9 ביוני 2015
האלקטרורטינוגרמה (ERG) היא פוטנציאל חשמלי שנוצר על ידי הרשתית בתגובה לאור. מאמר זה מתאר כיצד להשתמש ב-ERG כדי להעריך את תפקוד הרשתית, בחולדות מותאמות לחושך, וכיצד ניתן להשתמש בו כדי להעריך התערבות נוירו-פרוטקטיבית, במקרה הנוכחי התניה איסכמית מרחוק.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לבחון את תפקוד הראייה בחולדות רגילות, פגועות אור ומרוחקות, איסכמיות מותנות מראש ופצועות קלות באמצעות ה-ERG ובכך להדגים את ההשפעות המגנות של איסכמיה מרוחקת על הרשתית. זה מושג על ידי החשיכה הראשונה, התאמת החולדות למשך 12 שעות. השלב השני הוא להקליט את ה-ERG המותאם לחושך הבסיסי באמצעות גירוי אור LED ומגבר דיגיטלי.
לאחר מכן, חשפו את החולדות ללחץ ברשתית על ידי חשיפתה לאור רציף בהיר. השלב האחרון הוא להשוות את רישומי ה-ERG של חולדות עם נזקי אור ואלה המותנים מראש באיסכמיה של גפיים מרוחקות, ולמדוד את תגובות קולטני האור כפי שנראות בגל A ואת תגובות הרשתית הפנימיות כפי שנראות בגל B. בסופו של דבר, ה-ERG המותאם לחושך משמש להערכת תפקוד הראייה הסקוטופית.
כך ששיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי הגנה עצבית מבוססת איסכמית מרחוק. ניתן ליישם אותו גם על צורות אחרות של פגיעה ברשתית ובדיקות תרופתיות למחלות, ולהקרנה של בעלי חיים עם ליקויי ראייה. כדי להתחיל בהליך זה, התאם את החולדה בחושך למשך 12 שעות, ואז הרדים אותה בהזרקת קוקטייל קטמין קסילזין.
ברגע שהחיה מחוסרת הכרה, בדוק את עומק ההרדמה על ידי צביטה קלה של כף הרגל כדי לוודא שתגובת הרפלקס נעדרת. לאחר מכן, מרחו טיפת אטרופין וטיפה של פרוקס מתאן על הקרנית שלו. חותכים לחוט שחור באורך 10 סנטימטרים.
לאחר מכן צרו לולאה עם החוט והחליקו את הלולאה מעל קו המשווה של העין, סרוגה מעט הדוקה על מנת למשוך את גלגל העין מעט קדימה ולשמור על הקרנית נקייה מהעפעף. לאחר מכן, מרחו טיפות עיניים של קרמר על הקרניות. מקם את החולדה על המצע הסופג על גבי הפלטפורמה המחוממת כשראשה מונח בפתח הגנצפלד.
לאחר מכן הכנס את בדיקת הטמפרטורה הפנימית לתוך פי הטבעת כדי להבטיח שטמפרטורת הגוף נשמרת על 37 מעלות צלזיוס, ואבטח את בדיקת הטמפרטורה במקומה על ידי הדבקת החוט שלה לזנב החולדה. לאחר מכן, הכנס את אלקטרודת הייחוס תת עורית לגפה האחורית. הנח את האלקטרודה השלילית היטב בפה כדי למנוע מהאלקטרודה להחליק מהפה.
הצמד את כבל החיבור למשטח יציב. לאחר מכן מקם את האלקטרודה החיובית מעל מרכז הקרנית וודא שהאלקטרודה נוגעת בקרנית בעדינות באמצעות מניפולטור מיקרום. לאחר שהאלקטרודות נמצאות במקומן, עטפו את החור שהוקם, כולל הגנצפלד והחיה בחומר אטום כדי לשמר את ההסתגלות לחושך.
בתוכנת הרכישה. הגדר שני קילו-הרץ כקצב דגימה עם חמש אלפיות השנייה לדגימה לפני האיסוף וזמן איסוף של 100 עד 1000 אלפיות השנייה. לאחר מכן הגדר את מסנני מעבר הפס לאחד עד 1000 הרץ וודא שהדגימה מופעלת לתקופה של 100 אלפיות השנייה לאחר הבזק.
כעת, בדוק את קו הבסיס של ההקלטה. זה צריך להיות נקי מרעשים זרים, אך להראות את רעש המגבר ותנודות הנשימה. לאחר מכן הפעל פלאש בדיקה.
זוהי צורת גל טיפוסית של ERG בתגובה להבזק הבדיקה. בסיום, אפשר לבעל החיים להסתגל מחדש לחושך למשך 10 דקות. לאחר מכן בדוק שוב את קו הבסיס לאיתור אות יציב.
לאחר מכן, התחל את ההקלטה בתום סשן ההקלטה, בדוק את יציבות טמפרטורת הגוף של החיה. הסר את האלקטרודות ולאחר מכן החל מחדש את פולימר הקרמר על הקרניות. לאחר מכן, אפשרו לבעל החיים להתאושש על כרית חום עד שהוא נייד ופעיל לחלוטין לפני החזרה לבית החיה.
איור זה מציג את המדידה של גל וגל B מ-ERG מותאם כהה. העקבות המוצגים כאן מתועדים מהקרנית של עין מותאמת כהה להבזק אור בהיר שניתן בזמן המוצג כ-T אפס. משרעת הגל נמדדת מקו הבסיס לשוקת הראשונה.
המשרעת של גל B נמדדת משוקת גל A לשיא החיובי הבא. ההשהיה נמדדת מחפץ הגירוי לנקודת העניין על המעקב, כגון שוקת גל A. אות ה-ERG הגולמי הנשלט גדל עם גירוי האור הגובר.
גל מתגלה בערך ב-0.4 לוג קנדלה סקוטופית שניות למטר בריבוע, ופרדיגמת ההבזק התאום שימשה להפרדת אות ה-ERG המעורב לתגובות חרוט ומוט. ברגע ששולטים. ניתן לבצע טכניקה זו תוך 30 דקות.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מחקר זה משתמש באלקטרורטינוגרמה (ERG) כדי להעריך את תפקוד הרשתית בחולדות מותאמות חשכה. הוא בוחן באופן ספציפי את ההשפעות הנוירופרוטקטיביות של מיזוג איסכמי מרוחק על תגובות הרשתית בעקבות לחץ הנגרם על ידי אור.
Electroretinogram (ERG) assessment in rodent models enables quantitative evaluation of retinal function and neuroprotective interventions, supporting early-stage target validation in ophthalmic drug discovery. The protocol's ability to distinguish rod and cone responses and measure functional outcomes after remote limb ischemic preconditioning provides predictive confidence for mechanistic de-risking and translational continuity. This approach is directly relevant for portfolio triage and prioritization of neuroprotective strategies in preclinical pipelines.
The ERG protocol integrates from early discovery through preclinical validation, supporting hypothesis testing, mechanistic de-risking, and quantitative assessment of neuroprotective interventions.