לצורך זיהוים בניסויים התנהגותיים. הדבר מושג תחילה על ידי צביעה נראית של פני השטח של מזון דרוספילה רגיל בתוך מבחנה סטנדרטית לזבובים, באמצעות מספר טיפות של מאכל צבע. לאחר מכן, מוסיפים את הזבובים למבחנה למשך שלוש שעות, שלב שבו הדרוספילה צריכה להפגין צביעה חזקה של הבטן.ניתן לבצע ניסויי הזיווג, למשל, כדי לבחון אם נקבות מוצאים זכרים שנצבעו בצבע מסוים אטרקטיביים יותר. בסופו של דבר, טכניקת צביעה זו היא דרך מהירה, פשוטה ולא פולשנית לסמן חרקים לצורך זיהוי ניסיוני קל. היתרון המרכזי בשימוש בטכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון הסרה של חלק מכנף הזבוב, הוא שהיא מהירה יותר, פחות פולשנית וסבירה פחות להשפיע על התנהגות עוקבת.שיטה זו עשויה להועיל במגוון רחב של ניסויים שבהם חשוב לזהות פרטים או קבוצות של זבובים. היא פשוטה מספיק כדי לשמש בניסויים בסיסיים בבתי ספר או במכללות. את הטכניקה זו ידגימו Rudy Verse Bo ו-Chloe Hayes, שניהם דוקטורנטים כאן באוניברסיטת ליברפול. לאחר שהמזון נמזג והתגבש, התחילו בהוספת 0.5 עד 1 ml של צבע מאכל כחול על גבי המזון, והפיצו את הצבע על פני כל השטח של הבקבוקון.לאחר מכן, אחסנו את המזון בטמפרטורה של 4 °C למשך יומיים כדי לאפשר לתזונה להיספג בשכבה העליונה של המזון. לאחר מכן, העבירו את הזבובים אל המזון בהתאם לצרכי הניסוי. בתוך יום אחד, ניתן יהיה להבחין בקלות בין הזבובים שקיבלו את התזונה לבין הזבובים שלא נצבעו, כדי לבצע ניסוי זיווג עם הזבובים הצבועים.השתמשו בשואב (aspirator) להעברת זכרים בודדים שאינם זיווגים למבחנות פלסטיק סטנדרטיות בגודל 75 על 20 מילימטר המכילות 20 מיליליטר של מזון. במידה ומבצעים ניסוי זיווג עם שני זכרים, העבירו מחצית מהזכרים בכל קבוצת טיפול למבחנות עם מזון צבוע. לאחר מכן, העבירו נקבות שזה עתה בקעו למבחנות מזון טריות בקבוצות של 10.כעת אפשרו לשני המינים להגיע לבגרות גיל ההזדווגיות בטמפרטורה המתאימה למין. כאשר ה-drosophila מוכנים, חשפו את הזכרים הניסיוניים לטיפול הרצוי. לדוגמה, ניתן להרדים את הזבובים האחרים באמצעות פחמן דו-חמצני ולסמן את הבקבוקונים כדי לזהות הן את הטיפול והן את מצב הצבע של הזבובים ביום שלפני הניסוי.העבירו את הנקבות למבחנות בודדות המכילות 20 milliliters של מזון כדי להסגיר את הזבובים למבחנת ההשבחה, וסמנו את המבחנות בתוויות ניטרליות כדי לבצע עיוורון לניסוי. לאחר מכן, הוסיפו זכר אחד או שניים לכל מבחנת השבחה המכילה זבוב נקבה בודד, לפי הצורך.התחילו את ניסוי ההמating במקביל להדלקת האורות באינקובטור עבור שני ניסויי הזיווג של זכרים. ודאו שכל זכר הוא מקבוצת טיפול שונה ושתזבוב אחד מציג צביעה של הבטן. רשמו את הטיפול ואת הצבע של כל זבוב זכר.אם ההזדווגות מתרחשת בתוך שעתיים, רשמו את מצב הקוביות של הזכר המזדווג עבור ניסויי הזדווגות של זכר בודד. רשמו את הזמן שבו ההזדווגות מתחילה ומסתיימת. לאחר מכן, חשבו את נתוני השיהוי להצלחת ההזדווגות ואת משכה עבור הניסוי.המודל הטוב ביותר שנמצא להסבר השונות בהשפעת הרדמה בדו-תחמוצת הפחמן כולל את המין כגורם. לדוגמה, בניסויים מייצגים אלה, הרדמה בדו-תחמוצת הפחמן לא הפגינה השפעה מובהקת על הצלחת ההזדווגות של drosophila.זבובים מסוג Pseudo obscure ו-drosophila sub obscure בשני ניסויים של זכרים עבור drosophila melanogaster; עם זאת, נצפתה הצלחת הזדווגות נמוכה משמעותית עבור זכרים שנחשפו להרדמה בפחמן דו-חמצני, עם השפעה גדולה עוד יותר כאשר drosophila melanogaster נחשפו לגז בעת האיסוף או יום אחד לפני הניסויים. לא נצפו הבדלים משמעותיים בהזדווגות בזבובים שצבעוהם במזון עבור מין כלשהו משלושת המינים, וכן לא נמצא השפעה לשילוב הטיפול בניתוח או למצב ההזדווגות של החרקים בניסויי הזדווגות בודדים. לא נמצא הבדל בהזדווגות.נצפתה השהיה בכל אחד משלושת המינים כאשר נעשה שימוש בהרדמה באמצעות פחמן דו-חמצני לאיסוף בוגרים שבקעו לאחרונה. השפעה על משך ההזדווגות נראתה רק אצל זבובים מסוג drosophila sub obscure כאשר נחשפו לפחמן דו-חמצני יומיים לפני ניסויי ההזדווגות. לאחר צפייה בסרטון זה, אמורה להיות לכם הבנה טובה כיצד להשתמש בצביעה של המעי כטכניקה לא פולשנית לסמון הזבובים שלכם במהלך הניסויים.בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לבחון כל השפעה של הצבע הנבחר על המין הנחקר. צבעים מסוימים עשויים להיות רעילים, וצבעים מסוימים עשויים להשפיע ישירות על הצלחת ההזדווגות. לדוגמה, צבע מאכל אדום עשוי להיות מועדף במינים מסוימים.במקרה זה השתמשנו בטכניקת צבע זו כדי להבדיל בין זבובים בניסויי זיווג תחרותיים. עם זאת, ניתן להשתמש בה גם במגוון ניסויים אחרים שבהם נדרש זיהוי אינדיבידואלי של הזבובים, כגון בדיקות להערכת תוקפנות, הגנה טריטוריאלית, פעילות העדפת מזון או התנהגויות חברתיות.

