27 במרץ 2016
מאמר זה מתאר שיטה ליצירת פגיעת דחיסת חוט שדרה (SCI) הניתנת לשחזור בעכבר היילוד. המודל מספק פלטפורמה מועילה לחקר מנגנונים של פלסטיות אדפטיבית העומדים בבסיס התאוששות תפקודית ספונטנית.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לבצע פגיעת דחיסת חוט שדרה הניתנת לשחזור בעכבר יילוד. זה מושג על ידי הרדמה עמוקה תחילה של העכבר. לאחר מכן ביצוע כריתת למינקטומיה גבית כדי לחשוף את חוט השדרה.
ולבסוף על ידי ביצוע פציעת הדחיסה. לאחרונה הקמנו מודל עכברי יילודים לפגיעה בחוט השדרה והראינו שעכברים יילודים מפגינים רמה מדהימה של גמישות הסתגלותית. חקר מנגנון זה העומד בבסיס ההחלמה עשוי לספק תובנות חשובות, שיכולות לשמש לטיפול בפגיעה בחוט השדרה.
בסרטון הזה נדגים כיצד לבצע פגיעת דחיסה של חוט השדרה בעכבר בן יום אחד. הליך כירורגי זה, כולל הרדמה, כריתת למינקטומיה ושתי לחיצות אפידורליות מונעות קליפס. הכנה לניתוח.
הניתוח מבוצע תחת מיקרוסקופ סטריאו. הניחו כרית חימום מתחת למיקרוסקופ. חיוני לשמור על חום הגור כדי למנוע מוות פתאומי במהלך הניתוח.
הניחו שמיכה כירורגית או דף גדול של נייר מעבדה רך ונקי מעל כרית החימום. לשיכוך כאבים טרום ניתוחי הכינו מזרק אינסולין, 0.3 מיליליטר 30 מד, מלא בהרדמה מקומית, מרקאין, מדולל ב- PBS סטרילי, לריכוז סופי של 2.5 מיליגרם למיליליטר. לחתך בעור, הסרת שרירים וכריתת למינקטומיה, השתמש בסכין מיקרו, מלקחיים עדינים ומספריים לכריתת אירידקטומיה עדינים.
שימו לב שכאן, אנו משתמשים גם במלקחיים שכופפנו בקצוות ליצירת שיניים. אלה עובדים טוב יותר ממלקחיים עם שיניים הזמינים מסחרית מכיוון שהשיניים צריכות להיות קטנות מאוד. לדחיסת חוט השדרה, השתמש במיניקליפ מפרצת זמני של Yasargil ששונה במיוחד, אותו נתאר בהמשך.
יש צורך גם באורך קטן של צינורות נימי פלסטיק כדי ליצור פקק למניעת סגירה מלאה של הקליפ, ומוליך קליפ להצבת הקליפ. לתפירה השתמש במחזיק מחט ובמספריים קטנים כדי לחתוך את החוט. לטיפול בכאב, יש לדלל את Temgesic ב-PBS סטרילי, ל-0.03 מיליגרם למיליליטר.
הפגיעה בחוט השדרה כוללת דחיסה מונעת קליפס, באמצעות Yasargil Temporary Aneurysm Miniclip. לפני השימוש, יש לשנות את הקליפ באופן מכני, על ידי קיצוץ עובי הלהבים עד 150 מיקרומטר באמצעות אבן השחזה. רגע לפני הניתוח, חתוך קטע קצר של צינורות פלסטיק והנח אותו מעל אחד מלהבי הקליפ.
הצינור משמש כפקק למניעת סגירה מלאה של הקליפ. הרדמה ושיכוך כאבים. לצורך הרדמת גז, אנו משתמשים במכשיר אידוי סופראן המחובר למיכל חמצן.
איזופלורן הוא חומר ההרדמה שמתאדה בחמצן טהור. כדי להפיץ את תערובת האיזופלורן, החמצן לעכבר, עליכם לבנות מסכת אף המותאמת ליילודים. עכברים יילודים הם כל כך קטנים, שניתן להכין את המסכה מקצה המזרק, המשמש ככניסה לצינורות הפלסטיק המחוברים לשקע הוופורייזר.
בצד המסכה, קדחו חור קטן לחיבור צינור פינוי שמסתיים במשאבת ואקום מוסדרת, עם יחידת איסוף, או פשוט במכסה אדים. הכינו תא הרדמה באמצעות צלחת פטרי מפלסטיק בגודל 150 על 25 מיליליטר. בצד אחד, צרו חור גדול מספיק לראש העכבר.
