Name: קביעת העדפות Ultrasonic ניקוד בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו בחירה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 16 s
Description: חקור העדפות לקולות אולטראסוניים בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו-בחירה. שיטה זו מאפשרת לחוקרים ללמוד על תקשורת ומערכות יחסים חברתיות בין פרטים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי גרנט ב- סיוע לJSPs עמיתים לAA; על ידי מענקים ב-סיוע למחקר מדעי על תחומי חדשניים לעמיתי JSPs (מס &#39;4501 ומס&#39; 25,132,712) לTK; ועל ידי מענק מחקר מטעם אוניברסיטת Azabu. איור 2 הודפס מחדש מKihara, ט, Harada, ט, וKoshida, ייצור תואם ופל נ ומאפיינים של קרינת אולטרא-סאונד מושרה תרמית סיליקון nanocrystalline. ב: חיישנים ומפעילים: פיסיים, נפח 125, Elsevier, עמ &#39;. 426, (2006), באישור Elsevier.

<html> כל ההליכים אושרו על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת Azabu. כל הניסויים בוצעו בתא אטום לרעש. 1. הכנת בעלי החיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זכרים להקלטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשיג עכברי זכרים מגיעים לבגרות מינית חוו בהזדווגות. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נושאים נקבה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשיג נקבות עכברי בתולה שכבר שוכנו עם 2 עד 5 להמלטה לכלוב (בדרך כלל 8 - 12 שבועות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשיג מריחות נרתיק יומי כדי לקבוע את השלב של מחזור הייחום לפני הבדיקה, לפי מקלין 21. יש להקפיד למזער את הגירוי בנרתיק כדי למנוע pseudopregnancy. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכתים את המריחות עם Giemsa, ולקבוע שלב של מחזור הייחום מבוסס על הנוכחות או עדר של כדוריות דם לבנות, תאי האפיתל cornified, ותאי אפיתל גרעיני, על פי 22 נלסון. </li></ol></li></ol> 2. מכשירים (איור 1) _content &quot;&gt; <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/53074/53074fig1.jpg" /> איור 1. סכמטי של מבחן התיבה והתקנים דו בחירה. עכברים יכולים לגשת חדרים ו- B דרך השערים הקטנים הממוקמים ביניהם לבין האזור הניטרלי. התיבה דו-הבחירה ושני משדרי אולטרסאונד מונחים על רצפת חדר אטום לרעש. המיקרופון מושעה בתוך החדר אטום לרעש. קיצור:. מחשב, מחשב אישי <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53074/53074fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקלטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר מיקרופון הקבל קולי למחשב באמצעות ממיר A / D USB. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את רמת הרווח של ממיר A / D ל&quot; 7 &quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתונים אקוסטיים רשומות בקבצים בפורמט של 16 סיביות עם קצב דגימה של 400 kHz באמצעות תוכנה ללכידה אודיו. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור השמעה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר D / ממיר למחשב באמצעותממשק USB. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חיבור שני מגברים לD / ממיר באמצעות מחליש. (המכשיר האחרון משמש כדי למנוע עומס יתר.) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר פולט אולטרסאונד לכל מגבר. </li></ol></li></ol> 3. USV הקלטה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח עכבר זכר ב( 17 x 10 x 11 סנטימטר) קטן או כלוב בגודל בינוני (21 x 14 x 13 סנטימטרים) עם חור בקוטר 6 סנטימטר בדפנות והחור מכוסה ברשת תיל 0.5 סנטימטר. בעת שימוש בכלוב בגודל בינוני, לבנות מחיצה מעבר למרכז הכלוב לצמצם את השטח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אין להשתמש במצעים בכלוב, כדי למנוע רעשי רשרוש שיכול לזהם את ההקלטות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים מיקרופון ליד הרשת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגין ניטור ניקוד קולי עם הגדרת ההקלטה מוצגת בשלב 2.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח עכבר נקבה לבגרות מינית בשני metestrus או diestrus בכלוב עם עכבר הזכר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא USVs במשך 3 - 5 דקות. </li></ol> 4. Test תיבה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבנות תיבת הבדיקה באמצעות לוח אקריליק (איור 1). הערה: תיבת הבדיקה (35 x 20, וx 20 סנטימטר) מחולקת בשלושה מדורים: אזור ניטראלי (15 x 20 סנטימטרים), וחדרים ו- B (20 x 10 סנטימטר, כל אחת). חדרים ו- B כל יש חור 4 סנטימטר בקוטר שמכוסה ברשת תיל 0.5 ס&quot;מ. החורים והרשת נמצאים בכל קצה של חדרים וב הפוך שערים (5 X 5 סנטימטרים כל אחת) בין האזור הניטרלי וחדרי A ו- B. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע דליפת קול לבודד כל פולט אולטרסאונד, פרט לצד הפונה לרשת, באמצעות צלחות גומי, איטום אותם לתיבה מסביב לכל רשת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותמות להוביל מקום בשני הצדדים של הקיר בין החדרים ו- B לבידוד קול. </li></ol> 5. הכנה לקול ניגון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת צלילי פלייבק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ללכוד קטע 20 שניות של USV מהקובץ המוקלט באמצעות תוכנה לעריכת אודיו דיגיטלית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר וללכוד רקע לאISE (0.35 שניות) מקובץ 20 שניות קטע USV. צור קובץ רעשי רקע 20 שניות על ידי חזרה על קטע הרעש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לנגן את שני קבצי הקול בו זמנית, לייצא אותם כקובץ צליל סטריאו אחת, עם קובץ אחד ל&quot; אוזן שמאל &quot;וקובץ האחר ל&quot; אוזן ימין.&quot; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סנן את קבצי קול באמצעות כמסנן גבוה לעבור עם הפסקת של 40 קילוהרץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפחית את הרעש באמצעות הכלי להפחתת רעשים בתוכנה שלאחר עיבוד. בחר וללכוד קטע של הקובץ שמכיל לא USVs כפרופיל להפחתת רעשים, ולהפעיל הפחתת רעש עם רמה 40. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כיול של צלילי פלייבק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שהמרחב בין קרינת אולטרא-סאונד ומיקרופון הוא 10 סנטימטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לכייל את רמות לחץ קול מקרינת אולטרא-סאונד, לבצע ניטור קולי באמצעות התצורה המתוארת בשלב 2.1. מדוד את רמת לחץ קול על ידי המיקרופון בדציבלים (dB). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Using המחליש ומגברים, להתאים את עוצמת הקול של USVs שנוצר על ידי קרינת אולטרא-סאונד לאותה רמת לחץ הקול כUSVs הזכר שנרשם בשלב 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעת השימוש בשני משדרי אולטרסאונד וקובץ קול מורכב מUSVs ורעשי רקע, לאשר כי שני משדרי אולטרסאונד תערוכה באותה רמת לחץ קול באמצעות קול כיול (למשל, צליל טהור 75-kHz) לפני ביצוע הבדיקה התנהגותית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר מתרבה קובץ קול מורכב משני זרמים של USVs, להתאים שתי רמות לחץ קול שנוצרו באותה הרמה, לפני הבדיקה. </li></ol></li></ol> 6. מבחן דו-בחירה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את קרינת אולטרא-סאונד מאחורי משתלב בתיבת הבדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את השערים לחדרים ו- B עם לוח אקריליק, ולהרגיל את הנקבה בכפוף לאזור הניטרלי למשך 30 דקות. לכסות את התיבה עם אקריליק לוח כדי למנוע שהעכבר יכול לברוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל הקלטת וידאו באמצעות CCהמצלמה D רכובה מעל לתיבה. המצלמה (לא מוצג באיור 1) משתרעת על השטח של כל שלושת התאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את השער וכיסוי לוח ולאפשר הנקבה לחקור באופן חופשי את תיבת הבדיקה, כולל אזורי הצליל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהנקבה חקרה שני רשתות שינוי, וחזרה לאזור הניטרלי, להתחיל לשחק קובץ קול 20 שניות שוב ושוב במשך 5 או 10 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל מעקב התנהגות במשך 5 או 10 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להפחית את רמזי חוש הריח לא רצויים שהופקדו מהנושא הקודם, לנקות את כלובי המבחן בין הבדיקות עם 70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור המקום של קרינת אולטרא-סאונד ו- B באופן אקראי, כדי למנוע השפעת הטיה צד טבועה כלפי חדרי A או B. </li></ol> 7. ניתוח סטטיסטי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בתוכנת ניקוד אירוע התנהגותיות, לנתח את הפרמטרים הבאים: מספר כולל של ערכים בכל חדר; משך זמן כולל של שהייה בכל אזור מרכז; משך זמן כולל של שהייה בכל אזור צליל; ומשך הזמן הכולל של חיפוש של כל רשת מול פולט אולטרסאונד. איור 1 מדגים מה הכוונה &quot;אזור מרכז&quot; ו- &quot;אזור צליל.&quot; הערה: במקרים בהם העכבר נשאר על הקו המפריד בין שני האזורים (איור 1, קו מקווקו) להחליט מיקום על ידי הכיוון של הראש. כאשר הראש פונה לצד הרשת, הוא הבקיע כמו שהייה באזור הקול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכל פרמטר התנהגות, להשוות את תגובות לחדרים ו- B באמצעות בדיקה חתמה דרגה Wilcoxon, או -tests לא זיווג עם רמה מובהקת של 0.05. </li></ol>

