Name: מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: למד מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים נעים בחופשיות באמצעות טלמטריה רדיולוגית מושתלת. שיטה זו מאפשרת ניטור רציף של פרמטרים פיזיולוגיים ללא שימוש באלחוש או אילוץ.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות (NIH/NHLBI) [מענק מס. HL114869] והתמיכה מ-UTHSC ל-SM.

הצהרה אתיקה: כל הנהלים בעלי חיים המוזכרים המאמר וידאו זה היו נבדקה ואושרה על ידי טיפול בבעלי חיים ועדת שימוש (IACUC) באוניברסיטת מרכז המדע טנסי הבריאות. הערה: השתמש מכשירים המיקרו-כירורגיה סטרילי לאורך כל ההליך הכירורגי. מכשירי ניתוח עשויים להיות מעוקר ניצול מעקר אינפרא אדום בטמפרטורת חיטוי אופטימלית של 1,500 ° F (815.6 מעלות צלזיוס). Telemeters ניתן לעשות שימוש חוזר, עם זאת, לפני הכנסתו בשנת החיה לוודא לעקר את המשדר כולו בהתאם להוראות היצרן וכי קצה הצנתר כבר ומלא עם ג&#39;ל מיוחד המסופק על ידי היצרן. 1. בחיות מעבדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבל אישור IACUC עבור כל הניסויים אשר יבוצעו. התייעצות עם מוסדיים IACUC מומלץ מאוד בנוגע לדרישות לשימוש כאבים שלאחר הניתוח לאחר הליך זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את החיות גחדרי שבשליטת limate בעל טמפרטורת סביבה של 21 מעלות צלזיוס, 60% לחות יחסית, ואת מחזור אור כהה 12-hr עם גישה חופשית למזון ומים. הערה: מכיוון שהגוף העכבר צריך להתאים את החללית טלמטריה (approximatively 1 ס&quot;מ קוטר x 2 ס&quot;מ), עדיף להשתמש בעכברים השוקלים 20 גרם או יותר. </li></ol> 2. הרדמה והכנה Operative <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את העכבר באמצעות סולם דיוק ולהקליט את משקלו. הקפד להתמודד עם החיה בעדינות ובשקט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה לתוך תא אינדוקציה ולסגור אותו. גדר קצב זרימת חמצן ברמה של 0.5 ליטר / דקה ולהגדיר ריכוז isoflurane ב 4 - 5%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר העכבר מאבד את הכרתו, למקם אותה על צלחת התחממות גוף נשמרה ב 36 - 37 מעלות צלזיוס. לשמור על הרדמה באמצעות nosecone עם סט isoflurane ב -2% (לשמור על קצב הזרימה ב 0.5 L / min). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את אזורי פעולה על ידי הסרת השיער מהחלק האחורי של הצוואר tהוא היבט הגחון של הצוואר על ידי החלת קרם להסרת שיער. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פנק את אתר החתך עם 3 בקשות של שיחים כירורגית (פתרון בבטאדין) לסירוגין עם אלכוהול איזופרופיל 70%. </li></ol> 3. כירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר במצב שכיבה. בדוק רפלקסים על ידי צובט את הרגל, ולהתאים הרדמה עד שאין תגובה. עושים חתך קו האמצע כ 1 ס&quot;מ מתחת לצוואר של העכבר באמצעות אזמל. בצד השמאלי של החתך ליצור מרחב תת עורית על ידי הפרדת העור בקפידה מתוך רקמת חיבור הבסיסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את העכבר, ולהשתמש אזמל לעשות חתך בעור של כ 1.5 ס&quot;מ בצד שמאל הגבי מאחורי עצם השכם. צור בכיס תת עורית לאורך האגף של חיה גדולה מספיק כדי להכיל את התקן. הכנס את המשדר לכיס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס מהדק hemostat קטן חתך הלוך לתמרן אותו מתחת לעור לכיוון הקדמיפתיחת צוואר. באמצעות מהדק hemostat מוכנס, לתפוס בעדינות צינור פוליאתילן רעיל (4 ס&quot;מ אורך x 1 מ&quot;מ ID). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משוך את hemostat חזרה דרך המנהרה את חתך לרוחב בחלק האחורי עד בצינור שבולט משני חתך בבטן ועל הגב, לשחרר את הצינור מתוך hemostat. מאחור, הכנס את חיישן קטטר לתוך הצינור למנהרת קצה הקטטר חישת לחץ דרך הצוואר. מתוך קדמי הצוואר, למשוך ולהסיר את צינור פוליאתילן לסגור את החתך הגבה באמצעות קליפים מתכת. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד בזהירות את בלוטות mandibular באמצעות applicators טיפ גפן סטרילי לסגת בלוטת mandibular שמאל באמצעות וו ושהייה אלסטי. באמצעות קנס שקצו מלקחיים מעוקלים, לאתר את העורק הראשי בצדו השמאלי של קנה הנשימה. שמור את האתר כירורגית סטרילית ידי הצבת ואבטחת וילון סטרילית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לבודד את הכלי מן הרקמה הסובבת בעדינות להפריד אתהעצב התועה (לבנבן בצבע) כי הוא לאורך עורק התרדמה מן העורק. היזהר שלא לחתוך או נזק עצבי או העורק. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור שלוש חתיכות של לא נספגים 7-0 תפר מתחת לקטע עורק התרדמה מבודד. לקשור את תפר גולגולתי לסגור את זרימת הדם. משוך את התפר קרוב עצם החזה כדי לחסום זמני של זרימת דם מאבי העורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך קשר רופף באמצעות התפר באמצע. זה ישמש כדי לאבטח את הקטטר הספינה. חותכים חתך קטן לתוך העורק בין הגולגולת ואת התפרים sternal באמצעות מיקרו מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפוס את הקטטר עם מלקחי cannulation כלי מיוחדים, נזהר שלא לסחוט את הקטטר כדי למנוע אובדן ג&#39;ל מן החללית. בעדינות, לתפוס את העורק עם מלקחי פינצטה בסדר קצה מעוגל, לאחזר את הקטטר, ולהכניס אותו הספינה דרך החתך הקטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדקו את הצומת תפר באמצע סביב עורק בעדינות לקדם את החתולמכירה. משחררים בעדינות את תפר כי הוא הפרוקסימלי אל עצם החזה ולהמשיך לקדם את הקטטר אל אבי העורקים רוחבי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את הסימן על קטטר שנותן מדד משוער של כמה רחוק את הקטטר צריך להיות מוכנס. לאחר הנקודה הוא הגיע, בעדינות להדק הן נמוך יותר התפר העליון סביב הקטטר. קטטר מאובטח על עורק הצוואר על ידי קשרי תפר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגירת החתך בעור עם תפר 5-0 שאינם נספגים. לאחר סגור, לאטום את החתך עם דבק רקמות. </li></ol> 4. מדידות Recovery ו- BP כירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג בעלי חיים מקרוב לשובו של תנוחות נורמלי והתנהגויות. במהלך שיכוך כאבי ניהול &#39;תקופה של 24 שעות לאחר ניתוח עפ&quot;י הוראות על ידי וטרינר צוות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר החיות התאוששו (5 - 7 ימים לאחר הניתוח), לשכן אותם בנפרד בכלוב עכבר רגיל מונח על גבי צלחת מקלט טלמטריה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סובבו את TR מושתלansmitters &quot;על&quot; ו &quot;off&quot; באמצעות מכשיר מגנטי ממוקם קרוב בקצרה את החיה מן מחוץ לכלוב. </li></ol>

