8 ביוני 2015
העשרה סביבתית לעכברים דורשת התקנה מורכבת ומאתגרת, כמו גם טכניקות גידול וטיפול מקיפות כדי להבטיח השפעות מטבוליות ואנטי סרטניות חזקות בעכברים. פרוטוקול זה מספק נהלים מפורטים לשחזור ההשפעות שהוזכרו לעיל בעכברים.
מטרת הליך זה היא לספק פרטים הדרושים לשיכון ותחזוקה של בעלי חיים בהעשרה סביבתית, המייצרת השפעות מטבוליות ואנטי סרטניות חזקות בעכברים. זה מושג על ידי הקמת סביבת הדיור המועשרת תחילה בפח גדול עם חפצים כגון גלגלים, מקורות פועלים, צריפים, צינורות, בולי עץ וכלובים. השלב השני הוא להציג את בעלי החיים לסביבה החדשה.
לאחר מכן, הסביבה המועשרת נשמרת על ידי שינוי מיקום וסוג החפצים בפח ואספקת מזון ומים טריים על בסיס קבוע. השלב האחרון הוא לנקות את החפצים שהוחלפו בסביבה כדי שיהיו מוכנים להחלפה בעתיד. בסופו של דבר, לאחר המתת חסד וניתוח רקמות של בעלי חיים.
טכניקה זו של העשרה סביבתית מראה ירידה בשומן, עמידות מוגברת להוצאת אנרגיה כנגד השמנת יתר הנגרמת על ידי דיאטה, ומתג פנוטיפי לבן לחום על ידי הפעלת ציר השומן העצבי של ההיפותלמוס. שיטה זו מתארת פרטים לגבי הקמת סביבה מועשרת למכרסמי מעבדה המשפרת את העמידות לסרטן ומחלות מטבוליות. ראשית, יש לרסס ולנגב את החלק הפנימי של פח העשרה גדול בחומרי חיטוי ספוריצידין.
בהתאם להוראות היצרן, נגב את הפח עם נייר ספוג אתנול או מי ברז 30%, מגבת ומייבש עם מגבת נייר כדי להיפטר מכל ריח מחומר החיטוי הקודם. השתמש באיגלו צינורות פלסטיק עם גלגלים מסוג SOR וצעצועים שונים אחרים מפלסטיק כמו צעצועים בסביבה מועשרת. שטפו את הצעצועים האלה כמו קודם, השתמשו בגלגלי ריצה ממתכת שנשטפו כמו קודם.
אם הצבע על הגלגל מתחיל לדעוך כך שהגלגל הופך רועש כאשר בעלי החיים רצים עליו, מרחו כמות קטנה של ג'לי נפט על המקום שבו הגלגל והציר מתחברים. השתמש בבולי עץ בסביבה מועשרת. נקה את בולי העץ על ידי הסרת מצעים או פסולת אחרת ביד.
לאחר מכן יש לעקר את בולי העץ על ידי חיטוי במחזור יבש או במחזור טקסטיל, המגיע לטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות. השתמש בכלובי האכלה נקיים בין מידות של 29 ס"מ על 18 ס"מ על 12.5 ס"מ ו-30.5 ס"מ על 19 ס"מ על 14 ס"מ כדי להחזיק. מתלה תיל האכלה ושתייה חותך חור בקוטר של לפחות חמישה סנטימטרים מהחלק התחתון הקדמי של הכלוב כדי שהעכברים יוכלו להיכנס ולצאת.
להתחיל. עבור רבע סנטימטר של קלחי תירס מצעי חיות מעבדה לתוך פח ההעשרה הנקי עד הגדול לעומק של שניים עד 2.5 סנטימטרים. לאחר מכן, הנח שניים או שלושה מבולי העץ הקודמים של אבי העורקים בפינה אחת של הפח כדי לבודד שטח של כ-1,225 סנטימטר מרובע.
ואז באזור המופרד על ידי בולי העץ, הניחו שלושה דבקים עם גלגלי SOR מעל. ודא שלגלגלים יש מקום להסתובב בחופשיות. כעת הרכיבו את צינורות הפלסטיק כך שמספר זרועות מסתעפות מהחלק המחבר המרכזי.
הנח את הצינור הזה באמצע הפח בשתי פינות הפח. הניחו כלוב האכלה מלא באותם מצעים כמו הפח. החור בקדמת כל כלוב האכלה צריך להיות פונה לכיוון מרכז הפח.
הניחו חוט מזון ומים המכיל צ'או עכבר על גבי כל כלוב האכלה. הוסף את בקבוק המים. הנח גלגל 11.5 ס"מ, גלגל 20.5 ס"מ וגלגל 28 ס"מ לתוך הפח.
לאחר מכן הניחו עוד ארבעה עד חמישה תאים מפלסטיק כמו צעצועים או מנהרות ברחבי פח ההעשרה. כסו את הפח בנייר סינון מיקרו מבודד והשתמשו בקליפסים כדי להצמיד את נייר הסינון לפח. כאשר מכניסים בעלי חיים לפח ההעשרה מכלוב רגיל, הניחו את הכלוב בפח על צדו כדי שבעלי החיים יוכלו לנוע בחופשיות מהכלוב הרגיל לפח ההעשרה.
אל תאפשר להעביר את חומרי הקינון לפח ההעשרה. ניתן לשכן 10 עד 20 בעלי חיים מאותו גיל, מין וזן גנטי בסביבה המועשרת בו זמנית. ודא שבעלי החיים נמצאים במעקב יומיומי אחר סימני מחלה או מצוקה.
