זוגי H-המבוך: מבחן חזק התנהגות למידה וזיכרון במכרסמים

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא לחקור זיכרון עבודה מרחבי ומכרסמים ולהעריך את אסטרטגיית הלמידה וההתנהגות שלהם. זה מושג על ידי בניית מבוך H כפול להערכת ביצועי למידה וזיכרון. כצעד שני, בעלי חיים מורגלים לסביבת המבוך לפני אימון התנהגותי.

לאחר מכן, בעלי החיים מאומנים מדי יום במבוך תוך שימוש בפרדיגמת למידה אגוצנטרית על מנת לפתח תגובה רגלית. לחלופין, ניתן להשתמש בפרדיגמה אלוצנטרית כדי לפתח תגובת מקום. השלב האחרון הוא להעריך את אסטרטגיית הלמידה של החיה בניסוי בדיקה שבו תנוחת ההתחלה שלהם משתנה והדפוס מוסר.

התוצאות מספקות תובנה לגבי בחירת אסטרטגיית הלמידה המשמשת במבוך בהתבסס על תיעוד התנהגות בעלי חיים. היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כמו מבוך הרדיו בעל שמונה הזרועות או מבוך המים של מוריס, הוא שניתן לרכוש אותה במהירות תוך יומיים בלבד, והיא מאפשרת לנסיין לכוון את סוג האסטרטגיה שעל בעל החיים ללמוד. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום ההתנהגות, כגון יחסי הגומלין הדינמיים בין מערכות הזיכרון הפרוצדורלי וההצהרתי, וכיצד מערכות אלו מושפעות משיטות טיפול שונות.

מדגים הליך זה יהיה ד"ר ריצ'רד פינל, פוסט-דוקטורנט מהמעבדה למערכות נוירו-אלקטרוניות. השלב הראשון הוא לבנות את מבוך ה-H הכפול. המבוך מורכב מסמטה מרכזית המצטלבת על ידי שלוש זרועות ריצה מקבילות.

רוחב כל מסדרון הוא 20 ס"מ ומוקף בקירות פרספקס שקופים גבוהים. הקירות מאובטחים בדבק מיוחד, למשל, תיקון אגרי וברגים ואטומים למים בכל הזוויות הפנימיות. ראשית, הפרספקס נחתך לגודל והמפרקים הפנימיים נתקעים.

ציפוי הפלסטיק המגן מוסר ליד המפרק להדבקה, וכל חלקיקי האבק מוסרים בעזרת ממס ניקוי. שני הצדדים מונחים בצורה של 90 מעלות, וסרט מיוחד משמש לאיטום הקצוות למניעת דליפת הדבק. בתהליך הריפוי מכינים את הדבק על ידי ערבוב חומר פילמור ומערבבים בעדינות את דבק Croix מוחל באמצעות מזרק מונע אוויר.

לאחר מכן המפרק מקובע ואטום למים ומותר להתרפא. יש להציב שקע בתוך המבוך לניקוז. הניחו את המבוך על שולחן המאפשר גישה לכל הצדדים.

יש למקם רמזים מנוגדים היטב על הקירות שמסביב. לאחר מכן, סמן את הזרועות הצפונית והדרומית להתמצאות מאוחר יותר במהלך ניתוח הווידאו. לבסוף, מקם מצלמה מעל המבוך לניתוח לאחר מבחן של התנהגות בעלי חיים.

הפעל את המצלמה כדי לתעד את תנועות החיה לפני כל ניסוי. כדי להתכונן לשלב טרום האימון, מלאו את המבוך במים שקופים לגובה משוער של 17 סנטימטרים. אימון מקדים יכול להתרחש יום אחד לפני או באותו יום של האימונים.

שמרו על טמפרטורת המים בין 21 ל-23 מעלות צלזיוס כדי לספק תמריץ לחולדות לחפש את פלטפורמת המילוט. מלאו את המבוך במים יום לפני הבדיקה כדי לאפשר לטמפרטורת המים להתייצב. ללא קשר לעמדת ההתחלה, חסום תמיד את הכניסה לזרוע הנגדית עם דלת גיליוטינה שקופה.

כשהוא מוכן, שחרר את החולדה מהגפה של אחת הזרועות המרכזיות. עם ההגעה לפלטפורמת המילוט, אפשר לחולדה לנוח ולהתבונן בסביבתה למשך כ-15 שניות. נהל ארבעה ניסיונות רצופים עם לפחות 10 שניות מנוחה בין הניסיונות.

