Name: Retroductal submandibular בלוטת החדרה ונקודות מופרדות הקרנה במודל עכברים של הרוק hypofunction (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: למד שיטת הזרקה רטרודוקטלית לבלוטות הרוק התת-לסתיות בעכברים לטיפול בהיפופונקציה לאחר קרינה. טכניקה זו מאפשרת טיפול מקומי עם פחות תופעות לוואי מערכתיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לד"ר ג'ון צ'אנג (אונקולוגיה קרינתית, מרכז מדעי הבריאות של LSU) על הסיוע במדידות מינון הקרינה. המחקר נתמך על ידי האגודה האמריקאית לסרטן (מספר מענק: 116945-RSG-09-038-01-CCE), המכון הלאומי לבריאות (מספר מענק: R21CA173162) ומרכז הסרטן פייסט-וויילר.

כל ההליכים אושרו על ידי בריאות LSU, Shreveport, טיפול בבעלי חיים ועדת השתמש היו בהתאם להנחיות NIH לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה. 1. Cannulation של בלוטות הרוק עכברוש submandibular <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת מזרק-Tubing האסיפה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים באורך 10 ס&quot;מ של צינורות פוליאתילן PE10 עם אזמל. החזק את שני הקצוות של הצינור בין האצבע המורה לאגודל. מחממים את החלק האמצעי של הצינור מעל להבה עדינה, בעדינות למתוח את צינורות מרוככת להכפיל אורכו על ידי משיכת שני הצדדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את הצינורות באמצע עם אזמל בזווית של 45 o לקבל cannulae 2 - כל אחד עם לקצה חד. הרחב את הקצה שאינו מחודד של הצינורית ידי הולם אותו על מחט 29 G של מזרק אינסולין 0.5 סמ&quot;ק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הצינורית, ולצייר 220 μl של תמיסת מלח לתוך המזרק. הקש כדי לסלק בועות אוויר. התאימו את cannulעל המחט, לדחוף את הבוכנה במזרק כדי לפלוט את האוויר ולהבטיח זרימה חופשית של פתרון באמצעות צינורית. כוון את עוצמת הקול עד 200 μl. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Intra-Oral Cannulation של submandibular בלוטת Duct הערה: חיטוי מכשירים לפני ההליך, לעקר ב-בין ההליכים מעקרים חרוז חם. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את העכברוש ספראג Dawley, ולחלק את נפח מחושב של קטמין (42 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / xylazine (8 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / acepromazine (1.4 מ&quot;ג / ק&quot;ג) לערבב בתוך מזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרסן את החיה ידי אחיזה בבסיס הזנב בין האצבע המורה ואת האגודל של יד אחת זזה מצד שני על הגוף לקלוט את זה. הנח את האצבע והאמה לאורך צידי הראש בזמן להחזיק את הגוף עם האגודל האצבעות הנותרות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק את חומר ההרדמה בשרירי הגפיים האחוריים. אשר עומק ההרדמה על ידי צביטת בוהן רפלקס palpebral. החל סיכת עין כדי למנוע בעוד יובשחיה היא בהרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את החיה על פלטפורמה-ומעוצבת (איור 1), ולעסוק הוא שן החותך העליון בסרגל הרוחבי. משוך את הלסת התחתונה על ידי looping גומייה סביב התחתונות ועיגון אותו הרציף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור תפר סטרילי דרך הלשון והרם אותו להעלות את רצפת הפה. הצמד את התפרים עם hemostat, ולהעביר מעל המשקוף הרוחבי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרחב את הלחיים עם מפזר לחי שהותקן (איור 1), ותחת מיקרוסקופ לנתח לאתר את הגבשושיות תת הלשוניות על רצפת הפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחוז לקצה החד של הצינורות מתבצעים PE10 באמצעות מלקחיים עדינים. בעדינות לתפעל את הקצה של הצינורית לתוך פתח ductal על הגבשושיות תת הלשוניות. אשר מיקום של הצינורית ידי שחלה זה 3 - 5 מ&quot;מ לתוך הצינור; לוודא שהוא עובר ללא כל מכשול. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Submandibular בלוטת חינוך קדםllation <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק אטרופין (0.5 מ&quot;ג / ק&quot;ג) תת עורי בתוך בעורפו, ולהמתין 10 דקות עבור הפחתה בהפרשות הרוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אבטח את הצינורית אל פתח צינור עם טיפת cyanoacrylate (דבק), ולאפשר לו להתייבש. להנחיל הפתרון בבלוטה (200 μl / הבלוטה) על ידי בוכנת לחיצה על המזרק לאט בקצב של ~ 50 μl / min. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרסק את הצינורות עם hemostat, ובזהירות להסיר את המזרק. שמור את הצינורות בצינור עבור 30 - 60 דקות עד שהחיה להכרתו. הסר תפר שמחזיק את הלשון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את החיה לכלוב נפרד, ולהשתמש מנורת חום כדי לשמור אותו חם במהלך ההתאוששות. אין להשאיר את החיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו לשמור recumbence sternal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי החיה היא אמבולטורי מלא, לשכן אותו בבית הביבר עם גישה חופשית למזון ומים. </li></ol></li></ol> 2. בהתאמה לשפת הקרנה מופרדתשל בלוטות submandibular <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרסן את החיה כפי שתואר קודם לכן, להרדים עם הממשל תוך שרירית של קטמין (33 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / xylazine (6 מ&quot;ג / ק&quot;ג) / acepromazine (1 מ&quot;ג / ק&quot;ג) תערובת של הגפיים האחוריות. אשר עומק ההרדמה, ולהחיל סיכה לעיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את פרקדן חיה על השולחן מאיץ ליניארי, ולהרחיב הצוואר שלה על ידי הטיית הראש. Collimate בתחום הקרינה (רוחב חריץ 3 סנטימטרים) כדי להקיף את האזור מהגבול התחתון של הלסת התחתונה לחלק העליון של עצם החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים בולוס 1 ס&quot;מ שווה-רקמה על האזור, ולהתאים את המרחק בין מקור קרינה העליון של בולוס ל -100 ס&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקרינים את החיה (2.5 Gy) באמצעות קרן פוטונים 6 MV של מאיץ ליניארי. מנת שיעור, גודל שדה, ומרחק ממקור קרינת בולוס משטח יכתיב את זמן החשיפה. ב הנוכחי להגדיר, חיות הוקרנו בשיעור מנה של ~ 1 Gy / min. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על חשיפה; 2.5 Gy / יום עבור סכום כולל של 8ימים; 4 ימים / שבוע עם מרווח 2 ימים שביניהם. שמור על חמי החיה במהלך התאוששות. מעבירים את החיה כדי ביבר אחרי זה אמבולטורי מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף רוק הבלוטה submandibular מגורה 8 שבועות לאחר קרינה כדי למדוד את תפקוד בלוטת 14. להרדים בעלי חיים תחת הרדמה על ידי זלוף הלב של pH בופר paraformaldehyde קר 4% / פוספט 7.2. לעקור בלוטות submandibular עבור היסטולוגית ו immunohistochemical מנתח 14. </li></ol>

