Name: הערכת Transcutaneous של תפקוד כלייתי במכרסמי Conscious (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: למד שיטה מינימלית פולשנית להערכת תפקוד כלייתי במכרסמים באמצעות מדידה טרנסקוטנית של שיעור סינון גלומרולרי. הטכניקה מאפשרת ניתוח מיידי ללא דגימות דם ומייעלת מחקר בנפרולוגיה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ZHP נתמך על ידי פרויקט מארי-קירי: NephroTools.

ניסויי צורך לפתח את הפרוטוקול בוצעו על פי תקנות לאומיות ואושרו על ידי ועדת המדע האתית המקומית (Regierungspräsidium קרלסרוהה). 1. הכנת פתרון הזרקת FITC-sinistrin <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממסי FITC-sinistrin מלוח פיסיולוגי להכין פתרון מניות. המינון המומלץ בעכברים הוא משקל הגוף 7.5 מ&quot;ג / 100 גרם (BW), ואילו אצל חולדות 5 מ&quot;ג / 100 גרם BW FITC-sinistrin עדיפה. עבור עכברים, להכין פתרון של פתרון המניות FITC-sinistrin ב 15 מ&quot;ג / מ&quot;ל, ואילו עבור חולדות להכין בריכוז של 40 מ&quot;ג / מ&quot;ל. הערה: פתרון המניות FITC-sinistrin ניתן להכין מראש ולאחסן ב -20 ° C מוגן מפני אור. </li></ol> 2. הכנת בעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאקלם בעלי חיים לפחות שבוע לפני כניסתה שלהם בכל ניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החיה באמצעות isoflurane 5% לאחר 5 L / min O 2 </sub&gt; לזרום למשך 2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא החיה הוא מורדם כראוי על ידי התבוננות בנשימה שלה, אשר הופך איטי יותר ויותר, ולאמת חוסר תגובה עם חוסר תגובה הבוהן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שהחיה היא ישנה, ​​להפחית את ההרדמה isoflurane 2.5% ב 2 ליטר / דקה O 2 קצב משלוח ולקחת את BW. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הפרווה מן האגף של החלק האחורי של החיה באמצעות מכונת גילוח חשמלית. לגלח שטח מעט גדול יותר באזור זה יהיה תפוס על ידי התיקון דבק דו-צדדי, אשר יש ממדים של 3 ס&quot;מ x 6 ס&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהמשך להחיל קרם להסרת שיער לתקופה קצרה (2-3 דקות) כדי להסיר את הפרווה הנותרת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף את האזור ביסודיות עד השמנת הוסרה לחלוטין, כמו השמנת עצמו עשויה להיות פלורסנט. הערה: הימנע מגרד את העור של החיה כפי שהוא יכול לייצר / בצקת גירוי. אם האזור המקולף מראה פיגמנטציה על העור, לגלח אזור גדול עד נקודה הלא פיגמנט עבורחלק אופטי של המכשיר נמצא. מומלץ לגלח 24 שעות מראש על מנת למזער את חשיפת הרדמה. </li></ol> 3. התקן כנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את המכשיר האופטי למדידת תפקוד כליות על צד אחד של התיקון הדבק דו-צדדי, מיצוב החלק האופטי מעל החלון השקוף (איור 1) לעזוב את החלק השני עם רדיד מגן. הערה: כשעובדים עם מכרסמים קטנים, להקטין את הגודל של התיקון כפי שמוצג באיור 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף חתיכת תיקון דבק דו-צדדי של גודל התאמת לסוללה כפי שמוצג באיור 3. </li></ol> קיבוע 4. של ההתקן על בעלי החיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשבתי את הנפח המתאים של הזרקה מבוססת על משקל הגוף החי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החיה עם isoflurane כפי שצוין בעבר על סעיפים 2.1-2.3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים חתיכה של o תחבושת גזה צינורי אלסטיf על 1 ס&quot;מ יותר מאשר רוחב של תיקון דבק דו צדדית כדי לשמש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך את תחבושת גזה אלסטי על הראש של החיה ומניחים על גבו, עוזב את האזור מגולח חשוף. הערה: לחילופין, לתקן את המכשיר באמצעות סרט דביק, אלא להיות מודע לחץ מיותר על המכשיר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את הסוללה למכשיר באמצעות חיבור מחבר לסוללה לנמל המתאים בהתקן. לאחר מכן מורידים את נייר הכסף מגן מן היצירה של תיקון ו הר הסוללה על פני השטח העליונים של המכשיר (איור 4 א). ודא כי הסוללה מחוברת כמו שצריך על ידי סימון כי המכשיר מתחיל להבהב. הערה: חולדות, הסוללה יכולה להיות גם מחוברת ישירות על התיקון הדבק, לצד ההתקן (האיור 