שיטת ניקוד מהירה פנוטיפי נוירולוגיות להערכת מחלת התקדמות בSOD1-G93A מודל העכבר של ALS

המטרה הכוללת של הליך זה היא להעריך במהירות ובאמינות את התפקוד העצבי-שרירי של SOD אחד G 93 a עכברים על ידי הערכה יומית של תפקוד הגפיים האחוריות שלהם באמצעות מערכת ניקוד נוירולוגית פנוטיפית פשוטה. זה מושג על ידי התבוננות תחילה בגפיים האחוריות של העכברים תוך תלייתם בזנב. השלב השני הוא לאפשר לעכברים ללכת תוך כדי התבוננות בהליכה שלהם.

לאחר מכן, העכברים מונחים על צידיהם כדי לבדוק אם יש נוכחות או היעדר רפלקס הכתיבה. השלב האחרון הוא לבצע את ניתוח הנתונים על ידי התאמת נתוני ציון נוירולוגי של קבוצות עכברים למודל רגרסיה לוגיסטית סידורית. בסופו של דבר, מערכת הניקוד הנוירולוגית הפנוטיפית שלנו משמשת להערכת התקדמות המחלה ב-SOD one G 93, מודל עכבר של LS לצורך הבחנה ביעילות של התערבויות טיפוליות.

היתרון העיקרי של שיטה זו על פני כל הטכניקות הקיימות האחרות הוא שהיא מהירה, פשוטה, אמינה ומינימום מלחיצה עבור העכברים. ההשלכות של שיטה זו משתרעות על טיפול בטרשת צידית ניאוטרופית או LS מכיוון שהיא מאפשרת הערכה מהירה של התערבויות טיפוליות במודל העכברי הנפוץ ביותר של המחלה. הדגמה חזותית היא קריטית מכיוון שקשה ללמוד את שיטת הניקוד הנוירולוגית מכיוון שההבדלים הנוירולוגיים יכולים להיות עדינים.

התחל בשיכון עכברי SOD זכר אחד G 93 A כך שיהיה עכבר אחד לכל בית כלוב, נקבת SOD עכברים G 93 A עד שניים לכל כלוב. לספק העשרה סביבתית לעכברים בצורה של בקתות פלסטיק. ספקו לעכברים מזון ומים ב-Lido Record.

משקל גוף לכל העכברים ומחקרים בו זמנית. משקל גוף יומי הוא אינדיקטור רגיש להתקדמות המחלה ולכל חולשה שעלולה לנבוע מטיפול תרופתי כרוני. במהלך המחקר, העריכו את הציון הנוירולוגי של כל עכבר מדי יום באמצעות משטר של שלוש בדיקות המבוצעות ברצף.

שימו לב היטב כי תיחום ציונים בנקודות מעבר פנוטיפיות הוא קשה מאוד במבחן הראשון. מבחן מתלי הזנב, החזק את העכבר כ-1.5 אינץ' מבסיס הזנב מעל החלק העליון של כלוב הבית. התבונן בתפקוד הגפיים האחוריות למשך שנייה עד שתיים וחזור על הבדיקה שלוש פעמים.

למבחן ההליכה. הנח את העכבר על משטח נקי המספק אחיזה מסוימת ומרחק הליכה של 25 סנטימטרים לפחות. אפשר לעכבר ללכת עד 75 סנטימטרים תוך התבוננות ב- ga שלו.

לבדיקת רפלקס הכתיבה, הנח את העכבר על צדו והשתמש בשעון עצר כדי למדוד את הזמן שלוקח לכתוב את עצמו ללא סיוע משני הצדדים. נדרש ניסיון אחד בלבד של בדיקה זו. ציין כל גפה אחורית שמאלה או ימינה באופן עצמאי בסולם מאפס עד ארבע בהתבסס על התוצאה הקולקטיבית של שלושת מבחני התצפית הפנוטיפיים.