<ol><li>Danaei, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+preventable+causes+of+death+in+the+United+States%3A+comparative+risk+assessment+of+dietary%2C+lifestyle%2C+and+metabolic+risk+factors%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">The preventable causes of death in the United States: comparative risk assessment of dietary, lifestyle, and metabolic risk factors.</a> PLoS Med. 6 (4), e1000058(2009).</li>
<li>Dornas, W. C., Silva, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+the+study+of+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biosci%22%5BJournal%5D)">Animal models for the study of arterial hypertension.</a> J Biosci. 36 (4), 731-737 (2011).</li>
<li>Henze, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+alterations+in+heart+rate+variability%2C+baroreflex+sensitivity%2C+and+anxiety-like+behaviors+during+development+of+heart+failure+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent alterations in heart rate variability, baroreflex sensitivity, and anxiety-like behaviors during development of heart failure in the rat.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 295 (1), H29-H38 (2008).</li>
<li>Hoffmann, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+tempol+prevents+hypertension%2C+proteinuria%2C+and+poor+feto-placental+outcomes+in+BPH%2F5+mouse+model+of+preeclampsia%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Chronic tempol prevents hypertension, proteinuria, and poor feto-placental outcomes in BPH/5 mouse model of preeclampsia.</a> Hypertension. 51 (4), 1058-1065 (2008).</li>
<li>Lerman, L. O., Chade, A. R., Sica, V., Napoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+hypertension%3A+an+overview%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lab+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Animal models of hypertension: an overview.</a> J Lab Clin Med. 146 (3), 160-173 (2005).</li>
<li>Johns, C., Gavras, I., Handy, D. E., Salomao, A., Gavras, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+experimental+hypertension+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Models of experimental hypertension in mice.</a> Hypertension. 28 (6), 1064-1069 (1996).</li>
<li>Vatner, S. F., Braunwald, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+control+mechanisms+in+the+conscious+state%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular control mechanisms in the conscious state.</a> N Engl J Med. 293 (19), 970-976 (1975).</li>
<li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+Pressure+Monitoring+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Arterial Pressure Monitoring in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 1, 105-122 (2011).</li>
<li>Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+simultaneous+measurement+of+mouse+systolic+arterial+blood+pressure+by+radiotelemetry+and+tail-cuff+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 286 (6), H2408-H2415 (2004).</li>
<li>Kurtz, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+blood+pressure+measurement+in+humans+and+experimental+animals.+Part+2%3A+Blood+pressure+measurement+in+experimental+animals%3A+a+statement+for+professionals+from+the+subcommittee+of+professional+and+public+education+of+the+American+Heart+Association+council+on+high+blood+pressure+research%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Recommendations for blood pressure measurement in humans and experimental animals. Part 2: Blood pressure measurement in experimental animals: a statement for professionals from the subcommittee of professional and public education of the American Heart Association council on high blood pressure research.</a> Hypertension. 45 (2), 299-310 (2005).</li>
<li>Kurtz, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+blood+pressure+measurement+in+animals%3A+summary+of+an+AHA+scientific+statement+from+the+Council+on+High+Blood+Pressure+Research%2C+Professional+and+Public+Education+Subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Recommendations for blood pressure measurement in animals: summary of an AHA scientific statement from the Council on High Blood Pressure Research, Professional and Public Education Subcommittee.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (3), 478-479 (2005).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

