Name: דור של Microtumors שימוש 3D אדם Biogel תרבות מערכת תאי Glioblastoma נגזרות חולות להרכבת פרופיל Kinomic ובדיקת תגובה לתרופה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: למד ליצור מערכת תרבית מיקרו-גידולים תלת-ממדית מגליובלסטומה נגזרת חולים לבדיקת תרופות בקצב גבוה וניתוח קינומי. שיטה זו מאפשרת חקר מדויק של תגובות שונות לטיפול בין מטופלים שונים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

נתמך על ידי מענק R21 NIH (PI: ג Willey, CA185712-01), בפרס נבג גידול במוח (PD: GY גילספי, P20CA 151,129-03) וחוזה SBIR (PI: ר &#39;סינג, N43CO-2,013-00,026).

<ol><li>Ohgaki, H., Kleihues, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population-based+studies+on+incidence%2C+survival+rates%2C+and+genetic+alterations+in+astrocytic+and+oligodendroglial+gliomas%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuropathol+Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Population-based studies on incidence, survival rates, and genetic alterations in astrocytic and oligodendroglial gliomas.</a> J Neuropathol Exp Neurol. 64 (6), 479-489 (2005).</li>
<li>Wen, P. Y., Kesari, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malignant+gliomas+in+adults%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Malignant gliomas in adults.</a> N Engl J Med. 359 (5), 492-507 (2008).</li>
<li>Thumma, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+pretreatment+clinical+factors+on+overall+survival+in+glioblastoma+multiforme%3A+a+Surveillance+Epidemiology+and+End+Results+%28SEER%29+population+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Effect of pretreatment clinical factors on overall survival in glioblastoma multiforme: a Surveillance Epidemiology and End Results (SEER) population analysis.</a> World J Surg Oncol. 10 (75), (2012).</li>
<li>Furnari, F. B., Cloughesy, T. F., Cavenee, W. K., Mischel, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+of+epidermal+growth+factor+receptor+signalling+networks+in+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity of epidermal growth factor receptor signalling networks in glioblastoma.</a> Nat Rev Cancer. 15 (5), 302-310 (2015).</li>
<li>Mischel, P. S., Cloughesy, T. F., Nelson, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA-microarray+analysis+of+brain+cancer%3A+molecular+classification+for+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">DNA-microarray analysis of brain cancer: molecular classification for therapy.</a> Nat Rev Neurosci. 5 (10), 782-792 (2004).</li>
<li>Verhaak, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+genomic+analysis+identifies+clinically+relevant+subtypes+of+glioblastoma+characterized+by+abnormalities+in+PDGFRA%2C+IDH1%2C+EGFR%2C+and+NF1%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Integrated genomic analysis identifies clinically relevant subtypes of glioblastoma characterized by abnormalities in PDGFRA, IDH1, EGFR, and NF1.</a> Cancer Cell. 17 (1), 98-110 (2010).</li>
<li>De Witt Hamer, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genomic+profile+of+human+malignant+glioma+is+altered+early+in+primary+cell+culture+and+preserved+in+spheroids%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">The genomic profile of human malignant glioma is altered early in primary cell culture and preserved in spheroids.</a> Oncogene. 27 (14), 2091-2096 (2008).</li>
<li>Shankavaram, U. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+profiling+indicates+orthotopic+xenograft+of+glioma+cell+lines+simulate+a+subclass+of+human+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Molecular profiling indicates orthotopic xenograft of glioma cell lines simulate a subclass of human glioblastoma.</a> J Cell Mol Med. 16 (3), 545-554 (2012).</li>
<li>Abbott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+culture%3A+biology%27s+new+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Cell culture: biology's new dimension.</a> Nature. 424 (6951), 870-872 (2003).</li>
<li>Rao, S. S., Lannutti, J. J., Viapiano, M. S., Sarkar, A., Winter, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+3D+biomimetic+models+to+understand+the+behavior+of+glioblastoma+multiforme+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">Toward 3D biomimetic models to understand the behavior of glioblastoma multiforme cells.</a> Tissue Eng Part B Rev. 20 (4), 314-327 (2014).</li>
<li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8 (10), 839-845 (2007).</li>
<li>Hollister, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porous+scaffold+design+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Porous scaffold design for tissue engineering.</a> Nat Mater. 4 (7), 518-524 (2005).</li>
<li>Rowley, J. A., Madlambayan, G., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alginate+hydrogels+as+synthetic+extracellular+matrix+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Alginate hydrogels as synthetic extracellular matrix materials.</a> Biomaterials. 20 (1), 45-53 (1999).</li>
<li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrigel%3A+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li>
<li>Yoshino, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proliferation+and+differentiation+of+a+transfected+Schwann+cell+line+is+altered+by+an+artificial+basement+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Proliferation and differentiation of a transfected Schwann cell line is altered by an artificial basement membrane.</a> Glia. 3 (5), 315-321 (1990).</li>
<li>Uab Research Foundation. Biologically active native biomatrix composition. US patent. , 7727550 B2 (2010).</li>
<li>Sarkaria, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+an+orthotopic+xenograft+model+for+assessing+the+effect+of+epidermal+growth+factor+receptor+amplification+on+glioblastoma+radiation+response%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Use of an orthotopic xenograft model for assessing the effect of epidermal growth factor receptor amplification on glioblastoma radiation response.</a> Clin Cancer Res. 12 (7), 2264-2271 (2006).</li>
<li>Strober, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trypan+Blue+Exclusion+Test+of+Cell+Viability%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Immunol%22%5BJournal%5D)">Trypan Blue Exclusion Test of Cell Viability.</a> Curr Protoc Immunol. 111, 1-3 (2015).</li>
<li>Anderson, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinomic+exploration+of+temozolomide+and+radiation+resistance+in+Glioblastoma+multiforme+xenolines%5BTitle%5D)+AND+%22Radiother+Oncol%22%5BJournal%5D)">Kinomic exploration of temozolomide and radiation resistance in Glioblastoma multiforme xenolines.</a> Radiother Oncol. 111 (3), 468-474 (2014).</li>
<li>Anderson, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinomic+profiling+of+electromagnetic+navigational+bronchoscopy+specimens%3A+a+new+approach+for+personalized+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Kinomic profiling of electromagnetic navigational bronchoscopy specimens: a new approach for personalized medicine.</a> PLoS One. 9 (12), 116388(2014).</li>
<li>Jarboe, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinomic+profiling+approach+identifies+Trk+as+a+novel+radiation+modulator%5BTitle%5D)+AND+%22Radiother+Oncol%22%5BJournal%5D)">Kinomic profiling approach identifies Trk as a novel radiation modulator.</a> Radiother Oncol. 103 (3), 380-387 (2012).</li>
<li>Anderson, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+Throughput+Kinomic+Profiling+of+Human+Clear+Cell+Renal+Cell+Carcinoma+Identifies+Kinase+Activity+Dependent+Molecular+Subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">High Throughput Kinomic Profiling of Human Clear Cell Renal Cell Carcinoma Identifies Kinase Activity Dependent Molecular Subtypes.</a> PLoS One. 10 (9), 0139267(2015).</li>
<li>Anderson, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinomic+Alterations+in+Atypical+Meningioma%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Research+Archives%22%5BJournal%5D)">Kinomic Alterations in Atypical Meningioma.</a> Medical Research Archives. 3, (2015).</li>
<li>Hothi, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+chemical+screens+identify+disulfiram+as+an+inhibitor+of+human+glioblastoma+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">High-throughput chemical screens identify disulfiram as an inhibitor of human glioblastoma stem cells.</a> Oncotarget. 3 (10), 1124-1136 (2012).</li>
<li>Quartararo, C. E., Reznik, E., deCarvalho, A. C., Mikkelsen, T., Stockwell, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Throughput+Screening+of+Patient-Derived+Cultures+Reveals+Potential+for+Precision+Medicine+in+Glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Med+Chem+Lett%22%5BJournal%5D)">High-Throughput Screening of Patient-Derived Cultures Reveals Potential for Precision Medicine in Glioblastoma.</a> ACS Med Chem Lett. 6 (8), 948-952 (2015).</li>
<li>Ma, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+personalized+medicine+with+a+three-dimensional+micro-scale+perfusion-based+two-chamber+tissue+model+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Towards personalized medicine with a three-dimensional micro-scale perfusion-based two-chamber tissue model system.</a> Biomaterials. 33 (17), 4353-4361 (2012).</li>
<li>Pedron, S., Becka, E., Harley, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+glioma+cell+phenotype+in+3D+matrices+by+hyaluronic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Regulation of glioma cell phenotype in 3D matrices by hyaluronic acid.</a> Biomaterials. 34 (30), 7408-7417 (2013).</li>
<li>Rape, A., Ananthanarayanan, B., Kumar, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+strategies+to+mimic+the+glioblastoma+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Engineering strategies to mimic the glioblastoma microenvironment.</a> Adv Drug Deliv Rev. 79-90, 172-183 (2014).</li>
<li>Willey, C. D., Gilbert, A. N., Anderson, J. C., Gillespie, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-Derived+Xenografts+as+a+Model+System+for+Radiation+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Radiat+Oncol%22%5BJournal%5D)">Patient-Derived Xenografts as a Model System for Radiation Research.</a> Semin Radiat Oncol. 25 (4), 273-280 (2015).</li>
</ol>