4B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כיסוי המגן מן התיקון עם המכשיר פועל ומניח אותו על האזור המגולח על גב החיה מחזיק אותוs קצוות עד שהוא קבוע כראוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה את המכשיר עם תחבושת גזת צינורי אלסטי הדבקה אותה אל פני השטח הדבקים של התיקון (איור 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כראוי למתוח את התחבושת צינורי על הבטן של החיה, על מנת להבטיח כי הגפיים יכולים לנוע בחופשיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור קיבעון הגנה טוב יותר של המכשיר, להחיל פיסת נייר דבק בעקבות הצורה של המכשיר ומכסה את החוטים של הסוללה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד הרקע 1 עד 3 דקות, ללא הפעלת לחץ על התקן </li></ol> מינהל 5. FITC-sinistrin ונוהל מדידה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במידת הצורך, לחמם את הזנב של החיה באמצעות מים חמים לפני הזריקה או צלחת חימום בטמפרטורה מבוקרת לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק דרך זנב וריד הנפח המתאים של פתרון מניות FITC-sinistrin. היקף ההזרקה תלוי BW חיה ולכן יש לחשב לכל וחסרונות פרטidering מינון הריכוז הרצוי של פתרון מניות, כאמור בסעיף 1.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא כי כל פתרון FITC-sinistrin ניתנת בהזרקה לווריד ולא תת-עורית. הערה: לחילופין, FITC-sinistrin יכול להינתן באמצעות קטטר תוך ורידי מראש מושתל יצאו לעבר העורף במכרסמים או באמצעות זריקה מסלולית רטרו בעכברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות, ולהחזיר את בעל החיים לכלוב בבית שלו הימנעות תנועות חזקות וכל הלחץ על המכשיר, כפי שהוא היה צריך להכניס חפצים התנועה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את הכלוב הביתה במקום רגוע להימנע שהחיה מופרת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את המדידה במהלך לפחות שעה 1 אם עובד עם עכברים 2 hr בעת שימוש חולדות. באותה תקופה, ההתקן האופטי ימדוד דרך העור את הקרינה הנפלטת FITC-sinistrin. הערה: בתקופת הקלטת החיה חייבת להתארח לבד. יתר על כן אספקת מים, כמו גם בולטמבנים כגון מכסי החוט, יש להסיר כדי למנוע ניזק של חפצי מכשיר ותנועה האלקטרוניים בשל השפעות בחפצים. </li></ol> הסרת התקן 6. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר תקופת ההקלטה נגמרה, הסר את ההתקן ללא הרדמה; עם זאת, אם יש צורך בכך, להרדים את החיה לזמן קצר תחת isoflurane 5% לאחר 5 L / min שיעור משלוח O 2 במהלך 2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות, לשלוף את הסרט הדביק תחילה, ואחר כך את התחבושת צינורי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לנתק את התיקון דבק דו-צדדי מן העור ולהחזיר את בעל החיים לכלוב בבית הרגיל שלו. </li></ol> 7. קראו מתוך נתונים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתק את הסוללה מהמכשיר להסיר את התיקון דבק. הערה: הנתונים מאוחסנים על המכשיר עד מדידה חדשה מתחילה. כאשר הסוללה מחוברת הנתונים המאוחסנים הם מוחלפים עם ההקלטות החדשות. לכן, לא מחדש את הסוללה לפני הורדת נתונים מןהֶתקֵן. יש תקופת חסד 10 שניות מיועד חיבורים מחדש בשוגג של הסוללה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את המכשיר למחשב באמצעות כבל USB מיקרו ולהוריד את הנתונים באמצעות התוכנה המצורפת. קובץ הפלט הוא קובץ csv שניתן לפתוח ולשנות באמצעות תוכנת גיליונות אלקטרוניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את קובץ נתונים עם התוכנה הספציפית עבור המכשיר האופטי וליצור עקומת קינטיקה חיסול באמצעות פרוטוקולי תוכנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח העקום ידי ביצוע ההוראות שסופקו עם המכשיר האופטי. זמן קצר, לצורך הערכת הנתונים, להגדיר את אות הרקע אשר נמדדה לפני ממשל FITC-sinistrin ולסמן את תחילת שלב הפרשת המעריכים של הסמן, אשר מתרחש בדרך כלל 15 דקות ו -45 דקות לאחר הזרקת בולוס, עכברים וחולדות בהתאמה . הערה: התוכנה תציג אוטומטית את FITC-sinistrin מחצית החיים (t 1/2) יחד עם ערך 2 R, נקבע על ידי 1-comparמודל tment. t 1/2 יכול להיות מנוצל כדי לחשב GFR באמצעות מקדם המרה 9,10. </li></ol>