רדיו-טלמטריה מושתלת השתפרה באופן משמעותי בעשור האחרון; גודל חללית קטן הופך את השתל פחות טראומטי עבור החיה, חיי סוללה ממושכים עוזרים להפחית את העלויות, ותדרי מַד מֶרְחָק עצמאיים למנוע crosstalk בין מקלטים. טלמטריה נחשב המדינה- of-the-art שיטה לאיסוף מגוון רחב של פרמטרים פיזיולוגיים לנוע חיות בחופשיות ללא חפצים הקשורים לשימוש של איפוק, אינטראקציה אנושית, או הרדמה אשר נדרשים על ידי טכניקות אחרות 8,9. עם ז...

יתר לחץ דם הוא אחד מגורמי הסיכון העיקריים למחלות לב וכלי דם, ניתן לטעון שזה בעיה בריאותית ציבורית גדולה הן במדינות מפותחות ומתפתחות 1. במודלים של בעלי חיים כמה לחץ דם ניסיוני פותחו לחקות תגובות יתר לחץ דם כמו אלה שנצפו אצל בני אדם 2. בין היתר, את העכבר אמבולטורי מייצג מודל מצוין ללמוד את ספר בראשית ואת ההתקדמות של יתר לחץ דם המאפשר בניתוח vivo של התוצאות של חשיפה כרונית ליתר לחץ דם. לחץ דם (BP) ניטור בעכברים סייע לחוקרים לפענח מספר מנגנונים המעורבים בתחום הפיזיולוגיה פתופיזיולוגיה של מחלות כגון כשל יתר לחץ דם ולב 3, 4. ואכן, מניפולציה של גנום העכבר מותר דור מהונדס או מודלים במיקוד הגן מתאים ללימוד יתר לחץ דם 5, 6. עם זאת, אפילו מניפולציה עדינהשל עכברים מודעים גורם ריגושים שיכולים להציג ממצאים פוטנציאליים במהלך רכישת נתונים, תוך שימוש הרגעה או כדורי הרגעת הערכה משפיע לחץ דם 7. היבטים אלה חשובים במיוחד וחייב להילקח בחשבון כאשר מנסים ניטור BP לטווח ארוך. ישנן מספר דרכים כדי להקליט BP בעכברים, וכן השוואה בין הטכניקות הנפוצות ביותר הזמינים כיום נדונה במקום אחר 8, 9. עם זאת, המלצות AHA למדידת BP למסקנה כי מדידת תוך עורקים של BP הם העדיפו בדרך כלל בגלל יכלו למדוד ישירות BP על פני תקופה ארוכה של זמן 10. רדיו-טלמטריה בשילוב עם מדידה ישירה של לחץ הדם הוא המדינה- of-the-art שיטה לניטור תפקודים פיזיולוגיים ב ער לנוע בחופשיות בחיות מעבדה תוך מזעור מתח וחפצים הקשורים לסביבה 9, 11.הרדיו-טלמטריה מציעה את היכולת לאסוף לחץ דם אוטומטי, קצב לב, טמפרטורת גוף ופעילות חיה מחיות מודעות מרובות. למרות מתודולוגיה זו הופכת לפופולרית מאוד במעבדות רבות, השתלת הרדיו-טלמטריה בעכברים יכולה להיות מאתגרת מבחינה טכנית. כאן אנו מראים צעד-אחר-צעד פרוטוקול הממחיש כיצד להשתיל מתמר לחץ בעכברים. הטכניקה כוללת החדרת תת עורית של החללית בגוף העכבר, לתעל את הקטטר לצוואר וקדימה ליד קשת אבי העורקים דרך עורק התרדמה השמאלי. נתונים מתועדים מרחוק מוצגים חיים על צג המחשב. נתונים מאוחסנים גם עבור &quot;off-line&quot; ניתוח.