בצד הנגדי, צרו שני חורים קטנים יותר בקוטר צינור הפלסטיק. לבסוף, צרו חור פינוי, קטן יותר מהאחרים, בחלק העליון של המנה. חותכים את קצה הפיפט של 250 מיקרוליטר ומכניסים אותו לחור האחרון הזה.
קצה הפיפט מתפקד כמחבר לצינור הפינוי המחובר למכשיר ואקום המוגדר ללחץ שלילי קל. בעזרת פלסטלינה, מהדקים את המסכה ממש בתוך החור לראש העכבר. בעזרת סרט או פלסטלינה, אבטח את צינורות הפלסטיק לתקרת החדר, וודא שהצינורות ממוקמים היטב בחורים המתאימים.
הנח את החדר על שמיכת הניתוח מתחת למיקרוסקופ. המערכת כולה מיוצגת בסכימה זו. תא עצירה תלת כיווני ממוקם על יציאת הוופורייזר.
כאן, הנתיב לתא השינה פנוי, בעוד שהנתיב למסכה חסום וניתן למקם את העכבר בתא השינה כדי להתחיל את ההרגעה. סיבוב תא העצירה התלת-כיווני ימינה מאפשר לגז לזרום למסכה וחוסם את הדרך לתא השינה. בתצורה זו ניתן להעביר את העכבר למסכה.
דליפת גז מוסרת על ידי ואקום מתא הצפה. בחר גור עכבר ששתה לאחרונה חלב, כפי שמעיד הצבע הלבן הנראה דרך העור. הכניסו את הגור לתא השינה והכניסו איזופלורן מאודה ב-4% כדי להשיג הרגעה מהירה.
העבירו את הגור למסכה. מקם בזהירות את חוטם העכבר היטב לתוך המסכה כדי להבטיח חשיפה מספקת לגז ההרדמה. סובב את תא העצירה התלת-כיווני, כדי להסיט את הגז לכיוון המסכה.
יש להזריק תת עורית, 50 מיקרוליטר מרקאין במינון של 2.5 מיליגרם למיליליטר, במקום הניתוח הרצוי. היזהרו לא להזריק עמוק מדי, מכיוון שכלי דם עלולים להיפגע בקלות והחדרת המרקאין לכלי היא קטלנית. נגב את עודפי המרקאין בעזרת קומפרס סטרילי קטן.
כריתת למינקטומיה גבית. הפחיתו את ריכוז האיזופלורן לאחוז אחד עד שני אחוזים. לאחר מספר דקות, חודרים את העור בעזרת סכין מיקרו ויוצרים פתח העברה של שמונה עד תשעה מילימטר על ידי משיכה עדינה של העור בכיוון הזנב הרוסטרלי.
פתח העברה נוח בהרבה ומעניק גישה רוחבית טובה יותר לביצוע כריתת הלמינקטומיה. החזר את שולי חתך העור מהרקמה הבסיסית, על ידי החדרת חתיכות ספונגיסטטין, תת עוריות רוסטרליות וזנב לחתך. חותכים את השרירים הקדם-חולייתיים במספריים דקים כדי לחשוף את עמוד השדרה.
שימו לב שאצל היילוד, תהליך עמוד השדרה אינו מפותח במלואו. מזהים את קו האמצע וחותכים את הלמינה לרוחב בעזרת המספריים הדקים. שימו לב לא לחתוך עמוק מדי, מכיוון שהדבר עלול לפגוע בדורה ואפילו בחוט השדרה.
הניחו בזהירות להב אחד של מלקחיים דקים בין הלמינה לדורה. תפסו את הלמינה על ידי סגירת המלקחיים והרימו אותה בזהירות עד שהיא מתנתקת, והשאירו את הדורה בטקט. חזור על השלב, פעמיים עד שלוש כדי להשיג כריתת למינקטומיה של מקטע אחד עד שניים.
שלוט בדימום באמצעות חתיכות קטנות של ספונגיסטטין. באמצעות המלקחיים הדקים כמלקחיים, הסר חלקים ממפרקי הפן באופן דו-צדדי כדי להשיג מספיק מקום כדי למקם את מיניקליפ המפרצת השונה בתוך תעלת החוליות. שלב זה גורם לעתים קרובות לדימום שניתן לשלוט בו באמצעות חתיכות קטנות של ספונגיסטטין.
