Name: צנתור לטווח ארוך של טרונק לימפה במעי וגביית הלימפה חזירים ילודים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 25 s
Description: למדו טכניקת צנתור לימפה מעייתית בחזירים ילודים לחקר מטבוליזם שומנים. שיטה כירורגית זו מאפשרת איסוף לימפה בכמויות גדולות לניתוח מרכיבי מטבוליזם ותפקוד חיסוני.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

העבודה נתמכה בחלקה על ידי מימון של סוכנות בעלי החיים והבשר של אלברטה ומענק דיסקברי של מועצת מדעי הטבע והמחקר לס.ד. פרוקטור.

כל הנהלים על חיות ניסוי המתוארות הוא סרטון ואת כתב היד אושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי החיים המוסדיים השתמש ועקב אחר ההנחיות שנקבעו על ידי המועצה הקנדית של טיפול בבעלי החיים. 1. הרדמה כירורגית והכנת כירורגים של החזירים הילודים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחדר כניסה נפרדת, premedicate 25 חזירים ק&quot;ג סמוך לבסיס של הצוואר עם קוקטייל תרופות הרגעה-הרדמה תוך שרירית המכיל: azaperone (0.3 מ&quot;ג / ק&quot;ג), קטמין הידרוכלוריד (10 מ&quot;ג / ק&quot;ג), dexmedetomidine (15 מיקרוגרם / ק&quot;ג). הערה: הוסף עצירות (0.005-.02 מ&quot;ג / ק&quot;ג) של קוקטייל התרופות מראש הרדמה לשיכוך כאבים התוך אופרטיבית משופרת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את חזירים בגז משאיפת isoflurane בשאיפה (isoflurane 4-5% ב 500 מ&quot;ל-1000 מ&quot;ל / דקה O 2) באמצעות מסיכת פנים. דמיינו את מיתרי הקול באמצעות היקף בגרון וטרינרי (ארוך להב ישר 17-25 ס&quot;מ), ולהחיל עיקור לידוקאין 10% אקטואלי אל ווקאליתמייתרים. אפשר ספריי לידוקאין לפנות מיתרי הקול 30-60 שניות לפני אינטובציה כדי לצמצם את האפשרות של התכווצות מיתרי הקול ואת חסימה בדרכי הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצנרר החזירים על ידי העברת הטובוס אזוקים (5.0-7.0 מ&quot;מ קוטר פנימי (ID)) בין מיתרי הקול ולשמור על הרדמה בגז isoflurane (isoflurane 0.5-2.0% ב 1,000-2,000 מ&quot;ל / דקה O 2) באמצעות ארגז סגור מעגל rebreathing מערכת הרדמה במהלך הניתוח. להעריך את רמת הרדמה מטון לסת, ושניהם תגובות רפלקס דוושת palpebral. גז הרדמה פג תוקף הוא יישחט פרק מחוץ לחדרי הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה את המשטח החיצוני של האוזן עם פתרון לקרצף כירורגית 2.0% chlorhexidine ואחריו שטיפת אלכוהול איזופרופיל 70%. עם קטטר 20 G תוך ורידי, קטטר וריד האוזן לספק עירוי נוזלים (פתרון Ringer Lactated; 5-10 מ&quot;ל / ק&quot;ג / שעה) במהלך הניתוח. Secure דופק oximeter אל פני השטח הרירי של הלשון עם medקלטת iCal כדי לפקח על קצב לב ואת הרוויה של חמצון דם היקפי (SpO 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את החזיר הרדים בעמדת גב שכיבתה לגלח את בטן הגחון מאמצע חזה caudally להיבט הגחון של החיק. נקו בתחום זה עם שני לסירוגין כלורהקסידין 2.0% סקראבס כירורגית ושוטף במים סטרילית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעביר את החזיר המורדם כדי לחדרי הניתוח ולהחיל את לקרצף כירורגית הסופית של שטיפת אלכוהול איזופרופיל 70%, לאפשר לו להתייבש, ולאחר מכן לעטוף את החיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בדיקת טמפרטורת רקטלית כ ​​סנטימטר 2-4 לתוך פי הטבעת כדי לפקח על טמפרטורת גוף. מניחים החזירים על כרית חימום הסירקולציה המחודשת מים כדי לשמור על טמפרטורת גוף נורמלית (C ° 38-40) במהלך ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכרוך את החזיר עם וילונות ארבעה מגבות להציב דפוס ברבע שמעליה ברחבי הבטן. מניח את הווילון הראשון ברחבי xiphisternum, הווילון השני לאורך בצד הלטרלי של הבטן כ 5 גמ &#39;לרוחב קו אמצע הבטן. מניח את הווילון השלישי ברחבי ציצת ​​ileal של האגן ואת הווילון הרביעי, כמו הווילון השני (אם כי בצד הנגדי), מושם לאורך בצד הלטרלי של הבטן כ 5 סנטימטרים לרוחב קו אמצע הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים וילון שולחן גדול, עם פתיחת חריץ המאפשר גישה לאתר כירורגית, על וילונות מגבת שבבסיס ולכסות את חזיר ושולחן הכירורגי כולו. הווילון הסופי הוא וילון Steri-הפנויה מונח על וילון השולחן הגדול. </li></ol> 2. ניתוח בטן צנתור של טרונק הלימפה המעיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך בעור 20 ס&quot;מ עם להב סכין המנתחים כדי לחשוף את שרירי הבטן הבסיסית. לחתוך את שכבות שרירי הבטן עם electrocautery מונו-קוטבית (20 הגדרה ואט) לחשוף את הצפק הקודקודית. פתח קטע ליניארי 20 ס&quot;מ של הצפק הקודקודית במספריים מצנבאום לגשת הקרביים בטן וכלי הלימפה. </li><li&gt; צב מפשקים על ההיבט גולגולתי של החתך הניתוחי לשמור על חלל הבטן פתוח למשך הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרטיב את כל הרקמות עם חם (37 מעלות צלזיוס) תמיסת מלח סטרילית עבור ההליך הכירורגי כולו. הרם בעדינות פלח גדול של המעי כולל המעי הגס, cecum, מעי והמעי הריק יתכן שרמת מחלל הבטן exteriorize אותו בכנף שמאל של חזיר כדי לגשת בבטן העליונה, כבד וכלי הלימפה. אבטח את המעי exteriorized בעמדה עם וילונות מגבת נוספת לגבש קלע לתמוך המעי בעדינות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את כלי הלימפה, היא מטילה כ 4 סנטימטרים גולגולתי המדיאלי של הווריד התקין כליות, 6 סנטימטרים זנב-medial- גחון של מנהלי עבודת caval ומתחת ההיבט הקרבי של האונה הכבדה ממש ליד הלבלב 22,36,37. זהה את כלי הלימפה כמבנה שקוף חופף למגזר הגחון הימני של וריד שער 36,37. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את הלימפה Vessאל מן fascia שמסביב ידי מנסים לשחזר את הרקמה המצורפת בעדינות עם אפליקטורים Q-Tip. לאחר ההיבטים לרוחב של כלי מופרדים מן הרקמה הסובבת, ליצור פתח &quot;מנהרה&quot; מתחת לכלי השייט עם בוטה קנס שקצהו מלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור שלושה 2-0 תפרי משי מתחת לכלי השייט הלימפה עם מלקחיים בסדר. ולקשור את תפר הזנב ביותר הראשון כדי לחסום, להתרחב ולמלא את הכלי עם הלימפה. Purposefully לעזוב את הקצוות של תפר זה ארוך יחסית (4 ס&quot;מ) כדי לאבטח את הקטטר אל כלי הלימפה. מניח שני תפרים אחרים מופרדים 1.0 סנטימטר אחד מהשני והם כ 1.0-1.5 סנטימטר גולגולתי אל תפר הזנב המאובטח. להשאיר את שני התפרים הללו עם &quot;עניבה ליגטורה רופפת יחידה &#39;כדי לאפשר לאבטחה מהירה יותר של קטטר לתוך הכלי. הערה: הקטע של כלי הלימפה ממוקם בין תפר ligating הזנב ביותר התפר באמצע (של שני תפרי הגולגולת) הוא האתר עבור צנתור. לגבי suחומר ture, 2-0 תפר polyglactin יכול להוות תחליף 2-0 תפרי משי במידת צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכי חור קטן לתוך הכלי עם מספרי איריס להרחיב את הכלי עם מלקחיים בוטים בסדר. הכנס כ 1.0-1.5 סנטימטר של צינורות קטטר מיוחדים (4.06 קוטר חיצוני (OD) X 2.31 מזהים מ&quot;מ) עם קצה משופע לתוך הכלי ולקשור שני תפרי הגולגולת כדי לאבטח את הקטטר במקום. השתמש קצות התפר הארוכים של תפר הזנב כדי לאבטח את הקטטר אל כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את מעי exteriorized עם כמויות של מלח חם ובעדינות להחזירו חלל הבטן להבטיח מיצוב אנטומי נכון של המעיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Exteriorize הקטטר את פרוותו אמצע שמאל (5-10 ס&quot;מ ventrally מן fossa paralumbar). לעשות חתך בעור עם אזמל להעביר נקז מחלל הבטן אל פני העור כדי ליצור פתח עבור ההחצנה של הקטטר. השתמש מלקחיים גדולים קלי exteriorize הקטטר מן CAV בטןity דרך פתח הנקז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את הצפק הקודקודית עם דפוס תפר מתמשך פשוט של תפר 2-0 polyglactin עם מחט עגול (קונים). סגור את שכבות שרירי הבטן עם דפוס תפר קטע פשוט עם תפר 2-0 polyglactin על מחט עגול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את העור בדפוס subcuticular עם 2-0 תפר polyglactin על מחט חיתוך. Secure את הקטטר exteriorized על העור עם דפוס תפר ארנק חוט תפר ניילון 2-0 על מחט חיתוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח מעייל מיוחד על החזיר ועדיין מורדם להקל מיקומה ולהפחית את הלחץ של החזיר במהלך התאוששות. </li></ol> שחזור 3. פוסט-כירורגית אוסף לימפה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כ -10 דקות לפני הפסקת הרדמה משאיפת, לנהל bupenorphine (0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג) לשריר כדי לספק שיכוך כאבים שלאחר ניתוח מיידי. המשך bupenorphine (0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג) כל 12 שעות במשך 24-48 שעות כדי לשמור עלשיכוך כאבים שלאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג החזירים לסיבוכים ניתוחים דואר בכל שעות 8-12 לתקופה של 7 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף את הלימפה 500 מ&quot;ל בקבוקים לשטוף פוליפרופילן, מצופה חומצה ethylenediamine tetraacetic (EDTA), שיושלם עם אנטיביוטיקה; פניצילין (6,000 IU), סטרפטומיצין (6 מ&quot;ג) ו- B amphotericin (3 מ&quot;ג) כל 12 שעות למשך 7 ימים. </li></ol> 4. כימות ApoB48 ליפופרוטאין, טריגליצריד, כולסטרול וחלבון הסכום שנגבה מן לימפה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה מדגם הלימפה 1,800 XG במשך 5 דקות ב 4 ° C.. איסוף supernatant ולהשתמש בו עבור כימות של טריגליצרידים, כולסטרול וחלבון כולל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלק את supernatant לשלוש דוגמאות: מדגם חי, מים מזוקקים מדולל מדגם 1:20 מדגם סופי המדולל 1: 100 עם מים מזוקקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש supernatant חי כדי למדוד את רמות כולסטרול, עם ערכה זמינה מסחרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש 1:20 01:100 דגימות בדילול למדוד טריגליצרידים ורמות חלבון הכולל עם ערכה זמינה מסחרי ואת assay חלבון bicinchoninic סך-חומצת בהתאמה. </li></ol> 5. כימות של ליפופרוטאין ApoB48, שנאספו לימפה 38 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבע את הריכוז של ליפופרוטאין ApoB48 עם שיטה מערבית סופגת מותאמת חיסון 38. הלימפה הכולל הפרד (SDS-PAGE) ג&#39;ל אלקטרופורזה polyacrylamide סולפט dodecyl נתרן טריס-acetate- 3-8%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את החלבונים מופרדים אל קרום פלואוריד polyvinylidene (0.45 מיקרומטר) דגירה אותם עם נוגדן polyclonal עז אל apoB (1: 4,000), ולאחר מכן לאגד את זה עם נוגדנים משני אנטי-עז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכמת את ליפופרוטאין ApoB48 עם chemiluminescence באמצעות השוואה ליניארי densitometric עם תקן חלבון ApoB48 מכרסם מטוהרים. </li></ol>