<table><tbody><tr><td>מערכת הרדמה לבעלי חיים קטנים</td><td>Kent Scientific Corp, טורינגטון, קונטיקט, ארה"</td><td></td>ב <td>מערכת הרדמה לבעלי חיים קטנים בזרימה נמוכה</td></tr><tr><td>מחמם רפידות ומד טרמומטר עכבר</td><td>Kent Scientific Corp, Torrington, קונטיקט, ארה"</td><td></td><td>ב מאפשר ניטור טמפרטורת הגוף, ובקרה הומותרמית בבעלי חיים</td></tr><tr><td>קטנים מיקרוסקופ דו-עיני</td><td>Kent Scientific Corp, Torrington, קונטיקט, ארה"</td><td>בגוף משקפת KSCXTS-1121</td><td>עם מוט מעמד בום ומלקחיים LED</td></tr><tr><td>Hemostat Corps</td><td>קנט סיינטיפיק קורפ, טורינגטון, קונטיקט, ארה"ב</td><td>INS750451</td><td>משמש להדק כלי דם או לתאר</td></tr> תפרים <tr><td>מתכת קטנים, 7 מ"מ, נירוסטה</td><td>קנט סיינטיפיק קורפ, טורינגטון, קונטיקט, ארה"ב</td><td>INS750344</td><td>משמש לסגירת עור</td></tr><tr><td>תמיסת בטדין Purdue</td><td>Products L.P., סטמפורד, קונטיקט, ארה"ב</td><td>NDC-67618-150-01</td><td>תמיסה מקומית של 10% פובידון יוד</td></tr><tr><td>תמיסת מלח רגילה</td><td>מעבדות Abott</td><td>04930-04-10</td><td>הדרושה למניעת התייבשות רקמות.</td></tr><tr><td>Nair (תחליב מסיר שיער)</td><td></td><td></td><td>דרוש להסרת פרווה מאתר החתך/ניתוח</td></tr><tr><td>תפר משי צמה</td><td>Teleflex Medical OEM, קובנטרי, קונטיקט, ארה"ב</td><td></td><td>גודל 5.0, 6.0, 7.0</td></tr><tr><td>אתנול</td><td></td><td>2716</td><td>70% אתנול לחיטוי</td></tr><tr><td>מספריים אביב&nbsp;</td><td>כלי מדע עדין</td><td>15000-10</td><td>לדיסקציה קלה</td></tr><tr><td>מספריים (בזווית לצד)</td> <td>כלי מדע עדין</td><td>14063-011</td><td>מס' 3 ידית</td></tr><tr><td>להב</td><td></td> אזמל <td>2976-0</td><td>מס' 10</td></tr><tr><td>מלקחיים (מעוקלים)</td> <td>כלי מדע עדין</td><td>11150-10</td><td>להחזקת רקמות</td></tr><tr><td>מלקחיים (ישרים)</td> <td>כלי מדע עדין</td><td>11151-10</td><td>להחזקת רקמות</td></tr><tr><td>מחזיק מחט&nbsp;</td><td>כלי מדע עדין</td><td>12002-12</td><td>לתפירת</td></tr><tr><td>אף מחט עדינה מלקחיים</td><td>כלי מדע עדין Isoflurane</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>הנרי שיין&nbsp; בריאות בעלי חיים, מלוויל, ניו יורק, ארה"</td><td></td><td>ב חומר הרדמה אינהלציה כללי</td></tr><tr><td>Sterilizer</td><td>Benchmark Scientific, 116 Corporate Blvd, South Plainfield, NJ, ארה"ב</td><td>B1000</td><td>לעקר כלים כירורגיים&nbsp; תוך 5-10 שניות באמצעות חימום אינפרא אדום</td></tr><tr><td>רפידות גזה Johnson</td><td>& ג'ונסון, ניו ברונסוויק, ניו ג'רזי, ארה"</td>ב <td>JJ8513</td><td>לשימוש לניקוי פצעים, הכנה, קרצוף או חבישה</td></tr><tr><td>של מכשיר טלמטריה</td><td>מדעי הנתונים הבינלאומי, סנט פול, מינסוטה, ארה"</td>ב <td>DSI-PA-C10</td><td>לרישום לחץ דם בעכברים הנעים בחופשיות</td></tr><tr><td>מערכת מקלט טלמטריה&nbsp; משולב עם PC</td><td>Data Sciences International, סנט פול, מינסוטה, ארה"</td><td></td><td></td></tr>ב <tr><td>Tubing</td><td>Instech Laboratories, פלימות' פגישה, הרשות הפלסטינית ארה"ב</td><td>BTPE-90</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים לקנולציה של כלי דם, 13 ס"מ, 0.5 מ"מ</td><td>OD World Precision Instruments</td><td>503374</td><td>מלקחיים מיוחדים לקנולציית כלי</td></tr><tr><td>דם דבק רקמות</td><td>3M מוצרים לטיפול בבעלי חיים, סנט פול, מינסוטה, ארה"ב</td><td>NAC מס':&nbsp; 11380041</td><td>משתמשים לסגירת פצעים קלים, ולעתים קרובות מבטלים את הצורך בתפרים ו/או תחבושות</td></tr><tr><td>משקל שקילה&nbsp;</td><td></td><td>איזון מעבדה אנליטי מדויק</td> <td>BB300</td></tr></tbody></table>

מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

במהלך הפיתוח של סוכני vasoactive חדשים, ניטור לחץ דם העורקי הוא חיוני על מנת לאמוד את היעילות של התרופות החדשות המוצעות. ואכן, מחקר התמקדות לגילוי מטרות טיפוליות פוטנציאליות חדשות באמצעות עכברי שינוי גנטי שגרמו דורש הערכה אמינה, לטווח ארוך של הווריאציה בלחץ העורקי המערכתית. נכון לעכשיו, תקן הזהב עבור קבלת מדידות ארוכות טווח של לחץ דם בעכברים אמבולטורי משתמש רדיו-משדרים מושתלים, הדורשים cannulation העורק. טכניקה זו מבטלת את צורך קשירה, ריסון, או הרדמת החיות אשר מציגות מתח וחפץ במהלך דגימת נתונים. עם זאת, ניטור לחץ הדם העורקי בעכברים באמצעות צנתור יכול להיות מאתגר למדי בשל גודלו הקטן של העורקים. כאן אנו מציגים צעד אחר צעד מדריך כדי להמחיש את פסוקי מפתח קריטיים עבור השתלה תת עורית מוצלחת של משדרי רדיו ג עורק התרדמהannulation בעכברים. אנו גם דוגמאות של פעילות לחץ דם לזמן ארוך שנלקחו מעכברים לנוע בחופשיות לאחר תקופה של התאוששות לאחר ניתוח. בעקבות הליך זה יאפשר הקלטות לחצו דם ישיר אמינות מחיות מרובות בו זמנית.

נתונים אלו יכולים להירכש מרחוק על ידי כונס נכסים; עקבות הם דמיינו על מסך מחשב עבור בקרת איכות (איור 1 א). פרטים כגון זיהוי בעלי חיים, לחץ דם דיאסטולי, לחץ דם סיסטולי גם מוצגים (איור 1b). עורקי BP ניתן להקליט ברציפות (24/7), או עבור בפרקי זמן קצרים מתוכנת (כלומר, 60 שניות רכישת כל שעה). נתונים אלו יכולים להיות מאוחסנים באופן אוטומטי דיסק קשיח לצורך ניתוח מאוחר יותר. בממוצע נתוני BP מתוך הקלטה רציפה 3 ימים מ...

