RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/53785-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
תת תפקוד בלוטות הרוק, תופעת לוואי משמעותית של רדיותרפיה בראש ובצוואר מפחיתה את איכות החיים של המטופל. הוכחת היעילות של טיפולים חדשים במודלים של בעלי חיים היא תנאי מוקדם לפני המעבר הקליני. פרוטוקול זה מתאר מתן רטרודוקטי והקרנה מקומית של בלוטות תת-לסתות של חולדות.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לתת טיפולים רטרודוקטיביים לבלוטות התת-לסתית כדי להעריך את יעילותם במאבק בתפקוד לקוי של הרוק. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הפרעות בבלוטות הרוק כגון אילו טיפולים יכולים להגן מפני או לשחזר את תפקוד בלוטות הרוק מפני קרינה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן לטפל בבלוטות הרוק באופן מקומי ובכך להפחית את הסיכון לתופעות לוואי של רקמות שאינן מטרה.
בדרך כלל אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו מכיוון שפתחי הצינורות אינם נראים ויש לתפעל את הצינורית בצורה עיוורת לתוך הצינור. לפני תחילת ההליך, חתוך באורך של עשרה סנטימטרים של צינור פוליאתילן PE 10 בעזרת קרפל, ואז אחוז בשני קצוות הצינור בין האצבע המורה לאגודל של כל יד וחמם את החלק האמצעי של הצינור מעל להבה עדינה, מושך בזהירות את שני הצדדים כדי למתוח את הצינור המרוכך כדי להכפיל את אורכו. לאחר מכן השתמש בקרקל כדי לחתוך את הצינור באמצע בזווית של 45 מעלות כדי לקבל שני קנולי כל אחד עם קצה מחודד.
מתחו את הקצה הלא מחודד של אחת הצינוריות מעל מחט 29 של מזרק אינסולין 0.5 סמ"ק. לאחר מכן הסר את הצינורית ושאב 220 מיקרוליטר תמיסת מלח למזרק. הקש על פיר המזרק כדי לעקור בועות אוויר ולחבר מחדש את הצינורית מעל המחט.
לחץ על הבוכנה כדי להוציא את האוויר מהצינורית וכדי להבטיח זרימה חופשית של תמיסה דרך הצינור והתאם את נפח המלח במזרק ל-200 מיקרוליטר. כעת אשרו את רמת ההרגעה המתאימה של החולדה על ידי צביטת בוהן ורפלקס מוחשי ומרחו חומר סיכה לעיניים על הקרניות החשופות. הנח את האמימל על פלטפורמת ריסון שתוכננה במיוחד והפעל את השיניים החותכות העליונות על המוט הרוחבי.
לולאה גומייה סביב החותכות התחתונות כדי למשוך את הלסת כלפי מטה. עיגון לפלטפורמה. לאחר מכן העבירו תפר סטרילי דרך הלשון והרימו אותו כדי להרים את רצפת הפה.
לאחר מכן השתמש בהמוסטט כדי להדק את התפרים ולהעביר את המוסטט מעל המוט הרוחבי. לאחר מכן השתמש במפזר לחיים שנבנה בהתאמה אישית כדי להרחיב את הלחיים ובמיקרוסקופ מנקב כדי לאתר את הפפילי התת-לשוני על רצפת הפה. בעזרת מלקחיים עדינים תפסו את הקצה המחודד של צינור PE 10 המוכן מראש ומניפולציה בעדינות את קצה הצינורית לתוך פתח הצינורית בפפילה התת-לשונית.
לאחר מכן השחילו את הצינורית שלושה עד חמישה מילימטרים לתוך הצינור, וודאו שהצינורית עוברת דרך הצינור ללא חסימה. לפני החדרת מי המלח יש להזריק אטרופין תת עורי לתוך קשקוש צוואר החיה. עשר דקות לאחר ההזרקה הצמידו את הצינורית לפתח הצינור עם טיפת ציאנואקרילט.
