Name: Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: למד השתלת רגל אחורית אורתוטופית בעכברים באמצעות טכניקת חפת ללא תפרים לאנסטומוזה מיקרו-וסקולרית. מודל זה מאפשר חקר תגובות חיסון אלוגניות בהשתלות מרכיבות וסקולריות ומשפר את שיעורי ההצלחה של ניתוחים מיקרו-וסקולריים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי הצבא, חיל הים, NIH, חיל האוויר, VA לענייני בריאות לתמוך במאמץ AFIRM השנייה, תחת פרס מס W81XWH-13-2-0053. פעילות רכישה הצבא האמריקני למחקר רפואי, 820 צ&#39;נדלר רחוב, פורט דטריק MD 21,702-5,014 הוא משרד הרכישה הענקת וניהלה. דעות, פרשנויות, מסקנות והמלצות הן על דעת המחבר ואינם שאושרו בהכרח על ידי משרד הגנה. המחברים מבקשים להודות ג&#39;סיקה איזי, DVM, קרוליין גארט, DVM וג&#39;ולי ווטסון, DVM לתמיכת הווטרינרים המעולה שלהם במהלך המחקר.

כל הניסויים נערכו בהתאם מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה של המכון הלאומי לבריאות (NIH) ואושרו על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת ג&#39;ונס הופקינס ושימוש (JHUACUC). הנהלים הספציפיים בוצעו תחת MO13M108 פרוטוקול ACUC אושר. מבצע התורם 1. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נהל שיכוך כאבים בנקודת הזמן המתאים לכל ניסוח תרופתי לפני ניתוח. על פי השימוש בפרוטוקול טיפול בבעלי חיים ושימוש אישרה 0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג BW של עצירות תת עורי 1 hr לפני החתך בעור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התורם שלווה עם isoflurane מיושם באמצעות תא המצורף מאדה isoflurane ב 4%; לשמור הרגעה והרדמה ב -2% באמצעות חרטומו. בצע השתקפות נסיגת קמצוץ בוהן כדי לפקח על עומק ההרדמה לפני תחילתו של ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לובשים מסכות, שמלות בידוד הפנויה וכפפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את ar כירורגיתea, בפרט הגפה ובמפשעה האחוריות, ו prep עם 10% Povidone - יוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש וילון שדה סטרילי, מכשירים autoclaved ו מיקרוסקופ בהגדלה גבוהה (40X). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצעו חתך עור במפשעה באמצעות מספרי proximally לאזור אמצע הירכיים ואת circumferentially לחבר את החתך כדי לתחום את הגפיים אחוריים משאר גוף העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה לנתח את עורק, וריד עצב הירך. הפרד כל שלושת המבנים באמצעות מלקחיים ומספריים מיקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר pedicle וסקולרית הוא גזור לחלק את הכלי ברמה של הרצועה מפשעתי באמצעות מספרי מייקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן, ממשיכים לחלק את גחון הפרט (שרירי ירך gracilis המדיאלי) וקבוצות שרירים הגבו 20 proximally ברמה של ירך האמצע להפריד השתל מן החיה התורמת באמצעות מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Transect הירך וגוזר באמצע פיר הירך באמצעות מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים בעלי חיים על ידי fol מנת יתר isofluraneשאחריו נקע בצוואר הרחם. אשר הפסיק פעימה ונשימת לב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את האיבר עם 2 מיליליטר heparinized (30 IE) קר (4 ° C) מלוח באמצעות מחט שטיפת G 33 רכובה על מזרק (ראה לוח חומרים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח שרוול polyimide אחד על וריד, ועצם ירך, בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עוטפים השתל לתוך גזה צמר גפן רטוב, מקום בצלחת פטרי ולאחסן ב 4 ° C עד הבלעה. </li></ol> 2. נמען מבצע <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת הגפיים האחוריות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נהל שיכוך כאבים בנקודת הזמן המתאים לכל ניסוח תרופתי לפני ניתוח. על פי השימוש בפרוטוקול טיפול בבעלי חיים ושימוש אישרה 0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג BW של עצירות SC 1 hr לפני החתך בעור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התורם שלווה עם isoflurane מיושם באמצעות תא המצורף מאדה isoflurane ב 4%; לשמור הרגעה והרדמה ב -2% באמצעות חרטומו. בצע השתקפות נסיגת קמצוץ בוהן כדי לפקח על המחלקהשעות של הרדמה לפני תחילתו של ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במשחה וטרינריים המשפיעים על העיניים של העכבר כדי למנוע יובש לאחר הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את אזור הניתוח, ובמיוחד הגפיים האחוריות ובמפשעה מכין עם 10% Povidone - יוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצעו חתך עור במפשעה באמצעות מספרי proximally לאזור אמצע הירכיים ואת circumferentially לחבר את החתך כדי לתחום את הגפיים אחוריים משאר גוף העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה לנתח את עורק הירך, וריד ועצב ולהפריד כל שלושת המבנים באמצעות מלקחיים ומספריים מיקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר pedicle וסקולרית הוא גזור, מהדק את כלי הירך ברמה של הרצועה מפשעתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את כלי דיסטלי ברמה של העורק ברום הבטן שטחית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן, ממשיכים לחלק את גחון הפרט (שרירי ירך gracilis המדיאלי) וקבוצות שרירים הגבו 20 proximally ברמה של ירך האמצע להפריד את האחוריות li הילידיםMB מבעלי החיים לנמען באמצעות מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Transect הירך באמצע פיר הירך באמצעות מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לצרוב שרירי ירך transected בעבר כדי למנוע דימום של אתר לנתיחה ובכך איבוד דם נמען. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הַשׁרָשָׁה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקטין את איבוד הנוזלים על ידי להשקיית שדה הניתוח עם מלח חמים (37 מעלות צלזיוס) והזרקת 0.3 מ&quot;ל תמיסת מלח חמים לפני ואחרי הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את השתל באופן המשקף את עמדת אנטומי מדויק של הגפיים האחוריות יליד ידי יישור עצם הירך של הנמען ואת השתל ולחבר אותם באמצעות מחט השדרה 20 G כמו מסמר תוך לשדי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Coapt קבוצות שרירים הגחון ועל הגב באמצעות חומר תפר נספג (6-0 Polysorb). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את כלי הירך באמצעות טכניקת השרוול-תפר הכללי; בפירוט, למשוך את הצד המקבל של כלי שיט על האזיקים רכובים בעבר על הכלי המסתיים של גרףt. השתמש תפר 10-0 ניילון ולבצע עניבה היקפית כדי לתקן את ספינת הנמען על השרוול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא לשחרר את המלחציים. בשלב זה לוודא ויזואלית סיבוב שרוול ומיצוב אופטימלי כדי למנוע אי-סיבוב מסתלסל של הכלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע המוסטאסיס מוקפד באמצעות כוויית אלקטרו עם דגש מיוחד על הממשק התורם למקבל השריר ואת קצות העצם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את העור באמצעות תפרים ניילון שאינם נספגים (6-0 Ethilon). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבוע תנאי normothermic בכך שהוא מאפשר את החיה להתאושש בכלוב שלה תחת מנורת חימום. המשך מעקב שוטף לפחות 4 שעות לפני חזרת אותו למוקד הדיור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק שיכוך כאבים שלאחר הניתוח עם עצירות במינון של 0.1mg / kg SC כל 6-8 שעות במשך 3 ימים. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Khalifian, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facial+transplantation%3A+the+first+9+years%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Facial transplantation: the first 9 years.</a> Lancet. , (2014).</li>
