Name: הקלטה בו זמנית של Electroretinography ופוטנציאלים חזותיים מעוררים אצל חולדות הרדימו (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: למד כיצד למדוד בו-זמנית אלקטרורטינוגרם ופוטנציאלים חזותיים מעוררים בחולדות מורדמות. שיטה זו מאפשרת הערכה מקיפה של תפקוד הרשתית והמעבר הויזואלי הקורטיקלי במחקרי עצבנות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המימון לפרויקט זה ניתן על ידי המועצה הלאומית לבריאות ומחקר רפואי (NHMRC) 1046203 (BVB, AJV) ומלגת המכון למדעי המוח במלבורן (CTN).

<ol><li>Nguyen, C. T. O., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Prog Retin Eye Res. 27, 1-44 (2008).</li>
<li>Tsai, T. I., Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+acute+intraocular+pressure+challenge+on+rat+retinal+and+cortical+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of acute intraocular pressure challenge on rat retinal and cortical function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 1067-1077 (2014).</li>
<li>Cowey, A., Franzini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+retinal+origin+of+uncrossed+optic+nerve+fibres+in+rats+and+their+role+in+visual+discrimination%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The retinal origin of uncrossed optic nerve fibres in rats and their role in visual discrimination.</a> Exp Brain Res. 35, 443-455 (1979).</li>
<li>Weinstein, G. W., Odom, J. V., Cavender, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visually+evoked+potentials+and+electroretinography+in+neurologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Visually evoked potentials and electroretinography in neurologic evaluation.</a> Neurol Clin. 9, 225-242 (1991).</li>
<li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+evoked+potentials+standard+%282004%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visual evoked potentials standard (2004).</a> Doc Ophthalmol. 108, 115-123 (2004).</li>
<li>Ridder, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causes+of+cataract+development+in+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Causes of cataract development in anesthetized mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li>
<li>Nixon, P. J., Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+cone+responses+to+rat+electroretinograms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Experiment+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The contribution of cone responses to rat electroretinograms.</a> Clin Experiment Ophthalmol. 29, 193-196 (2001).</li>
<li>Bui, B. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+the+electroretinogram+to+understand+how+intraocular+pressure+elevation+affects+the+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Using the electroretinogram to understand how intraocular pressure elevation affects the rat retina.</a> J Ophthalmol. 2013, 262467(2013).</li>
<li>Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+measure+of+the+electrical+activity+of+human+rod+photoreceptors+using+electroretinography%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A quantitative measure of the electrical activity of human rod photoreceptors using electroretinography.</a> Vis Neurosci. 5, 379-387 (1990).</li>
<li>Birch, D. G., Hood, D. C., Locke, K. G., Hoffman, D. R., Tzekov, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+electroretinogram+measures+of+phototransduction+in+cone+and+rod+photoreceptors+-+Normal+aging%2C+progression+with+disease%2C+and+test-retest+variability%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Quantitative electroretinogram measures of phototransduction in cone and rod photoreceptors - Normal aging, progression with disease, and test-retest variability.</a> Arch Ophthalmol. 120, 1045-1051 (2002).</li>
<li>Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+receptoral+responses+in+pigmented+and+albino+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Development of receptoral responses in pigmented and albino guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Doc Ophthalmol. 99, 151-170 (1999).</li>
<li>Robson, J. G., Saszik, S. M., Ahmed, J., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+and+cone+contributions+to+the+a-wave+of+the+electroretinogram+of+the+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rod and cone contributions to the a-wave of the electroretinogram of the macaque.</a> J Physiol. 547, 509-530 (2003).</li>
<li>Severns, M. L., Johnson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+care+and+fitting+of+Naka-Rushton+functions+to+electroretinographic+intensity-response+data%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The care and fitting of Naka-Rushton functions to electroretinographic intensity-response data.</a> Doc Ophthalmol. 85, 135-150 (1993).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+of+electroretinogram+amplitude+growth+during+light+adaptation+in+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Origin of electroretinogram amplitude growth during light adaptation in pigmented rats.</a> Vis Neurosci. 23, 155-167 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> J Physiol. 555, 153-173 (2004).</li>
<li>Tremblay, F., Laroche, R. G., Debecker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Electroretinographic+Diagnosis+of+the+Incomplete+Form+of+Congenital+Stationary+Night+Blindness%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">The Electroretinographic Diagnosis of the Incomplete Form of Congenital Stationary Night Blindness.</a> Vision Res. 35, 2383-2393 (1995).</li>
<li>Bayer, A. U., Keller, O. N., Ferrari, F., Maag, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+glaucoma+with+neurodegenerative+diseases+with+apoptotic+cell+death%3A+Alzheimer%27s+disease+and+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Association of glaucoma with neurodegenerative diseases with apoptotic cell death: Alzheimer's disease and Parkinson's disease.</a> Am J Ophthalmol. 133, 135-137 (2002).</li>
<li>Wostyn, P., Audenaert, K., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+abnormal+high+trans-lamina+cribrosa+pressure+difference%3A+A+missing+link+between+Alzheimer%27s+disease+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neurology+and+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">An abnormal high trans-lamina cribrosa pressure difference: A missing link between Alzheimer's disease and glaucoma.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 110, 753-754 (2008).</li>
<li>Yucel, Y. H., Zhang, Q. A., Weinreb, R. N., Kaufman, P. L., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+retinal+ganglion+cell+loss+on+magno-%2C+parvo-%2C+koniocellular+pathways+in+the+lateral+geniculate+nucleus+and+visual+cortex+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of retinal ganglion cell loss on magno-, parvo-, koniocellular pathways in the lateral geniculate nucleus and visual cortex in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 22, 465-481 (2003).</li>
<li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+changes+can+we+expect+in+the+brain+of+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Survey+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">What changes can we expect in the brain of glaucoma patients.</a> Survey of Ophthalmology. 52, 122-126 (2007).</li>
<li>Kong, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+aging+and+diet+restriction+on+retinal+function+during+and+after+acute+intraocular+pressure+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Impact of aging and diet restriction on retinal function during and after acute intraocular pressure injury.</a> Neurobiol Aging. 33, 1115-1125 (2012).</li>
<li>Bui, B. V., Sinclair, A. J., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroretinograms+of+albino+and+pigmented+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Aust+N+Z+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Electroretinograms of albino and pigmented guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Aust N Z J Ophthalmol. 26, Suppl 1 98-100 (1998).</li>
<li>Jobling, A. I., Wan, R., Gentle, A., Bui, B. V., McBrien, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+choroidal+TGF-beta+in+the+tree+shrew+model+of+myopia%3A+isoform+expression%2C+activation+and+effects+on+function%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and choroidal TGF-beta in the tree shrew model of myopia: isoform expression, activation and effects on function.</a> Exp Eye Res. 88, 458-466 (2009).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+dark-adapted+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Dissecting the dark-adapted electroretinogram.</a> Doc Ophthalmol. 95, 187-215 (1998).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Prog Retin Eye Res. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hudnell, H. K., Boyes, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparability+of+rat+and+human+visual-evoked+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The comparability of rat and human visual-evoked potentials.</a> Neurosci Biobehav Rev. 15, 159-164 (1991).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+wireless+electroretinogram+and+visual+evoked+potentials+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Conscious wireless electroretinogram and visual evoked potentials in rats.</a> PLoS One. 8, e74172(2013).</li>
<li>Hetzler, B. E., Berger, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine-Induced+Modification+of+Photic+Evoked-Potentials+in+the+Superior+Colliculus+of+Hooded+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Ketamine-Induced Modification of Photic Evoked-Potentials in the Superior Colliculus of Hooded Rats.</a> Neuropharmacology. 23, 473-476 (1984).</li>
</ol>