כדי לשפר את הנראות לפעמים יש יתרון לשטוף עם PBS סטרילי חם, 37 מעלות צלזיוס. יצירת פגיעת דחיסת חוט השדרה. פתח את הקליפ והנח את הלהבים משני צידי חוט השדרה במרווחים שבין מפרקי הפאצט לחוט.
ודא שהלהבים מוכנסים עמוק מספיק כדי להקיף את החלק הגחוני של חוט השדרה. סגרו במהירות את התפס, תוך החזקת האפליקטור במקומו, כדי למנוע החלקה לאחור של התפס. לאחר 15 שניות, שחררו את הסרטון במהירות.
נקה את הפצע באמצעות ספונגיסטטין. כדי להשיג דחיסה סימטרית, הפוך את הלהבים ובצע דחיסה שנייה למשך 15 שניות בכיוון ההפוך. תפירה. יש להסיר את חתיכות הספונגיסטטין שהונחו מתחת לעור בתחילת הניתוח ולסגור את העור עם תפרים 6.0.
הזרקו 0.05 מיליליטר, Temgesic, ב-0.03 מיליגרם למיליליטר. תת עורי עם מזרק אינסולין בגודל 30 והניחו את הגור בסביבה מבוקרת טמפרטורה בטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס למשך מספר שעות. כדי להפחית את ההתנהגות האימהית התוקפנית כלפי הגור המנותח במהלך הלילה הראשון, לאחר הניתוח, הכינו תמיסה של דיאזפאם, מדוללת ב-PBS נקי, ל-0.1 מיליגרם למיליליטר להזרקה תוך צפקית בשמונה גרם לקילוגרם. תוצאות.
כפי שמוצג בגרף זה, שש שעות לאחר דחיסת חוט השדרה, ברמות בית החזה הנמוכות יותר, הגפיים האחוריות של עכברים פצועים משותקות, בעוד שהגפיים הקדמיות לא. במקרה של חיות ביקורת מזויפות, שעברו רק כריתת למינקטומיה, גם הגפיים האחוריות וגם הגפיים הקדמיות ניידות מאוד. החלק של חוט השדרה מראה שאריות דם למראה הפציעה.
בנוסף, הרקמה שקופה, מה שמרמז על אובדן רקמות, מה שמוביל לרוב להיווצרות חלל מספר ימים לאחר מכן. מסקנה. לאחר סרטון זה אתה אמור להבין היטב כיצד ליצור פגיעת דחיסת חוט השדרה בעכבר יילוד. היתרון בשימוש בעכברים יילודים הוא שאנו יכולים להשתמש בשיטות ספציפיות כדי לטפל בגמישות אדפטיבית, שלא ניתן להשתמש בה בעכברים בוגרים.
בנוסף, המודל מספק פלטפורמה לבחינת גישות טיפוליות, כגון השתלת תאי גזע.
מאמר זה מתאר שיטה ליצירת פגיעת דחיסה הדירה וניתנת לשחזור של חוט השדרה (SCI) בעכברים רכים. מודל זה יתרוני לחקר המכניזמים של פלסטיות אדפטיבית העומדים בבסיס התאוששות תפקודית ספונטנית.
מודל דחיסת חוט השדרה בעכברים רכישים זה מאפשר חקירה מכניסטית של פלסטיות אדפטיבית בהחלמה מפגיעות בשלבי חיים מוקדמים, ומספק מערכת רלוונטית למחלה לצמצום סיכונים של היפותזות טיפוליות. על ידי לכידת הדינמיקה של התאוששות תפקודית ספונטנית, המודל תומך בתיקוף מטרות ובסריקה פנוטיפית בתוכניות פרה-קליניות במדעי העצבים. הרלוונטיות שלו לפגיעות בחוט השדרה בילדים וההמשכיות התרגומית הפוטנציאלית לאינדיקציות במבוגרים משפרות את קבלת ההחלטות ברמת הפורטפוליו בגילוי תרופות נוירולוגיות.
המודל משתלב ברצף הגילוי, החל מתיקוף המטרה ועד לבדיקת יעילות פרה-קלינית, ובמיוחד עבור גישות של הגנה עצבית (neuroprotective) ושיקום עצבי (neurorestorative).