מטרת פרוטוקול זה היא להעריך את לחץ הדם המערכתי בעכברים הנעים בחופשיות באמצעות מכשירי רדיו-טלמטריה מושתלים.

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

מטרתו של פרוטוקול זה היא להעריך את לחץ הדם המערכתי בעכברים בהכרה הנעים בחופשיות, באמצעות מכשירים רדיוטלמטריים להשתלה. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום המחלות הווסקולריות ומאפשרת הערכה של גורמים רבים המעורבים בבקרת לחץ הדם. היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת איסוף של מגוון רחב של פרמטרים פיזיולוגיים מבעלי חיים הנעים בחופשיות, ללא הארטיפקטים הקשורים לשימוש בריסון, אינטראקציה אנושית או הרדמה, הנדרשים בטכניקות אחרות.שכנו את בעלי החיים למחקר זה בטמפרטורה של 21 degrees Celsius עם 60% relative humidity תחת מחזור של 12 שעות אור וחושך, ובגישה חופשית למזון ומים. שקלו עכבר נבחר, תוך טיפול עדין ורגוע בו. מכיוון שגוף העכבר חייב להתאים לגודל הגשש הטלמטרי, על העכבר לשקול לפחות 20 grams.כדי להשרות הרדמה, השתמשו בתא השראה עם 4% עד 5% isoflurane בזרימה של 0.45 liters per minute. העבירו את העכבר המעולף ללוח חימום, וספקו לו 2% isoflurane באמצעות קונו לאף. לאחר מכן, ודאו את מצב ההרדמה באמצעות צביטה בבוהן.אם העכבר אינו מגיב, המשיכו להסרת שיער מהצד הוונטרלי של צווארו באמצעות קרם להסרת שיער. לאחר מכן, נגבו את השיער ואת עודפי הקרם, ושפשפו את העור לניקוי באמצעות שלושה יישומים לסירוגין של betadine ו-70% isopropyl alcohol. ניתן להשתמש שוב בטלמטרים עבור ניסוי זה אם הם עומדו בסטריליזציה בהתאם להוראות היצרן וקצות הקטטרים שלהם מולאו מחדש בג'ל של היצרן.כעת, כאשר העכבר נמצא במצב שכיבה על הגב (supine), בצעו חתך של סנטימטר אחד בקו האמצע מתחת לצוואר העכבר באמצעות סקלפל. בצד שמאל של החתך, צרו חלל תת-עורי על ידי הפרדה זהירה של העור מרקמת החיבור שמתחתיו. לאחר מכן, הפכו את העכבר והשתמשו בסקלפל כדי לבצע חתך של 1.5 סנטימטר בצד הגבי השמאלי מאחורי השכמה.צרו שם כיס תת-עורי גדול מספיק כדי להכיל את המכשיר. כעת הכניסו את המשדר אל תוך הכיס. לאחר מכן, הכניסו תפס המוסטט קטן דרך החתך האחורי והעבירו אותו בתת-העור לכיוון הפתח הקדמי של הצוואר.באמצעות התפס, אחזו בעדינות בצינור פלסטיק באורך ארבעה סנטימטרים ומשכו את ההמוסטט חזרה דרך המנהרה והחוצה דרך החתך הלטרלי בגב. שחררו את התפס מהצינור ברגע שהוא בולט הן מהחתך הבטני והן מהחתך הגבי. כעת, הכניסו מהגב את חיישן הקטטר אל תוך הצינור כדי להעביר את קצה קטטר מדידת הלחץ דרך הצוואר.לאחר מכן, משכו והוציאו את צינור הפוליאתילן מהצוואר בכיוון קדמי (anterior) וסגרו את החתך הגבי (dorsal) באמצעות סיכות מתכת. בשלב הבא, הפרידו בזהירות את בלוטות הלסת התחתונה (mandibular glands) באמצעות מקלוני צמר גפן. לאחר מכן, הרחיקו את בלוטת הלסת התחתונה השמאלית באמצעות וו קיבוע אלסטי.