<ol><li>Lindsay, F. E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cisterna+chyli+as+a+source+of+lymph+samples+in+the+cat+and+dog%5BTitle%5D)+AND+%22Res.+Vet.+Sci%22%5BJournal%5D)">The cisterna chyli as a source of lymph samples in the cat and dog.</a> Res. Vet. Sci. 17, 256-258 (1974).</li>
<li>Kohan, A. B., Howles, P. N., Tso, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+studying+rodent+intestinal+lipoprotein+production+and+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Methods for studying rodent intestinal lipoprotein production and metabolism.</a> Curr. Protoc. Mouse Biol. 2, 219-230 (2012).</li>
<li>Wang, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+uptake+and+lymphatic+absorption+of+beta-carotene+in+ferrets%3A+a+model+for+human+beta-carotene+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Intestinal uptake and lymphatic absorption of beta-carotene in ferrets: a model for human beta-carotene metabolism.</a> Am. J. Physiol. 263 (4 Pt 1), G480-G486 (1992).</li>
<li>Hein, W. R., Barber, T., Cole, S. A., Morrison, L., Pernthaner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+collection+and+characterization+of+afferent+lymph+from+the+ovine+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J.Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Long-term collection and characterization of afferent lymph from the ovine small intestine.</a> J.Immunol. Methods. 293 (1-2), 153-168 (2004).</li>
<li>Hartmann, P. E., Lascelles, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+flow+and+lipid+composition+of+thoracic+duct+lymph+in+the+grazing+cow%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The flow and lipid composition of thoracic duct lymph in the grazing cow.</a> J. Physiol. 184 (1), 193-202 (1966).</li>
<li>Redgrave, T. G., Dunne, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chylomicron+formation+and+composition+in+unanaesthetised+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Chylomicron formation and composition in unanaesthetised rabbits.</a> Atherosclerosis. 22 (3), 389-400 (1975).</li>
<li>Binns, R. M., Hall, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+paucity+of+lymphocytes+in+the+lymph+of+unanaesthetised+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Exp.+Pathol%22%5BJournal%5D)">The paucity of lymphocytes in the lymph of unanaesthetised pigs.</a> Br. J. Exp. Pathol. 47 (3), 275-280 (1966).</li>
<li>Ohlsson, L., Kohan, A. B., Tso, P., Ahren, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GLP-1+released+to+the+mesenteric+lymph+duct+in+mice%3A+Effects+of+glucose+and+fat%5BTitle%5D)+AND+%22Regul.+Pept%22%5BJournal%5D)">GLP-1 released to the mesenteric lymph duct in mice: Effects of glucose and fat.</a> Regul. Pept. 189, 40-45 (2014).</li>
<li>Ho, H. T., Kim, D. N., Lee, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+apolipoprotein+B-48+synthesis+and+lymphatic+cholesterol+transport+are+lower+in+swine+fed+high+fat%2C+high+cholesterol+diet+with+soy+protein+than+with+casein%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Intestinal apolipoprotein B-48 synthesis and lymphatic cholesterol transport are lower in swine fed high fat, high cholesterol diet with soy protein than with casein.</a> Atherosclerosis. 77 (1), 15-23 (1989).</li>
<li>Arnold, M., Dai, Y., Tso, P., Langhans, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meal-contingent+intestinal+lymph+sampling+from+awake%2C+unrestrained+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Meal-contingent intestinal lymph sampling from awake, unrestrained rats.</a> Am. J. Physiol. Integr. Comp. Physiol. 302 (12), R1365-R1371 (2012).</li>
<li>Nguyen, T. M., Sawyer, J. K., Kelley, K. L., Davis, M. A., Kent, C. R., Rudel, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACAT2+and+ABCG5%2FG8+are+both+required+for+efficient+cholesterol+absorption+in+mice%3A+evidence+from+thoracic+lymph+duct+cannulation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">ACAT2 and ABCG5/G8 are both required for efficient cholesterol absorption in mice: evidence from thoracic lymph duct cannulation.</a> J. Lipid Res. 53 (8), 1598-1609 (2012).</li>
<li>Sato, M., Kawata, Y., Erami, K., Ikeda, I., Imaizumi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LXR+agonist+increases+the+lymph+HDL+transport+in+rats+by+promoting+reciprocally+intestinal+ABCA1+and+apo+A-I+mRNA+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">LXR agonist increases the lymph HDL transport in rats by promoting reciprocally intestinal ABCA1 and apo A-I mRNA levels.</a> Lipids. 43 (2), 125-131 (2008).</li>
<li>Boyd, M., Risovic, V., Jull, P., Choo, E., Wasan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stepwise+surgical+procedure+to+investigate+the+lymphatic+transport+of+lipid-based+oral+drug+formulations%3A+Cannulation+of+the+mesenteric+and+thoracic+lymph+ducts+within+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">A stepwise surgical procedure to investigate the lymphatic transport of lipid-based oral drug formulations: Cannulation of the mesenteric and thoracic lymph ducts within the rat.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 49 (2), 115-120 (2004).</li>
<li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+absorption+of+dietary+maize+glucosylceramide+in+lymphatic+duct+cannulated+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Intestinal absorption of dietary maize glucosylceramide in lymphatic duct cannulated rats.</a> J. Lipid Res. 51 (7), 1761-1769 (2010).</li>
<li>Shackleford, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+lymphatically+transported+testosterone+undecanoate+to+the+systemic+exposure+of+testosterone+after+oral+administration+of+two+andriol+formulations+in+conscious+lymph+duct-cannulated+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp.+Ther%22%5BJournal%5D)">Contribution of lymphatically transported testosterone undecanoate to the systemic exposure of testosterone after oral administration of two andriol formulations in conscious lymph duct-cannulated dogs.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 306 (3), 925-933 (2003).</li>
<li>Lespine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+lymphatic+transport+to+the+systemic+exposure+of+orally+administered+moxidectin+in+conscious+lymph+duct-cannulated+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharm.+Sci%22%5BJournal%5D)">Contribution of lymphatic transport to the systemic exposure of orally administered moxidectin in conscious lymph duct-cannulated dogs.</a> Eur. J. Pharm. Sci. 27 (1), 37-43 (2006).</li>
<li>Carr, J., Carr, I., Dreher, B., Betts, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+metastasis%3A+invasion+of+lymphatic+vessels+and+efflux+of+tumour+cells+in+the+afferent+popliteal+lymph+as+seen+in+the+Walker+rat+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic metastasis: invasion of lymphatic vessels and efflux of tumour cells in the afferent popliteal lymph as seen in the Walker rat carcinoma.</a> J. Pathol. 132 (4), 287-305 (1980).</li>
<li>Bennell, M. A., Husband, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Route+of+lymphocyte+migration+in+pigs.+I.+Lymphocyte+circulation+in+gut-associated+lymphoid+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Route of lymphocyte migration in pigs. I. Lymphocyte circulation in gut-associated lymphoid tissue.</a> Immunology. 42 (3), 469-474 (1981).</li>
<li>Knight, J. S., Baird, D. B., Hein, W. R., Pernthaner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gastrointestinal+nematode+Trichostrongylus+colubriformis+down-regulates+immune+gene+expression+in+migratory+cells+in+afferent+lymph%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Immunol%22%5BJournal%5D)">The gastrointestinal nematode Trichostrongylus colubriformis down-regulates immune gene expression in migratory cells in afferent lymph.</a> BMC Immunol. 11, 51(2010).</li>
<li>Milling, S. W., Jenkins, C., MacPherson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection+of+lymph-borne+dendritic+cells+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Collection of lymph-borne dendritic cells in the rat.</a> Nat. Protoc. 1 (5), 2263-2270 (2006).</li>
<li>Pernthaner, A., Cole, S. A., Gatehouse, T., Hein, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+diversity+of+antigen-presenting+cells+in+ovine-afferent+intestinal+lymph%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Med.+Res%22%5BJournal%5D)">Phenotypic diversity of antigen-presenting cells in ovine-afferent intestinal lymph.</a> Arch. Med. Res. 33 (4), 405-412 (2002).</li>
<li>Thielke, K. H., Pabst, R., Rothkotter, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+proliferating+lymphocyte+subsets+appearing+in+the+intestinal+lymph+and+the+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Quantification of proliferating lymphocyte subsets appearing in the intestinal lymph and the blood.</a> Clin. Exp. Immunol. 117 (2), 277-284 (1999).</li>
<li>Mayrhofer, G., Fisher, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA-containing+plasma+cells+in+the+lamina+propria+of+the+gut%3A+failure+of+a+thoracic+duct+fistula+to+deplete+the+numbers+in+rat+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">IgA-containing plasma cells in the lamina propria of the gut: failure of a thoracic duct fistula to deplete the numbers in rat small intestine.</a> Eur. J. Immunol. 9 (1), 85-91 (1979).</li>
<li>Beh, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+of+IgA-containing+cells+in+intestinal+lymph+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Aust.+J.+Exp.+Biol.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">The origin of IgA-containing cells in intestinal lymph of sheep.</a> Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 55 (3), 263-274 (1977).</li>
<li>Bennell, M. A., Husband, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Route+of+lymphocyte+migration+in+pigs.+II.+Migration+to+the+intestinal+lamina+propria+of+antigen-specific+cells+generated+in+response+to+intestinal+immunization+in+the+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Route of lymphocyte migration in pigs. II. Migration to the intestinal lamina propria of antigen-specific cells generated in response to intestinal immunization in the pig.</a> Immunology. 42 (3), 475-479 (1981).</li>
<li>Rothkotter, H. J., Huber, T., Barman, N. N., Pabst, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphoid+cells+in+afferent+and+efferent+intestinal+lymph%3A+lymphocyte+subpopulations+and+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Lymphoid cells in afferent and efferent intestinal lymph: lymphocyte subpopulations and cell migration.</a> Clin. Exp. Immunol. 92 (2), 317-322 (1993).</li>
<li>Vilahur, G., Padro, T., Badimon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerosis+and+thrombosis%3A+insights+from+large+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Atherosclerosis and thrombosis: insights from large animal models.</a> J. Biomed. Biotechnol. 1, (2011).</li>
<li>Getz, G. S., Reardon, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb.+Vasc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Animal models of atherosclerosis.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 32 (5), 1104-1115 (2012).</li>
<li>Skold, B. H., Getty, R., Ramsey, F. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+atherosclerosis+in+the+arterial+system+of+aging+swine%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Spontaneous atherosclerosis in the arterial system of aging swine.</a> Am. J. Vet. Res. 27 (116), 257-273 (1966).</li>
<li>Reiser, R., Sorrels, M. F., Williams, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+high+levels+of+dietary+fats+and+cholesterol+on+atherosclerosis+and+lipid+distribution+in+swine%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of high levels of dietary fats and cholesterol on atherosclerosis and lipid distribution in swine.</a> Circ. Res. 7, 833-846 (1959).</li>
<li>Casani, L., Sanchez-Gomez, S., Vilahur, G., Badimon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pravastatin+reduces+thrombogenicity+by+mechanisms+beyond+plasma+cholesterol+lowering%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb.+Haemost%22%5BJournal%5D)">Pravastatin reduces thrombogenicity by mechanisms beyond plasma cholesterol lowering.</a> Thromb. Haemost. 94 (5), 1035-1041 (2005).</li>
<li>Romosos, D. R., McGilliard, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+thoracic+and+intestinal+lymph+duct+shunts+in+calves%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Dairy+Sci%22%5BJournal%5D)">Preparation of thoracic and intestinal lymph duct shunts in calves.</a> J. Dairy Sci. 53 (9), 1275-1278 (1970).</li>
<li>Shannon, A. D., Lascelles, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intestinal+and+hepatic+contributions+to+the+flow+and+composition+of+thoracic+duct+lymph+in+young+milk-fed+calves%5BTitle%5D)+AND+%22Q.J.+Exp.+Physiol.+Cogn.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">The intestinal and hepatic contributions to the flow and composition of thoracic duct lymph in young milk-fed calves.</a> Q.J. Exp. Physiol. Cogn. Med. Sci. 5 (2), 194-205 (1968).</li>
<li>Aliev, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+lymph+of+ruminants.+I.+Operative+techniques+for+collecting+intestinal+lymph+from+ruminants%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Vet.Hung%22%5BJournal%5D)">Intestinal lymph of ruminants. I. Operative techniques for collecting intestinal lymph from ruminants.</a> Acta Vet.Hung. 38 (1-2), 105-120 (1990).</li>
<li>Butterfield, A. B., Lumb, W. V., Litwak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+preparation+of+miniature+swine+for+atherosclerosis+research%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Surgical preparation of miniature swine for atherosclerosis research.</a> Am. J. Vet. Res. 37 (12), 1519-1523 (1976).</li>
<li>Saar, L. I., Getty, R. Lymphatic system. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSaar%2C+LI+%22Sisson+and+Grossman%27s%3A+The+anatomy+of+domestic+animals%22">Sisson and Grossman's: The anatomy of domestic animals</a>. 2, W. B. Saunders Company. Philadelphia PA. 1343-1358 (1975).</li>
<li>Zanchet, D. J., de Souza Montero, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+liver+sectorization+and+segmentation+and+virtual+reality+depiction%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Cirurgica.+Basilera%22%5BJournal%5D)">Pig liver sectorization and segmentation and virtual reality depiction.</a> Acta. Cirurgica. Basilera. 17 (6), 382-387 (2002).</li>
<li>Vine, D. F., Takechi, R., Russell, J. C., Proctor, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+postprandial+apolipoprotein-B48+metabolism+in+the+obese%2C+insulin-resistant+JCR%3ALA-cp+rat%3A+increased+atherogenicity+for+the+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Impaired postprandial apolipoprotein-B48 metabolism in the obese, insulin-resistant JCR:LA-cp rat: increased atherogenicity for the metabolic syndrome.</a> Atherosclerosis. 190 (2), 282-290 (2007).</li>
<li>Li, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+properties+of+ascending+aorta+and+pulmonary+trunk+in+pigs+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">Biomechanical properties of ascending aorta and pulmonary trunk in pigs and humans.</a> Xenotransplantation. 15 (6), 384-389 (2008).</li>
<li>Arkill, K. P., Moger, J., Winlove, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+and+mechanical+properties+of+collecting+lymphatic+vessels%3A+an+investigation+using+multimodal+nonlinear+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Anat%22%5BJournal%5D)">The structure and mechanical properties of collecting lymphatic vessels: an investigation using multimodal nonlinear microscopy.</a> J. Anat. 216 (5), 547-555 (2010).</li>
<li>Uwiera, R. R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmid+DNA+induces+increased+lymphocyte+trafficking%3A+a+specific+role+for+CpG+motifs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Plasmid DNA induces increased lymphocyte trafficking: a specific role for CpG motifs.</a> Cell. Immunol. 214 (2), 155-164 (2001).</li>
<li>Black, D. D., Davidson, N. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+apolipoprotein+synthesis+and+secretion+in+the+suckling+pig%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Intestinal apolipoprotein synthesis and secretion in the suckling pig.</a> J. Lipid Res. 30 (2), 207-218 (1989).</li>
<li>Heider, J. G., Pickens, C. E., Lawrence, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+acyl+CoA%3Acholesterol+acyltransferase+in+cholesterol+absorption+and+its+inhibition+by+57-118+in+the+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Role of acyl CoA:cholesterol acyltransferase in cholesterol absorption and its inhibition by 57-118 in the rabbit.</a> J. Lipid Res. 24, 1127-1134 (1983).</li>
<li>Noh, S. K., Koo, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+sphingomyelin+is+more+effective+than+egg+sphingomyelin+in+inhibiting+intestinal+absorption+of+cholesterol+and+fat+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Milk sphingomyelin is more effective than egg sphingomyelin in inhibiting intestinal absorption of cholesterol and fat in rats.</a> J. Nutr. 134, 2611-2616 (2004).</li>
<li>Brunham, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+ABCA1+directly+contributes+to+HDL+biogenesis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Intestinal ABCA1 directly contributes to HDL biogenesis in vivo.</a> J. Clin. Invest. 116 (4), 1052-1062 (2006).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

