Name: אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש Langendorff-perfused (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: חקור מודל איסכמיה-reperfusion בלבבות עכברוש מבודדים באמצעות מערכת Langendorff. שיטה זו מאפשרת הערכת תפקוד שריר הלב ומדידת לחץ חדרי לזיהוי נזק איסכמי בזמן אמת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

פרסום זה נתמך על ידי המחקר קליני וTranslational (SCTR) מכון הדרום קרוליינה, עם בית אקדמי באוניברסיטה לרפואה של דרום קרוליינה, NIH / NCATS גרנט מספר UL1 TR000062. תמיכה נוספת סופקה על ידי פרס הצטיינות VA BX002327-01 לDRM. DJH נתמכה על ידי NIH / NCATS גרנט מספר TL1 TR000061 ועל ידי NIH גרנט מספר T32 GM008716. הים היה נתמך על ידי NIH גרנט מספר T32 HL07260.

כל הנהלים המופיעים ברשימה שאושרו על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים באוניברסיטה הרפואית של דרום קרוליינה. הניסויים שתוארו כאן הם ניסויים חריפים, שאינה הישרדות. ככזה, אין שימוש במשחת עיניים וחבילת הפעלה סטרילי לא נדרשה. המתת חסד מושגת על ידי exsanguination במהלך הקציר של הלב. 1. ניסיוני הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרה או לחץ קבוע או זרימה מתמדת מכשירי Langendorff זלוף 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 4 L של קרבס Henseleit הצפת שונה (במ&quot;מ: 112 NaCl, KCl 5, 1.2 MgSO 4, 1 K 2 4 HPO, 1.25 CaCl 2, 25 3 NaHCO, 11 D-גלוקוז, 0.2 חומצת octanoic, pH = 7.4). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך 10x מאגרי המניה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים NaCl, KCl, MgSO 4, ו- K 2 4 HPO במי ultrapure 3 L. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפזר CaCl 2 ב 500 מיליליטר המים Wi ultrapureה 40 מיליליטר של 1 N HCl. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לאט להוסיף CaCl 2 פתרון לחיץ שנעשה ב1.2.1.1. להוסיף מספיק מים ultrapure להסתכם 4 ל &#39;אפשר לעורר עבור שעה 1 לפני סינון דרך מסנן 0.8 מיקרומטר. חנות ב 4 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפזר NaHCO 3 במי ultrapure 4 L. לאפשר לעורר במשך שעה 1 לפני הסינון דרך על 0.8 מיקרומטר מסנן. חנות ב 4 מעלות צלזיוס </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשלב 400 מיליליטר 10x חיץ קרבס Henseleit עם 400 מיליליטר 10x NaHCO חיץ 3. מוסיף מים ultrapure מספיק לסך 4 ל ממיסים סוכר ובחומצת octanoic תוך ערבוב. סנן באמצעות 0.8 מיקרומטר לסנן. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן מערכת ללב. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 2 ליטר של חיץ מסונן לבקבוק 4 L ממוקם 38 במעל ברזלים מחוברים לצינורית אב העורקים. זה יספק לחץ זלוף של 70-80 מ&quot;מ כספית ללב, המהווה את לחץ זלוף המומלץ 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס bubbler פיזור גז למאגר בבקבוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את החיץ באמצעות המערכת, להיות בטוח כדי לחסל את כל בועות מתוך צינורות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל גז (95% O 2/5% CO 2) לפחות 30 דקות לפני לב הוא להציב במערכת. השתמש זרימת גז בדיקה ומנתח גז דם כדי לוודא ריווי חמצן. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן אספקה ​​כירורגית ובלון. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקציר של לב, להכין זוג אחד של 6.75 &quot;מספריים כירורגיות, זוג אחד של 4.5&quot; מספריים, שני זוגות של hemostats, שני סטים של מלקחיים caramalt, שני מזרקים עם 27 מחטי G, 2 חתיכות של תפר משי 0-מד (כ 15 ס&quot;מ אורך), צינורית אחד 1/16 אינץ &#39;תיל, וצינורית לקנה הנשימה אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרכיב צינורית לקנה הנשימה, להדביק חתיכה קצרה של צינור פלסטיק בקוטר 1/16 אינץ &#39;לY-מחבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרכיב מנגנון בלון: לצרף מחט gavage לפיסת 1/16 צינורות אינץ &#39;, ולאחר מכן לצרף צינורות לדיור מתמר לחץ. מזרק קטן המצורף לצד השני של TR הלחץ האחרansducer דיור יאפשר אינפלציה ודפלציה של הבלון. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך ריבוע של קצה לעטוף ומקום פלסטיק של מחט gavage במרכז. לעטוף בניילון הנצמד סביב מחט gavage. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא בלון עם מי מלח ולקשור את שני תפרים. לנפח בלון כדי לוודא שאין דליפות. הנפח של תמיסת מלח בתוך הבלון המנופח צריך להיות בערך 200 μl, אבל יכול להשתנות בהתאם לגודל של העכברוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלופין, להשתמש בעריסת אצבע לטקס במקום של הניילון נצמד. הנח מחט gavage בתוך עריסת אצבע, למלא עם מי מלח ולקשור את. </li></ol></li></ol></li></ol> 2. קציר הלב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרסן את עכברוש ספראג Dawley באמצעות decapicone או התקן ריסון ספר אחר. שוקל חולדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל קטמין / תערובת xylazine (0.85 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין ו0.15 מ&quot;ג / קילוגרם xylazine) באמצעות זריקת intraperitoneal להרדים חולדה. מינון זה של הרדמה יספק הרדמה מספיק ל20-40 דקות, אבל ההליך אמור להסתיים מהר ככל האפשר לאחר ההרדמה הוא אישר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר מידה ראויה של הרדמה על ידי רפלקס קמצוץ הבוהן בדיקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Tracheotomy <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר פרווה מאמצע כף-לבסיס של לסת, באמצעות hemostats לרומם פרווה ומספריים לעשות חתך. שמור את הפרווה גבוהה להפריד אותו מהשריר הבסיסי, המאפשר אחד כדי לחתוך לאורך הפרווה ולהסיר אותו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות hemostats, להרים רקמות בלוטות ולעשות חתך אופקי בfascia נחותים רקמת הבלוטות. השתמש hemostats להפיץ חתך פתוח, נזהר שלא ניק ורידי הצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מספריים באמצעות hemostats, שריר שמעל קנה הנשימה קמצוץ, ובאמצעות לעשות חתך רוחבי בשריר ממש מתחת לקצה hemostats. באמצעות hemostats, התפשט לרקמות מלבד לחשוף את קנה הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות להכניס hemostats תחת קנה הנשימה, ניקוי fascia תוך כדי התקדמות בעדינות על ידי קידום וחוזר בי hemostats. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl">ברגע שhemostats ממוקמים בהצלחה מאחורי קנה הנשימה, לצבוט 0-0 תפר משי עם hemostats וhemisect קנה הנשימה עם זוג קטן, מספריים חד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס צינורית לקנה הנשימה לתוך קנה הנשימה התפצל לפתע, למשוך תפר מאחורי קנה הנשימה, ולקשור את התפר סביב קנה הנשימה cannulated, עיגון התפר לY-המפשעה של הצינורית עם קשר מנתחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מחט 27 G, להזריק 1000 U / קילוגרם הפרין לוריד הצוואר ומאפשר להסתובב למשך 30 שניות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתיחת בית החזה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר פרווה מאמצע בטן-לאזור אמצע כף-ידי צובט עם hemostats וגזירה במספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך רוחבי אינץ &#39;¾ לתוך קיר שרירי הבטן, ממש מתחת לסרעפת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך אנכי במעלה קיר הקיר וחזה הבטן, חיתוך לאורך עצם החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את הסרעפת בחזרה בילטרלי, ואז להפיץ בית חזה כדי לחשוף את לב, בית חזה מהדק עם hemostats כדי להבטיח שנשארה התפשטות. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות hemostats, להסיר בעדינות התימוס, חושף את אב העורקים עולים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקניט hemostats דרך לולאת אב העורקים, קידום וחוזר בי hemostats בעדינות מתפשט fascia לאפשר קצה hemostats דרך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש hemostats למשוך 0-0 תפר משי מאחורי אב העורקים עולים, לקשור תפר לפקעת חצי כיכר רופפת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל ברזלים כדי להתחיל זרימה של חיץ זלוף, אב העורקים hemisect ומייד להכניס צינורית לתוך לומן של אב העורקים. מהירות cinch קשר חצי כיכר ולהשלים את הקשר, הידוק ביסודיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במספריים לנתח לב מכולים הגדולים, להוציא את הלב מחזה ולצרף לעמודה זלוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקצץ משם רקמת ריאה עודפת ולאפשר לב לאזן על עמודה במשך כ -15 דקות לפני החדרת הבלון. השתמש קצב זרימה נורמלי של חיץ דרך הלב של 10-20 מיליליטר / דקה. </li></ol></li></ol> 3. Langendorff זלוף ואיסכמיה reperfusion פציעה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיקום של טרום LVבלון ssure <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוציא את האוויר הבלון תוך גלגול לצורת קונוס ולהפוך את ברזלים כדי להבטיח בלון נשאר מרוקן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בלו עזב אטריום עם מספריים קטנים לחשוף גישה לשסתום צניפי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בלון דרך אטריום שמאל ושסתום צניפי לתוך חדר השמאלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל תוכנת ניטור לחץ (LabChart Pro). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנפח בלון על ידי פתיחת שסתום ובעדינות הגדלת כמות של תמיסת מלח בבלון עד שלחץ הדיאסטולי קריאה מmicromanometer עולה אפס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבדוק את התגובה באורך-מתח, לנפח בלון לאט ללחץ הדיאסטולי של 75 מ&quot;מ כספית, להוציא את האוויר לאט, חוזר פעם אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר לחץ הדיאסטולי 10 מ&quot;מ כספית על ידי ויסות הכמות של תמיסת מלח בבלון. הפעל ברזלים לאטום בלון ברמה זו של אינפלציה, ולשמור על מערכת לחץ סגורה בין בלון LV ומתמר לחץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לב נמוך יותר לתא תא וכיסוי מחומם עם פלסטיק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מודעהministration של איסכמיה reperfusion פציעה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את החלק התחתון של החדר המחומם ולאפשר קאמריים למלא עם חיץ effused. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר חיץ ששקוע לב, להפוך את ברזלים כדי לעצור את הזרימה של חיץ ללב, גרימת איסכמיה הגלובלית. זמן איסכמיה יכול להשתנות בהתאם למטרות של הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 30 דקות של איסכמיה, להפוך ברזלים כדי לשחזר את הזרימה של חיץ ללב, ייזום reperfusion. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר reperfusion של לב עבור שעה 1 לפני סיום הניסוי. השתמש פעמים reperfusion משתנים, בהתאם למטרות של הניסוי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סיום הניסוי וקציר של רקמות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בנמל בצד של ברזלים, לנהל 10 מיליליטר של תמיסת מלח שנאגרו פוספט ב 4 מעלות צלזיוס ללב בשיעור של 10 מיליליטר / דקה לעצור הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר לב מטור זלוף, לקצץ משם נותר רקמות פרוזדורים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח לב לתוך מטריצת חיתוך רקמות נירוסטה, מכסה באבאrafilm, והמקום ב -80 ° C במשך 8 דקות, או עד שהלב יש עקביות כמו מרשמלו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר בלוק מהמקפיא ולהכניס סכיני גילוח לחיתוך מטריצה ​​לחתוך לב ל -2 פרוסות מ&quot;מ. ניתן גם לרכוש בלוקים רקמות עם גדלי פרוסה אחרים מ -2 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר פרוסות אחד בכל פעם ושחרר לתוך חנקן נוזלי להבהב להקפיא למחקרים ביוכימיים. שמור על פרוסת חדרית השלישית מהקודקוד לצביעת אוטם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרה של רקמה מחנקן נוזל חנות ב -80 ° C עד לשימוש בניסויים ביוכימיים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אוטם מכתים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה הפרוסה חדרית השלישית ב 10 מיליליטר של 1% w / כלוריד triphenyltetrazolium נ (TTC) על 37 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות. הערה: דגירה בTTC יכולה להתבצע במשך 15 או 30 דקות ללא שינוי ביעילות 15. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את פרוסת רקמה מTTC 10% פורמלין שנאגרו ולאפשר לדגירה בטמפרטורת חדר למשך הלילה. לקבלת תוצאות אופטימליות, לשמועיש לנקוט TS מתוך פורמלין וצלם בתוך 24 שעות 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוכנה פרוסה ושימוש מוכתם צילום כגון ImageJ להעריך גודל אוטם על פי הפרוטוקול של היצרן. לצלם בהקדם האפשרי לאחר קיבוע, כצבע יימוג לאורך זמן. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Bainey, K. R., Armstrong, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+perspectives+on+reperfusion+injury+in+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Clinical perspectives on reperfusion injury in acute myocardial infarction.</a> American Heart Journal. 167 (5), 637-645 (2014).</li>
<li>Beyersdorf, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+controlled+reperfusion+strategies+in+cardiac+surgery+to+minimize+ischaemia%2Freperfusion+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">The use of controlled reperfusion strategies in cardiac surgery to minimize ischaemia/reperfusion damage.</a> Cardiovascular Research. 83 (2), 262-268 (2009).</li>