<ol><li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+behavior%2C+ultrasonic+communication+and+social+reward+are+influenced+by+genetic+variation+in+adolescent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice.</a> PLoS One. 2 (4), e351(2007).</li>
<li>Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+adult+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice+during+three+types+of+social+encounters%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T+tf/J mice during three types of social encounters.</a> Genes Brain Behav. 10 (1), 44-56 (2010).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+and+usage+of+female+and+male+mouse+ultrasonic+vocalizations+reveal+only+minor+differences%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The structure and usage of female and male mouse ultrasonic vocalizations reveal only minor differences.</a> PLoS One. 7 (7), e41133(2012).</li>
<li>Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+ultrasonic+vocalisation+in+social+communication+and+divergence+of+natural+populations+of+the+house+mouse+%28Mus+musculus+domesticus%29%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus).</a> PLoS One. 9 (5), e97244(2014).</li>
<li>Amato, F. R., Moles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+as+an+index+of+social+memory+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations as an index of social memory in female mice.</a> Behav. Neurosci. 115 (4), 834-840 (2001).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+male+mice+emit+context-specific+ultrasonic+vocalizations+that+are+modulated+by+prior+isolation+or+group+rearing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment.</a> PLoS One. 7 (1), e29401(2012).</li>
<li>Ehret, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infant+rodent+ultrasounds%E2%80%93a+gate+to+the+understanding+of+sound+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">Infant rodent ultrasounds–a gate to the understanding of sound communication.</a> Behav. Genet. 35 (1), 19-29 (2005).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLoS Biol. 3 (1), e386(2005).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab.+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46 (1), 28-34 (2007).</li>
<li>Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+partial+from+whole+ultrasonic+vocalizations+using+a+go%2Fno-go+task+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Acoust.+Soc.+Am%22%5BJournal%5D)">Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice.</a> J. Acoust. Soc. Am. 136 (6), 3401(2014).</li>
<li>Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+ultrasonic+vocalizations+by+CBA%2FCaJ+mice+%28Mus+musculus%29+is+related+to+spectrotemporal+dissimilarity+of+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations.</a> PLoS One. 9 (1), e85405(2014).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%E2%80%98songs%E2%80%99+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic ‘songs’ with approach behaviour.</a> Biol. Lett. 5 (5), 589-592 (2009).</li>
<li>Musolf, K., Hoffmann, F., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+courtship+vocalizations+in+wild+house+mice%2C+Mus+musculus+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic courtship vocalizations in wild house mice, Mus musculus musculus.</a> Anim. Behav. 79 (3), 757-764 (2010).</li>
<li>Asaba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+social+environment+imprints+female+preference+for+male+song+in+iice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Developmental social environment imprints female preference for male song in iice.</a> PloS one. 9 (2), e87186(2014).</li>
<li>Uematsu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+approaches+to+pup+ultrasonic+vocalizations+produced+by+a+nanocrystalline+silicon+thermo-acoustic+emitter%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Maternal approaches to pup ultrasonic vocalizations produced by a nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitter.</a> Brain Res. 1163, 91-99 (2007).</li>
<li>Okabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+social+experience+and+gonadal+hormones+on+retrieving+behavior+of+mice+and+their+responses+to+pup+ultrasonic+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22Zoolog.+Sci%22%5BJournal%5D)">The effects of social experience and gonadal hormones on retrieving behavior of mice and their responses to pup ultrasonic vocalizations.</a> Zoolog. Sci. 27 (10), 790-795 (2010).</li>
<li>Okabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pup+odor+and+ultrasonic+vocalizations+synergistically+stimulate+maternal+attention+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pup odor and ultrasonic vocalizations synergistically stimulate maternal attention in mice.</a> Behav. Neurosci. 127 (3), 432-438 (2013).</li>
<li>Shinoda, H., Nakajima, T., Ueno, K., Koshida, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermally+induced+ultrasonic+emission+from+porous+silicon%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Thermally induced ultrasonic emission from porous silicon.</a> Nature. 400 (6747), 853-855 (1999).</li>