למחברים אין גילויים רלוונטיים לעבודה זו.

ERG ו VEP הם מדדים אובייקטיביים של תפקוד הראייה מהרשתית והקליפה, בהתאמה. היתרון של הקלטה בו זמנית הוא תמונה מקיפה יותר של מסלול ויזואלית השלם מוענקת. באופן ספציפי, מידע המשלים מההערכה במקביל שלהם יכול לספק הגדרה ברורה יותר של האתר של פציעה במסלול ויזואלי (למשל, עבור הפרעות עם חפיפת ERG אך ברור VEP גילויי 18, כאשר נוירופתיה אופטית עשויה להתקיים יחד עם ניוון מוחי עיקרי 19, 20, או כאשר הפסד VEP ניתן מבולבל על ידי ביטוי של פציעות בכמה מקומות באותו המסלול...

מדידה של electroretinogram (ERG) ופוטנציאל חזותי עורר (VEP) לספק הערכות כמותיות שימושיות של השלמות של המסלול ויזואלי. ERG מודד את התגובות החשמליות של הרשתית לגירוי אור, בעוד VEP מודד את השלמות התפקודית המקבילה של מסלולים החזותיים מהרשתית אל קליפת הראייה העיקרית הבאה באותו אירוע האור. כתב יד זה מתאר פרוטוקול עבור ההקלטה והניתוח של תגובות ERG ו VEP במודל מעבדה נפוצה, החולדה. ERG מספק אינדקס של השלמות התפקודית של מספר כיתות תא מפתח רשתית על ידי כימותי התגובה החשמלית הברוטו של רשתית בזק של אור. סדרה מתואמת של ונתיבים יוניים ביוזמת התפרצות אור אופסט, לייצר שינויים לזיהוי מתח כי ניתן למדוד באמצעות אלקטרודות משטח להציב מחוץ לעין. צורת הגל שנוצר מייצג את השילוב של se<html> ריס של רכיבים מוגדרים היטב, הנבדלים משרעת, עיתוי ותדירות. כמות ממשית של מחקרים הוכיחה כי המרכיבים הללו שמורים יחסית היטב ברחבי רשתיות החולייתנים רבות וכי הרכיבים ניתן להפריד אחד מהשני. על ידי בשיקול בחירת הגירוי (גירוי פלאש, רקע, מרווח interstimulus) תנאים ובחירת תכונות ספציפיות של צורת גל מהרוכב לנתח אחד יכול להיות סמוך ובטוח של חוזרי מידה של קבוצה ספציפית של תאים ברשתית 1,2. מאפיינים אלה ביסוד השירות ומכאן היישומים הנפוצים של ERG כאמצעי בלתי פולשני של תפקוד רשתית. כתב יד זה מתמקדת מתודולוגיה למדידת ERG וניתוח בתכונות שלה כדי להחזיר פרטים על כמה משיעורי התאים העיקריים ברשתית, כלומר קולטני אור (רכיב PIII), תאים דו קוטביים (רכיב PII) ותאי הגנגליון ברשתית (בחיובים בתגובה סף scotopic או pSTR). = &quot;Jove_content&quot;&gt; The VEP מספק assay התגובה קליפת המוח לאור; ראשון שמקורם ברשתית ואילך מתקשר סדר דרך עצב הראייה, בדרכים אופטיות, התלמוס (גרעין ברך הצדי, LGN) ו אופטי קרינה לאזור V1 של הקליפה 3. במכרסמים, רובם (90 - 95%) של סיבי עצב הראייה כל עין decussate 4 ו המעצבבים אמצע המוח הנגדי. בניגוד ERG, זה עדיין לא ניתן לייחס מרכיבים שונים של VEP לשיעורי תאים ספציפיים, 5 ובכך משנים מקום לאורך מסלול ויזואלי יכול להשפיע על צורת גל VEP. עם זאת, VEP הינו מדד שאינו פולשני שימושי של ביצועים חזותיים ויושרה מסלול ויזואלי. VEP, הפועל בשיתוף עם ERG, יכול לספק הערכה מלאה יותר של מערכת הראייה (כלומר, רשתית / מסלול ויזואלי). הקלטות ERG ו VEP יכול להתנהל במנותק או בשילוב, תלוי appliקטיון. המתודולוגיה המתוארת במאמר זה מאפשר הערכה סימולטני של אלקטרופיזיולוגיה עורר חזותי ברשתית קליפת המוח משני העיניים שתי אונות אצל חולדות מורדמים. זוהי דרך יעילה יותר מקיף להעריך תפקוד הרשתית ואת ההשפעות הזרם כי שינויים בתפקוד הרשתית יכול להיות על תפקוד הראייה עורר קליפת המוח.