איסוף לימפה במעי הוא שיטה מצוינת לחקור מנגנוני המעורבים שומנים 8-12 ו מטבוליזם התרופה 13-15, סרטן גרורות 16,17, סחר תא ותפקוד מערכת חיסון 18-26, במודלים של בעלי חיים שונים הניסיונות. ואכן, את היכולת לקצור כמויות גדולות של מי היקפי (מביא) ומרכז (efferent וכלי גזע גדולים) הלימפה פני תקופה ממושכת לא הייתה חשובה במיוחד להבנת שינויים זמניים המתרחשים אוכלוסיות תאים הבאים אתגרים עם סוכני ויסות חיסוניים 18-22 , 25,26. באופן דומה, אוסף...

מערכת הלימפה היא שטח אלתר של פיזיולוגיה. במודלים פרה של צנתור הלימפה להתרחש מיני בעלי חיים שונה 1-8 ומשמשים והפרמצבטיקה ומכוני מחקר לחקור מנגנוני המעורבים שומנים 8-12 סמים מטבוליזם 13-15, גרורות סרטן 16 עם טיפול ניסיוני 17, ו -18 תפקוד מערכת החיסון -26. מחקר זה בוחן את שימוש צנתור מטען לימפה במעי במודל חזיר בית למדוד רכיבים של מטבוליזם שומנים בדם. מטבוליזם Lipoprotein מעורב בייצור הפרשת chylomicrons, כמו גם משינויים בשיעורי שומנים הקשורים חלבון כולל. אלה הם שיקולים חשובים כמו שיש הבדלים גדולים במטבוליזם שומנים בין במודלים של מכרסמים נפוצים ובני אדם וככזה, במודלי חזירים לאסוף לימפה במעי יכולים לספק מידע דומה יותר ללימוד שומנים ליtabolism באנשים 27-31. מספר טכניקות כירורגיות משמשות כדי לאסוף את לימפה במעי במינים של בעלי חיים גדולים: גישת כתף גולגולתי (כלומר, צנתור צינור חזה) 5, גישת אגף העליון לרוחב 32-34, וכן קו אמצע גחון או גישת paramedian 22,35. וידאו זה מתאר בפירוט את ההליך הניתוח חזירים בגישה כירורגית קו אמצע גחון עבור הצנתור של המטען לימפה במעי. היתרי טכניקה כירורגית זהירות שיטה זו של צנתור הלימפה לאסוף כמויות גדולות של הלימפה מרכיביו לאורך תקופות ממושכות של זמן. טכניקה זו פותחת מספר עצום של יישומים לתחומים רבים לבחון פונקציות פיסיולוגיות שונות. יישומים יכולים לכלול, אך אינם מוגבלים, ליפופרוטאין גוף וחילוף חומרי שומנים, immunosurveillance, בראשית גידול וגרור, תפקוד מעיים, ואת developmאף אוזן גרון והתקדמות של מחלה דלקתית של המעי.