R.S. ו-R.S.S. הם עובדים של Vivo Biosciences. J.C.A. ממומן בחלקו על ידי UAB Kinome Core.

צעדים קריטיים בתוך הפרוטוקול בעיקר מתייחסים microtumor הדור, כמו גם מינון תרופה ותחזוקה. מכיוון חרוזי microtumor הם שבירים יכולים להיקרע בקלות, בזהירות רבה נחוצה הוא בשלבי ההתפתחות של assay ותחזוקה. אם מתרחשת שגיאה במהלך אחד מהתהליכים אלה, אפשר להתפשר פרשנות ניסיון, גרימת רחבה או חזרה מיותרת של הניסויים או אפילו הדרת נתונים. שינויים ופתרון בעיות, במיוחד של תהליך פיתוח microtumor, כללו תכנון וייצור של כלי הידרופוב...

גידולים ממאירים במוח הנפוצים ביותר תוך גולגולתי העיקריים הם כיתה III astrocytomas ו multiforme גליובלסטומה IV כיתה (גליובלסטומה או GBM). גידולים אלה מציעים בפרוגנוזה גרועה עם הישרדות לשנה אחת החציוני בין 12 - 15 חודשים עם טיפולים הקיימים כיום עבור GBM בארה&quot;ב 1-3. טיפולי Multimodality כוללים ניתוח, הקרנות, וכימותרפיה כולל temozolomide (TMZ) וסוכנים במיקוד קינאז. איתות קינאז הוא dysregulated תדיר GBM, כולל תת קבוצות של גידולים עם הגברה או מוטציות הפעלת ב הקולטן לגורם הגדילה באפידרמיס (EGFR), עליות טסיות נגזר הקולטן לגורם הצמיחה (PDGFR) איתות, גדל Phosphatidyl-אינוזיטול-3 kinase (PI3K) ו הגידול בתמיכה איתות angiogenic דרך הקולטן לגורם הצמיחה דם האנדותל (VEGFR) וכן 4-6 מסלולים מונע קינאז אחרים. נוכחי במבחנה במודלים vivo לעתים קרובות לאבד שינויים נציג אלה &lt;sup&gt; 7. בנוסף, פרופיל גנטי לא הציע את היתרונות הצפויים בן כדי לשקף את העובדה ששינויים גנטיים אפיגנטיים לא תמיד לחזות שינויים ברמת פעילות חלבון, שבו רוב קינאז מיקוד סוכנים לפעול ישירות, והיכן טיפולים עם מנגנונים אחרים של פעולה רשאית לפעול בַּעֲקִיפִין. שורת התא המסורתית הנציחה שניתן passaged אינסוף כבר זמן רב את הסטנדרט עבור בדיקות סמים בשל קלות תחזוקת שחזור שלהם. עם זאת, מודל זה סובל תזונתי גבוה (ומלאכותי) בסביבת גידול בוחרת עבור גדל מהר תאים שונים מאוד מן הגידול המקורי. ככזה, חלה התעניינות רבה בפיתוח מערכות מודל מציאותי יותר המשקפים מערכת ביולוגית הגידול מורכב יותר, כפי שוהה המטופל. xenografts גידול שפותח ישירות גידול ראשוני גדל בעכברים ( &quot;xenoline,&quot; xenograft נגזרות החולות או PDX) proviדה מערכת מודל רעיונית יותר, במיוחד במקרים של בריפוי הסרטן, כפי שהם מורגשים יותר לנבא הצלחה קלינית. 8 למרות הביולוגיה שמשקפת בצורה טובה יותר, המודלים האלה הם יקרים קשים להקים ולתחזק. יתר על כן, הם לא מקובל מחקרי תפוקה גבוהה. הצורך טוב יותר לפתח מודלים ביולוגיים שיותר לשקף במדויק שינויים מולקולריים גידולים ראשוניים, ו לפרופיל ולבדוק מודלים אלה באמצעות מדדים ישירים פעילות קינאז, לא פונדקאית סמנים גנטיים, ברור. היא מוכרת היטב שבניגוד דו ממדי תרבויות monolayer (2D), 3D או מודלי assay רבים-תאיים יכול לספק יותר פיסיולוגי נקודות קצה רלוונטיות 9-11. תרבות 3D נפוצה גישות לערב microcarriers מטריקס מצופה היווצרות אליפטית תא. spheroids הגידול יכול להיות שנוצר באמצעות צבירה הסלולר באמצעות בקבוק טווה, צלחת pHEMA ותליית טכניקות טיפה. מגבלות עבור tגישות hese כוללות: חוסר יכולת של תאים מסוימים כדי ליצור spheroids יציב, השתנות בצמיחה ואתגרים עם סוגי תאים מעורבים. לחלופין, סינתטיים רבים (הידרוג&#39;ל, פולימר) ובעלי חיים הנגזרות Engelbreth-הולם-נחיל (EHS) מטריקס מן סרקומות העכבר, קולגן שור) מטריצות פותחו לתרבות 3D לומד 12-14. מטריקס עכבר EHS נעשה שימוש נרחב אך ידוע להאיץ גדילת תאים והתמיינות במבחנה ובחי 15. על מנת לשכפל ביולוגית גידול 3D, מערכת biomatrix אדם פותחה על ידי ד&quot;ר ראג &#39;סינג et al. 16. Biogel האנושית טבעית, הצמיחה ללא הגורם מאפשרת פיגומי תרבות 3D (חרוזים, דיסקים), אשר תומכים טיפוח לטווח ארוך של סוגי תאים מרובים. סדרת עיצובי תרבות biogel האנושי 3D מוקמת ללימוד צמיחת גידול, הדבקה, תכונות אנגיוגנזה ופלישה. יתרונות ומאפיינים של biogel האדם לעומת משותף<html> ג&#39;לים העכבר EHS מסוכמים בטבלה 1 ולוח 2. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מָקוֹר: </td><td> האדם Amnions (רקמת Pooled) הפתוגן- חינם, IRB-פטור / אושרה </td></tr><tr><td> טבע ECM: </td><td> ללא מפוגל Biogel (הפקת GLP) </td></tr><tr><td> מַפְתֵחַ רכיבים: </td><td> Col-I (38%), Laminin (22%), Col-IV (20%), Col-III (7%), Entactin &amp; HSPG (&lt;3%) </td></tr><tr><td> GF-חינם: </td><td> לגילוי EGF, FGF, TGF, VEGF, PDGF (Non-angiogenic, אינו רעיל) </td></tr></tbody></table> טבלה 1: מאפיינים של האדם Biogel לעומת ג&#39;לים נפוצות EHS. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-wi</html style=";text-align:right;direction:rtl">ה-next.within-page = &quot;תמיד&quot;&gt; <tbody><tr><td> Biogel אנוש </td><td> ג&#39;לים EHS </td></tr><tr><td> מטריקס אנושית טבעית </td><td> מטריקס עכבר מחדש </td></tr><tr><td> צמיחה &amp; התמיינות תאים מבוקרים </td><td> יכול לקדם את צמיחת &amp; התמיינות תאים </td></tr><tr><td> ביטוי גנים פיזיולוגי </td><td> ביטוי גנים משתנה </td></tr><tr><td> מודל בתרבית רקמה דמוית 3D </td><td> מודל ההתרבות מבוסס פלייט </td></tr></tbody></table> טבלה 2: יתרונות של האדם Biogel לעומת ג&#39;לי הנפוצים EHS.