dyeing-insects-for-behavioral-assays-mating-behavior-anesthetized

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

תסיסנית melanogaster היא מערכת גנטית התנהגותית מודל צייתן, שבו נעשה שימוש כדי להבין את הבסיס המולקולרי התאי של תהליכים ביולוגיים רבים חשובים יותר ממאה שנים 1. תסיסנית נוצלה היטב כדי לקבל תובנות לתוך הבסיס הגנטי של ההתנהגות במהירות הבזק.

שיטות Assay תסיסנית התנהגות

במאמר זה וידאו, אנו מתארים assay אוטומטי כדי למדוד את ההשפעה של רעב או שובע על התנהגות חיפוש מזון תלויה בריח הפירות המבוגרים לעוף melanogaster דרוזופילה.

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב דרוזופילה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לכימות ההימנעות של אנשים לחוצים. פרדיגמה זו היא עוצמתית אך ידידותית למשתמש וניתן להשתמש בה כדי להעריך את ההשפעה של גנים וסביבה על סוג אחד של אינטראקציה חברתית ב-Drosophila melanogaster.

Assay הפשוט לכימות חברתיות הימנעות ב Melanogaster דרוזופילה

פרוטוקול זה מתאר טכניקה assay להרחבה אישית assay בתסיסנית כי התשואות נתונים חזקים, כמותיים כדי למדוד התנהגות הטיפוח. השיטה מבוססת על השוואת ההבדל הצטברות צבע על גופים של חיות מטופחות לעומת מטופח על פני תקופה של זמן.

