Paper-based Devices for Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles

Chihchen Chen; Bo-Ren Lin; Min-Yen Hsu; Chao-Min Cheng

doi:10.3791/52722

מכשירים מבוססי נייר לבידוד ואפיון של תאית שלפוחית

JoVE Journal
Bioengineering

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Bioengineering

Paper-based Devices for Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles

מכשירים מבוססי נייר לבידוד ואפיון של תאית שלפוחית

Full Text

11,978 Views

11:53 min

April 3, 2015

DOI: 10.3791/52722-v

Chihchen Chen¹, Bo-Ren Lin¹, Min-Yen Hsu², Chao-Min Cheng¹

¹Institute of Nanoengineering and Microsystems,National Tsing Hua University, ²Taichung Veterans General Hospital

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

פרוטוקול זה מפרט שיטה לבודד שלפוחית תאית (EVS), חלקיקים קרומיים קטנים שוחררו מהתאים, מ קטן כמו 10 דגימות סרום μl. גישה זו עוקפת את הצורך בultracentrifugation, דורשת רק כמה דקות של זמן assay, ומאפשרת בידוד של כלי רכב חשמלי מדגימות של כרכים מוגבלים.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבודד שלפוחיות חוץ-תאיות באמצעות פלטפורמה מבוססת נייר. זה מושג על ידי למינציה ראשונה עם שני יריעות פוליסטירן עם תאית עגולה, מגזרות נייר מיושרות על מערך של חורים רשומים. השלב השני הוא צימוד כימי של מולקולות שיקשרו שלפוחיות חוץ-תאיות לאזור בדיקת הנייר.

לאחר מכן, ניתן להזרים את הדגימה הביולוגית ישירות לאזור בדיקת הנייר, ולבודד שלפוחיות חוץ-תאיות לאחר שלב השטיפה. השלב האחרון הוא אפיון, שלפוחיות חוץ-תאיות שנלכדו באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים, אלייזה או ניתוח טרנסקריפטומי. בסופו של דבר, ניתן לטהר ולרכז תת-קבוצות של שלפוחיות חוץ-תאיות מדגימות סרום קטנות של 10 מיקרוליטר.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos