תעוזה, תוקפנות, ואת מבחני Shoaling עבור תסמונות התנהגותיות דג הזברה

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא לתקנן את המתודולוגיה המשמשת לצפייה, ניתוח ופירוש תסמונות התנהגותיות של תעוזה, תוקפנות, רדידה בדג הזברה. באופן ישיר, שיטה זו יכולה לענות על שאלות בתיאוריית האבולוציה, מבנה האוכלוסייה ודינמיקה של אוכלוסייה. בשילוב עם טכניקות בין-תחומיות ניתן ליישם אותו בתחומים כמו פרמקולוגיה, טוקסיקולוגיה, גנטיקה התנהגותית ואנדוקרינולוגיה.

היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהשילוב של תעוזה, תוקפנות, רדידה מקיף התנהגויות רבות שנחקרו היטב וניתנות לכימות בקלות בדג הזברה. וניתן לשנות כל בדיקה כדי לענות על שאלות ניסיוניות חלופיות. התחל בהפרדה אקראית של דג הזברה ליחס המתאים של דג מוקד לדגי גירוי.

אחסן את כל הדגים במדפי הדיור של דג הזברה במחזור אור/חושך קפדני של 12 עד 12 שעות. האכילו מזון פתיתים לכל דגי המוקד והגירוי מדי יום. והאכילו שרימפס מלח רק פעם בשבוע בימים שאינם מחקר.

לאחר מכן, הקימו שלושה מיכלי בדיקה במעבדה. אחד לתוקפנות, תעוזה וגלישה במקומות שממזערים את האפשרות לגירויים חיצוניים שליליים. ואפשר מספיק מקום למצלמת וידאו כדי ללכוד את כל המיכל.

הגדר את מצלמת הווידאו, כך שתהיה לה מספיק בהירות כדי לראות את תוויות המיכל, כמו גם כדי להבחין בהתנהגויות עדינות של דג המוקד. שמור את המצלמה באותו מיקום עם תצוגה מלאה של המיכל במהלך כל הקלטות הבדיקה ההתנהגותית, על מנת למזער הבדלים לא מכוונים בניקוד התנהגותי כתוצאה מהקלטות דיפרנציאליות. לאחר מכן, הגדר ערכת תיוג כדי לעקוב אחר התאריך, מספר הדג ומספר הבדיקה עבור כל המבחנים ההתנהגותיים.

סמן את החלק החיצוני של המיכל עם סרט מול המצלמה. רשום מידע זה במחברת מעבדה לעיון מהיר ובקרת איכות עתידית. לבסוף, הגדר מיכל התאקלמות שישמש בין כל הבדיקות, כמו גם מיד לאחר הוצאת הפרטים ממתלה הדיור.

התחל בהשגת מיכל מלבני בנפח 19 ליטר, בגודל 30 על 15 על 10 סנטימטרים. ציידו את הטנק במחיצות אטומות חיצוניות המקיפות את שלושת הצדדים של מיכל התוקפנות, והשאירו את החלק הקדמי חשוף לצפייה כדי להפחית גירויים חיצוניים לא רצויים. מחלקים את המיכל עם סימונים חיצוניים לארבעה רבעים מלבניים שווים.

השתמש באיטום סיליקון כדי לקבע מראה בתוך הרביע התחתון השמאלי, נוטה ב -22.5 מעלות, ויוצר משולש ימני כנגד הצד השמאלי הקיצוני של המיכל. יש מים טריים ומיושנים, מחוממים מראש ל-27.5 עד 28.5 מעלות צלזיוס, מוכנים להוסיף למיכל התוקפנות על מנת להבטיח שטמפרטורת המים במיכל האקלים ובמיכל התוקפנות תהיה בטווח של שתי מעלות צלזיוס ממתלה הדיור. דג מוקד ממתלה הדיור והעבירו אותו למיכל התאקלמות נפרד שם הוא יתאקלם למשך 10 דקות.

ודא שמצלמת הווידיאו ממוקדת במיכל בדיקת התוקפנות ולחץ על הקלטה. לאחר מכן, העבירו מיד את דג המוקד באמצעות כוסות רוח ממיכל ההתאקלמות למיכל התוקפנות. הקלט את מיכל התוקפנות למשך 10 דקות ו-30 שניות.

לאחר מכן, את דג המוקד ממיכל התוקפנות בחזרה למיכל ההתאקלמות. בעת צפייה בהקלטה לאחר השלמת הבדיקה, המתן 30 שניות לאחר הכנסת הדג למיכל כתקופת הסתגלות נוספת לפני ניקוד התנהגויות. לבסוף, ציון בדיקת תוקפנות בודדת לפחות פעמיים עד שהבדיקה ניקוד בהסכמה גבוהה בין האיטרציות.

