Name: שימוש בelectroretinogram כדי להעריך את התפקוד ברשתית מכרסמים וההשפעות המגנות של האיבר המרוחק איסכמי אכשור קד (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 34 s
Description: למדו להעריך תפקוד רשתית בעכברושים באמצעות אלקטרורטינוגרם (ERG) ולהדגים את ההשפעות המגנות של איסכמיית איבר מרוחקת על תאי הרשתית לאחר חשיפה לאור.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים לסיוע של הגב &#39;שרון Spana בניטור מכרסמים, טיפול וניסויים. תמיכה במימון דוקטורט כבר ניתן על ידי אוניברסיטה של ​​סידני ואוסטרלי מרכז מחקר למצוינות בחזון.

פרוטוקול זה כדלקמן הנחיות טיפול בבעלי החיים של אוניברסיטת סידני. 1. אלקטרודות ביצוע <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבנות את האלקטרודה החיובית (אחד שייצור קשר עם הקרנית) מאורך קצר (5 סנטימטרים) של חוט פלטינה 1-2 מ&quot;מ קוטר. אופנה אותו ללולאה כמה מ&quot;מ קוטר. חבר לולאה זה ליתרון קונבנציונלי, מספיק זמן כדי להגיע לשלב הקלט של המגבר שלך (ראה איור 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבנות את האלקטרודה השלילית (שילך בפיו של בעל החיים) באמצעות Ag / AgCl גלולה 1-2 מ&quot;מ בקוטר, קשור גם ליתרון אמנה (ראה איור 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאלקטרודה התייחסות (שתיכנס לעכוזו של בעל החיים), להשתמש במחט מזרק נקייה (23 G), קשורה גם ליתרון של אורך המתאים (ראה איור 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באופן אידיאלי, להשתמש בכבלים שלוש-עופרת מסופקים על ידי יצרני מכשיר, להתחבר שלוש אלקטרודות (U החיובי94; קרנית, שלילי → פה, התייחסות → עכוז) למגבר. </li></ol> 2. חיבור וכיול של גירוי האור וERG סט-אפ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צור (או אתר) מעבדה הקלטה קטנה, אשר יכול להתבצע כהה. לצייד עם שניהם אור מעל לספסל עשה אדום או ראש-מנורה אדומה או או. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש מטר סוויטה דה לוקס כדי לאשר שהארת האור האדומה מגיעה עין של החולדה במהלך ההתקנה אינו עולה על לוקס 1. הערה: מסנן צפיפות ניטראלי יכול לשמש כדי להפחית מנורת בהירות והמקור של אור המנורה חייב במיוחד פולט אור אדום. adaption הכהה תהיה בסכנה אם מקורות אור פולטי אורכי גל נמוכים (גלוי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאטום את כל האור התועה שנכנס למעבדה ההקלטה (זה לעתים קרובות דורש התמדה עם קלטת אטומה) ולהכין מסנן צפיפות ניטראלי (זה ניתן לרכוש בגיליונות) גדול מספיק כדי להתאים מעל, וכך עמום, כל מסך מחשב יהיה לך ב מעבדה. הערה: אור תועה והאור של מסך יש בם כדי לפגוע בהסתגלות כהה של העין החולדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את המגבר לחומרת רכישת נתונים. חבר מוביל חיובי, שלילי והתייחסות למגבר. ודא שהמחשב ויחידת אספקת חשמל Ganzfeld LED מחובר היטב למקור קרקע. הערה: מעבדות חלקם מתמחים נקודות הארקה, מחוברים לקרקע בניין; צינור מים הוא אלטרנטיבה יעילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכייל את מקור אור LED עם מד קרינת מחקר באיכות. תקן החיישן של המטר במצב שבו העין של החיה תהיה ממוקמת בניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תכנית נוריות Ganzfeld להפעיל פרוטוקול ERG שדה מלא עם עליות צעד חכם באנרגיית הבזק, הבזק משך, הבזק חזרה וזמן בין הבזקים, מכונה מרווח interstimuls (ISI), הגדרות. לדוגמא פרוטוקול מלא שדה ראה טבלה 1. הערה: השדה מלא הבזקי ERG להגדיל מהבזקים עמומים חוזר על עצמו לbהבזקים תקין באופן חכם צעד. תכנית הבזק התאום הבאה על מפרוטוקול השדה המלא ומאפשרת בידוד של תגובות מוט וחרוט. </li></ol> 3. יום לפני הניסויים ERG <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dark להסתגל Sprague-Dawley חולדות לשעה 12 לפני ההקלטה. זה נוח לעשות את זה במעבדה ההקלטה, פעם אור תועה כבר בוטל. </li></ol> 4. יום של ניסויים ERG <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לארגן את החיה להיות בעדינות מחוממת בעת ההקלטה. אנו משתמשים בפלטפורמת מתכת אור הבנויה כך שהראש של החיה יכול לנוח בנקודה הנכונה בכניסה לGanzfeld. יש פלטפורמת צינורות מובנים שבאמצעותו אנו לשאוב מים שחומם מראש ל 40 מעלות צלזיוס באמבט מים. הערה: הניסיון מראה שזה שומר על טמפרטורת הליבה של החיה על 37 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את העכברוש בתנאים חשוכים. שיא במשקל ולהפוך את קטמין הנכון (60 מ&quot;ג / קילוגרם) ו xylazine (5 מ&quot;ג / קילוגרם) במינון. לרסן את העכברוש gently ולהזריק חומר ההרדמה intraperitoneally. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערה זמן הזרקה. ברגע שבעלי החיים הוא לא מודע (בדרך כלל תוך 5 דקות) לבדוק לעומק של הרדמה על ידי צביטה קלה כרית רגל אחת, כדי לראות אם תגובת רפלקס היא הווה. עדיף לחכות עד שרפלקס זה הוא נעדר או חלש, לפני שתמשיך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל טיפה אחת של אטרופין ועוד proxmethacaine לקרנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך באורך 10 סנטימטר של חוט שחור. לעשות לולאה עם קשר פשוט ולהחליק את הלולאה מעל קו המשווה של העין. הדק אותו מעט; ההשפעה היא למשוך את גלגל העין מעט קדימה, עם לחץ מינימאלי. הדבר זה שומר את הקרנית ברורה מהעפעפיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טיפות עיני קרבומר יחולו על פני השטח של הקרנית. ודא קרבומר נשאר על פני השטח של קרנית ולא לשפוך על העפעפיים או הפנים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מצעים סופגים על גבי פלטפורמה מחוממת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברוש עמדה על המצעים, עם הראש במקום המומלץ בפתיחת Ganzfeld. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> int הכנסבדיקה טמפרטורת ernal לתוך פי הטבעת. בדיקה מאובטחת טמפרטורה בעמדה ידי מקליטה כבל בדיקה לזנב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את האלקטרודה ההתייחסות (מחט 23 G) תת עורי לרגל האחורית, ולהתחבר למגבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את האלקטרודה השלילית (גלולה Ag / AgCl) מאובטח בפה. כדי למנוע זאת מחליקה את הפה, להדביק את ההובלה בחיבור למשטח יציב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את האלקטרודה החיובית על המרכז של הקרנית. באמצעות micromanipulator, להבטיח כי האלקטרודה נוגעת הקרנית בעדינות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טמפרטורת גוף בדוק היא ב37.0-37.5 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שבעלי החיים ממוקם כראוי ואלקטרודות נמצאות במקום, לעטוף את ההתקנה כולה (Ganzfeld ובעלי חיים) עם חומר אטום (לשמר הסתגלות כהה). אנו משתמשים בבד שחור רך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברכישת התוכנה להגדיר בקצב דגימה 2 קילוהרץ עם זמן אוסף של 100-1,000 msec עם 5 אלפיות השניים של דגימה מראש אוסף. הגדר את המסננים לעבור להקה ל1-1,000הרץ ולהבטיח דגימה שמופעל כדי לטעום את התקופה ~ 250 אלפיות השנייה הבא פלאש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את בסיס ההקלטה. זה צריך להיות חופשי של רעש מיותר, אבל להראות קצת רעש מגבר ותנודה בדרכי הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם בסיס תערוכות רעש מיותר, להתחיל פתרון בעיות. רוב הבעיות הקשורות לזליגה בעמדת אלקטרודה, או הארקה. השתמש כלוב פאראדיי כדי להבטיח הקלטות הן ללא רעש מיותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל הבזק בדיקה, 0.4 יומן סקוטי cd.sm -2. גל ERG דומה לאיור 2A אמור להופיע. בתגובות האופייניות המעבדה שלנו לcd.sm -2 הבזק סקוטי 0.4 יומן הם (גל: -474 ± 39 μV וב-גל: 1,512 ± 160 μV, n = 11). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר לבעלי חיים לכהים מחדש להסתגל במשך 10 דקות. זה נוח לשימוש 10 דקות אלה לבדוק שוב את נקודת ההתחלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האישור הבא של אות יציבה להתחיל בהקלטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסוף פגישת ההקלטה, לבדוק שטמפרטורות הגוףיור נשמר. הסר אלקטרודות. מרח את קרם פולימר קרבומר לקרניות. לאפשר לבעלי החיים להתאושש על כרית חום עד שהוא נייד ופעיל באופן מלא, לפני שתחזור לדיור בעלי חיים. </li></ol> 5. איסכמיה מרחוק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע איסכמיה המרוחקת בשני מכרסמים ער או anesthetised. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם בעל החיים מורדמים, להניח אותה על פלטפורמה מחוממת (לעיל) ולהחליק את שרוול מד לחץ דם על החלק העליון של האיבר האחורי-, ברור של הברך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם בעלי החיים המשמשים לטיפולו, ניתן לבצע הליך זה ללא הרדמה; זה דורש שני אנשים. אדם אחד מרסן את החיה בעדינות והשנייה חל שרוול מד לחץ דם ומפעיל את מד לחץ דם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבעלי חיים ער, להשתמש פיסת המגבת ~ 15 סנטימטרים x 30-50 סנטימטר לעטוף בעדינות את החיה, עם hindlimb אחד חינם. הנח את החיה על גבה על (נניח) זרוע השמאל, עם הראש שלו תחוב בין זרועו של בעל ופלג הגוף עליון, ומקוםהשרוול שכתואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את האוויר השרוול ולהבטיח את שסתום לחץ האוויר סגור. לשאוב את השרוול עד 160 מ&quot;מ כספית בבעלי החיים anesthetised, ועד 180 מ&quot;מ כספית בבעלי חיים ער. זה עולה לחץ הסיסטולי (בדרך כלל 140 מ&quot;מ כספית ו -160 מ&quot;מ כספית בהתאמה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשמור על לחצים אלה כנדרש, תוך שימוש במשאבת כף היד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הזמן המתוכנן לאיסכמיה (אנו משתמשים 2 תקופות של 5 דקות מופרדות על ידי 5 reperfusion דקות), להוציא את האוויר בלחץ השרוול על ידי שחרור שסתום לחץ האוויר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אשר את ההשפעה של איסכמיה מרחוק עם בדיקה טמפרטורת עור מחוברת לשודד. טמפרטורת עור בדרך כלל נופלת 32-30 מעלות צלזיוס, במשך 5 דקות ומתאוששת בreperfusion. </li></ol> 6. נזק קל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שחולדות נמצאות בלפני הלילה כהה מותאם, הליך נזק קל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזמן המתאים הבא איסכמיה איבר (בניסויים שלנו ללא דיחוי), כל חיה ממוקמת ביחידות לתיבות פרספקס, wiמים ה ומזון במכלים מבוסס רצפה. הערה: נזק הנגרם אור יכול להתבצע רק בבעלי החיים לבקן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור על אור לבן 1,000 לוקס-מכויל מראש בזמן סטנדרטי (בדרך כלל 09:00) ולשמור על מצב זה למשך 24 שעות. </li></ol> 7. ERG הפקת נתונים וניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרכוש צורות גל בממוצע של ERG. במידת צורך, נכון לתחילת מחקר אינו אפס, על ידי חיסור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את משרעת של הגל (שהוצג באמצע לעוצמות גירוי גבוהות), כהפרש בין המתח הבסיסי והראשון (&lt;30 אלפיות השני חביון) שוקת (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד את משרעת ב-גל כהפרש בין המתח לשיא של הגל והחיובי של הגל הבא, בדרך כלל המתרחש בהשהיה של 80-100 אלפיות שני (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד פוטנציאלי oscillatory באמצעות התמרת פורייה לסנן נתונים 60-235 הרץ, עם להקת מעבר 90 הרץ <sup&gt; 7. אם נדרשה אות פוטנציאל oscillatory המבודדת אז יכולה להיות מופחתים צורת הגל מסונן כדי לאשר את זהותו של השוקת-הגל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזמן הסמוי (חביון) של פסגות a- וב-גל יכול להיות גם אמצעי שימושי (איור 1). השתמש בהבזקי התאום לבודד את תגובת המוט. הפחת את תגובת קונוס (פלאש 2) מהתגובה המעורבת (פלאש 1) כדי לבודד את תגובת המוט (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנרמל עוצמת אור בודדת-גל ואמפליטודות ב-גל (לאחר טיפול / פוסט-טיפול-בסיס) או בממוצע לקבוצות טיפול. עקומות עוצמת תגובת העלילה אמפליטודות הקבוצה וטעייה נגד הבזק אנרגיה. </li></ol>