כדי להתחיל באימון, העבירו את פלטפורמת המילוט ממצב טרום האימון שלה לזרוע שנבחרה והוסיפו מים כדי להטביע את הפלטפורמה לסנטימטר אחד מתחת לפני המים. לאחר מכן, הפכו את המים לאטומים על ידי ערבוב של 250 גרם אבקת חלב רזה. ראשית, ערבבו מראש את אבקת החלב והמים בבקבוק נפרד והפיצו את התערובת הזו במספר מקומות ברחבי המבוך.

ערבוב יעזור להגיע להומוגניות במי המבוך מהר יותר. שחררו את החולדות מסמטה מרכזית כפי שהודגם קודם לכן, וודאו שהכניסה לזרוע הנגדית חסומה. לאחר השחרור, התבונן בהתנהגות החיה ותעד את ביצועיה באופן ידני או באמצעות מצלמת וידאו.

אם לא מגיעים לפלטפורמת המטרה תוך 60 שניות, הנחו את החולדה בעדינות לפלטפורמת המילוט ואפשרו לחולדה לנוח שם ולהתבונן בסביבתם. לאחר מכן מוציאים את החולדה במשך כ-15 שניות ומייבשים אותה במגבת לפני הניסיון הבא. זה חשוב כדי שהחולדות לא יתקררו בארבעת הימים הבאים.

עקוב אחר פרוטוקול האימון הבסיסי. שחרר את החולדות מזרוע ההתחלה הצפונית או הדרומית ברצף בלתי צפוי כך ששתי הזרועות ישמשו פעמיים. הסר את פלטפורמת המילוט כדי לבצע את ניסויי הגשושית ביום השישי.

שחרר את החולדה מזרוע שונה מזו ששימשה במהלך האימון. לדוגמה, אם משוחררים בזרוע הצפונית המשוחררת מהזרוע הצפון-מזרחית כשהזרוע הדרום-מזרחית סגורה, אפשרו לחולדה לשחות למשך 60 שניות לכל היותר. שחרר את החולדה מאותה זרוע התחלה עבור כל אחד מארבעת ניסויי האימון מדי יום.

ביום השישי, הסר את פלטפורמת המילוט למשפט החקירה. שחרר את החולדה מזרוע אחרת מהמקום שבו שוחררה במהלך המשפט. אפשרו לחולדות לשחות במשך 60 שניות.

לאחר הבדיקה. סקור את ההקלטות שצולמו מהמצלמה העליונה, עקוב באופן ידני אחר תגובה, חביות, שגיאות ראשוניות וחוזרות על עצמן, בחירות ראשונות וסוגי תגובות. לבסוף, הפעל ניתוח סטטיסטי לגבי שגיאות תגובה, חביון כדי להגיע למטרה וזמן שהייה בזרוע היעד.

בתרשים זה, אזורי שגיאת המבוך מודגשים באפור, והזרועות הסגורות מודגשות בשחור הן עבור עמדות ההתחלה הדרומיות והן הצפוניות. הקו שבקע מתאר שביל שחייה לדוגמה שבו החולדה מבקרת בכל ארבעת אזורי השגיאה. לפני ההגעה לפלטפורמת הבריחה, מסלולי השחייה המייצגים הללו מתארים תנועה במהלך ניסוי הגשושית.

לאחר אימון אלוצנטרי, לאחר אימון אגוצנטרי, חולדות מתאמנות להתחיל מתצוגת הזרוע הצפונית או הדרומית, בעיקר תגובות פרוצדורליות כאשר עמדת ההתחלה שלהן מוסטת שמאלה. אולם חולדות שזרוע ההתחלה שלהן סובבה ב-180 מעלות, הראו כמות גבוהה יותר של תגובות מקום. תגובות שהוצבו או תגובות פרוצדורליות הוגדרו כמסלולי שחייה טיפוסיים אחרים הוצגו הן עבור קבוצות נגעי ההיפוקמפוס הגחוני והן עבור קבוצות הנגע הגחוני בילודים במהלך שלב האימון.

שימו לב להבדל בביצועים. בניסוי האימון הרביעי במהלך מפגש הגשושית, זרוע ההתחלה המקורית נסגרה והחולדות שוחררו מהזרוע הדרום-מערבית. לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך פחות מחמש דקות אם היא מבוצעת כראוי.

בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להחליף את מי החלב כל יום, אחרת הם יהפכו מעופשים. מאז הפיתוח, הליך זה סלל את הדרך לחוקרים בתחום ההתנהגות לחקור מערכות זיכרון פרוצדורליות והצהרתיות בבעלי חיים ערים.