<li>Kihara, T., Harada, T., Koshida, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wafer-compatible+fabrication+and+characteristics+of+nanocrystalline+silicon+thermally+induced+ultrasound+emitters%5BTitle%5D)+AND+%22Sensor.+Actuat.+A-Phys%22%5BJournal%5D)">Wafer-compatible fabrication and characteristics of nanocrystalline silicon thermally induced ultrasound emitters.</a> Sensor. Actuat. A-Phys. 125 (2), 422-428 (2006).</li>
<li>Kikusui, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross+fostering+experiments+suggest+that+mice+songs+are+innate%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Cross fostering experiments suggest that mice songs are innate.</a> PloS One. 6 (3), e17721(2011).</li>
<li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Vaginal+Lavage%2C+Crystal+Violet+Staining%2C+and+Vaginal+Cytological+Evaluation+for+Mouse+Estrous+Cycle+Staging+Identification%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification.</a> J. Vis. Exp. (67), e4389(2012).</li>
<li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL%2F6J+mice%3A+I.+Cycle+frequency%2C+length+and+vaginal+cytology%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).</li>
<li>Tomihara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+ER-beta+gene+disruption+on+estrogenic+regulation+of+anxiety+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Effect of ER-beta gene disruption on estrogenic regulation of anxiety in female mice.</a> Physiol. Behav. 96 (2), 300-306 (2009).</li>
<li>Zheng, Q. Y., Johnson, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+associated+with+the+modifier+of+deaf+waddler+%28mdfw%29+locus+corresponds+with+age-related+hearing+loss+in+12+inbred+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hear.+Res%22%5BJournal%5D)">Hearing loss associated with the modifier of deaf waddler (mdfw) locus corresponds with age-related hearing loss in 12 inbred strains of mice.</a> Hear. Res. 154 (1-2), 45-53 (2001).</li>
<li>Haga, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+male+mouse+pheromone+ESP1+enhances+female+sexual+receptive+behaviour+through+a+specific+vomeronasal+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The male mouse pheromone ESP1 enhances female sexual receptive behaviour through a specific vomeronasal receptor.</a> Nature. 466 (7302), 118-122 (2010).</li>
<li>Grimsley, J. M., Monaghan, J. J., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+social+vocalizations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development of social vocalizations in mice.</a> PLoS One. 6 (3), e17460(2011).</li>
<li>Sugimoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+strain+differences+in+waveforms+of+ultrasonic+vocalizations+during+male-female+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A role for strain differences in waveforms of ultrasonic vocalizations during male-female interaction.</a> PLoS ONE. 6 (7), (2011).</li>
<li>Hanson, J. L., Hurley, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+presence+and+estrous+state+influence+mouse+ultrasonic+courtship+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations.</a> PLoS One. 7 (7), e40782(2012).</li>
<li>Wang, H., Liang, S., Burgdorf, J., Wess, J., Yeomans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+induced+by+sex+and+amphetamine+in+M2%2C+M4%2C+M5+muscarinic+and+D2+dopamine+receptor+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations induced by sex and amphetamine in M2, M4, M5 muscarinic and D2 dopamine receptor knockout mice.</a> PLoS One. 3 (4), (2008).</li>
<li>Moles, A., Kieffer, B. L., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficit+in+attachment+behavior+in+mice+lacking+the+mu-opioid+receptor+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Deficit in attachment behavior in mice lacking the mu-opioid receptor gene.</a> Science. 304 (5679), 1983-1986 (2004).</li>
<li>Hiramoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tbx1%3A+identification+of+a+22q11.2+gene+as+a+risk+factor+for+autism+spectrum+disorder+in+a+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Tbx1: identification of a 22q11.2 gene as a risk factor for autism spectrum disorder in a mouse.</a> Hum. Mol. Genet. 20 (24), 4775-4785 (2011).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+deficits+in+social+behaviors+and+ultrasonic+vocalizations+in+later+generations+of+mice+lacking+neuroligin4%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Absence of deficits in social behaviors and ultrasonic vocalizations in later generations of mice lacking neuroligin4.</a> Genes Brain Behav. , (2012).</li>
<li>Roy, S., Watkins, N., Heck, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+analysis+of+ultrasonic+vocalizations+in+a+mouse+model+of+fragile+X+syndrome+reveals+limited%2C+call+type+specific+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Comprehensive analysis of ultrasonic vocalizations in a mouse model of fragile X syndrome reveals limited, call type specific deficits.</a> PLoS One. 7 (9), e44816(2012).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