<ol><li>Stevens, L. A., Levey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measured+GFR+as+a+confirmatory+test+for+estimated+GFR%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Measured GFR as a confirmatory test for estimated GFR.</a> J Am Soc Nephrol. 20, 2305-2313 (2009).</li>
<li>Katayama, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calculation+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+rats+by+the+use+of+a+bolus+injection+of+iodixanol+and+a+single+blood+sample%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Calculation of glomerular filtration rate in conscious rats by the use of a bolus injection of iodixanol and a single blood sample.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 61, 59-64 (2010).</li>
<li>Reinhardt, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+immunoassay+technology+%28FIT%29%2C+a+new+approach+for+measuring+physiological+functions%3A+application+of+FIT+to+measure+glomerular+filtration+rate+%28GFR%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Functional immunoassay technology (FIT), a new approach for measuring physiological functions: application of FIT to measure glomerular filtration rate (GFR).</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1583-F1588 (2008).</li>
<li>Rieg, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+method+for+measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice.</a> J Vis Exp. , e50330(2013).</li>
<li>Yu, W., Sandoval, R. M., Molitoris, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+renal+filtration+function+using+an+optical+ratiometric+imaging+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of renal filtration function using an optical ratiometric imaging approach.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, F1873-F1880 (2007).</li>
<li>Wang, E., Sandoval, R. M., Campos, S. B., Molitoris, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+diagnosis+and+quantification+of+acute+kidney+injury+using+fluorescent+ratio-metric+determination+of+glomerular+filtration+rate+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rapid diagnosis and quantification of acute kidney injury using fluorescent ratio-metric determination of glomerular filtration rate in the rat.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 299, F1048-F1055 (2010).</li>
<li>Colson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+choice+of+the+anesthetic+influence+renal+function+during+infrarenal+aortic+surgery%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Does choice of the anesthetic influence renal function during infrarenal aortic surgery?</a> Anesth Analg. 74, 481-485 (1992).</li>
<li>Fusellier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+three+anesthetic+protocols+on+glomerular+filtration+rate+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of three anesthetic protocols on glomerular filtration rate in dogs.</a> Am J Vet Res. 68, 807-811 (2007).</li>
<li>Schreiber, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcutaneous+measurement+of+renal+function+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Transcutaneous measurement of renal function in conscious mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 303, F783-F788 (2012).</li>
<li>Schock-Kusch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcutaneous+measurement+of+glomerular+filtration+rate+using+FITC-sinistrin+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol+Dial+Transplant%22%5BJournal%5D)">Transcutaneous measurement of glomerular filtration rate using FITC-sinistrin in rats.</a> Nephrol Dial Transplant. 24, 2997-3001 (2009).</li>
<li>Schock-Kusch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcutaneous+assessment+of+renal+function+in+conscious+rats+with+a+device+for+measuring+FITC-sinistrin+disappearance+curves%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Transcutaneous assessment of renal function in conscious rats with a device for measuring FITC-sinistrin disappearance curves.</a> Kidney Int. 79, 1254-1258 (2011).</li>
<li>Steinbach, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pilot+study+to+assess+the+feasibility+of+transcutaneous+glomerular+filtration+rate+measurement+using+fluorescence-labelled+sinistrin+in+dogs+and+cats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A pilot study to assess the feasibility of transcutaneous glomerular filtration rate measurement using fluorescence-labelled sinistrin in dogs and cats.</a> PLoS One. 9, e111734(2014).</li>
<li>Schock-Kusch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+of+transcutaneous+measurement+of+renal+function+in+various+strains+of+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Reliability of transcutaneous measurement of renal function in various strains of conscious mice.</a> PLoS One. 8, e71519(2013).</li>
<li>Cowley, A. W. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progression+of+glomerular+filtration+rate+reduction+determined+in+conscious+Dahl+salt-sensitive+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Progression of glomerular filtration rate reduction determined in conscious Dahl salt-sensitive hypertensive rats.</a> Hypertension. 62, 85-90 (2013).</li>
<li>Giani, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+angiotensin-converting+enzyme+is+essential+for+the+hypertension+induced+by+nitric+oxide+synthesis+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Renal angiotensin-converting enzyme is essential for the hypertension induced by nitric oxide synthesis inhibition.</a> J Am Soc Nephrol. 25, 2752-2763 (2014).</li>
<li>Sadick, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+non-invasive+GFR-estimation+methods+in+rat+models+of+polycystic+kidney+disease%3A+3.0+Tesla+dynamic+contrast-enhanced+MRI+and+optical+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol+Dial+Transplant%22%5BJournal%5D)">Two non-invasive GFR-estimation methods in rat models of polycystic kidney disease: 3.0 Tesla dynamic contrast-enhanced MRI and optical imaging.</a> Nephrol Dial Transplant. 26, 3101-3108 (2011).</li>
<li>Trudu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+noncoding+UMOD+gene+variants+induce+salt-sensitive+hypertension+and+kidney+damage+by+increasing+uromodulin+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Common noncoding UMOD gene variants induce salt-sensitive hypertension and kidney damage by increasing uromodulin expression.</a> Nat Med. 19, 1655-1660 (2013).</li>
<li>Zollner, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+measurement+of+kidney+function+by+dynamic+contrast+enhanced+MRI+and+FITC-sinistrin+clearance+in+rats+at+3+tesla%3A+initial+results%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Simultaneous measurement of kidney function by dynamic contrast enhanced MRI and FITC-sinistrin clearance in rats at 3 tesla: initial results.</a> PLoS One. 8, e79992(2013).</li>
</ol>