ציון סינוס של אפס המציין שהעכבר הוא פרה-סימפטומטי. כאשר במהלך בדיקת ההשעיה, הגפיים האחוריות מורחבות במלואן מקו האמצע הרוחבי ונשארות במצב זה למשך שתי שניות או יותר. כמו כן, במהלך מבחן ההליכה נצפית הליכה רגילה.

הקצה ציון של 1 המציין את הופעת התסמינים הראשונים. אם במהלך בדיקת ההשעיה, הגפה האחורית קורסת לכיוון קו האמצע הרוחבי, קורסת חלקית לכיוון קו האמצע הצדדי רועדת או מפוזרת בצורה חריגה בצורה אחרת. בנוסף לתסמיני מבחן ההשעיה שהוצגו זה עתה, ההליכה של עכבר שאמור לקבל ציון של אחד עדיין צריכה להיראות נורמלית או מעט נמוכה יותר.

הקצה ציון של שתיים המציין את תחילתו של פארסיס. אם במהלך מבחן ההשעיה, הגפה האחורית קורסת חלקית או מלאה, ובנוסף במהלך מבחן ההליכה, הגפיים האחוריות משמשות לתנועה קדימה. עם זאת, אצבעות הרגליים מתכרבלות כלפי מטה לפחות פעמיים במהלך הליכה של 75 סנטימטר או שכל חלק בכף הרגל נגרר כדי לקבל ציון של שתיים.

העכבר חייב להיות מסוגל לכתוב את עצמו לאחר שהונח משני צידיו תוך 10 שניות. ציון סינוס של שלוש המעיד על שיתוק. אם במהלך מבחן ההשעיה העכבר מראה שיתוק נוקשה בגפה האחורית או שיש לו תנועת מפרקים מינימלית, העכבר עדיין עשוי להראות תנועה קדימה במהלך מבחן ההליכה, עם זאת, לא באמצעות הגפיים האחוריות שלו.

בנוסף לציון סינוס של שלוש, העכבר עדיין חייב להיות מסוגל לכתוב את עצמו לאחר שהונח משני צידיו תוך 10 שניות. לבסוף, ציון של ארבע, המגדיר את נקודת הקצה האנושית בכל פעם שהעכבר מראה שיתוק נוקשה במהלך ההשעיה. הבדיקה לא מראה תנועה קדימה במהלך מבחן ההליכה באמצעות הגפיים האחוריות, וגם אינה מסוגלת לכתוב את עצמה תוך 10 שניות לאחר הנחתה משני הצדדים.

לעכברים זכרים יש בדרך כלל התקדמות מחלה אגרסיבית יותר מאשר לעכברים נקבות, כפי שמעידים חלק גדול יותר מתוחלת החיים שלהם המציגים תסמינים שניתן לסווג עם ציון נוירולוגי של 1 בהשוואה לנקבות. ככל שהתסמינים גדלים לטווח של ציון נוירולוגי של שניים או שלושה, מספר הימים המושקעים בכל ציון שווה בתדירות בין המינים. מוצגים כאן לוגיסטיקה סידורית, גרפים של ניתוח סטטיסטי שנוצרו באמצעות פרוטוקול הנוירוקו שתואר זה עתה.

נתונים אלה הם ממחקר פרמקולוגיה של יעילות תרופות שבו עוקבה של SOD אחד G 93 עכברים המקבלים את תרכובת הבדיקה TDI 1 73 מושווים לעוקבה של עכברים שקיבלו רכב. לא נצפו הבדלים מובהקים סטטיסטית כאשר המינים נותחו בנפרד, אך מובהקות סטטיסטית הושגה כאשר מיזגו מגדרים. למרות שהראה מגמות דומות, ניתוח ההישרדות של קפלן מאייר לא היה רגיש מספיק כדי לחשוף הבדלים משמעותיים גם כאשר המינים מוזגו.

לאחר השליטה, ניתן ליישם את שיטת הניקוד תוך פחות מדקה לכל עכבר אם היא מבוצעת כראוי. אחרי הצפייה בסרטון הזה, אתם אמורים להבין היטב כיצד להעריך את התקדמות המחלה ב-SOD One G 93, מודל עכבר של LS באמצעות מערכת Neuroco.