כאן, התוצאות של מבחן מייצג הראו שעכברים נקבות יכולות להבחין בין USV זכרים מלאכותיים לבין רעשי רקע (איור 3). המסקנה שיש להסיק מתוצאות אלה היא שאות ההבחנה בא לידי ביטוי במשך השהות בחדר ובאזור הצליל, ובמשך החיפוש ברשת ב-5 הדקות הראשונות של הבדיקה, אך לא ב-5 הדקות השניות (איור 3C, E ו-F). נתונים אלה מצביעים על כך שעכברים מתרגלים לצלילי ההשמעה, אולי בגלל חוסר מגע חברתי המתרחש ליד פולט האולטרסאונד. לכן, זמן הבדיקה האופטימלי הוא 5 דקות. 
ממצאים אלה עשויים להסביר את ה...

בעלי חיים רבים משתמשים בקולות לתקשורת intraspecific. במאסכאלאס העכבר, סוג אחד חשוב של אות תקשורת הוא קולות קוליים (USVs), שיש לי תדרים גבוהים יותר מ -20 קילו-הרץ. USVs נפלט על ידי עכברים נחשב מרכיב של הכרה חברתית בזכר-נקבת 1-4, נקבה-נקבה 1, 5, וגבר-גבר 1, 6 אינטראקציות. USVs גם נפלטים על ידי גורים כשהם מבודדים מאמם, אשר מגדיל אחזור-גור התנהגותה, ולכן כלבון הישרדות 7. למרות דיווחים רבים ניתחו ומסווג USVs עכבר 8, 9, תגובות התנהגותיות ומנגנונים עצביים של בעלי החיים שקיבלו כבר פחות מתועד 10, 11. האחרון הוא צורך להבהיר את המשמעות הביולוגית של המאפיינים השונים של USVs. לחשוף מנגנונים אלה, ניסוי ההשמעה הוא שיטה יעילה. מחקרי השמעה לאחרונה עולים כי נקבהעכברים נמשכים 12 USVs, וכי הם מעדיפים USVs מזכרים שהם שונים מהוריהם 13, 14. מאמר זה מסביר את מבחן ההשמעה משמש להערכת העדפת USV בעכברים. תיבת מבחן דו-בחירה פותחה באשר ניתן לשחק שתי USVs שונה בחזרה בו זמנית בשני תאים של מתחם בדיקה, כפי שמוצג באיור 1. סוג זה של תיבת המבחן מונע זיהום צליל על ידי חלוקת אזור הבדיקה בשלושה תת-תאים , באמצעות קירות עופרת. קרינת אולטרא-סאונד נמצאות מחוץ לכל חדר. בקיר שבין החדרים וקרינת אולטרא-סאונד חורים מכוסים ברשת תיל. עכברים יכולים לנוע בחופשיות בשלושה חדרים, ולהראות התנהגות &quot;חיפוש ברשת&quot;, כאילו כדי להגיב לUSVs שיחק בחזרה על ידי קרינת אולטרא-סאונד. בבדיקה זו, עכברים להישאר לתקופות של משך שונה קרוב לפולט קול אחד או אחר. יכולים להיות מחוברים פרמטרים אלה כדי להשיג measu רגיש<html> מחדש של העדפת קול. כדי שתוכל לשחק USVs בחזרה, קרינה תרמו-אקוסטי סיליקון nanocrystalline (כלומר, &quot;NC-סי פולט&quot;) שימשה כבמחקרים קודמים 15-17. התקנים אלה מורכבים מהאלקטרודה סרט דק דוד, שכבת סיליקון ננו-נקבובי, ופרוסות סיליקון חד גבישיים. קובץ הקול הדיגיטלי מומר לאות אנלוגי ולאחר מכן עבר דרך אלקטרודה דוד. המכשיר ממיר את אותות תרמית מתח תלוי וכתוצאה מכך ללחץ קול משמעותי עם עיוות נמוכה. מכשיר זה הוא ייחודי בכך ש, שלא כמו מחוללי צליל משותפים שתלויות בתנודות מכאניות, זה יכול להתרבות קול ללא הצורך בסרעפת. הפולט מציג רמת לחץ קול שטוחה בתדרי 20-160 קילו-הרץ (איור 2), ויכול להתרבות USVs עכברי נרשם דיגיטלי מאוד מדויק במונחים של זמן, תדירות, ורמת צליל לחץ 15, 18, ​​19. ve_content &quot;&gt; בניסוי נציג מוצג באיור 3, / 6 נקבות C57BL (B6) הורשו לבחור בין BALB / ג (BALB) USVs זכר ורעשי רקע. בנוסף, איור 4 מראה את הבחירה של נקבות B6 וBALB בין פלייבקים USV בו זמנית מBALB וזכר B6, כפי שדווחו במחקר קודם 14. המאפיינים של USVs הגברי שונים בין B6 וBALB זני 20. כפי שניתן לראות בתוצאות אלה, את האטרקטיביות של USVs ניתן להעריך בפרוטוקול הנוכחי, שבו צלילים נרשמים מאדם חי, ניתחו אקוסטית, ושיחקו בחזרה לאנשים אחרים.