כעת, בעזרת פינצטה מעוקלת בעלת חוד דק, אתרו את העורק הקרוטיד (carotid artery) לאורך הצד השמאלי של הקנה ובודדו בזהירות את כלי הדם מהרקמה שמסביבו. לאחר מכן, הפרידו בעדינות את עצב הוגוס (vagus nerve) מהעורק הקרוטיד, תוך הקפדה לא לחתוך או לפגוע בעצב או בעורק. לאחר ההפרדה, העבירו שלוש פיסות של תפר 7-0 שאינו נספג מתחת לעורק הקרוטיד המבודד, וקשרו את התפר הקרניאלי כדי לחסום את זרימת הדם.משכו את התפר הקרוב ביותר לעצם החזה כדי לחסום זמנית את זרימת הדם מהאאורטה. כעת, קשרו קשר רפוי באמצעות התפר האמצעי כדי לקבע את הקטטר. לאחר מכן, בצעו חתך קטן בעורק בין התפרים באמצעות מיקרו-מספריים.השתמשו בפינצטה מיוחדת לקנולציה של כלי דם כדי לקבע בעדינות את הקטטר, כך שהפרוב לא יידחף החוצה. לאחר מכן, השתמשו בפינצטה כדי לתפוס בעדינות את העורק. כעת הוציאו את הקטטר והחדירו אותו לכלי הדם דרך החתך הקטן.השלב הקריטי ביותר בפרוטוקול זה הוא הכנסת הגשש אל תוך כלי הדם. לכן, ודאו שאתם רגועים ויושבים בנוח בעת ביצועו, מכיוון שקואורדינציית ידיים טובה היא קריטית לשלב זה. לאחר מכן, הדקו את קשירת התפר המרכזית סביב העורק והחדירו בעדינות את הקטטר.לאחר מכן, שחררו בעדינות את התפר הפרוקסימלי לעצם הסטרנום והמשיכו להחדיר את הקטטר לעבר האורטה הרוחבית. בעת החדרת הקטטר לעורק התרדי (carotid artery), חשוב להסתכל על קצה המיקרוסקופ של הפרובה. החדרה רחוקה מדי תגרום לחסימה של האורטה ולמות העכבר.לאחר שהקטטר הוכנס עד לסימון הנכון, הדק בעדינות הן את התפר התחתון והן את התפר העליון מסביב לקטטר כדי לקבע אותו לעורק הקרוטיד. לבסוף, סגור את חתך העור באמצעות תפר 5-0 שאינו נספג ואטום את החתך בעזרת דבק רקמות. לאחר הניתוח, עקוב אחר העכבר עד אשר יפגין תנוחות והתנהגויות נורמליות.במהלך 24 השעות הראשונות, ניתן משככי כאבים בהתאם להנחיות הווטרינר של המוסד. לאחר שהבעלי החיים התאוששו, חמישה עד שבעה ימים לאחר הניתוח, שכנו אותם באופן פרטני בכלוב עכברים רגיל המוצב מעל ללוח מקלט הטלמטריה. כדי לאסוף נתונים, מקמו את כלוב העכבר מעל ללוח מקלט טלמטריה והפעילו את המשדר באמצעות המכשיר המגנטי של היצרן.לאחר הפרוצדורה המתוארת, ניתן לאסוף נתונים מרחוק באמצעות מקלט. העקבות מוצגים על מסך המחשב לצורך בקרת איכות. פרטים כגון מזהה בעל החיים, לחץ דם דיאסטולי וסיסטולי ותאריך האיסוף מוצגים אף הם.ניתן להקליט את לחץ הדם העורקי באופן רציף או במרווחי זמן קצובים. ממצא בולט העולה מהקלטות רציפות של לחץ דם בעכברים הוא שהן עוקבות אחר מקצב צירקדי. לאחר צפייה בסרטון זה, תגבירו את הבנתכם לגבי האופן שבו מטמיעים חיישני טלמטריה לניטור בסיסי.ברגע שתשלטו בטכניקה, ניתן לבצעה תוך 30 דקות אם היא מבוצעת כראוי.