<li>Langendorff, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Untersuchugen+am+%C3%BCberlebenden+S%C3%A4ugethierherzen%5BTitle%5D)+AND+%22Pfl%C3%BCgers+Archives%22%5BJournal%5D)">Untersuchugen am überlebenden Säugethierherzen.</a> Pflügers Archives. 61, 291-307 (1895).</li>
<li>Bell, R. M., Mocanu, M. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrograde+heart+perfusion%3A+The+langendorff+technique+of+isolated+heart+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Retrograde heart perfusion: The langendorff technique of isolated heart perfusion.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 50 (6), 940-950 (2011).</li>
<li>Tyers, G. F., Todd, G. J., Neely, J. R., Waldhausen, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+myocardial+protection+from+ischemic+arrest+by+intracoronary+tetrodotoxin+administration%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">The mechanism of myocardial protection from ischemic arrest by intracoronary tetrodotoxin administration.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 69 (2), 190-195 (1975).</li>
<li>Murry, C. E., Jennings, R. B., Reimer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconditioning+with+ischemia%3A+A+delay+of+lethal+cell+injury+in+ischemic+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Preconditioning with ischemia: A delay of lethal cell injury in ischemic myocardium.</a> Circulation. 74 (5), 1124-1136 (1986).</li>
<li>Kolwicz, S. C., Tian, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+function+and+energetics+in+isolated+mouse+hearts+using+31P+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac function and energetics in isolated mouse hearts using 31P NMR spectroscopy.</a> The Journal of Visualized Experiments. (42), (2010).</li>
<li>Fishbein, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+phase+acute+myocardial+infarct+size+quantification%3A+Validation+of+the+triphenyl+tetrazolium+chloride+tissue+enzyme+staining+technique%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Early phase acute myocardial infarct size quantification: Validation of the triphenyl tetrazolium chloride tissue enzyme staining technique.</a> American Heart Journal. 101 (5), 593-600 (1981).</li>
<li>Aune, S. E., Herr, D. J., Mani, S. K., Menick, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+inhibition+of+class+I+but+not+class+IIb+histone+deacetylases+exerts+cardiac+protection+from+ischemia+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Selective inhibition of class I but not class IIb histone deacetylases exerts cardiac protection from ischemia reperfusion.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 72, 138-145 (2014).</li>
<li>Yellon, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+protective+role+of+heat+stress+in+the+ischaemic+and+reperfused+rabbit+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">The protective role of heat stress in the ischaemic and reperfused rabbit myocardium.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 24 (8), 895-907 (1992).</li>
<li>Khaliulin, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+preconditioning+of+isolated+rat+hearts--a+potent+cardioprotective+mechanism+involving+a+reduction+in+oxidative+stress+and+inhibition+of+the+mitochondrial+permeability+transition+pore%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Temperature preconditioning of isolated rat hearts--a potent cardioprotective mechanism involving a reduction in oxidative stress and inhibition of the mitochondrial permeability transition pore.</a> The Journal of Physiology. 581 (Pt 3), 1147-1161 (2007).</li>
<li>Molojavyi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+ketamine+and+its+isomers+on+ischemic+preconditioning+in+the+isolated+rat+heart%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Effects of ketamine and its isomers on ischemic preconditioning in the isolated rat heart).</a> Anesthesiology. 94 (4), 623-629 (2001).</li>
<li>Asfour, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NADH+fluorescence+imaging+of+isolated+biventricular+working+rabbit+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">NADH fluorescence imaging of isolated biventricular working rabbit hearts.</a> The Journal of Visualized Experiments. (65), (2012).</li>
<li>Sill, B., Hammer, P. E., Cowan, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+mapping+of+langendorff-perfused+rat+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Optical mapping of langendorff-perfused rat hearts.</a> The Journal of Visualized Experiments. (30), (2009).</li>
<li>Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One+hour+reperfusion+is+enough+to+assess+function+and+infarct+size+with+TTC+staining+in+langendorff+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Drugs+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in langendorff rat model.</a> Cardiovascular Drugs and Therapy. 23 (4), 327-331 (2009).</li>
<li>Sutherland, F. J., Shattock, M. J., Baker, K. E., Hearse, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+isolated+perfused+heart%3A+Characteristics+and+cautions%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Pharmacology+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mouse isolated perfused heart: Characteristics and cautions.</a> Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 30 (11), 867-878 (2003).</li>
<li>Reichelt, M. E., Willems, L., Hack BA,, Peart, J. N., Headrick, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+and+coronary+function+in+the+langendorff-perfused+mouse+heart+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Physiology%22%5BJournal%5D)">Cardiac and coronary function in the langendorff-perfused mouse heart model.</a> Experimental Physiology. 94 (1), 54-70 (2009).</li>
<li>Xie, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histone+deacetylase+inhibition+blunts+ischemia%2Freperfusion+injury+by+inducing+cardiomyocyte+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Histone deacetylase inhibition blunts ischemia/reperfusion injury by inducing cardiomyocyte autophagy.</a> Circulation. 129 (10), 1139-1151 (2014).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