<table><tbody><tr><td>תא אטום לרעש</td><td>Muromachi Kikai</td><td></td><td></td></tr><tr><td>כלוב קטן</td><td>CLEA יפן</td><td>CL-0113-1</td><td></td></tr><tr><td>כלוב אמצעי</td><td>CLEA יפן</td><td>CL-0103-1</td><td></td></tr><tr><td>מיקרופונים מעבה אולטרסאונד</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>CM16/CMPA</td><td></td></tr><tr><td>ממיר A/D</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>UltraSoundGate116H</td><td></td></tr><tr><td>אודיו תוכנה</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>RECORDER USGH</td><td></td></tr><tr><td>Adobe Audition 3.0 / תוכנת עריכת אודיו</td><td>Adobe Systems</td><td>Adobe Audition 3.0</td><td></td></tr><tr><td>Nc-Si emitter</td><td>המקורי</td><td></td><td>אינו זמין מסחרית אך מתוכנן להיות כך בעתיד הקרוב</td></tr><tr><td>ממיר D/A</td><td>National Instruments</td><td>NI USB-6251 BNC</td><td></td></tr><tr><td>מנחת</td><td>מקורי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מגבר</td><td>Yamatake</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PC</td><td>Windows 7 מקצועי</td><td></td><td>Intel&reg; core i7-2600K CPU @ 3.4GHz, 8GB RAM, מערכת הפעלה 64 סיביות</td></tr><tr><td>מקליט אירועים Excel-macro / תוכנת ניקוד</td><td>אירועים מקורית</td><td></td><td>מתוכנתת על ידי Naoto Akagawa & </td></tr><tr><td>מצלמת</td><td></td><td></td><td></td></tr> Takeru Yamamoto CCD <tr><td>לוחות גומי (עשויים שרף אלסטומר)</td><td>Tokyo bouon</td><td>TI-75BK B4</td><td>חותכים אותם לגודל הנכון http://www.piano-bouon.jp/shopping/?pid=1329272401-447630&ca=6&p=3</td></tr><tr><td>תמיסת אזור אאוזין מתילן כחולה של Giemsa</td><td>Merck Millipore</td><td>1.09204.0500</td><td></td></tr></tbody></table>

קביעת העדפות ultrasonic ניקוד בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו בחירה

Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback Test

עכברים פולטים קולות קוליים (USV) במהלך מגוון תנאים, כגון בידוד גורים ואינטראקציות חברתיות של מבוגרים. USV אלה נבדלים עם גיל, מין, מצב ורקע גנטי של החיה הפולטת. למרות שמחקרים רבים אפיינו את ההבדלים הללו, האם עכברי מקלט יכולים להבחין בין USV שונים מבחינה אובייקטיבית ולהראות העדפות לתכונות צליל מסוימות עדיין לא ברור. כדי לקבוע אם עכברים יכולים להבחין בין מאפיינים שונים של USV, פותח לאחרונה ניסוי השמעה, שבו ניתן להעריך את תגובות ההעדפה של עכברים לשני USV שונים בצורה של העדפת מקום.
ראשית, תועדו USV מעכברים. לאחר מכן, ה-USV המוקלטים נערכו, נחתכו בהתאם ויוצאו כקבצי סאונד סטריאופוניים. לאחר מכן, אמפליטודות ה-USV שנוצרו על ידי שני פולטי האולטרסאונד ששימשו בניסוי הותאמו לאותה רמת לחץ קול. פולטות תרמו-אקוסטיות מסיליקון ננו-גבישי שימשו להשמעת ה-USV. לבסוף, כדי לחקור את ההעדפה של עכברי הנבדק על פני USV נבחרים, זוגות של שני אותות USV שונים הושמעו בו זמנית בתיבת בדיקה דו-ברירה. על ידי כניסה חוזרת ונשנית לאזור מוגדר ליד פולט אולטרסאונד וחיפוש ברשת התיל מול הפולט, העכבר חושף את העדפתו לצליל אחד על פני אחר. מודל זה מאפשר להשוות את האטרקטיביות של התכונות השונות של USV של עכברים, בהקשרים שונים.