<ol><li>Arden, G. B., Heckenlively, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArden%2C+GB+%22Principles+and+practice+of+clinical+electrophysiology+of+vision%22">Principles and practice of clinical electrophysiology of vision</a>. , MIT Press. 139-183 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology-London%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> Journal of Physiology-London. 555 (1), 153-173 (2004).</li>
<li>Fortune, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+ganglion+cell+functional+loss+in+rats+with+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Selective ganglion cell functional loss in rats with experimental glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45 (6), 1854-1862 (2004).</li>
<li>Alarcon-Martinez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+and+long+term+axotomy-induced+ERG+changes+in+albino+and+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Vision%22%5BJournal%5D)">Short and long term axotomy-induced ERG changes in albino and pigmented rats.</a> Molecular Vision. 15 (254-255), 2373-2383 (2009).</li>
<li>Lyubarsky, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functionally+rodless+mice%3A+transgenic+models+for+the+investigation+of+cone+function+in+retinal+disease+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Functionally rodless mice: transgenic models for the investigation of cone function in retinal disease and therapy.</a> Vision Research. 42 (4), 401-415 (2002).</li>
<li>Bush, R. A., Sieving, P. A. A PROXIMAL RETINAL COMPONENT IN THE PRIMATE PHOTOPIC ERG A-WAVE. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 35 (2), 635-645 (1994).</li>
<li>Liu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+electroretinographic+oscillatory+potentials+in+normal+and+ROP+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Development of the electroretinographic oscillatory potentials in normal and ROP rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 47 (12), 5447-5452 (2006).</li>
<li>Casson, R. J., Wood, J. P. M., Melena, J., Chidlow, G., Osborne, N. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+ischemic+preconditioning+on+light-induced+photoreceptor+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The effect of ischemic preconditioning on light-induced photoreceptor injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (3), 1348-1354 (2003).</li>
<li>Lawson, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerobic+Exercise+Protects+Retinal+Function+and+Structure+from+Light-Induced+Retinal+Degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Aerobic Exercise Protects Retinal Function and Structure from Light-Induced Retinal Degeneration.</a> Journal of Neuroscience. 34 (7), 2406-2412 (2014).</li>
<li>Grimm, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-induced+erythropoietin+in+the+hypoxic+retina+protects+against+light-induced+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">HIF-1-induced erythropoietin in the hypoxic retina protects against light-induced retinal degeneration.</a> Nature Medicine. 8 (7), 718-724 (2002).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+Methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: Methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 27 (1), 1-44 (2008).</li>
<li>Bayer, A. U., Cook, P., Brodie, S. E., Maag, K. P., Mittag, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+different+recording+parameters+to+establish+a+standard+for+flash+electroretinography+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Evaluation of different recording parameters to establish a standard for flash electroretinography in rodents.</a> Vision Research. 41 (17), 2173-2185 (2001).</li>
<li>Pugh, E. N., Lamb, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPLIFICATION+AND+KINETICS+OF+THE+ACTIVATION+STEPS+IN+PHOTOTRANSDUCTION%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+Et+Biophysica+Acta%22%5BJournal%5D)">AMPLIFICATION AND KINETICS OF THE ACTIVATION STEPS IN PHOTOTRANSDUCTION.</a> Biochimica Et Biophysica Acta. 1141 (2-3), 111-149 (1993).</li>
<li>Breton, M. E., Schueller, A. W., Lamb, T. D., Pugh, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ANALYSIS+OF+ERG+A-WAVE+AMPLIFICATION+AND+KINETICS+IN+TERMS+OF+THE+G-PROTEIN+CASCADE+OF+PHOTOTRANSDUCTION%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">ANALYSIS OF ERG A-WAVE AMPLIFICATION AND KINETICS IN TERMS OF THE G-PROTEIN CASCADE OF PHOTOTRANSDUCTION.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 35 (1), 295-309 (1994).</li>
<li>Mizota, A., Adachi-Usami, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+body+temperature+on+electroretinogram+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Effect of body temperature on electroretinogram of mice.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43 (12), 3754-3757 (2002).</li>
<li>Szabo-Salfay, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+electroretinogram+and+visual+evoked+potential+of+freely+moving+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The electroretinogram and visual evoked potential of freely moving rats.</a> Brain Research Bulletin. 56 (1), 7-14 (2001).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+Wireless+Electroretinogram+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Conscious Wireless Electroretinogram and Visual Evoked Potentials in Rats.</a> Plos One. 8 (9), (2013).</li>
<li>Galambos, R., Juhasz, G., Kekesi, A. K., Nyitrai, G., Szilagyi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NATURAL+SLEEP+MODIFIES+THE+RAT+ELECTRORETINOGRAM%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">NATURAL SLEEP MODIFIES THE RAT ELECTRORETINOGRAM.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (11), 5153-5157 (1994).</li>