<table><tbody><tr><td>קולגנאז-I&nbsp;</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>CO130</td><td></td></tr><tr><td>טריפסין EDTA (10x)</td><td>Invitrogen</td><td>15400-054&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal-A</td><td>Life Technologies</td><td>10888-022</td><td></td></tr><tr><td>N-2 Supplement</td><td>Life Technologies</td><td>17502-048</td><td>1x ריכוז סופי</td></tr><tr><td>B-27 עם ויטמין A</td><td>Life Technologies</td><td>12587-010</td><td>1x ריכוז סופי</td></tr><tr><td>רקומביננטי אנושי FGF-basic</td><td>Life Technologies</td><td>PHG0266</td><td>10 ננוגרם/מ"ל ריכוז סופי</td></tr><tr><td>רקומביננטי אנושי EGF</td><td>Life Technologies</td><td>PGH0315</td><td>10 ננוגרם/מ"ל ריכוז סופי</td></tr><tr><td>L-גלוטמין</td><td>קורנינג Cellgro Mediatech</td><td>25-005-CI</td><td>2 מ"מ ריכוז סופי</td></tr><tr><td>Fungizone</td><td>Omega Scientific</td><td>FG-70</td><td>2.5 ומיקרו; גרם/מ"ל ריכוז סופי</td></tr><tr><td>פניצילין סטרפטומיצין</td><td>אומגה מדעי</td><td>PS-20</td><td>100 יח'/מ"ל פניצילין G, 100 ומיקרו; גרם/מ"ל סטרפטומיצין ריכוז סופי</td></tr><tr><td>Gentamicin</td><td>Life Technologies</td><td>15750-060</td><td>50 ננוגרם/מ"ל ריכוז סופי</td></tr><tr><td>MTT</td><td>Life Technologies</td><td>M6494</td><td>מוכן ל-5 מ"ג/מ"ל ב-PBS ומסונן סטרילי, 1 מ"ג/מ"ל בבאר</td></tr><tr><td>SDS</td><td>Fisher</td><td>BP166</td><td>למאגר ליזה MTT, מוכן ל-10% ב-0.01&nbsp; M HCl, 5% בבאר</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Fisher</td><td>A144SI-212</td><td>עבור מאגר ליזה MTT, מוכן ל-0.01&nbsp; M עם SDS, 5 mM בבאר</td></tr><tr><td>Calcein AM</td><td>Life Technologies</td><td>C1430</td><td>1 mM במלאי DMSO, 2&nbsp; ומיקרו; M בתמיסת צביעה PBS, 1&nbsp; ומיקרו; M בבאר</td></tr><tr><td>האלט' s קוקטייל מעכב חלבון פוספטאז&nbsp;</td><td>Pierce ThermoScientific</td><td>78420</td><td>יחס של 1:100 ב-MPER&nbsp;</td></tr><tr><td>מעכב חלבון פרוטאז של Halt&nbsp;</td><td>Pierce ThermoScientific</td><td>87786</td><td>יחס של 1:100 במגיב מיצוי חלבון יונקים MPER</td></tr><tr><td>(MPER)</td> <td>Pierce ThermoScientific</td><td>PI78501</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue</td><td>Pierce ThermoScientific</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Fisher</td><td>BP231</td><td>להמסת סידן AM ותרכובות</td></tr><tr><td>מלח חוצץ פוספט ללא Ca/Mg</td><td>Lonza</td><td>17-517Q</td><td>מדולל ל-1x עם מים אולטרה-טהורים של MiliQ ומסוננים סטריליים (לתרבית תאים)</td></tr><tr><td>תמיסת מלח עם חוצץ פוספט של Dulbecco עם Ca/Mg</td><td>Corning Cellgro Mediatech</td><td>20-030-CV</td><td>מדולל ל-1x עם מים אולטרה-טהורים של MiliQ (לשטיפה מראש)</td></tr> <tr><td>פרוטוקול</td> <td>פורמלין 10% חוצץ ניטרלי</td><td>032-060</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue</td><td>Pierce ThermoScientific</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>מעכב חלבון פוספטאז בצפיפות גבוהה של Hubiogel</td><td>Vivo Biosciences</td><td>HDHG-5</td><td></td></tr><tr><td>Halt's</td><td>Pierce</td><td>78420</td><td></td></tr><tr><td>מעכב פרוטאז חלבון של Halt's</td><td>Pierce</td><td>87786</td><td></td></tr><tr><td>מגיב מיצוי חלבון יונקים (MPER)</td> <td>Thermo Scientific</td><td>78501</td><td></td></tr><tr><td>שבב פרופיל מערך חלבון טירוזין קינאז (PTK)</td><td>PamGene</td><td>86312</td><td></td></tr><tr><td>מאגר קינאז PTK</td><td>PamGene</td><td>36000</td><td>300 ומיקרו; l מלאי חיץ PK 10x ב-2.7&nbsp; ml dH2O, מספר קטלוגי לערכת ריאגנטים PTK</td></tr><tr><td>ATP</td><td>PamGene</td><td>36000</td><td>מספר קטלוגי לערכת ריאגנטים PTK</td></tr><tr><td>PY20- נוגדן מצומד FITC</td><td>PamGene</td><td>36000</td><td>מספר קטלוגי לערכת ריאגנטים PTK</td></tr><tr><td>תוסף PTK</td><td>PamGene</td><td>32114</td><td></td></tr><tr><td>צינור PTK-MM1 (10x BSA)</td> מספר קטלוגי <td>PamGene</td><td>36000</td><td>לערכת</td></tr> <tr><td>ריאגנטים PTKשבב פרופיל מערך סרין/תראונין קינאז (STK)</td><td>PamGene</td><td>87102</td><td></td></tr><tr><td>מאגר קינאז STK</td><td>PamGene</td><td>32205</td><td>מספר קטלוגי עבור ערכת ריאגנטים STK</td></tr><tr><td>תערובת נוגדנים ראשונית STK (צינור DMAB)</td> מספר קטלוגי <td>PamGene</td><td>32205</td><td>עבור ערכת ריאגנטים STK</td></tr><tr><td>נוגדן משני מצומד FITC</td> צינור <td>PamGene</td><td>32203</td><td></td></tr><tr><td>STK-MM1 (100x BSA)</td> <td>PamGene</td><td>32205</td><td>מספר קטלוגי לערכת ריאגנטים</td></tr><tr><td>STK מאגר נוגדנים</td><td>STK PamGene</td><td>32205</td><td>מספר קטלוגי לערכת ריאגנטים STK</td></tr><tr><td>ציוד</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>#11 להבים, סטרילי</td><td>פישר</td><td>3120030</td><td></td></tr><tr><td>#3 ידיות אזמל, סטרילי</td><td>פישר</td><td>08-913-5</td><td></td></tr><tr><td>צלחות פטרי זכוכית 100 מ"מ</td><td>פישר</td><td>08-748D</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מעוקלים למחצה</td><td>פישר</td><td>12-460-318</td><td></td></tr><tr><td>בקבוק טריפסיניזציה</td><td>פישר</td><td>10-042-12B</td><td></td></tr><tr><td>מערבל מגנטי</td><td>פישר</td><td>14-490-200</td><td></td></tr><tr><td>3/4 אינץ' מוט ערבוב</td><td>פישר</td><td>14-512-125</td><td></td></tr><tr><td>מסננת תאים BD&nbsp;</td><td>Fisher</td><td>#352340</td><td></td></tr><tr><td>B-D 50 מ"ל צינור צנטריפוגה</td><td>Fisher</td><td>#352098</td><td></td></tr><tr><td>PamStation 12</td><td>PamGene</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BioNavigator 6.0 תוכנת ניתוח קינומי&nbsp;</td><td>תוכנת בדיקת PamGene</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Evolve Kinase</td> תוכנת אפליקציית <td>PamGene</td><td></td><td></td></tr><tr><td>UpKin (חיזוי קינאז במעלה הזרם)</td><td>PamGene</td><td></td><td></td></tr><tr><td>gentleMACS Dissociator</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-235</td><td></td></tr><tr><td>מערכת תרבית תאים סיבובית (RCCS)</td><td>Synthecon</td><td>RCCS-D</td><td>עם 10 מ"ל HARV חד פעמי</td></tr></tbody></table>