USVs נרשם מBALB-זכר אחד (161 הברות לכל 20 שניות), כמו גם רעש רקע שמשו השמעת צלילים בניסוי הנציג מוצג באיור 3. בניסוי זה, 7 עכברים B6 נשיים שמשו בשעת 9 שבועות של גיל . כדי לקבוע את משך הזמן הטוב ביותר של בדיקות של תגובה נשית להשמעת צלילים, הפרמטרים התנהגותיים נותחו בנפרד במשך חמש דקות הראשונות ואחרונה בסך הכל זמן מבחן 10 דקות. ראשית, לא היה הבדל משמעותי בזמן הכולל של שהייה בחדרי A או B בזמן חקירה ...

קולות אולטראסוניים (USVs) בעכברים משתנים בהתאם לגיל, מין, מצב ורקע גנטי. באמצעות שני פולטי אולטרסאונד המשדרים בו זמנית במקומות שונים, בדיקה דו-ברירה זו יכולה להעריך את זיהוי העכברים ואת תגובות ההעדפה למאפיינים שונים של USV.

קביעת העדפות Ultrasonic ניקוד בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו בחירה

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לקבוע העדפות של קולות אולטרסוניים (USV) בעכברים באמצעות מבחן השמעה בעל שתי אפשרויות בחירה. הדבר מושג תחילה על ידי הקלטת USV מפרט חי. השלב השני הוא עריכה וקיצור של ה-USV שהוקלט בהתאם, ויצירת קבצי קול סטריאופוניים.בשלב הבא, מבצעים כיול של פולטי האולטרסאונד ומכווננים את נפח ה-USV. באמצעות המנחית והמגברים, השלב הסופי הוא להכניס את העכבר הנבדק לתיבת הבדיקה ולהשמיע את שני קובצי הקול בו-זמנית. בסופו של דבר, ניטור התנהגותי יכול לחשוף האם העכבר מפגין העדפה לצליל אחד על פני השני.פולטי ה-USV שפיתחנו יכולים לסייע לנו להשיב על שאלות מפתח הנוגעות לתקשורת של המינים, כגון גורמים מעורבים והמשמעות הביולוגית של סוגים שונים של USV. היתרון העיקרי של הפולט הקאוסטי שלנו על פני התקנים קיימים, כגון מתמירים פייזואלקטריים, הוא שתגובת התדר אינה כוללת שיאי תהודה. הפס הרחב בשידור האולטרסאונד ללא עיוותים הרמוניים מאפשר להשתמש בפולט לשחזור של קורסי תקשורת אקוסטית מורכבים.שיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי התגובה של נקבות ל-s bs או לזכרים. ניתן להחיל אותה גם על סוגים אחרים של אינטראקציות חברתיות, כגון בין אם לצאצאיה, בין זכרים בוגרים ובין נקבות בוגרות. כדי להתחיל, השג עכברי זכרים בעלי ניסיון מיני ועכברי נקבות בתולות, ועקוב אחר מחזור ה-esra באמצעות ביצוע משחות ואגינליות מדי יום.צבע את המריחות

determining-ultrasonic-vocalization-preferences-mice-using-two-choice

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

קולות קוליים של עכברים משמשים כפרוקסי למודל הבסיסים הגנטיים של ליקויים בתקשורת קולית במודלים של עכברים להפרעות נוירו-פסיכיאטריות. הפרוטוקול הנוכחי מתאר שלושה הקשרים ניסיוניים המעוררים באופן מהימן קולות קוליים מגורים (לאורך כל ההתפתחות) ועכברים בוגרים (אינטראקציות חד מיניות, אינטראקציות זכר-ייחום).

הקלטת עכבר Ultrasonic קולות של להערכת תקשורת חברתית

עכברים לייצר רפרטואר multisyllabic מורכבים של vocalizations קולי (USVs). אלה USVs נמצאים בשימוש נרחב כמו readouts עבור הפרעות נוירופסיכיאטריות. פרוטוקול זה מתאר כמה מהנוהלים שלמדנו ופיתחנו כדי לעקב באופן עקבי, לאסוף ולנתח את התכונות האקוסטיות והתחביר של שירי העכבר.