<li>Galambos, R., Szabo-Salfay, O., Szatmar, E., Szilagyi, N., Juhasz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+modifies+retinal+ganglion+cell+responses+in+the+normal+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Sleep modifies retinal ganglion cell responses in the normal rat.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98 (4), 2083-2088 (2001).</li>
<li>Guarino, I., Loizzo, S., Lopez, L., Fadda, A., Loizzo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+chronic+implant+to+record+electroretinogram%2C+visual+evoked+potentials+and+oscillatory+potentials+in+awake%2C+freely+moving+rats+for+pharmacological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plasticity%22%5BJournal%5D)">A chronic implant to record electroretinogram, visual evoked potentials and oscillatory potentials in awake, freely moving rats for pharmacological studies.</a> Neural Plasticity. 11 (3-4), 241-250 (2004).</li>
<li>Huang, J. C., Salt, T. E., Voaden, M. J., Marshall, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NON-COMPETITIVE+NMDA-RECEPTOR+ANTAGONISTS+AND+ANOXIC+DEGENERATION+OF+THE+ERG+B-WAVE+IN-VITRO%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+%28London%29%22%5BJournal%5D)">NON-COMPETITIVE NMDA-RECEPTOR ANTAGONISTS AND ANOXIC DEGENERATION OF THE ERG B-WAVE IN-VITRO.</a> Eye (London). 5 (4), 476-480 (1991).</li>
<li>Sasovetz, D. KETAMINE HYDROCHLORIDE - EFFECTIVE GENERAL ANESTHETIC FOR USE IN ELECTRORETINOGRAPHY. Annals of Ophthalmology. 10 (11), 1510-1514 (1978).</li>
<li>Mojumder, D. K., Wensel, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+Mydriatics+Affect+Light-Evoked+Retinal+Responses+in+Anesthetized+Mice%29%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Topical Mydriatics Affect Light-Evoked Retinal Responses in Anesthetized Mice).</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51 (1), 567-576 (2010).</li>
<li>Fraunfel, F. t, Burns, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACUTE+REVERSIBLE+LENS+OPACITY+-+CAUSED+BY+DRUGS%2C+COLD%2C+ANOXIA%2C+ASPHYXIA%2C+STRESS%2C+DEATH+AND+DEHYDRATION%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">ACUTE REVERSIBLE LENS OPACITY - CAUSED BY DRUGS, COLD, ANOXIA, ASPHYXIA, STRESS, DEATH AND DEHYDRATION.</a> Experimental Eye Research. 10 (1), 19(1970).</li>
<li>Calderone, L., Grimes, P., Shalev, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACUTE+REVERSIBLE+CATARACT+INDUCED+BY+XYLAZINE+AND+BY+KETAMINE-XYLAZINE+ANESTHESIA+IN+RATS+AND+MICE%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">ACUTE REVERSIBLE CATARACT INDUCED BY XYLAZINE AND BY KETAMINE-XYLAZINE ANESTHESIA IN RATS AND MICE.</a> Experimental Eye Research. 42 (4), 331-337 (1986).</li>
<li>Behn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dark+adaptation+is+faster+in+pigmented+than+albino+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Dark adaptation is faster in pigmented than albino rats.</a> Documenta Ophthalmologica. 106 (2), 153-159 (2003).</li>
<li>Sugawara, T., Sieving, P. A., Bush, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+relationship+of+the+scotopic+and+photopic+ERG+to+photoreceptor+cell+loss+in+light+damaged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Quantitative relationship of the scotopic and photopic ERG to photoreceptor cell loss in light damaged rats.</a> Experimental Eye Research. 70 (5), 693-705 (2000).</li>
<li>Machida, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P23H+rhodopsin+transgenic+rat%3A+Correlation+of+retinal+function+with+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">P23H rhodopsin transgenic rat: Correlation of retinal function with histopathology.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41 (10), 3200-3209 (2000).</li>
<li>Brandli, A., Stone, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+Ischemia+Influences+the+Responsiveness+of+the+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Observations+in+the+Rat.+Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Remote Ischemia Influences the Responsiveness of the Retina.</a> Observations in the Rat. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (4), 2088-2096 (2014).</li>
<li>Maccarone, R., Di Marco, S., Bisti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saffron+supplement+maintains+morphology+and+function+after+exposure+to+damaging+light+in+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Saffron supplement maintains morphology and function after exposure to damaging light in mammalian retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 49 (3), 1254-1261 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+abnormal+rod+photoreceptor+activity+with+the+a-wave+of+the+electroretinogram%3A+Applications+and+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Assessing abnormal rod photoreceptor activity with the a-wave of the electroretinogram: Applications and methods.</a> Documenta Ophthalmologica. 92 (4), 253-267 (1996).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+COMPUTATIONAL+MODEL+OF+THE+AMPLITUDE+AND+IMPLICIT+TIME+OF+THE+B-WAVE+OF+THE+HUMAN+ERG%5BTitle%5D)+AND+%22Visual+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A COMPUTATIONAL MODEL OF THE AMPLITUDE AND IMPLICIT TIME OF THE B-WAVE OF THE HUMAN ERG.</a> Visual Neuroscience. 8 (2), 107-126 (1992).</li>
<li>Wachtmeister, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oscillatory+potentials+in+the+retina%3A+what+do+they+reveal%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Oscillatory potentials in the retina: what do they reveal.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 17 (4), 485-521 (1998).</li>
</ol>