במידת הצורך, טפל בעדינות בבעלי החיים כדי לבדוק את מצבם פעמיים בשבוע. בדוק את מפלס המזון והמים, וודא שהמזון והמים יספיקו ליומיים הקרובים. כמו כן, יישר את גלגלי הריצה וצעצועי ההעשרה כך שהם יהיו פרושים וניתן יהיה להשתמש בהם בקלות.
החלף את כל פריטי ההעשרה המלוכלכים פעם בשבוע, באופן אידיאלי כאשר העכברים מורחקים מהסביבה. למטרות ניסוי, הסר את כלובי ההאכלה ומתלי התיל והחלף בכלובים נקיים ומתלים מלאים במזון טרי. החלף את בקבוקי המים בבקבוקי מים נקיים.
ארגנו מחדש את פריטי ההעשרה כך שההיבטים העיקריים של ההתקנה יישמרו, אך פריטי ההעשרה ימוקמו בצורה שונה. ספוט. בדוק את שאר פח ההעשרה הגדול ונקה במידת הצורך. על ידי הוצאת פסולת מלוכלכת ופיזור מצעים נקיים חדשים אחת לשבועיים.
בעת ביצוע הגידול השבועי, שטפו את הצעצועים ביד או על ידי שליחתם דרך שטיפת הכלוב. בכל חודש, נקו את רוב הפסולת על ידי הסרת צעצועי העשרה וכלובי האכלה והוצאת החול. החלף בחול טרי וודא שיש שני סנטימטרים של מצעים בכל אזורי הכלוב אחת לשלושה חודשים או כנדרש בפרוטוקול בעלי החיים שלך, הסר את כל המצעים והצעצועים וחטא את פח ההעשרה על ידי שטיפה כמו לפני בקרת הבית בעלי חיים קבוצתיים באותו מחזור חושך בהיר של 12 שעות.
מכיוון שהעכברים בסביבה המועשרת בכלובים מבודדים זעירים, מספקים את אותם מצעי קלחי תירס בכלוב הבקרה כמו בסביבה המועשרת, ומוסיפים קן של ארבעה סנטימטרים על ארבעה סנטימטרים מואר בקן יצרן מייסטר המאכלס שלושה עד חמישה עכברים מאותו מין בכלוב עכברים רגיל. אין לספק שום צינור צעצוע או אטב בכלוב. כלול מתלה תיל בכלוב להחזקת מזון ובקבוק מים אם הכלוב אינו מחובר למערכת השקיה אוטומטית.
עקוב אחר בריאות בעלי החיים מדי יום, וודא שלבעלי החיים יש שפע של מזון ומים. החלף או נקה את הכלובים, חוטי האכלה, המזון והמים. פעם בשבוע יש לנקות את הכלובים ואת מדפי התיל כמו קודם.
עכברים זכרים בני שלושה שבועות שוכנו בסביבה מועשרת או בכלובי ביקורת במשך חמישה שבועות לפני החיסון התת-עורי של הגידול עם 10 עד 5 תאים לכל חיה. התוצאות מראות משקל גידול מלנומה B 16 כ-17 ימים לאחר החיסון. כל קבוצה כללה 10 בעלי חיים.
הכוכבית מייצגת ערך P של פחות מ-0.05 המחושב על ידי מבחן ה-T של התלמידים כאן. עכברים בני שלושה שבועות היו נתונים להעשרה סביבתית במשך שישה ימים. שישה ימים בסביבה מועשרת, ירידה רטרופריטונאלית, רקמת שומן לבנה, משקל כרית שומן.
גרף זה מראה כי שישה ימים בסביבה מועשרת, ירידה ברקמת השומן החומה, רקמת השומן הלבנה האפידרמיסית ורקמת השומן הלבנה הרטרופריטונאלית, משקל כרית השומן ביחס למשקל הגוף. שני הגרפים הבאים חולקים תוצאות מעכברים ששוכנו בסביבה מועשרת במשך ארבעה שבועות כפי שניתן לראות כאן, ארבעה שבועות בהעשרה סביבתית, ירידה במשקל כריות השומן בכל סוגי השומן למעט רקמת שומן חומה. ארבעה שבועות בהעשרה סביבתית, ירידה במשקל כריות השומן ביחס למשקל הגוף עבור כל סוגי השומן למעט רקמת שומן חומה.
לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להגדיר ולתחזק סביבה מועשרת הגורמת להשפעות אנטי סרטניות ואנטי השמנת יתר ועכברים.
פרוטוקול זה מפרט את ההליכים להקמת סביבה מועשרת לעכברים, המעודדת בריאות מטבולית ומפחיתה את הסיכון לסרטן. הוא מפרט את ההקמה, התחזוקה והניטור של הסביבה כדי להבטיח תנאים אופטימליים לבעלי החיים.
פרוטוקולים סטנדרטיים להעשרה סביבתית עבור עכברי מעבדה הם קריטיים ליצירת פנוטיפים מטבוליים ואונקולוגיים הניתנים לשחזור במחקר פרה-קליני. העשרה מבוקרת מאפשרת בדיקה חסונה של השערות הנוגעות להוצאה אנרגטית, אדיפוסיטי (השמנה) וביולוגיה של גידולים, ובכך משפיעה ישירות על תיקוף מטרות והפחתת סיכונים מנגנוניים. יישום עקבי תומך ברציפות תרגומית ובביטחון בתיק המודלים של מחלות מטבוליות וסרטן.
פרוטוקולים של העשרה סביבתית ממוקמים בממשק שבין הגילוי המוקדם לפיתוח מודלים פרה-קליניים, ותומכים הן בתיקוף של מטרות והן במחקר תרגומי.