NG מחזיקה בפטנט על ייצור של FITC-sinistrin.

העיתון הנוכחי מתאר את ההליך כדי לקבוע תפקוד כליות אצל מכרסמים מודעים באמצעות מכשיר מיניאטורי ואת FITC-sinistrin סמן כליות אקסוגניים. כפי שנאמר קודם, יש בשיטה זו מספר יתרונות בהשוואה לנהלים המסורתיים של פינוי שתן פלזמה. אחד מהם הוא העצמאות מדגימת הדם ושתן אשר מובילה לחסכון רב במונחים של מוצרים צריכים, זמן, כמובן, מתח חיה. כפי שניתן לראות בטבלה 2, סמן כליות אקסוגניים FITC-sinistrin ומדידת קינטיקה לחיסולה דרך העור לאפשר את ההשפעה של פתולוגיות כליות על תפקוד הכליות להיחקר 9,10,14-18. אוסף סדרה של דגימות דם נדרשו להעריך אישור פלזמה או סמנים ביולוגיים של מחלות כליה הן מלחיצים עבור החיה, מסורבלים ונדרש זמן רב עבור החוקרים. לכן, מדידות סדרתיות בתוך אותה החיה כבר הגוited ידי לרווחת החיות והסיבות מתודולוגית. שחזור בתוך-החיה הוכיחה מדידת transcutaneous 13 עושה את זה שיטה אידיאלית עבור גילוי שינויים בתפקוד כליות עקב התקדמות מחלה או הזדקנות. מאותה הסיבה, זה גם יכול להיות מאוד שימושי כדי ללמוד את האפקטיביות של גישות טיפוליות. שני צעדים קריטיים עבור יישום מוצלח של טכנולוגיה זו הם הקיבוע של המכשיר האופטי על החיה והממשל הנכון של הסמן. המכשיר חייב להיות קבוע כראוי כדי למנוע חפצי תנועה. לשם כך, מניעת ההתקשרות והניתוק של התיקון הדבק דו צדדי חיונית כפי שהוא יכול להוביל לאובדן של התכונות הדבקות שלה ובסופו של דבר קיבעון הולם על החיה. כאמור בפרוטוקול, חוסר תנועה והגנה על מכשיר אופטי על ידי כיסוי אותו עם נייר דבק הוא גישה יעילה כדי להבטיח adequatקיבעון דואר. בעת ביצוע FITC-sinistrin הזרקת בולוס זה הוא חיוני כדי לנהל את כל החומר לווריד ולא תת-עורית. השחרור של הסמן בתוך הרקמה התת עורית ניתן לזהות בקלות על ידי טבעת צהובה מקיפה את הזנב של החיה המיוצר על ידי הצבע משלו של FITC-sinistrin. הזרקה תת עורית בדרך כלל באה לידי הביטוי עקום להחמיא זמן הפרשת סמן ממושך. המגבלה האפשרית של שיטה זו היא מפתח נוסף הקשורות למערכת הסמן בשימוש מאשר עם הטכנולוגיה כשלעצמה. כאשר בצקת קיימת בעור של חיה, הערכת transcutaneous של תפקוד כלייתי לא תהיה מומלצת, כפי שיש תא נוסף אשר יכול לשנות את דינמיקת הפרשת FITC-sinistrin. בדומה לכך, עור פיגמנט יכול להגביל את השימוש בטכניקה בשל ספקטרום העירור ופליטה החופף של FITC-sinistrin ו מלנין. עם זאת, אצל בעלי חיים עם פיגמנטציה בעור בטלאים, הבעיה נפתרת על ידי הנחת אופטיחלק של המכשיר באזור חסר צבע. אפשר לשנות היבטים שונים של הערכה transcutaneous של התפקוד הכלייתי על-מנת להתאים את ההליך מיני בעלי חיים שונים ו / או גישות. לדוגמא, מינון FITC-sinistrin המומלץ או אורך המדידה יכול להיות מותאם בהתאם המטרה של הניסוי, כמו גם עבור מינים שונים או במודלים של בעלי חיים. הסתגלות זו של השיטה כבר אושרה על ידי היישום המוצלח שלה במינים שונים של מכרסמים וכמה סוגים של זנים עם מצבים בריאותיים מגוונים. בנוסף, הערכת transcutaneous של תפקוד כלייתי תאומת לאחרונה בכלבים וחתולים 12 עם תוצאות מצוינות. עקב ההבדלים שאינו מוטל בספק בין חיות ומכרסמים אלה, מחקר זה קבע את המינון המתאים של FITC-sinistrin עבור שניהם, כלבים וחתולים, והוא ביצע מחזיקים מעמד זמן רב מדידה, 4 שעות במקום השימוש 1 או 2 שעותד במכרסמים. יחדיו, השימוש בטכניקה זו יכולה לעזור לנו לקבל תובנות מדויקות יותר נפרולוגיה, ובכלל זה הבנה טובה יותר של התקדמות מחלת כליות והשפעת טיפולים. המאפיינים של ערכת transcutaneous של תפקוד כלייתי ממקמים אותו כטכניקה מתאימה להיות מיושמת בתחומים קליניים בבני אדם ולשימוש וטרינרים בעתיד, ואת צריך להיחשב טכנולוגיה מבטיחה להחליף את הגישות המסורתיות.

קצב הסינון הגלומרולרי (GFR) הוא הפרמטר הטוב ביותר כדי להעריך את תפקוד הכליות הכוללת. תקן הזהב לקבוע GFR מסתמך על אישור שתן או פלזמה של סמני כליות אקסוגניים, כגון אינולין 1. עם זאת, נהלים אלה הם זמן רב ומורכב, המחייב את האוסף של דם סדרתי ו / או דגימות שתנו מבחני מעבדה אחוריות לניתוח שלה. בנוסף, שיטות אלה הנן פולשניות מלחיצות עבור בעלי החיים, הגבלה מספר פעמים ובאיזו תדירות המדידות ניתן לחזור. מספר גישות חלופיות פותחו כדי לפשט את ההליכים הקלסיים לקבוע GFR, אבל הם עדיין מסתמכים על דגימה שתן פלזמת 2-4 ו / או לדרוש הרדמה עמוקה 5,6, אשר ידוע להשפיע ופרמטרים המודינמיים כליות ותפקוד 7, 8. תוצרים של חילוף חומרים, כגון קריאטינין, גם נמצאים בשימוש נרחב כדי להעריך את תפקוד כליות. עם זאת, ידוע כי accurACY של סמנים אנדוגני אלה אינו אופטימלי, ויתרה מזאת, לנתח אותם, שתן או דגימת דם הוא גם הכרחי. כאן אנו מתארים מתודולוגיה transcutaneous להעריך תפקוד כלייתי בחיות מודעות. שיטה זו היא פשוטה ומהירה מאשר שיטות מסורתיות כמו גם רק פולשנית. בעזרת טכניקה זו, באמצעות מכשיר אופטי מיניאטורי ואת isothiocyanate והעמסת סמן כליות אקסוגניים (FITC) -sinistrin, אפשר לקבוע תפקוד הכליות כמעט בזמן אמת ללא צורך פלזמה או דגימה שתן ללא צנתור כירורגית לניהול חומר. בשל תכונותיו אלה, השיטה מתאימה לביצוע מדידות סדרתיות באותה חיה. FITC-sinistrin הוא סמן כליות מסוננים באופן חופשי על ידי glomerulus, ללא ספיגה חוזרת או הפרשת צינורי. החלק האופטי של המכשיר מיניאטורי מורכב משני דיודות פולטות אור (LED), בהן לרגשדה מרקר מנוהל פוטודיודה כדי לזהות את הקרינה הנפלטת דרך העור. הנתונים נרשמו מאוחסנים בזיכרון הפנימי המשולב במכשיר והם יכולים לשמש כדי ליצור עקומת קינטיקה חיסול FITC-sinistrin. חשמל מסופק על ידי סוללת ליתיום נטענת קטנה. לקבלת מידע מפורט יותר על מכשיר הרכיבים הבודדים שלה מתייחס שרייבר והאח &#39;. 9. המכשיר מותקן בקלות על הגוף החי באמצעות תיקון דבק דו צדדי נושאת חלון שקוף עבור הרכיבים האופטיים. התוצאות זמינות לאחר תקופת ההקלטה נגמרה. בשיטה והפרוטוקול הניתן כאן, אנו מציגים טכנולוגיה מבטיחה אשר יכול להחליף את תקן הזהב הנוכחי כדי לקבוע GFR, לא רק במחקר אלא גם בתחום הקליני.