<ol><li>Delporte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+fluid+secretion+after+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+to+irradiated+rat+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 94 (7), 3268-3273 (1997).</li>
<li>Chambers, M. S., Rosenthal, D. I., Weber, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiation-induced+xerostomia%5BTitle%5D)+AND+%22Head+Neck%22%5BJournal%5D)">Radiation-induced xerostomia.</a> Head Neck. 29 (1), 58-63 (2007).</li>
<li>Sciubba, J. J., Goldenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+complications+of+radiotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Oral complications of radiotherapy.</a> Lancet Oncol. 7 (2), 175-183 (2006).</li>
<li>Rodrigues, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+prospective+study+of+salivary+gland+function+in+lymphoma+patients+receiving+head+and+neck+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">A prospective study of salivary gland function in lymphoma patients receiving head and neck irradiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 75 (4), 1079-1083 (2009).</li>
<li>Coracin, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Major+salivary+gland+damage+in+allogeneic+hematopoietic+progenitor+cell+transplantation+assessed+by+scintigraphic+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Marrow+Transplant%22%5BJournal%5D)">Major salivary gland damage in allogeneic hematopoietic progenitor cell transplantation assessed by scintigraphic methods.</a> Bone Marrow Transplant. 37 (10), 955-959 (2006).</li>
<li>Jensen, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+salivary+gland+hypofunction+and+xerostomia+induced+by+cancer+therapies%3A+management+strategies+and+economic+impact%5BTitle%5D)+AND+%22Support+Care+Cancer%22%5BJournal%5D)">A systematic review of salivary gland hypofunction and xerostomia induced by cancer therapies: management strategies and economic impact.</a> Support Care Cancer. 18 (8), 1061-1079 (2010).</li>
<li>de Castro, G. Jr, Federico, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation%2C+prevention+and+management+of+radiotherapy-induced+xerostomia+in+head+and+neck+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Evaluation, prevention and management of radiotherapy-induced xerostomia in head and neck cancer patients.</a> Curr Opin Oncol. 18 (3), 266-270 (2006).</li>
<li>Epperly, M. W., Carpenter, M., Agarwal, A., Mitra, P., Nie, S., Greenberger, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoral+manganese+superoxide+dismutase-plasmid%2Fliposome+%28MnSOD-PL%29+radioprotective+gene+therapy+decreases+ionizing+irradiation-induced+murine+mucosal+cell+cycling+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vivo%22%5BJournal%5D)">Intraoral manganese superoxide dismutase-plasmid/liposome (MnSOD-PL) radioprotective gene therapy decreases ionizing irradiation-induced murine mucosal cell cycling and apoptosis.</a> In Vivo. 18 (4), 401-410 (2004).</li>
<li>Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+irradiation-induced+salivary+hypofunction+by+microvessel+protection+in+mouse+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands.</a> Mol Ther. 15 (12), 2101-2106 (2007).</li>
<li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+radiation-induced+salivary+hypofunction+following+hKGF+gene+delivery+to+murine+submandibular+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Prevention of radiation-induced salivary hypofunction following hKGF gene delivery to murine submandibular glands.</a> Clin Cancer Res. 17 (9), 2842-2851 (2011).</li>
<li>Palaniyandi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenoviral+delivery+of+Tousled+kinase+for+the+protection+salivary+glands+against+ionizing+radiation+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Adenoviral delivery of Tousled kinase for the protection salivary glands against ionizing radiation damage.</a> Gene Ther. 18 (3), 275-282 (2011).</li>
<li>Baum, B. J., Voutetakis, A., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+glands%3A+novel+target+sites+for+gene+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Salivary glands: novel target sites for gene therapeutics.</a> Trends Mol Med. 10 (12), 585-590 (2004).</li>
<li>Limesand, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-like+growth+factor-1+preserves+salivary+gland+function+after+fractionated+radiation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">Insulin-like growth factor-1 preserves salivary gland function after fractionated radiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 78 (2), 579-586 (2010).</li>
<li>Timiri Shanmugam, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recombinant+AAV9-TLK1B+administration+ameliorates+fractionated+radiation-induced+xerostomia%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Recombinant AAV9-TLK1B administration ameliorates fractionated radiation-induced xerostomia.</a> Hum Gene Ther. 24 (6), 604-612 (2013).</li>
<li>Coppes, R. P., Vissink, A., Konings, A. W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+radiosensitivity+of+rat+parotid+and+submandibular+glands+after+different+radiation+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Radiother+Oncol%22%5BJournal%5D)">Comparison of radiosensitivity of rat parotid and submandibular glands after different radiation schedules.</a> Radiother Oncol. 63 (3), 321-328 (2002).</li>
<li>Sunavala-Dossabhoy, G., Palaniyandi, S., Richardson, C., De Benedetti, A., Schrott, L., Caldito, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TAT-mediated+delivery+of+Tousled+protein+to+salivary+glands+protects+against+radiation-induced+hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">TAT-mediated delivery of Tousled protein to salivary glands protects against radiation-induced hypofunction.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 84 (1), 257-265 (2012).</li>
<li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+the+AQP1+cDNA+for+the+correction+of+radiation-induced+salivary+hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Transfer of the AQP1 cDNA for the correction of radiation-induced salivary hypofunction.</a> Biochim Biophys Acta. 1758 (8), 1071-1077 (2006).</li>
<li>Tran, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paracrine+effects+of+bone+marrow+soup+restore+organ+function%2C+regeneration%2C+and+repair+in+salivary+glands+damaged+by+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Paracrine effects of bone marrow soup restore organ function, regeneration, and repair in salivary glands damaged by irradiation.</a> PLoS One. 8 (4), e61632(2013).</li>
<li>Nanduri, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salisphere+derived+c-Kit%2B+cell+transplantation+restores+tissue+homeostasis+in+irradiated+salivary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Radiother+Oncol%22%5BJournal%5D)">Salisphere derived c-Kit+ cell transplantation restores tissue homeostasis in irradiated salivary gland.</a> Radiother Oncol. 108 (3), 458-463 (2013).</li>
<li>Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticle-mediated+gene+silencing+confers+radioprotection+to+salivary+glands+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo.</a> Mol Ther. 21 (6), 1182-1194 (2013).</li>
<li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reengineered+salivary+glands+are+stable+endogenous+bioreactors+for+systemic+gene+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Reengineered salivary glands are stable endogenous bioreactors for systemic gene therapeutics.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (9), 3053-3058 (2004).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