<li>Petruzzo, P., Dubernard, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+International+Registry+on+Hand+and+Composite+Tissue+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Transpl%22%5BJournal%5D)">The International Registry on Hand and Composite Tissue allotransplantation.</a> Clin. Transpl. , 247-253 (2011).</li>
<li>Shores, J. T., Brandacher, G., Lee, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hand+and+Upper+Extremity+Transplantation%3A+An+Update+of+Outcomes+in+the+Worldwide+Experience%5BTitle%5D)+AND+%22Plast.+Reconstr.+Surg%22%5BJournal%5D)">Hand and Upper Extremity Transplantation: An Update of Outcomes in the Worldwide Experience.</a> Plast. Reconstr. Surg. , (2014).</li>
<li>Levi, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+the+abdominal+wall%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Transplantation of the abdominal wall.</a> Lancet. 361, 2173-2176 (2003).</li>
<li>Strome, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laryngeal+transplantation+and+40-month+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22N.Engl.J.+Med%22%5BJournal%5D)">Laryngeal transplantation and 40-month follow-up.</a> N.Engl.J. Med. 344, 1676-1679 (2001).</li>
<li>Rose, K. G., Sesterhenn, K., Wustrow, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tracheal+allotransplantation+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Tracheal allotransplantation in man.</a> Lancet. 1, 433(1979).</li>
<li>Hofmann, G. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allogeneic+vascularized+transplantation+of+human+femoral+diaphyses+and+total+knee+joints--first+clinical+experiences%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant.+Proc%22%5BJournal%5D)">Allogeneic vascularized transplantation of human femoral diaphyses and total knee joints--first clinical experiences.</a> Transplant. Proc. 30, 2754-2761 (1998).</li>
<li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+report+of+penile+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Urol%22%5BJournal%5D)">A preliminary report of penile transplantation.</a> Eur. Urol. 50, 851-853 (2006).</li>
<li>Brannstrom, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Livebirth+after+uterus+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Livebirth after uterus transplantation.</a> Lancet. , (2014).</li>
<li>Sarhane, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosing+skin+rejection+in+vascularized+composite+allotransplantation%3A+advances+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Diagnosing skin rejection in vascularized composite allotransplantation: advances and challenges.</a> Clin. Transplant. 28, 277-285 (2014).</li>
<li>Schneeberger, S., Khalifian, S., Brandacher, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunosuppression+and+monitoring+of+rejection+in+hand+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Tech.+Hand+Up.+Extrem.+Surg%22%5BJournal%5D)">Immunosuppression and monitoring of rejection in hand transplantation.</a> Tech. Hand Up. Extrem. Surg. 17, 208-214 (2013).</li>
<li>Lee, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+antigenicity+of+components+of+a+vascularized+limb+allograft%5BTitle%5D)+AND+%22Plast.+Reconstr.+Surg%22%5BJournal%5D)">Relative antigenicity of components of a vascularized limb allograft.</a> Plast. Reconstr. Surg. 87, 401-411 (1991).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemiface+allotransplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Plast.+Reconstr.+Surg%22%5BJournal%5D)">Hemiface allotransplantation in the mouse.</a> Plast. Reconstr. Surg. 129, 867-870 (2012).</li>
<li>Ibrahim, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+heterotopic+swine+hind+limb+transplant+model+for+translational+vascularized+composite+allotransplantation+%28VCA%29+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A modified heterotopic swine hind limb transplant model for translational vascularized composite allotransplantation (VCA) research.</a> J Vis Exp. , (2013).</li>
<li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> J Vis Exp. , (2014).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+hind+limb+transplantation%3A+a+new+composite+tissue+allotransplantation+model+using+nonsuture+supermicrosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Mouse hind limb transplantation: a new composite tissue allotransplantation model using nonsuture supermicrosurgery.</a> Transplantation. 90, 1374-1380 (2010).</li>
<li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141, 682-689 (2007).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+hind-limb+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic hind-limb transplantation in rats.</a> J Vis Exp. , (2010).</li>
<li>Zou, Y., Brandacher, G., Margreiter, R., Steurer, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+heterotopic+arterialized+liver+transplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Cervical heterotopic arterialized liver transplantation in the mouse.</a> J. Surg. Res. 93, 97-100 (2000).</li>
<li>Zhang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+mouse+limb+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Development of a mouse limb transplantation model.</a> Microsurgery. 19, 209-213 (1999).</li>
<li>Schneeberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upper-extremity+transplantation+using+a+cell-based+protocol+to+minimize+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Surg%22%5BJournal%5D)">Upper-extremity transplantation using a cell-based protocol to minimize immunosuppression.</a> Ann. Surg. 257, 345-351 (2013).</li>
<li>Azari, K., Brandacher, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+composite+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Vascularized composite allotransplantation.</a> Curr Opin Organ Transplant. 18, 631-632 (2013).</li>
<li>Pomahac, B., Gobble, R. M., Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facial+and+hand+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb.+Perspect.+Med%22%5BJournal%5D)">Facial and hand allotransplantation.</a> Cold Spring Harb. Perspect. Med. 4, (2014).</li>