דור של microtumors שימוש 3d אדם biogel תרבות מערכת תאי glioblastoma נגזרות חולות להרכבת פרופיל kinomic ובדיקת תגובה לתרופה

Generation of Microtumors Using 3D Human Biogel Culture System and Patient-derived Glioblastoma Cells for Kinomic Profiling and Drug Response Testing

השימוש ב-xenografts שמקורם בחולה למידול סרטן סיפק תובנה חשובה לגבי הביולוגיה של הסרטן והיענות לתרופות. עם זאת, הם גוזלים זמן, יקרים ועתירי עבודה. כדי להתגבר על המכשולים הללו, קבוצות מחקר רבות פנו לתרביות ספרואידים של תאים סרטניים. בעוד שהם שימושיים, ספרואידים או אגרגטים של גידול אינם משכפלים אינטראקציות מטריצת תאים כפי שנמצא in vivo. ככזה, גישות תרבות תלת מימדיות (תלת מימד) המשתמשות בפיגום מטריצה חוץ-תאי מספקות מערכת מודל מציאותית יותר לחקירה. החל מהשתלות תת עוריות או תוך גולגולתיות, רקמת הגידול מתפרקת לתרחיף תא בודד הדומה לנוירוספרות של תאי גזע סרטניים. תאים אלה מוטמעים לאחר מכן במטריצה חוץ-תאית שמקורה באדם, ביוג'ל אנושי תלת מימדי, כדי ליצור מספר רב של מיקרו-גידולים. מעניין לציין כי ניתן לתרבית מיקרו-גידולים במשך כחודש עם כדאיות גבוהה וניתן להשתמש בהם לבדיקת תגובה לתרופות באמצעות מבחני ציטוטוקסיות סטנדרטיים כגון 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) והדמיית תאים חיים באמצעות Calcein-AM. יתר על כן, ניתן לנתח אותם באמצעות אימונוהיסטוכימיה או לקצור אותם לצורך פרופיל מולקולרי, כגון פרופיל קינומי מבוסס מערך בתפוקה גבוהה, המפורט גם כאן. מיקרו-גידולים תלת מימדיים, אם כן, מייצגים מערכת מודל רב-תכליתית בעלת תפוקה גבוהה שיכולה לשכפל בצורה קרובה יותר את הביולוגיה של הגידול in vivo מאשר גישות מסורתיות.