long-term-blood-pressure-measurement-freely-moving-mice-using

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

ערוץ 8-CODA תפוקה גבוהה לא פולשני לחץ דם מערכת מודד את לחץ הדם עד 8 עכברים או חולדות בו זמנית. מערכת זו זנב השרוול משתמשת בלחץ נפח הקלטה (הציבורי של ורמונט) כדי למדוד את לחץ הדם על ידי קביעת נפח הדם הזנב.

מדידת לחץ דם בעכברים באמצעות לחץ נפח הקלטה, שיטת זנב השרוול

טכניקה כירורגית להשתלה של משדרי טלמטריה זמינים מסחרית המשמש למדידה רציפה של biopotential (חד להוביל ECG), קצב הלב, טמפרטורת הגוף הליבה בפעילות של תנועה בעכברים נע בחופשיות מוצג. המלצות פרוטוקולים לטיפול שלאחר הניתוח לבין הקלה על כאב, שיפור התאוששות, הרווחה שיעור ההישרדות מוצגים גם.

השרשה של משדרי Radiotelemetry מניבים נתוני אק&quot;ג, קצב הלב, טמפרטורת הגוף Core ו פעילות חינם נעים עכברי מעבדה

הסרט הזה מדגים כיצד לרכוש פרמטרים המודינמיים מערכתיים וכבדים בעכברים. כל הניטור כולל רכישה של פרמטרים חיוניים, לחץ מערכתי בדם, לחץ ורידים מרכזיים, קצב זרימת עורק כבד נפוץ, ולחץ וריד שער, כמו גם את קצב זרימת הפורטל בעכברים.

ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים

עכברים ומורדמת התערוכה-פיזיולוגיים לחץ דם סיסטמי, שמונע את הערכה משמעותי של הטון האוטונומית נתון את הקשר האינטימי בין לחץ הדם ואת מערכת העצבים האוטונומית. לפיכך, התווה שיטה פעילות במקביל להקליט העצבים הסימפתטית כליות, לחץ דם עם עירוי תוך ורידי בעכברים בהכרה.

בגישה חדשנית עבור הקלטה בו זמנית של פעילות העצבים הסימפתטית כליות, לחץ דם עם עירוי תוך ורידי, בהכרה, עכברים ערככם.

כאן, אנו מתארים הכנה הקלטה בו זמנית של אלקטרוקרדיוגרם ואת לחץ הדם התוך עורקי (BP) בחולדות ניסיוני, אשר ניתן לעשות עם ציוד סטנדרטי במתקנים בעלי חיים, ניתן להחיל על פיזיולוגית או תרופתי מחקרים לחקור מנגנונים פתוגניים או טיפולית ברפואה לב וכלי דם.

ההקלטה סימולטני אלקטרוקרדיוגרם ודם פולשנית בלחץ מדידה בחולדות

הברופלקס הוא מנגנון ויסות קצב הלב על ידי מערכת העצבים האוטונומית בתגובה לשינויים בלחץ הדם. אנו מתארים טכניקה כירורגית להשתלת משדרי טלמטריה למדידה רציפה וסימולטנית של אלקטרוקרדיוגרמה ולחץ דם בעכברים. זה יכול לקבוע רגישות ספונטנית baroreflex, סמן פרוגנוסטי חשוב למחלות לב וכלי דם.

השתלת משדרי אק"ג ולחץ דם טלמטריים משולבים לקביעת רגישות ספונטנית לברפלקס בעכברים מודעים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מדידה רציפה ארוכת טווח של זרימת הדם הכלייתית בחולדות מודעות ובמקביל רישום לחץ דם עם צנתרים מושתלים (מלאים בנוזלים או בטלמטריה).

מדידה מתמשכת ארוכת טווח של זרימת הדם הכלייתית בחולדות מודעות

פרוטוקול זה מספק הליך שלב אחר שלב לביצוע מתן מינון בולוס תוך ורידי מרובים וניטור המודינמי פולשני בעכברים. חוקרים יכולים להשתמש בפרוטוקול זה לבדיקת תרכובת טיפולית עתידית ליתר לחץ דם בעורק הריאה.

מינון בולוס תוך ורידי מרובים והערכה המודינמית פולשנית במודל יתר לחץ דם של עורק ריאתי בעכבר הנגרם על ידי היפוקסיה

כאן, אנו מתארים שיטה פשוטה להשתלת מוניטור סוכר רציף מסחרי המיועד לחולים על עכברים ומספקים את הסקריפטים לניתוח התוצאות.

ניטור סוכר רציף פשוט בעכברים הנעים בחופשיות

מודל Murine לפגיעה ריאות הנגרמת ההנשמה הוא כלי חשוב ללמוד פציעה ריאות...

לחץ אוורור מבוקר כדי לגרום פגיעה ריאות חריפה על עכברים

למד מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים נעים בחופשיות באמצעות טלמטריה רדיולוגית מושתלת. שיטה זו מאפשרת ניטור רציף של פרמטרים פיזיולוגיים ללא שימוש באלחוש או אילוץ.

מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה

גלה סרטונים נוספים