<table><tbody><tr><td>קליפ תנין</td><td>מותג גנרי</td><td>HM3022</td><td>קליפ נירוסטה 26 מ"מ לחיבור אלקטרודות בורג VEP לכבלים</td></tr><tr><td>ביו-מגבר</td><td>ADInstruments</td><td>ML 135</td><td>להגברת אותות ERG ו-VEP</td></tr><tr><td>נתרן קרבוקסימתיל צלולוז 1.0%</td> <td>אלרגן</td><td>CAS 0009000-11-7</td><td>נוזל צמיג לשיפור איכות האות של אלקטרודת ה-ERG הפעילה</td></tr><tr><td>קרפרופן 0.5%</td><td>קבוצת בריאות בעלי החיים של פייזר</td><td>CAS 53716-49-7</td><td>שם קנייני: הזרקת רימדיל (50 מ"ג/מ"ל). לשיכוך כאבים לאחר ניתוח, מדולל ל-0.5% (5 מ"ג/מ"ל) במי מלח רגילים</td></tr><tr><td>כלורהקסדין 0.5%</td> <td>מעבדות אוריון</td><td>27411, 80085</td><td>לחיטוי מכשירים כירורגיים</td></tr><tr><td>אמבט מים במחזור</td><td>Lauda-K&ouml; nigshoffen</td><td>MGW Lauda</td><td>לשמירה על טמפרטורת הגוף של החיה המורדמת במהלך ניתוח והקלטות אלקטרופיזיולוגיות</td></tr><tr><td>אמלגם דנטלי</td><td>DeguDent GmbH</td><td>64020024</td><td>לעטיפת מכלול האלקטרודה-גולגולת כדי להפוך אותו לחזק יותר</td></tr><tr><td>Dental burr</td><td>Storz Instruments, Bausch ו-Lomb</td><td>#E0824A</td><td>ראש מקדחה מיניאטורי בקוטר ~0.7 מ"מ ליצירת חור קטן בגולגולת מעל כל חצי כדור להשתלת ברגי VEP</td></tr><tr><td>מקדחה</td><td>בוש</td><td>סדרת Dremel 300</td><td>מקדחה אוטומטית לטרפנינג</td></tr><tr><td>עופרת אלקטרודה</td><td>דשא טלפקטור&nbsp;</td><td>כבלי פלטינה F-E2-30</td><td>לחיבור אלקטרודות חוטי כסף למגבר</td></tr><tr><td>Faraday Cage</td><td>בהתאמה</td><td></td> אישית <td>מבטיח עמידות לאור לשמירה על הסתגלות לחושך. מצרף את מערך Ganzfeld לשיפור יחס האות לרעש</td></tr><tr><td>ספוגיות גזה</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd</td><td>57-100B</td><td>לייבוש החתך הכירורגי ומשטח הגולגולת החשוף במהלך הניתוח</td></tr><tr><td>Ganzfeld שילוב כדור</td><td>פתרונות פוטומטריים בינלאומיים</td><td></td><td>ממריץ אור בעיצוב אישי: קוטר 36 מ"מ, גודל צמצם 13 ס"מ</td></tr><tr><td>סקוטש</td><td>VELCRO אוסטרליה Pty Ltd</td><td>מותג סקוטש לשימוש חוזר עטוף</td><td>אטב וו ולולאה כדי לאבטח את האלקטרודות ואת החיה בפלטפורמת ההקלטה</td></tr><tr><td>Isoflurane 99.9%</td><td>Abbott Australasia Pty Ltd</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>שם קנייני: Isoflo(TM) אנאסתטיקה באינהלציה. חומר הרדמה אינהלציה בדרגה פרמצבטית מעורבב עם גז חמצן לניתוח השתלת אלקטרודות VEP</td></tr><tr><td>קטמין&nbsp;</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Ketamil</td><td>שם קנייני: Ketamil Injection, מותג: Ilium. חומר הרדמה בדרגה פרמצבטית להקלטה אלקטרופיזיולוגית</td></tr><tr><td>Luxeon LED</td><td>Phillips Lighting Co.</td><td></td><td>לגירוי אור עשרים 5 וואט ואחת 1 וואט.</td></tr><tr><td>מיקרומניפולטור</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>BS4 50-2625</td><td>מחזיק את האלקטרודה הפעילה של ERG במהלך ההקלטות</td></tr><tr><td>אלקטרודת מחט</td><td>דשא טלפקטור&nbsp;</td><td>F-E2-30</td><td>מוכנס תת עורית לזנב כדי לשמש כאלקטרודה קרקעית הן עבור ה-ERG והן עבור VEP</td></tr><tr><td>פנילפרין 2.5% מינימום&nbsp;</td><td>Bausch and Lomb</td><td>CAS 61-76-7</td><td>מועשר בטרופיקמיד להשגת הרחבה מקסימלית לרישום ERG</td></tr><tr><td>פובידון יוד 10%</td> <td>סאנופי-אוונטיס</td><td>CAS 25655-41-8</td> שם קנייני<td>: Betadine, חיטוי להכנת העור המגולח לניתוח 10%, 500 מ"ל</td></tr><tr><td>מערכת רכישת נתונים Powerlab</td><td>ADInstruments</td><td>ML 785</td><td>שולט בנורות הלד</td></tr><tr><td>Proxymetacaine 0.5%</td> <td>Alcon Laboratories& נ.ב.פ;</td><td>CAS 5875-06-9</td><td>להרדמת הקרנית במהלך הקלטות ERG</td></tr><tr><td>תמיסת מלח</td><td>Gelflex</td><td></td><td>לא ניתנת להזרקה, לציפוי אלקטרודות חוטי כסף</td></tr> תוכנת <tr><td>Scope</td><td>ADInstruments</td><td>גרסה 3.7.6</td><td>מפעילה בו זמנית את הגירוי באמצעות מערכת Powerlab ואוספת נתונים</td></tr><tr><td>כסף (חוט עגול עדין)</td> <td>A& מתכת E</td><td>0.3 מ"מ</td><td>משמשת לייצור אלקטרודות ERG פעילות ולא פעילות, ואלקטרודת VEP לא</td></tr><tr><td>פעילה ברגי סטריל אל חלד&nbsp;</td><td>MicroFasterners</td><td></td><td>קוטר פיר 0.7 מ"מ, אורך 3 מ"מ יושתל על קליפת המוח הראייתית הראשונית ומשמש כאלקטרודות VEP פעילות</td></tr><tr><td>מסגרת סטריאוטקסית</td><td>דיוויד קופף</td><td>דגם 900</td><td>מכשיר סטריאוטקסי של בעלי חיים קטנים לאיתור קליפות הראייה הראשוניות על פי Paxinos & אטלס מוח העכברוש של ווטסון משנת 2007 קואורדינטות</td></tr><tr><td>להב כירורגי</td><td>סוואן-מורטון בע"מ</td><td>0206</td><td>לחיתוך אזור העור המכסה את קליפת המוח הראייתית הראשונית להשתלת אלקטרודות VEP</td></tr><tr><td>תפר</td><td>שנחאי Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td></td><td>3-0 תפר קלוע משי שאינו נספג, לנסיגת העור במהלך ניתוח השתלת אלקטרודות VEP</td></tr><tr><td>משחת עיניים טוברמיצין 0.3%</td> <td>מעבדות אלקון&nbsp;</td><td>CAS 32986-56-4</td><td>שם קנייני: Tobrex. משחה אנטיביוטית מונעת שנמרחת סביב פצע העור לאחר הניתוח</td></tr><tr><td>טרופיקמיד 0.5%</td> <td>מעבדות אלקון&nbsp;</td><td>CAS 1508-75-4</td><td>שם קנייני: 0.5% טיפת עיניים Mydriacyl, הוחדרה להשגת מידריאזיס להקלטת ERG</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Xylazil-100</td> חומר <td>הרדמה בדרגה פרמצבטית להקלטה אלקטרופיזיולוגית</td></tr><tr><td>קצה פיפטה</td><td>Eppendorf Pty Ltd</td><td>0030 073.169</td><td>Eppendorf epTIPS 100 - 5,000 מ"ל, לאלקטרודות בהתאמה אישית</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel</td><td>Microsoft</td><td>גרסה 2010</td><td>תוכנת גיליון אלקטרוני לניתוח נתונים</td></tr><tr><td>Lethabarb Euthanazia הזרקת</td><td>Virbac (אוסטרליה) Pty בע"מ</td><td>LETHA450</td><td>325 מ"ג/מ"ל נתרן פנטוברביטל להמתת חסד מהירה</td></tr></tbody></table>