<li>Chong, A. S., Alegre, M. L., Miller, M. L., Fairchild, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+and+limits+of+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb.+Perspect.+Med%22%5BJournal%5D)">Lessons and limits of mouse models.</a> Cold Spring Harb. Perspect. Med. 3, a015495(2013).</li>
<li>Lin, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neck+as+a+preferred+recipient+site+for+vascularized+composite+allotransplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Plast.+Reconstr.+Surg%22%5BJournal%5D)">The neck as a preferred recipient site for vascularized composite allotransplantation in the mouse.</a> Plast. Reconstr. Surg. 133, 133e-141e (2014).</li>
<li>Shapiro, R. I., Cerra, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+reimplantation+and+transplantation+of+a+complex+organ%3A+the+rat+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb.</a> J. Surg. Res. 24, 501-506 (1978).</li>
<li>Leto Barone, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gracilis+myocutaneous+free+flap+in+swine%3A+an+advantageous+preclinical+model+for+vascularized+composite+allograft+transplantation+research%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">The gracilis myocutaneous free flap in swine: an advantageous preclinical model for vascularized composite allograft transplantation research.</a> Microsurgery. 33, 51-55 (2013).</li>
<li>Mathes, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preclinical+canine+model+for+composite+tissue+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reconstr.+Microsurg%22%5BJournal%5D)">A preclinical canine model for composite tissue transplantation.</a> J. Reconstr. Microsurg. 26, 201-207 (2010).</li>
<li>Barth, R. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+survival+of+composite+facial+allografts+in+non-human+primates+associated+with+posttransplant+lymphoproliferative+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prolonged survival of composite facial allografts in non-human primates associated with posttransplant lymphoproliferative disorder.</a> Transplantation. 88, 1242-1250 (2009).</li>
<li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Res+C+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Res C Embryo Today. 96, 39-50 (2012).</li>
<li>Foster, R. D., Liu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+hindlimb+transplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reconstr.+Microsurg%22%5BJournal%5D)">Orthotopic hindlimb transplantation in the mouse.</a> J. Reconstr. Microsurg. 19, 49(2002).</li>
<li>Tung, T. H., Mohanakumar, T., Mackinnon, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+Mouse+Model+for+Heterotopic+Limb+and+Composite-Tissue+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reconstr.+Microsurg%22%5BJournal%5D)">Development of a Mouse Model for Heterotopic Limb and Composite-Tissue Transplantation.</a> J. Reconstr. Microsurg. 17, 267-274 (2001).</li>
<li>Zhang, F., Shi, D. Y., Kryger, Z., Moon, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+mouse+limb+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Development of a mouse limb transplantation model.</a> Microsurgery. 19 (5), 209-213 (1999).</li>
<li>Schneeberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+acute+rejection+after+hand+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Atypical acute rejection after hand transplantation.</a> Am. J. Transplant. 8, 688-696 (2008).</li>
<li>Mathes, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stable+mixed+hematopoietic+chimerism+permits+tolerance+of+vascularized+composite+allografts+across+a+full+major+histocompatibility+mismatch+in+swine%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl.+Int%22%5BJournal%5D)">Stable mixed hematopoietic chimerism permits tolerance of vascularized composite allografts across a full major histocompatibility mismatch in swine.</a> Transpl. Int. 27, 1086-1096 (2014).</li>
<li>Yamada, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+CTLA4Ig+for+induction+of+mixed+chimerism+and+renal+allograft+tolerance+in+nonhuman+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Use of CTLA4Ig for induction of mixed chimerism and renal allograft tolerance in nonhuman primates.</a> Am. J. Transplant. 14, 2704-2712 (2014).</li>
<li>Sachs, D. H., Kawai, T., Sykes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+tolerance+through+mixed+chimerism%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb.+Perspect.+Med%22%5BJournal%5D)">Induction of tolerance through mixed chimerism.</a> Cold Spring Harb. Perspect. Med. 4, a015529(2014).</li>
<li>Kawai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HLA-mismatched+renal+transplantation+without+maintenance+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">HLA-mismatched renal transplantation without maintenance immunosuppression.</a> N. Engl. J. Med. 358, 353-361 (2008).</li>
<li>Kawai, T., Sachs, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerance+induction%3A+hematopoietic+chimerism%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Tolerance induction: hematopoietic chimerism.</a> Curr Opin Organ Transplant. 18, 402-407 (2013).</li>
<li>Kawai, T., Sachs, D. H., Sykes, M., Cosimi, A. .B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HLA-mismatched+renal+transplantation+without+maintenance+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">HLA-mismatched renal transplantation without maintenance immunosuppression.</a> N. Engl. J. Med. 368, 1850-1852 (2013).</li>
<li>Leventhal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimerism+and+tolerance+without+GVHD+or+engraftment+syndrome+in+HLA-mismatched+combined+kidney+and+hematopoietic+stem+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Transl.+Med%22%5BJournal%5D)">Chimerism and tolerance without GVHD or engraftment syndrome in HLA-mismatched combined kidney and hematopoietic stem cell transplantation.</a> Sci. Transl. Med. 4, 124-128 (2012).</li>
<li>Cendales, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Banff+2007+working+classification+of+skin-containing+composite+tissue+allograft+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">The Banff 2007 working classification of skin-containing composite tissue allograft pathology.</a> Am. J. Transplant. 8, 1396-1400 (2008).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרס כלכלי מתחרה.