<table><tbody><tr><td>מכשיר כליות NIC</td><td>מנהיים פארמה & תוכנת Diagnostics GmbH</td><td></td><td>, סוללות ומטענים מסופקים יחד עם המכשיר/ים. יש לבצע הזמנות באמצעות</td></tr><tr><td>info@mapdiagnostics.com FITC-sinistrin</td><td>Mannheim Pharma & Diagnostics GmbH</td><td></td><td>הזמנות צריכות להיעשות באמצעות</td></tr><tr><td>info@mapdiagnostics.com מדבקת דבק דו צדדית</td><td>Mannheim Pharma & Diagnostics GmbH</td><td></td><td>הזמנות צריכות להיעשות באמצעות מכונת</td></tr><tr><td>גילוח חשמלית info@mapdiagnostics.com Isis Rodent</td><td>Braun Aesculap&nbsp;</td><td>GT420</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott GmbH&nbsp;</td><td></td><td></td>PZN4831850</tr><tr><td>סרט דבק Leukosilk</td><td>BSN רפואי</td><td>102200</td><td></td></tr><tr><td>תחבושת גזה אלסטית צינורית&nbsp;</td><td>MaiMed Medical GmbH</td><td>73012</td><td>ישנם גדלים שונים זמינים. מידה 1 מומלצת לעכברים.</td></tr><tr><td>קרם אפילציה Veet</td><td>Reckitt Benckiser</td><td>PZN7768307</td><td>פורמולציה לעור רגיש מומלצת מכיוון שהיא עדינה יותר עם עור בעלי החיים</td></tr><tr><td>כבל מיקרו USB</td><td>Samsung</td><td>APCBU10BBE</td><td></td></tr><tr><td>Deltajonin פתרון פיזיולוגי</td><td>AlleMan Pharma GmbH</td><td>3366954</td><td>לחלופין, ניתן להשתמש בו במי מלח או PBS&nbsp;</td></tr></tbody></table>

הערכת transcutaneous של תפקוד כלייתי במכרסמי conscious

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

קצב סינון גלומרולרי (GFR) הוא תקן הזהב להערכת תפקוד הכליות הכללי. עם זאת, שיטות מסורתיות להערכת GFR הן מסורבלות וגוזלות זמן. בנוסף, נדרשות דגימות דם או שתן סדרתיות, עם הלחץ הנלווה לחיות הניסוי. טכניקה עדכנית מפחיתה משמעותית את ההשקעה בזמן ובמשאבים, ממזערת את הפולשניות ואת הלחץ של בעלי החיים, אך היא תקפה באותה מידה כמו הגישות המסורתיות. השיטה מודדת תפקוד כליות דרך העור. באמצעות מכשיר אופטי והסמן הכלייתי האקסוגני fluorescein isothiocyanate (FITC)-sinistrin, טכניקה זו מסוגלת למדוד את קינטיקת האלימינציה של הסמן דרך העור. ללא צורך בדגימות דם או שתן או בדיקות מעבדה נלוות, תוצאות המדידה הטרנס-עורית זמינות כמעט באופן מיידי. השיטה כבר אומתה במינים שונים ויושמה בהצלחה במספר מודלים של פתולוגיה כלייתית. יתר על כן, בשל מאפייניו הזעיר פולשניים, הוא מתאים למדידות עוקבות בתוך אותה חיה. כאן מסופק פרוטוקול מפורט לביצוע הערכה דרך העור של תפקוד הכליות במכרסמים.