Eliciting וניתוח זכר העכבר Ultrasonic ווקאליזציה (USV) שירים

קולות אולטרסוניים של חולדות ועכבר במעבדה (USVs) שימושיות לחקר תפקוד קולי ועצבי. פרוטוקול זה מתאר פרדיגמת תגמול מזון שמעוררת באופן אמין את ה-USVs התיאבון ללא בלבולים הקשורים להזדווגות. הוא מפרט את התניה של בעלי חיים, הצגת גירויים, הקלטה וניתוח אקוסטי, ומספק שיטה ניתנת לשחזור ללימוד תפקוד רגשי-מוטיבציוני ותפקוד חושי מוטורי של הגולגולת.

עוררת תגמול מזון צפויה של קולות אולטרסוניים תיאבוניים בעכברים ועכברים במעבדה

צעדי פלוס מבוך חרדה כמו התנהגות במכרסמים. ישנם שני ההפך סגור ושתי זרועות פתוחות מנוגדות; מכרסמים חרדה למנוע את זרועות הפתוחות. האזור המרכזי הוא לא לגמרי פתוח ולא סגור, כך שהזמן שבילה כאן הוא דו משמעי וקשה לפרש. כאן שינוי של הפרוטוקול בתוספת-מבוך ביטול תחום זה מתואר.

מבחן הסמטאות הרצוף של חרדה בעכברים וחולדות

מאמר זה מציג פרוטוקול לבדיקת אוויר קונטקסטואלי ורמז פחד באמצעות מערכת ניתוח וידאו על מנת להעריך פחד למידה וזיכרון בעכברים.

אוויר מבחן הקשר ורמז פחד באמצעות מערכת ניתוח וידאו בעכברים

פרוטוקול זה מתאר את לוח החורים ששונה, שהוא מערך מבחן התנהגותי הכולל את המאפיינים של שדה פתוח ולוח חורים מסורתי. מערך זה מאפשר ניתוח דיפרנציאלי של התנהגות בלתי מותנית של יונקים קטנים במעבדה כמו גם ניתוח של יכולות קוגניטיביות.

מועצת החור השתנה - מדידת התנהגות, קוגניציה ואינטראקציה חברתית בעכברים וחולדות

מחקרים קודמים על הממד החברתי של לחץ התמקדו בשני משתנים חשובים: זהות חברתית ותמיכה חברתית. פרוטוקול זה מציג מניפולציה ניסויית יעילה של שני משתנים חברתיים אלה ומתאר את יישומם בפרדיגמת אינדוקציה סטנדרטית של מתח (Trier Social Stress Test).

הממד החברתי של מתח: ניסיון מניפולציות של תמיכה החברתית וזהות חברתית בחברת טרייר מתח מבחן

לטעם מתוק יש משיכה נהנתנית חזקה בקרב אנשים בכל הגילאים, במיוחד ילדים. מתוארת כאן שיטה אמינה ותקפה שניתן להשתמש בה כדי לקבוע את רמת המתיקות המועדפת ביותר, מה שהופך אותה לכלי פסיכופיזי רב ערך עבור מדענים.

פסיכו שיטת המעקב למדוד שטעמים אצל ילדים ומבוגרים

גרסת חולדה של מבחן ערנות Psychomotor אדם (PVT) מתוארת מודד היבטים של תשומת לב דומים לשיעורים שנמדדו עם PVT האדם, כולל היבטים של ערנות אדם כגון דיוק ביצועים, מהירות מנוע, מוקדם להגיב, ובפערים בדום.

מבחן הערנות Psychomotor המכרסם (rPVT): שיטה להערכת ביצועי נוירו-התנהגותיות אצל חולדות ועכברים

המבחן זיהוי האובייקט (אורט) הוא assay פשוט ויעיל להערכת בלמידה ובזיכרון בעכברים. המתודולוגיה המתוארת להלן.

אובייקט הרומן מבחן ההכרה לחקירה של למידה וזיכרון בעכברים

חקור העדפות לקולות אולטראסוניים בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו-בחירה. שיטה זו מאפשרת לחוקרים ללמוד על תקשורת ומערכות יחסים חברתיות בין פרטים.

קביעת העדפות Ultrasonic ניקוד בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו בחירה

גלה סרטונים נוספים