יונתן אבן היא מנהל CSCM Pty Ltd

שיטת ERG הכהה מותאמת הבזק שתוארה לעיל היא שיטה אמינה להערכת תפקוד רשתית בחולדות. שני-הגל ו- B-הגל הופחתו נזק קל. מרחוק נפשית מראש איסכמי מיתנו ירידות מושרה נזק קלים ב- הגל ו- B-גל. שימור זה של תפקוד רשתית עולה כי נפשית מראש איסכמי מרחוק מושרה neuroprotection, מזכיר צורות אחרות של מגן נפשית מראש כגון היפוקסיה, איסכמיה ופעילות גופנית 8-10. אות ERG נרשמה נקבעה על ידי שלוש קבוצות של גורמים - הגדרת ההקלטה, פרמטרים של גירוי האור, והמצב של בעלי החיים. <p class="jove_step" ...

ERG הוא פוטנציאל חשמלי שנוצר על ידי הרשתית בתגובה לאור, ונרשם מפני הקרנית של העין. כאשר תנאים של הקלטה מנוהלים בקפידה, ERG ניתן להשתמש במגוון דרכים כדי להעריך את תפקוד רשתית. כאן אנו תיארנו כיצד להקליט את &#39;הבזק ERG&#39;, את הפוטנציאל שנוצר כאשר הרשתית חשופה לבזק קצר, בהיר מוצג ברקע Ganzfeld. Ganzfeld מפזר את אור homogenously והבזק של אור מגיע לכל הרשתית כ אחיד. אם הרשתית כהה מותאמת לפני ההקלטה, וכהה ההסתגלות נשמר כחיה מוכנה להקלטה, ERG הושג מופק על ידי שני קולטני האור המוט וחרוט. יש פלאש ERG הכהה מותאמת גל אופייני, שכבר נותח בשתי דרכים. ראשון, מוקדם ומאוחרת רכיבים של צורת גל ERG כבר להבחין, וקשורים לרצף של נוירוןהפעלת אל ברשתית. הרכיב הראשון הוא קצר חביון פוטנציאל הולך שלילי, הגל (איור 1). זה ואחריו פוטנציאל הולך חיובי, נקרא ב-הגל. שלב העלייה של ב-גל תערוכות תנודות, שנחשבים רכיב נפרד (פוטנציאלי oscillatory או Ops). הגל נחשב שיופקו על ידי קולטני אור, ב-הגל על ידי תאים של שכבת הגרעין הפנימית, וOps על ידי תאי amacrine 1. בהתבסס על כוח הגירוי, תגובות להבזקים מאוד עמומים כינו את תגובת סף scotopic אפשרית. תגובת סף scotopic הוא הבין שיופקו מתאי הגנגליון ברשתית 2-4. שנית, ניתן להפריד פלאש ERG על ידי הסתגלות אור, או על ידי פרוטוקול שני פלאש מתואר להלן, למרכיבי rod- ומונע קונוס. בתנאי photopic, הגל הוא לא להבחין בחולדות, כי אוכלוסיית קונוס היא נמוכה, אבל Ops וב-גל הואברור 5. בפרימטים, רשתיות שיש אוכלוסיות חרוט גבוהות, שני rod- ומסלולי cone- ליצור גל לזיהוי 6. שני מדדים שימושיים לעתים קרובות מופקים פלאש ERG הם אמפליטודות של a- וB-גלים, נמדדה כמו באיור 1, עם תגובות אופייניות הבזק מוצגות באיור 2. כאשר אוכלוסיית קולטי האור מצטמצמת, לדוגמא על ידי חשיפה למזיקה בהיר אור, כל הרכיבים של ERG מופחתים. התערבויות neuroprotective, כגון מרוחק נפשית מראש איסכמי (RIP), יכולות להיות מאומתות על ידי השמירה על אמפליטודות של a- וB-גלים (איור 3). לסיכום, הניתוח של ERG מאפשר השוואות בין בריא, האור הפגום ורשתית neuroprotected.

