פרוטוקול מתח מתון כרוני בלתי צפוי לתסמיני דיכאון ייזום, שינויים התנהגותיים ותוצאות בריאותיות שליליות במכרסמים

המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא לחשוף זן מכרסמים לסדרה של גורמי לחץ כרוניים ובלתי צפויים הנקבעים באופן אקראי, כך שהחיה אינה יכולה לפצות ביעילות תחת חומרה הולכת וגוברת של תסמיני דיכאון. זה מושג על ידי חשיפה יומיומית לאחד מרשימה של גירויים אפשריים שנועדו להיות מלחיצים אך לא מזיקים או מזיקים לבעל החיים. בעלי החיים נחשפים לגורמי לחץ חמישה עד שישה ימים בשבוע במשך שמונה שבועות במרווחי זמן קבועים, בעלי החיים מנוטרים להתפתחות תסמיני דיכאון על ידי הערכת מצב הקוד ותגובות בעלי החיים להטלת גירויים, כגון בדיקת ריסוס סוכרוז.

התוצאות מראות כי הטלת גורמי לחץ כרוניים אקראיים ובלתי פתירים על סביבת החיה מונעת את יכולת ההסתגלות של בעל החיים וגורמת להתפתחות תסמיני דיכאון במהלך מספר שבועות. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום המחלות הכרוניות, כגון כיצד תסמיני דיכאון כרוני יכולים להוביל לתוצאות בריאותיות שליליות ברקמות או במערכות איברים אחרות. הרעיון לשימוש בשיטה זו עלה לראשונה כאשר למדנו על הקשרים הנלווים העמוקים בין מחלות לב וכלי דם מתקדמות וסיכון למחלות באוכלוסיות הקליניות שלנו, וההצגה המקבילה של מחלות דיכאון עמוקות גם כן.

מדגימים הליך זה יהיו מר סטיבן ברוקס וגב' קיילה ברנון, דוקטורנטים מהמעבדות שלנו. על מנת לייצר עכברי בית עם לחץ קל בכלובים נפרדים ולחשוף את העכברים לגורם לחץ אחד או שניים ביום למשך שלוש עד ארבע שעות לפחות עבור כל גורם לחץ, יש לבצע את הרשימה הבאה של גורמי לחץ בלוח זמנים אקראי עבור גורם הלחץ של המצעים הלחים. הרטיבו את המצעים על ידי שפיכת 10 עד 20 אונקיות מים נקיים לכלוב רגיל.

שמור את העכבר בכלוב הלח למשך שלוש עד ארבע שעות. הסר את המצעים מהכלוב למשך שלוש עד ארבע שעות ולאחר מכן העביר את העכבר לגורם לחץ אחר הדורש כלוב ריק, או הנח אותו בכלוב נקי עם מצעים טריים. הטה את הכלובים ללא מצעים לכ-45 מעלות למשך שלוש עד ארבע שעות באמצעות חפץ יציב שיישאר במקומו בזמן שהעכבר מסתובב בכלוב עבור גורם לחץ זה, שנה את מחזורי האור הרגילים של 12 שעות, 12 שעות חושך לפרקי זמן של 30 דקות, הנמשכים בסך הכל שמונה שעות.

העבירו את העכבר מהכלוב הביתי שלו לכלוב של עכבר שכן שהוסר לתקופת הלחץ של שלוש שעות. הוציאו את המצעים מהכלוב והוסיפו מים לעומק של כ-0.25 אינץ' לעכברים, והשאירו את העכבר למשך כארבע שעות. בקצרה, יבש את העכבר במגבת רכה בתום החשיפה למים.

חשפו עכברים לטורף, ריחות או צלילים על ידי הוספת ציציות מפוזרות באופן אקראי או 10 עד 20 מיליליטר שתן ממין טורף טבעי לכלוב, והשאירו את העכבר למשך שלוש עד ארבע שעות. לחלופין, השמיעו נהמות או רעשי טורף ממיני טורפים טבעיים ENC קרבה לכלובים במשך שלוש שעות בסוף כל תקופת לחץ יומית. הכניסו את העכברים לכלובים נקיים והחזירו אותם למתקן הדיור מדי יום.

בדקו כל בעל חיים לאיתור התפתחות פצעים או פצעים שעשויים לדרוש טיפול וטרינרי פעם בשבוע, בקשו משני חוקרים להעריך טיפוח קוד. בדוק כל בעל חיים והקצה ציון קוד שבועי בסולם מאפס לאחד. הוסף ציון בודד על ידי הקצאת ציונים בודדים של אפס שמשמעותו נקי או אחד שמשמעותו מלוכלך לכל אחד משמונה אזורי גוף.

הראש, הצוואר, המעיל הגבי, מעיל הגחון, הזנב, ארבע הגפיים, הגפיים האחוריות ואזור איברי המין. הניחו את החיה בכלוב נקי מרופד בכרית כותנה או מגבת כדי למנוע מהמצעים להידבק לפרווה. לאחר מכן רססו תמיסת סוכרוז של 10% על הראש והפרווה הגבית של כל בעל חיים ורשמו את התנהגות הטיפוח הכוללת למשך חמש דקות.

מדוד את ההשהיה והתדירות של פעילות טיפוח הפנים במהלך תקופה זו. ההשהיה היא משך הזמן בין הריסוס הראשון להתחלת טיפוח הפנים, ויש למדוד את התדירות כמספר הפעמים שהפנים מטופחות. לאחר שמונה שבועות של מתח מתון כרוני בלתי צפוי, חלו שינויים משמעותיים בתוצאות ההתנהגותיות והפיזיולוגיות במכרסמים בלחץ כרוני ביחס לזני הביקורת הלא לחוצים שלהם.

עכברים פיתחו תסמינים דמויי דיכאון בעקבות מתח כרוני קל בלתי צפוי, והראו ירידה הדרגתית בציוני טיפוח הפרווה. התדרדרות ניכרת זו במצב הפיזי של הפרווה מרמזת על ירידה בפעילות הטיפוח ועשויה להיות מקבילה לחוסר מוטיבציה. עדויות עדכניות מצביעות על כך שיש הבדל כמותי משמעותי בתגובות למתח מתון כרוני בלתי צפוי בין עכברים זכרים ונקבות.

באופן ספציפי, הנתונים מצביעים על כך שעכברים נקבות שנחשפו לפרוטוקול לחץ זהה לזכרים תואמי גיל מפתחות תגובות התנהגותיות חמורות יותר לפרוטוקול מאשר זכרים. בעקבות הליך זה, ניתן לבצע בקלות שיטות אחרות המתאימות לתפקוד ספציפי של איבר על מנת לענות על שאלות נוספות כמו כיצד נוכחות של תסמיני דיכאון כרוני יכולה להשפיע על תפקוד תקין במערכת האיברים המעניינת. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להשתמש בשלבים ובנהלים השונים בפרוטוקול UCMS כדי ליצור בהדרגה את התנאים של תסמיני דיכאון גוברים במודל המכרסמים שלך.