הקלטה בו זמנית של electroretinography ופוטנציאלים חזותיים מעוררים אצל חולדות הרדימו

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

האלקטרורטינוגרמה (ERG) והפוטנציאל המעורר החזותי (VEP) משמשים בדרך כלל להערכת שלמות מסלול הראייה. ה-ERG מודד את התגובות החשמליות של הרשתית לגירוי אור, בעוד שה-VEP מודד את השלמות התפקודית המתאימה של מסלולי הראייה מהרשתית לקליפת המוח הראייתית הראשונית לאחר אותו אירוע אור. ניתן לפרק את צורת הגל של ERG לרכיבים המשקפים תגובות ממחלקות שונות של תאי עצב וגליה ברשתית. המרכיבים המוקדמים של צורת הגל VEP מייצגים את שלמות עצב הראייה ומרכזי קליפת המוח הגבוהים יותר. הקלטות אלו יכולות להתבצע בנפרד או ביחד, בהתאם לבקשה. המתודולוגיה המתוארת במאמר זה מאפשרת הערכה סימולטנית של אלקטרופיזיולוגיה מעוררת ראייה ברשתית ובקליפת המוח משתי העיניים ומשתי ההמיספרות. זוהי דרך שימושית להעריך באופן מקיף יותר את תפקוד הרשתית ואת ההשפעות במעלה הזרם שיכולות להיות לשינויים בתפקוד הרשתית על תפקוד קליפת המוח המעוררת חזותית.

ERG א-גל (&gt; -1.38 יומן cd.sm -2), ב-גלי (&gt; - 4.99 יומן cd.sm -2) STRs (&lt;- 4.99 יומן cd.sm -2) ואת VEPs (&gt; - 0.52 יומן cd.sm -2) נרשמו בו זמנית (איור 1 ו -3). בשעת הבזקים מאוד עמומים, STR חיובית (pSTR) נתפסה על כ 110 msec לאחר פלאש, וכן STR שלילית (nSTR) בכ 220 msec (איורים 1 ו -2). ERG עם ב-גל גדול, פסגות בין 50 עד 100 מילי-שניות לאחר תחילת הבזק מתון אשר ניתן ...

פרוטוקול זה מתאר מדידה סימולטנית של אלקטרורטינוגרמה ופוטנציאלים מעוררים חזותיים בחולדות מורדמות.

הקלטה בו זמנית של Electroretinography ופוטנציאלים חזותיים מעוררים אצל חולדות הרדימו