הראינו כי מערכת תרבות biogel 3D תומכת צמיחה לטווח ארוך ותפקוד של סוגי תאים מרובים. בפרויקט שיתופי זה, xenolines GBM נגזרות החולה (PDX) משמש להפקת מאות microtumors. תאים ניתקים (3 x 10 5) או neurospheres (40 - 50) היו משובצים חרוזי biogel (2 מ&quot;מ) ואחרי gelation המהיר הם בתרבית bioreactor אישית תקשורת NB המלאה. כדאיות סלולרית (Calcein-AM), פרופיל צמיחה (MTT), וניתוח מבוסס מערך פעילות kinomic נקבעו. microtumors PDX מתוחזק ארגון רב-תאיי...

ניתן למזער קסנוגרפלים שמקורם בחולה של גליובלסטומה מולטיפורמה למיקרו-גידולים חיים באמצעות מערכת תרבית ביוג'ל אנושית תלת מימדית. בדיקת גידול תלת מימדית זו מתאימה לבדיקת תגובה לתרופות ופרופיל מולקולרי, כולל ניתוח קינומי.

דור של Microtumors שימוש 3D אדם Biogel תרבות מערכת תאי Glioblastoma נגזרות חולות להרכבת פרופיל Kinomic ובדיקת תגובה לתרופה

The use of patient-derived xenografts for modeling cancers has provided important insight into cancer biology and drug responsiveness. However, they are ...