מבודד לב החולדה perfused יכול לשמש בהצלחה כדי לחקור את ההשפעה של התערבות תרופתית בלב נפשית מראש לפגיעה reperfusion איסכמיה 9. עם זאת, יש כמה צעדים חיוניים להליך שחייב להיות אחיד כדי להבטיח תוצאות לשחזור. שמירה על טמפרטורה של 37.4 מעלות צלזיוס במערכת היא קריטית, כמו גם היפותרמיה והיפרתרמיה קלות יכולים לגרום נפשית מראש לב 10,11. הזמן הכולל שחולף מהזרקה של חומר הרדמה לכריתה של הלב חייב להישמר עד למינימום, כחשיפה ממושכת לקטמין עלולה להפריע נפשית מראש לב 12.<...

הבהרה של האירועים שבבסיס תגובת הלב לשתי איסכמיה ו reperfusion חיונית בשיפור הטיפול בהליכי אוטם שריר לב 1 ולב כירורגית שדורשים 2 צלב-הידוק אב העורקים. בעוד מודלים in vivo של פגיעת reperfusion איסכמיה לאפשר ניתוח נקודת סיום מאוד שימושי, הם לא יעילים כמו לחקר ההשפעות התפקודיות של פגיעת reperfusion איסכמיה בחריפות בזמן אמת. בנוסף, במודלי reperfusion איסכמיה vivo בדרך כלל לייצר שונות משמעותיות בגודל אוטם, ומשלוח ישיר של תרופה ללב בזמן reperfusion הוא מאתגר. הניצול של מערכת לב Langendorff מבודדת ללימוד פגיעת reperfusion איסכמיה מאפשר להערכה תפקודית בזמן אמת של טיפולים תרופתיים, אזור האחיד של רקמת אוטם שריר, ומשלוח מיידי של תרופה ישירות לשריר הלב. תאר ב ראשוןy אוסקר Langendorff בשינה 1895 3, הלב Langendorff מבודד הוא מודל חזק ללימוד פגיעת reperfusion איסכמיה, ששמש במחקר reperfusion איסכמיה במשך 40 השנים האחרונות 4,5. הנה, כמה שינויים נעשו כדי לייעל את הלב המבודד לניתוח פונקציונלי. בcannulation באתרו של אב העורקים בזמן הלב פועם מבטיח כי הלב אינו חווה נפשית מראש איסכמי, שהיה משנה את תוצאות ניסויי reperfusion איסכמיה 6. כדי להקל על זה, tracheotomy מתבצע, המאפשר אוורור והבטחת יציבות פיזיולוגית של העכברוש במהלך ניתוח. הלב אז מצורף לעמודת מים במקטורן זכוכית ספירלה שדרכו חיץ קרבס Henseleit מועבר באמצעות זלוף מדרדר ישירות לאב העורקים. בלון מלוח מלא מוכנס לתוך החדר השמאלי ומחובר למתמר לחץ, המאפשר למדידה בזמן אמת של לחצים מהחדרחישוב ד פרמטרים פונקציונליים מרובים. בסיומו של הניסוי, הלב סמוק עם מי מלח קר כדי לעצור את ההתכווצות ופלאש קפוא בחנקן נוזלי כדי לאפשר ניתוח במורד הזרם של רמות ה- DNA, RNA והחלבון. שונה כך, לב Langendorff perfused משמש כמערכת יעילה לניטור ישיר של ההשפעה הפיזיולוגית של התערבויות תרופתיות בכל עת בחריפות במהלך פציעת reperfusion איסכמיה.

<table><tbody><tr><td>נתרן כלורי</td><td>סיגמא אולדריץ</td>' <td>S3014</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן כלורי</td><td>סיגמא אולדריץ</td>' <td>P9541</td><td></td></tr><tr><td>מגנזיום גופרתי</td><td>סיגמא אולדריץ</td>' <td>203726</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן פוספט דו-בסיסי</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>RES20765-A7</td><td></td></tr><tr><td>סידן כלוריד דיהידראט</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>C8106</td><td></td></tr><tr><td>נתרן ביקרבונט</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>S5761</td><td></td></tr><tr><td>D-גלוקוז</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>חומצה אוקטנואית</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>C2875</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-טריפנילטטרזוליום כלוריד</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>T8877</td><td></td></tr><tr><td>מתמר לחץ רפואי</td><td>MEMSCAP</td><td>SP844</td><td></td></tr><tr><td>מאסטרפלקס משאבה פריסטלטית</td><td>קול פארמר</td><td>EW-07521-40</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex ראש משאבת עומס קל</td><td>קול פארמר</td><td>EW-07518-10</td><td></td></tr><tr><td>אמבט מים במחזור מחומם</td><td>Lauda</td><td>M3</td><td></td></tr><tr><td>מודול זרימת צינורות</td><td>Transonic</td><td>TS410</td><td></td></tr><tr><td>קונסולת מחקר מודולרית</td><td>Transonic</td><td>T402</td><td></td></tr><tr><td>חיישן זרימה מוטבע</td><td>Transonic</td><td>ME2PXN</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab התקני קליטת נתונים</td><td>AD Instruments</td><td>PL3508</td><td></td></tr><tr><td>LabChart תוכנה לרכישת נתונים</td><td>AD Instruments</td><td>MLU60/8</td><td></td></tr></tbody></table>

אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש langendorff-perfused

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

לאירועים הביוכימיים סביב פגיעה באיסכמיה רפרפוזיה בסביבה האקוטית יש חשיבות רבה לקידום אפשרויות טיפול חדשות לאוטם שריר הלב וסיבוכים לבביים של ניתוחי חזה. היכולת של תרופות מסוימות להתנות את שריר הלב כנגד פגיעה באיסכמיה הובילה למספר ניסויים קליניים, ללא הצלחה רבה. מודל הלב המבודד מאפשר התבוננות חריפה בהשפעות התפקודיות של פגיעה באיסכמיה בזמן אמת, כולל ההשפעות של התערבויות פרמקולוגיות שונות הניתנות בכל נקודת זמן לפני או בתוך חלון הפגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה. מכיוון שתקופות קצרות של איסכמיה יכולות להקדים את הלב מפני פגיעה איסכמית, מבוצעת קנולציה של אבי העורקים באתרה כדי לאפשר הערכה תפקודית של שריר הלב שאינו מותנה מראש. בלון מלא במי מלח מונח בחדר השמאלי כדי לאפשר מדידה בזמן אמת של יצירת הלחץ. פגיעה איסכמית מדומה על ידי הפסקת זרימת חיץ הזלוף, ואחריה רפרפוזיה. ניתן לווסת את משך האיסכמיה והרפרפוזיה כדי לבחון אירועים ביוכימיים בכל נקודת זמן נתונה. למרות שמודל הלב המבודד של לנגנדורף אינו מאפשר התחשבות באירועים מערכתיים המשפיעים על איסכמיה ורפרפוזיה, זהו מודל מצוין לבחינת אירועים תפקודיים וביוכימיים חריפים בחלון של פגיעה באיסכמיה כמו גם את השפעת ההתערבות התרופתית על התניה לבבית לפני ואחרי התניה לבבית. מטרת פרוטוקול זה היא להדגים כיצד לבצע קנולציה של אבי העורקים וכריתת לב ואחריה פגיעה באיסכמיה/רפרפוזיה במודל לנגנדורף.