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא למדוד בו-זמנית את האלקטרו-רטינוגרם (electroretinogram) ואת הפוטנציאל העצבון העקיב הראייתי (visual evoked potential) בחולדה. שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום הנוירו-מדע של החריץ, כגון האם השפעות של הזדקנות או מחלות משפיעות על רכיבים מסוימים במסלול הראייה.היתרון המרכזי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת הערכה מקיפה של תפקוד הרשתית והשפעתו במעלה הזרם על התפקוד הקורטיקלי המעורר חזותית. כדי להתחיל בהליך זה, הכינו מראש את אלקטרודות ה-ERG הלא-פעילות המותאמות אישית על ידי חיתוך חוט כסף באורך 70 מילימטר ויצירת לולאה בקוטר שמונה מילימטר להקפה של עין החולדה. צרו עיגול אחיד והתאימו את גודל הלולאה על ידי עיצובה על קצה ראש של צינור ברוחב מילימטר אחד.דבר זה חשוב מכיוון שטבעת קטנה מדי עלולה להעלות בטעות את הלחץ התוך-מפרקי, בעוד שטבעת גדולה מדי עלולה להגביר את השונות של האותים. לאחר מכן, הכינו מראש את האלקטרודה הבלתי פעילה למבחן VEP בהתאמה אישית, על ידי חיתוך של נתיב כסף באורך 70 מילימטר. צרו אליפסה בקוטר של שמונה מילימטרים כדי להשחיל אותה על שיני החיתוך של החולדה.לאחר מכן, הכינו את אלקטרודות ה-ERG הפעילות המותאמות אישית על ידי חיתוך חוט כסף באורך 30 מילימטר ויצירת לולאה קטנה בקוטר של כ-1 עד 2 מילימטר, המשמשת למגע עדין עם קרנית החולדה תוך מזעור השחיקות בקרנית. לאחר מכן, חברו את האלקטרודות בבטחה למובילי האלקטרודות על ידי שזירת הכסף עם החוט הפנימי החשוף. בדקו את המתכת החשופה העודפת באמצעות סרט הדבקה כדי להפחית ארטיפקטים פוטו-וולטאיים.עבור האלקטרודות הפעילות של ה-ERG, ניתן להוסיף שכבות של סרט הדבקה (masking tape) כדי להשיג עטיפה עבה וקשיחה יותר, כך שיהיה קל יותר להחזיק את האלקטרודה באמצעות מיקרו-מניפולטור. על כל אלקטרודה לא פעילה של ה-ERG, הדביקו חתיכה קטנה של סרט סקוטש (hook and loop fastener) לסרט ההדבקה כדי לאפשר חיבור יציב לרצועת הצוואר של המכרסם. לאחר מכן, עבור כל אלקטרודה פעילה של ה-VEP, חברו תליש תנימים (alligator clip) לחוט הפנימי של מוליך האלקטרודה.מייד לפני ההקלטות, בצעו ציפוי חשמלי (electro plate) של המשטחים החשופים של חוטי הכסף בכלוריד כדי לשפר את הולכת האות. לשם כך, חברו את הקתודה להדף השלילי של הסוללה וטבלו את הקצה השני בתמיסת מלח. לאחר מכן, טבלו את קצה הכסף של חוט האנודה בתמיסת סליין נורמלית וחברו את הקצה השני של חוט אלקטרודה זה להדף החיובי של סוללה בעלת מתח של תשעה וולט.נתקו אותם לאחר 20 שניות, והקצה הכסוף של חוט האלקטרודה צריך להיות מכוסה באופן אחיד בשכבה לבנה. חזרו על תהליך הכלורידציה עבור כל אלקטרודות ה-ERG וה-VEP הכסופות. בהליך זה, חטאו את האזור הגזור של בעל חיים תחת הרדמה עם 10% povidone iodine שלוש פעמים.בצעו חתך סגיטלי לאורך קו האמצע של הראש באמצעות סכין מנתחים (scalpel) והסִירו עיגול של רקמת עור בקוטר 20 מילימטר כדי לחשוף את עצם הגולגולת. לאחר מכן, הסירו את פריוסטואום (periosteum) השכבה התחתונה על ידי גירוד וייבוש עם גזה, כדי לחשוף את התפרים הגולגולתיים הקורונליים והסגיטליים. קדחו שני חורים דרך הגולגולת בשני ההמיספירות.הבריגו ברגי נירוסטה לשני החורים שהוכנו מראש עד לעומק של מילימטר אחד כדי לאפשר עיגון חזק. לאחר מכן, הכינו את האזור הכירורגי עבור amalgam דנטלי על ידי ייבוש עצם הגולגולת בעזרת גזה והרחקה של העור באמצעות שתי תפרים. לאחר מכן, מרחו את ה-amalgam הדנטלי על הגולגולת החשופה כדי לקבע את אלקטרודות הברגים במקומן ולהבטיח שכש-1.5 מילימטרים מהברגים יישארו חשופים לצורך ההקלטה.