<table><tbody><tr><td>מחשב</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PC Powerlab, חומרת רכישה 4 ערוצים</td><td>AD Instruments</td><td>PL 35044</td><td>רכישה של ERG</td></tr><tr><td>Animal Bio Amp</td><td>AD Instruments</td><td>FE 136</td><td>מגבר</td></tr><tr><td>לתרשים מעבדה</td><td>ERG AD Instruments</td><td></td><td>תוכנה לאיסוף אותות</td></tr><tr><td>Ganzfield</td><td>פתרונות פוטומטריים</td><td>FS-250A</td><td>גירוי אור</td></tr><tr><td>Ganzfield מערכת הפעלה</td> פתרונות <td></td><td></td><td>פוטומטריים</td></tr><tr><td>מחקר רדיומטר</td><td>טכנולוגיות אור בינלאומיות</td><td>ILT-1700</td><td>כיול סדרת אור</td></tr><tr><td>לוקס מטר</td><td></td><td>LX-1010B</td><td>לבדוק אילומנציה אור אדום</td></tr><tr><td>Excel</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microsoft חוטי עופרת</td><td>AD מכשירים</td><td></td><td>חיבור חיובי, שלילי אלקטרודות קרקע למגבר</td></tr><tr><td>חוטי עופרת - תנין</td><td>AD מכשירים</td><td></td><td>גנזפילד קרקע וחומרת רכישה למחשב</td></tr><tr><td>חוט פלטינה 95%</td> <td>A& E מתכות</td><td></td><td>אלקטרודה פוסטיב</td></tr><tr><td>אלקטרודה פה Ag / AgCl גלולה</td><td>SDR</td><td>E205</td><td>אלקטודה שלילית</td></tr><tr><td>26 G מחט</td><td>BD</td><td></td><td>קרקע אלקטודה</td></tr><tr><td>משאבת</td><td></td><td></td><td></td>מים</tr><tr><td>אמבט</td><td></td><td></td><td></td>מים</tr><tr><td>צינורות</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מערכת שמיכה הומותרמית עם בדיקה גמישה</td><td>Harvard Appartus</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>אטרופין 1% עם</td><td>באוש & </td><td>Mydriasis מקומי</td>Lomb <td></td></tr><tr><td>Proxmethycaine 0.5% w/v</td><td>Bausch & הרדמה</td><td>מקומית</td>Lomb <td></td></tr><tr><td>דמעות ויסקו טיפות עיניים</td><td>נוברטיס</td><td></td><td>קרבומר פולימר</td></tr><tr><td>חוט</td><td></td><td></td><td>נסוג עפעף</td></tr><tr><td>פינצטה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>דבק רב פעמי</td><td>Blu tac</td><td></td><td>פנס ראש אדום עמום. אלקטרודות הדבקה</td></tr><tr><td>מצעים</td><td></td><td></td><td></td>סופגים</tr><tr><td>קטמיל - קטמין 100 מ"ג/מ"ל - 50 מ"ל</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>דיסוציאטיבי</td></tr><tr><td>קסיליום - קסילזין 100 מ"ג/מ"ל - 50 מ"ל</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td></td>משקל</tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr> להרפיית שרירים</tbody></table>

שימוש בelectroretinogram כדי להעריך את התפקוד ברשתית מכרסמים וההשפעות המגנות של האיבר המרוחק איסכמי אכשור קד

Using the Electroretinogram to Assess Function in the Rodent Retina and the Protective Effects of Remote Limb Ischemic Preconditioning

ה-ERG הוא הסכום של כל פעילות הרשתית. ה-ERG מוקלט בדרך כלל מהקרנית, המשמשת כאנטנה שאוספת ומסכמת אותות מהרשתית. ה-ERG הוא מדד רגיש לשינויים בתפקוד הרשתית שהם פאן-רשתית, אך פחות יעיל לאיתור נזק המוגבל לאזור קטן של הרשתית. בעבודה הנוכחית אנו מתארים כיצד להקליט את ה-ERG 'הבזק', שהוא הפוטנציאל שנוצר כאשר הרשתית נחשפת להבזק אור קצר. אנו מתארים שיטות של הרדמה, מידריאזיס וניהול הקרנית במהלך ההקלטה; כיצד לשמור על הרשתית חשוכה מותאמת; חומרי אלקטרודה ומיקום; הטווח והכיול של אנרגיית הגירוי; רישום פרמטרים וחילוץ נתונים. אנו מתארים גם שיטה להשראת איסכמיה בגפה אחת, וכיצד להשתמש ב-ERG כדי להעריך את ההשפעות של איסכמיה מרוחקת זו מהרשתית על תפקוד הרשתית לאחר נזק לאור. מתואר פרוטוקול שני הבזקים המאפשר בידוד של הרכיב מונע החרוט של ה-ERG המותאם לחושך, ובכך את ההפרדה של רכיבי המוט והחרוט. מכיוון שניתן לתעד אותו בטכניקות זעיר פולשניות, נעשה שימוש נרחב ב-ERG במחקרים על הפיזיולוגיה, הפרמקולוגיה והטוקסיקולוגיה של הרשתית. אנו מתארים דוגמה אחת לתועלת זו, שבה נעשה שימוש ב-ERG כדי להעריך את תפקוד הרשתית שנפגעה מאור, עם ובלי התערבות נוירו-פרוטקטיבית; התניה מוקדמת על ידי איסכמיה מרחוק.

הפרוטוקול יכול לשמש למדידת תפקוד ראייה של רשתית המכרסמים in vivo. הגל, מדד לתפקוד קולטי האור, וב-הגל, מדד לתפקוד רשתית פנימי, הם מבואר באיור 1. עליות-נשלט מוט ERG האות עם גירוי האור הגובר, כפי שמוצג באיור 2 א. הגל מתברר ב~ cd.sm סקוטי 0.4 יומן -2 ואת המשרעת של העליות-הגל עד רוויה בcd.sm סקוטי 2.5 יומן -2 (לא מוצג). הפרדיגמה הבזק התאום נעשתה שימוש כד...

האלקטרורטינוגרמה (ERG) היא פוטנציאל חשמלי שנוצר על ידי הרשתית בתגובה לאור. מאמר זה מתאר כיצד להשתמש ב-ERG כדי להעריך את תפקוד הרשתית, בחולדות מותאמות לחושך, וכיצד ניתן להשתמש בו כדי להעריך התערבות נוירו-פרוטקטיבית, במקרה הנוכחי התניה איסכמית מרחוק.

The ERG is the sum of all retinal activity. The ERG is usually recorded from the cornea, which acts as an antenna that collects and sums signals from the ...

