הדמיה מקור מוח במודלים פרה עכברוש של מיקוד אפילפסיה באמצעות רזולוציה גבוהה EEG הקלטות

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבצע ניתוח מקור מוחי באמצעות הקלטות EEG ברזולוציה גבוהה שהתקבלו מחולדות עם אפילפסיה מוקדית. זה מושג על ידי הנחת מכסה מיני EEG במים מזוקקים עם 0.2% כלוריד למשך הלילה ומילוי כל אלקטרודה למחרת במשחה מוליכה מעורבת לשיפור עכבת האלקטרודה. השלב השני הוא להגדיר את מכסה המיני EEG על חולדה מורדמת ולתעד נתוני EEG ברזולוציה גבוהה.

לאחר מכן, אותות ה-EEG המוקלטים מעובדים מראש כדי לקבל אותות ממוצעים עבור סוגים שונים של אפילפסיה בין-צדדית באמצעות השיטה מבוססת הסף ושיטת פירוק הגל. השלב האחרון הוא ליצור את מודל מוליך נפח הראש של החולדה עם מיקומי האלקטרודות המבוססים על MRI בודד או הסתברותי. בסופו של דבר, הפתרון ההפוך של ES Loretta מחושב כדי להראות את מקורות המוח המשוערים שצפויים להיות קשורים לאזורי המוח האפילפטוגניים.

מודלים פרה-קליניים של זיכרון RAM שימושיים מאוד לחקר אפיגנזה באמצעות טכניקה אלקטרופיזיולוגית. למרות שרישום אלקטרופיזיולוגי פולשני שימש בעבר לחקר חולדה אפילפטית, אין טכניקה זמינה לביצוע הדמיית מקור מוח שלם בחולדה זו ללא הרדמת המחט. במחקר זה, אנו מציעים מתודולוגיה שלמה להשגתה.

בסרטון זה אראה לכם כיצד להכין ולהגדיר את ה-EEG mini. אני אהיה אחראי על כל ההליכים המוכנים להכנת RU להקלטה. במהלך הקלטת G, אפעיל ציוד ותוכנת הקלטה G.

בנוסף, אראה כיצד לבצע ניתוח מקורות מוח מהנתונים המוקלטים. כדי להתחיל בהליך זה יש לערבב משחת אלקטרודות EEG עם תמיסת NACL של 0.9%. הוסיפו טיפה של מתילן כחול כדי לעזור לדמיין את משחת האלקטרודות בתוך האלקטרודות ועל העור.

לאחר מכן, הניחו את העיסה המעורבת במזרק וודאו שאין בה בועות אוויר. לאחר מכן מלאו את כל 32 האלקטרודות בעיסה מלמטה מבלי להכניס בועות אוויר כחלק מהליך ההכנה לחולדה, קצצו את ראש החולדה לאחר מכן, הפחיתו את האיזו פלואור ל-2%ואז הניחו את החולדה על כרית החימום במנגנון הסטריאוטקסי. תקן את תעלות האוזן עם מוטות האוזניים ואבטח את חרוט האף לאספקת חומר הרדמה.

לאחר מכן, מרחו משחה עיניים על עיני החיה. לאחר מכן יש לגלח את ראשו ולשפשף את העור באלכוהול איזופרופיל 90% כדי לעורר את כלי הדם ולהסיר את השומן. לאחר מכן הניחו ספוגית מי מלח על הקרקפת וכסו אותה לחלוטין כדי לשמור על מוליכות עור טובה עד שמכסה המיני EEG מוכן להתקנה.

חבר את טמפרטורת הנשימה ושלושה בדיקות אלקטרוקרדיוגרמה עופרת לגוף החולדה כדי לנטר באופן רציף את הפיזיולוגיה שלה במהלך הליך הרישום. בהליך זה, הסר את ספוגית המלח על קרקפת החולדה והנח את מכסה המיני EEG המוכן על עורה. תקן את מכסה המיני עם גומיות.