<table><tbody><tr><td>להב לרינגוסקופ מילר</td><td>וולש אלין</td><td>68044</td><td>אורך 182 מ"מ</td></tr><tr><td>יועץ כירורגיה: מוניטור סימנים חיוניים</td><td>Surgivet</td><td>V9203</td><td></td></tr><tr><td>בדיקת טמפרטורת פי הטבעת</td><td>Surgivet</td><td>V3417</td><td></td></tr><tr><td>מחולל אלקטרוכירורגיה חד קוטבית</td><td>מעבדת עמק</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מספריים מצנבאום</td> מדע <td>יפה</td><td>14518-18</td><td></td></tr><tr><td>מפסק טופייר</td><td>סטיבנס</td><td>162-11-676</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים יתושים</td><td>סטיבנס</td><td>162-7-10</td><td></td></tr><tr><td>קלי מלקחיים מעוקלים (14 ס"מ)</td><td>סטיבנס</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים לרקמות אליס</td><td>סטיבנס</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים (10.2 ס"מ)</td><td>סטיבנס</td><td>162-18-780</td><td></td></tr><tr><td>חבישת מלקחיים-אדיסון (12.1 ס"מ)</td><td>Stevens</td><td>162-17-2510</td><td></td></tr><tr><td>נהגי מחט</td><td>Stevens</td><td>162-V98-42</td><td></td></tr><tr><td>מספריים איריס</td><td>מדע עדין</td><td>14058-11</td><td></td></tr><tr><td>משאבת מים במחזור</td><td>Jorvet</td><td>J-783X</td><td></td></tr><tr><td>שמיכת Maxitherm-ויניל</td><td>Jorvet</td><td>J-784C</td><td></td></tr><tr><td>אפליקטורים Q tip</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-037-960</td><td></td></tr><tr><td>צנתור&nbsp; צינורות (4.06 OD X 2.31 ID)</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>MRE-160</td><td>צינורות השתלת מיקרו-רנתן</td></tr><tr><td>2-0 תפר משי</td><td>Ethicon</td><td>LA556</td><td></td></tr><tr><td>2-0 תפר פוליגלקטין</td><td>Ethicon</td><td>J443H</td><td>2-0 ויקריל</td></tr><tr><td>מעיל בעלי חיים גדול</td><td>Lomir Biomedical Inc.</td><td>בקבוקי כביסה מפוליפרופילן SSJ2YC</td><td></td></tr><tr><td></td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>03-409-22C</td><td>500 מ"ל</td></tr><tr><td>פניצילין-סטרפטומיצין</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>D4333</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>60-00-4</td><td></td></tr><tr><td>אמפוטריצין B</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>A2411</td><td></td></tr><tr><td>אזפרון</td><td>אלנקו סטרניל</td><td></td> לבריאות <td></td> בעלי חיים</tr><tr><td>Dexmedetomidine hydrochloride</td><td>Zoetis</td><td>6295</td><td>Dexdomitor</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott Animal&nbsp; בריאות</td><td>05260-5</td><td>IsoFlo</td></tr><tr><td>קטמין הידרוכלוריד</td><td>Zoetis</td><td>2626</td><td>Ketaset</td></tr><tr><td>Bupenorphine hydrochloride</td><td>Champion Alstoe Animal Health</td><td></td><td>DIN:02347510</td></tr><tr><td>6 מ"מ צינור אנדוטרכיאלי</td><td>Jorvet</td><td>J-165d</td><td></td></tr><tr><td>10% תרסיס לידוקאין</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>DIN:02003767</td></tr><tr><td>4% פילינג</td> <td>כירורגי כלורהקסידיןPartnar Animal Health</td><td>PCH-011</td><td>מדולל: תמיסה 2.0%</td></tr><tr><td>3M וילון סטרי כירורגי</td><td>3M Health Care</td><td>1040</td><td></td></tr><tr><td>SDS עמוד ג'ל</td><td>Invitrogen</td><td></td><td>EA0375BOX 3-8% טריס אצטט</td></tr><tr><td>ממברנת פלואוריד פוליווינילידן</td><td>Millipore</td><td>IPVH00010</td><td>0.45 &mu; m גודל נקבוביות</td></tr><tr><td>נוגדן ApoB&nbsp;</td><td>EMD Millipore</td><td>AB742</td><td>1:4000 דילול</td></tr><tr><td>חמור נגד עזים IgG-HRP</td><td>סנטה קרוז ביוטכנולוגיה</td><td>Sc-2304</td><td></td></tr><tr><td>ECL פריים ווסטרן ספוג ריאגנט</td><td>GE Healthcare LifeSciences</td><td>RPN2232&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>ערכת טריגליצרידים</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>998-40391/994-40491</td><td></td></tr><tr><td>ערכת כולסטרול כוללת</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>439-17501</td><td></td></tr><tr><td>סה"כ חלבון</td><td>&nbsp; פירס&nbsp;</td><td>23225</td><td>בדיקת חומצה ביסינצ'ונינית</td></tr></tbody></table>