המטרה הכוללת של פרוצדורה זו היא לבחון את התפקוד החזותי בחולדות עם פגיעה מאור בסינרי תאורה נורמליים ובחולדות שעברו התניה איסכמית רחוקה ופגיעה מאור, וזאת באמצעות ERG, ובכך להדגים את ההשפעות המגנות של איסכמיה בגפה רחוקה על הרשתית. דבר זה מושג תחילה על ידי הסתגלות של החולדות לחושך למשך 12 שעות. השלב השני הוא הקלטת ERG בסיסי במצב הסתגלות לחושך באמצעות גירויי אור LED ומגבר דיגיטלי.בשלב הבא, חשפו את החולדות לעקה רשתית באמצעות חשיפה לאור רציף ועז. השלב הסופי הוא השוואה בין רישומי ה-ERG של החולדות עם הנזק מהאור לבין אלו שעברו התניה מוקדמת באמצעות איסכמיה של גפה מרוחקת, ומדידה של תגובות הפוטורספטורים כפי שבאות לידי ביטוי בגל A ותגובות הרשתית הפנימית כפי שבאות לידי ביטוי בגל B. בסופו של דבר, ה-ERG המותאם לחושך משמש להערכת התפקוד החזותי הסקוטופי.שיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי נוירופרוטקציה המבוססת על איסכמיה מרוחקת. ניתן להחיל אותה גם על צורות אחרות של פגיעה ומחלות ברשתית לצורך בדיקות פרמקולוגיות, וכן לסריקת בעלי חיים עם פגמים בראייה. כדי להתחיל בפרוצדורה זו, יש להתאים את החולדה לחושך למשך 12 שעות, ולאחר מכן להרדימה באמצעות הזרקה של תערובת ketamine xylazine.לאחר שהחיה איבדה את הכרתה, בדקו את עומק ההרדמה על ידי צביטה קלה של כף הרגל כדי לוודא שהתגובה הרפלקסיבית אינה קיימת. לאחר מכן, טפטפו טיפה אחת של atropin וטיפה אחת של prox methane על הקרנית. גזרו חוט שחור באורך 10 centimeters.לאחר מכן, צור לולאה בעזרת החוט והשלב את הלולאה מעל קו המשווה של העין, בקשירה הדוקה למדי כדי למשוך את גלגל העין מעט קדימה ולשמור על קרנית העין נקייה מעפעפי העין. לאחר מכן, טפטף טיפות עיניים של carmer על הקרניות. מקם את החולדה על המצע הסופג שמעל הפלטפורמה המחוממת, כאשר ראשה מונח בפתח ה-ganzfeld.לאחר מכן, הכניסו את גשש הטמפרטורה הפנימי לרקטום כדי להבטיח שחום הגוף נשמר ב-37 °C, ואבטחו את גשש הטמפרטורה במקומו על ידי הדבקת הכבל שלו לזנב החולדה. לאחר מכן, הכניסו את אלקטרודת הייחוס תת-עורית לגפה האחורית. מקמו את האלקטרודה השלילית בבטחה בפה כדי למנוע מהאלקטרודה להחליק החוצה מהפה.חברו את כבל החיבור למשטח יציב. לאחר מכן, מקמו את האלקטרודה החיובית מעל מרכז הקרנית והבטיחו שהאלקטרודה תיגע בקרנית בעדינות באמצעות מיקרו-מניפולטור. ברגע שהאלקטרודות במקום, כסו את מערך החור, כולל הגנצפלד (ganzfeld) והחיה, בחומר אטום כדי לשמר את ההסתגלות לחושך.בתוכנת הרכישה, הגדירו קצב דגימה של 2 kHz עם 5 ms לדגימה טרום-איסוף וזמן איסוף של 100 עד 1000 ms. לאחר מכן, הגדירו את מסנני הפס (band pass filters) ל-1 עד 1000 Hz וודאו שהדגימה מופעלת למשך תקופה של 100 ms לאחר הבזק.כעת, בדקו את קו הבסיס של ההקלטה. הוא צריך להיות נקי מרעשים חיצוניים, אך להציג את רעש המגבר ואת התנודות הנשימתיות. לאחר מכן, בצעו הבזקה לבדיקה.זהו גל ERG טיפוסי בתגובה להבזק הבדיקה. עם סיום הפעולה, יש לאפשר לבעל החיים להסתגל מחדש לחושך למשך 10 דקות. לאחר מכן, יש לבדוק שוב את קו הבסיס כדי לוודא שהאות יציב.לאחר מכן, התחילו את ההקלטה. בסיום סשן ההקלטה, בדקו את יציבות טמפרטורת הגוף של בעל החיים. הסירו את האלקטרודות, ולאחר מכן מרחו שוב את פולימר ה-carmer על הקרניות. לאחר מכן, אפשרו לבעל החיים להתאושש על פד חימום עד שיהיה נייד ופעיל לחלוטין לפני ההחזרה למכלאה.איור זה מציג את מדידת גל a וגל B מ-ERG לאחר הסתגלות לחושך. העקבה המוצגת כאן נרשמה מהקרנית של עין שהסתגלה לחושך בתגובה להבזק אור בהיר שניתן בזמן המסומן כ-T zero. אמפליטודת גל a נמדדת מקו הבסיס ועד לשפל הראשון.את אמפליטודת גל B מודדים מהשפל של גל A ועד לשיא החיובי הבא. את הלטנסי (זמן השהיה) מודדים מארטיפקט הגירוי ועד לנקודת העניין בעקבה, כגון השפל של גל A. אות ה-ERG הגולמי הדומיננטי עולה עם הגברת גירוי האור.גל הופך גלוי בערך ב-0.4 logs scotopic candela seconds per meter squared, ופרדיגמת ההבזקים הכפולים (twin flash paradigm) שימשה להפרדת אות ה-ERG המעורב לתגובות של קונוסים ושל מקלות. לאחר רכישת המיומנות, ניתן לבצע טכניקה זו בתוך 30 דקות.

using-electroretinogram-to-assess-function-rodent-retina-protective

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מדגים את הכנת מודל חולדות לחקר בריאות הרשתית ותקינות מסלול הראייה. פוטנציאל מעורר חזותי וייחוס אלקטרורטינוגרפי ואלקטרודות פעילות מחוברים לחולדה, ולאחר מכן יישור הפלטפורמה עם החולדה מול קערת גנצפלד להארה רשתית אחידה וסגירת כלוב פאראדיי כדי למנוע הפרעות חיצוניות.