המטרה הכללית של מערכת תרבית מיקרו-גידולים תלת-ממדיים של גליובלסטומה המופקת מחולה היא לאפשר בדיקת תרופות בסריקה רחבה (high-throughput) עם בדיקת פרופיל מולקולרי תואמת, כגון בדיקת קינומיקה. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום הסרטן, כגון, מדוע טיפולים מסוימים פועלים היטב בגידול של חולה אחד אך לא באחר? היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא שהיא מספקת מערכת תרביות גידולים ממוזערת אך מציאותית, המתאימה לבדיקת טיפולים.באופן כללי, אנשים שאינם מכירים את השיטה הזו יתקשו בהחלה, כיוון שטיפול בתאי xenograft שמקורם בחולה אינו דומה לטיפול בתאי גידולים ממססים (immortalized) המקובלים מזה זמן רב. זאת בשל שבירותם ורגישותם לשינויים בתנאי התרבית. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית, שכן את שלבי יצירת המיקרו-גידול קשה ללמוד באמצעות תיאור בלבד, בשל שיטת הייצור הייחודית והמורכבת שלהם.את הליך פירוק הגידול תדגים קתרין לנגפורד, הטכנאית הבכירה ומנהלת המעבדה במעבדתי. את הליכי יצירת המיקרו-גידולים והמתנת התרופות תדגים רייצ'ל שבין, טכנאית במעבדתי. באמצעות פינצטה, בצעו נשסון לא חודר כדי לשחרר בעדינות את מסת הגידול מדופן הפריטונאום ומהעור, והעבירו את מסת הגידול לצחנית פטרי מזכוכית סטרילית.לאחר מכן, השתמש בסקאלפל סטרילי עם להב מספר 11 ובפינצטה סטרילית חצי-מעוקלת כדי לנקות את רקמת הגידול מרקמה נמקרית ומרקמת חיבור קרומית של המאכסן. שטוף את הגידולים שנוקו עם RPMI סטרילי שלוש עד חמש פעמים כדי להסיר את עודפי הדם, תוך הטיה עדינה של הצלחת בין השטיפות כדי להסיר את נוזל השטיפה. לאחר השטיפה האחרונה, השתמש בשני להבי סקאלפל מספר 11 כדי לקצוץ את הגידולים לעדין.לאחר מכן, השתמשו בפינצטה סטרילית חצי-מעוקלת כדי להעביר את הגידולים למסורת דיסוציאציה המכילה תמיסת אנזימים. הכניסו את המסורת לתוך הדיסוציאטור תאי, ובחרו בתוכנית Tumor 2. לחצו על Start כדי להפעיל את הדיסוציאטור למשך 37 שניות.לאחר מכן, העבירו את המבחנה למכשיר סיבוב (rotator) והניחו את המכשיר באינקובטור בטמפרטורה של 37 degree Celsius למשך 40 דקות. בתום הדגירה, החזירו את המבחנה למכשיר הדיסוציאציה (dissociator) והפעילו את תוכנית Tumor 3 למשך 37 שניות. בסיום התוכנית, סבבו את התאים בצנטריפוגה ותלו את המשקע ב-10 milliliters של RPMI ללא סרום בעזרת ערבוב עדין.בשלב הבא, העבירו באיטיות את התאים למסנן תאים של 40 מיקרון בתוך מבחנה חדשה של 50 מיליליטר, והניחו לסספנסיה לטפטף דרך המסנן בכוח הכבידה. הרימו בעדינות את לשונית מסנן התאים בין כל הוספה של תאים, כדי לשבור את הוואקום שבין המסנן למבחנה ולאפשר לתאים התלויים לעבור בחופשיות דרך הרשת. לאחר סינונם של כל התאים, סובבו במ centriuge את סספנסיית התאים הבודדים והשביו שנית את המשקע ב-10 מיליליטר של Neurobasal Medium מלא.לאחר מכן, קבעו את מספר התאים החיוניים באמצעות שיטת הדירה של trypan blue, והניחו את התאים על קרח. כדי ליצור את המיקרו-גידולים, מרכזו את תאי ה-xenoline של הגליובלסטומה שגזרו מהמטופל לאחר הפירוק, ותלו את המשקע ב-50,000 תאים לכל שני מיקרוליטרים של FBS. לאחר מכן, דללו את התאים בביוג'ל אנושי בצפיפות גבוהה וקר מאוד, ביחס של תא אחד לארבעה חלקי ביוג'ל.לאחר מכן, השתמשו בפיפטה אלקטרונית רב-ערוצית כדי לחלק 10 µL של תערובת תאים לכל פין על פלטת פלדה בעלת 96 פינים עם ציפוי הידרופובי. חשוב למנוע היווצרות בועות בעת ערבוב התאים, המצע והביוג'ל, תוך עבודה מהירה ויעילה ליצירת המיקרו-גידולים לפני שהביוג'ל האנושי מתחיל להתמצק על הפינים. כאשר כל המיקרו-גידולים הונחו על הפלטה, העבירו את הגידולים התלת-ממדיים לאינקובטור לתרביות רקמה למשך 20 דקות כדי להשלים את תהליך הג'לציה של חרוזי הגידול.