מנגנון בלון החדר השמאלי מאפשר ניטור של הלחץ שפותח על ידי חדר הקבלנות שמאלה (איור 1) בזמן אמת. כפי שתואר לעיל 7, עקבות לחץ זה יכול לשמש כדי לחשב רב של הפרמטרים של תפקוד חדר. חישובים אלה יכולים להתבצע בשלב הבסיסי, כמו גם את שלב reperfusion, בממוצע לכל עקבות מרובות בתוך כל קבוצה, ובהשוואה על מנת לקבוע אם ההתערבות התרופתית הביאה נפשית מראש לב, כפי שעשינו בעבר 9. פרמטר אחד כזה הוא הלחץ שפותח, מחושב כהפרש בין לחץ סיסטולי ודיאסטולי לחץ הסוף. הלחץ שפ...

לב החולדה המבודד הוא מודל מתמשך לפגיעה באיסכמיה. כאן, אנו מתארים את תהליך קצירת הלב הפועם מחולדה באמצעות קנולציה של אבי העורקים באתרה, זלוף לנגנדורף של הלב, סימולציה של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה וצביעה על אוטם כדי לאשר את היקף העלבון האיסכמי.

אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש Langendorff-perfused

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא לדגמן איסכמיה ופגיעה מרפרפוזיה, ex vivo. הדבר מושג תחילה על ידי הרדמה של חולדה ופתיחת בית החזה כדי לבצע קניולציה של האורטה ב-C two, ובכך למנוע עישור איסכמי (ischemic preconditioning) של השריר הלבבי. לאחר מכן, הלב מוסר ומחובר למערכת פרפוזיה of alanor.השלב הסופי הוא השראת פגיעה מהרפוסיה לאחר איסכמיה על ידי הפסקת זרימת התמיכה למשך פרק זמן, ולאחר מכן השבת הזרימה. לבסוף, מדידת יצירת הלחץ החדרתי משמשת להדגמת ההשפעה של פגיעה מהרפוסיה לאחר איסכמיה על תפקוד השריר הלבבי. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום האיסכמיה וההרפוסיה של הלב, כגון אילו אירועים מולקולריים מתרחשים במהלך השעות הראשונות והדינמיות של פגיעה מהרפוסיה לאחר איסכמיה.ראשית, חשבו את כמות חומר ההשכרה הנדרשת לאחר שווידאתם שהחולדה תחת השפעת הרדמה. התחילו את הטרכיאוטומיה על ידי פתיחה ראשונית של העור מאזור מרכז ארבע הגפיים ועד לבסיס הלסת. השתמשו במלקחיים להומיסטזיס כדי להזיז את העור הצידה, ובכך לחשוף את השרירים.לאחר מכן, בעזרת תפסני עשירה (hemostats), הרימו את רקמת הבלוטה והשתמשו במספריים כדי לבצע חתך תחתון לתוך הפסציה. הרחיבו את הרקמה החשופה באמצעות זוג תפסני עשירה נוסף. היזהרו לא לפצוע את הווריד הג'וגולרי.כעת בצעו חתך רוחבי בשריר המכסה את הקנה באמצעות מספריים ובסיוע של המוסטטים. לאחר מכן, השתמשו בהמוסטטים כדי לחשוף את הקנה על ידי מיקום זהיר של ההמוסטטים מתחת לקנה, תוך ניקוי הפסציה בתהליך. לאחר מכן, תפסו עם ההמוסטטים תפר משי 0,0 מאחורי הקנה.בשלב הבא, השתמשו במספריים לצורך חיתוך. נתחו את הקנה (trachea) לתוך הקנה. הכניסו את הקניולה התרסימלית והדקו אותה באמצעות התפר, ולא את התפר אל ה-Y של הקניולה.כעת, בעזרת מזרק עם מחט בקוטר 27 gauge, מזריקים 1000 units של heparin לכל קילוגרם לווריד הג'וגולרי (jugular vein). ממתינים 30 שניות לפני תחילת התורקוטומיה (thoracotomy). מתחילים את התורקוטומיה על ידי הסרת העור שבין מרכז הבטן למרכז הרבע הש第四 בעזרת המוסטטים ומספריים.לאחר מכן, בצעו חתך של שלושה רבעי אינץ' בדופן הבטן, ממש מתחת לסרעף. המשיכו את החתך אנכית לאורך העצם הסטרנום. לאחר מכן, גזרו את הסרעף משני הצדדים כדי לחשוף את כלוב הצלעות.כעת, הרחיבו את כלוב הצלעות וקבעו אותו הצידה באמצעות תפסני המסטט (hemostats), ובכך חשפו את הלב. השחלת הקנולה לאורטה היא השלב הקריטי ביותר בפרוצדורה. יש להכניס את הקנולה בדייקנות ולקשור אותה במהירות כדי למנוע מצב שבו הלב יעבור תקופה קצרה של איסכמיה, דבר שעלול לשנות את תוצאות האיסכמיה-רפרפוזיה (ischemia reperfusion) שתבוא לאחר מכן.