הכנת מודל חולדה להערכת תקינות מסלול הראייה באמצעות מערך אלקטרופיזיולוגי

מקור: Brandli, A. התניה מוקדמת איסכמית של גפיים מרוחקות: טכניקה נוירו-פרוטקטיבית במכרסמים. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים פרוטוקול התניה איסכמית לא פולשנית של גפיים בחולדות כדי לגרום להגנה עצבית מערכתית. ההליך כולל חסימת עורקים מבוקרת ורפרפוזיה, המפעילה מסלולי לחץ תאיים המשחררים גורמי הגנה. גורמים אלה משפרים את העמידות בפני פגיעות איסכמיות ומטבוליות באיברים מרוחקים כמו המוח והרשתית.

התניה מוקדמת איסכמית לא פולשנית של גפיים במודל חולדה להגנה עצבית

הרשתית המכרסם כבר זמן רב מוכרת כחלון נגיש למוח. במאמר זה טכני אנו מספקים פרוטוקול אשר מעסיק את מודל העכבר של מחלת רשתית הנגרמת חמצן כדי ללמוד את המנגנונים שיובילו לכישלון של התחדשות כלי דם במערכת העצבים המרכזית, לאחר פגיעה איסכמית. המערכת המתוארת גם ניתן לרתום לבחון אסטרטגיות לקידום צמיחה מחודשת של כלי דם פונקציונליים בתוך הרשתית ומערכת העצבים המרכזית.

הערכה של כלי דם התחדשות במערכת העצבים המרכזית באמצעות רשתית העכבר

נפשית מראש איסכמי מרחוק (RIP) הוא שיטה של ​​רקמות אוויר נגד לחץ מזיק. הקמנו שיטה של ​​איסכמיה מרחוק בגפיים האחורי, על ידי ניפוח שרוול מד לחץ דם למשך 5-10 דקות. יכולות ההגנה העצביות של RIP הוכחו במודל של ניוון רשתית במכרסמים.

איבר מרוחק איסכמי אכשור קד: טכניקת neuroprotective במכרסמים

Ex vivo ERG יכול לשמש לתיעוד פעילות חשמלית של תאי רשתית ישירות מרשתית שלמה מבודדת של בעלי חיים או בני אדם. אנו מדגימים כאן כיצד ניתן להתאים מערכות ERG in vivo להקלטות ERG ex vivo על מנת לנתח את הפעילות החשמלית של תאי הרשתית.

בו זמנית<em&gt; Vivo לשעבר</em&gt; בדיקות פונקציונליות של שתי הרשתיות על ידי<em&gt; In vivo</emמערכת electroretinogram&gt;

פרוטוקול זה מתאר מדידה סימולטנית של אלקטרורטינוגרמה ופוטנציאלים מעוררים חזותיים בחולדות מורדמות.

הקלטה בו זמנית של Electroretinography ופוטנציאלים חזותיים מעוררים אצל חולדות הרדימו

אנחנו מראים נהלי השתלת הקלטה כירורגית למדוד אותות חזותיים אלקטרו מן העין (electroretinogram) והמוח (ויזואלי עורר פוטנציאל) בחולדות מודעות, וזה יותר מקביל למצב האנושי שבו הקלטות מתנהלות ללא מקעקעת הרדמה.

השרשה ורישום האלחוטי electroretinogram ופוטנציאל חזותי מעורר אצל חולדות Conscious

כאן, אנו מציגים שיטה להקלטת תגובות חשמליות אור-עורר של אפיתל פיגמנט רשתית (RPE) בעכברים באמצעות טכניקה המכונה DC-ERGs שתואר לראשונה על ידי מרמורשטיין, Peachey, ועמיתים בתחילת שנות ה-2000.

אלקטרורטינוגרמה ישירה (DC-ERG) להקלטת התגובות החשמליות המעוררות אור של אפיתל פיגמנט רשתית העכבר

כאן, אנו מתארים דגם עכבר של איסכמיה רשתית על ידי חסימת עורקים דו-צדדית נפוצה חולפת באמצעות תפרים פשוטים ומהדק. מודל זה יכול להיות שימושי להבנת המנגנונים הפתולוגיים של איסכמיה ברשתית הנגרמת על ידי מומים קרדיווסקולריים.

דגם מורין של פגיעה איסכמית ברשתית הנגרמת על ידי חסימת עורקים דו-צדדית משותפת חולפת

שינוי של מערך multielectrode קיים או ציוד מהדק תיקון עושה את ex vivo electroretinogram נגיש יותר. שיטות משופרות לתיעוד ושמירה על תגובות אור ex vivo מקלות על חקר תפקוד התאים הפוטורצפטורים וה-ON-דו-קוטביים ברשתית הבריאה, מודלים של בעלי חיים של מחלות עיניים ורשתיות של תורמים אנושיים.

אופטימיזציה של ההגדרה והתנאים עבור אלקטרורטינוגרמה של Ex Vivo כדי לחקור את תפקוד הרשתית בעיניים קטנות וגדולות

פרוטוקול זה מדגמן פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה ברשתית בעין עכבר על ידי השראת איסכמיה ברשתית באמצעות צינורית החדר הקדמי והעלאת הלחץ התוך עיני, ולאחר מכן נורמליזציה של לחץ תוך עיני כדי להתחיל את הרפרפוזיה.

אינדוקציה של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה ברשתית במודל עין עכבר

למדו להעריך תפקוד רשתית בעכברושים באמצעות אלקטרורטינוגרם (ERG) ולהדגים את ההשפעות המגנות של איסכמיית איבר מרוחקת על תאי הרשתית לאחר חשיפה לאור.

שימוש בelectroretinogram כדי להעריך את התפקוד ברשתית מכרסמים וההשפעות המגנות של האיבר המרוחק איסכמי אכשור קד

גלה סרטונים נוספים