ההתקנה של מדידת transcutaneous היא מאוד פשוטה ומהירה: המכשיר ממוקם על התיקון הדבק דו-צדדי (איור 1) ומותאם בגודלם במידת צורך (איור 2), הסוללה מוכנה (איור 3) ומחוברת (איור 4). שיטה זו כדי להעריך את תפקוד כליות תאומת כבר במינים שונים על ידי השוואה עם הגישה המסורתית של פינוי פלזמת 9,11,12. בעקבות הפרוטוקול נחשף כאן, שרייבר ואח &#39;. הדגימו את תוקפו של טכניקה במודלים של עכברים שונים, מראה תוצאות דומות מאוד בקרב אישור המדידה פלזמה transcutaneous לכל הקבוצות שנחקרו (טבלה 1) 9. בעבודה זו לא השיגה 1/2 הוסב GFR באמצעות עכבר ספציפי למחצה אמפירי מרהגורם. העקביות של ערכת transcutaneous של תפקוד כלייתי הוכחה גם באמצעות זנים שונים של עכברים. מדידות רצופות בתוך 3 ימים באותה החיה הראו מקדם של סטיות של 3.0-6.2% 13. במחקר זה לא היה מרת GFR אך התוצאות התבטאו ופרשו ישירות במונחים של t 1/2. האפשרות לקבל את התוצאות כמעט בזמן אמת היא אחד היתרונות הגדולים של שיטה זו. לאחר תקופת ההקלטה, התוצאות זמינות מיידית לניתוח התוכנה המצורפת מציגה את עקומת הפרשת FITC-sinistrin מיידי (איור 6). בתוך אותה תוכנה יישומים ט 1/2 של FITC-sinistrin ניתן להשיג, אשר ניתן להשתמש בהם ישירות כפרמטר להעריך תפקוד כלייתי של המרה מבחינת GFR. איור 7 </stרונג&gt; שמראה איך זה נראה עקום הפרשת FITC-sinistrin נמדד transcutaneously בבעל חיים עם אי ספיקה כלייתית. כאשר תפקוד כלייתי מושפע, FITC-sinistrin t 1/2 עליות בשל ההפרשה המופחתת של חומר ואת המראה של השינויים העקומים. בדרך כלל, העקומה נמדדת לא תחזור לרמת רקע ומציג שטח מוגבר מתחת לעקומה. באותה החיה, מדידות מראש כדי לאחר פציעה יכולות לחוות גידול בעוצמת הקרינה המרבית עקב הצטברות של הסמן נגרם על ידי ההפרשה המופחתת שלה. בנוכחותו של אי ספיקת כליות, העקומה נמדדת transcutaneously של sinistrin FITC יכול להראות למצב יציב בשל פגיעה בתפקוד קשה (איור 7). השימוש במכשיר הזעיר בתוך מספר זנים של מכרסמים עם מצב בריאותי שונה הראה כי טכניקה זו מתאימה ורגישה מספיק כדי לזהות שינויי דue על מחלות כליה והזדקנות. טבלה 2 מציגה תמצית המודלים בעכברים למדו עד כה בשיטה זו. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig1.jpg" /> באיור 1. מיקום של המכשיר על המדבקה הדבקה דו-צדדית. המכשיר הוא רכוב על מיצובה התיקון הדבק חלק האופטי שלה בחלון השקוף. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig2.jpg" /> איור 2. התאמת התיקון הדבק מכרסמים קטנים. לשימוש בבעלי חיים קטנים מומלץ להקטין את הגודל של התיקון. ת: השתמש במכשיר כמדריך לחתוך את התיקון כראוי. B: לאחר לגודל הרצוי הושג, המכשיר יכול להיות ממוקם על פני השטח הדביקים של התיקון. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig2large.jpg" target="_blank">P</a>לחכור לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig3.jpg" /> הכנה איור 3. של הסוללה. כדי לצרף את הסוללה למכשיר, לחתוך חתיכה קטנה של תיקון דבק דו-צדדי (A ו- B) ומניחים אותו על פני השטח של הסוללה (C). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig4.jpg" /> חיבור איור 4. ומיקום של הסוללה במהלך המדידה. (א) מכרסמים קטנים כגון עכברים, בשל השטח המופחת, הסוללה חייבת להיות ממוקמת על גבי המכשיר. (ב) בעלי חיים גדולים יותר ג הסוללהלהציב ליד המכשיר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig5.jpg" /> איור 5. מיקום של תחבושת גזת צינורי אלסטי חולדה. תחבושת צינורי צריכה לכסות את התיקון הדבק דו-צדדי מבלי להפריע לתנועה החופשית של הגפיים עבור הנוחות של החיה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig6.jpg" /> תמונת נציג איור 6. עקומת חיסול FITC-sinistrin. האות שנוצרה על ידי FITC-sinistrin מזוהה transcuבו-זמנית ומאוחסן בזיכרון הפנימי של המכשיר. כאשר הנתונים שנרשמו הורדו על מחשב, התוכנה יוצרת עקומה דומה לזו שהוצגה בתמונה. ציר ה- Y מציג את עוצמת הקרינה רשמה [AU], נפלטת סמן FITC-sinistrin המוזרק, ואילו ציר ה- X מייצג את משך המדידה בזמן [דקות]. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig6large.jpg" target="_blank">נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig7.jpg" /> תמונת נציג איור 7. בעקום חיסול FITC-sinistrin בחיות עם הפרעות בתפקוד הכליתי. (א) עקום חיסול FITC-sinistrin בחיות עם תפקוד כלייתי מופחת בדרך כלל מראה על שטח גדל מתחת לעקומה וחוסר היכולת להגיע לרמת הבסיס בתוך בתקופת מדידה נורמלית<html> . (ב) בעלי חיים נפגעים קשה עקום נמדד transcutaneously יכול להראות למצב יציב אשר מצביע על כשל כליות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="שולחן 1" src="/files/ftp_upload/53767/53767table1.jpg" /> טבלת 1. אימות של מדידת transcutaneous ידי השוואה עם אישור הפלזמה המסורתי. מדידת transcutaneous של תפקוד כלייתי תאומתנה במודלים של עכברים שונים (בריא nephrectomized באופן חד-צדדי (UNX) C57BL / 6-129 SV עכברים במודל עכבר של nephronophthisis ( PCY)) על ידי השוואה עם אישור פלזמה. ערכים הם אמצעי ± SD. GFR, קצב הסינון הגלומרולרי 9. /53767/53767table2.jpg &quot;/&gt; מודלים טבלה 2. Murine ללמוד באמצעות מדידת transcutaneous UNX, באופן חד-צדדי nephrectomized.; ACE, אנזים המרת-אנגיוטנסין; T gumodwt / WT, בנוקאאוט uromodulin מהונדס, SD, עכברוש ספראג Dawley; PKD, מחלת כליות פוליציסטיות.

קביעת קצב הסינון הגלומרולרי (GFR) היא תקן הזהב להערכת תפקוד הכליות הכללי. עם זאת, הליכים מסורתיים למדידת פרמטר זה הם מסורבלים ודורשים השקעה גדולה של זמן. כאן אנו מתארים שיטה מהירה וזעיר פולשנית לקביעת GFR דרך העור.