לאחר מכן, הסר את תפרי ההרחקה. עבור הקלטות סקוטופיות, כל הפעולות מבוצעות בחדר חשוך. לצורכי הדגמה, מיקום האלקטרודות מבוצע כאן תחת תאורה רגילה של החדר.הבעל חיים הותאם להחשכה למשך 12 שעות והורדם באמצעות קטמין וקסילזין. לאחר הרחבת אישונים והרדמה מקומית, יש להצמיד את אלקטרודת ה-VEP הלא פעילה סביב השיניים החותכות התחתונות. לאחר מכן, מקמו את בעל החיים על פלטפורמת ה-ERG לפני קערת ה-Ganzfeld הממוקמת בתוך כלוב פאראדיי.קבעו את בעל החיים לפלטפורמה באמצעות רצועת סקוץ' המוצמדת בחוזקה אך לא באופן הדוק סביב העורף. לאחר מכן, מקמו את האלקטרודות הלא פעילות של ה-ERG על ידי הקיפת טבעת הסקלרה באופן לא פולשני סביב קו המשווה של העין, במרחק של כשלושה מטרים מאחורי הלימבוס.ייצבו זאת על ידי הצמדת האלקטרודה לרצועת הסקוץ' מסביב לעורף. חזרו על הפרוצדורה עבור העין הקונטרלטרלית. כעת, חברו את אלקטרודות ה-VEP הפעילות על ידי חיבור תפסני תנימים (alligator clips) לברגי הפלדה אל-חלודה, שהושתלו מראש בגולגולת.לפני מיקום האלקטרודה הפעילה של ה-ERG, הניחו טיפה קטנה של 1% carboxymethylcellulose sodium על האלקטרודה כדי לשפר את איכות האות. מקמו את האלקטרודות הפעילות של ה-ERG כך שייגעו קלות במרכז פני השטח של קרנית העין, באמצעות מיקרו-מניפולטור המחובר לזרוע הסטריאוטקסית המותאמת אישית. ודאו ש-carboxymethylcellulose sodium נוגע רק בקרנית ולא בלובנה, על ידי ניגוב הנוזל העודף.לאחר מכן, הכניסו שני עד חמישה מילימטרים של אלקטרודת מחט הארקה מפלדת אל חלון, מתחת לעור בזנב. הזריזו את הפלטפורמה קרוב יותר לקערת ה-Ganzfeld וודאו שעיני בעלי החיים מיושרות עם פתח הקערה כדי לאפשר תאורה אחידה של שתי הרשתית. לאחר מכן, סגרו את כלוב פאראדיי כדי להפחית רעשים חיצוניים.באמצעות הפרוטוקול לעיל, ניתן להקליט ערימה של צורות גל ERG בתגובה לטווח של גירויים, כאשר ההבזק העמום ביותר מופיע בתחתית והבהיר ביותר בחלק העליון. ברמות תאורה עמומות מאוד, ניתן להקליט תגובות סף סקוטופיות. עם עליית בהירות הגירוי, צורות הגל הופכות להיות נשלטות על ידי גל B, ולאחר מכן מופיע גל A בעל כיוון שלילי בגירויים הבהירים ביותר.ניתן לבחון את תפקוד הפטורצפטורים מסוג פטיש (rod) באמצעות שימוש ב-P3 למידול גל A. איור זה מראה כי אמפליטודת P2 גדלה עם עלייה באנרגיית הגירוי. ניתן לבחון את תפקוד התאים הבי-פולריים של הפטיש על ידי מידול תאוריות התגובה לעוצמה של P2 של הפטיש באמצעות פונקציית naka rushtin.תפקוד תאי העצב ברשתית נמדד באנרגיות אוריות עמומות ומכומת על ידי אמפליטודת השיא ותזמון ה-pSTR. תפקוד תאי דו-קטביים של קונוסים מעורר באמצעות פרדיגמה של הבזקים זוגיים ומכומת על ידי אמפליטודת השיא ותזמון ה-P2 של הקונוסים. ניתוח האמפליטודה של ה-VEP נלקח כשיא עד השפל ואמפליטודות מהשפל לשיא, דבר המספק את תזמון התגובות הללו.אמפליטודת גלי ה-VEP עולה עם עלייה באנרגיית הגירוי. לאחר רכישת מיומנות, ניתן לבצע טכניקה זו תוך כ-30 עד 45 דקות, ללא זמן ההכנה והמיקום של האלקטרודות וזמן ההסתגלות (adaptation). בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב להקפיד במיוחד על דיוק מיקום האלקטרודות ולהקצות מספיק זמן להסתגלות.בעקבות פרוצדורה זו, ניתן לבצע פרוצדורות אחרות, כגון שינוי מהלך המחלה או טיפולים, כדי לענות על שאלות ספציפיות. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיו בעלי הבנה טובה לגבי אופן ההכנה והמיקום של האלקטרודות, וכן לגבי אופן ההקלטה והניתוח של צורות הגל של ה-ERG וה-VEP.