לאחר שהדבק התייבש, לחץ לאט על בוכנת המזרק ב -50 מיקרוליטר לדקה עד להחדרת 200 מיקרוליטר מתמיסת המלח לבלוטה. אם אתה נתקל בחזרה presure במהלך ההחדרה, עצור ולאחר מכן משוך את הצינור ואז החזר עם צינורית חדשה. ואז מהדקים את הצינור בעזרת המוסטט ומסירים בזהירות את המזרק.
השאירו את הצינור בצינור למשך 30 עד 60 דקות עד שהחיה תחזור להכרה. לאחר מכן הסר את התפר המחזיק את הלשון והעביר את החיה לכלוב נפרד מתחת למנורת חום עד להתאוששות מלאה. להחיל באופן מקומי הקרנה מקוטעת על הבלוטה התת-לסתית.
עמוד חריץ של שלושה סנטימטרים של שדה קרינה המקיף את האזור מהגבול התחתון של הלסת התחתונה ועד לחלק העליון של עצם החזה של החולדה המורדמת במצב שכיבה. לאחר הנחת בולוס שווה ערך לרקמה של סנטימטר אחד על האזור. התאם את המרחק בין מקור הקרינה לחלק העליון של הבולוס ל-100 סנטימטרים באמצעות קרן פוטון של שישה מגה-וולט על המאיץ הליניארי.
הקרינו את החיה ב-2.5 גווני אפור למשך החשיפה המתאים. בתום תקופת החשיפה לקרינה יש לחמם את החיה במהלך ההתאוששות שלה, כפי שהודגם זה עתה. במהלך הניסויים הראשוניים, המיקום הנכון של הצינורית אושר על ידי החדרת תמיסת המטוקסילין או טריפלן כחול לבלוטה והערכת צביעת הבלוטה בבעלי חיים שעברו המתת חסד.
הבלוטות התת-לסתות נחקרו מכיוון שניתן להקרין אותן באופן סלקטיבי באמצעות קרינה עמודית לצוואר תוך הימנעות מהשפעות חמורות מחוץ למטרה דרך הפה שעלולות להשפיע על בריאות בעלי החיים ועל תוצאות הניסוי. ניתוח ההשפעות של תוכנית קרינה מקוטעת זו על זרימת הרוק בשמונה שבועות לאחר הקרינה מראה כי חשיפה יומית ל-2.5 מרווחים אפורים מפחיתה באופן חד את זרימת הרוק. הפחתה של פי 10 בתפוקת הרוק בבעלי חיים מוקרנים בהשוואה לבעלי חיים שאינם מוקרנים.
לאחר שליטה, ניתן להשלים טכניקה זו תוך מספר דקות אם היא מבוצעת כראוי. בעת ניסיון הליך זה חשוב לזכור להבטיח מעבר בלתי מוגבל של צינורית לצינור ההפרשה של בלוטת הרוק. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום הפרעות בבלוטות הרוק לחקור טיפולים לקרינה ולמחלות אוטואימוניות של בלוטות הרוק.
לאחר צפייה בסרטון זה אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע התקנה רטרודוקטיבית בבלוטה התת-לסתית של החולדה ולהקרין באופן מקומי את הבלוטות כדי להעריך את היעילות הטיפולית של שיפור רעילות קרינה. אל תשכח שעבודה עם טיפולים גנטיים וחלבונים עלולה להיות מסוכנת ביותר ויש לנקוט באמצעי זהירות כגון הימנעות מדקירות מחט ומזעור חשיפת העור לגורמים ביולוגיים בעת ביצוע הליך זה.
Related Videos
09:52
Related Videos
24.1K Views
05:18
Related Videos
26.6K Views
07:05
Related Videos
23.7K Views
07:29
Related Videos
19.4K Views
08:13
Related Videos
8.5K Views
07:45
Related Videos
10.4K Views
09:10
Related Videos
11.7K Views
07:38
Related Videos
8.3K Views
03:50
Related Videos
3.4K Views
05:40
Related Videos
1.8K Views