ניסוי באמצעות תפסני עשירה (hemostats). הסר בזהירות את הבלוטה הטימוס כדי להגיע לעורק האורטה העולה. העבר את תפסני העשירה דרך לולאת האורטה דרך הפציה.לאחר מכן, השחילו תפר משי 00 דרך הפתח וקשרו אותו בקשר פשוט רפוי. כעת התחילו את זרימת תמיסות הפרפוזיה דרך הקנולה. לאחר מכן, בצעו נתיחה של האורטה והכניסו מיד את הקנולה אל תוך לומן האורטה.הדק את הקנולה על ידי הידוק הקשר והשלמתו לקשר ריבועי. בעזרת מספריים, נתק את הלב מהכליים הגדולים. לאחר השחרור, הוצא אותו וחבר אותו לעמוד הפרפוזיה.גזמו את רקמת הריאה העודפת. לאחר כ-15 דקות, הלב יגיע לשיווי משקל עם זרימת בופר רגילה של בין 10 ל-20 milliliters לדקה. לאחר שהלב השתווה לעמוד, ניתן להחדיר את הבלון.ראשית, יש לרוקן את הבלון מהאוויר תוך כדי גלגולו לצורת קונוס. יש לנעול את הזרימה אל הבלון לאחר שרוקנו אותו. שנית, יש לגשת למסוע המיטרלי על ידי כריתת העלייה השמאלית של הלב.שלישית, הכניסו את הבלון דרך המסתם המיטרלי אל תוך החדר השמאלי. כעת התחילו בניטור הלחץ הסיסטולי והדיאסטולי באמצעות תוכנת lab chart pro, ונפחו את הבלון עד שהלחץ יהיה גבוה מ-0. לאחר מכן, בדקו את תגובת הלחץ-אורך.נפחו את הבלון לאט עד שהלחץ מגיע ל-75 millimeters of mercury. לאחר מכן, רוקנו אותו לאט וחזרו על הפעולה. הסיגו את הלחץ חזרה ל-10 millimeters על ידי שינוי כמות התמיסה המלחית בבלון.לאחר מכן, נעול את הבלון בלחץ זה ושמר מערכת לחץ סגורה בין הבלון למתמר (transducer). לבסוף, הכנס את הלב לתא מחומם ועטוף אותו בניילון נצמד. יש להסגיר את התא כך שיתמלא בבופר מותאם.לאחר שהלב הוטבע, הפסיקו את זרימת הבופר. פעולה זו גורמת לאיסכמיה גלובלית למשך הזמן הדרוש. במקרה זה, 30 דקות.לאחר 30 דקות, הפסיקו את האיסכמיה על ידי השבת זרימת התמיכה אל הלב ושחרור פקק התא. המתינו עד לסיום זמן הרפרפוזיה הרצוי ולאחר מכן סיימו את הניסוי, שבמקרה זה יהיה לאחר שעה של רפרפוזיה דרך הפתח הצדדי של ברז העצירה. הגבישו 10 milliliters של PBS קר מאוד במשך דקה אחת.פעולה זו תעצור את פעילות הלב. לאחר מכן, הוציאו את הלב מהעמודה וגזרו כל רקמה שנותרה מהעליות. ייבשו את הלב בעזרת נייר סופג, העבירו אותו למטריצת חיתוך וכסו אותו ב-perfil.הקפיאו את הלב בטמפרטורה של 80- מעלות צלזיוס למשך שמונה דקות או עד שיגיע למרקם של מרשמלו. בעזרת להבי תער, חלקו את הלב לפרוסות בעובי של 2 מילימטר, או לפי העדפתכם, הסירו כל פרוסה באופן פרטני והקפיאו אותה בחנקן נוזלי. עבור מחקרים ביוכימיים, יש לאחסן את הפרוסות הקפואות בטמפרטורה של 80- מעלות צלזיוס.עבור צביעת אוטם (infarct staining) השאירו פרוסה אחת ללא הקפאה בחנקן נוזלי. עם הפרוטוקול המתואר, מכשיר בלון החדר השמאלי מאפשר ניטור בזמן אמת של הלחץ המיוצר על ידי התכווצות החדר השמאלי.בלב תקין, טווח הלחץ המפותח הוא בין 70 ל-130 מילימטרים של כספית. לאחר פגיעה איסכמית, הלחץ המפותח פוחת והלחץ הדיאסטולי הסופי עולה כאשר מחסנים בבעלי חיים סוכן התניה מוקדמת, כגון saha, מעכב HDAC מסוג Class one and two B, לפני הכריתה; במקרה זה, לחץ הבסיס עשוי להשתנות והשפעותיה של פגיעת איסכמיה-רפרפוזיה מופחתות.ניתן להוציא ישירות או לחשב מתוך פלט התוכנה גם מדדים אחרים של תפקוד החדר השמאלי. בבדיקה של הלב הפגוע באמצעות TTC, הצובע רקמה פעילה מטבולית באדום, התברר כי לבבות שהוכפפו לפגיעת reperfusion ischemia היו פחות פעילים מטבולית באופן משמעותי, מה שמעיד על כך שהכילו רקמה נקרוטית לאחר הליך זה. ניתן להשתמש בטכניקות כגון real-time quantitative PCR, Western blotting ומספקטרומטריית מסות כדי לענות על שאלות כגון, מהן ההשפעות הביוכימיות והגנטיות של ischemia, פגיעת reperfusion וטיפול תרופתי על הלב?