בסיום הדגירה, העבירו את המיקרו-גידולים לצלוחית תרבית של 10 סנטימטר המכילה Neurobasal Medium מלא, והחזירו את הגידולים לאינקובטור. לאחר יום עד יומיים, השתמשו בפיפט רחב למעבר נוזלים כדי להעביר את המיקרו-גידולים לבארות של פלטת תרבית בעלת 96 בארות, המכילה 50 microliters של Neurobasal Medium לכל בארה, והוסיפו 50 microliters של תמיסת המינון המתאימה לכל בארה. החזיקו את המיקרו-גידולים המטופלים באינקובטור לתרביות רקמה למשך יום עד 14 ימים, והזינו את הגידולים פעמיים בשבוע בתרבית טרייה ובתמיסת התרופה.כדי להעריך את מורפולוגיית התאים של המיקרו-גידול, ביום הראשון, השביעי והרביעי עשר לתרבית, סמנו את המיקרו-גידולים באמצעות 1 µM של Calcein-AM שדולל טרי לכל באר, בתוך אינקובטור לתרביות רקמה למשך 20 דקות. לאחר מכן, דגמו את הגידולים באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית בהגדלות של 2, 4 ו-10x. כדי להעריך את צמיחת המיקרו-גידול, ביום הראשון, השביעי וה-14, טפלו בתרביות באמצעות 20 µL של MTT שהוכן טרי למשך שעתיים באינקובטור לתרביות רקמה.בסיום הדגירה, יש לבצע ליזה של הגידולים באמצעות תמיסת ליזה 10% SDS שהוכנה טרי, ביחס של אחד לאחד לנפחי בארות התרבית, ולאטום את הפלטה. לאחר מכן, יש להדגיר את המיקרו-גידולים בתמיסת הליזה למשך לילה בטמפרטורה של 37 °C, ולמדוד את הבליעה באורך גל של 570 nm באמצעות קורא פלטות (multi-plate reader) למחרת בבוקר. באמצעות דימוי תאים חיים עם Calcein-AM כפי שהודגם זה עתה, ניתן להעריך את צמיחת התאים והחיוניות של המיקרו-גידולים, וכן את השפעות הטיפולים התרופתיים על תפקודים אלו.כפי שנצפה, מיקרו-גידולים שלא טופלו ומיקרו-גידולים בעלי עמידות ידועה לטיפול התרופתי הניסיוני מראים דפוס צמיחה רציף לאורך תקופת תרבית של שבועיים. עם זאת, תאי גידול רגישים ל-TMZ מראים צמיחה תאית מופחתת בסוף תקופת התרבית בתגובה לריכוז הגבוה ביותר של טיפול ב-TMZ, כפי שנמדד בבדיקת MTT. באופן מעניין, סיגנלינג של קינאז במיקרו-גידולים העמידים ל-TMZ חושף מספר פפטידים עם עוצמות שונות באופן מובהק לאחר טיפול ב-10 µM TMZ.ואכן, בניסוי מייצג זה, ניתוח של פרופילים קינומיים שונים אלו באמצעות תוכנה לחיזוי קינאזים במעלה הזרם (upstream kinase prediction software) זיהה שינויים ספציפיים בעוצמתם של tyrosin kinase מסוג SYK, LCK ו-CTK ומספר kinase מסוג serine/threonine, מה שמרמז על מטרות טיפוליות חדשות פוטנציאליות שעשויות לסייע בהתגברות על עמידות לטיפול בגידולים. לאחר רכישת המיומנות, ניתן להשלים את פירוק הגידול בשעתיים אם הפעולה מבוצעת כראוי. ניתן להשלים את הטכניקות של יצירת מיקרו-גידולים ומתן תרופות בשלוש שעות בסך הכל אם הן מבוצעות כראוי.בעתיד, ניתן יהיה להשתמש במערכת מודל זו כמערכת אוואטר בסגנון פרובנד, שבה גידול של חולה יותאם מולקולרית לספריית מיקרו-גידולים קיימת המופקת מחולים, כדי להנחות את הקליניקאי בבחירת הטיפול המיטבי.

generation-microtumors-using-3d-human-biogel-culture-system-patient

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

בסרטון זה, אנו מייצרים מיקרו-גידולים מתאי גידול שמקורם במטופל באמצעות ביוג'ל אנושי תלת-ממדי. מיקרו-גידולים אלה דומים מאוד למיקרו-סביבה של הגידול in vivo ומשמשים פלטפורמות פוטנציאליות לבדיקות תרופות.