Vascularized Composite אלוגרפט, כגון גפיים עליונים והשתלות פן לשיקום פגמי רקמות הרסניות, התפתח כאפשרות טיפול תקפה בחולים לא amendable להליכים שיקומיים קונבנציונליים. התקדמות טכנית בתחום המיקרו-כירורגיה לשחזור וכן ניסיון רב עם אימונוסופרסיבי החזק וטיפולי modulatory חיסוניים בהשתלות איברים מוצקות, מאפשרת כעת הישרדות של שתל לטווח ארוך באוכלוסיית חולים ייחודית זו 3,21. עם זאת, תופעות לוואי משמעותיות של דיכוי חיסוני ארוכת הטווח הנדרשת לצורך תחזוקה של השתל והישרדות עדיין להגב...

סוף שנות התשעים בישרו את הימים החלוציים של השתלות משחזרות עם השתלת היד המוצלחת הראשונה שבוצעה בצרפת בשנת 1998. מאז, השימוש ב-VCAs לשחזור פגמים הרסניים ברקמות הופעל בהצלחה בספקטרום רחב של חולים. נכון להיום, העולם סופר 76 מקבלי 112 גפיים עליונות וכן 31 פנים 1-3. בנוסף, בוצעו מספר סוגים נוספים של VCAs כגון דופן הבטן 4, גרון 5, קנה הנשימה 6, מפרקים כלי דם 7 ואפילו פין 8. יתר על כן, לאחרונה דווח על לידת חי של תינוק לאחר השתלת רחם 9. ניסיון עולמי הולך וגדל זה מעיד על האופן שבו השתלה משחזרת הפכה לאופציה טיפולית תקפה עבור חולים הסובלים מפגמים תפקודיים משמעותיים ברקמות שאינם ניתנים לתיקון לניתוחים וטיפולים משחזרים ומשקמים קונבנציונליים. 
בעוד שהרעיון של החלפת "דומה בכמו" עורר התלהבות קלינית, הספקנות הראשונית עדיין שוררת לגבי תופעות הלוואי של דיכוי חיסוני קונבנציונלי במינון גבוה הנדרש לשמירה על השתלות ותפקודן 10,11. עם זאת, כפי שהוכח על ידי עבודתם המכוננת של לי ועמיתיו, השתלים המרוכבים הללו נוטים פחות לדחות מאשר מרכיביו הבודדים, ויתר על כן, חלק ממרכיבי הרקמה כמו תא העצם הוסקולרי הזינו אופטימיות מכיוון שהם עשויים להפעיל השפעות אימונולוגיות ייחודיות על מאזן הקבלה והדחייה החיסונית 12. 
הקבוצה שלנו הייתה חלוצה במספר מודלים מיקרו-כירורגיים של בעלי חיים להשתלת איברים מוצקים, כמו גם השתלה מרוכבת בכלי דם 13-19. כאן אנו מתארים הליך כירורגי חדשני המשתמש בטכניקת שרוול ללא תפר לביצוע אנסטומוזה סופר מיקרו-וסקולרית במודל השתלת גפיים אחוריות של עכבר אורתוטופי. מודל השתלה זה מספק כלי שימושי לחקירת מנגנוני קבלה ודחייה של מערכת החיסון, כמו גם את תפקידם של רכיבי רקמה בודדים, כגון תא מח העצם בכלי הדם, לקראת אינדוקציה של סובלנות בסביבה הרב-תכליתית מבחינה אימונולוגית של מיני העכברים. בנוסף, המיקום האורתוטופי של הגפה פותח את האפשרויות להתחדשות עצבית ולמחקרי תוצאות תפקודיות, שהם חשובים ביותר להגדרת VCA.

