RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/53603-v
Elza van Deel1,2, Yanto Ridwan1, J. Nicole van Vliet1, Sasha Belenkov3, Jeroen Essers1,4,5
1Department of Genetics,Erasmus MC, Rotterdam, 2Department of Experimental Cardiology,Erasmus MC, Rotterdam, 3PerkinElmer, Inc., 4Department of Vascular Surgery,Erasmus MC, Rotterdam, 5Department of Radiation Oncology,Erasmus MC, Rotterdam
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
שיטה זו מתארת את השימוש בטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת קוונטית (MicroCT) כדי להעריך את המורפולוגיה הלבבית, התפקוד, הזלוף, חילוף החומרים והכדאיות עם חומר ניגוד יוד בעכברים עם איסכמיה של שריר הלב המושרה בניסוי. ניתן ליישם את הטכניקה להדמיה אורכית לא הרסנית בתפוקה גבוהה in vivo של מודלים שונים של בעלי חיים של מחלות לב אנושיות.
המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים את השימוש בטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת במהירות גבוהה בהדמיה של שער נשימה לבבי פנימי כדי להעריך תפקודי שריר הלב הגלובליים והאזוריים במודל איסכמיה לבבית של עכבר. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בפתופיזיולוגיה של הלב כגון מהן ההשפעות על הפתולוגיה או של טיפולי malfa על תפקוד שריר הלב הגלובלי והאזורי? היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מספקת הערכה מהירה, אורכית ולא פולשנית של הפרמטרים הלבביים החשובים ביותר המבוצעת בקלות על ידי אנשים שאינם מומחים.
ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על הטיפול במחלות לב וכלי דם. כפי שיכול לשמש ככלי פרה-קליני להשגת תובנה מתקדמת לגבי התפתחות מחלות לב. מי שידגים את ההליך יהיו ניקול ואן וליט, טכנאית, אלזה ואן דיל, פוסט-דוקטורנטית, וינטו רידוואן, טכנאי נוסף מהמעבדה שלנו.
התחל בביצוע חתך קטן בעור של עכבר בן 12 שבועות בין הצלעות השנייה לשלישית. לאחר מכן בעזרת ווים קטנים, משוך הצידה את שרירי החזה כדי לחשוף את השרירים הבין-צלעיים. לאחר מכן השתמש במספריים קפיציים מעוקלים של שני מילימטר כדי לחתוך בזהירות את השריר הבין-צלעי השלישי מבלי לפגוע בריאות.
לאחר מכן בעזרת מלקחיים, קרעו את קרום הלב והשתמשו בחתיכת גזה רטובה כדי לדחוף הצידה את הריאות. מקם מחדש את הווים בחלק הפנימי של בית החזה כך שחלק גדול מהדופן החופשית של החדר השמאלי וחלק מהאטריום השמאלי נראים לעין. לאחר מכן, באמצעות הפרוזדור כדי לאתר את העורק הכלילי השמאלי, הכניסו תפר כירורגי של שבעה אפס משי מתחת לעורק הכלילי השמאלי וקשרו את התפר שני מילימטרים מתחת לקצה האטריום השמאלי כדי לתקן את גודל האוטם.
לאחר אישור חזותי של הצלחת השראת האוטם על ידי חיוורון הדופן החופשית של החדר השמאלי, נפחו בזהירות את הריאה וסגרו היטב את החזה בתפר כירורגי משי שש אפס. נקו את הפצע במי מלח והשתמשו בתפרי משי נוספים כדי לסגור את העור ולאחר מכן למרוח תרסיס לפצעים כדי לעורר ריפוי ולמנוע זיהום. לאחר מכן הנח את העכבר בכלוב על כרית חימום עד להתאוששות מלאה.
שלוש עד ארבע שעות לאחר הניתוח, הפעל את סורק המיקרו-CT, פתח את תוכנת בקרת המיקרו-CT וחמם את צינור הרנטגן. לאחר מכן טפל בפקק בקבוקון הגומי של מיכל חומר ניגוד יוד עם 70% אלכוהול והשתמש במזרק שטח מת נמוך כדי למשוך חמישה עד 10 מיקרוליטר של החומר לכל גרם ממשקל גופו של בעל החיים. לאחר טיהור בועות האוויר, ספוג את זנב העכבר המורדם ב-70% אלכוהול וחום להרחיב את ורידי הזנב.
הזרקו את חומר הניגוד לווריד זנב לרוחב. כאשר כפתור מצב החי מופיע בתוכנת הבקרה, צינור הרנטגן מוכן. הכנס את כיסוי הקדח הקטן ואת מיטת החיות הקטנה.
לחץ על לחצן מסד הנתונים החדש בחלון מסד הנתונים והזן שם עבור מסד הנתונים החדש. כאשר תיבת הדו-שיח מופיעה, לחץ על כפתור העיון ונווט לכונן בו יישמר מסד הנתונים. לאחר מכן לחץ על אישור וצפה במסד הנתונים החדש בחלון מסד הנתונים.