כימות של תסיסנית התנהגות Grooming

מאמר זה מתאר assay התנהגותיים המשתמש כונן הזדווגות זכר תסיסנית melanogaste r ללמוד מוטיבציה. באמצעות שיטה זו, חוקרים יכולים לנצל טכניקות neurogenetic זבוב מתקדם לחשוף את המנגנונים הגנטיים, מולקולריים והמכשירים סלולריים העומדים בבסיס המוטיבציה הזו.

מדידת כונן מזווג סירוס ועיקור במאלה<em&gt; תסיסנית</em

אנו מדגימים assay לנתח את רמזים סביבתיים וגנטיים המשפיעים על התנהגות ההזדווגות של זבוב הפירות תסיסנית melanogaster .

שיטה לבחינת ההשפעה של רמזים סביבתיים על התנהגות ההזדווגות ב<em&gt; תסיסנית מלנוגאסטר</em

פרוטוקול זה מתאר לימוד תסיסנית זיכרון assay שנקרא מיזוג חיזור. זה assay קלאסי מבוסס על צמצום התנהגות החיזור הגברי לאחר דחייה מינית על ידי נקבה לא נקלט מראש. צורה טבעית זו של גמישות התנהגותית יכולה לשמש לבחינת למידה, זיכרון לטווח קצר וזיכרון לטווח ארוך.

תסיסנית חיזור התניה כמדד למידה וזיכרון

פרוטוקול זה מתאר כיצד להפוך תא תצפית התנהגות Drosophila מבוגר פשוט, וכיצד לצלם בהבחנה גבוהה / קטעי וידאו של המורפולוגיה או התנהגות של סוגים שונים של זבובי פירות בתא התצפית באמצעות שיטות פשוטות יחסית ובמחיר סביר.

מערכת הדמיה מתכווננת בחדות גבוהה למחקרים התנהגותיים של מבוגרים Drosophila

הפרעת הספקטרום האוטיסטי (ASD) קשורה להתנהגות חברתית ותקשורתית לקויה ולהופעתה של התנהגות חזרתית. לצורך חקר הקשר בין גנים אוטסיים וליקויים התנהגותיים במודל דרוזופילה , מתוארות במאמר זה חמש פרדיגמות התנהגותיות להערכת ריווח חברתי, תוקפנות, חיזור, טיפוח והתנהגות הרגלה.

פרדיגמות להערכה התנהגותית במודל דרוזופילה של הפרעת הספקטרום האוטיסטי

מאמר זה מציג שיטות למניפולציה אופטוגנטית ב-Drosophila melanogaster, תוך שימוש ב-CsChrimson ו-GtACR2 כדי להפעיל ולהשתיק נוירונים ספציפיים. ארבעה ניסויים מתוארים לשימוש באופטוגנטיקה כדי לחקור התנהגויות תרמוטקטיות וטעמיות, ומספקים תובנות לגבי המנגנונים העצביים הבסיסיים השולטים בתהליכים אלה.

מבחנים התנהגותיים למניפולציה אופטוגנטית של מעגלים עצביים בדרוזופילה מלנוגסטר

הפרוטוקול מציג שיטה בעלת תפוקה גבוהה וחסכונית להערכת רעילות עצבית בזבוב הפירות באמצעות כימות תפקוד לקומוטורי כחלופה למודלים מסורתיים של יונקים. מטרתו להעריך את ההשפעות הנוירוטוקסיות של תרכובות פרמצבטיות, גורמים סביבתיים או שינויים גנטיים באמצעות מודל רגיש, ניתן לשחזור וחיובי מבחינה אתית.

ניתוח התנהגותי של תפקוד לקומוטורי ב-Drosophila melanogaster כקריאה לרעילות עצבית

למד שיטת צביעה לא פולשנית לזיהוי פרטים בניסויים התנהגותיים בדרוזופילה. טכניקת צביעת המזון מאפשרת מעקב אחרי זכרים צבועים בניסויי חיזור ללא השפעה שלילית על ההתנהגות.

צביעת חרקים למבחני התנהגות: התנהגות חיזור של הרדים

גלה סרטונים נוספים