simultaneous-recording-electroretinography-visual-evoked-potentials

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מדגים את הכנת מודל חולדות לחקר בריאות הרשתית ותקינות מסלול הראייה. פוטנציאל מעורר חזותי וייחוס אלקטרורטינוגרפי ואלקטרודות פעילות מחוברים לחולדה, ולאחר מכן יישור הפלטפורמה עם החולדה מול קערת גנצפלד להארה רשתית אחידה וסגירת כלוב פאראדיי כדי למנוע הפרעות חיצוניות.

הכנת מודל חולדה להערכת תקינות מסלול הראייה באמצעות מערך אלקטרופיזיולוגי

סרטון זה מדגים את התהליך של מדידת פוטנציאלים מעוררים חזותיים או VEPs בחולדה מורדמת עם אלקטרודות גולגולת מושתלות מראש, אשר רושמות את האותות החשמליים מקליפת המוח הראייתית בתגובה לגירויי אור.

הקלטה של פוטנציאלים מעוררים חזותיים באמצעות אלקטרודות גולגולת במודל חולדה

סרטון זה מדגים את ההליך להקלטות בו-זמניות של אלקטרואנצפלוגרפיה מקומית (EEG) ופוטנציאלי שדה מקומיים (LFPs) בחולדה מורדמת. התהליך כולל הכנת החולדה והצמדת אלקטרודות מעוררות לכריות השפם שלה. אלקטרודת עכביש EEG ממוקמת על גולגולת החולדה לצורך מדידות EEG על פני השטח. במקביל, מיקרואלקטרודה רב-ערוצית מוחדרת לאזור מסוים במוח דרך חור בגולגולת כדי לרשום פעילות עצבית מאזור מקומי במוח.