מרחו שכבה של משחת אלקטרודות מוליכות גבוהה הן על הקרקע והן על אלקטרודות הייחוס. לאחר מכן, הניחו אותם על האוזניים המתאימות. לאחר מכן חבר את מכסה המיני EEG למגבר.

הסתכלו על תצוגה מקדימה של עקבות ה-EEG ובדקו את הביצועים של כל האלקטרודות. לאחר מכן יש לתת דקסטר ב-0.25 מיליגרם לק"ג לתוך הצפק של החולדה, ולהפחית מיד את קצב הפלואור של ה-0%אם קצב הנשימה אינו בטווח של 30 עד 60 פעימות לדקה, הגדל את קצב הפלואור בעדינות במקסימום של 1%כעת התחל ברישום EEG וודא את קיומה של פעילות פרוקסימלית בעקבות ה-EEG. לאחר ההקלטה, סמנו את מיקומם של שלושת העיגולים הבולטים של כובע המיני EEG על גבי העור על ידי הכנסת עט צבעוני לתוכם.

לפני הסרת מכסה המיני EEG, צלם תמונה של ראש החולדה עם ציוני הדרך. איתור וסיווג המטענים מתבצע באמצעות הקודים שפותחו בעצמם ב-matlab, אותות ה-EEG הממוצעים עבור כל תת-סוג של מטען חבלה משמשים לניתוח מקור המוח. בהליך הבא, סיעור המוחות של תוכנת הקוד הפתוח ישמש עם אטלס ה-MRI עבור חולדות ווסטר, הזנת MRI ומשטח המוח לתוכנה, יצירת משטח הראש עם הגדרת ברירת מחדל.

לאחר מכן צור את הקרקפת ואת משטחי הגולגולת החיצוניים הפנימיים על סמך MRI לחישוב שדה עופרת, בדוק את הכיוון והמיקום של כל משטח ביחס ל-MRI, באמצעות אפשרות ההדמיה, תוך שימוש בתמונת ראש החולדה שנרכשה כדי לרשום במשותף את המיקומים של שלושת ציוני הדרך ב-MRI ונקודות הרשת של ציוני הדרך. כהפניות, צור את מיקומי האלקטרודות כאשר האלקטרודות קבועות על הפיגום. לאחר מכן הזן את קובץ הערוץ שנוצר לתצוגת התוכנה לסיעור מוחות, ואשר את המיקום של כל האלקטרודות לחישוב מטריצת שדה עופרת.

הזן את ערכי המוליכות, המספקים את היחס בין העור, הגולגולת והמוח. השג את מטריצת שדה העופרת על סמך מודל מוליך הנפח ומיקומי האלקטרודות שנוצרו. לאחר מכן, הזן את אותות ה-EEG הממוצעים עבור תת-סוג של IED על ידי בחירה באפשרות שיטת הערכת המקור כגון S Loretta.

הפתרון ההפוך יתקבל על סמך מטריצת שדה העופרת המחושבת ואותות ה-EEG הקלט בתרשים הסיום. המקורות המשוערים המוצגים כאן הם סדרות הזמן של מיקומי המקור המוחי של מטעני חבלה ביחס לצבירים שונים בספייקים וגלים חדים. ההערכה בוצעה בזמן ספציפי המסומן בקו אנכי אדום.

להלן הטופוגרפיות של EEG, והנה המקורות הנוכחיים בקליפת המוח. איור זה מציג את מקורות המוח המשוערים במהלך ההתקף, מופעי הזמן מסומנים כקווים אנכיים אדומים. אחרי הצפייה בסרטון הזה, אתם אמורים להבין היטב כיצד להכין את המיני קאפ הקל כדי להקליט EEG עם סיבוב גבוה, ולבצע ניתוח של מקורות מוח על החולדה.

המתודולוגיה שהצגנו כאן יושמה על מודל קליני להבנת מנגנונים על האפיגנזה הבסיסית.