בלוטות רוק לעתים קרובות לקבל מינון קרינה מעבר לסף של התאוששות רקמה בחולים עובר טיפול הקרנות לסרטן צוואר הראש, אבלציה בחירה של בלוטות צוואר, או ממאירויות המטולוגיות אזוריות. למרות תאי acinar מפריש נוזל של הבלוטה הם מובחנים סופנים, הם באופן פרדוקסלי רגישים לקרינה. פונקצית הפרשת טיפות בתוך השבועות הראשונים של קרינה, ותוצאות ניזק בלתי הפיכות בלוטות פלט רוק תחתון כרוני. כדי להתמודד עם תפקוד בלוטת עניים יובש הפה הזה מתפתח, שימור או שיקום של תפקוד הפרשה הוא קריטי. טיפולים חדשניים כדי להג...

הרס בטחונות של רקמות בריאות חשבונות במשך מספר תופעות לוואי מזיקות של טיפולים בסרטן. חלק או שלם של בלוטות הרוק הגדולות שעומדות עם שדות הקרינה נהרס באופן בלתי נמנע. לכן, רוב החולים שעברו הקרנות לחולי סרטן הראש והצוואר, לימפומה צוואר הרחם, או קרינה גוף מלא לפני השתלת מח עצם סובלים אחת מתופעות הלוואי הנפוצות ביותר ומתמשך של קרינה, בלוטת הרוק hypofunction 2-6. תאי acinar מייצר הנוזל של בלוטות הרוק הם רגישים לקרינה. פגיעה בבלוטות הרוק גורמת פוחתת דרסטי של זרימת רוק, מצב המכונה hypofunction רוק כמו. ההפחתה הכרונית בזרימת רוק פוגעת בפעילות אוראלית מפתח כגון לעיסה, בליעה, דיבור, וטעם, אך מהתוצאות החולניות של כאבים עזים, דמעות ריריות, בליעה, זיהומים אופורטוניסטיים, ועששת שיניים מחמירההחולה של רווחה 2,3 לתפקד. מאז אובדן תא הרוק הקשורים הקרנות הוא בלתי הפיך, אין טיפול מתקנת של יובש בפה. טיפול שוטף המתמקד להרגיע סימפטומים עם תחליפי רוק מלאכותיים וסמי prosecretory אינו יעיל להקלה ארוך טווח 6. למרות ששיטות משלוח קרינת שיפור לסייע בהפחתת חומרת המצב, רעילות רקמות בריאות וסיבוכיה להישאר גורם מגביל בטיפול בסרטן 6,7. צעדים מנעו כדי למנוע סיבוכים הקשורים הקרנות הם, אם כן, הופכים לנורמה. רדיו-מגן סוכני scavenge מיני חמצן רדיקלים חופשיים, ואכלוס תא אומנת, או להגביר תיקון DNA הם נבדקים כדי למנוע hypofunction רוק 8-11. הפרשות של בלוטות הרוק אקסוקרינית לנקז לתוך הפה דרך צינורות ההפרשה העיקרית. cannulation פנים הפה של הצינוריות דואר הפרשה להזרקה של חומר ניגוד נעשתה דרך שגרה כמו הליך אשפוז. ניצול בגישה דומה, בלוטות רוק יכולות להיות ממוקדות ישירות לטיפול מקומי 12. מלבד הפחתת הסיכון של תופעות לוואי מערכתיות, החדרת בלוטת retroductal הוסיפה הטבות. ההסדר בשכבה של תאי רוק סביב עץ ductal מאפשר מיקוד של כל תאי אפיתל הרוק, ואת אנקפסולציה סיב המעשים בלוטת כמחסום להפחית התפשטות טיפולית רצויה. בעיקרו של דבר, בלוטות רוק מתאימות באופן אופטימלי לטיפול ממוקד של תחלואים בלוטה כגון hypofunction רוק-induced קרינה. קרינה קונבנציונלית לטיפול בסרטן מועברת במנות קטנות (1.8 - 2.5 Gy / שבריר / יום, חמישה ימים בשבוע) לתקופה של שבועות. לכן, טיפולי רדיו-מגן שמראים יעיל נגד תכנית קרינה ממושכת במודלים ניסיוניים יש השלכה קלינית יותר. Comproפונקצית רוק mised לאחר קרינה מופרדת נרשמה חיות קטנות, אבל מקור קרינה, במינון קטן, ופרוטוקולים בם נעשו שימוש הם 9,10,13 מגוונות. דו&quot;ח זה מקובע שיטות למסירת retroductal כדי וקרינה מקומית של בלוטות submandibular עכברוש באמצעות מקור קרינה חולה-רלוונטי שבריר מנה.