צנתור לטווח ארוך של טרונק לימפה במעי וגביית הלימפה חזירים ילודים

Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs

צנתור של גזע הלימפה במעי בחזירים שזה עתה נולדו היא טכניקה המאפשרת איסוף ארוך טווח של כמויות גדולות של לימפה משפיעה במעי (מרכזית). חשוב לציין, איסוף הלימפה המרכזית מהמעי מאפשר לחוקרים לחקור הן את המנגנונים והן את מרכיבי השומנים הקשורים למטבוליזם של שומנים, דלקת מעיים וגרורות סרטניות, כמו גם תאים המעורבים בתפקוד החיסוני ובמעקב חיסוני. גישה כירורגית בקו האמצע הגחוני מאפשרת חשיפה כירורגית מצוינת לבטן הגולגולת וגישה קלה יחסית לכלי תא המטען של הלימפה במעי הנמצא ליד הלבלב ולמקטע הגחון הימני של וריד הפורטל מתחת להיבט הקרביים של אונת הכבד הימנית. הכלי מנותח בקפידה ומשוחרר מהפאשיה שמסביב ולאחר מכן מורחב עם תפרים המאפשרים החדרה וקיבוע לאחר מכן של הקטטר לתוך הכלי. הקטטר מחוצה וכ-1 ליטר ל-24 שעות של לימפה נאסף במשך תקופה של 7 ימים. בעוד שטכניקה זו מאפשרת איסוף כמויות גדולות של לימפה מרכזית לאורך תקופה ממושכת, ההצלחה תלויה בדיסקציה כירורגית זהירה, טיפול ברקמות ותשומת לב רבה לטכניקה כירורגית נכונה. זה חשוב במיוחד בניתוחים בבעלי חיים צעירים מכיוון שכלי הלימפה יכולים להיקרע בקלות, מה שעלול להוביל לכישלון כירורגי וניסיוני. הסרטון מדגים טכניקה כירורגית מצוינת לאיסוף לימפה במעי.

<html> צנתור הלימפה של המטען הלימפה מעיים של חזיר בילוד מאפשר איסוף של כ 1 L / 24 שעות של הלימפה מרכזית על תקופה של 7 ימים. הלימפה שנאסף בניסויים זה הכיל רכיבים של מטבוליזם שומנים בדם, כלומר חלבון הלימפה הכולל, ליפופרוטאין ApoB48, טריגליצרידים, חלבון כולל, וכולסטרול. טבלת 1 מדגיש כמויות נציג והמרכיבים השומניים אלה מדגימים הלימפה משולבת של שלושה חזירים. יש לציין, זרימת הלימפה המרכיבים השומנים נמצאים-בקנה אחד עם הערכים של הלימפה המרכזי שדווח על ידי חו...

אנו מציגים הליך כירורגי לצנתור תא המטען של הלימפה במעי בחזירים יילודים כדי לאסוף כמויות גדולות של רכיבי חילוף חומרים של שומנים מלימפה זורמת.

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal ...

ניתוב קטטר למערכת הלימפה הוא טכניקה חשובה המשמשת לחקר מנגנונים המעורבים במטבוליזם של שומנים ותרופות, גרורות של סרטן ותפקוד חיסוני, ואיסוף כמויות גדולות של לימפה ממודלים שונים של בעלי חיים מאפשר לחוקרים ללמוד תהליכים אלו. הסרטון מדגים בפירוט את ההליך הכירורגי המשמש לניתוב קטטר לתא הלימפה המעי (intestinal lymphatic trunk) בחזיריו新生 (neonatal pigs) באמצעות גישה קו-מרכזית במישור הגחוני. כל הפרוצדורות אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ולהשתמש בבעלי חיים של אוניברסיטת אלברטה.כדי לגשת לכלי הלימפה, פתחו את חלל הבטן. נעשה שימוש במכשיר כריתה חשמלית (electrocautery) בהגדרת חיתוך כדי לפתוח את שכבת השריר. הונח רטראקטור כדי להחזיק את דופן הבטן פתוחה למשך הפרוצדורה.איברים בטניים מרכזיים מזוהים כדי לסייע באיתור כלי הלימפה. לשיפור הגישה למקטעי כלי הלימפה, המעי הדק והמעי הגס מוצאים החוצה לצד שמאל של הגוף. כלי הלימפה מסומן באמצעות זיהוי הכבד והמקטע הבטני הימני של וריד השער.בחזירי יניקים כלי הלימפה עדינים ונתסבקים בקלות, ולכן נדרשת דיסקציה מדוקדקת באמצעות מקלוני צמר וכלים לא חדים. כאן נראה את כלי הלימפה של המעי. כעת מעבירים את התפר מתחת לכלי הלימפה באמצעות פינצטה לא חדה.כעת ישנן שלוש תפרים של משי 2-0 שעברו מתחת לכלי הלימפה. התפר הזנבי ביותר משמש להרחבת הכלי ולאבטחת הקטטר לכלי. התפרים הקרנאליים משמשים לאבטחת הקטטר בתוך הכלי.חתך קטן בכלי הלימפה מאפשר להרחיב את הכלי באמצעות פינצטה קהה. הקטטר מוחדר אל תוך הכלי. יש לבצע זאת בעדינות כדי להבטיח שכלי הלימפה לא יקרע.יש להחדיר את הקטטר מעבר לתפר הקרניאלי ביותר כדי להבטיח שהוא ממוקם היטב. שלושה תפרי משי 2-0 מקבעים את הקטטר בתוך כלי הלימפה. חשוב לציין כי שני התפרים הקרניאליים משמשים תחילה לקיבוע הקטטר לכלי הדם, ולאחר מכן משתמשים בתפר הקודאלי ביותר כדי לעגן את הקטטר ולהוסיף יציבות.חשוב לוודא שקיים זרימה לימפתית תקינה לפני סגירת חלל הבטן. הקטטר מוצא החוצה במרכז השוק השמאלית של החזיר. פינצטה גדולה משמשת למשיכת הקטטר מחלל הבטן אל פני השטח החיצוניים של שוק החזיר.שכבות השריר נסגרות באמצעות תפר vicryl 2-0 על מחט קהה (tapered needle) בתבנית תפרים פשוטים קטועים (simple interrupted suture). העור נסגר באמצעות תפר vicryl 2-0 על מחט חותכת (cutting needle) בתבנית תפר רציף תת-עורי (running subcuticular suture). בחיתוך היציאה, הקטטר עובר דרך העור ונסגר באמצעות תפר nylon 2-0 על מחט חותכת בתבנית תפר שקיש (purse-string suture).סגירה זו מסייעת במניעת זיהומים עולים הנעים פנימה לאורך הקטטר. המעטפת המחזיקה את בקבוקי איסוף הלימפה ממוקמת על החזיר בעודו תחת הרדמה. הקטטר מוחדר לבקבוק האיסוף ומוודאים זרימה לימפתית תקינה לפני יקיצתו של החזיר.החזירים מחלימים היטב מההליך וזרימה לימפתית מצוינת נשמרת לאורך כל הניסוי. הטבלה מציגה את הרכיבים של הלימפה שנאספה מכלי הלימפה. רכיבים אלו כוללים Apolipoprotein B48, טריגליצרידים וכולסטרול.תמונת ה-Western Blot מראה נוכחות של Apolipoprotein B48 וכמויות קטנות של Apolipoprotein B100 ממקור פלזמי בתוך דגימת הלימפה שנאספה. למרות שקתטרציה לימפתית בחזירים צעירים יכולה להיות מאתגרת מבחינה טכנית, מכיוון שהכליים הלימפתיים הם עדינים ושבירים, סרטון זה מדגים כי שימוש בטכניקה כירורגית נכונה וזהירה בחזירים צעירים יכול לספק לחוקרים מודל מצוין לאיסוף לימפה מהמעיים.