כדי להגדיר את מבחן הנועזות, השג תחילה מיכל טרפז קטן בנפח 1.5 ליטר, בגובה 15 ס"מ עם חלק עליון של 26.5 ס"מ ותחתית של 22.5 ס"מ, ורוחב של 6 סנטימטרים. עטפו נייר אטום סביב שלושה צדדים של המיכל, והשאירו את החלק הקדמי חשוף לצפייה. הניחו פיסת סרט דקה אחת מחוץ למיכל כדי לתחום את החלק העליון מהחלק התחתון של המיכל.

לאחר מכן, ודא שטמפרטורת המים במיכל ההדגשה היא בטווח של שתי מעלות צלזיוס ממתלה הדיור. העבירו את דג המוקד ממתלה הדיור למיכל ההתאקלמות ותנו לו להתאקלם במשך 10 דקות. ודא שמצלמת הווידאו ממוקדת במבחן הנועזות ולחץ על הקלטה במכשיר.

העבירו מיד את דג המוקד ממיכל ההתאקלמות למיכל הנועזות והקליטו במשך שמונה דקות ו-30 שניות. בעת צפייה בהקלטה לאחר השלמת הבדיקה, אפשר תקופת הסתגלות נוספת של 30 שניות לאחר הכנסת הדג למיכל לפני הניקוד. לבסוף, ציון מבחן נועזות יחיד לפחות פעמיים, עד שהבדיקה מקבלת ניקוד בהסכמה גבוהה בין איטרציות.

כדי להגדיר את מבחן הגלישה, השג מיכל של 76 ליטר בעל שלושה תאים המחולקים על ידי שני מחיצות זכוכית אטומות באיטום סיליקון. חיצונית, השתמש בסרט כדי לסמן שני אזורי העדפה הנמצאים במרחק של שש נקודות שלושה חמישה סנטימטרים מכל אחד ממחלקי הזכוכית המציינים כל אזור גירוי. החל מחיצות אטומות חיצוניות סביב שלושה צדדים של מיכל הגלישה והשאיר את החלק הקדמי חשוף לצפייה.

לאחר מכן, בחר את הגירוי להתאקלם לפחות 12 שעות לפני הבדיקה ובקש מהם להישאר במיכל הגלישה לאורך כל הניסוי. העבירו את דג המוקד ממתלה הדיור למיכל התאקלמות נפרד באמצעות כוסות רוח שם הוא יתאקלם למשך 10 דקות. לאחר מכן, על ידי כוסות רוח, העבר את דג המוקד ממיכל ההתאקלמות לתא המרכזי של מיכל הגלישה.

אפשר תקופת הסתגלות של 10 דקות לפני תקופת תצפית של 10 דקות על ניקוד חי, שבה דגים רדודים מוגדרים כנמצאים באזור ההעדפה בתא המאכלס את רדוד המטרה. לאחר מכן, כמת את הזמן המושקע בכל אזור העדפה, כמו גם את הזמן המושקע בנפח המרכזי. לבסוף, לאחר השלמת הבדיקות, העבירו את הדגים למיכל טרמינל נפרד שישמש כמיכל היעד הסופי עבור כל הפרטים המוקדיים המשומשים.

פרוטוקול זה בחן אסוציאציות עקביות בתוקפנות, תעוזה והתנהגויות רדודות של דג הזברה כדי לקבוע אם קיימת תסמונת התנהגותית. כאן, מרכיב ראשון מייצג התנהגויות תוקפנות, בעוד מרכיב שני קשור להתנהגויות תעוזה. מכיוון שהתנהגויות תוקפנות ותעוזה אינן מיוצגות על ידי אותו מרכיב, ניתן להסיק כי יש היעדר תסמונת התנהגותית תוקפנות נועזת בדג הזברה.

לאחר שליטה, ניתן לבצע את כל הפרוטוקול של דג מוקד אחד תוך 70 דקות. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להכיר את עצמך ואת הצוות שלך עם כל התנהגות יעד על מנת למזער את הטיית הצופה. ניקוד אותה הקלטת וידאו מספר פעמים יגביר גם את הביטחון בתוצאות שלך.

בעקבות הליך זה ניתן לבצע שיטות נוספות בתחומים פרמקולוגיים, גנטיים או פיזיולוגיים על מנת לענות על שאלות נוספות לגבי אילו גורמים פנימיים וחיצוניים משפיעים על תסמונות התנהגותיות. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להתבונן, לנתח ולפרש תסמונות התנהגותיות של תעוזה, תוקפנות, תסמונות התנהגותיות רדודות בדג הזברה. תודה על הצפייה ובהצלחה בניסויים שלך!