<table><tbody><tr><td>צינורות פוליאתילן תוך-רפואיים (PE10)</td><td>בקטון דיקסון</td><td>427401</td><td></td></tr><tr><td>1/2 סמ"ק מזרק אינסולין U-100</td><td>בקטון דיקסון</td><td>309306</td><td></td></tr><tr><td>דמעות מלאכותיות</td><td>מילר וטרינר אספקה&nbsp;</td><td>5098-9840-64</td><td></td></tr><tr><td>מעקר חרוזים חמים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>תפר משי פרמה יד</td><td>Ethicon</td><td>K833H</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים Graefe</td><td>Fine Science Tools</td><td>11051-10</td><td></td></tr><tr><td>אולימפוס SZX16 מיקרוסקופ סטריאו</td><td>האנט אופטיקה והדמיה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6 MV מאיץ ליניארי</td><td>Elekta</td><td></td><td></td></tr><tr><td>בולוס - ללא עור&nbsp;</td>מנורת חום <td>Civco</td><td>MTCB410</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Braintree Scientific</td><td>HL-1&nbsp; 110 וולט</td><td></td></tr></tbody></table>

retroductal submandibular בלוטת החדרה ונקודות מופרדות הקרנה במודל עכברים של הרוק hypofunction

Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction

רקמות נורמליות השוכנות בתוך שערי הקרינה נפגעות בשוגג. בלוטות הרוק נפגעות לעתים קרובות במהלך הקרנות ראש וצוואר. נזק בלתי הפיך לתאים גורם לאובדן כרוני של תפקוד הרוק הפוגע בפעילות הפה הבסיסית, ומגביר את הסיכון לזיהומים בפה ועששת. תת תפקוד הרוק וסיבוכיו משפיעים באופן חמור על נוחות המטופל. הטיפול הסימפטומטי הנוכחי של המצב אינו יעיל, ויש צורך בטיפולים חדשים יותר כדי להרגיע את המצב. 
בלוטות הרוק הן בלוטות אקסוקריניות, המוציאות את הפרשותיהן לפה דרך צינורות ההפרשה. קנולציה של צינורות אלה מספקת גישה ישירה לבלוטות. אספקה רטרודוקטלית של חומר ניגוד לבלוטות הרוק העיקריות היא הליך שגרתי במרפאות חוץ להדמיה אבחנתית. באמצעות הליך דומה, ניתן לבצע טיפול מקומי בבלוטות. עם זאת, ביצוע טכניקה זו במחקרים פרה-קליניים עם בעלי חיים קטנים מציב אתגרים ייחודיים. במחקר זה אנו מתארים את הטכניקה של מתן רטרודוקטלי בבלוטות תת-לסתיות של חולדות, הליך ששוכלל במעבדתו של ד"ר ברוס באום (NIH)1, ופורסים נוהל להקרנה מקומית של הבלוטה.

התאמת טכניקת sialography פולשנית, טיפול המקומי של בלוטות רוק גדולות אינו ריאלי. ממשל Retroductal בבלוטות רוק עכברוש submandibular נוסה על ידי cannulation פנים פה של הצינוריות של וורטון (איור 2). צינוריות הרוק של וורטון הפתוחות על הגבשושיות תת-לשוניים ממוקמות על רצפת הפה, אבל הפתחים אינן גלויות בקלות. החדרת הצינורית הייתה, אם כן, נעשתה על ידי חיטוט עדין. כדי למנוע דימום לא נעים או ניקוב צינור, שום כוח ששימש בעת הצבת הצינורית. מעבר ה...

תת תפקוד בלוטות הרוק, תופעת לוואי משמעותית של רדיותרפיה בראש ובצוואר מפחיתה את איכות החיים של המטופל. הוכחת היעילות של טיפולים חדשים במודלים של בעלי חיים היא תנאי מוקדם לפני המעבר הקליני. פרוטוקול זה מתאר מתן רטרודוקטי והקרנה מקומית של בלוטות תת-לסתות של חולדות.