<table><tbody><tr><td>תפר, 6-0 ניילון</td><td>MWI</td><td>31849</td><td></td></tr><tr><td>תפר, 6-0 תפר פוליסורב</td><td>MWI</td><td>72667</td><td></td></tr><tr><td>, 10-0 ניילון</td><td>Aero Surgical</td><td>TK-107038</td><td></td></tr><tr><td>צינורות פולימיד, גודל 25</td><td>Vention Medical</td><td>141-0023</td><td></td></tr><tr><td>צינורות פולימיד, גודל 27</td><td>Vention Medical</td><td>141-0015</td><td></td></tr><tr><td>מהדקים מיקרו-וסקולריים (יחיד)</td><td>Synovis</td><td>00396</td><td></td></tr><tr><td>מהדקים מיקרו-וסקולריים (כפולים)</td><td>Synovis</td><td>00414</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מספריים</td><td>Synovis</td><td>SAS-18</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מלקחיים</td><td>Synovis</td><td>FRS-15 RM-8</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מרחיבים</td><td>Synovis</td><td>FRS-15 RM-8d.1</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מחט</td><td>Synovis</td><td>C-14</td><td></td></tr><tr><td>מוליך מיקרו-מהדק</td><td>Synovis</td><td>CAF-4</td><td></td></tr><tr><td>מחט מיקרו-שטיפה</td><td>המילטון</td><td></td><td>10 מ"מ, 30&deg;, 33G</td></tr><tr><td>תמיסת צלצולים חלב</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>NC9968051</td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td></td><td></td><td>מספר DEA נדרש; מתקבל מבית מרקחת בית חולים.</td></tr><tr><td>אנרופלוקסצין; Baytril</td><td>Bayer Health Care</td><td>186599</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td></td><td></td><td>מתקבל מבית מרקחת בית חולים</td></tr></tbody></table>

orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

מערכות מודלים של בעלי חיים, ובמיוחד מודלים של עכברים, התפתחו לכלים מדעיים רבי עוצמה ורב-תכליתיים החיוניים למחקר בסיסי ותרגומי בתחום רפואת ההשתלות. מגוון עצום של ריאגנטים זמין אך ורק בסביבה זו, כולל נוגדנים חד-שבטיים ופוליקלונליים ליישומים אבחנתיים והתערבותיים כאחד. בנוסף, מספר עצום של זנים גנוטיפיים, מולדים, טרנסגניים ונוק-אאוט מאפשרים חקירה מפורטת של התרומות האישיות של רכיבים הומורליים ותאים ליחסי הגומלין המורכבים של תגובה חיסונית והופכים את העכבר לסטנדרט הזהב למחקר אימונולוגי. 
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) מתאר תחום חדש של השתלה באמצעות השתלות אלוגרפט כדי להחליף "דומה בכמו" בחולים הסובלים מאובדן רקמות טראומטי או מולד. פרוטוקול מתודולוגי כירורגי זה מראה את השימוש בטכניקת שרוול ללא תפר לאנסטומוזה סופר-מיקרו-וסקולרית במודל השתלת גפיים אחוריות של עכבר אורתוטופי. המודל מאפשר באופן ספציפי השוואה בין פרדיגמות מבוססות בהשתלת איברים מוצקים עם צורה חדשה של השתלות המורכבת ממרכיבי רקמה שונים ושונים. באופן ייחודי, מודל זה מאפשר השתלה של תא מח עצם ונישה ברי קיימא שיש להם פוטנציאל להשפיע לטובה על איזון הקבלה והדחייה של מערכת החיסון. טכניקה זו מספקת כלי לחקירת זיהוי אלואנטיגן ודחייה וקבלה של אלוגרפט, כמו גם מאפשרת להמשיך במחקרי התחדשות עצבים תפקודיים כדי לקדם עוד יותר את תחום ההשתלה החדשני הזה.

Performing אלוגרפט מרוכבים vascularized במודל של עכברים באמצעות טכניקה השרוול הלא תפר מאפשר להשיג הישרדות השתל ובעלי חיים טווח מצוין וארוך כפי שמוצג באיור 1. יתר על כן, הוא מייצג שיטה אמינה לקבל תוצאות לשחזור של דחייה של השתל הדרגתית מרוכבים vascularized אלוגרפט כפי שתועד על ידי מהתמונות המוצגות באיור 2. היסטולוגיה H &amp; E של רקמות המתקבל חיות שעברו דחייה נוספת מדגישה את הדינמיקה לשחזור של דחייה ...

מודל הרומן הזה להשתלה הגפיים האחוריות orthotopic בתוך העכבר, החלת טכניקה השרוול הלא תפר עבור השקה סופר-כלי הדם, מספק כלי רב עוצמה עבור מחקר אימונולוגי מכניסטית in vivo הקשורים אלוגרפט מרוכבים vascularized (VCA).

Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

המטרה הכוללת של סרטון הדרכה זה היא להציג מודל עכברי של השתלה אורתוטופית של גפה אחורית תוך שימוש בטכניקת cuff ללא תפרים עבור אנסטומוזיס סופר-מיקרו-וסקולרית. מודלים של בעלי חיים הם בעלי חשיבות עליונה להבנה ולטיפול במחלות אנושיות, וסללו את הדרך להפיכת ההשתלה הרקונוסטרוקטיבית למציאות קלינית במהלך שני העשורים האחרונים. מודל ספציפי זה יכול לסייע במתן מענה לשאלות מפתח הקשורות לפתופיזיולוגיה של תגובה אלו-אימונית הספציפית לשטבלים מורכבים מועסקים (vascularized composite allografts).היתרון המרכזי של הטכניקה הוא ששיטת השרוול ללא תפרים מפחיתה משמעותית את המורכבות ומעלה את שיעור ההצלחה של הליך סופר-מיקרו-וסקולרי זה. לאחר אישור רמת הסדציה המתאימה באמצעות צביטה בבהונות, גלחו את הגפה האחורית ואת המפשעה של חיית התורם. לאחר מכן, חטאו את העור עם 10% povidone iodine והניחו את העכבר תחת מיקרוסקופ דיסקציה.השתמשו במספריים כדי להתחיל את קצירת הגפה התורמת באמצעות חתך בעור במפשעה, פרוקסימלית לאזור אמצע הירך. חברו את החתך באופן היקפי כדי להפריד את הגפה האחורית משאר הגוף. זהו ובצעו דיסקציה לעורק הפמורלי, לווריד ולעצב.לאחר מכן, השתמשו בפינצטה ובמספרי מיקרוכירורגיה כדי להפריד בין שלושת המבנים. מניעת מיקרו-טראומה לדופן כלי הדם באמצעות טכניקת "no touch" היא חיונית להבטחת הצלחתו של ההליך. לאחר נתיקתו של הגבעול הווסקולרי, השתמשו במספרי המיקרוכירורגיה כדי לחתוך את כלי הדם בגובה הרצועה המפשעת (inguinal ligament).המשיכו בפירוק של קבוצות השרירים הבטניות והגבניות הבודדות בערך במרכז הירך כדי להפריד את הש Transplant מהחיה התורמת. לאחר מכן, בצעו חיתוך לרוחב של ה-femur במרכז מוט הירך. באמצעות מזרק המצויד במחט בכילייב 33, שטפו את הגפה שהוסרה עם 2 ml של סלין בהפרין בטמפרטורה של 4 °C.לאחר מכן, מקמי טבעות פוליאימיד (polyimide cuffs) בודדות על הווריד והעורק הפמורליים. את השתל יש לשמור בתוך גזה מכותנה רטובה בצלחת פטרי בטמפרטורה של 4 °C עד להשתלה. הרכבת ה-pesis על טבעות הפוליאימיד היא השלב הקריטי ביותר בפרוצדורה.מכיוון שפגיעה בסימון עלולה להוביל לפגיעה בזרימת הדם ולחץ רקמה לא תקין עלול לחשוף רקמות אנטיביוטיות מסוימות, מה שמעלה את הסבירות להיווצרות תרומבוזה. כדי להסיר את הגפה האחורית של המקבל, הזרק 0.3 mL של סליין חמים תוך-פריטונית. בצע חתך היקפי מסביב לגפה האחורית, זהה ובצע דיסקציה של העורק הפמורלי, הווריד והעצב כפי שהודגם כעת.לאחר שביצעו דיסקציה של הגבעול הוסקולרי (vascular pedicle), יש לסגור בעזרת תסמיך את כלי הדם הפמורליים בגובה הרצועה המפשעת (inguinal ligament). לאחר מכן, יש לחתוך את כלי הדם דיסטלית בגובה העורק האפיגסטרי השטחי (superficial epigastric artery). המשך בפירוק קבוצות השרירים הבטניות והגב בנפרד, בערך במרכז הירך, כדי להפריד את הגפה האחורית המקורית מבעל החיים המקבל.לאחר מכן, בצעו חיתוך רוחבי (transect) של ה-femur במרכז ה-femoral shaft. לאחר מכן, השתמשו במחט ספינלית בכילייב 20 כ-intramedullary rod, ויישרו את עצמות ה-femur של הרסיפיאנט ושל השתל במיקום המקורי של הגפה האחורית. חברו את עצמות ה-femur של התורם ושל הרסיפיאנט.השתמש בחומר תפירה ספיג כדי לקרב את קבוצות השרירים הגבאיות והבטניות. ביצוע יישור זה בצורה מדויקת ומהירה מונע איבוד דם ממושך מחלל העצם. כדי לחבר את כלי הדם הפמורליים, משוך את הצד המקבל של כלי הדם מעל שרוולי הפוליאימיד.השתמשו בתפר ניילון 10-0 כדי לקבע את כלי הדם המקבל אל השרוול באמצעות קשירה היקפית. כאשר כלי הדם ייוצב, שחררו את התפסנים. ודאו ויזואלית שהשרוולים אינם מסובבים באופן שגוי.יש לוודא ויזואלית שהושגה הומיאוסטזיס ולהשתמש בקוויצירה חשמלית (electrocautery) כדי לעצור כל מקור של דימום. לאחר מכן, סגרו את העור באמצעות תפרי ניילון שאינם נספגים. עקבו אחר בעל החיים עד להחלמתו המלאה.ביצוע השתלה של רקב מורכב מכיל כלי דם (vascularized composite allotransplantation) במודל עכברי באמצעות טכניקת שרוול ללא תפרים זו, מקלה על השגת הישרדות מצוינת וארוכת טווח של השתל ושל בעל החיים. יתרה מכך, טכניקה זו מהווה שיטה מהימנה להשגת תוצאות הניתנות לשחזור של דחייה הדרגתית של השתל הזר (allograft) ומודל של השתלה של רקב מורכב מכיל כלי דם כפי שמתועד בתמונות. ואכן, ניתוח היסטולוגי של רקמות שהושגו מבעלי חיים שעברו תהליך דחייה מדגיש עוד יותר את הדינמיקה הניתנת לשחזור של דחיית השתל הזר במודל עכברי זה.במידה ושולטים בטכניקה זו, ניתן להשלימה בתוך 90 עד 120 דקות, אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור להקדיש תשומת לב מרבית לטיפול ברקמה ולהימנע מכל סוג של דימום. לאחר פיתוחה, טכניקה זו עשויה לסלול את הדרך עבור חוקרים בתחום ההשתלות השחזוריות.לחקירת שאלות מכניסטיות בסיסיות הקשורות לאלו-אימוניות של השתלות מורכבות מvaskularized composite allografts. לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה של ביצוע כל השלבים הקריטיים של השתלת גפה אחורית אורתוטופית בעכבר.

orthotopic-hind-limb-transplantation-in-the-mouse

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הלב heterotopic העכבר מודל השתלת הוכח על ידי חוקרים רבים להיות שיטה חשובה לחקר המנגנונים של דחייה התגובה החיסונית. עם זאת, טכניקות מעורבות עדיין מאתגרת. על ידי שינוי שיטות סטנדרטיות יש לנו הצלחה עם יותר מ 1000 השתלות.