הערכת Transcutaneous של תפקוד כלייתי במכרסמי Conscious

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

המטרה הכללית של הליך זה היא למדוד תפקוד כליות באופן טרנס-קומי (דרך העור) ללא צורך בדגימות דם או בניתוח ניסויי נוסף. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום הנפרולוגיה, כגון ההשפעה של גרימת נזק לכליות או התערבויות טיפוליות ספציפיות על תפקוד הכליות. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם היותה פולשנית באופן מינימלי והעובדה שהתוצאות מוכנות לניתוח מיד לאחר המדידה, ללא צורך במניפולציות ניסוייות עוקבות.ניתן להשתמש בטכניקה זו כדי לחקור כמעט כל מצב כלייתי במספר מינים שונים. כמו כן, היא שימושית לביצוע מדידות רציפות באותו בעל חיים. לפני תחילת הפרוצדורה, יש לוודא את רמת ההרדמה הנכונה באמצעות צביטה באצבע.השתמשו במכונת גילוח חשמלית כדי להסיר פרווה משטח של שלושה על שישה סנטימטרים מהחלק התחתון של הבטן של בעל החיים. הסירו את הפרווה הנותרת באמצעות קרם להסרת שיער. לאחר שתי עד שלוש דקות, שטפו היטב את העור החשוף, שכן הקרם עלול לפלוט פלואורסצנציית רקע.בשלב הבא, הניחו את המכשיר האופטי למדידת תפקודי כליות על צד אחד של מדבקת דבק דו-צדדית. מקמו את החלק האופטי מעל החלון השקוף והשאירו את הצד הנגדי מכוסה בנייר הגנה. לאחר מכן, הצמידו למסירה פיסה תואמת בגודלה של מדבקת דבק דו-צדדית לסוללה.לפני קיבוע המכשיר, שקלו את בעל החיים. לאחר מכן, גזרו פיסה של תחבושת גזה אלסטית שרוולית באורך הגדול בכשני סנטימטר מרוחב מדבקת הדבק הדו-צדדית. משכו את התחבושת מעל ראשו של בעל החיים.בשלב הבא, הניחו את בעל החיים במצב שכיבה על הגב (supine), כאשר האזור הגולח נשאר חשוף. חברו את מחבר הסוללה לפורט המתאים במכשיר. אם הסוללה חוברה כראוי, המכשיר יתחיל להבהב.הסר את רדיד ההגנה מהצד השני של המדבקה המחוברת לסוללה, והצמד את הסוללה למשטח העליון של המכשיר. כעת, הסר את כיסוי ההגנה מהמדבקה של מכשיר העבודה והחזק את הקצוות עד לקיבוע נכון, והנח את המדבקה על האזור הגולח בגבו של בעל החיים.כסו את המכשיר בתחבושת גזה אלסטית צינורית, תוך הקפדה על מתיחה מלאה של התחבושת מעל הבטן, ובו זמנית ודאו שהגפיים יכולות לנוע בחופשיות. קיבוע טוב הוא קריטי למניעת ארטיפקטים של תנועה במהלך המדידה, לכן אנא ודאו שהמכשיר מחובר כראוי לפני תחילת המדידה. לאחר שהתחבושת במקומה, הדביקו רצועת סרט דביק במידה מתאימה מעל המכשיר, כך שתכסה את חוטי הסוללה.מדדו את קריאת הרקע במשך דקה עד שלוש דקות ללא הפעלת לחץ על המכשיר. למתן ה-FITC-sinistrin, לאחר חימום זנבו של בעל החיים כדי להרחיב את ורידי הזנב, מזריקו תוך-ורידית (IV) את הנפח המתאים של תמיסת ה-FITC-sinistrin המרוכזת. לאחר מכן, הניחו בזהירות את בעל החיים לבדו בכלוב מגוריו, ללא מים וללא מכסה רשתית.יש להקפיד על מניעת ארטיפקטים של תנועה. לאחר מכן, רשמו את הפלואורסצנציה הנפלטת מה-FITC-sinistrin באמצעות המכשיר האופטי למשך פרק הזמן הניסויי המתאים. בתום תקופת ההקלטה, הסירו בזהירות את סרט ההדבקה ולאחר מכן את התחבושת השפופרתית.לאחר מכן, הפרידו בעדינות את מדבקת הדבק הדו-צדדית מהעור. החזירו את בעל החיים לכלוב המגורים הרגיל שלו. כדי לקרוא את הנתונים, נתקו את הסוללה מהמכשיר והסירו את מדבקת הדבק.לאחר מכן, השתמש בכבל micro USB כדי לחבר את המקליט האופטי למחשב והורד את הנתונים באמצעות התוכנה המתאימה. לבסוף, השתמש בתוכנה המתאימה כדי להפיק את עקומת קינטיקת הסילוק בהתאם לפרוטוקולי התוכנה. פתח את קובץ ה-CSV המכיל את הנתונים.כאשר התפקוד הכליתי נפגע, זמן מחצית החיים של FITC-sinistrin עולה. הדבר נובע מהפחתה בהפרשת החומר וגורם לשינויים בעקומת הריכוז. בדרך כלל, העקומה הנמדדת אינה חוזרת לרמת הרקע, ונצפה שטח גדול יותר מתחת לעקומה.באותו בעל חיים, מדידות לפני ואחרי פגיעה מדגימות עלייה בעוצמת הפלואורסצנציה המקסימלית עקב הצטברות של הסמן שנגרמה מהפחתה בהפרשתו. לדוגמה, בנוכחות אי-ספיקת כליות, עקומת ה-FITC-sinistrin שנמדדה באופן טרנס-קוטנאלי מראה מצב יציב (steady state) בשל פגיעה חמורה בתפקוד של רקמת הכליות. יתרה מכך, המכשיר הממוזער שימש למדידה מוצלחת של תפקוד כלייתי במספר זני מכרסמים בעלי מצבים בריאותיים שונים.הדגשת התאימות והרגישות של המכשיר לזיהוי שינויים הנובעים ממחלה כלייתית והזדקנות. לאחר רכישת המיומנות, ניתן להקים את הניסוי במלואו תוך 50 דקות, כאשר חוקר בודד יכול להעריך לפחות ארבעה בעלי חיים בשעה. בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור להגן על המכשיר האלקטרוני על ידי הסרת אספקת המים וכל מבנה בולט במהלך תקופת המדידה.

transcutaneous-assessment-of-renal-function-in-conscious-rodents

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מדידה של קצב סינון גלומרולרי (GFR) היא תקן הזהב להערכת תפקוד כליות. כאן אנו מתארים שיטת תפוקה גבוהה המאפשרת קביעת GFR בעכברים מודעים באמצעות זריקה אחת בולוס, קביעת isothiocyanate ההעמסה (FITC)-אינולין בפלזמה וחישוב GFR ידי מודל דעיכה מעריכית שני שלבים.