הקלטות פוטנציאליות אלקטרואנצפלוגרפיות ומקומיות בו-זמנית בחולדה מורדמת

סרטון זה מדגים כיצד להקליט אלקטרורטינוגרמה (ERG) ופוטנציאל מעורר חזותי (VEP) בחולדה מודעת. החולדה, עם אלקטרודות שהושתלו בניתוח, עוברת תחילה הסתגלות כהה. לאחר החלת טיפות מרחיבות, החיה מונחת בריסן וממוקמת בקערת גנצפלד. אותות ERG ו- VEP נרשמים לאחר מכן.

הקלטה של אלקטרורטינוגרמה ופוטנציאל חזותי מעורר בחולדה

סרטון זה מדגים הקלטה של אלקטרורטינוגרמה מצומדת ישירה (DC-ERG) על אפיתל פיגמנט רשתית של עכבר מותאם כהה ומורדם (RPE). לאחר החלת טיפות מרחיבות, החיה ממוקמת במערך הקלטה, והאלקטרודה הנימית המלאה בחיץ מלח ממוקמת על הקרנית. לאחר הקמת קו הבסיס, DC-ERG נרשם.

רישום אלקטרורטינוגרמה בצימוד ישיר של אפיתל פיגמנט הרשתית בעכבר

האלקטרורטינוגרמה (ERG) היא פוטנציאל חשמלי שנוצר על ידי הרשתית בתגובה לאור. מאמר זה מתאר כיצד להשתמש ב-ERG כדי להעריך את תפקוד הרשתית, בחולדות מותאמות לחושך, וכיצד ניתן להשתמש בו כדי להעריך התערבות נוירו-פרוטקטיבית, במקרה הנוכחי התניה איסכמית מרחוק.

שימוש בelectroretinogram כדי להעריך את התפקוד ברשתית מכרסמים וההשפעות המגנות של האיבר המרוחק איסכמי אכשור קד

דה-מיאלינציה מוקדית מושרה בעצב הראייה באמצעות מיקרו-הזרקת ליזולציטין. פוטנציאלים מעוררים חזותיים נרשמים באמצעות אלקטרודות גולגולת המושתלות מעל קליפת המוח הראייתית כדי לבחון את הולכת האות לאורך מסלול הראייה in vivo. פרוטוקול זה מפרט את ההליכים הכירורגיים העומדים בבסיס השתלת אלקטרודות ומיקרו-הזרקת עצב הראייה.

הקלטת פוטנציאל עוררה חזותית במודל עכברוש של demyelination עצב אופטי הניסויי

אנחנו מראים נהלי השתלת הקלטה כירורגית למדוד אותות חזותיים אלקטרו מן העין (electroretinogram) והמוח (ויזואלי עורר פוטנציאל) בחולדות מודעות, וזה יותר מקביל למצב האנושי שבו הקלטות מתנהלות ללא מקעקעת הרדמה.

השרשה ורישום האלחוטי electroretinogram ופוטנציאל חזותי מעורר אצל חולדות Conscious

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה עבור הקלטה בו זמנית של שותף מקומי אלקטרואנצפלוגרם (EEG) ו- multi-למינריות שדה מקומי פוטנציאל עכברוש anesthetized. חור burr בתלמידים הגולגולת עבור הכניסה של microelectrode מוצג לייצר עיוות זניח של האות EEG.

הקלטה בו זמנית של שותף מקומי אלקטרואנצפלוגרם ופוטנציאל שדה מקומי במכרסם

דבקות בסטנדרטים בינלאומיים ושמירה על הסתגלות כהה רשתית הם קריטיים כדי לרכוש תגובות אלקטרורטינוגרם שדה מלא תקפות באבחון וניהול של מחלות רשתית תורשתית בירושה. פרוטוקול מעשי באמצעות חדר חושך נייד מסופק כדי לקבל אלקטרורטינוגרמה שדה מלא עבור תינוקות וילדים תחת הרדמה או הרדמה כללית בהגדרת חדר הניתוח.

הקלטת אלקטרורטינוגרם לתינוקות וילדים תחת הרדמה כדי להשיג הסתגלות כהה אופטימלית וסטנדרטים בינלאומיים

מטרת פרוטוקול זה היא לאפיין מודל חדשני של ניוון עצבי גלאוקומטי המבוסס על צריבה תרמית של 360° של מקלעת כלי הדם הלימבלית, הגורמת ליתר לחץ דם עיני תת-חריף.

צריבה במעגל מלא של מקלעת כלי הדם הלימבלית לגלאוקומה הנגרמת בניתוח במכרסמים

למד כיצד למדוד בו-זמנית אלקטרורטינוגרם ופוטנציאלים חזותיים מעוררים בחולדות מורדמות. שיטה זו מאפשרת הערכה מקיפה של תפקוד הרשתית והמעבר הויזואלי הקורטיקלי במחקרי עצבנות.

הקלטה בו זמנית של Electroretinography ופוטנציאלים חזותיים מעוררים אצל חולדות הרדימו

גלה סרטונים נוספים