יצירת מיקרו-גידולים: טכניקת תרבית חוץ גופית לתרבית מיקרו-גידולים תלת-ממדיים לניתוח תגובה לטיפול תרופתי

פרוטוקול להפצה של דגימות כירורגיות גליומה בדרגה גבוהה מנותקות במדיום נוירוספרה ללא סרום כדי לבחור עבור תאים עם פנוטיפ תא גזע סרטני. עבור דגימות שלא מצליחות לגדול כמו נוירוספרות, פרוטוקול חלופי מוצע. טכניקת הטמעת פרפין לשמירה על הארכיטקטורה הנוירוספרית התלת מימדית לאימונוציטוכימיה מתוארת.

אופטימיזציה של תרבית תאי גליומה בדרגה גבוהה מדגימות כירורגיות לשימוש במודלים קליניים רלוונטיים לבעלי חיים ואימונוכימיה תלת-ממדית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לתרבות תלת מימדי של החולה-derived גליובלסטומה תאים בתוך orthogonally tunable biomaterials כחיקוי של מטריקס המוח. גישה זו מספקת במבחנה, פלטפורמה ניסיוני זה שומר על מאפיינים רבים של ויוו גליובלסטומה תאים בדרך כלל לאיבוד בתרבות.

חומצה היאלורונית מבוסס Hydrogels לתרבות תלת-ממדי של החולה-Derived גליובלסטומה תאים

Neurospheres גדל כמו תרבויות 3D מהווה כלי רב עוצמה כדי ללמוד ביולוגיה glioma. כאן אנו מציגים פרוטוקול לבצע אימונוהיסטוכימיה תוך שמירה על המבנה התלת-ממד של glioma neurospheres באמצעות הטבעה פרפין. שיטה זו מאפשרת אפיון glioma neurosphere מאפיינים כגון stemness ובידול עצבית.

הערכה של סמנים Glioma מאת אימונוהיסטוכימיה על תרבויות Neurosphere פרפין-מוטבע Glioma תלת-ממד

כאן, אנו מתארים שיטת פלישה קלה לשימוש עבור גלינובלסטומה. שיטת הפעולה הזאת מתאימה לתאים גלנובלסטומה כמו גזע. מאקרו של פיג'י לכימות קל של פלישה, הגירה והתפשטות מתואר גם כן.

מודל ספרואיד תלת-ממדי לגלינובלסטומה

במאמר זה אנו מתארים שיטה ליצירת אורגנואידים של גליובלסטומה (GBM) מדגימות של מטופלים ראשוניים או מתרביות תאים שמקורן בחולה, ושמירה עליהם עד לבגרות. אורגנואידים אלה של GBM מכילים אוכלוסיות תאים מגוונות מבחינה פנוטיפית ויוצרים מחדש מיקרו-סביבה של גידולים ex vivo.

שמירה על המגוון התאי של גליובלסטומה אנושית Ex vivo באמצעות תרבית אורגנואידית תלת-ממדית

הפרוטוקול הנוכחי מתאר פלטפורמה ניסיונית להערכת ההשפעות של רמזים מכניים וביוכימיים על תגובות כימותרפיות של תאי גליובלסטומה שמקורם בחולה בתרביות מטריצה-מימטיות תלת-ממדיות באמצעות התקן תאורת UV מותאם אישית המאפשר פוטו-קרוסלינקינג בתפוקה גבוהה של הידרוג'לים עם תכונות מכניות הניתנות לכוונון.

מערכי הידרוג'ל מאפשרים תפוקה מוגברת לסינון השפעות של רכיבי מטריצה וטיפולים במודלים תלת-ממדיים של גידולים

כאן, אנו מתארים פרוטוקול מקיף לייצור ושימוש באורגנואידים של גליובלסטומה מהונדסים במעבדה (LEGO) כדי לחקור תלות גנוטיפ-פנוטיפ ולסנן תרופות פוטנציאליות לטיפול בגליובלסטומה.

תרבית אורגנואידים של גליובלסטומה מהונדסת במעבדה וסינון תרופות

כאן, אנו מקימים פלטפורמת פרופיל מטבולי המשלבת ספרואידים גליומה תלת מימדיים (תלת מימדיים) ונורמליזציה מבוססת הדמיה באמצעות ניתוח שטף חוץ-תאי. גישה זו מאפשרת הערכה מדויקת יותר של התגובות המטבוליות של הגידול לטיפולים תרופתיים ומספקת תובנות לגבי מנגנוני עמידות פוטנציאליים.

התקדמות בפרופיל מטבולי של ספרואידים תלת מימדיים של גידולי מוח לבדיקת תרופות

אנו מציגים מודל נדידה תלת-ממדי של גליובלסטומה המשתמש בגליאומספירות מגנטיות שמקורן במטופלים שנוצרו מגידולים שאובחנו לאחרונה וחזרים. פלטפורמה זו מאפשרת המחשה של דינמיקת ההגירה הספציפית של מטופלים והערכת יעילות טיפולית. הבדיקה יכולה להיות מולטיפלקסית לאחר ההגירה כדי להעריך את מיקום החלבונים ודפוסי ביטוי.

בדיקת נדידת גליובלסטומה תלת-ממדית שכפולה עם מיקום ספרואידי מתווך ננו-חלקיקים מגנטיים בתנאים היפוקסיים

למד ליצור מערכת תרבית מיקרו-גידולים תלת-ממדית מגליובלסטומה נגזרת חולים לבדיקת תרופות בקצב גבוה וניתוח קינומי. שיטה זו מאפשרת חקר מדויק של תגובות שונות לטיפול בין מטופלים שונים.

דור של Microtumors שימוש 3D אדם Biogel תרבות מערכת תאי Glioblastoma נגזרות חולות להרכבת פרופיל Kinomic ובדיקת תגובה לתרופה

גלה סרטונים נוספים