השתלת הלב Heterotopic ב עכברים

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן...

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

אנו מתארים טכניקה שבה קטע של אב העורקים בבטן מעכבר הושתל orthotopically ממש מתחת לעורקי הכליה בנמען אלוגנאית או syngeneic. טכניקה זו יכולה להיות שימושית במחקרים בם השתלה של עורקים גדולים של גודל אחיד נחשבת יתרון.

השתלת אב עורקים בעכברי orthotopic לחקר מחלת כלי דם

טכניקה מודגמת עבור ההליך המיקרו-כירורגי להשתלה הטרוטופית של לבבות בעכברים, כולל שיטות פשוטות לקצירת תורם ואנסטומוזיס של כלי הדם המקבל.

שיטה שונה לHeterotopic מאוס לב Transplantion

כדי לחקור השתלה משולבת של איברים מוצקים וכלי דם, אנו מתארים מודל חדש של השתלת דופן חזה הטרוטופית, בלוטת התימוס ולב בעכברים באמצעות טכניקת שרוול צוואר הרחם ללא תפרים.

Microsurgical דגם חדשני לHeterotopic, כמקשה אחת בחזה קיר, קורנית, ולב השתלה בעכברים

פרוטוקול זה מציג מודל חזק, לשחזור של כלי דם מרוכבים allotransplant (VCA) מכוון למחקר בו זמנית של אימונולוגיה והתאוששות תפקודית. הזמן שהושקע בטכניקה קפדנית בהשתלה אורתוטופית ירך ימין באמצע הירך האחורי עם תפורים ביד וסמיכות עצבית מניב את היכולת ללמוד התאוששות תפקודית.

לוקח את הצעד הבא: מודל השתלת גפיים אחוריות קופטציה עצבית כדי למקסם את ההתאוששות תפקודית בחולדה

מאמר זה מציג פרוטוקול השתלת דש אוסטאומיו-עורית הטרוטופית חלקית בחולדות ותוצאותיו הפוטנציאליות במעקב אמצע הטווח.

מודל השתלת הינדימבה הטרוטופית חלקית בחולדות

בפרוטוקול זה נדון ביישום מודל של השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת (OLT) בעכברים. בנוסף, נדונים גם אדג'ובנטים לניתוח נוסף של פטנטיות אלוגרפט לאחר OLT מוצלח בעכבר, במיוחד באמצעות סריקות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (microCT).

השתלת כבד אורתוטופית מוצלחת בעכברים באמצעות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת אנגיוגרפיה

אנו מציגים מודל עכבר שניתן לשחזור של אלוטרנסלנטציה מורכבת של גפיים אחוריות לצוואר הטרוטופית. פרוטוקול סופר-מיקרוכירורגי זה, הכולל אנסטומוזות כלי דם בקוטר 0.3-0.5 מ"מ, משלב הנחיית חוטי ניילון ושרוול ורידי. הוא מספק פלטפורמה אמינה למחקרים תרגומיים על סבילות, פגיעות איסכמיה-רפווזיה, ומנגנונים אימונולוגיים באלוטרנסרפלנטציה של כלי דם מרוכב.

השתלת גפה אחורית לצוואר הטרוטופית בעכבר: מודל סופר-מיקרוכירורגי של אלוטרנספלינצ'נציה מורכבת וסקולרית

פרוטוקול זה מציג טכניקת אנסטומוזה פשוטה מקצה לצד להשתלת לב צוואר הרחם בעכברים, ומספק מודל חזק וניתן לשחזור ללימוד אימונולוגיה של השתלות.

השתלת לב עכבר הטרוטופית צווארית באמצעות טכניקת אנסטומוזה מקצה לצד לחקר אימונולוגיה של השתלות

למד השתלת רגל אחורית אורתוטופית בעכברים באמצעות טכניקת חפת ללא תפרים לאנסטומוזה מיקרו-וסקולרית. מודל זה מאפשר חקר תגובות חיסון אלוגניות בהשתלות מרכיבות וסקולריות ומשפר את שיעורי ההצלחה של ניתוחים מיקרו-וסקולריים.

Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

גלה סרטונים נוספים