Retroductal submandibular בלוטת החדרה ונקודות מופרדות הקרנה במודל עכברים של הרוק hypofunction

Normal tissues that lie within the portals of radiation are inadvertently damaged. Salivary glands are often injured during head and neck radiotherapy. ...

המטרה הכללית של הליך זה היא מתן טיפולים תרופתיים בדרך רטרו-דוקטאלית (בתוך התעלה) לבלוטות התת-לסת כדי להעריך את יעילותם במאבק בדיספונקציה של הרוק. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום של הפרעות בבלוטות הרוק, כגון אילו טיפולים יכולים להגן על תפקוד בלוטות הרוק מפני קרינה או לשחזר אותו. היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא שניתן לטפל בבלוטות הרוק באופן מקומי, ובכך להפחית את הסיכון לתופעות לוואי ברקמות שאינן רצויות לטיפול.בדרך כלל, אנשים שאינם מכירים את השיטה יתקשו בביצועה כיוון שפתחי התעלה אינם נראים, ויש להחדיר את הקנולה אל התעלה באופן עיוור. לפני תחילת הפרוצדורה, חתכו בעזרת סקלפל מקטע של 10 cm של צינור פוליאתילן PE 10, לאחר מכן אחזו בשני קצות הצינור בין האצבע לאגודל של כל יד וחממו את החלק המרכזי של הצינור מעל להבה עדינה, תוך כדי מתיחה זהירה של שני הצדדים כדי להכפיל את אורכו של הצינור שהתרכך. לאחר מכן, השתמשו בסקלפל כדי לחתוך את הצינור במרכזו בזווית של 45 מעלות, כדי לקבל שתי קנולות שכל אחת מהן בעלת קצה מחודד.מתחו את הקצה שאינו מדורג של אחת הקנולות מעל מחט ה-29 gauge של מזרק אינסולין בנפח 0.5cc. לאחר מכן, הסירו את הקנולה ושאבו 220 µL של תמיסת סליין לתוך המזרק. הקפישו את גוף המזרק כדי להוציא בועות אוויר, והחזירו את הקנולה מעל המחט.לחץ על הבוכנה כדי להוציא את האוויר מהקנולה ולהבטיח זרימה חופשית של התמיסה דרך הפחית, וכוון את נפח הסליין במזרק ל-200 microliters. כעת, ודא את רמת הסדציה המתאימה של החולדה באמצעות צביטה בבהוץ ובדיקת רפלקס מיושש, ומריח חומר סיכה לעיניים על הקרניות החשופות. הנח את בעל החיים על פלטפורמת קיבוע ייעודית והשב את השיניים החותכות העליונות על המוט הרוחבי.הקיפו גומייה סביב השיניים החותכות התחתונות כדי למשוך את הלסת למטה, ועגנו אותה לפלטפורמה. לאחר מכן, העבירו תפר סטרילי דרך הלשון והרימו אותה כדי להרים את רצפת הפה.לאחר מכן, השתמשו בבסיס המוסטט (hemostat) כדי לסגור את התפרים והעבירו את ההמוסטט מעל המוט הרוחבי. בשלב הבא, השתמשו במרחיב לחיים בהתאמה אישית כדי להרחיב את הלחיים ובמיקרוסקופ דיסקציה כדי לאתר את הפפילות התת-לשוניות (sublingual papilli) ברצפת הפה. בעזרת פינצטה עדינה, אחזו בקצה המחדר של צינור ה-PE 10 המוכן מראש והכניסו בעדינות את קצה הקניולה אל פתח התעלה בפפילה התת-לשונית.