long-term-catheterization-intestinal-lymph-trunk-collection-lymph

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מתארים שיטה כירורגית חדשנית catheterizing "לולאות מעיים" בתוך מעי של כבשה. לאחר חיות התאוששו מהניתוח ויש לי פינה אנטיביוטיקה משככי כאבים, טיפולים מרובים ניתן להפקיד ישירות לולאות באמצעות קטטר.

צנתור של לולאות מעיים של מעלי גירה

סרטון זה מדגים טכניקה לצינור צינור הלימפה המזנטרי בחולדות. שיטה זו מאפשרת גישה ישירה לכל נפח הרכיבים הקיימים בנוזל הלימפה.

קנולציה של צינור לימפה מזנטרי במודל חולדה לקצירת נוזל לימפה

כאן אנו מתארים טכניקה לקנולציה של צינור הלימפה המזנטרי בחולדות המאפשרת כימות של הובלת שומנים ותרופות דרך מערכת הלימפה לאחר מתן המעי. ניתן להתאים את הטכניקה להערכת ריכוזי לימפה מזנטרית ו/או הובלה של נוזלים, תאי חיסון, פפטידים, חלבונים ומולקולות ליפופיליות.

לימפה Duct cannulated עכברוש דגם mesenteric: בקשה להערכה של המעיים הלימפה תרופות תחבורה

כאן, אנו מתארים שיטה מדויקת לאיסוף לימפוציטים צינור בית החזה והתבוננות בהגירה של לימפוציטים טרופיים במדבקות של עכברוש פייר במשך 3 שעות באמצעות צילום זמן לשגות. טכניקה זו יכולה להבהיר כיצד הדינמיקה של לימפוציטים מושפעים בתנאים דלקתיים.

תצפית מיקרוסקופית של לימפוציטים דינמיקה במדבקות של עכברוש פייר

הפרוטוקול הנוכחי מתאר פרוטוקול כירורגי מפורט לבידוד לימפה זורמת במעי בתגובה לעירויי חומרים מזינים תוך תריסריונים בעכברים. זה מאפשר קביעה פיזיולוגית של ספיגת שומנים כוללת במעי וסינתזה והפרשה של כילומיקרון בתגובה לחומרים מזינים ניסיוניים שונים.

בידוד הלימפה המזנטרית הזורמת בעכברים לכימות קינטיקה של ספיגת שומנים תזונתיים והפרשת כילומיקרון

מתוארת גישה אמינה וניתנת לשחזור להחדרה ותחזוקה של קטטר היקמן מנהור לגישה ארוכת טווח של כלי דם בחזירים. הצבת צנתר ורידי מרכזי מאפשרת דגימה יומית נוחה של דם שלם מבעלי חיים ערים ומתן תוך ורידי של תרופות ונוזלים.

שימוש בצנתר היקמן לגישה ארוכת טווח לכלי דם במודל חזירי פרה-קליני

פרוטוקול זה מתאר את הפיתוח של מודל חזרזיר יילודים של פגיעה ריאתית חריפה המדגים אירועים פתוגניים מוקדמים המתרחשים בריאה המוקדמת, כולל כמות פעילי שטח תת-מספקת, היפראוקסיה, אוורור בלחץ גבוה ודלקת, כדי להקל על הבנת הטריגרים המולקולריים של דיספלזיה ברונכופולמונרית ולשפר את התרגום הטיפולי.

פיתוח מודל פגיעת ריאות חריפה של חזרזיר יילודים המשחזר את הסביבה המוקדמת של ריאות פגים

פרוטוקול ניסויי זה מדגים מודל עכברוש מחובר לצינור לימפה צווארי עמוק, המאפשר הערכה ישירה וכמותית של ניקוז לימפה מאזור הראש. המודל מאפשר ניתוח מפורט של מומסים שמקורם במערכת העצבים המרכזית (CNS), אוכלוסיות תאי חיסון, והפצה וניקוי של טיפולים ממוקדים במערכת העצבים המרכזית.

מודל עכברוש בצינור הלימפה הצווארי להערכת הובלה לימפה מהראש ומהמוח

פרוטוקול ניסויי זה מתאר מודל עכברוש מחובר לצינור לימפה כבד, המאפשר הערכה ישירה וכמותית של ניקוז לימפה וכלי דם בכבד. המודל מאפשר דגימה סימולטנית של לימפה כבדית ודם מערכתית כדי לחקור העברת כבד, מטבוליזם ואיתות חיסוני, ותומך במחקרים של פרמקוקינטיקה של תרופות וביולוגיה ספציפית לכבד.

מודל עכברים מקיף להערכת מסלולי העברת כבד באמצעות דגימת לימפה וכלי דם בו-זמנית

הקרינה היא שיטת הדמיה חדשנית מבטיח לניתוח דימוי מודרך באונקולוגיה כירורגית. בסרט זה אנו מתארים את הליך טכני לגילוי של הצומת לימפה זקיף באמצעות דימות פלואורסצנטי כמו לראווה גניקולוגיים oncologicy. מערכת multispectral מצלמה פלואורסצנטי, יחד עם הסוכן indocyanine ניאון ירוק, מוחל.

Multispectral הדמיה בזמן אמת Fluorescence לגילוי intraoperative של הצומת סנטינל הלימפה גניקולוגיות אונקולוגיה

למדו טכניקת צנתור לימפה מעייתית בחזירים ילודים לחקר מטבוליזם שומנים. שיטה כירורגית זו מאפשרת איסוף לימפה בכמויות גדולות לניתוח מרכיבי מטבוליזם ותפקוד חיסוני.

צנתור לטווח ארוך של טרונק לימפה במעי וגביית הלימפה חזירים ילודים

גלה סרטונים נוספים