שיטת תפוקה גבוהה למדידה של קצב סינון הגלומרולרי בעכברים בהכרה

תפקוד המודינמי בשלב מוקדם הוא קריטי להתפתחות מחלת כליות. עם זאת, מתודולוגיות הזיהוי מוגבלות. ההתקדמות האחרונה בסונוגרפיה מספקת אפשרות לא פולשנית ומדויקת לגילוי מוקדם של פגיעה בכליות. מחקר זה מתאר מתודולוגיה סונוגרפית שלב אחר שלב לאיתור תפקוד לקוי של הכליות באמצעות מודל נפרוטוקסיות של חולדות הנגרמות על ידי תרופות.

גילוי מוקדם של הפרעות בתפקוד הכליות המודינמי סמים באמצעות טכנולוגיה Sonographic בחולדות

מטרת פרוטוקול זה היא להדגים את העקרונות והטכניקות למדידה וחישוב קצב הסינון הגלומרולרי, קצב זרימת השתן והפרשת נתרן ואשלגן בחולדה. ניתן להשתמש בהדגמה זו כדי לספק לתלמידים הבנה מושגית כוללת כיצד למדוד תפקוד כליות.

הפגנת מעבדה לפיזיולוגיה: גלומרולרי סינון שיעור בחולדה

עכברים ומורדמת התערוכה-פיזיולוגיים לחץ דם סיסטמי, שמונע את הערכה משמעותי של הטון האוטונומית נתון את הקשר האינטימי בין לחץ הדם ואת מערכת העצבים האוטונומית. לפיכך, התווה שיטה פעילות במקביל להקליט העצבים הסימפתטית כליות, לחץ דם עם עירוי תוך ורידי בעכברים בהכרה.

בגישה חדשנית עבור הקלטה בו זמנית של פעילות העצבים הסימפתטית כליות, לחץ דם עם עירוי תוך ורידי, בהכרה, עכברים ערככם.

פרוטוקול זה מתאר לראשונה את הליך כירורגי של השתלה קבועה של צנתור שלפוחית השתן בשילוב עם אלקטרודות חיצוניות סוגר השופכה, ואת השני, את המדידה של הפונקציה של שלפוחית השתן או השופכה חיצוני טבעתי בבעלי ער מושתל.

מדידות סוגר השופכה Cystometric או חיצוני בחולדות ער עם קטטר מושתל ואלקטרודות ומאפשר למדידות חוזרות

שיטות למדידת תגובות סימפטי ואת הלב וכלי הדם מערכת העצבים המרכזית (CNS) מניפולציות חשובים לקידום מדעי המוח. פרוטוקול זה פותחה כדי לסייע למדענים מדידה וכימות שינויים חריפה בפעילות כליות העצבים הסימפתטית (RSNA) בחולדות מרדימים (ההישרדות).

לכימות שינויים חריפה בפעילות העצבים הסימפתטית כליות בתגובה מניפולציות במערכת העצבים המרכזית בחולדות מורדם

כאן נתאר פרוטוקול כדי למדוד את קצב הסינון glomerular (GFR), בהכרה, לנוע בחופשיות עכברים באמצעות צג GFR דרך העור.

Transdermal מדידה של קצב הסינון Glomerular בעכברים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מדידה רציפה ארוכת טווח של זרימת הדם הכלייתית בחולדות מודעות ובמקביל רישום לחץ דם עם צנתרים מושתלים (מלאים בנוזלים או בטלמטריה).

מדידה מתמשכת ארוכת טווח של זרימת הדם הכלייתית בחולדות מודעות

קצב סינון גלומרולרי (GFR) הוא הסמן האידיאלי להערכת תפקוד הכליות. עם זאת, שיטת המדידה הסטנדרטית באמצעות הזרקת אינולין עם ניתוח דם ושתן סדרתי אינה מעשית. מאמר זה מתאר שיטה מעשית למדידת GFR באופן טרנסדרמלי בחזירונים.

מדידה טרנסדרמלית של קצב סינון גלומרולרי בחזירונים מאווררים מכנית

מאמר זה מציג מודל CKD איסכמי המשתמש ב-IRI כלייתי חד-צדדי עם נפרקטומיה נגדית שבוצעה יום לפני איסוף הדגימה; פרוטוקול זה מאפשר הערכה פונקציונלית מבוססת סרום, הישרדות גבוהה ופתולוגיה של CKD ניתנת לשחזור ב-28 ו-42 ימים, ומספק פלטפורמה גמישה למחקרים מכניים והתערבותיים.

מודל העכבר של מעבר ממחלת כליות חריפה לכרונית שנגרם מאיסכמיה כליתית/פגיעה ברפרפוזיה

למד שיטה מינימלית פולשנית להערכת תפקוד כלייתי במכרסמים באמצעות מדידה טרנסקוטנית של שיעור סינון גלומרולרי. הטכניקה מאפשרת ניתוח מיידי ללא דגימות דם ומייעלת מחקר בנפרולוגיה.

הערכת Transcutaneous של תפקוד כלייתי במכרסמי Conscious

גלה סרטונים נוספים