induction-assessment-ischemia-reperfusion-injury-langendorff-perfused

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מאמר זה מתאר טכניקה גבוהה ברזולוציה של זמן ומרחב התנועה תמונה אופטית פעולה פוטנציאל על פני השטח של Langendorff-perfused הלבבות חולדה באמצעות צבע פוטנציומטרית (di-8-ANEPPS).

מיפוי אופטי של Langendorff-perfused לבבות עכברוש

המודל של עכברוש אקוטי אוטם שריר הלב (AMI) כדאי ללמוד תוצאה של MI על תפקוד pathophysiological ופיזיולוגיות לב.

באוטם שריר הלב אצל חולדות

אנחנו מציגים את שיטה כירורגית כדי לגרום לאיסכמיה / reperfusion הניסיוני (I / R) פציעה כדי לדמות אוטם שריר הלב (MI) בעכברי מודל, המאפשר ליותר בהירות במיצוב של קשירה בעורק השמאלי הקדמי יורד (LAD) כדי להגדיל את שחזור ניסויים MI בעכברים.

דגם של שריר הלב איסכמיה reperfusion הפגיעה Murine באמצעות קשירת של העורק השמאלי קדמי יורד

שמורת זרם כלילית (CFR), מוגדרת כיחס של זרימת דם כלילית מירבית לזרימת הדם הכלילית במנוחה. אנו מציגים פרוטוקול להערכת CFR בחולדות באמצעות אולטרסאונד, אשר מציעה את ההזדמנות לחזות גורמי סיכון לב וכלי דם בהעדר מחלה חסימתית כלילית.

הערכה של שמורת זרם כלילית לאחר איסכמיה אוטם שריר הלב Reperfusion בחולדות

כאן אנו מתארים שיטה פשוטה וניתנת לשחזור שיכולה לגרום לאוטם שריר הלב או לפגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים על ידי קשירה מדויקת של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי באמצעות מיקרומניפולציה.

השראת אוטם שריר הלב ופגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים

מודל איסכמיה-רפרפוזיה שריר הלב של לב חולדה משופר על ידי שימוש ב- retractor מתוצרת עצמית, צינור פוליוויניל כלוריד ושיטת קשר ייחודית. אלקטרוקרדיוגרמה, טריפנילטרזוליום כלוריד וכתמים היסטולוגיים, ותוצאות ניתוח הישרדות באחוזים הראו כי לקבוצת המודל המשופרת יש שיעורי הצלחה והישרדות גבוהים יותר מאשר לקבוצת המודל הקיימת כבר.

מודל מכרסמים משופר של איסכמיה שריר הלב ופציעת רפרפוזיה

המחקר הנוכחי מדגים מודל בעל חיים בעל יכולת שחזור גבוהה של איסכמיה אזורית חריפה של שריר הלב ופגיעה ברפרפוזיה בארנבים באמצעות מיני בית חזה שמאלי למקרי הישרדות או עצם סטרנטומיה בקו האמצע למקרים שאינם הישרדותיים.

מודל של איסכמיה ופגיעה רפרפוזיה בארנבים

מאמר זה מדגים את ההיתכנות של השגת זמני זילוח ארוכים יותר (4 שעות) של שתלי לב מורין ללא אובדן תפקוד על ידי הפעלת לחצי זילוח נמוכים יותר (30-35 מ"מ כספית) מאשר פיזיולוגיים (60-80 מ"מ כספית) במהלך לנגנדורף.

זילוח לנגנדורף שונה לזמני זילוח ארוכים יותר של השתלות לב מכרסמים

פרוטוקול זה מתאר את תהליך ההכנה לרפרפוזיה של חסימת עורק המוח התיכון דרך עורק התרדמה המשותף.

הכנת מודל שונה עבור זילוח חסימת עורק מוחי אמצעי

מודל רב עוצמה עבור perioperative וביקורתית טיפול הקשור לפגיעה כליות חריפה מוצגת. שימוש hypoperfusion כל הגוף הנגרמת על ידי דום לב אפשר כמעט לשחזר את השינויים היסטולוגית ופונקציונלי של AKI קליניים.

דום לב Normothermic ו החייאה: במודל עכבר של פגיעה איסכמיה reperfusion

חקור מודל איסכמיה-reperfusion בלבבות עכברוש מבודדים באמצעות מערכת Langendorff. שיטה זו מאפשרת הערכת תפקוד שריר הלב ומדידת לחץ חדרי לזיהוי נזק איסכמי בזמן אמת.

אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש Langendorff-perfused

גלה סרטונים נוספים