RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/53115-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
טרנסלוקציה של אפקטור לתאי מארח באמצעות מערכת הפרשה מסוג III היא אסטרטגיית אלימות נפוצה בקרב חיידקים גרם שליליים. יושם מבחן מבוסס היתוך אפקטור בטא-לקטמאז לניתוח כמותי של טרנסלוקציה. בתאים נגועים בירסיניה, ההמרה של מדווח FRET על ידי הבטא-לקטמאז מנוטרת באמצעות מיקרוסקופ סריקת לייזר.
המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא למדוד טרנסלוקציה של חלבון אפקטור לתאי מארח באמצעות מערכת ההפרשה של ורניה סוג שלוש. זה מושג על ידי דגירה של תאי heela עם מוטציות yersinia המבטאות היתוך בטא לקטמאז אחד של אפקטור TEM כדי לאפשר טרנסלוקציה של היתוך אפקטור לתאי HELOC. כשלב שני, תאי ה-HELOC הנגועים נטענים בתרכובת מדווח סריג תאים, המעובדת על ידי אסטרו תאי לטעון ב-CCF 4 פלואורסצנטי ובכך נלכדת בתוך התא.
הפיצול הבא של CCF 4 על ידי בטא-לקטמאז הממוקם בטרנס גורם לשיבוש של fre, אשר נרשם על ידי מיקרוסקופ סריקת לייזר על מנת לנתח את עוצמות הקרינה של התורם והמקבל. התוצאות מראות כמויות שונות של אפקטור טרנס ממוקם TEM היתוך בטא לקטמאז אחד בהתבסס על קינטיקה שונה של עליית הקרינה של התורם. אחד היתרונות העיקריים של טכניקה זו על פני השיטות הקיימות הוא שהעיבוד הבין-תאי של תרכובת CCF 4 מספק כלי ספציפי ורגיש ביותר למדידת טרנסלוקציה.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
13:28
Related Videos
21.2K Views
11:33
Related Videos
6.5K Views
13:31
Related Videos
14.5K Views
08:39
Related Videos
10.5K Views
08:51
Related Videos
9.6K Views
10:29
Related Videos
11.2K Views
11:30
Related Videos
12.1K Views
07:25
Related Videos
11.2K Views
08:13
Related Videos
18K Views
07:40
Related Videos
6.5K Views