לאחר מכן, השחל את הקנולה שלושה עד חמישה מילימטרים אל תוך התעלה, וודא שהקנולה עוברת דרך התעלה ללא חסימה. לפני החדרת התמיסה המלוחית, הזרק אטרופין תת-עורי לעורף של בעל החיים. עשר דקות לאחר ההזרקה, קבע את הקנולה לפתח התעלה באמצעות טיפה של ציינואקרילט.לאחר שהדבק התייבש, לחץ באיטיות על בוכנת המזרק בקצב של 50 µL לדקה עד שיוזרקו 200 µL של תמיסת סליין לתוך הגלנד. אם נתקלת בלחץ נגדי במהלך ההזרקה, עצור, הוצא את הצינור ולאחר מכן בצע קנולציה מחודשת באמצעות קנולה חדשה. לאחר מכן, סגור את הצינור בעזרת המוסטט והסר בזהירות את המזרק.השאירו את הצינורית בתעלה למשך 30 עד 60 דקות עד שהחיה תחזור להכרה. לאחר מכן, הסירו את התפר המחזיק את הלשון והעבירו את החיה לכלוב נפרד תחת מנורת חימום עד להחלמה מלאה. להחלה מקומית של הקרנה שברית (fractionated irradiation) על בלוטת התת-לסת.צרו שדה הקרנה בצורת חריץ ברוחב שלושה סנטימטרים המקיף את האזור מגבולו התחתון של הלסת התחתונה ועד לחלקו העליון של הגומב (sternum) של החולדה המורדמת במצב שכיבה על הגב. לאחר הנחת בולוס שווה-רקמה ברוחב סנטימטר אחד מעל האזור, כווננו את המרחק בין מקור הקרינה לראש הבולוס ל-100 סנטימטרים, תוך שימוש באלומה פוטונית של ששה מגה-וולט במאיץ ליניארי.הקרינו את בעל החיים ב-2.5 grays למשך זמן החשיפה המתאים. בסיום תקופת החשיפה לקרינה, חממו את בעל החיים במהלך התאוששותו כפי שהודגם זה עתה. במהלך הניסויים הראשוניים, אושש את המיקום הנכון של הקנולה על ידי הזרקת תמיסת hematoxylin או trypan blue לבלוטה והערכת צביעת הבלוטה בבעלי חיים שהורדמו.בלוטות התת-לסת נבחנו כיוון שניתן להקרינן באופן סלקטיבי באמצעות קרינה ממושקת לצוואר, ובכך להימנע מהשפעות קשות מחוץ למטרה בחלל הפה העלולות להשפיע על בריאות בעלי החיים ועל תוצאות הניסוי. ניתוח של השפעות סכמת הקרינה המקוטעת זו על זרימת הרוק שמונה שבועות לאחר ההקרנה מראה כי חשיפה יומית למנות של 2.5 grey מפחיתה בצורה חדה את זרימת הרוק. נצפתה הפחתה של פי 10 בתפוקת הרוק בבעלי חיים שהוקרנו בהשוואה לבעלי חיים שלא הוקרנו.ברגע שהטכניקה נלמדת היטב, ניתן להשלימה תוך מספר דקות אם היא מבוצעת כראוי. בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור להבטיח מעבר חופשי של הקנולה אל תוך תעלת ההפרשה של בלוטת הרוק. לאחר פיתוחה, סללה טכניקה זו את הדרך עבור חוקרים בתחום הפרעות בלוטות הרוק לבחון טיפולים למחלות בלוטות רוק הנגרמות מקרינה וממחלות אוטואימוניות.לאחר צפייה בסרטון זה, צריכה להיות לכם הבנה טובה כיצד לבצע התקנה רטרו-דוקטלית (retroductal installation) בבלוטה התת-לסתרית של החולדה, וכיצד להקרין את הבלוטות באופן מקומי כדי להעריך את היעילות הטיפולית של הפחתת רעילות הקרינה. זכרו כי עבודה עם תרופות גנטיות וחלבון עלולה להיות מסוכנת ביותר, ויש לנקוט תמיד באמצעי זהירות בעת ביצוע הליך זה, כגון הימנעות מדקירות מחט וצמצום חשיפת העור לסוכנים ביולוגיים.