כדי להגדיר את תנאי הסריקה, בחר את הפרמטרים המתאימים. כעת הנח את העכבר המוזרק והמורדם על מיטת החיות בסורק והחלק את דלת המכשיר ימינה כדי להפעיל את מנעול הבטיחות. לחץ על כפתור מצב חי כדי להציג את הנושא בזמן אמת ולצפות בחלון לכידת X ובבעל החיים.
לחיצה על ה-stagלחצני בקרת ציר Z קדימה ואחורה מזיזים את מיטת החיות עד שחזה העכבר נמצא בשדה הראייה. לאחר מכן השתמשו בחצים שמאלה וימינה כדי למקם את החיה בתוך התיבה התוחמת הכחולה. בחר 90 מהרשימה הנפתחת של בקרת הסיבוב בחלון תוכנת הבקרה ולחץ על כפתור ההגדרה כדי לסובב את השער ולוודא שהחיה נשארת בתוך התיבה התוחמת הכחולה של חלון לכידת X.
בחלון לכידת X, לחץ לחיצה ימנית על העכבר כדי לשנות את גודל אזור הלב-נשימה המבוקש. גרירת הקצוות כך שעקבות הלב-נשימה נראים בבירור בתצוגת הסנכרון. לחץ על מיקום הבית ושנה את גודל אזור העניין עבור לב ונשימה.
ודא שאזור העניין מכסה את הסרעפת ואת החלק האפיקלי של הלב בכל עמדות הגשר. לאחר מכן סובב את השער ב-90 מעלות כדי לוודא שעקבות הלב-נשימה עדיין נראים בבירור. כאשר החיה נמצאת במקומה, לחץ על כפתור סריקת ה-CT כדי לאתחל את הרכישה.
הודעת אישור סריקת ה-CT תופיע. לחץ על כן. מחוון האנרגיה האדום של רנטגן יפעיל את המכשיר והסריקה תתחיל.
בסיום הסריקה התבונן בתצוגות הטרנס-ציריות, העטרה והסגיטליות של השחזורים בתוכנת הצופה הדו-ממדית. לבסוף, הוציאו את החיה מהסורק ועקבו אחריה עד להתאוששות מלאה. כאן מוצגים חתכים מייצגים של מאגר דם קצר-צירי קצר-דיאסטולי וקצה סיסטולי של לב עכבר עם אוטם שריר הלב.
בתמונות אלה חתכים קצרים-ציריים, קצה דיאסטולי וקצה סיסטולי של לב עכבר ללא אוטם שריר הלב מציגים תיחום מצוין של חלל החדר השמאלי עם מעט רעשי רקע. שימו לב כיצד אזורי נדירות הניגודיות, המתאימים לאוטם שריר הלב, סומנו היטב בתמונות הציר הקצר של לב העכבר הנתון לקשירת העורקים הכליליים השמאליים הקדמיים היורדים. אבל לא בחיה שנותחה במזויף.
על פי מודל איגוד הלב האמריקאי בן 17 המקטעים, ניתן לחלק את החדר השמאלי לחלקים בסיסיים, אמצע חלל ואפיקלי קצר-צירי. בעלילה הקוטבית המייצגת וההיקפית הללו נראה שפע שונה בבירור בקטעים הקדמיים האמצעיים, האמצעיים-אינפרו-לטרליים, האמצעיים הקדמיים, הקדמיים האפיקליים והקודקודיים בעכבר אוטם שריר הלב בהשוואה לחיה המופעלת בדמה. לאחר השליטה, ניתן להשלים את השראת אוטם שריר הלב תוך 45 דקות בעוד שהדמיית המיקרו-CT שלאחר מכן דורשת ארבע שעות.
בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור שביצועי תפקוד הלב תלויים בסוג ומידת ההרדמה. לפיכך, למדידות מדויקות, יש לשמור על קצב הלב פיזיולוגי ככל האפשר במהלך רכישת התמונה. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום הפרמקולוגיה לחקור אסטרטגיות התערבות בעכברים ולנתח את ההשפעה של אסטרטגיות טיפול ברמה על התקדמות המחלה.
לאחר צפייה בסרטון זה אתה אמור להבין היטב את ניתוח אוטם שריר הלב ולדעת כיצד להשתמש במערכת המיקרו-CT המהירה בשילוב עם חומר הניגוד של בריכת הדם המבוסס על יוד. אל תשכח שעבודה עם איזופלורן עלולה להיות מסוכנת וכי תמיד יש לנקוט באמצעי זהירות כגון אוורור טוב בעת ביצוע הליך זה.
Related Videos
05:50
Related Videos
12.9K Views
10:16
Related Videos
33K Views
10:53
Related Videos
5.7K Views
06:53
Related Videos
9K Views
06:46
Related Videos
9.8K Views
11:13
Related Videos
6.8K Views
12:54
Related Videos
3.5K Views
12:15
Related Videos
2.7K Views
11:09
Related Videos
4.1K Views
07:33
Related Videos
701 Views