retroductal-submandibular-gland-instillation-localized-fractionated

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פרוטוקול עבור cannulation של בלוטת הרוק עכבר submandibular דרך צינור של וורטון מתואר. לצורך ניסוי זה, הפתרון כחול trypan משמש הצבעים כדי להדגים כיצד טכניקה זו יעילה מספק חליטות לתוך בלוטת ממוקד, ולהציע את האמינות של הגישה החדשה הזו כמו טיפול פוטנציאלי סמים / תא קליניות לגבי רגנרצית של בלוטות הרוק.

Cannulation של בלוטת הרוק באמצעות עכבר Submandibular Duct של וורטון

בוטולינום טוקסין מוזרק לבלוטות הרוק לטיפול בסיאלוריאה. הזרקת רעלן הבוטולינום מונחה אולטרסאונד הן בבלוטת הפרוטיד והן בבלוטת התת-לסת מדגימה יעילות מתמשכת והיעדר תופעות לוואי חמורות.

אולטראסאונד מונחה זריקות בוטולינום טוקסין-A: שיטה של ​​טיפול Sialorrhea

בלוטת הרוק hypofunction הוא תוצאה תכופים של מחלות אוטואימוניות והקרנות. לשחזור הערכה של תפקוד בלוטת הרוק במודלים של העכבר המחלות האלה היא אתגר טכני. . הנה, מתוארת שיטה פשוטה למדידה מדויקת, לשחזור של ייצור רוק בעכברים.

שיטת המדידה של תפקוד בלוטת הרוק בעכברים

אנו מתארים פרוטוקול בניתוח לחשוף ולייצב את בלוטת הרוק submandibular מאתר עבור הדמיה intravital באמצעות מיקרוסקופ intravital זקוף. פרוטוקול זה ניתנת להתאמה בקלות אחרים בלוטות אקסוקרינית של הראש, באזור הצוואר של עכברים ומכרסמים קטנים אחרים.

הכנה של בלוטת הרוק Submandibular מאתר מיקרוסקופ Intravital זקופה

משלוח סמים מקומי נקראות בלוטות הוא עניין בביולוגיה בלוטת הרוק ההבנה ועל ההתפתחות של הריפוי. אנו מציגים פרוטוקול הזרקת retroductal מעודכן ומפורט, שנועדו לשפר את המסירה ודיוק הפארמצבטית ניסיוני. היישום שהוצגו במסמך זה הוא המסירה של חלקיקים פולימרים.

ננו-חלקיק Retroductal הזרקה אל בלוטת Submandibular מאתר

אנו מציגים גישה מפורטת לביצוע אוסף רוק, כולל מיכשור וציוד מאתר את ניתוקה של שלושה בלוטות הרוק הגדולות.

מאתר הערכה תפקודית הרוק באמצעות בעקבות גירוי פילוקרפין Fractionated קרינה

שימוש תלת מימדי בתרבויות אורגאותוגית להמחיש מורפולוגיה וסמנים פונקציונלי של בלוטות הרוק עשוי לספק תובנות הרומן לתוך מנגנונים של נזק רקמות לאחר הקרינה. מתוארים כאן הוא פרוטוקול לסעיף, תרבות, הקרנת, כתם, תמונה 50 – 90 יקרומטר עבה בלוטת הרוק סעיפים לפני ובעקבות חשיפה לקרינה מייננת.

הטיפול בקרינה של תרבויות אורגנוטימית מתוך הלסת התחתונה ובלוטות הרוק פרודה מודלים מפתח Vivo מאפיינים

בלוטות הרוק הוצעו כאתר יעד לרקמות לטיפול גנטי, במיוחד בתחום החיסון על ידי העברת גנים. אנו מדגימים אספקת גנים במודל פרימטים לא אנושיים המשתמש בעירוי פרוטידים מדרדר.

עירוי בלוטת פרוטידים מדרדר דרך צינור סטנסן בפרימט לא אנושי לאספקת גנים וקטורית

הדמיה אימונופלואורסצנטית מוגבלת על ידי היכולת לצפות בתהליכים ביולוגיים מורכבים ותלויי זמן בתמונת מצב אחת בלבד בזמן. מחקר זה מתאר גישת הדמיה חיה שנערכה על פרוסות בלוטות תת-לסתיות של עכברים שנחתכו בחיתוך מדויק. גישה זו מאפשרת תצפית בזמן אמת על אינטראקציות תא-תא במהלך הומאוסטזיס ותהליכי התחדשות ותיקון.

חקירת אינטראקציות תאים-תאים בבלוטת הרוק באמצעות Ex Vivo Live Cell Imaging

פרוטוקול זה מפרט את השיטה לשימוש במכשיר קיבוע שפתיים בביופסיה של בלוטות רוק שפתיים, יחד עם היתרונות הנלווים לה.

מכשיר קיבוע שפתיים מסייע בביופסיית בלוטות הרוק השפתיים למחלת שוגרן

למד שיטת הזרקה רטרודוקטלית לבלוטות הרוק התת-לסתיות בעכברים לטיפול בהיפופונקציה לאחר קרינה. טכניקה זו מאפשרת טיפול מקומי עם פחות תופעות לוואי מערכתיות.

Retroductal submandibular בלוטת החדרה ונקודות מופרדות הקרנה במודל עכברים של הרוק hypofunction

גלה סרטונים נוספים